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ゲノム編集
ゲノム編集関連製品
funakoshi news
ゲノム中の PiggyBac トランスポゾンの
コピー数を算出するキット
対立遺伝子のジェノタイピングキット
EZ-Genotyping Kit
PiggyBac Copy Number qPCR Kit
製品ページ番号:9015
System Biosciences 社 の PiggyBac Transposon
Vector System(p.16~17 参照)によってゲノム中
に挿入した PiggyBac トランスポゾンのコピー数を,
qPCR により算出するキットです。
特 長
●
UCR1 プライマーによってゲノム数を,PBcopy プライマーに
製品ページ番号:34775
PCR を用いて,多くの哺乳動物細胞中の標的対立遺伝
子の遺伝子型を,効率良く決定できるキットです。同一
チューブで PCR グレードのゲノム DNA を,迅速に抽
出できます。
特 長
●
50 試料分のジェノタイピングを行うのに必要な試薬を含みます。
●
操作は簡便で,長時間の酵素処理やゲノム DNA のカラム精製
は必要ありません。
よってゲノム中の PiggyBac トランスポゾンのコピー数を算出
し,それぞれの Ct 値からトランスポゾンのコピー数を算出します。
●
ΔΔ Ct=2
Number of Copies per Genome
100
100
100
100
100
23.82
19.88
19.05
18.77
18.15
28.43
24.74
24.69
24.97
24.49
ΔΔ Ct: copy#
2^-(PBcopy(ΔΔ Ct/2)
UCR1)
24.47
12
29.00
15
49.76
25
73.29
37
80.92
40
性/汚染分析などに適用できます。
y=0.0352x+7.4258
R2=0.9388
35
30
Results
Sample Preparation
Cultured cells
45
40
M
M 1
2
3
4
PCR
Incubate at 95℃
5 min
∼ 2 hours
5
6
7
8
9 10
Gel Electrophoresis
∼ 1 hour
M
M
25
20
15
KO 1,281 bp
WT 1,067 bp
10
5
0
0
400
600
800
200
PB Transposon added (ng)
(PBase held constant at 100 ng)
WT: Samples 1 and 3
KO Mono- allele:
Samples #4, #5, #6, #7, #8, #9, #10
KO Bi-allele: Sample #2
1,000
Genotyping results for validation of allele status in gene targeting assay using
homologous recombination(HR)targeting vector.
品 名
メーカー 商品コード
包装 / 価格(¥)
PiggyBac copy number qPCR Kit(20 reactions)
SBI
PBC100A-1
品 名
1 kit /
45,000
本誌に掲載されている製品はすべて研究用です
製品ページ番号について
フナコシホームページで各製品の詳細をご覧いただけます。
検索
ハイスループットのスクリーニング,混合/クローン細胞中の
遺伝子型の同定,DNA フィンガープリントおよび細胞同一
Transposon Transposase PBcopy UCR1 avg
(ng)
(ng)
avg Ct
Ct
100
300
500
700
1,000
同じチューブ内でゲノム DNA の抽出を行うため,PCR におけ
る二次汚染を低減できます。
●
※qPCR 試薬が別途必要です。
22
●
copy 数=ΔΔ Ct÷2,
-(avg PBcopy Ct-avg UCR1 Ct)
フナコシニュース 2016 年 4 月 15 日号(No.609)
包装 / 価格(¥)
1 kit /
56,000
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フナコシは,ライフサイエンスの更なる発展を目指し,皆様の研究
http://www.funakoshi.co.jp/contents/
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メーカー 商品コード
EZ-Genotyping Kit(50 reactions)
SBI
GE200A-1
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