p.17 - フナコシ

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フナコシニュース 2007 年 10 月 15 日号
17
■ BlotGlyco® for MALDI（#BS-X4104）
品 名 メーカー 商品コード
包装 / 価格（￥）
Monosialoganglioside GM3, Human Brain
HYL
8G16-4h
1 mg /
38,000
1 mg /
30,000
M.W.：1,171，純度：＞ 98％
◆ ヒドラゾン−オキシム交換反応を利用して，ビーズに固定化された
糖鎖を再遊離と同時に蛍光標識します。
◆ キットの再遊離（蛍光標識）試薬は MALDI-TOF MS 用に設計され
ており，イオン抑制効果により超高感度測定が可能です。
Monosialoganglioside GM3, Human Liver
HYL
8G16-13h
操作法概略（#BS-X4104 の場合）
M.W.：1,214，純度：＞ 98％
1 mg /
52,000
M.W.：2,391，純度：＞ 98％
Hz
Tetrasialoganglioside GQ1b, Bovine Brain
HYL
8G16-12b
ペプチド
※ 上記掲載品以外にも多くのガングリオシドを取り扱っています。詳
脂質
Hz
Hz
糖鎖
Hz
細はフナコシホームページの製品検索をご利用いただくか，当社テ
z
Hz
H
タンパク質
クニカルサポート（欄外参照）までお問い合わせ下さい。
Glycoblotting
糖鎖選択的捕捉
核酸
生体由来混合物
BlotGlyco®
糖鎖研究
※Hz：ヒドラジド基（-NHNH2）
複合糖鎖精製ビーズ
BlotGlyco®
Hz
-ONH2 基含有
蛍光標識試薬
-ONH2
Hz
Hz
Hz
生体試料などの複雑な混合物から糖鎖を選択的に捕捉し，
同時に還元末端を蛍光標識できるポリマービーズです。
混合，撹拌などの簡便な操作で高度な糖鎖精製が可能です。
HPLC 用の製品と，MALDI-TOF MS 用の製品があります。
ヒドラゾンー
オキシム交換反応
Hz
z
H
蛍光標識糖鎖
分析例
ヒト血清（5μl）
※ BlotGlyco® を用いたハイスループット糖鎖プロファイリング法の有
効性を検証し，標準化を図ることを目的とした，GFRG 研究会が発足
されています。GFRG 研究会の詳細は http://www.gfrg.org/ をご覧
下さい。
Man
Gal
GlcNAc
GalNAc
NeuAc
Fuc
共通の特長
◆ 従来の糖鎖精製法で必要だった煩雑なカラム操作などは不要です。
◆ 従来法では 1 ∼ 2 日を要した糖鎖精製・標識操作を，わずか 2 ∼ 3
時間で行えます。
1250
1500
1750
2000
2250
2500
微量成分
2750
3000
3250
3500
3750
m/z
49 種類の N 型糖鎖を検出
（従来の報告では 20 ∼ 30 種類）
◆ 糖鎖精製には Glycoblotting 法を利用しています。この方法は，生
体物質の中で糖鎖のみがアルデヒド基（還元末端）を持つことに着
（構造は m/z 値からの推測です。）
目し，ビーズのヒドラジド基（-NHNH2）で選択的に捕捉します。
◆ ペプチド，タンパク質，脂質，核酸などあらゆる莢雑物を排除でき
ます。
◆ 微量糖鎖の回収が可能です（約 106 個の細胞から糖鎖分析も可能）。
◆ BlotGlyco® ビーズ表面と -NHNH2 基の間に蛍光色素があり，糖鎖
をビーズから遊離させる際に，同時に糖鎖還元末端を蛍光標識しま
す（下図）。
◆ 精製した糖鎖は，HPLC, 質量分析など一般的な測定法に使用できま
ヒト血清中糖タンパク質の N 型糖鎖分析例 -MALDI-TOF MS
MALDI-TOF MS 条件
装 置 : Autoflex Ⅲ TOF/TOF mass spectrometer（Bruker Daltonics 社）
試料調製：1μl の試料溶液に 9μl の DHB matrix solution（30% アセトニトリル／
水溶液中に 10 mg/ml）を加えた後，その 1μl を target plate にスポットし，
で乾燥させた。
キット内容
■ BlotGlyco® for HPLC（#BS-45305）
試薬
● BlotGlyco® 分散液
す。
BlotGlyco for HPLC（#BS-45305）の構造
● BlotGlyco® ビーズ
● 再遊離（蛍光標識）試薬
固相による操作性向上
（カラム操作は不要）
蛍光性の付与
（HPLC分析に好適）
※ 精製に必要な試薬は，製品プロトコルをご覧下さい。
品 名 メーカー 商品コード
S S ［Fluorescent tag］ NHNH2
定量的な再遊離
（DTTによる還元で切断）
071015s_P16-17_k_n_i_k.indd 17
糖鎖捕捉
（ヒドラゾン形成で糖鎖捕捉）
BlotGlyco
SMB
BlotGlyco
SMB
for HPLC (10 reactions)
BS-45305
for MALDI (10 reactions)
BS-X4104
包装 / 価格（￥）
1 kit /
30,000
1 kit /
40,000
ＦＡＸ ０３ ５
- ６８４ １
- ７７５
ＴＥＬ ０３ ５
- ６８４ １
- ６２０
■ BlotGlyco® for MALDI（#BS-X4104）
®
お問い合わせ先
■ BlotGlyco® for HPLC（#BS-45305）
→高感度分析により，未知構造の
糖鎖を検出する可能性
2007/09/26 11:43:03