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鶏のサルモネラ症に関する研究 特に,ひ な白痢保菌鶏の摘発診断法
昭和36年11月20日 529 鶏 の サル モネ ラ症 に 関 す る研 究 特 に,ひ な 白痢 保 菌鶏 の摘 発 診 断法 に つい て (第III報) ア ドレナ リン注 射 法 に よ るひ な 白痢 断続 型 陽性 鶏 の診 率 断 の 向上 に関 す る研 究 農 林 省 動 物 医 薬 品 検 査 所(所 長 田 中 稔 治 (昭 和36年1月30日 緒 言 ひ な白痢 の血 清 診 断上,注 川 島 秀 雄 博 士) 受付) ち全 血 に よ る急 速 凝 集 反 応(平 板 法),検 目すべ き もの と して 断続 型 陽 性 蕪 を挙 げ る 乙 とが 出来 る.こ れ に つ い 反 応 難40羽(主 てDalling1)はresidul 反 応 で陰 性 と到 定 され,さ motorと 称 し,今 井3)は と して2年 鶏)と,全 集 反 応 で詳 細 に検 査 の結 果3∼5分 は低 凝 集 債 を 持続 しつ ゝ断続 的 に 弱 陽 性 な い し 応 を示 す鶏40羽(4∼5カ に っ い て試 験 を行 つ た. び長 期 に陰 性 を持 続 す る.し た が つ て現 行 のひ な 白痢 の摘 発 診 断 で は そ の診 断 が 供 試 した. 既 に第 皿報5)で のべ た ご と く,こ れ ら断 続 型 陽 性 2.供 れ つ ゝ血 中,糞 中 に長 期 に わ た つ て菌 を排 出 し本 病 の根 絶 の 困難 な主 因 も,こ れ ら保 菌 鶏 の存 在 と 密 接 な関 係 が あ る もの と考 え られ る. よ り陽 性 限 界 に ま で上 昇 させ,か つ また血 中 お よ 供 試 鶏 の筋 肉 内 に注 射 し た. (b)塩 酸 チ ス チ ン 塩 酸 チ ス チ ン の1%溶 液 を供 試 鶏 の皮 下 に5mg 注 射 した. び 尿 中 に,ひ な 白痢 菌 を誘 出 させ る実 験 を試 み, 断続 型 陽 性 鶏 の特 に 陰性 期 に お け る摘 発 診 断法 の 化ア ド リナ リ ン1000倍 液)を 用 い た 。 お確 立 さ れ てい ない.筆 者 は,こ れ ら低 凝 集 債 を 維持 す る保 菌鶏 の血清 凝集 償 を各 種 薬 剤 の注射 に を 化 ア ドリナ リ ン. 三 供 製 薬 の塩 化 エ ピ レナ ミン注 射 液(塩 使 用 量 は0.2mg/kgを 断続 型 陽 性 鶏 の特 に陰 性 期 の摘発 方 法 は現 在 な 月蕪)10羽 試 した各 種 薬 剤 (a)塩 鶏 は低 凝 集 償 を維 持 し血 清 診 断 に よ る摘 発 を免 が でわ ず か に反 月難 で 産卵 開 始 時 の鶏) なお対 照 と して健 康・ 鶏(4∼5カ きわ め て 困難 な もの で あ るそ れ の み な らず 筆 者 が 血急速凝集 らに血 清 に よ る急 速 凝 低 凝 集 債 維 持 鶏 と呼 ぶ が ご と く,こ れ らの保 菌 鶏 陽 性 に転 じ,再 査によ り,60秒 以 内に 凝集 が発 現 し,陽 性 と到 定 され た (c)オ イ ベ ス チ ン油 溶 液. 可能 性 に っ い て,次 の 成績 をえ た ので こ ゝに報 告 武 田製 薬 の エ ス テル型 ホル モ ン剤,オ イベ ス チ ン油 溶 液 の5,000国 際単 位 を供 試 鶏 の皮 下 に注 射 す る. した. 実 験 材 料 お よび 方法 1.実 験 に 用 い られ た鶏. 野 外 に お い て現 行 の ひ な 白痢 の診 断法,す (d)ビ タ ミンBユ 。 市販 の ビ タ ミンB1注 なわ 下 に注 射 した. 射 液 の10mgを 供 試 鶏 の皮 530 目本 伝 染 病 学 会 雑 誌 3.血 第1図 清 凝 集 便 の検 査 第35巻 第8号 各 種 薬 剤 の ひ な 白痢 保 菌 鶏 の凝 集 価 に及 ぼ す影響 ひ な 白痢 の急 速 診 断用 菌 液 を用 い,区 劃 され た 硝 子 板 上 に1/1の 注 射 針 か ら滴 下 す る診 断 液 の1 滴(約0.04m1)を 滴 下 し置 き,供 試 難 の 翼 下静 脈 か ら 採 血 した1血液 の1滴(約0.04mn1)を 菌液 の傍 らに滴 下 し直 ち に混 和 撹 搾 し凝集 発 現 秒 数 を 鋼 定 す る方 法,す なわ ち急 速 凝集 反 応(平 板 法) と血 清 を用 い て行 な う試験 管 凝集 反 応 の両 法 で検 査 した.試 験 管 凝 集 反 応 用 の 抗 原 と して は,急 速 診 断 用 菌 液 を生 理 食 塩 液 で50倍 に稀 釈 した も の を 用 い た. 観 察 方 法 そ の他 は第1報 お よび 第 豆報 に 記 述 し た方 法 に準 じて行 なつ た. 4.血 中 お よび尿 中 よ りの 菌 の検 出法. 材 料 を直 接 また はKauffmann増 夜 増 菌 後SS寒 菌 培 地 で1 天 培 地 に 塗 抹 し37℃48時 間 培 養 後,露 滴 様 の集 落 で 培 地 の色 を変 化 させ ない も の を と りKrumwiede培 地 お よびSIM培 地 でサ ル モ ネ ラ属 菌 で あ る見 当 をつ け尿 素 培 地 に 移 植, 40日 間 の観 察 の結 果 で は,血 清 凝 集 債 は薬 剤 接 種 分 解 しない も のに つ い て,ひ な 白痢 翫 知 陽 性 血清 後,一 時 的 に下 降 の傾 向 を示 し,ま た不 規 則 的 に で た め し凝 集 反 応 を行 ない,次 い で運 動 性 の有無 血 中 にひ な 白痢 菌 の検 出 が認 め られ た.し か し な を調 べ,ひ が ら,こ れ ら菌 の血 中へ の誘 出 が薬 剤 の影 響 に よ な 白痢 菌 で あ る こ と を同定 した. る もの か否 か に つ い て は不 明 で あ つ た(第1図). 実験成績 (1)各 種 薬 剤 のひ な 白痢 陽 性 鶏 の 凝集 債 に 及 (b)ア ドレナ リン の注 射 群. 鶏 体 側 に働 くス トレス と して用 い た 各 種 薬 劃 は ぼ す影 響 ひ な 白痢 陽 性 反 応 鶏(2年 鶏)の 凝 集 債 を各 種 ひ な 白痢 陽 性 難 の凝 集 償 を上 昇 させ え なか つ た. i薬剤 の応 用 に よつ て上 昇 させ る こ との可能 性 を調 べ るた め の基 礎 的 実 験 を 行 ない ,次 の結 果 を え そ こで あ る種 の原 虫,ま た.成 績 は第1図 記)の 注 射 を試 み た と ころ,き わ め て満 足 すべ き (a)ビ お よび第2図 タ ミンB1,チ に示 す. ス チ ン,オ イベ スチ ン の た は細 菌 の誘 発 に有 効 で あ る と考 え られ て い るア ドレナ リン(以 下Aと 結 果 が え られ た. 注 射 群. す な わ ち,断 続 型 陽 性 を示 す供 試 鶏3羽 薬 剤 の選 揮 は鶏 体 側 の栄 養 お よび,ホ ル モ ン系 に作 用 す る ス トレス と して の ビ タ ミンB1チ ス に0.2mg/kgのAを チ ンお よび オ イベ ス チ ン を用 い,各 群3羽 す1:50∼1:100の 低 凝 集 償 を陽 性 限界1:200 ∼1:400ま で 上 昇 させ うる こ と を確 認 した . ずつの ひ な 白痢 陽 性 鶏 の皮 下 に4日 間 々隔 で,そ れ ぞ れ の薬 剤 を注 射 した.す な わ ち ビ タ ミンB1,は10mg ず つ,2回,計20mgオ 計10,0001.U.,お ず つ2回,計10mgを イベ ス チ ン5,0001.U.を2回 よび チ ス チ ン の1%溶 液 の5mg 用 い た が,目 的 とす る血 清 凝 集 償 の上 昇 は認 め られず,む しろ 各 種 薬 剤 接 種 後 略 の筋 肉 内 注 射 した 成 績 は第2図 に認 め られ る よ うに血 清 凝 集 債 が陰 性 な い し弱 陽 性 を示 さ らに急 速 凝 集 反 応 に お け る凝 集 発 現 秒 数 の短 縮 が認 め られ た が3羽 中1羽,す な わ ちNO6124 の急 速 凝 集 反 応 の凝 集 促 進 は認 め られ な か つ た. しか し,A注 射 後20分 ご とに採 血 し120分 の間 の 血 液 の培 養検 査 に よ り血.液中 に ひ な 白痢 菌 の誘 出 531 昭 和36年11月20日 第2図Adrenalin注 射 に よ る 凝 集 価 の 上 昇 と菌 の 証 明 つ い て調 べ た.成 績 は第3表 に 見 られ る通 りで あ る. す な わ ち,A注 射 後 各 経 過 時 間(分)ご とに採 一 血 し,.血.清に よ る試 験 管凝 集 償 が最 高 凝集 贋 に達 した 分 数(時 間)を もつ て上昇 例 数 を集 計 し,凝 集債 がA注 射 前 の 値 に 下 降(復 計 し,次 の結 果 をえ た.A注 元)し た 例 数 を集 射 後 血清 凝 集 債 が最 高 値 に達 す るの は10∼20分 の間 が 最 も多 く(24/37 64%),60分 以後 で は上 昇 は 認 め られ な か つた.ま たA注 射 後,上 昇 した凝 集 債 の下 降 はA注 射 後40 分 に始 ま り,120分 後 に おい て全 例 に 下 降 が認 め られ た.よ つ て,以 後 の実 験 に おい て は,菌 の血 中へ の誘 出 の結 果 を も考 え,A注 射 後30分 お よび 60分 の2回 検 査 法 を採 用 す る こ と と した. (3)A注 射 に よ る急 速 凝 集 反 応(平 板 法)に よ る凝 集 促 進 の程 度. 供 試 鶏 は現 行 の全 血 急 速 凝 集 反 応 で60秒 以 内 に が全 例 に認 め られ た.す な わ ち これ らの結 果 はA 凝 集 を示 す陽 性 群 と60秒 以 内 に凝集 を示 さない 陰 注 射 に よる血 清 凝 集 債 の上 昇 と血 中菌 の証 明 な ど 性 群 の二群,計57羽 に よつ て,現 行 診 断法 で は摘 発 の困難 な断続 型 陽 す なわ ち,陽 を用 い た. 性 群 は50秒 台 で凝 集 を示 す反 応 性 鶏 を確 実 に摘 発 診 断 し う る可 能 性 を示 咬 す る も 難9羽,40秒 の と考 え さ らに これ らの点 につ い て詳 細 に検 討 し 羽,10秒 た. 陰 性群 は 全 血 急速 凝 集 反 応 で は 前述 の ご と く陰 性 (2)A注 射 に よる,ひ な 白痢 保 菌 蕪 の血 清 凝 集 便 の上 昇 お よび下 降 の 時 間 的推 移 に つ い て. 供 試 鶏 は 断続 型陽 性 鶏 と考 え られ るひ な 白痢 自 然 感 染 鶏 で,野 外 に おけ る摘 発 診 断 成績 で は全 血 に よ る急 速 凝 集 反 応(平 板 法)に よ る60秒 観 察 で は反 応 の発 現 が認 め られ ず,陰 性 と到 定 され た も の さ らに血 清 に よ る平板 法 で詳 細 に検 査 の結果, 3∼5分 で わ ず か に 反応 を示 した 鶏37羽(月 令4 ∼5月)に つい て,A注 射 に よる凝 集 債 の上 昇 に 第3表Adrenalinア 台1羽,30秒 台,3羽,20秒 台,6羽,5∼2秒3羽,計25羽 台,3 を用 い, の も ので,血 清 に よ る急 速 凝集 反 応 で始 め て3∼ 5分 後 に わ ず か に反 応 を示 す,い わ ゆ る断 続 型 陽 性 鶏 に 属 す る も の と考 え られ る32羽 を用 い た.以 上,合 計57羽 の陽 性 群(2年 鶏)お よび 陰 性群(4 ∼5月 鶏)に つ い てA注 射 に よ り平 板 法 の凝 集 の 促 進 の状 況 を観 察 した.成 績 は第4表 す な わ ち,A注 に示 す. 射 後30分 お よび60分 の全 血 に よ る急 速 凝 集 反 応 で,凝 集 発 現 秒 数 が20秒 以 上 短 縮 され た も の(帯)は57例 中4例,10秒 ド レナ リ ソ 注 射 に よ る 凝 集 価 の 上 昇 及 び 下 降 時 期 以上短縮 さ 532 日本 伝 染 病 学 会雑 誌 第4表Adrenalin注 +++…20秒 以 上 短 縮++…10秒 れ た も の(++)は57例 中12例,お で合 計57例 中37例,65%の 短 縮 が 認 め られ た.陰 後30分,60分 よび10秒 以 下 の 中21例 も のに凝 集 発 現 秒 数 の 性群32例 中20例 は,A注 射 に お け る全 血 急 速 凝 集 反 応 で は凝 集 の促 進 が 認 め られ なか つた. (4)A注 以 下-… 差 異 を 認 め な い も の. す なわ ち 凝集 債 の上 昇 は,試 験 管 凝 集 反 応 で は 平 板 法 よ りも さ らに顯 著 で あつ た.す 倍1血清 を第1管 射 に よ る試 験 管 凝集 反 応 に お け る凝 注 射 前 に比 較 して凝 集 債 が2倍 上昇 した も の51例 中37例(73%),4倍 に上 昇 した も の12/51(23%), あ り,全 例に 凝 集 便 の上 昇 が認 め られ た. (5)A注 な わ ち急 速 凝集 反 応 に なわ ち,50 とす る倍 数 稀 釈 段 階 に お い て,A 8倍 に上 昇 した もの2/51(4%)で 集 償 の上 昇 に つ い て. 前 項 の検 査 は平 板 法,す 第8号 射 に よ る平 板 法 に お け る凝 集 促 進 の程 度 以 上 短 縮+…10秒 秒 数 の短 縮 が 認 め られ た もの(十)は57例 第35巻 射 に よ る血 液 中 のひ な 白痢 菌 の検 出 率 の 向上 に つ い て. よ る凝 集 の促 進 の状況 を観 察 した が,陰 性 群32例 A注 射 に よ り,ひ な 白痢 断続 型 陽 性 鶏 の流 血 中 中20例 は凝集 の認 め られ ぬ も の も あつ た. 同様 の現 象 が試 験管 凝集 反 応 に お い て も現 わ れ るか ど うか に つ い て検 討 した. に 菌 の検 出率 の高 ま る可 能 性 を示 咬 す る基 礎 的 実 供 試鶏 は 前項 の検査 に用 い た 陽 性鶏25羽 と断続 型 陽 性 鶏 と考 え られ る もの26羽,合 計51羽 に つ い て検 査 した.結 果 は第5表 る. に見 ら れ る 通 りで あ 第5表Adrenalin注 射 に よる試 験管法におけ る凝集価上昇 度 験(第2図)の 結果 か らA注 射 後,流 血 中 の菌 検 出 成績 と検 出時 間 との関係 に っ い て調 べ た. 供 試 鶏 は いず れ も全 血 に よ る平板 法 で は 陰 性 の も ので,血 清 に よ る平 板 法 で3∼5分 後 にわずか に反 応 す る,い わゆ る断 続 型 陽 性 と認 め られ る43 羽 に つい て検 査 した.成 績 は第6表 に 見 られ る通 りで あ る.検 査 は 時 間 的 に検 査 す る手 技 的 な制 約 のた め,2回 に分 け て行 つ た. す なわ ち,第1回 の検 査 は21羽 に っ い て 行 な い,A注 射 後30分 お よび60分 の2回 検 査 した.30 分 で菌 の検 出 を認 め た もの は21例 中8例(38%), 60分 で は16/21(76%)で 第2回 第6表Adrenalin注 射 に よ る 流1血 中,菌 あ つ た. の試 験 群 は22羽 につ い て行 ない,A注 の検 出 と時 間 と の関 係 射 昭和36年11月20日 533 日本 伝 染 病 学 会雑 誌 534 後5分,10分,20分,40分,60分,90分120分 7回 検 査 した.60分 中14例,64%で の に お け る菌 の検 出成績 は22例 最 高 で あ り,第 一 回 の成績 に お い 第35巻 第8号 験 管 凝 集 反 応 で検 査 し.全 血 急 速 凝 集 反 応 で60秒 以 内 に凝 集 す る弱 陽 性鶏5羽 と,既 述 の ご と く血 清 に よ る急 速 凝 集 反 応 に お い て の み わ ず か に反 応 て も60分 の菌 検 出率 が16/2176%(平 均30/43,70%) す る,い わ ゆ る断 続 型 陽 性 鶏 と考 え られ る反 応 鶏 で あ り,い ず れ もA注 射 後60分 の菌 検 出率 が良 好 10羽 と同群 の反 応 鶏 中血 清 凝 集 債1:100を で あつ た.以 上 の成績 はA注 射 が ひ な 白痢 断続 型 も の3羽 を加 えた 合 計13羽 の陰 性 鶏 を用 い た.な 陽 性 鶏 の血 中 へ の菌 誘 出に 際 し きわ め て 有 効 に 作 お,対 照 群 に は 急速 凝集 反 応,試 験 管 凝 集 反 応 上 用 す る こ とを示 す も の と して注 目 され る. 全 く陰 性 の成 績 を示 す 健 康 鶏5羽 (6)A注 射 に よ る血 液 お よび尿 中 よ り の菌 の 検 出 と体 内保 菌 と の関 係. 供 試 鶏 は あ らか じめ全 血 急 速 凝 集 反応 お よび試 は 第7表 に 見 られ る通 り,A注 示す を用 い た.成 績 射 後 の血 清 凝 集 債 は い ず れ も上昇 した が対 照 群 で は凝 集 償 の上 昇 は 全 く認 め られ な か つ た. 第8表Adrenalin注 射 に よ る 血 液 及 び 糞 中,菌 の検 535 昭 和36年11月20日 A注 射 前 の検 査 で,血 液 お よび尿 中 か らの菌 の 検 出 は全 例 陰 性 で あつ た が,A注 射 後 の血 中 か ら の菌 検 出成 績 は18例 中16例,88.8%が 中 で はA注 射 後1日 例,72%の 陽性 で,尿 お よび2日 の検 査 で18例 中13 陽 性 率 を示 した.以 上 の結 果 か らA注 射 は血 中 の み な らず 尿 中 か ら もひ な白痢 菌 の検 出 を きわ め て容 易 な ら しめ る こ と を確 認 した.そ こ ひ な 白痢 菌 の鶏 体 内に お け る分 布 を調 べ るた め こ れ ら供 試 蕪 の全 例18羽 を,A注 射 後 第3日 に致 死 解 剖 の上,主 要 臓器 に つ い て 菌 検索 を行 つ た. そ の結 果 脾 臓100%,卵 %,腎 臓50%,膵 率 で,ひ 臓44%,心 彙,睾 丸80%,肝 血28%,胆 臓66 嚢11%の な 白痢 菌 を検 出 しえ た 。 対 照 として 用 い た健 康鶏5羽 は,血 液 尿 な らび で 現 行 の全 血 急 速 凝 集 反 応 で は陽 性 と到 定 し え な に 上 記 主 要 臓 器 か ら全 くひ な 白痢 菌 の検 出 は認 め い 鶏 でA注 射 に よつ て始 め て血 液 お よび尿 中 に菌 られ なか つ た. の存在 を確 認 した いわ ゆ る断 続 型 陽 性 鶏 と目 され る これ ら保 菌 鶏 の,菌 の 由来 す る組 織,す 出 と体 内菌 の分 布 と の関 係 なわち 供 試 鶏 の 月令 別 に よ る比 較 故 にA注 射 に よつ て血 液 お よび尿 よ り検 出 され た ひ な白痢 菌 は,保 菌鶏 の体 内 臓 器 由来 の もの で 536 日本 伝 染 病 学 会雑 誌 第9表 自然 感 染 ひ な 白痢 保 菌鶏 の 診 断 及 び 菌 分 離 に 対 す るAdrenalin注 第35巻 射 法 の 応 用試 験 成 績 第8号 537 昭 和36年11月20日 あ る こ とが わ か つ た.し か しな が らA注 射 が菌 の 分 離 に 対 す るA注 射 法 の応 用 試 験 成 績. (a)試 験 群 誘 出 に ど の よ うな役 割 を演 ず るか に つ い て は不 明 で あ る. A注 射 法 を野 外 よ り摘 発 した 供 試 鶏37羽 にっ い (7)A注 射 に よ る血 中 お よび尿 中 へ のひ な 白 て実 地 応 用 した結 果 を第9表 に 総括 す る.供 試 鶏 痢 菌 の出現 と供 試 鶏 の 月令 お よび体 内 菌分 布 との は全 血 急 速 凝 集 反 応 で 弱 陽 性 無 と到定 され る も の 関係 に つ い て. 11羽,お 血 清 反 応 で強 陽性 を呈 す る老 令(2年 鶏6羽 鶏)反 応 と同群 の 老 令 鶏 で弱 陽 性 を 呈 す る もの5 羽,計11羽 と,4∼5カ よび各 試 験項 目で 既 述 の ご と く全 血急 速 凝 集 反 応 で は陰 性 で,血 清 に よ る急 速 凝集 反 応 に お い て の み わ ず か に 反 応 す る鶏26羽 で あ り,こ れ 月 の若 令鶏 で全 血 急 速 凝 ら合 計37の 供 試 鶏 は 現行 のひ な 白痢 診 断 法 で は摘 集 反 応 で弱 陽 性 を呈 す る も の11羽 の2群 に つ い 発 診 断 の困 難 な断続 型 陽 性 鶏 に 属 す る と考 え られ て,A注 る もの で あ る. 射 に よ る血 中 な らび に尿 中 よ りの菌 の検 出成 績 を比 較 した.成 績 は第8表 これ ら供 試 鶏 にAを 注 射 し,注 射 後30分,60分 に示 され る. の2回 検 査 に お け る試 験管 凝 集 債 の 上昇 は最 も顯 若 令 鶏 群 の血 中菌 の検 出率 は11例 中9例,82% の陽 性率 で あ る のに く らべ,老 令 難 群 は11例 中5 著 で,37例 例,45%の た. 成 績 で あ り,ま た尿 中菌 の検 出率 に お い て も月令 の若 い鶏 群 が高 い陽 菌 率 を示 した. の 上 昇 が 認 め られ 血 清 反 応 と平 行 して実 施 した 血 中か らの菌 の検 この よ うに,供 試 鶏 の 月令 の違 い に よ りA注 射 の菌 誘 出効 果 に差 が認 め られ る点 を追 究 す る 目的 で,両 群 の鶏 をA注 射 後3日 中 全 例 に1∼3管 目に 致 死,解 剖 して 出率 は37例 中35例 が 陽 性 で あ り,さ らに これ らの 菌 の 由来 を供 試 鶏29例 に つ い て致 死 解 剖 の上,保 菌 の状 態 を検 査 した結 果 は第7表 お よび第8表 に 体 内 保 菌 の状 態 を検 査 した結 果 老 令 鶏 群 で は卵 彙 に 保 菌 す る もの8例 中8例100%,腹 腔4/850 示 した ご と く,供 試難 のほ ゞ全 例 が保 菌 して い た, %,腎 示 す もの と考 え られ る. 臓 お よび胆 嚢 は,い ず れ も2/8,25%,に 菌 の検 出 を認 め た が,そ の他 の部 位 か らは菌 の検 出 は 認 め られ な か つ た. 藁 お よび睾 丸75%,腎 (b)参 考 群 参 考 群 と して供 試 した老 令(2年)保 若 令 鶏 群 の菌 検 出 成 績 は 脾 臓87.5%,肝 %,卵 この事 実 はA注 射 法 に よ る診 断摘 発 率 の確 実 性 を 臓75 お よび 膵 臓 は 各25 菌 鶏 は, 現 行 診 断 法 に よ り完全 な陽 性鶏 と診 断 され た もの で,A注 射 に よ る診 断 法 を応 用 す る ま で もな く, %,心 血 お よび 胆 嚢12.5%に 菌 の検 出 を認 め2菌 の体 内 分 布 が,老 令 鶏 に く らべ て,広 範 囲 で あつ 現 行 診 断法 で摘 発 診 断 され る保 菌 鶏 で あ る. て,特 に 脾 臓 お よび肝 臓 に高 度 な菌 の 検 出 を認 め 管凝 集 債 の上昇 お よび 平板 法 に お け る血 清 反 応 上 た こ とは,A注 の傾 向 は試 験 群 とすべ て一致 して認 め られ た が, 射法 が こ れ ら若 令 の も の に非 常 に 有 効 で あつ た こ と,関 係 が あ る よ うに 考 え られ る. (8)自 然 感 染 ひ な 白痢 保 菌 鶏 の診 断 お よび 菌 これ ら強 陽 性保 菌鶏 にAを 注 射 した とこ ろ試 験 血 中 な らび に尿 中 へ の菌 の検 出率 は 試 験 群 に く ら べ 低 率 で あつ た こ とは い ささ か意 外 とす る結 果 で あつ た. 538 日本 伝 染 病 学 会 雑 誌 こ れ らの現 象 に つ い て は 既 に第8表 べ た. の 成績 で述 た.そ 対照 群 と して用 い た健 康 鶏4羽 はA注 射 に よ る 血 清類 属 反 応 は認 め られず,血 清 反 応 上A注 射 に よつ て上昇 した 試 験 群 な らび に参 考 群 の血 清 凝 集 抗 体 は特 異 的 な も の と考 え られ る. の 目的 を果 し え なか つ こで あ る種 の原 虫,ま た は細 菌 の誘 発 に 有 効 で あ る と考 え られ て い る ア ドレナ リン の注 射 を 試 み た と ころ,き わ め て満 足 すべ き結 果 をえ た. す な わ ち,ア ドレナ リン注 射 後30分,60分 の2 回 検 査 で試 験 管 凝 集債 の上 昇 は最 も著 明 で,37例 健 康 難 の血 中 お よび戻 中 の ひ な 白痢 菌 の検 出成 績 は全 く陰 性 で あつ た. 中全 例 に1∼3管 の上 昇 が認 め ら れ た.(第9 表) 総 括 な らび に考 察 また 急 速 凝 集 反 応,(平 鶏 の サ ル モ ネ ラ症 の原 因 は古 くか ら知 られ て い るS.pullorumを 第8号 液 等 を,ひ な 白痢 保 菌 鶏 の皮 下 に 注 射 し,血 清 凝 集 債 の上 昇 を試 み た が,そ (c)対 照 群 第35巻 始 め と し,最 近 多 くの サ ル モ 板 法)に おい て も凝集 が 促進 され 従 来 の診 断 法 に く らべ,ア ド レナ リン 注 射 に よ り凝 集 発 現 秒 数 が短 縮 され,陽 性 限界 の ネ ラ属 の細 菌 が鶏 か ら分 離 され,翫 にS.thomp- 60秒 以 内 で凝 集 の発 現 を示 す も のが多 く現 わ れ, sonを 保 菌 してい る鶏 の卵 か ら作 つ た マ ヨネー ズ 到定 が 容易 に なつ た.(第4表)さ の中 毒死 亡 例 を河 島4)ら は報 告 し,難 の サ ル モ ネ と平行 して 血 液 中の 菌 の検索 を行 つ た結 果,ア ラ症 の存 在 は鶏 の防疫 的 見 地 か らのみ な らず,人 レナ リ ン注 射 に よ り,ひ な 白痢 保 菌 鶏 の流 血 中 に の公 衆 衛 生 上 に も重 要 な課 題 とな りつ ゝあ る 。 菌 の検 出率 の高 ま る事 を認 め た.す 筆 著 は難 のサ ル モ ネ ラ症 の全貌 を明 らか に す る らに凝 集 反 応 ド なわ ち,ア ド レナ リ ン注 射 後流 血 中 か らの菌 の検 出成 績 と検 出 目的 で,ま ず 代 表 的疾 病 で あ るS.pullorumの 時 間 との関 係 は ア ドレナ リン注 射 後60分 に お い て 感 染 に よつ て 起 るひ な 白痢症 の診 断,特 最 も高 率 で70%,次 に凝 集 反 い で40分 で50%,30分 90分 で38%,20分 断法 の可 能 性 につ い て実 験 した. レナ リン注 射 法 は ひ な 白痢 保 菌 鶏 の菌 を血 中 に誘 断続 型 陽 性難 は長 期 に 低 凝 集 償 を持 続 しっ ゝ断 続 的 に 弱 陽 性 な い し陽 性 を示 し再 び陰 転 を続 け る ので 現 行 血 清 診 断 で は 摘 発 が 困 難 で あ る.し か で32%の お よび 応 で 断続 型 を示 す 陽 性 鶏 の陰 性 期 に お け る摘 発 診 陽 性 率 を示 し,ア ド 出す る際 に きわ め て有 効 に作 用 す る こ と を認 め た (第6表). 1948年 池 田2)は 「生体 内 の種 々 の臓 器 に分 布 す も,血 中 お よび尿 中 か らか な りの菌 の排 出 をみ る る網 状 内被 細 胞 系 が流 血 中 の細 菌,コ ロ イ ド等 の の で本病 の根 絶 の困 難 な主 因 と して考 え られ る こ 異 物 を撮 取 し消 化 して血 液 を浄 化 す る一方,そ とは既 に第 五報5)に 述 べ た通 りで あ る.低 凝 集 償 病 原 体 に対 す る免 疫 体 を構 成 し,蓄 積 す る機 能 を を持 続 しつ ゝ陽 転 陰 転 を繰 り返 す断続 型 陽 性 鶏 の 有 す る こ とは古 くか ら先 人 の認 め て い る事 実 で あ 示 す これ らの現 象 に っ い て は まだ血 清 学的 な らび り,し た が つ て,こ に細 菌 学 的 な究 明 は な さ れ て お らず,し たがつて り,そ の 中 に摂 取 され て い る細'菌,も し くはそ の 確 実 に これ ら保 菌 鶏 を摘 発 す る検 索 の方 法 も現 在 中 で構 成,蓄 積 され て い る免 疫 体 が流 血 中 に移 行 な お確 立 され て い な い. の の細 胞 系 を刺 戟 す る こ とに よ 筆 者 は断 続 型 陽 性 鶏 の,特 に陰 性 期 に お け る血 す る で あ ろ うこ とは 容 易 に 推 察 され る.Irde1P, N.0.Guchan,安 原 らは こ の事 実 に 注 目 し,ア ド 清 凝 集 債 と各 種 薬 剤 に よ り陽 性 限 界 に まで上 昇 さ セ る こ とに よ り,そ の診 断 率 の 向上 が望 め る で は に よ り流 血 中 の 菌 検 出率 を高 め う る こ と を 認 め な か ろ うか との見 地 か らそ の 可能 性 に つ い て検 討 た 」 と述 べ,さ らに池 田 は これ を追 試 し,チ フ ス性 した.す 疾 患 に ア ドレナ リ ン を用 い て,こ なわ ち,薬 剤 の選 揮 は難 体 側 の栄 養 お よ レナ リン を注 射 して,こ の細 胞系 を刺 戟 す る こ と とに脾 臓 の チ フ び ホル モ ン系 に 作 用 す る ス トレス として の ビタ ミ ス免 疫 構 成 に対 す る意義 を検 討 す るた め,ア ンB1,塩 ナ リンが凝 集 素 産生 に及 ぼ す影 響 に つ い て 次 の こ 酸 チ ス チ ン,お よび オ イベ スチ ン油 溶 ドレ 昭 和36年 539 11月 20日 ドレナ リ ン注 射 後 の血 中 へ の こ とか ら,ひ な 白痢 保 菌 鶏 に お け るア ドレナ リ の菌 の 出現 お よび 消失 の 時 間 的 関係 が 血 圧 お よび ン注 射 に よる血 中 な らび に尿 中へ 菌 の誘 出す る事 白血 球 像 の 変化 とほ ゞ一致 して い る点,な らび に 柄 と,血 清 凝 集 贋 の上 昇 す る事柄 に対 す る機 序 に 注 射 後 に脾 の縮 小 を認 めた 点 か ら見 て,血 中 に お つ い て は,脾 そ の ほ か 自律 神 経 系 に 与 え る ア ドレ け る菌 出現 また は そ の増 加 は ア ドレナ リ ンに よ る ナ リン の誘 発 作 用 が大 い に 関 与 す る も の ゝご と く 脾 の收 縮 に起 因 し,そ の脾 内 に存 在 す る病 原 体 が 一 時 的 に血 中 に移 行 す る も の と し,さ らに ア ド レ 考 察 され る. と く考 察 してい る.ア これ らの基 礎 的 実 験 に も とづ き,ひ な 白痢 の現 ナ リン注 射 に よる凝 集 贋 の上 昇 も,そ の 時 間 的 関 行 診 断 法 で は す べ て弱 陽 性 な らび に陰 性 と到 定 さ 係 か らみ て菌 の場 合 と同様 に脾 内 に産 生 蓄 積 され れ た 難 で,さ た凝 集 素 が一 時 的 に血 中 に移 行 す る もの で あろ う 5分 で わ ず か に 反 応 を示 す 到 定 の き わ め て 困難 と述 べ て い る. な,い わ ゆ る断 続 型 陽 性 蕪 に 属 す る と考 え られ る 特 に注 目すべ きは ア ドレナ リ ン注 射 に よ る血 中 4∼5カ らに 血 清 に よ る急 速 凝 集 反 応 で3∼ 月 の若 令 鶏 の37羽 につ い て行 つ た ア ドレ 菌 検 出率 は 第IV病 週 以 内に 高 く第V病 週 以 後 に は ナ リン注 射 法 の応 用 試 験 成 績 の結 果 は次 の ご と く 脾 内 の菌数 は 少 な くな る も の が多 い こ とが 推 察 さ れ る と して い る点 で あ る 。 総 括 され る. 結 論 ア ドレナ リン注 射 後30分,60分 の2回 検 査 で試 筆 者 もア ド レナ リン注 射 に よる血 中 お よび尿 中 へ のひ な 白痢 菌 の 出現 と,供 試 鶏 の 月令 お よび体 験 管 凝 集 債 の上 昇 は全 例 に 認 め られ,急 内 の菌 分 布 との関 係 を調 べ た結 果,若 令(4∼5 反 応 の凝 集 発 現 秒 数 が か な り短 縮 され た のみ で な 速凝集 ヵ 月)の 反 応 鶏 群 の血 中菌 の検 出率 は11例 中9例 く,血 清 反 応 と平 行 して実 施 した血 中菌 の検 出率 82%の 高 率 で あ る に く らべ,老 令(2年)の は37例 中35例 の高 率 に菌 を証 明 した. 難 群 は11例 中5例45%で 反応 あ り,ま た尿 中菌 の検 出 以 上 の結 果 か ら,ひ な 白痢 保 菌 鶏 の血 清 診 断 上 率 に お い て も若 令 鶏 群 が高 い陽 性 率 を示 した.こ きわ め て摘 発 診 断 の 困難 な 断続 型 陽 性鶏 の,特 に の老,若 陰 性期 に あ る と老 え られ るい わゆ る潜 在 保 菌 鶏 を 両 鶏 群 の体 内保 菌 の状 態 を検 査 した と こ ろ,老 令 群 で は卵 巣8例 %,腎 中8例100%,腹 腔4/850 お よび胆 嚢 は いず れ も2/825%に 菌 の検 出 を 高 率 に か つ的 確 に摘 発診 断 す る 乙 とが 出来 た こ と か ら,ア ドレナ リ ン注 射 法 は,ひ な 白痢 防 疫 上 な 認 め,菌 検 出部 位 が 限局 して い た のに く らべ,月 らび に難 の サ ル モ ネ ラ症 の綜 合 的 研 究 の推 進 に有 令 の若 い群 の菌 検 出成 績 は脾 臓87.5%肝75%,卵 効 で あ る と認 め られ る. 巣 お よび睾 丸75%,腎 よび胆 嚢12.5%に お よび膵 臓 各25%,心 血お 菌 の検 出 を認 め,菌 の体 内分 布 が老 令 鶏 に比 して 広範 囲 で あっ て特 に脾 臓 お よび 肝 臓 に高 度 な菌 の検 出 を認 め た. 文 1) Dalling, Stat. T.: Tech. 公 衛 誌, Bull., 4: 麻 布 大 報 告, North 以 上 の結 果 は,前 述 の池 田 の チ フ ス性 疾 患 に お 俊 一: 日 獣 医 誌, け る老 察 を裏 づ け るが ご と き成 績 で あ る.こ れ ら 稔 治: 日 伝 染 会 誌, Carolina 48: 206, 2: 献 7, 昭23 (1948).-3) 今 井 信 実: 3, 35 Exp. 池 田 知 雄: 17-34, 19: Agric. 1935.-2) (7): 昭30 (1955).-4) 昭32 (1957).-5) 487-494, 河 島 田 中 昭36. 540 日本 伝 染 病 学 会 雜 誌 Studies on the Salmonellosis Diagnostic of Hens with Special Reference Methods of Pullorum 第35巻 第8号 to the Carrier III Adrenalin injection as an aid to the detection " intermittent type" of S . pullorum carrier of Toshiji TANAKA National Veterinary Assay Laboratory, Tokyo (Director: Dr. H. KAWASHIMA) Agglutination test and isolation of S. pullorum tion on 37 hens, 1. 120 to 150 days old, which demonstrated A considerable or a remarkable after a single intramuscular 2. S. pullorum after the adrenalin 3. S. pullorum after was carried the adrenalin negative injec- whole blood tests. titer was observed 30 to 60 minutes out on the blood of the 37 hens 30 to 60 minutes injection with positive results was isolated from internal from all the hens investigated organs of 26 hens at autopsy carried out injection. From the above mentioned these intermittent rise of agglutinin out after adrenalin injection of 0.2 ml adrenalin. detection 3 days after the adrenalin 4. were carried injection results, seemed type reactors S. pullorum to originate detected isolated from their after the adrenalin pullorum carriers. 5. A high isolation rate of S. pullorum was observed from the visceral blood of hens organs. Most of injection were regarded most frequently among as S. young hens (120 to 150 days old). 6. Relation between the age of hens and the distribution of pullorum organisms in their body was examined on 11 hens 120 to 150 days old and 11 hens 720 days old, both belonging to the spleen, ovaries, white leghorn. liver, kidney, In young pancreas, heart posibility of an isolation of the organisms bladder and kidney. 7. It was concluded hens, were widely distributed blood and gall bladder. was strictly from these results organisms In older limited to ovaries, that the increase of agglutinin hens, in the peritoneum, gall titer the and provocation effect of pullorum organisms from the blood might be due to the stimulus of adrenalin to the spleen and the other organs and the vascular system and that the adrenalin injection method as reported here, a single intramuscular (x 1,000), might be available in practice to provocate the "intermittent and be recommended for the diagnosis of S. pullorum carrier. injection of 0.2 ml type "of pullorum