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リン酸化ペプチド 精製・濃縮ツール
リン酸化ペプチド精製・濃縮ツール リン酸化ペプチド 精製・濃縮ツール ◆高い選択性 ◆簡便な操作 ◆豊富なラインアップ Structures are created using Chemistry 4-D Draw which is provided by ChemInnovation Software, Inc. リン酸化ペプチド精製・濃縮ツールラインアップ 可逆的リン酸化を研究することは、多くの細胞調節を解明する上で重要な役割を果たしています。しかしタンパク質中の リン酸化ペプチドは、含有量が微量であり、イオン化効率が低いため、質量分析計では検出が困難となるケースがあり ます。そのため、リン酸化ペプチドのみを精製・濃縮することが必要となります。ジーエルサイエンスでは、リン酸化ペプ チドと特異的に吸着する二酸化チタンを用いた、精製・濃縮ツールを用意しています。 ® Titansphere TiO 充填剤 二酸化チタンを均一な多孔質球状粒子に合成したビーズです。リン酸化ペプチドを選択的に濃縮・精製できます。 品名 粒子径 Titansphere TiO Cat.No. 入数 価格 5 μm 500 mg 5020-75000 42,000_ 10 μm 500 mg 5020-75010 42,000_ ® Titansphere Phos-TiO 充填剤 Titansphere TiO充填剤よりもリン酸化ペプチドへの吸着能を高めたビーズです。 品名 粒子径 入数 Cat.No. Titansphere Phos-TiO Bulk 10 μm 500 mg 5010-21315 価格 58,000_ ® Titansphere Phos-TiO Kit (チップタイプ) 遠心操作により、簡便にリン酸化ペプチドの精製・濃縮ができるキットです。 品名 Titansphere Phos-TiO Kit セット内容 チップカラム 24本 Solution A, B, C 廃液用チューブ 回収用チューブ 取扱説明書 チップカラム 96本 Solution A, B, C 廃液用チューブ 回収用チューブ 取扱説明書 カラムサイズ Cat.No. 価格 1 mg/10 μL 5010-21300 20,000_ 3 mg/200 μL 5010-21305 20,000_ 1 mg/10 μL 5010-21301 72,000_ 3 mg/200 μL 5010-21306 72,000_ ® Titansphere Phos-TiO MP Kit (チップタイプ) 1リン酸化ペプチドと多重リン酸化ペプチドのフラクションを分けて回収するキットです。 リン酸化ペプチドの同定数向上が可能です。 品名 セット内容 Titansphere Phos-TiO MP Kit チップカラム 24本 Solution A, B, C, D 廃液用チューブ 回収用チューブ1, 2 取扱説明書 Titansphere Phos-TiO MP Kit (脱塩カラムセット) チップカラム 24本 Solution A, B, C, D 廃液用チューブ 回収用チューブ1, 2 MonoSpin L C18 GL-Tip SDB 取扱説明書 カラムサイズ Cat.No. 1 mg/200 μL 5010-21280 24,000_ 3 mg/200 μL 5010-21281 24,000_ 1 mg/200 μL 5010-21270 54,000_ 3 mg/200 μL 5010-21271 54,000_ 価格 ® Titansphere Phos-TiO (カートリッジタイプ) チップタイプより負荷量が大きくなったカートリッジカラムです。 品名 Titansphere Phos-TiO カラムサイズ 入数(包装単位) Cat.No. 価格 50 mg/3 mL 25本(1本) 5010-21290 80,000_ 100 mg/3 mL 25本(1本) 5010-21291 130,000_ アプリケーション ® ◆Titansphere TiOの精製効率 1,600 1,400 ペプチド同定数 1,200 1,000 800 非リン酸化 11.1 % リン酸化 サンプル量 : 50 μg 使用チタニア量 : 各1 mg 89.9 % 600 HeLa細胞抽出物を用いてTitansphere TiOの性能を 確認しました。 リン酸化ペプチドの同定数を比較すると、約89.9 %の 割合でリン酸化ペプチドが検出されました。 400 200 0 Titansphere TiO 他社チタニア ® ◆Titansphere TiOとIMAC法の性能比較 トータルピーク面積 (×106) 180 非リン酸化 リン酸化 150 120 約2.6倍 90 サンプル量 : 100 μg 使用チタニア量 : 1 mg 60 30 0 Titansphere TiO IMAC シロイヌナズナ細胞抽出物を用いて、市販IMACとの 比較を行ないました。 IMACと比較すると、Titansphere TiOの方がリン酸化 ペプチドのトータルピーク面積で約2.6倍、ペプチド同 定数では約1.8倍と、多くのリン酸化ペプチドが検出さ れました。 ペプチド同定数 製品名 リン酸化ペプチド 非リン酸化ペプチド Titansphere TiO 846 198 IMAC 474 379 ® ◆Titansphere Phos-TiOの性能 トータルピーク面積 (×108) 2.5 非リン酸化 リン酸化 2.0 1.5 サンプル量 : 50 μg 使用チタニア量 : 各1 mg 約2.6倍 1.0 0.5 0 Titansphere Phos-TiOをTitansphere TiOと比較しま した。 Titansphere Phos-TiOではリン酸化ペプチドのトータ ルピーク面積で約2.6倍と、多くのリン酸化ペプチドが 検出されました 。 Phos-TiO Kit Titansphere TiO ® ◆Titansphere Phos-TiO MP Kitの性能 使用方法 -改良HAMMOC法とSIMAC法*との リン酸化ペプチド同定数比較 - チップタイプ *: IMACカラムのフロースルーをTiO2カラムで再度精製を行うメソッドです。 サンプル : HeLa細胞抽出液100 μg 非リン酸化ペプチド Data from Wakabayashi et al. Ana Chem 2015, 87 多重リン酸化ペプチド カートリッジタイプ チップカラム 1リン酸化ペプチド カートリッジカラム ファルコンチューブ 遠心アダプター フラクション① フラクション② Total IMAC TiO2 Total 廃液用チューブ 【Titansphere Phos-TiO MP Kit使用】 Titansphere Phos-TiO MP Kitメソッドのフラクション①には、 1リン酸化ペプチドが多く含まれ、フラクション②では、多重リン 酸化ペプチドが多く検出されています。さらにTotalでSIMAC法 よりも多くの1リン酸化ペプチド、多重リン酸化ペプチドが検出さ れています。 遠心分離機で操作します。 関連製品ラインアップ ® Titansphere Phos-TiO Tip 品名 カラムサイズ 1 mg/10 μL 入数 Cat.No. 24本 5010-21302 18,000_ 96本 5010-21303 70,000_ 価格 24本 5010-21316 18,000_ 96本 5010-21317 70,000_ 24本 5010-21307 18,000_ 96本 5010-21308 70,000_ 品名 容量 Cat.No. Titansphere Phos-TiO 3 mL カートリッジ用 乳酸溶液 15 mL 5010-21295 Titansphere Phos-TiO Tip 1 mg/200 μL 3 mg/200 μL 乳酸 価格 3,000_ ® MonoSpin -脱塩用カラム- 品名 カラム容量 入数(個) Cat.No. 50 5010-21700 22,000_ 100 5010-21701 39,000_ 22,000_ 価格 MonoSpin C18 1 mL MonoSpin L C18 10 mL 30 7510-11320 品名 チップ容量 入数(本) Cat.No. GL-Tip SDB 200 μL 96 7820-11200 12,000_ GL-Tip GC 200 μL 96 7820-11201 32,000_ 仕様 入数(枚) Cat.No. 直径 47 mm、膜厚 0.5 mm 20 5010-30002 34,400_ 直径 90 mm、膜厚 0.5 mm 10 5010-30003 69,000_ GL-Tip -脱塩用チップ- 価格 EmporeTM Disk C8 品名 Empore Disk C8 価格 遠心アダプター 品名 入数(個) Cat.No. 遠心アダプター 24 5010-21514 6,700_ 1 5010-21341 12,000_ 2 5010-21343 23,000_ 96ウェルプレート対応遠心アダプター 価格 AA955-20160727PDF