転写共役因子 Peroxisome proliferator

Kobe University Repository : Kernel
Title
転写共役因子Peroxisome proliferator-activated receptor
γ coactivator-1 (PGC-1α)の新規アイソフォームの同
定(Identification of a novel isoform of peroxisome
proliferator-activated receptor g coactivator-1 (PGC1α))
Author(s)
金, 世煜
Citation
神戸大学医学部紀要=Medical journal of Kobe
University,65(1/2/3/4):1-9
Issue date
2005-03
Resource Type
Departmental Bulletin Paper / 紀要論文
Resource Version
publisher
DOI
URL
http://www.lib.kobe-u.ac.jp/handle_kernel/00422382
Create Date: 2017-03-31
l
転写共役因子 Peroxisomep
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r
l (PGC-lα) の新規アイソフォームの同定
世建
金
神戸大学大学院医学系研究科応罵分子医学講座
結束病代語・消化器・腎臓内科
連絡先:金
世霊
神戸大学大学誌医学系研究科応用分子医学講窪
糖尿病代認・消化器・腎臓内科
神戸市中央区橋町 7-5-1
電話:078-382-5861
Fax:078-382-2080
〈平成 1
6
年 5月2
7日受付〉
子の活性を制調することにより，多彩な生物学的作用
【要約】
を発揮することが報告されているが，中でも生体のエ
マウスゲノム靖報の解析かち p
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r γcoactivator-1α(PGC-1α)
の新規アイソフォームを同定した。この薪規アイソフォー
ムの mRNAのアミノ駿コード領域は，諜報の PGC豆NAの 5
'嬬の 1
6アミノ酸分の塩基配列が，こ
1αm
2アミノ離分の配列に置換されてお
れとは異なった 1
り，既報の第 lエクソンの上流に存在する新規エクソ
ネルギ一代謝の制御における作用が注目されてい
る
は
， 3)。
PGC-1α は謁色脂訪組識に発現し，寒冷暴露により
その発現は強く誘導される。梅色脂肪中では， PGC-1
αは PPARγ や甲状腺ホルモン受容体の転写活性を
n
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gp
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n(UCP)1を
刺激することにより， u
こ関与する遺伝子の発現を増強さ
はじめとした熱産生 i
ンからの転写顎始によって生じるスプライシングバリ
GC-lα は絶
せる作用を有する(1)。また，肝臓では P
アントと考えられた。薪農アイソフォームは骨諮筋お
食により発現が誘導され，摂食によりその発現は抵下
こ強発現していた。アデノウイルス
よび心筋に特異的 i
するは〕。肝細胞で P
GC-lα は HNF-4α ，グルココル
ベクターを用いて C
2C12培養筋篤縮胞に本アイソフォー
チコイド受容体， Fox
むなどの転写国子に結合し，
ムを強制発現させると，
これらの転写活性を刺激することによりフォスフォエ
ミトコンドワア関連莞缶子の
ノールピルどン酸カルボキシキナーゼやグルコース 8
発現が増加し組識学的検討でもミトコンドワアの増加
を認めた。また，
リポーターアッセイにより，転写!z9
リン酸脱リン酸化酵素といった糖薪生系遺伝子む発現
を誘導する(4一
九
子N
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1の転写活性を増強
GC-1α の
させる{乍患を持つことが明らかとなった。 P
骨格筋の筋線維は 1型線維(遅筋)と 2型線維(速
新規アイソフォームは，骨格筋のエネルギ一代謝変化
筋)に分類される(7)0 1型隷維にはミトコンドリアが
の制御に関わる可能性が示唆された。
豊富であり，エネルギー需要を酸化的リン酸化経籍 i
こ
より強く依存するのに対し
【緒
2聖線維はグリコーゲン
分解からのエネルギーにより強く抜存する。骨格筋で
GC-1α 辻 1型線維に高発現するが， PGC-lα を
はP
Peroxisome p
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d receptorγ
coactivator-1α(PGC-1α)は，転写冨子 Peroxisome
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r γ(PPARγ 〉 に 結
本来 2型線維が主鉢の筋において
1型線維を詩徴づ
ける種々の遺伝子の発現が増加し，
ミトコンドワアも
合し，その転写活性を増強させる転写共投国子として
増加する (8)。また骨格筋生挨む解析から
GC-lα は操々な転写茜
罰定された該蛋白である (1)0 P
患者の骨搭筋では P
GC-lα によって誘導される遺長
発現させたトランスジェニックマウスでは，
筋肉に通乗j
【キーワード] P
GC-lα ，スプライシングパワアント，第肉，転写共役因子
(1)
2型轄尿病
2
αaもしくは pcDNAjPGC-1αb，1μgの pcDNAj
NRF-1，0.1μgの ・ ガ ラ ク ト シ ダ ー ゼ 遺 伝 子 を コ ー
子 群 の 発 現 が 低 下 す る こ と も 報 告 さ れ て い る (9・ヘ
GC-1α は骨絡筋のエネノレギ一代謝制梅に
すなわち， P
ドする SRα(SRαjLacZ) の各プラスミドを混合後，
LipofectAMINE (インビトロジェン)を用いて， 2
4
重要な役割を果たす転写共役因子であるとともに，骨
格筋における P
GC-1α む 機 能 や 発 現 の 低 下 は
2型
ウェルプレートで培養した 2
9
3細 抱 i
こ導入した。 pcD
糖尿痛む病謹と関連する可能性が示唆される。
今@J，著者はマウスゲノム?膏報の解析により筋肉及
NAjPGC-1αa も し く は pcDNAjPGC-1αb及び、
び心筋に高発現する P
GC-1α の新規アイソフォーム
pcDNAjNRF-1の 導 入 を 行 わ な い 場 合 は ， 遺 伝 子 を
を同定し，その発現特性及び機能について検言ました。
cDNA.3.1を方日え，
コードしない p
本研究により，
この新規アイソフォームは骨格筋のヱ
ンに用いるプラスミド量は常に 3.1μgとなるよう謁
ネルギ一代謝変化の制御に重要な機能を果たす可能性
整した。 4
8時 間 後 に 組 抱 を 呂 収 し ， 可 解 化 分 画 の ル
が示唆された。
シフエラーゼ活性及び・ガ、ラクトシダーゼ活性をホタ
トランスフェクショ
ルルシフエラーゼアッセイシステム及び β ガラクトシ
【方
法】
ダーゼアッセイシステム〈プロメガ〉により測定し，
βガラクトシダーゼ活性あたりのルシフエラーゼ活性
1の転写活性を算出した。
により N豆F
蛋自発現ベクター
マウス P
GC-1α の新規アイソフォーム (PGC-1αb)
の cDNAは
， PGC-1α1b特異領域を含むセンスプラ
及び既報のマウス P
GC-1α の カ ル ボ キ シ ル 末 端 の 匡
C2C12筋詩紹抱への PGC-lαbの過剰発現
C2C12筋 芽 縮 胞 は 既 報 の ご と く 培 養 し ， 筋 誇 紹 抱
2C12筋 筒 細 胞 に 以 前 に
への分化誘導を行った(ヘ C
5
'c
a
aagct
g
a
子山こ本自民なアンチセンスプライマー (
記載した方法に従って (ωAxCAPGC-lαbもしくは対
c
a
cc
c
gt
g
aa
t
3
'
) を 用 い て ， マ ウ ス 膏 搭 筋 cDNA
ライブラリー〈タカラバイオ〉を鋳主として PCRに
8時間後に
照 と し て AxCALacZを 感 染 さ せ ， 感 染 4
5
't
g
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c
atgga
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gt
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gggat
t
gt
3
'
)
イマー (
て 増 幅 し た 。 既 報 の PGC-1α(GC-1αa) 0) cDNA
o
t
a
l RNAを抽出し，
細抱を回収し，細胞から t
RT-PCRI
こ供した。また，@J収した細胞を電子顕微
も同じライブラワーより PCRにて増幅した。これら
鏡による解析に供した。
の cDNAを 蛋 自 発 現 ベ ク タ -p
cDNA3.1 (インピト
GC-lα 各アイソフォームの発現
マウス各臓器の P
ロジェン) !こサブクローニングし，それぞれのベクター
を pcDNAjPGC-1αb，pcDNAjPGC-1αaと名づけ
5匹む 1
0適齢雄性 ICRマウスの各臓器を話時摂金
た
。 PGC-1αbをコードするアデノウイルスベクター
o
t
a
lRNAを揺出した。各語体か 0
t
辱た
下で採取し t
akaraAdenovirus E
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nキット〔タカラ
はT
バイオ)を用いて，既報の手技(叫に従い作成し， Ax
t
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a
lRNAを等量づ、つ還合した後，定量的 RT-PCR
によち， P
GC-lα 各アイソフォームの発現量を解析し
CAPGC-1αbと名づけた。 β ガ ラ ク ト シ ダ ー ゼ 遺 伝
f
こ
。
子 を コ ー ド す る ア デ ノ ウ イ ル ス ベ ク タ -AxCALacZ
定量的 RT-PCR
辻東京大学童科学研究所，斉藤泉薄士より供与を受け
た。ヒト N
u
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1 (NRF-l
)
cDNAは PCR法によりヒト骨格筋 cDNA (タカラバ
cDNA3.1にサブクロー
イオ)を鋳型として増幅し. p
細 抱 ， マ ウ ス 各 騒 器 よ り 抽 出 し た 約 3μgの t
o
t
a
l
ニングした。このベクターは pcDNAjNRF-1と名づ
RNAを鋳型として逆転写を行い， cDNAを毎た。こ
こ記載した手技に従
の cDNAを 鋳 型 と し て ， 以 前 i
い<t
4
)
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B
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ミ
GreenPCR Masterキット(ノ fーキンエ
けた。また，ヒト m
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r Mode17900 (PE アプ
A (mTFA) 遺伝子の NRF-1反 応 性 領 域 詰 既 報 と 同
隷にゆヒトゲノム DNA (タカラバイオ社)を鋳型と
ライドセイエンス)を用いて定量的 PCR解析を行い，
36B4遺伝子に対する相対発現量として各撞遺伝子の
こて増幅し，ホタルルシフエラーゼ遺伝子
して PCRI
発現量を定量した。遺伝子発現の検出に用いたプライ
を コ ー ド す る ベ ク タ -pGL3 (インピトロジェン)に
マーベアは以下の通りである。 PGC-1αb
，5
't
g
a
サブクローニンクーした O 本 プ ラ ス ミ ド は mTFA-
gtga
c
atgga
t
g坑 gggat
t
gt
3
' (センス)及び
1ucjpGL3と名づけた。
5
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c
gc
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gg
c
tc
a
tt
g
tt
g
ta
c
tg
g
t
3
' (アンチセ
ンス) ;ATP合 成 酵 素 βサブユニット
リポーターアッセイ
lμgの mTFA-1ucjpGL3， 1μzの pcDNAjPGC-1
(
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ga
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ATPs
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:bATPase)，5
aga a
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3
' (センス〉及び、 5
' -ggg
く2)
3
c
c
ag
c
ag
a
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a
ac
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c
3
' (アンチセンス);
チトクローム c
喜変化欝素サブユニット I (
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3
' (センス)及び 5
a
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3
' (アンチセンス) ;mtTF
A，5
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七a
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3
' (センス〉及
び5
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3
' (アンチセンス);
NRF-1，5
'c
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ac
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'
(センス)及び、 5
'g
g
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ct
g
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g
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gc
g
tc
g
tc
t
g
PGC-1αa及 び PGC-1αbのマウス各臓器における発
，
現分布について検討した。 PGC-1αaの mRNAは
0 PGC-1αa及 び 36B4mRNA
g
3
' (アンチセンス )
既報どおり(1. 3) 掲色詰訪組識，骨格筋，腎臓，脳，
の検出には既報のプライマーペアを用いた (14slao
a
)。一方， PGC心篇などの臓器に発現を認めた(璽 2
マウス各組織におぜる PGC-lαbの発現分布
PGC-1αa及び PGC-1αbの mRNAはノザンプロッ
ト上ほぼ同等の位置に泳動されると予瀕され，ノザ、ン
プロットにより両者の発現量を験討することは困難と
考えられた。そこで，各々のアイソフォームに特異的
なプライマーベアを患いた定量的 RT-PCR法により，
lαbの mRNAI
ま骨格筋及び心筋 i
こ特徴的に高発現
【結
果】
しており，褐急詣訪組織にも軽震の発環を確認した
(
国2
b
)。
PGC-lα 新規アイソフォームの同定
マウス ESTデータベースを竣索の結果，窺報む P
GC-1αcDNAと 5
'剖のみが異なった塩基配列を有す
る ESTクローンが存在することを見出した (ESTア
クセッション番号 AW107131及 び B
B
8
5
3
7
2
9
)。 こ れ
らの ESTクローンの塩基配列から推定されるアミノ
酸記列は，既報の P
GC-1α のアミノ末端 1
6アミノ按
2アミノ酸分の
分の塩基が欠失し， これとは異なる 1
塩基に量換された講造を持っていた(図 1)。マウス
ゲノム清報データベースを検索した結果，
PGC-lαbの強制発現が各謹遺{云子発現及びミトコン
ドリア合成に及ぼす効果
C2C12筋笥紐抱にアデノウイノレスベクターを罵い
て PGC-1αbを 強 制 発 現 し ， 各 撞 の 内 因 性 の 遺 伝 子
発現を定量的 RT-PCR法により検討した。 PGC-1αa
，
PGC-1αbの共通部分を認識する抗体によるイムノプ
ロットでは， C
2C12箆 篤 鱈 胞 に PGC-1α 蛋 白 は 検 出
できなかった(図 3
a
)。また， RT-PCRによっても P
GC-1αa (データ示さず)， PGC-1αbの mRNAも検
出されなかった(密 3
b
)
0 C2C12筋 笥 組 胞 に pGC-1
a
これら
ESTクローンにおいて既報の PGC-1αcDNA塩 基 配
列とは異なる部生と完全に一致する配列が，既報の P
G
C
1
α 遺{云子の第一エクソン上流約 1
5
k
bの位墨に存
，
g0.020
"
，
'末 端 に は ス プ ラ イ シ ン
在した。この梧同性領域の 3
司
‘
グ受容部のコンセンサス配列に合致する塩基配列が存
jom
芸0.016
D
:
:
在した。以上の知克から，今回同定した ESTクロー
毛
D
39GOB
ンがコードする mRNAは
， P
GC-1α 遺伝子の未開定
U 0.004
0
のスプライシングパワアントに由来すると考えられた。
a
.
以下，本論文では，既報の P
GC-1α を PGC-1αaと
b
今回同定したスプライシングバリアントを PGC-1αb
20
.
0
2
5
，
と呼ぶ。
2
2962B
a
E0
.
0
1
5
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~ 0
.
0
1
0
:
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。
a
.
で 0
.005
MAWDMCS QDSVWSDI E
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aa
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gaaa
命 令 命 令 命 令 . . )参考
8 タ点々々
々々
9
o--ゼ「
密 2
. 各 種 臓 器 に お け る PGC・1αa及 び PGC-lαbの
MLG LSSMDSILK
匿1
. PGC・1αa及び PGC-lαbのアミノ接配列の差異
a
) 及 び PGC-1αb (
b
) の翻訳
マウス PGC-1αa(
関桧部位のメチオニンをコードする ATGからの互い
に相違した部位む全塩基配列およびそれに対応するア
ミノ酸配列を示す。
0
発現分布
槌 時 摂 食 時 の マ ウ ス の 各 議 器 に お け る PGC-1αa
(
a
)及 び PGC-lαb(
b
) の mRNA発現量を RT-PCR
にて検討した。 mRNA量 は 36B4mRNAに 対 す る 相
対量を 3@]の実験で得ちれた植の平均値土標準誤差で
表示した。
(3)
4
αbをコードするアデノウイルスを感染させると， ウ
イノレス量依存性 i
，
こ PGC-lαb0)mRNAは増加し，
GC-lα 蛋白の発現も増加した
またこれと平行して P
a，b
)。
〈
図3
PGC-lαbの強制発現によち， mTFA，NRF-l，
bATPase，COXI
Iの mRNA発現は，いずれも PGC1αbの発現量抜毒性に増加した〈図 3
c
-f)。また， P
GC-lαbを発現させた細胞の徴細構造を電子顕微鏡
のサイズの増大が観察された〈図
写活性化作用に及ぼす PGC-lαbの効果を検討した O
2
9
3細抱において， mTFAに 対 す る 転 写 活 性 は
NRF-lの 発 現 i
こより，基礎誼の約 2倍 に 増 強 し た
︽U
司
44
b
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出
品
甲
山
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1αb:
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CAPGC1αb:
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。一割弱﹄︿ZNhEマ図@品川﹃一宗一00
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0
Ax
CAPGC・
1αb:
G
d
。30
』
4
)。
PGC-lαbO)転写活性化作用
PGC-lαaは NRF-llこ亘接結合し，その活性を増
強することが知られている(12)。そこで， NRF-IO)転
。=EdZNhE-
i
こより換討した結果，単位視野あたりのミトコンドワ
ア数の増加を認めるとともに，掴々のミトコンドリア
9
5
15
50
Ax
CAPGC-1αb:
(
M
O
I
)
-H
0
.
5
ZHh
呈・マ包@目立で
0
.
4
0
.
3
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.
2
Hhgz
0
.
1
8
AxCAPGC・1αb:
司4 4 z
aHTqu
nunununuw
nununUAU
剛志円ミ HhaFE
。ぉ酬と︿ZU5守
。 語︽
e
e
。
Q
AxCAPGC・1αb:
15
5
50
5
15
50
(
M
O
I
)
(
M
O
I
)
璽3
. PGCぺαbの強制発現による各蓮遺缶子発現の変化
C2C12筋筒細抱に記載の通りの重複感染度 (
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n:MOI
)I
こて PGC-lαbをコードするア
8時間の紐抱から得た可溶化分画を PGC-lα を認識する
デノウイルス (AxCAPGC-lα 訟を感染させた。感染後 4
8時間の細抱かる t
o
t
a
lRNAを得て， PGC-lα(b)，
抗体を用いたイムノプロットに供した(心。また，感染後 4
bATPase(c)，COXII(
心
，
血 TF
A(
e
)，NRF-1(f)の mRNA発 現 量 を RT-PCRに て 検 討 し た 。 各 種 遺 伝 子 の
mRNA量 i
ま 36B4mRNAに対する相対量を 3呂の実験で得られた値の平均鐘士課準誤差で表示した。
(4)
5
(
図 5)0 NRF-1とともに PGC-1αaを発現させると，
言
国
~ 5
.
0
きに達した。また，同量の PGC-1αbを
礎 僅 の 約 5f
:
;
:
;
韓
三 4
.
0
NRF-1とともに発現させても，転写活性は基礎僅の
9
3組 抱 i
こPGC-1αaもしくは P
約 5倍に増強した。 2
GC-1αbのみを発現させても， mTFAの転写活性は
基礎櫨の
6
.
0
0
.
既報どおり(1
2)mTFAの転写活性はさらに増強し，基
0
匂阻
害
3
.
0
z
。
惇
m 2.0
.
三 1.0
2倍に増強した。
暗
世
匂回
J
【考
察】
0
.
0
NRF:
GC-1α の新規なスプライシン
ノム清報の解析から， P
P
G
C
1
α 訟を同定し，その特性を検
グバリアント (
討した。 PGC-1αbは，既報の PGC-1α(PGC-1αa)
のアミノ末端 1
6アミノ酸が欠失し，これとは異なる
+
+
+
PGC.1αb:
・ ・ ・ + ・
÷
図5
. PGC・1αbによる NRF-l転写増強作用
2
9
3細胞に mTFA-1ucjpGL3及び内密性諜準として
，
l pcDNAjPG
のSRαjLacZともに， pcDNAjNRFC
1
α ， pcDNAjPGC-1αbの各プラスミドを単独で
÷
もしくは記載どおりの組み合わせで導入した。遺伝子導
8時間後に細胞を冨寂し，ルシフエラーゼアッセイ
入4
とβガラクトシダーゼアッセイに供した。レポーター遺
缶子む転写活性は， βガラクトシダーゼ活性あたりのル
シフエラーゼ活性む平均鐘±諜準誤差で表示した。
1
2アミノ駿 i
こ置換された構造を持っていた。各種遺
伝子データベース検索の結果， PGC-1αbOオルソロ
グをコードすると考えられる mRNAはマウスのみな
らず， ラットやヒトにも確認される(データ示さず)。
Control
+
PGC
・1
αa:
本研究ではマウス ESTデータベース及びマウスゲ
Ax
CAPGC-1αb
(MOI50)
x5000
x10000
密4
. PGC・1αbの強制発現によるミトコンドワアの増加
C2C12筋筒細屈に重複惑染震 (
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8時間の椙抱をウイルス非感染細胞を対照として (
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ス (AxCAPGC-lαb) を感染させた。惑染後 4
0
0
0倍畿，下設 1
0
0
0
0f
音
イ
象
。
顕徴鏡的観察に供した。上段 5
(5)
6
これ辻， PGC-lαbがマウスのみならず，時乳動物に
生成や酸化的リン酸化に関わる各種の遺伝子の発現に
GC-lα 遺{云子のスプライシング
普遍的;こ存在する P
対し主要な役割を果たすかは明らかではなし可。アイソ
バリアントである可能性を示唆するものである O
フォーム特異的な抗体を作成し，蛋白レベルで両アイ
PGC-lαaと辻異なり， PGC-lαbの臓器分布は，
ソフォームの発現量 C 絶対値を比較することは， PG
，
ほぼ骨諮筋及び心筋に限局していた。 PGC-lαaは
C
lαbむ生理的意義のさらなる検討にとって重要で
骨格筋では呼吸鎖における接化的リン酸化に関わる遺
あろう。また，各アイソフォームを特異的に欠失する
伝子の誘導に関与するとともに，
ミトコンドリアの生
遺伝子欠損マウスを作成すれば，橿体レベルでのエネ
成にも重要な磯能を果たすと考えられている ω 。そこ
ルギ一代謝における生理的機能む差異が暁らかになる
で，本萌究では，士吾養筋笥縮抱に PGC-lαbを過剰
と考えられる。また，運動急需により骨格筋の酸化的
発現し，各種の内菌性遺伝子の発現を検討した。
リン酸化能やインスワン抜葎性む糖取り込み能は増強
2
九 ま た ， 運 動 負 需 に よ っ て 骨 権 第 0) PGC-l
する (20，
C2C12詰養篇簡細胞にアデノウイルスベクターを用
いて PGC-lαbを発現させると，酸化的リン酸化に
必 須 の 欝 素 で あ る bATPase及 び COX豆 0) mRNA
が PGC-lαb蛋自の発現量の増加に伴って強く誘導
された。 bATPaseむ遺託子は核内ゲノム上に存在す
るのに対しく16)， COX宜遺伝子はミトコンドワア遺伝
増加するのかという点も，今後む重要な検討課題と考
子にコードされる的。 mTFAは核内ゲノムにコード
えられる。
される転写因子であるが，
αの発現量が増加すること (22，
2
3
)も知られており，運動
GC-lα
負荷による骨格筋の糖指費代諜の変化には， P
の発現増強が重要な投書日を果たす可能性がある O 運動
GC-lα のいずれのアイソフォームが
負荷において P
最近， DNAマイクロアレイを黒いた解析により，
こ移行して
ミトコンドりア i
ミトコンドワアむ各謹の遺伝子の発現誘導やミトコン
2聖糖尿病患者の骨格窮では PGC-lα 及び、 PGC-lα
こ関与することが知られている(へ
ドリア遺伝子の謹製 i
いよって誘導される遺缶子群の発現が低下していると
こ関
また，転写冨子 NRF-lは各種の酸化的ワン喜変化 i
り報告がなされたけ， 1九 ま た
わる酵素の遺伝子を誘導するとともに
m
n
工T
FAむ遺
2型糖尿病患者の近親
者では，耐糖能が正常であっても，骨格筋におけるミ
伝子発現も活性化する c
l
路
へ
§
トコンドリア機能が低下していることも報告されてい
n
工T
F
、
A及
び
び
、 NRF-lの発現 l
はま毘量依存性に増加し，
り
弘
， m
GC-lα の発現の抵
る位九すなわち骨格筋における P
iこミトコンドリアの生成も誘導し 7
たこ。以上の結果
さら に
下や，それによって生じるミトコンドリア機能，すな
2型糖尿病の擢患
， PGC-lαaと同様に，箭肉にお
よち， PGC-lαbは
わち酸化的ワン酸化反症の抵下は
ける酸化的リン酸化に関わる遺伝子の誘導能を有する
感受性を決定付ぜる遺伝的要菌の一つである可能性が
とともに， NRF-ljmTFAカスケードを介してミトコ
示唆される o DNAマイクロアレイを用いた解析では
ンドリアの生戒を増加させることが明ちかとなった。
PGC-lαbと PGC-lαaをI
Rl.IlJできず
2型糖尿病患
2
9
3細胞を用いた一通性発現系により， PGC-lαa
者でいずれのアイソフォームの低下が生じているか辻
と PGC1αbむ転写共役活笹を検討したところ， PG
明らかではない。 PGC-lαb， PGC-lαaの各アイソ
C-lαaと同様に PGC-lαbも NRF-lの転写活性を刺
，PGC-lαbともに NRF-l非導入
激した。 PGC-lαa
細胞においても， mTFA0)プロモーター活性を基礎
9
3縮抱に
鐘に比して約 2倍に増加させたが，これは 2
存在する内菌性 0)NRF-lの活性を刺激した結果であ
フォームの発現量を 2型糖尿病患者の骨格筋で検討す
雌
ることにより
2型糖京病の遺伝素因の解明にとって
有用な情報が得与れる可能性があろう。
【謝辞】
ると考えらえる。導入したプラスミド量あたちの
NRF-lt
こ対する転写共役活 詮 i
こ
は
， PGC1αaと PG
C
lαb寵で差は認めなかった。すなわち， PGC-lαa
と PGC-lαbは，少なくとも NRF-l1
こ対しては，ほ
賜りました神戸大学大学説志期分子医学講座，糧京病
ぼ同等の活性を有するものと考えられた。
車内科春日雅人教授に厚くお礼申し
代露首・消化器・腎E
J
本研究にあたり， AxCALacZを撰与いただきまし
問
PGC-lαa及び PGC-lαbが機能的 i
こ同等であると
た斉藤泉博士に深く惑謝いたします。また，ご指導を
上げます。
仮定すると，これらのアイソフォームのうちいずれが
【文献】
生理的に重要かは，南アイソフォームの発現量の多寡
に依存すると考えられる o RTPCR法では両者の発
田
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現量の絶対鐘を比較することは困難であり，骨諮筋に
おいていずれむアイソフォームが，
ミトコンドリアの
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