Ascentis® Express 5 µm HPLC カラム - Sigma

アセンティス
エクスプレス
Ascentis® Express HPLC Columns
with Fused-Core® Particles
全てのHPLCにUHPLCのパフォーマンスを
Ascentis Express とは
p.2
Ascentis Express 選択ガイド
p.3
Fused-Core 技術
p.4
アプリケーション
p.6
キャピラリーカラム
p.10
製品リスト
p.10
SAJ1703r
2
アセンティス　エクスプレス
Fused-Core 粒子技術＋Ascentis 固定相合成技術＝
®
®
HPLC Columns
コアシェルカラムのパイオニアであるシグマ アルドリッチの Ascentis Express HPLCカラムを紹介します。Ascentis Express
は、2.7 µmおよび 5 µm の Fused-Core 粒子技術から成り立っています。Fused-Core粒子とは、非多孔性のシリカゲルを
核とし、表面に多孔性のシリカゲルを結合させることにより、移動相とサンプルの拡散経路が短くなります。よって、高分離能
で低背圧にて高速分析を実現します。また、非常に堅牢で、HPLC、UHPLCのどちらの装置でも使用が可能です。
とは
Ascentis Express
Fused-Core 2.7 µmの特長
Fused-Core 5 µmの特長
● 3 µm粒子カラムの約2倍の高理論段数
● Sub-2 µm粒子カラムの半分の背圧で同等の高分離能
● 3 µm全多孔性粒子と同等の高理論段数で
5 µm全多孔性粒子並みの低圧
● Ascentis Express 2.7 µmと固定相導入技術が同じ為、
メソッド移行が容易
アセンティス エクスプレス
アセンティス
Ascentis Express
Ascentis
0.6 µm
0.5 µm
2.7 µm 1.7 µm
非多孔性の核
~5 µm 3.3 µm
非多孔性の核
2.7 µm
5 µm
Fused-Core 粒子
全多孔性粒子 3, 5, 10 µm
高理論段数、低背圧の例
充填剤粒子の種類
多孔質層の厚さ (µm)
2.7 µm Ascentis Express Fused-Core
5 µm Ascentis Express Fused-Core
3 µm 全多孔性
5 µm 全多孔性 A
5 µm 全多孔性 B
5 µm 全多孔性 C
表面積 (m2/g)
ポアサイズ (Å)
理論段数 *
背圧 (bar)*
90
90
100
100
120
100
38300
28300
24200
14600
14400
15300
284
78
309
100
63
120
150 1）
100 2）
300
300
170
450
0.5
0.6
N/A
N/A
N/A
N/A
* 理論段数及び背圧の分析条件：Column: 4.6 x 150 mm, Mobile Phase: 50/50 water/acetonitrile, Temperature: 30 ºC, Injection: 1 uL,
Instrument: Agilent® 1100 or Agilent 1200 with autosampler, Analyte : 1-chloro-4-nitrobenzene, Flow Rate corresponding to the plate height minimum
1) 全多孔性換算表面積 225 ∼ 300 m2/g
2) 全多孔性換算表面積 160 ∼ 200 m2/g
高速分析の例
Column: 4.6 x 150 mm
Mobile Phase: 50/50 water/
acetonitrile
Flow Rate: 1 mL/min
Detection: UV 250 nm
Temperature: 35 ºC
Injection: 5 µL
1. Uracil
2. Acetophenone
3. Benzene
4. Toluene
5. Naphthalene
Ascentis Express C18, 5 µm
1
2
3
5
4
N=23,422
1,200 psi
理論段数(plates)
23,422
25,000
背圧 (psi)
20,000
13,633
15,000
0
2
4
6
8
Ascentis C18, 5 µm
10,000
10
Min
5,000
1
1,200
1,080
0
Ascentis Express 5 µm
2
3
5
4
Ascentis 5 µm
N=13,633
1,080 psi
同一流速で分析時間短縮
0
2
4
6
8
10
Min
12
14
16
18
20
3
Ascentis® Express 固定相選択ガイド
C18 で保持もしくは
分離能の改善が必要
保持しす
ぎる場合
極性
化合物
極性、非極性化合物の Mix
ピーク間が近すぎる場合：
非極性化合物もしくは
極性化合物の保持改善
塩基性
化合物
イオン解離した
化合物
C8
F5
幾何
異性体
十分な保持
乏しいピークシャープ が得られな
さ（塩基性化合物）
い場合
弱い保持または
不十分な分離
水素結合性化合物、 π電子
フェノール類、 アクセプター
酸性化合物、
水酸基付加化合物
強極性
化合物
ニトロ
芳香族、
ヘテロ
芳香族
強双極子
化合物
π電子
ドナー
ペプチド
十分な分離が
得られない場合
HILIC
逆相
順相
HILIC
OH5
ES-Cyano
F5
HILIC
モード
非解離の
化合物
PhenylHexyl
ES-Cyano
RPAmide
RPAmide
F5
Peptide
ES-C18
Fused-Core® と 全多孔性粒子の位置付け
HPLC & UHPLC装置
Fused-Core
Fused-Core
5µm
2.7µm
低背圧
同等の分離
低背圧
同等の分離
より高分離
より高分離
全多孔性
全多孔性
全多孔性
1.7µm
3µm
5µm
UHPLC装置
高速・高分離
HPLC装置
HPLC装置
高分離
全てのHPLCにUHPLCのパフォーマンスを！
UHPLCのパフォーマンスを極限に！
一般分析
選択ガイド
Ascentis Express
非極性
化合物
4
Ascentis® Express のFused-Core® 技術
①粒子内の流れ：Fused-Core粒子の中心は、硬い非多孔性のシリカゲルです。移動相とサンプルは通過せず、
拡散経路が短くなります。
全多孔性の
3 µm 粒子
全多孔性の
Fused-Core の
2.7 µm 粒子
sub-2 µm 粒子
技術
Fused-Core
0.9 µm
1.5 µm
0.5 µm
理論段数：
理論段数：
理論段数：
140,000 (N/m)
240,000 (N/m)
240,000 (N/m)
②粒子間の流れ：Ascentis Express カラムは均一な充填剤です。
一般的なカラム
① Fused-Core 粒子は、非多孔性シリカゲルの核がある為、粒
子内拡散経路が短くなり（0.5 µm）、溶質の移動差が最小。
② Fused-Core 粒子は、充填剤が均一な為、拡散が最小限で、
溶質の軸方向拡散が減少。
Ascentis Express カラム
Sub-2 µm 粒子と同等の分離能（N ＝ 240,000（N/m））を発揮！
各粒子の背圧比較
5 µm Fused-Core粒子は低背圧なので、一般的なHPLC装置でも流速を上げた高速分析を実現します。
2.7 µm Fused-Core粒子は、全多孔性3 µm粒子の25%程高い背圧です。
12000
Fused150
Core
2.7um
Column:
x 4.6mm
Porous
3 um
Mobile
Phase:
60% Acetonitrile
Temperature:
35ºC
Fused Core
5um
Sample: 10mLToluene
Porous 5 um
Pressure (PSI)
10000
8000
6000
2.7µm Fused-Core粒子
Sub-2µm粒子
3µm 全多孔性粒子
一般的なHPLCの
圧力上限
5µm Fused-Core粒子
4000
（275bar）
5µm 全多孔性粒子
2000
0
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
flow (mL/min)
3.00
3.50
4.00
4.50
5
3 µmとsub-2 µmカラムの両者よりも、長いカラム寿命
Fused-Core ® 粒子はとても狭い粒度分布の為、2 µm 細孔径フリッツの使用を可能にしました（通常、5µm カラムで使用されるフリッツで
す）。3µm とsub-2 µm カラムでは0.5 µm 以下の細孔径フリッツ（UHPLC 用カラムでは0.2 µm 細孔径フリッツ）を使用しており、これが、
不溶性物質の詰まりを助長し、ピークスプリットや高い背圧などの原因となり、結果、短いカラム寿命につながっています。Ascentis Express カ
ラムは、2.0 µm 細孔径フリッツを使用している為、不溶性物質が詰まりにくく、長いカラム寿命を誇ります。
技術
Fused-Core
各粒子の理論段相当高さ（H）の比較
Van Deemter Plotによる各粒子の理論段高さ（H）の比較です。 5 µm Fused-Core粒子は 3 µm全多孔性粒子の代替に最適である事が歴然で
す。また、2.7 µm Fused-Core粒子は、 3 µm全多孔性粒子の性能を凌駕します。
20.00
Fused
Core
2.7um
Column:
150
x 4.6mm
Porous
3 um
Mobile
Phase:
60% Acetonitrile
Temperature:
35ºC
Fused Core
5um
Sample:
10mLToluene
Porous
5 um
18.00
16.00
14.00
5µm 全多孔性粒子
H
12.00
10.00
3µm 全多孔性粒子
8.00
5500psi（380bar）
5µm Fused-Core粒子
6.00
3200psi（220bar）
4.00
2.7µm Fused-Core粒子
2.00
0.00
0.00
0.50
1.00
1.50
2.00
2.50
flow (mL/min)
3.00
3.50
4.00
4.50
6
Ascentis® Express C18
Ascentis Express RP-Amide
特長
特長
●
●
●
●
C18, RP-Amide
その他の利点 : Ascentis Expressは粒子内の拡散距離が短い為、
溶媒置換などにおける平衡化時間を短縮できます。
従って、グラジエント分析でのサイクルタイムの短縮にもな
ります。
●
C18 と同じ移動相で異なる選択性
水素結合供与体となる極性化合物を強く保持
塩基性化合物に対するより良いピーク形状
100 ％水系移動相で使用可能
LC-MS アプリケーションでの低いブリード
Si
mobile phease
detection
injection
temperature
: 35:65, acetonitrile : water
: 254 nm
: 10 µL
: ambient
●
Alprazolam
●
●
●
●
G002881
G003672
G003670
Oxazepam
Clonazepam
天然化合物
フェノール類
塩基性化合物
代謝物
極性化合物（カルボン酸類、アミン、アルコール）
columns: Ascentis Express RP-Amide, 10 cm x 2.1 mm I.D., 2.7µm(CAT.NO. 53913-U)
Ascentis Express C18, 10 cm x 2.1 mm I.D., 2.7µm (CAT.NO. 53823-U)
mobile phase A: 20 mM phosphoric acid, pH 2 (unadjusted)
mobile phase B: water
1. Resorcinol
mobile phase C: acetonitrile
2. Catechol
mixing proportions: A:B:C = 75 : 5 : 20
3. 2-Methylresorcinol
flow rate: 0.3 mL/min
4. 4-Methylcatechol
temp.: 35 °C
5. 2,5-Dimethylresorcinol
det.: UV 270 nm
6. 3-Methylcatechol
injection volume: 1 µL
7. 4-Nitrocatechol
sample: 50 mg/L each in 20 mM phosphoric acid
G003654
G002879
sample :
1
2
Resorcinol
4
3
6
5
4
20
Catechol
1.0
2.0
1
30
Min
4
6
Min
超高速分離例 :Ascentis Express vs. 5 µm 全多孔性粒子
4.0
5.0
G004308
G004039
アセトニトリル 77% 削減
2
3.0
Ascentis Express C18
40
Ascentis Express C18 2.7 µm 4.6 mm I.D. x 10 cm
flow rate : 1.5 mL/min
pressure : 3597 psi (248 bar)
run time : 6.5 mins
N = 21297
分析時間 36.5 分 短縮
Min
2
4
3
0
7
5
1
10
Ascentis Express RP-Amide
1. Oxazepam
2. Cloazepam
3. Alprazolam
4. N-desmethyldiazepam
5. Diazepam
Ascentis C18 5 µm 4.6 mm I.D. x 25 cm
flow rate : 1.0 mL/min
pressure : 1856 psi (128 bar)
run time : 43 mins
2 3
N = 22147
0
O
応用例
N-desmethyldiazepam
Diazepam
(CH 2)14 CH 3
H
N
(CH 2 )3
G002594
●
●
G002590
●
疎水性による逆相分配での分離
対称なピーク形状
高い再現性と安定性
7
6
5
1.0
2.0
フェノール類の分析
Min
3.0
4.0
5.0
G004309
7
Ascentis® Express Phenyl-Hexyl
Ascentis Express F5
特長
特長
●
●
アセトニトリルより、メタノールにおいて高分離
● LC-MS アプリケーションに最適
C18では保持しにくい極性化合物を良好に保持
類似化合物の分離に最適
● 逆相、HILIC、100％水系移動相で使用可能
● LC-MS、LC-UV分析で低ブリード
●
応用例
●
●
●
●
医薬品
天然化合物
極性芳香族化合物
官能基を有する芳香族化合物
複素環式化合物
(CH 2)
Si
6
column: Ascentis Express, as indicated 10 cm x 3 mm I.D., 2.7 µm
mobile phase A: water
mobile phase B: acetonitrile
mixing proportions: A:B = 65:35
flow rate: 0.6 mL/min.
pressure: 3000 psi total, 2360 psi column
temp.: 35 °C
det.: UV 250 nm
injection: 2 µL
N-desmethyldiazepam
Diazepam
G002881
Phenyl-Hexyl, F5
●
Alprazolam
G003672
G003670
応用例
●
●
●
アミノ酸、有機酸類など低分子・極性化合物
アミン類
類似構造化合物
column(s) :　Ascentis Express F5, (53590-U) and Ascentis Express C18,
10 cm x 4.6 mm, I.D., 2.7 µm particle size (53827-U)
Discovery HS F5, 10 cm x 4.6 mm, I.D., 5 µm particle size (567515-U)
mobile phase A : water
mobile phase B :　methanol
mobile phase ratio :　A:B 50:50, v/v
flow rate :　0.8 mL/min
temp. :　35 ºC
pressure :　~2400 psi Express, ~1000 psi Discovery
det. :　UV at 240 nm
injection :　5 µL
sample :　10 µg/mL each in 90:10 water:methanol
Oxazepam
Clonazepam
Hydrocortisone
G003654
G002879
Sample (0.1 g/L each)
1.Oxazepam
2.Alprazolam
3.Clonazepam
4.N-desmethyldiazepam
5.Diazepam
1
4
2
Prednisolone
3
Phenyl-Hexyl
1
Ascentis Express F5
(Fused-Core®)
5
G005239
1 2
1. Hydrocortisone
2. Prednisolone
3. Prednisone(IS)
3
G005242
C18
4
3
G005238
0
2
2
4
Min
6
8
5
1
2
3
Discovery HS F5
（全多孔性）
1
2
4
RP-Amide
3
5
0
1
2
3
4
2
4
6
Min
8
6
8
10
12
G005243
C8
Ascentis Express C18
(Fused-Core)
5
1,2
3
0
2
抗不安薬及びその代謝物の分析
4
Min
6
8
G004806-4809
0
2
4
Min
ステロイド系抗炎症薬の分析
G005241
8
Ascentis® Express ES-Cyano
Ascentis Express OH5
特長
特長
●
●
●
逆相、順相、HILIC、100%水系移動相で使用可能
高温での酸性条件分析（∼100˚C, pH 1）に最適
●
ES-Cyano, OH5
応用例
●
応用例
三環系抗うつ薬（TCAs）
●
column:Ascentis Express ES-Cyano, 10 cm x 2.1 mm I.D.,
2.7 µm particles (53491-U)
mobile phase:(A) water with 0.05 % phosphoric acid; (B) acetonitrile with
0.05 % phosphoric acid; (60:40, A:B)
flow rate: 1.5 mL/min
pressure:3270 psi
temp.:30 °C
detector:UV, 225 nm
injection:5 µL
sample:20 µg/mL in mobile phase
固定相（シラノール）表面が移動相中の水を捕らえて擬似的に
嵩高い水和層を形成（水和層と有機層の液-液分配）
保持が移動相の塩濃度に依存しにくい
1.Liothyronine
2.Levothyroxine
HILIC モードでのテーリング・過保持の低減
column:Ascentis Express OH5, 10 cm x 3.0 mm I.D.,
1
2.7 µm particles (53769-U)
mobile phase:5 mM ammonium formate (95:5 acetonitrile:water) pH 6.8
flow rate:0.6 mL/min
pressure:965 psi
temp.:30 °C
det.:254 nm
injection:1 µL
sample:100 µg/mL in 25:75, water:methanol
1.Caffeine (neutral, pKa = 0.52, log D = -0.63)
2.Fenoprop (acid, pKa = 2.93, log D = -0.05)
3.Codeine (base pKa = 8.29, log D = -0.02)
3
2
0
1
2
Min
1
3
4
5
G005567a
高極性化合物の分析
Levothyroxine
column: Ascentis Express OH5, 10 cm x 3.0 mm I.D., 2.7 µm particles
(53769-U)
mobile phase: 0.1 % formic acid (56302), pH to 3.5 w/ammonium
formate (55674) :acetonitrile (CHROMASOLV LC-MS grade,
34967), 25:75, v/v
flow rate: 0.4 mL/min
pressure: 1350 psi
temp: ambient
det: ESI (+), scan m/z 150-300
injection: 5 µL
sample: 10 µg/mL in 90 % methanol (CHROMASOLV LC-MS grade, 34966)
2
Liothyronine
1
0
Min
5
G005603
L-methionine sulfoximine (MSX) L-Buthionine (S,R)-sulfoximine (BSX)
Monoisotopic Mass = 180 Da
Monoisotopic Mass = 222 Da
レボチロキシンとリオチロニンの分析
2
0
2
1. BSX (log P = log D = 0.52)
2. MSX (log P = log D = -1.01)
4
Min
6
メチオニンスルホキシミン（MSX）と
ブチオニンスルホキシミン（BSX）の分析
8
10
9
Ascentis® Express HILIC
Ascentis Express Peptide ES-C18
特長
特長
●
●
●
代謝物のような高極性化合物に対する強い保持力
MS での高感度分析
サンプル前処理（SPE、タンパク質沈殿法など）の最終ステップか
らの迅速な分析（例：SPE の溶出液を直接分析）
エンドキャッピングを施していない為低背圧です。
4.6 mm I.D. x 15 cm L カラム（CAT.NO. 53981-U）は、
流速 1.6 mL/min で背圧 2,300 psi（160 bar）です。
（移動相 85/15：アセトニトリル /0.1M ギ酸アンモニウム、pH 3）
●
●
●
●
●
応用例
20 kDaまでのペプチド分析用
（通常のAscentis Expressは8 kDaまで対応）
● 移動相にTFAを用いた強酸性条件や高温使用に最適
（通常の Ascentis Express はpH 2∼、∼60 ˚Cまで対応）
●
応用例
●
： Sterically protected C18（エンドキャッピングなし）
：1 ∼ 9
： ∼ 100˚C
： 160Å
： ∼ 20 kDa
： 80 m2/g（全多孔性換算 150 ∼ 200 m2/g）
： 0.30 mL/g
： 1.3 g/cc
アミノ酸類
低分子、酸性極性化合物（代謝物など）
生体アミン類（神経伝達物質、食品や飲料中の汚染物質）
有機りん系農薬（殺虫剤、除草剤）
糖類
薬物代謝物質、薬理活性物質
SPE tube : SupelTM-Select SCX SPE, 30 mg/1 mL (54240-U)
column : Ascentis Express HILIC (Si), 10 cm x 2.1 mm I.D., 2.7 μm (53939-U)
O
O
NH
CH3
O
CH3
O
CH3
N
O
Peptide probes (listed in order of elution):
O
Butylone
3,4-Methylenedioxypyrovalerone
(MDP V )
O
O
NH
NH
1. ac-GGGLGGAGGLKG
2. ac-KYGLGGAGGLKG
3. ac-GGAVKALKGLKG
4. ac-KYALKALKGLKG
CH3
CH3
monoisotopic mass: 941.5
monoisotopic mass: 1118.6
monoisotopic mass: 1139.7
monoisotopic mass: 1330.8
3
CH3
CH3
O
O
O
O
Ethylone
Methylone
NH
NH
CH3
CH3
H3C
CH3
H3C
CH3
O
Mephedrone
Methedrone
O
O
NH
F
CH3
2
O
NH
CH3
NH
CH3
CH3
4-Fluoromethcathinone
3-Fluoromethcathinone
Spiked Urine Sample After SPE Cleanup
Monitored Ions
Buphedrone
1
4
5
7
6
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
8
3
0
CH3
CH3
sample/matrix: 1 mL urine spiked to 100 ng/mL of bath salt mixture
SPE tube: Supel-Select SCX, 30 mg/1 mL (54240-U)
conditioning: 1 mL 1 % formic acid acetonitrile, then 1 mL water
sample addition: 1 mL spiked urine
washing: 1 mL water, 1 mL 1 % formic acid in acetonitrile, 1 mL water
elution: 2 mL 10 % ammonium hydroxide in acetonitrile
e luate post-treatment:thoroughly mix via vortex agitation, evaporate 1 mL aliquot to dryness,
reconstitute in 100 µL water:methanol, 1:1
column: Ascentis Express HILIC (Si), 10 cm x 2.1 mm, 2.7 µm
(53939-U)
mobile phase:(A) 5 mM ammonium formate acetonitrile;
(B) 5 mM ammonium formate water; (98:2, A:B)
flow rate: 0.6 mL/min
pressure: 127 bar
column temp: 35 ºC
detector: MS, ESI(+), 100-1000 m/z
injection: 1 µL
sample: 200 ng/mL in acetonitrile
2
4
1
O
O
F
column: Ascentis Express Peptide ES-C18, 10 cm x 2.1 mm I.D. , 2.7μm (53306-U)
mobile phase A: 0.1 % additive in water
mobile phase B: 25:75, (0.4 % additive):acetonitrile
additive: formic acid, pH 3.5 (adjusted with ammonium hydroxide)
gradient: initial = 15 % B, slope = 2 % MeCN / column volume
flow rate: 0.3 mL/min
temp.: 35 °C
det.: ESI(+)-TOF
injection: 1 µL
sample: 5 mg/L peptide 1 & 3, 1 mg/L peptide 2, 15 mg/L peptide 4
2
4
Monitored Ions
Diluted Spiked Urine (no SPE cleanup)
Monitored Ions
G004934
疎水性の塩基性ペプチドの LC-MS 分析
column: Ascentis Express Peptide ES-C18, 10 cm x 4.6 mm I.D. , 2.7μm (53324-U)
mobile phase A: 90:10, (0.1 % TFA) :acetonitrile
mobile phase B: 25:75, (0.1 % TFA) :acetonitrile
gradient: initial = 0 % B to 50 % B in 15 min.
flow rate: 1.5 mL/min
temp.: 30C°
det.: UV at 220 nm
injection: 5 µL
The test mix employed contains the following peptides
1
1. Gly-Tyr
2. Val-Tyr-Val
3. Met Enkephalin
4. Angiotensin II
5. Leu-Enkephalin
6. Ribonuclease
7. Bovine Insulin
MW = 252
MW = 379
MW = 574
MW = 1032
MW = 555
MW = 13,700
MW = 5733
7
6
MDPV
Buphedrone
3-Fluoromethcathinone
Butylone
Ethylone
4-Fluoromethcathinone
Mephedrone
Methylone
Methedrone
2
3
4
5
9
0
2
4
6
Min
高分子・低分子ペプチドの分析
尿中のバスソルト（脱法ドラッグ）の分析
Urine Blank After SPE Cleanup
6
Min
8
10
12
14
G004935
HILIC, Peptide ES-C18
固定相
pH 範囲
使用温度
細孔径
分子量範囲
表面積
ポア体積
粒子密度
10
Ascentis® Express キャピラリーカラム
特長
●
●
●
●
細孔径 90 Å のカラムは、ペプチドやその分解物（3000 amu 以下）に最適
細孔径 160 Å のカラムは、分子量 20 kDa まで対応
理論段数 200,000（N/m）
従来のカラムより高いサンプル保持容量
キャピラリーカラム
カラム内径と最高耐圧の関係
カラム
I.D.（µm）
75
100
200
300
500
1000
column: Ascentis Express C18, 5 cm x 300 µm I.D. , 2.7μm (CAT.NO. 53992-U)
mobile phase A: 5:95, acetonitrile:water with 0.1 % formic acid
mobile phase B: 95:5, acetonitrile:water with 0.1 % formic acid
flow rate: 10 µL/min.
det.: MS
gradient: 5-45 %B, 0-10 minutes
最高耐圧
（psi）
8500
8500
6500
6500
5000
5000
1. (mw 869) H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-Arg-Arg-OH
2. (mw 877) H-Tyr-Ile-Tyr-Gly-Ser-Phe-Lys-OH
3. (mw 1262) H-Ile-Ser-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH
4. (mw 1353) H-Gly-Phe-Val-Phe-Thr-Leu-Thr-Val-Pro-Ser-Glu-Arg-OH
カラム内径と初期検討流速の関係
カラム
I.D.（µm）
75
100
200
300
500
1000
3
初期検討流速
（µL/min）
2
0.3 ∼ 1
0.5 ∼ 2
2∼5
4 ∼ 10
12 ∼ 20
50 ∼ 75
1
4
0
PEEKsilTM チュービング
● 両末端は 10-32 ネジ山フィッティング
5
Min
10
G004443
●
C18 キャピラリーカラムでのペプチド分析
使用温度∼ 60˚C（ES シリーズは∼ 100˚C）
キャピラリーカラム製品リスト（2.7µm Fused-Core）
内径
（µm）
75
100
200
300
500
1000
75
100
200
300
500
1000
長さ
（cm）
5
5
5
5
5
5
15
15
15
15
15
15
15
C18（90Å）
CAT.NO.
53982-U
53985-U
53989-U
53992-U
53998-U
582711-U
54219-U
54256-U
54261-U
54271-U
54273-U
-
C8（90Å）
CAT.NO.
53983-U
53987-U
53991-U
53997-U
53999-U
54229-U
54260-U
54262-U
54272-U
54275-U
-
Peptide ES-C18 (160Å)
CAT.NO.
53543-U
53544-U
53545-U
53546-U
53547-U
53548-U
53549-U
53552-U
53553-U
53554-U
53558-U
53561-U
※その他の固定相についてもカスタムにて 5 cm あるいは 15 cm 長さのキャピラリーカラムをご提供できます。
11
Ascentis® Express 2.7 µm HPLC カラム
●
●
推奨操作最大圧 9,000 psi（60 MPa, 600 bar, 600 kgf/cm2）
使用温度∼ 60 ˚C（ ES シリーズ∼ 100 ˚C）
内径
長さ
（mm） （cm）
分析カラム
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
4.6
4.6
4.6
4.6
4.6
2
3
5
7.5
10
15
3
5
7.5
10
15
3
5
7.5
10
15
C18
Octadecyl
CAT.NO.
C8
Octyl
CAT.NO.
53799-U
53802-U
53822-U
53804-U
53823-U
53825-U
53805-U
53811-U
53812-U
53814-U
53816-U
53818-U
53826-U
53819-U
53827-U
53829-U
53795-U
53839-U
53831-U
53843-U
53832-U
53834-U
53844-U
53848-U
53849-U
53852-U
53853-U
53857-U
53836-U
53858-U
53837-U
53838-U
RP-Amide
Palmitamidopropyl
CAT.NO.
53797-U
53910-U
53911-U
53912-U
53913-U
53914-U
53915-U
53916-U
53917-U
53918-U
53919-U
53921-U
53922-U
53923-U
53929-U
53931-U
ガードカートリッジ、3個入り ※ガードカートリッジホルダー（Cat.No.53500-U）は別売りです。
2.1
3
53501-U
53509-U
53514-U
3.0
3
53504-U
53511-U
53516-U
4.6
3
53508-U
53512-U
53519-U
内径
長さ
（mm） （cm）
分析カラム
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
4.6
4.6
4.6
4.6
4.6
2
3
5
7.5
10
15
3
5
7.5
10
15
3
5
7.5
10
15
ES-Cyano
Diisopropylcyanopropyl
CAT.NO.
HILIC
Silica
CAT.NO.
53494-U
53468-U
53470-U
53472-U
53473-U
53475-U
53476-U
53478-U
53479-U
53481-U
53483-U
53484-U
53486-U
53489-U
53491-U
53492-U
53933-U
53934-U
53938-U
53939-U
53946-U
53964-U
53967-U
53969-U
53970-U
53972-U
53974-U
53975-U
53977-U
53979-U
53981-U
OH5
Pentahydroxy
CAT.NO.
53779-U
53748-U
53749-U
53755-U
53757-U
53764-U
53766-U
53767-U
53768-U
53769-U
53771-U
53772-U
53774-U
53775-U
53776-U
53778-U
ガードカートリッジ、3個入り ※ガードカートリッジホルダー（Cat.No.53500-U）は別売りです。
2.1
3
53495-U
53520-U
53780-U
3.0
3
53496-U
53521-U
53781-U
4.6
3
53497-U
53523-U
53782-U
分取カラム
●
●
Phenyl-Hexyl
Phenylhexyl
CAT.NO.
F5
Pentafluorophenylpropyl
CAT.NO.
53798-U
53332-U
53334-U
53335-U
53336-U
53338-U
53341-U
53342-U
53343-U
53345-U
53346-U
53347-U
53348-U
53351-U
53352-U
53353-U
53592-U
53566-U
53567-U
53568-U
53569-U
53571-U
53574-U
53576-U
53577-U
53578-U
53579-U
53581-U
53583-U
53584-U
53590-U
53591-U
53524-U
53526-U
53531-U
53594-U
53597-U
53599-U
Peptide ES-C18
Octadecyl
CAT.NO.
53299-U
53301-U
53304-U
53306-U
53307-U
53308-U
53311-U
53312-U
53313-U
53314-U
53316-U
53318-U
53323-U
53324-U
53328-U
53536-U
53537-U
53542-U
Ascentis Express C18 バリデーションパック
2）
推奨操作最大圧 6,000 psi（40 MPa, 400 bar, 400 kgf/cm
使用温度∼ 60 ˚C
固定相
内径 (mm)
長さ（cm）
C18
10
15
CAT.NO.
53793-U
※ 内径10 mm x 長さ5 cm 及び内径10 mm x 長さ10 cmはカスタムにて取り
扱い可能です。
バリデーションパックには3 種類の異なるボンディングロットのカラム
が各1 本ずつ、3 本入っています。
内径 (mm)
長さ (cm)
2.1
4.6
4.6
5
10
15
カラム
初期検討流速
I.D. (mm)
2.1
3.0
4.6
(mL/min)
0.2 ∼ 0.4
0.4 ∼ 0.8
1.0 ∼ 1.6
CAT.NO.
53994-U
53995-U
53996-U
Ascentis® Express 5 µm HPLC カラム
●
●
推奨操作最大圧 9,000 psi（60 MPa, 600 bar, 600 kgf/cm2）
使用温度∼ 60 ˚C（ ES シリーズ∼ 100 ˚C）
内径
長さ
C18
C8
Octadecyl
Octyl
（mm） （cm） CAT.NO.
CAT.NO.
RP-Amide
Palmitamidopropyl
CAT.NO.
Phenyl-Hexyl
Phenylhexyl
CAT.NO.
F5
Pentafluoro
phenylpropyl
CAT.NO.
ES-Cyano
Diisopropyl
cyanopropyl
CAT.NO.
HILIC
OH5
Silica
Pentahydroxy
CAT.NO.
CAT.NO.
50557-U
50558-U
50559-U
50562-U
50563-U
50564-U
50566-U
50567-U
50568-U
50569-U
50570-U
50574-U
50575-U
50577-U
50581-U
50583-U
50585-U
50588-U
50591-U
50255-U
50256-U
50257-U
50258-U
50260-U
50261-U
50262-U
50264-U
50265-U
50268-U
50269-U
50270-U
50276-U
50278-U
50284-U
50286-U
50288-U
50289-U
50294-U
50313-U
50314-U
50317-U
50321-U
50322-U
50327-U
50328-U
50329-U
50335-U
50336-U
50338-U
50339-U
50341-U
50343-U
50344-U
50345-U
50346-U
50347-U
50348-U
50592-U
50593-U
50597-U
50295-U
50297-U
50298-U
50349-U
50350-U
50355-U
分析カラム
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
2.1
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
3.0
4.6
4.6
4.6
4.6
4.6
4.6
2
3
5
7.5
10
15
25
3
5
7.5
10
15
25
3
5
7.5
10
15
25
50507-U
50362-U
50732-U
50442-U
50603-U
50508-U
50363-U
50733-U
50443-U
50604-U
50509-U
50364-U
50734-U
50446-U
50605-U
50511-U
50367-U
50735-U
50451-U
50607-U
50517-U
50368-U
50737-U
50454-U
50612-U
50518-U
50372-U
50739-U
50455-U
50613-U
50521-U
50373-U
50747-U
50456-U
50614-U
50522-U
50376-U
50749-U
50459-U
50615-U
50523-U
50377-U
50751-U
50464-U
50616-U
50525-U
50378-U
50752-U
50466-U
50619-U
50526-U
50381-U
50753-U
50469-U
50622-U
50527-U
50382-U
50758-U
50470-U
50623-U
50528-U
50385-U
50759-U
50472-U
50624-U
50529-U
50386-U
50767-U
50474-U
50625-U
50530-U
50389-U
50768-U
50477-U
50626-U
50533-U
50390-U
50769-U
50479-U
50627-U
50536-U
50391-U
50773-U
50482-U
50628-U
50537-U
50392-U
50774-U
50483-U
50631-U
50538-U
50394-U
50775-U
50487-U
50632-U
ガードカートリッジ、3個入り ※ガードカートリッジホルダー（Cat.No.53500-U）は別売りです。
2.1
0.5
50539-U
50395-U
50776-U
50496-U
50633-U
3.0
0.5
50541-U
50396-U
50777-U
50497-U
50634-U
4.6
0.5
50542-U
50399-U
50779-U
50498-U
50635-U
※分取カラムは内径10 mm、長さ5 cm、10 cm、15 cm、25 cm にてカスタムで承ります。
ホルダー
品名
Ascentis Expressガードカートリッジホルダー（チタニウム製Hybridフェラル付）
交換用チタニウム製Hybridフェラル、10個入り
Ascentis
3, 5, 10 µm
Ascentis Express
2.7 µm
5 µm
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊2)
＊
＊
＊3)
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
＊
CAT.NO.
53500-U
51391-U
固定相
タイプ
結合密度1)
µmol/m2
範囲
pH
エンド
キャッピング
C18
C8
RP-Amide
Phenyl-Hexyl
F5(PFP)
ES-Cyano
HILIC(Silica)
OH5
Peptide ES-C18
3.5
3.7
3.0
3.4
3.6
2.5
n/a
3.5
3.4
2∼9
2∼9
2∼9
2∼9
2∼8
1∼8
2∼8
2∼9
1∼9
あり
あり
あり
あり
あり
あり
なし
ガードカートリッジ
USP
コード
L1
L7
L60
L11
L43
L10
L3
なし
−
なし
L1
1) 結合密度はAscentis Express の値、2) Ascentis はPhenyl-butyl、3) Discovery® HS シリーズ
Ascentis カタログ
（SAJ1360）
アプリケーション集
（SAJ1575）
© 2016 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA, SAFC, SIGMA-ALDRICH, ALDRICH, and SUPELCO are trademarks of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. FLUKA is a trademark
of Honeywell Specialty Chemicals Seelze GmbH. SAFC brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and
conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at sigma-aldrich.com. Ascentis and Discovery are registered trademarks of Sigma-Aldrich and Sigma-Aldrich Biotechnology,
LP. Supel is a trademark of Sigma-Aldrich and Sigma-Aldrich Biotechnology, LP. Fused-Core is a registered trademark of Advanced Materials Technology, Inc. Agilent is a registered trademark of Agilent
Technologies. PEEKSil is a trademark of SGE Analytical Science Pty Ltd.
本記載の製品および情報は2014年4月1日現在の情報であり、収載の品目、製品情報、価格等は予告なく変更される場合がございます。／最新の情報は、弊社Web サイト
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（税別）
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て販売しております。医薬品原料並びに工業用原料等としてご購入の際は、
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お問い合せは下記代理店へ
〒140-0002 東京都品川区東品川2-2-24 天王洲セントラルタワー4階
製品に関するお問い合わせは、弊社テクニカルサポートへ
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