Dead-Cert Kit

フナコシニュース 2011 年 5 月増刊号
●
http://www.funakoshi.co.jp/
死細胞
特 長
◆ アポトーシスを起こした細胞とネクローシスを起こした細胞の両方
を認識し，除去します。
◆ 1.5 ml チューブで最大 5 × 106 個の細胞から死細胞を除去できます。
◆ キットに含まれる Dead-Cert YES medium は，死細胞の除去操作
5.0
2.5
0.0
未処理
処理後
後
死細胞／瀕死の細胞および細胞破片と結合する Dead-Cert
nanoparticle と，磁気ビーズ用セパレーター，専用培地をセッ
トにした製品です。簡単な操作で，生細胞のみを高効率で回収
できます。用途に応じた 6 種類の製品があります。
7.5
理
Dead-Cert Kit
10.0
処理
死細胞を除去し，生細胞のみを分離するキット
生細胞
12.5
未処
磁性粒子
15.0
細胞数（×105）
細胞分離
細胞培養
17.5
細胞培養
19
マウス B リンパ球細胞（λ -MYC）を Dead-Cert RNA Preparation Kit（#DC-003RN）
を用いて死細胞除去した（左図）。これらを試料として RNA の抽出を行った（右図）。死
細胞では RNA が速やかに分解されてしまうため，未処理のものでは分解産物が多く見ら
れる。本キットでの処理により，高品質な RNA 抽出が行える。
操作方法概略
1. 懸濁した Dead-Cert nanoparticle をチューブに移し，Dead-Cert
YES medium または血清含有の適切な培地で洗浄する。
2. Dead-Cert microtube magnet を用いて培地を除去する。
に最適化されています。
◆ Dead-Cert nanoparticle の粒径：250 nm
3. 新たな YES medium（または適切な培地）と細胞を加え，4℃ ＊ 1
で 40 分間インキュベートした後，細胞を回収する。
死細胞除去の重要性について
＊ 1 食細胞による貪食を防ぐために 4℃でのインキュベーションをお
勧めしますが，食細胞による影響が無い場合や，温度感受性の細
キット内容
品 名
キット構成品
Dead-Cert Kit
Dead-Cert nanoparticle ＊ 2
Dead-Cert YES medium
Dead-Cert microtube magnet
●
●
●
Dead-Cert Kit
Dead-Cert
without Magnet Nanoparticle
●
●
−
●
−
−
＊ 2 キットにより内容が異なります。
8,000
IgM 産生量 (ng/ml)
胞の場合は，４∼ 37℃で最適な温度をご検討下さい。
■ キット別売品
7,000
品 名 6,000
5,000
4,000
3,000
2,000
1,000
0
10
16
Dead-Cert
メーカー 商品コード
包装 / 価格（￥）
Microtube Magnet, Dead-Cert
ISV
DC-002
貸出しOK
1 piece /
44,000
ネオジム製磁石を内蔵した 1.5 ml チューブ用スタンド。※ オートクレーブ不可。
YES Medium, Dead-Cert
ISV
DC-004
30 tests /
26,000
死細胞の除去操作に最適化された培地。BSA 含有。
※ Dead-Cert nanoparticle の別売品については下表をご覧下さい。
貸出しOK
Dead-Cert Microtube Magnet の貸出しを承ります！
ご希望の方は当社テクニカルサポート（試薬担当）までお申し込み下さい。
Dead-Cert Nanoparticle
用途例
Antibody Production
Cell Culture
Cryopreservation
Drug Screening
ハイブリドーマを用いたモノクローナル抗体産生で産生量の向上
細胞生存率・増殖率およびタンパク質発現量の向上
凍結保存細胞を播種する際の細胞増殖率の向上
Cell-based アッセイにおけるノイズの減少や感度の向上
RNA Preparation
RNA，DNA，タンパク質試料を用いたアッセイにおける実験精
度の向上
DC-003TKRN
DC-003RN
DC-003TKNMRN
DC-001RN
Stem Cell
幹細胞の生存率および増殖率の向上など
DC-003TKSC
DC-003SC
DC-003TKNMSC
DC-001SC
30 tests＊3
￥134,000
DC-001AB
DC-001CC
DC-001CR
DC-001DS
ＦＡＸ ０３ ５
- ６８４ １
- ７７５
ＴＥＬ ０３ ５
- ６８４ １
- ６２０
Magnet なし
5 tests＊3
￥33,000
DC-003TKNMAB
DC-003TKNMCC
DC-003TKNMCR
DC-003TKNMDS
品 名
試薬
［メーカー：ISV］
Dead-Cert Kit
Magnet あり
5 tests＊3
30 tests＊3
￥67,000
￥161,000
DC-003TKAB
DC-003AB
DC-003TKCC
DC-003CC
DC-003TKCR
DC-003CR
DC-003TKDS
DC-003DS
お問い合わせ先
10
16
未処理
Dead-Cert Antibody
Production Kit（#DC-003AB）
を用いて死細胞除去したハイブリ
ドーマと，未処理のものの IgM
産生量。本製品を使用した場合に
は細胞生存率および増殖率が向上
（日） し，より多くの IgM が産生され
ている。
本紙に掲載されている
製品はすべて研究用です
瀕死の細胞は近隣の生細胞に深刻な影響を与え，またセルベースアッ
セイにおける非特異的なノイズの原因となります。
例えばアポトーシスを起こした細胞は，単核食細胞を引き寄せるリゾ
ホスファチジルコリンやフラクタルカインを放出し，好中球などの多形
核白血球の遊走を阻害するラクトフェリンを放出します。またアポトー
シスを起こした細胞では，エンドヌクレアーゼ G が放出され，DNA お
よび RNA が速やかに分解されます。
さらに死細胞は，リボソームの構成物質や熱ショックタンパク質など
の様々な化学走化性因子を放出します。
6
＊ 3 1 回に処理する細胞数が 5 × 10 個の場合の，標準的な使用回数です。細胞数により試薬の使用量を調整できます。
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