キンギョ雄における飢餓および片側精巣除去の影響と飢餓キンギョによる

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キンギョ雄における飢餓および片側精巣除去の影響と飢
餓キンギョによる性腺刺激ホルモン活性生物検定の試み
笹山, 雄一; 高橋, 裕哉
北海道大學水産學部研究彙報 = BULLETIN OF THE
FACULTY OF FISHERIES HOKKAIDO UNIVERSITY,
22(4): 267-279
1972-02
DOI
Doc URL
http://hdl.handle.net/2115/23459
Right
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bulletin
Additional
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22(4)_P267-279.pdf
Instructions for use
Hokkaido University Collection of Scholarly and Academic Papers : HUSCAP
キンギョ雄における飢餓および片側精巣除去の影響と飢餓キンギヨ
による性腺刺激ホルモン活性生物検定の試み
笹山雄一*・高橋裕哉*
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6
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， 生殖線の分泌する性ホルモンの統御をうけるととを示唆している (
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)。 しかしながら魚
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是正確にとらえる必要がある。
魚類の GTH についてのとのような試みには， F
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とみられる GTHI
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， サケ脳下垂体の抽出物が未熟ニヲマスの精巣重量を増加させることから， ζ れを
GTHの生物学的定量に用いうる可能性を示した。また Clemens& G
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) はコイやニ
ヲマスの精巣および精液の水分含量が投与 GTH と量的相関をもって増加することを示し， さらに
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9
6
8a
，b
) は脳下垂体を摘除した成熟キンギョの排精反応を GTH 生物試
験 K用いている。 しかしながら実験動物としての系統が確立されていない魚類を用いての生物試験で
は
， 予測されるその結果の大巾な個体差を考えて多数の個体を， しかも任意の時期応用いうる ζ とが
望ましい。との見地かちすると上記の諸法は必ずしも好適とはいえない。
Clemens& Reed (
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，
b
)は
， 雄キンギョの慢性的な
1:関して下垂体摘除に似た状態をもたらす乙とを示し， この現象を用いて
飢餓が精巣の組織学的変化 1
諸種のホルモンの配偶子形成活性の量的な検定を行ないうる可能性を示唆している。本研究は， 魚類
の GTHの生物学的定量を適確かつより能率的に行なう方法を見いだす目的で，成熟途上のキンギョ
1す飢餓の影響を観察し， きちに飢餓キンギョの排精の誘発 1
1:基づく GTHの定量化を
の精巣におよ 1
試みたものである。
稿を進めるに先立ち， 本研究 I
L対し終始御懇篤なる御助言を賜わった北海道大学山本喜一郎教授に
深甚なる謝意を表する。
材料および方法
本研究には成熟途上にある被健体長 4.8~7.8cm ，体重 3.8~18.8g の雄のキンギョ
Carassius
6-1Q0C (12~1 月)から 13-15 C (5月)の流水池で飼育し
9
6
9年 1
2月および 1
9
7
0年 1月 5月 1
:，精巣の初期状態を個体ごとに確認す
ていたものである。 1
るために左側精巣除去を行ない，腹ぴれと尾ぴれの部分切除の組み合わせによって個体識別し， 水温
20-230Cの飼育水構に移して絶食させ (HGx-S群
)
， 15-60日後に屠殺し， 精巣などの変化を観察
と同
した。また ζ の対照として 1月には左側精巣除去の偽手術を施した絶食群 (ShC-S群)と，各月 t
じく左側精巣除去またはその偽手術を施し，かつ十分な餌を与えた群 (HGx-F群と ShC-F群)を設
定し， HGx-S群と同様な条件で 3
0日間飼育した。 ζ れち各群の飼育は自然光条件下で行ない， また
auratus， を用いた。
ζ れらは水温
0
餌としては市販の配合餌料を用いた。
- 268-
1
9
7
2
]
笹山・高橋: キンギョでの飢織効巣と GTH生物検定
精巣除去手術は MS-222で軽く麻酔した魚について. Hansen(
19
3
1
) の方法 κ準じて行なった。偽
手術の場合は左側腹部切開ののち，精巣には触れず傷口を縫合じた。手術後 2週間以内で傷口は完全
に治ゆし，手術による死亡はほとんどみられなかった。
実験の開始時および終了時に各個体の体長，体重，精巣重量を測定，精巣は直ちにBo
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n染色を施して組織学的観察11:供した。
定し，定法I
とよりりの切片とし D
ととらえるために， 精巣切片の一定面積中の成熟精子の占める面積の割
また，組織学的変化を数量的 l
合
，
または精子形成の各段階の細胞の占める面積の割合を投影描写法により測定した。また片側精巣
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) としてあらわした。なお，各月
重量の体重に対する百分比を求め. h
の ShC-F群については精巣重量を左右別p::測定し，各々の hGSIについて左右による有意差のない
ζ とを確かめた。
GTHの量的検定の検討には， 泌尿生殖孔上部を圧迫しても排精しとZくなった飢餓魚に対して 1個
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体あたり人胎盤性性腺刺激ホルモン (HCG;G
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. または雌雄キンギョのアセトン乾燥下重体1/4-
.
2mlP::含むよう調製した液を腹腔内に注射し，注射 24時間後の排精反
1個分を 0.696生理食塩水 0
応の強きを観察した。対照としては同様な飢餓キンギョに対する 0.696 生理食塩水 0.2mlの腹腔内
注射を用いた。腹腔内注射は MS-222で軽く麻酔した後に行ない，体外への漏出を極力防ぐよう配慮
した。反応の度合いは Yamazaki& D
onaldson (
1
9
6
8a
) の方法 f
C準じ， 排精の観察しろる腹部圧迫
回 数 に よ っ て 土 .+
.++の 4段階P::区別した。
実験結果
飢餓キンギ冨の精巣にみられる変化
1
2月
1月の実験開始時まで低水温で飼育されていた雄キンギョでは追い星の発達も顕著でなく，
ζ の条件下での精巣の発達はきわめて緩慢であって. 1
2
また腹部圧迫による排精もみられなかった。
月
1月の実験開始時の hGSIはそれぞれ平均 0
.
8
0および 0.95と大差がなしまた組織学的にも精
巣小嚢内腔には小量の精子がみられるのみであった (
F
i
g
s
.1
.2
)0 5月の実験開始時には飼育水温の上
8 と増加をみせ，組織学的な精巣の成
昇にともない追い星や排精がみられる個体もあり hGSIは1.6
熟度もわずかに進んではいたが冬期の群との差は著しくはなかった (
F
i
g
.
3
)。
各月11:水温2O-230C の水槽へ移された ShC-F群では精巣の成熟が明らかに促進され，追い星や
排精現象の出現とともに. hGSIの増加，成熟精子の増量をともなう精巣小嚢の拡張が認められた
(
F
i
g
s
.
4
.6
)0 HGx-F群にも同様な成熟促進がみられるとともに，左側精巣除去に伴う残存精巣のい
わゆる補償肥大効果と恩われる現象が観察された。すなわち HGx-F群の hGSIの増加は ShC-F群
T
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x
t
f
i
g
.1
).精巣増重率を比べてみても後者が 1
2月
のそれに比してはるかに大であり (
1月および
5月にそれぞれ 5
1
.1
4
2
. 449
6 であったのに対して前者はそれぞれ 2
0
0
.2
9
0
.1
4
39
6 にも達してい
F
i
g
s
.5
.7
) が，精子形成の各段階の生殖
た。また成熟精子量の増加， 精巣小嚢の拡張も著しかった (
細胞の量的比率は ShC-F群のぞれと差がなく， 精子形成の全過程の進行が一様に刺激きれている
ζ
とを示していた (
T
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x
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f
i
g
.
2
)。
一方， 絶食状態におかれた HGx-S群では， 他群と同じく 20-230C の水温への移行後まもなく追
い星の出現や排精の開始をみせた。 1月の処理 1
5日目の精巣では， 精巣小嚢墜に相対的 1
1:多数の精
子細胞包嚢があり， 成熟精子への変態がすすんでいる
ζ とが認めちれた
(
F
i
g
.
8
)。処理 3
0日目には各
精巣小嚢は多量の成熟精子を貯留して著しく拡張しており， 小嚢壁11:1
立小数の精原細胞と稀11:精母細
胞または精子細胞の包嚢が残存するのみで，
主わめて薄くなり， 投餌群にはまったくみられなかった
F
i
g
.9
)。
完熟P::似た状態に達するとともに，処理魚の大部分が腹部圧迫による排精を示さなくなった (
- 269
[XXII
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北大水産業報
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偽手術群 (ShC-S群)の 3
0日間絶食処置も精巣に全く同様な変化を惹起した。精巣 K対する乙のよう
な飢餓効果は処置の時期にかかわりなく認められたが， 精巣が完熟 K似た状態ζ
l達するまでの日数は
時期によって明らかな差をみせ 1
2月には 4
5日を要した (
F
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g
.
l
l
)が
5月には 1
5日で十分であった
(
F
i
g
.
1
2
)。また各月の HGx-S群の精巣の組織切片について計測した精巣小型庭内陸面積の全精巣断面
1
1:対する比率は，乙の組織学的な観察結果とほぼ平行じた変化をみせた (
T
e
x
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f
i
g
.
3
)。さらに上記の
日数以上陀絶食処置を継続すると， 成熟精子の減少，小嚢壁 K残存する生殖細胞の退化消失，小嚢縮
F
i
g
.lO)。しかし，との場合
少と壁の肥厚などの退行的変化が次第に著しくなる乙とも確かめちれた (
にも第 1次精原細胞は比較的健全な状態にとどまっていた。
HGx-S群の hGSI は 5月を除き実験期間の初期 1
1:著しい増加をみせた (
T
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f
i
g
.
4
)。絶食によ
体長の減少は 3
0日目でそれぞれ平均 2
4
.
4
8
9
6，3
.
9
2
9
6であり， 特に処理初期の体重の減少
る体重，
- 270-
1
9
7
2
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笹山・高婿: キンギョでの飢餓効果と GTH生物検定
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L:示した肥満度の変化からもうかがわれた。 HGx-S 群の
hGSIの増加は一部 ζ のような体重減少によるものと考えられるが，精巣の実重量の変化も hGSIの
L9
0
.3mg，1
5日目に
それと平行しており，たとえば 1月では片側精巣の実重量の平均は実験開始時 I
214.5mg，3
0日固に 185.8mg と増加が顕著であった。 ζれは同月の投餌群の 3
0日目の片側精巣重
量の平均 3
3
7
.
6mg (ShC-F群)， 5
4
2
.5mg (HGx-F 群)に比して明らかに小であったが， 同月の
ShC-S群の片側精巣重量は 3
0日目でも平均 103.6mgであって， HGx-S群にも HGx-F群でみら
れたと同様な補償肥大の効果があることがわかった。
1月における 3
0日以上の飢餓処置は，前述の精巣の退行的変化そ反映して hGSI，精巣実重量の個
(
T
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)
0 5月での飢餓処置は， 実験開始期の精巣熟
L比して高かったため精巣は 1
5日目ですでに完熟 I
L似た状態 I
L達し， 多くの個体で
度が他の月の群 I
hGSIの減少がみられた。また，たとえば T
e
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五g
.
4I
L示した 1月の処理後 1
5日目の個体 No.13の
ごとく実験開始期の hGSIが他 I
L比して 0
.
4
2と著しく小である場合には水温上昇および飢餓処置に
よる hGSIの増加は 0
.
6
3 と顕著ではなく組織学的にも精巣小嚢内陸面積の全精巣断面 I
L:対する比率
7
9
6 で第 2精母細胞や精子細胞はきわめて少なく，第 2次精原細胞の包嚢が多数存在し， 精子形
は2
体による差を拡大する傾向が認められた
成初期の様相を呈していた。
ζ れらの事実は ζ の種の実験結果の均一性が実験開始期の状態の均一性
I L:依存する面が大であるととを推?ßIJ~ せた。
飢餓キンギ置による GTHの生物獄験
ζ のよう
I
L低水温 I
L:おいて精巣の発達を抑制したキンギョを 20-230C の水温 I
L:移しかっ飢餓の状
態におくと，処理魚は多量の成熟精子をもっ完熟に似た状態の精巣をもつに至るとともに， 泌尿生殖
孔の上部を圧しても排精を示きなくなる
ζ
とがわかった。
9
7
0年 3月 - 7月および 1
9
7
1年 8月
て
， 1
ζ の排精の停止を“精巣完熟"の指標とし
9月 I
L延べ 1
9
0尾のキンギョ(体長 4
.3-7.2cm，体重
3.7-14.5g
) を 20-230
C で絶食状態 i
とおき排精の停止を確かめた後本実験に用いた。 3月 4月お
- 272-
1
9
7
2
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笹山・高橋: キンギョでの飢餓効果と GTH生教検定
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よぴ 5月の一部の実験に用いたキンギョについては飢餓処置開始時に左側精巣除去を行ない， 実験開
月には 12始時の精巣の状態の確認を行なった。排精の停止は 3月には処理開始後 35-42日目， 4-7
1
6日目， 8-9月には 9-15日目 K明らかとなった。
同一種同一濃度の GTH投与の結果には群による有意な差がみられなかったので実験結果は投与物
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5I
l:示した。対照としての生理食塩水投与ではわずか 1
1
9
6 にま以上の
質ごとに一括して T
排精を認めたにすぎなかったが 2
0，印およひ・ 100mの HCG投与は 2
4時間後にそれぞれ 3
9
，
7
0， 9
4
9
6の試験魚 I
l:明らかな排精反応を惹起した。また++の反応の出現率は，対照群では 4
9
6弱
であったが HCG群ではそれぞれ 9
，
3
7，
9
4
9
6と投与量 I
とほぼ比例した増加をみせた。 5
0および 1 m
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の PMS投与の場合には土以上の反応の出現率はそれぞれ 4
3
. 加%と投与量が大きいほど反応尾数
が増す傾向を示したが. ++反応を示した割合はそれぞれ 14.10%であって，日CG投与の場合とは
異なる
ζ とが確かめられた。
4日
また HCG50IUの 1回投与により++の反応を示した個体は 3月では 7日 5月では 1
7
HCGの投与は上記したと同様な濃度に依存
する排精反応の出現をみせた。日CG単一注射後の排精効果の持続およびその期間の時期による差が
何に基づくかは目下のと ζ ろ明らかではないが，飢餓魚を用いてのこの GTH効果の生物試験は最初
の排精停止後少なくとも 2回の反覆が可能であると思われる。
飢餓魚の排精反応が魚類の下重体性 GTHによっても同様な投与量への依存を示すかどうかを検討
9
7
0年 1月および 5-7月 K計z7尾の成熟雌キンギョ{体長 4
.7
8
.
.
2c
m
.体重3.6するために. 1
2
2
.
0
g
) および計 7尾の成熟雄キンギョ{体長 5.9-7.1c
m
. 体重 7
.
1
1
3
.
7g
) の脳下垂体をアセト
/
4
.
ン舵燥したものを雌雄ごとにまとめ，注射直前に 0.6%生理食塩水 0.2mlあたり脳下垂体の 1
T
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匂.
5
)。
1
/
2または 1個分を含むように懸濁させ，上記と同様な方法でその排精誘導効果を調べた (
/
4個分の投与は 17% の試験魚に土の反応を起乙させたのみであったが，
雌キンギョの脳下垂体 1
1
/
2個および 1個分では+以上の反応がそれぞれ 63%および 91%の割合でみられ. HCGの場合と
月では 1
3日後!r.再ぴ排精の停止をみせ，
ζ れらに対する
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1
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7
2
]
笹山・高橋: キンギョでの飢織効果と GTH生物検定
同じく GTH濃度が高いほど反応が強まった。同様な傾向は雄の脳下垂体投与の結果 t
ともうかがわれ
た。雌雄とも脳下垂体 1個分のもつ排精誘導効果は HCG50IUの示すそれを上まわっていた。また
雄脳下垂体の試験例数が少ないため確実とはいいがたいが，脳下垂体の GTH活性の雌雄差は認める
乙とができなかった。
考 察
生殖腺にみられる反応を対象とする GTH検定に望ましい条件としては，検定動物の生殖膿の状態
1
1:個体差がなく， しかも常に同様な状態にある
ζ
と，従って任意の時期に試験を行ないうるとと， 適
当数の均一な状態の検定動物をそろえる乙とが容易なとと， および外因性の GTHの効果を確実にと
らえるために検定動物自体のもつ GTHの効果を無視できる状態におく乙となどがあげられる。 GTH
の種属特異性を考慮して魚類を検定動物 1
1:使った GTHの生物検定法は， ζれまでもいくつか報告さ
れているが， いずれも処理や測定の方法などに GTHの一般的な生物試験法としての難点をもっ。
o
b
e
r
t
s
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n& R
i
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f
r
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t(
1
9
5
7
)
たとえば未熟なニヲマス11:対する GTH投与による精巣重量の増加をみる R
やS
chmidte
ta
l
.(
1
9
6
5
)の方法は，結果をうるのに長時聞を要する欠点がある。コイ，キンギョ，ま
lemens& G
r
a
n
t(
1
9
6
4
.
たはニジマスを用いて GTH投与後の精巣や精液の水分含量の増加をみる C
1
9
6
5
) の方法は， 検定魚の初期状態によって結果に差を生じやすしまた測定法がやや煩雑なきらい
がある。近年. Y
amazaki& D
o
n
a
l
d
s
o
n(
1
9
6
8a
.b
) は下主主体を摘除した成熟雄キンギョ11:マスノスケ
Oncorhynchust
s
c
h
a
w
y
t
s
c
h
aより抽出した GTHを投与し，結果として起 ζ る排精反応が投与 GTH
の量 1
1:依存する ζ とを確認し， 新たな GTHの生物検定法として推している。との方法は下重体摘除
によって内因性の GTHを無視できる点や結果の判定が容易である点などに利点をもつが，完全 1
1
:
脳
下垂体を摘除した適当な熟度の検定魚を多数そろえるという手法上の困難さを伴う。
内因性の GTHを消失させる手段としては，外科的除去以外に生理的にその分泌を抑える方法もあ
る
。 C
lemens&Reed (
19
6
7
) はキンギョ雄への投餌量を初期体重の 1
9
6に制限して， 慢性飢餓の状
I
、
態においた場合， 処理魚の精巣は当初の 2-3週間で少数の精原細胞と多量の成熟精子を含む精巣1
裂をもつようになり(∞m
p
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ys
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)
. 次いで精子の減少と 4
唖笹の縮少をみせ (
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no
rsperme
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)
. 約 4ヶ月後には少数の生殖細胞がほとんど内陸を欠〈肥厚した結
合織の壁中 t
とみられるのみの， きわめて退行した状態 (
r
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g
r
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s
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ds
t
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g
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) になる ζ とを示した。彼らは
とみられるそれとよく一致する乙とを指摘し， 同織な餌料制
とのような精巣の変化が脳下垂体摘除後 t
g
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u
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z& C
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m
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s
.1
9
6
7a
)
. 脳下重
限をうけたキンギョの脳下垂体での好塩基性細胞の減数(Bo
体蛋自の電気泳動におけるこ，三の分画の消失と精巣水分含量増加能からみた脳下垂体 GTH活性の
低下(Bo
g
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u
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z& C
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m
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s
.1
9
6
7b
) とを併せて， 長期間の飢餓が GTH 1
1:関して p
s
e
u
d
o
hypophysectomyの状態をもたらすと結論している。
本研究では最も容易かつ確実な方法として餌料制限にかえて完全絶食を選んだが， 処理キンギョの
lemens らの観察とよく一致した過程をたどった。実験開始時の状態を
精巣にみられる変化は上記 C
可能な限り一定にするためにあらかじめ低水混に飼育して精子形成の進行をおくらせたキンギョを，
ryzias
より高い水温の実験水槽にうっすと精子形成は強く促進された。 乙のような現象はメダカ O
l
a
t
i
p
e
sの精子形成速度が水温 1
50C よりも 2
50C 1
1:おいて顕著に早められるという E伊 mi& Hyodo
・
T
a
g
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h
i(
1
9
6
7
) の知見や，キンギョの排精現象が飼育水温 1
1:支配会れるという山本ら (
1
9
6
6
) の報告
1:至る精子形成の全
にも示されている。本研究の結果から，水温上昇が精原細胞の分裂から精子変態 1
とみられる精巣成熟の促進も ζ のよ
ての過程を一様に促進する ζ とが示唆されたが， 飢餓処置の初期 l
うな温度効果によるものであろう。 C
lemens& R田 d (
1
9
6
7
) の場合も実験魚を池から 2
60C の水温
へ移しているので，同様な水温上昇の影響を考えてよかろう。
- 275-
北大水産業報
[XXII
，4
硬骨魚雄の脳下垂体除去は， 一般的には第 2次精原細胞の第 1精母細胞への移行と精原細胞の分裂
とを妨げる (Dodd& Wiebe
，1
部8
)0 P
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t
aでは脳下垂体摘除によって精原細胞の分
裂増殖およびその精母細胞への移行が停止するが， 手術時にあった精母細胞や精子細胞の精子への成
熟は抑えられない (
P
叩 d
e
y
，1
9
6
9
)。同様仕事実は P
l
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9
6
3
) やキンギョ
(
Y
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i& D
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n，1
9
団a
，
b
) でもしられている。本研究での飢餓処置は比較的短期間で脳下
主主体の GTHの放出か産生，またはその双方を抑制し， 結果として精原細胞の分裂の停止がおとり，
処理当初の水温上昇により急速に減数分裂前期以後の過程に入った生殖細胞はそのまま成熟を続けて
精子となり，結果として少数の精原細胞と多量の成熟精子をもっ精巣を生じたものと思われる。餌料
制限が精原細胞の増殖を限止する ζ とは上述の C
lemens& Reed (
1
9
6
7
) もすでに指摘していると乙
ろである。しかし，一見完熟It似た ζ の精巣の状態は， 産卵期の生理的成熟とは異った GTH欠除に
伴う精巣退縮の初期像としてとらえるのが妥当であろう。
さらに飢餓魚の精巣が， ζ のような“完熟"の状態It遣するとともに， 腹部圧迫によっても排精を
みせなくなるととが知られた。サメの類でも，ある期間の飢餓 t
とより放精が停止し， HCG または大
量の泌乳刺激ホルモンの投与によって回復するという報告がある (
C
a
r
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l
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，1
9
5
4
)。 キンギョの排精
もまた下重体摘除後すみやかに停止し GTHの投与によって回復することから，明らかに GTHの支
Y
a
m
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a
k
i& Yamamoto，1
9
6
7
;Yamazaki& D
o
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a
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n1
9
6
8
a
，b
)。従って
配下にある現象とされる (
飢餓魚の排精停止は，内因性 GTHの作用を無視しうる状態， すなわち生理的下重体摘除の状態を意
ζ基づいて， 排精停止をみせはじめた飢餓魚が“完熟"
味するものと考えうる。本研究では ζ の知見t
精巣をもち， 外因性 GTHによる排精誘導に反応しうる組織学的要素をもつものと判定した。 ζ の
ような飢餓魚への HCGの投与により明らかに排精が誘導され， しかも排精をみせる個体の比率は
HCG投与量に応じて高まる ζ とが確かめられた。 さらにより明確な排精反応(++反応)をみせる
個体の比率を目標とすると， ζ の傾向はさらに顕著であった。またキンギョの脳下垂体を投与した場
合t
とも同様に，投与量に依存する排精反応を， 試験魚 1尾あたり脳下垂体 1個分以下の範閤内でみせ
た乙とは，飢餓魚を用いての GTHの量的検定の有用性を示すものと考える。 PMS投与の結果は例
数が十分でないので断定し難いが， ζ の場合の陽性の反応は必ずしも投与量と平行せず， PMS 中の
LH様作用物質の混在によるのかもしれない。 しかし Yamazaki&Donaldωn (
1
9
6
8
a
) による脳下
黍体摘除キンギョでは HCGは排精誘導It有効だが FSHまたは LHは無効であるとされているので，
ζ の PMSの効果にゥいては今後一層の検討を要する。
本研究の飢餓処置が魚It全身的な影響をおよぼす ζ とは当然考えねばならない。飢餓K よって退縮
した精巣が外因性 GTHに対する反応性を失わない ζ とは R
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n(
1
9
5
8
) や Clemens & Reed
(
19
6
7
)1
1':よっても確かめられているが， 排精誘導に有効な HCGの濃度からすると，本研究の結果
amazaki&D
o
n
a
l
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n(
1
9
6
8a
) のそれに比して闘値が若干高く，反応性の低下が疑われる。 こ
は Y
れを考慮に入れても，飢餓魚による GTH検定法はほとんど均一な状態の精巣をもっ多数個体を周年
的に，かつ容易fC用いるととができる点で有利といえよう。
とは季節差がないように息われるが， 上述の
本研究の結果からして，外因性 GTHへの反応の度合 t
“完熟"状態に達するまでの日数は 1
2， 1月には 30-45日 5月 1
1
'
:
は 1
5日と差をみせた。慢性飢餓
状態 t
とあ苓キンギョの GSIの変化ゃ， 飢餓よりの回復の過程が光と関連した季節差をみせる乙とは
Bo
g
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匂 &Clemens (
1
9
6
7a
，
b
) が示唆しているが，本研究では， 低水温飼育中のキンギョの生
理的条件 K差の原因を求める ζ とが妥当のように恩われる。 たとえば飢餓処置開始時の精巣および内
2， 1月にきわめて顕著で， ζ れが飢餓効果の発現をお
臓諸器官の周閣の脂肪組織の量は 5月よりも 1
くらせる一因とも考えられる。また本研究での低温飼育は地下水の揚水を利用したため， 夏季にむか
つての水温上昇はさけられず， 従って 5月の実験初期の精巣は冬季のものに比して若干進んだ熟度を
示していた。 とのような実験開始期の精巣熟度の差も飢餓効果の発現速度It影響をおよぼすと息われ
- 276-
1
9
7
2
]
笹山・高橋: キンギョでの飢餓効果と GTH生物検定
る。飢餓効果の時期による
ζ のような差を最小限にとどめる ζ
とも今後の課題の一つであろう。さら
には， 検定物質の投与量の体重あたりの換算および排精反応のより適確な評価の方法などについても，
検定結果の個体差をより小にする方法として検討を重ねられるべき問題である。
飢餓処置開始時の精巣の状態の均一化をはかるために行なった片側精巣摘除は， 本研究の目標とし
たGTH検定には必要な処置ではない。 しかし処置開始時にきわめて未熟な精巣をもっ魚は飢餓処置
による精巣の“完熟"化を期待できない乙とがわかったので，精巣の初期状態の均一性を確認するた
めの生検は望ましい手段と恩われる。片側精巣摘除群の GSIは投餌，飢餓いずれの処置においても偽
手術群のそれに比して有意に大であって，
残存精巣の補償肥大現象がキンギョでもみられる
ζ とを確
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認できた。同様な現象は Salmog
(Go
swami& S
u
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9
6
7
) でも報告されている。特花後者では，残存卵巣の補償肥大が卵原細
)
胞の増殖と卵母細胞の肥大の双方に基づくものである ζ とが明らかにされているが， 本研究でも精巣
の補償肥大が精原細胞の増殖を含む精子形成の全ての過程が均一に刺激促進された結果である ζ とが
うかがわれた。
ζ のような補償肥大現象が，
晴乳類の幼雄の片側精巣除去後 i
とみられるものと同じく
D
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i
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n，1
9
6
6，参照)，
生殖腺ホルモンの血中濃度低下 K伴う GTHの分泌増加に起因するとすれば (
ζ の現象は魚類の脳下垂体一生殖腺系の機能相関の解析に 1つの手がかりを与えるものであろう。 ζ
れらの問題については現在もきらに研究を進めている。
要 約
1
. 水温 7-14C で飼育してきた成熟途上の雄キンギョ
0
C
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sa
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2月
1月お
よび 5月11:，片側精巣摘除手術またはその偽手術を施し水温 20-230Cの実験水槽11:移して 15-60日
h
G
S
I
) や精巣の組織所見 l
と
間絶食させた群と普通11:投餌した群とについて，片側生殖腺の重量指数 (
みられる変化を観察した。
2
. 投餌群精巣の精子形成は水温上昇によって明らかに促進された。 さら 1
1:片側精巣除去群の術後
3
0日目の残存精巣の hGSIは偽手術群のそれに比して顕著に大であった。 ζ の補償肥大の現象は，残
存精巣内の精原細胞の糟殖を含む精子形成の全ての過程が一様に促進された結果である乙とが確かめ
られた。絶食群では，処理の初期11:投餌群におけると同様な精子形成促進がみられ，また片側精巣摘
除による残存精巣の補償肥大も認められたが， 処理開始後 4
5日(1
2月
)
， 3
0日(1月
)
， 1
5日(5月)に
は
， 精巣は少数の精原細胞と多量の成熟精子をもっ小蜜より構成される完熟11:似た状態を呈するとと
もに腹部圧迫による排精をみせない状態ととtった。 きちに長期間の飢餓処置は精巣の明らかな退縮を
導いた。
3
. ζ の完熟に似た状態の精巣をもち， かつ排精の停止をみせた飢餓魚11: HCG20-1
∞lUを腹
腔内注射したと乙ろ， 2
4時間後t
とみられる排精反応の強きはその投与量に依存して増大するととが確
かめられた。 HCG1
0
0lUの投与はほとんど 100%の個体に顕著な排精反応を誘起した。また雌雄キ
4-1個投与した場合にも同様な濃度依存の傾向
ンギョの脳下垂体のアセトン乾燥物を 1尾あたり1/
0lU強11:相当
をみせる排精反応がお ζ った。脳下垂体 1個分の投与による排精反応の度合は HCG5
しており，また雌雄による結果の差は認められなかった。 PMS5
0，1
0
0lUの投与はわずかとz
反応を
惹起したが，反応の度合の濃度依存性は明ちかでなかった。 ζ れらの結果から，魚類の性腺刺激ホル
モンの定量化の一方法として，飢餓キンギョの排精誘導効果を利用できる乙とが確かめちれた。
文 献
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