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ヒストンペプチドアレイキャンペーン

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ヒストンペプチドアレイキャンペーン
〈研究用〉
アクティブ・モティフ社
ヒストンペプチドアレイキャンペーン
キャンペーン期間:2013年6月10日〜
8月30日受注分まで
MODified™ Histone Peptide Array
ヒストン修飾を簡便にスクリーニングできるペプチドアレイ
MODifiedTM Histone Peptide Array は,ヒストンやヒストン翻訳後修飾に対する相互作用に関して抗体,タンパク質,酵素をスクリーニング
するために使用できる有用な研究ツールです。各アレイは,デュプリケートで 384 通りの多様なヒストン修飾の組み合わせから構成されています。
修飾には,ヒストンH2A,H2B,H3,H4 の N 末端尾部のアセチル化,メチル化,リン酸化,シトルリン化が含まれます。
この独自のヒストンアレイには,ペプチド19merあたり最大4つの修飾が搭載されているため,個々の修飾についての研究だけでなく,近接
する修飾によって部位認識や結合が変化するかどうかも確認できます。アレイプロトコールは簡単で,ウエスタンブロットと同等の原理で実験
を行います。検出にはECLベースのシステムまたは比色システムのいずれかを使用できます。フィルムまたはCCDカメラで画像を取り込み,
無料のソフトウェアを用いて解析します(図 1)
。
40
A
Histone H3K9me3 pAb
35
Specificity factor
30
25
20
15
B
10
5
0
H
H
H
H
H
H
H
H
H
9m 3K27m 3R2m 3R8m 3R8m 3K4ac 3K4m 3K4m 3K4m 3R2m
e2a
e2
e3
e1
e3
e3 e2s e2a e2s
H3K
図 1:Histone H3K9me3 pAb の交差反応性の解析
MODified™ Histone Peptide Arrayおよび MODified™ Array Labeling Kitを用
いて,アクティブ・モティフ社の Histone H3K9me3 pAb(商品コード:39161)の交差
反応性を解析した。検出後,イメージをCCDカメラにより画像取込みを行い,アク
ティブ・モティフ社のアレイ解析ソフトウェアを用いて解析した。グラフの値は,全
てのスポットの平均強度をH3K9me3 以外のスポットの平均強度で除した比率を示
している。この抗体はHistone H3K9me3と高い特異性を有し,他の修飾とほとんど
交差反応性を示さないことがわかる。
ヒストン修飾アレイの利点
◆ヒストン特異的 ― 特定のヒストン修飾に対する独自のアレ
イにより解析します。
◆近隣修飾の影響 ― 各々のペプチドは最大4 種類のヒストン
修飾の組合せを有します。それにより近隣修飾の影響の解
析を可能にします。
C
図 2:G9a methyltransferase と MODified ™ Histone Peptide Array と
の反応
MODified™ Histone Peptide Array( 商 品 コ ー ド:13001)に A)25µM G9a
methyltransferase(商品コード:31327)
,
B)25µM G9a mutant H904K(商品コード:
31328)またはC)酵素コントロールなしを,1mM AdoMet 存在下でオーバーナイト反
応させた。アレイはHistone H3K9me2 抗体を用いて検出した。新しいメチル化部位
が野生型 G9a histone methyltransferase によって処理されたアレイ上で観察され
た。ペプチド基質上でこのヒストン修飾酵素が活性を示したことがわかる。
◆ウエスタンブロットのような検出方法 ― 迅速かつ簡便に
ECLまたは比色法で検出します。
MODifiedTM Histone Peptide Array の簡易ラベリングと化学発光検出に必要な試薬を含む,MODifiedTM Array Labeling Kit(別売)
を用意しています。さらに,MODifiedTM Histone Peptide Arrayと併用して,ヒストン修飾認識タンパク質ドメインとヒストン修飾間の
結合解析を行うことができる,MODifiedTM Protein Domain Binding Kitを発売しました。これらキットの詳細および無料のArray
Analyse Software のダウンロードについては,www.activemotif.jp/modified をご覧ください。
包 装
商品
コード
定価
(税別)
ヒストンペプチドアレイキャンペーン
1 array
13001
¥39,800
ヒストンペプチドアレイキャンペーン
5 arrays
13005
¥179,800 ➡ ¥143,800
5 rxns
13006
¥18,000
キャンペーン対象外
5 rxns
13007
¥28,000
キャンペーン対象外
製品名
MODified™ Histone Peptide Array
NEW
MODified™ Array Labeling Kit
MODified™ Protein Domain Binding Kit
アクティブ•モティフ株式会社
キャンペーン
価格(税別)
➡
¥31,800
〈研究用〉
アクティブ・モティフ社
ヒストン解析 定番製品のご紹介
Histone Purification Kit / Histone Purification Mini Kit
翻訳後修飾を保持した高純度コアヒストンタンパク質の単離
日本語版プロトコール配布中
e-mailでご請求ください
Histone Purification Kits の使用法
キット購入で
ソーラーライト
プレゼント中
(2013 年 8 月 30 日受付分まで)
※ご購入いただいた製品と一緒にお届けします。
アクティブ・モティフ社の Histone Purification Kit および Histone
Purification Mini Kitは,翻訳後修飾を保持したまま,培養細胞お
よび組織試料から簡単にコアヒストンを単離できます(図1)
。 高純
度のヒストン画分を単離するために,本キットではユニークな精製
用樹脂および独自の溶出バッファーを採用しています。標準的な酸
抽出法とは異なり,コアヒストンを1画分として単離するだけでなく,
さらにH2A/H2B 画分とH3/H4 画分に分けることができます(図 2)
。
さらにユニークな抽出バッファーにより不要な酵素反応を防ぎ,ヒ
ストンの翻訳後修飾を保存します。
Acetylation
図 2:Histone Purification Kit を用いて精製したコアヒストンの
SDS-PAGE 解析
Methylation
各レーンに10µg の試料を加え16%Tris-glycine ゲルで電気泳動を行った。
左図:対数増殖期の組織培養細胞(TC)およびラット脳組織(Brain)から単離したコ
アヒストン。
右図:HeLa 細胞から単離した ヒストンH2A/H2B(レーン1)およびヒストンH3/H4(レ
ーン 2)
Phosphorylation
図 1:翻訳後修飾の保持
酸抽出法で単離したヒストンおよび Histone Purification Kitで単離したヒストンの
比較。本キットで単離したヒストンは前者の方法で単離したヒストンと比較して,同
等またはそれ以上にヒストンのアセチル化,メチル化,リン酸化が保持されている。
ヒストン精製キットの利点
◆アセチル化,リン酸化,メチル化などのヒストン修飾を保持
できます。
キット
Histone
Purification
Kit
Histone
Purification
Mini Kit
フォーマット
2画分
0.5-2.5 mg
(H2A/H2B, H3/H4)
スピンカラム
1画分
0.5-2.5 mg
(H2A, H2B, H3, H4)
ミニスピン
カラム
1画分
0.1-0.5 mg
(H2A, H2B, H3, H4)
表 1: Histone Purification Kit の比較
製品名
◆ Histone Purification Mini Kitを用いれば,ヒトだけでなく
出芽酵母由来のヒストンを精製可能です。
Histone Purification Kit
Histone Purification Mini Kit
2
3
容量
重力流
◆精製したヒストンは1画分(H2A, H2B, H3 および H4)また
は2 画分(H2A/H2B および H3/H4)に単離できます。
1
溶出方法
包 装
商品コード
定価(税別)
10 rxns
40025
¥62,000
20 rxns
40026
¥62,000
資料をご用意しています。
1 クロマチンおよびヒストン修飾解析2013
2 Epigenetics Products & Services 2013(英語版)
3 Epigenetics Services (英語版)
ご希望の方は,
「希望するカタログ名」
・「氏名」
・
「所属」
・
「郵便番号」
・
「住所」を明記の上,電子メールにて [email protected] 宛
にご請求ください。
アクティブ•モティフ株式会社
www.activemotif.jp
〒 162-0824 東京都新宿区揚場町 2-21
Tel: 03-5225-3638 Fax: 03-5261-8733
e-mail: [email protected]
〈130601His〉
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