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Sample Reload Adjustment

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Sample Reload Adjustment
Sample Reload Adjustment
本機能を用いることで、多点タイムラプスなどでステージ登録をしたディッシュ等に対して、イ
ンキュベーターに戻すために一度顕微鏡ステージから外し、再度ステージに載せて多点タイムラ
プス撮影などを再開する場合に、ディッシュの取り外しから発生する XY 方向のズレ量を補正す
ることが可能です。
なお、本機能を使用する場合、予め撮影を行うディッシュに固定された 2 点のマーカーが必要で
す。
基準ポジションの登録
(標本をステージから外す前)
1. 撮影を行う標本をステージに設置し Device メニューから Stage を選択して頂き、その中のリ
ストより Sample Reload Adjustment を選択してください。
2. 設定ウィンドウの左にあるタブより Initial Reference Points をクリックし、ウィンドウ下に
ある Live ボタンを押してください。
Molecular Devices Japan KK/ Imaging Team (1/5)
3. Live ボタンを押しますと、サンプル画像の上に視野中心部で交差する赤い十字線が表示され
た Live 画像が表示されますので、十字線の交差点、つまり視野の中心にマーカーの片方が来
るように、電動ステージを動かして下図の様に調整してください。
サンプル
R1:マーカー1
R2:マーカー2
4. 調整が完了しましたら、Point1 の Set to Current ボタンを押してマーカー1 の位置情報を登
録します。
5. マーカー1 の登録が完了しましたら、同じようにマーカー2 を視野の中心に置き、Point2 の
Set to Current ボタンを押して登録してください。
登録の際、Point1 と Point2 を間違えて登録しないように注意してください。
なお、Move to Position ボタンを押すことで、登録された位置に電動ステージを動かすことが
出来ますので、登録の確認にご利用下さい。
6. Save Settings ボタンを押して、現在の設定を任意の名称をつけて保存して頂いた後、ウィン
ドウ左端の Close ボタンを押して、設定ウィンドウを閉じてください。
Molecular Devices Japan KK/ Imaging Team (2/5)
7. ここまでの操作が完了しましたら、Multi Dimensional Acquisition 等で多点撮影の設定を行
ってください(Multi Dimensional Acquisition の使い方は別途マニュアルをご覧下さい)
多点撮影の設定が完了しましたら、必ず、登録したステージポジションデータを保存してく
ださい。
*Multi Dimensional Acquisition でのステージポジションデータの保存は、Stage 設定ダイ
アログの右端に Save ボタンがございます
8. 以上の設定が完了しましたら、通常通り、多点撮影を開始してください。
Molecular Devices Japan KK/ Imaging Team (3/5)
登録されたポジションの更新
(一度標本をステージから外し、載せ直した後)
1. ステージに取り出した標本を載せなおします。この際、取り外す前の位置状態から大きくず
れないようにしてください。
*35mm ディッシュの場合、弊社から販売しています Chamlide ディッシュ固定ホルダセッ
トをご使用頂くと大変便利です
標本の設置が完了しましたら、撮影前に保存したステージポジションデータを Load してくだ
さい。
2. Device メニューより Stage→Sample Reload Adjustment を選択してください。
表示される設定ダイアログの下にある Load Settings を押して、先ほど保存した設定データを
Load して頂き、Update Reference Points をクリックし Live ボタンを押してください
3. 移動前の基準点登録と同じように、マーカー1 を視野の中心において Position1 にある Set to
Current ボタンを押して登録、マーカー2 についても同様の操作をしてください。
この際、マーカー1 と 2 の再登録の際、入れ替えたりしないように注意してください。
サンプル
R1:マーカー1
R2:マーカー2
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*Set Initial Points to Update Points について
Point1,Point2 で Set to Current ボタンを押してポジションを登録しなおした後、こちらのボ
タンを押すことで、現在のポジションが Initial Reference Points(サンプル移動前の基準位置)
に置き換わります。
この機能を使うことでステージメモリリストを開きなおす必要が無いため、標本のステージ
からの脱着を繰り返す実験では操作が用意になりますが、多点撮影の為に登録されたステー
ジポジションの補正がかかりませんので、繰り返しによる位置ズレの誤差が累積することが
ございます。
精度を求める場合は本機能を使用しないで下さい。
4. 2 点の再登録が完了しましたら、設定ウィンドウの左のタブから Update Stage Position(s)を
クリックしてください。以下の表示に切り替わります。
Stage position(s) to adjust より、位置補正を反映させたいステージポジションデータの種類
をリストから選択した後、Apply ボタンを押すことでステージポジションデータに登録された
位置情報が全て補正されます。
ここまでの操作が完了しましたら Close ボタンを押して設定ウィンドウを閉じてください。
5. Multi Dimensional Acquisition 等で再び多点撮影を行ってください。
ステージポジションは全て補正がかけられましたので、再度登録する必要はございません。
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