グリコーゲン溶液 - ナカライテスク

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グリコーゲン溶液
核酸を精製、濃縮する一番簡単な方法は、高分子コロイドである DNA をアルコールと塩で凝集させて沈殿を得る（コ
ロイド塩析）方法であります。しかし、微量な DNA や RNA をアルコール沈殿にて回収する場合、回収率が低下す
ることが知られており、この回収率の低下を防ぐ目的で、アルコール沈殿を行う試料にグリコーゲンや tRNA を添
加します。本液は、アルコール沈殿を行う際に共沈剤として添加し、核酸の回収率を上げるために使用するものです。
特　長
● Ready to use
● 収率アップ
● 冷却ステップ不要
● 逆転写酵素の阻害なし
● Nuclease free
使用例
① 微量核酸の回収
10ng/100μl に調製したλ/Hind Ⅲ溶液を、0.3 mol/l 酢酸ナトリウム存在下にてそれぞれエタノール沈殿
を行ない、回収 DNA をアガロースゲル電気泳動により確認しました。
グリコーゲンを添加することで微量 DNA を効率よく回収できることを確認しました。またグリコーゲン
添加後直ちに遠心操作を行っても、90％以上の DNA を回収できることを確認しました。
レーン 1：Control
レーン 2：グリコーゲン未添加、直ちに遠心
レーン 3：グリコーゲン添加（1μl）、直ちに遠心
レーン 4：グリコーゲン添加（1μl）、室温、1 時間
レーン 5：グリコーゲン添加（1μl）、- ３０℃、1 時間
レーン 6：A 社　共沈剤添加（1μl）、直ちに遠心
② 逆転写酵素への影響
10,000cells の浮遊培養細胞 HL-60 から Sepasol®-RNAⅠSuper を用いて RNA の抽出を行い、グリコーゲン
添加イソプロパノール沈殿で RNA を回収しました。回収した RNA を DNase 処理し、次いで逆転写酵素
（ReverTra Ace®, 東洋紡績㈱）を使って cDNA としました。さらに同一チューブで DNA ポリメラーゼ（KOD
Dash®, 東洋紡績㈱）を使いβ-actin（645bp）の増幅を行いました。
共沈剤としてグリコーゲン溶液を用いて回収した RNA は、逆転写酵素に影響を与えず RT-PCR への適応が
可能であることを確認しました。
レーン 1：100bp ラダーマーカー
レーン 2：グリコーゲン未使用
レーン 3：グリコーゲン 0.5μl 使用
使用方法
レーン 4：グリコーゲン 1μl 使用
レーン 5：グリコーゲン 3μl 使用
レーン 6：グリコーゲン 5μl 使用
使用例
Sepasol® による Total RNA の抽出時にグリコーゲンを添加することで、細胞から RNA を効率良く回収で
きることが確認されました。以下にそのプロトコールをご紹介します。
価格表
製品名
Glycogen Solution(20mg/ml) from Oyster, Nuclease tested
貯法
製品番号
容量
価格
冷凍
17110-11
1 ml
13,500
関連製品
製品名
毒劇物
Sepasol®-RNA Ⅰ Super G
劇
Sepasol®-RNA Ⅱ Super
劇
ご注意　試験・研究用以外には使用しないでください。
貯法
冷蔵
冷蔵
製品番号
容量
価格
09379-84
100 ml
23,500
09379-97
200 ml
39,000
09379-55
500 ml
76,000
30487-46
100 ml
23,500
※記載の内容は、'15 年 10 月現在の情報に基づいております。
※価格に消費税は含まれておりません。
■販売取扱店
ナカライテスク株式会社
〒 604-0855　京 都 市 中 京 区 二 条 通 烏 丸 西 入 東 玉 屋 町 498
Web site
http://www.nacalai.co.jp
試　薬 は こ こ に
0 1 2 0 - 4 8 9 - 5 5 2
価格 ・ 納期のご照会
製品に関する技術的なご照会 E-mail:[email protected]
TEL:075-211-2703 FAX:075-211-2673
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