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特集 組織染色 ＆ in situ ハイブリダイゼーション 組織染色 In situ ハイブリダイゼーション 組織アレイ 組織バーチャルスライド作製機器 79 M a r c h 2010 注目商品 シグナル伝達 Multiplex転写因子アッセイ 細胞培養・細胞工学 幹細胞機能同定キットシリーズ バイオメディカル 特定原材料由来タンパク質迅速検出キット FASTKIT™ スリム 汎 用 受託サービス 機 器 Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット CapiVate™ タンパク質相互作用LC-MS/MS解析受託サービス Gel Protein Recovery System GPR-800 組織染色 ＆ in situ ハイブリダイゼーション 組織染色・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 2 In situ ハイブリダイゼーション・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 7 組織アレイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 8 組織バーチャルスライド作製機器・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10 新商品&トピックス ■シグナル伝達■ Multiplex転写因子アッセイ ……………………………………………………………12 ■細胞培養・細胞工学■ 幹細胞機能同定キットシリーズ ………………………………………………………16 ■バイオメディカル■ 特定原材料由来タンパク質迅速検出キット FASTKIT™ スリム …………………18 ■汎用■ Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット………………………………………………18 ■受託サービス■ CapiVate™ タンパク質相互作用LC-MS/MS解析受託サービス ………………25 ■機器■ Gel Protein Recovery System GPR-800 ………………………………………26 汎用 Multiplex転写因子アッセイ……………………………………………………12 Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット ……………………………………18 Mito-ID™ 膜電位検出キット ……………………………………………………13 TurboFect™ タンパク質トランスフェクション試薬 ……………………19 iODN（inhibitory oligodeoxynucleotide）…………………………………13 OmicsLink™ Expression-Ready ORF cDNAクローン ………………20 DetectX™ シトクロムP450 脱メチル化蛍光活性測定キット ……………14 尿RNA/miRNA/DNA/タンパク質精製キット ……………………………21 sMAdCAM-1 ELISAキット …………………………………………………14 SERVA Blue Prepサンプル調製キット ……………………………………22 キナーゼ活性検出 セルベースELISA キット …………………………………15 RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システム ……………………………22 アレルギー関連試薬 ……………………………………………………………15 12-エピトープタグタンパク質マーカーライセート …………………………23 細胞培養・細胞工学 GelRed™ & GelGreen™ 核酸ゲル染色キット ……………………………24 幹細胞機能同定キットシリーズ ………………………………………………16 受託サービス ChromaLink™ ビオチン標識キット …………………………………………23 CytoSelect™ 悪性形質転換アッセイキット ………………………………17 Lympholyte® 免疫細胞濃縮キット …………………………………………17 CapiVate™ タンパク質相互作用LC-MS/MS解析受託サービス …………25 バイオメディカル 機器 特定原材料由来タンパク質迅速検出キット FASTKIT™ スリム …………18 Gel Protein Recovery System GPR-800………………………………26 研究室のホープ 27 肉食動物は栄養がかたよらないのか？ 特集 組織染色 ＆ in situ ハイブリダイゼーション 新規抗体商品のご案内 28 ライオンに代表される肉食動物。彼らは肉しか食べないが、栄養がかたよらない 組織染色 in situ ハイブリダイゼーション 組織アレイ 組織スライド作製機器 のだろうか――。つい、そんな心配をしがちだが、実際は問題ないという。ライオ 79 M a r c h 2010 2009年シグナル研究のハイライト 30 ンが狩りをするシーンを思い浮かべてもらいたい。シマウマ等の草食動物を追いか けているイメージが脳裏に浮かぶはずだ。そう、肉食動物が獲物とするのは、ほと んどの場合が草食動物。そして、獲物をしとめるとまず最初に消化器官を食べる。 お知らせコ−ナ− 33 草食動物の消化器官には消化中の植物が残っている。つまり、草食動物を捕食する ことで間接的に植物の栄養も摂取しているのである。いくら肉食動物といえども植 注目商品 シグナル伝達 xMAP® Multiplexアッセイ 細胞培養・細胞工学 幹細胞機能同定キットシリーズ バイオメディカル 食物アレルギー物質迅速検出キット FASTKITスリム 汎 用 受託サービス 機 器 Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット CapiVate™ 相互作用物質解析受託サービス 物の恵みなしには体を壊してしまう。実はこんな意外な方法で栄養を補っているの Gel Protein Recovery System GPR-800 だ。 組織染色 ＆ in situ ハイブリダイゼーション in situ 特集 ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 組織染色とは、生体組織や細胞の構造及び機能を抗体や蛍光 プローブ等を用いて可視化させることです。組織または細胞内 のターゲットとなる物質を可視化マーカーで標識し、顕微鏡下で 観察します。 シ グ ナ ル 伝 達 In situ ハイブリダイゼーション （ISH） では、検出対象がmRNA になります。組織内のターゲット分子の発現をmRNAレベルで検 出します。プローブには、ターゲット分子のmRNAと相補的なDNA またはRNAを用い、検出用に放射性物質やDIGを標識させます。 （Fluorescence また、in situ ハイブリダイゼーションには、FISH in situ hybridization）法とCISH（Chromogenic in situ hybridization）法などがあります。FISH法は、検出用に蛍光プ ローブを用いる方法です。CISH法は、ペルオキシダーゼやフォス 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ファターゼを使って異数体や染色体転座、遺伝子増幅の検出が可 能で、高価な蛍光顕微鏡を必要とせず、明視野顕微鏡で観察でき ます。 組織染色及びin situハイブリダイゼーションは、組織学や病理 学分野をはじめ、ライフサイエンス研究において欠かせない手法 の1つです。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 今回の特集では、多岐にわたる組織染色 ＆ in situハイブリダ イゼーション試薬の中から、コスモ・バイオがおすすめする商品 を下記のカテゴリに分けてご紹介致します。 汎 用 A 組織染色 ●シングル＆デュアル IHC染色キット ●免疫組織染色用（Ready-to-use） ウサギクローナル抗体 ●Polink-2 Plus検出システム ●Klear マウス-オン-マウス組織検出システム ●HISTAR 組織染色標識試薬 ●HistoGeenペルオキシダーゼ染色基質キット ●免疫組織染色用アクセサリーキット ●組織マーキングダイ Davidson Marking System® ●組織染色キット ●組織染色関連商品 受 託 サ ー ビ ス B In situ ハイブリダイゼーション ●CISH／FISH用プローブキット ●UltraSensitive® in situハイブリダイゼーション検出キット C 組織アレイ ●ヒト腫瘍組織マイクロアレイ ●パラフィン包埋組織アレイ／パネル ●FDA標準規格 ヒト凍結組織アレイ 機 器 D 組織バーチャルスライド作製機器 ●自動バーチャルスライド作製装置 Toco（トコ） Cosmo Bio News No.79 1 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 特集 組織染色＆in situ ハイブリダイゼーション A 組織染色 シングル＆デュアル IHC染色キット ウサギモノクローナル抗体の高い親和性と特異性を実感可能なオールインワン染色キット シ グ ナ ル 伝 達 エピトミクス社のIHC染色キットは、Ready-to-useの免疫染色シ 特 長 ステムで、組織サンプル中の特定のターゲット抗原の検出用に、エピ トミクス社のウサギモノクローナル一次抗体（RabMab®）と一緒に ●オールインワンの染色キットで、ウサギモノクローナル抗体の高い お使いいただけるようデザインされています。 親和性と特異性の利点を実感可能。 IHC染色キットは、RabMab ® と組み合わせて、新規のポリマー ●全てのキットで、ポリマーベースの二次抗体検出システムを使用。 ベースの二次抗体とウサギモノクローナル抗体の優れた抗原認識能 ●同じ組織切片上でモノクローナル抗体とのハイクオリティーな二 を一体化し、非ポリマーベースの二次抗体よりもはっきりした強いシ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 重染色も可能。 グナルが得られます。 二重IHC染色には、エピトミクス社のデュアル染色IHCキット（品 構成内容 番：4000-1）を用いて、Mouse Mabと適当なRabMab® を組み合 わせてください。 図1 （左）Ace™ IHC検出キット（品番：40021）を使って、ヒト乳癌でのHSP73染色。 （右）Tandem™ IHC染色キット（品番： 4 0 0 0 - 1 ）を 使 って 、膀 胱 癌 組 織 で の Cytokeratin8（Fast Red）＆Ki-67 （DAB）染色。 ●抗原賦活化溶液 ●ペルオキシダーゼブロック溶液 ●ブロッキング溶液 ●ネガティブコントロール用ウサギIgG ＊ ●抗ウサギ二次抗体（HRP） ●一次抗体希釈液 ＊ ●抗マウス二次抗体（ALP） ●DABまたはFast Redタブレット＊ ＊キットによって異なりますのでご注意ください。 EPITOMICS, INC. 品 名 Ace™ IHC Detection Kit Tandem™ IHC Staining Kit バ イ オ メ デ ィ カ ル ! 検出タイプ Single Polymer Detection（DAB、50スライド） Double Polymer Detection（Fast Red＆DAB、50スライド） 交差種 Human、Mouse、Rat Human、Mouse、Rat 品 番 4002-1 4000-1 包 装 1 kit 1 kit 略号EPT 貯 蔵 4 4 5 希望販売価格 ￥51,000 ￥86,000 エピトミクス社では、免疫染色でお使いいただける高い親和性と特異性のウサギモノクローナル抗体を豊富に取り揃えています。コスモ・バイオホームページ上の“カタログ請求”からエピトミクス社ウサギモノクローナル 抗体カタログ2009年秋号をご請求ください。 免疫組織染色用（Ready-to-use）ウサギクローナル抗体 独自のin vitroクローニング技術により、優れた特異性・感度を持つ抗体を提供します！ DBバイオテック社のウサギクローナル抗体は、独自に開発した 特 長 in vitroクローニング技術を用いて、ハイブリドーマを用いずに作製 汎 用 されたウサギ免疫グロブリン（IgG）のホモジニアスフラクションで、 ターゲットタンパク質のユニークな直線状エピトープ（4∼7アミノ ●非常に高い特異性、親和性、結合活性：一般的なモノクローナル抗 体は、抗原濃度＞50∼100naで検出しますが、ウサギクローナ 酸で構成される特異的なアミノ酸配列）を認識する単一特異性抗体 ル抗体は、5na以上で検出可能です。 です。抗体のエピトープは、抗原構造や制御された翻訳後修飾、タン ●ロット間で高い再現性が得られます。 パク質／タンパク質相互作用領域、タンパク質のフォールディング等 ●直鎖状のエピトープを認識する単一特異性抗体です。 を詳細に分析して設計されているので、非常に高い特異性、親和性、 ●染色が困難なターゲットに対する抗体を取り揃えています。 結合活性を持つことが特長です。 ●第三者機関により染色性を確認済みです。 受 託 サ ー ビ ス 図1 p53（品番：DB 026 RTU）ウサギクローナル抗体 ホルマリン固定及びパラフィン包埋したヒト大腸癌組織（4hm）をp53（品 番：DB 026 RTU） ウサギクローナル抗体で染色した。癌細胞のポジティ ブな核が免疫染色されている。 DB Biotech Spol. S. r. o. 抗体名 Actin Bcl-2 C-erb-2（Her-2/neu） CD1a CD3 CD5 CD10 clone I CD10 clone II CD20 CD45 機 器 ! 2 略号DBB 品 番 DB 001-IHC- RTU DB 064-RTU DB 094-RTU DB 071-RTU DB 082-RTU DB 027 RTU DB 030 RTU DB 057-RTU DB 041 RTU DB 042 RTU 希望販売価格 ￥27,000 ￥27,000 ￥30,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥27,000 DB Biotech Spol. S. r. o. 抗体名 略号DBB 品 番 CD117 DB 062-RTU CD163 DB 045 RTU CD205（RCC, DEC 205）clone I DB 043 RTU CD205（RCC, DEC 205）clone II DB 044 RTU CD227（Mucin RTU, EMA） DB 048 RTU cyclin D1 DB 066-RTU Cytokeratin 7 DB 051 RTU ER （Estrogen Receptor） DB 053 RTU Kappa Light Chain clone I DB 037 RTU Kappa Light Chain clone II DB 038 RTU 希望販売価格 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥27,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥30,000 上記商品は、全て種由来：Human、交差種：Human、包装：7F、貯蔵：4℃です。 また、上記商品の他にも高品質ウサギクローナル抗体を豊富に取り揃えております。詳細はコスモ・バイオ（欄外参照）までお問い合わせください。 Cosmo Bio News No.79 DB Biotech Spol. S. r. o. 抗体名 略号DBB 品 番 Ki-67 DB 070-RTU Lambda Light Chain clone I DB 039 RTU Lambda Light Chain clone II DB 040 RTU Melan A DB 050 RTU Melanosome DB 049 RTU p53 DB 026 RTU Placental Alkaline Phosphatase DB 047 RTU PR（Progesterone receptor） DB 059-RTU Anti S-100 DB 055 RTU Anti TTF-1 clone II DB 089-RTU Anti TTF-1 clone III DB 090-RTU 希望販売価格 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥30,000 ￥27,000 ￥46,000 ￥30,000 ￥46,000 ￥46,000 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン Polink-2 Plus検出システム 高感度な新しい2ステップポリマー検出システム 従来の2ステップポリマーHRP、AP検出システムは、ポリマー検出 特 長 システムでは最も感度が良いものとされています。ゴールデンブ リッジインターナショナル社の新しいPolink-2 Plus検出システムは、 従来のシステムを改良した超高感度ポリマーシステムで、バックグラ ウンドは、目立って増加することなく、2∼4倍も強い染色パフォーマ ●多様なフォーマットに対応：広範囲抗体、及び特異性の高い各種単 一種抗体のシリーズがあります。 ●特にウサギ用シリーズは他社のキットに比べ、ウサギモノクローナ シ グ ナ ル 伝 達 ル抗体を含むウサギ一次抗体のシグナルを強化します！ ンスを示します。 ■従来の2ステップポリマー検出システムとの比較 従来の2ステップポリマー シグナル強化に抗体へ架橋 剤を使用 マウス抗体にとても感度が 良いがウサギ抗体では悪い テクノロジー 感度 一次抗体 インキュベーション時間 Polink-2 Plusポリマー シグナル強化に新結合シス テムを使用 マウス、ウサギ、ヤギ、ラッ ト抗体を低濃度使用する際 は従来の2ステップポリマー よりも2∼4倍高感度 マウス及びウサギを検出す 多様なフォーマットに最適 る広範囲抗体には適してい 【広範囲抗体】 マウス及びウサギ るが単一種抗体については 【単一種抗体】 不適 マウス、ウサギ、ヤギ、 ラット特異的抗体（マウス に交差しない） 、 マウス特異的抗体（ラット に交差しない） 10分+10分 20分+30分 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 図1 Polink-2 Plus検出シリーズを使用した染色図 Golden Bridge International, Inc 検出システム HRP/ACE HRP/DAB AP ! 品 名 Polink-2 Plus HRP Broad with AEC Kit（AEC付き） Polink-2 Plus HRP Broad with DAB Kit（DAB付き） Polink-2 Plus AP Broad Kit 一次抗体 HRP x Mouse and Rabbit 吸収済み血清タンパク Human 色 素 AEC Mouse and Rabbit Human DAB Rabbit & Mouse Human ＊ 品 番 D42-6 D42-15 D41-6※ D41-15※ D68-6 D68-15 包 装 6 F（60スライド） 15 F（150スライド） 6 F（60スライド） 15 F（150スライド） 6 F（60スライド） 15 F（150スライド） 希望販売価格 ￥31,000 ￥55,000 ￥31,000 ￥55,000 ￥19,000 ￥36,000 バ イ オ メ デ ィ カ ル 略号GBI 貯 蔵 4 4 4 4 4 4 上記商品の他にも、マウス用、ウサギ用等の単品種商品やPolink-2 Plus技術を使用した二重染色キットをご用意しています。また、発色剤（＊）は別途ご用意ください。詳細は、コスモ・バイオホームページ上の“サイト内 検索”をご利用ください。 （キーワード：Polink-2）※サンプルをご用意しています。詳細は、コスモ・バイオホームページ上の“サンプル配布”をご覧ください。 Klear マウス-オン-マウス組織検出システム 汎 用 独自のポリマー技術でマウス組織における高感度な染色を可能にしました Klear マウス-オン-マウス組織検出システムは、マウス組織上でマ 特 長 ウスモノクローナル抗体を用いた免疫組織染色にご利用いただけま す。本システムでは、Polink-2 Plus技術により低バックグラウン ド・高感度な検出を可能にしました。また、使いやすい滴下ボトルに ●マウス組織におけるマウスモノクローナル抗体を用いた染色に使 用します。 入っており、二次抗体の組織免疫グロブリンとの反応を防ぐブロック ●高感度：クリアなバックグラウンドで非常に感度が良好です。 試薬が含まれています。ご使用の目的に応じて、APシステムでは ●ビオチンフリー：ビオチンのブロッキングの必要がないシステムです。 Fast RedまたはAP Red+、HRPシステムではDABまたはAECを ●迅速：35分でブロッキング （従来は1時間以上） 。 選択することができます。 構成内容 ●マウスブロッキング試薬A&B 受 託 サ ー ビ ス ●各種標識ポリマー ●マウスモノクローナル抗体エンハンサー ●発色剤 ●基質バッファー Golden Bridge International, Inc 検出システム ALP/Fast Red ALP/AP-Red+ HRP/DAB HRP/AEC ! 品 名 Klear Mouse on Mouse AP Fast Red kit Klear Mouse on Mouse AP AP-Red+ kit Klear Mouse on Mouse HRP DAB kit Klear Mouse on Mouse HRP AEC kit 品 番 D50-7 D51-7 D52-7 D53-7 包 装 1 kit（7 F；70スライド分） 1 kit（7 F；70スライド分） 1 kit（7 F；70スライド分） 1 kit（7 F；70スライド分） 希望販売価格 ￥48,000 ￥45,000 ￥42,000 ￥42,000 略号GBI 貯 蔵 4 4 4 4 機 器 上記商品には、サイズ違いもございます。詳細は、コスモ・バイオホームページ上の“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：Klear） お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 3 特集 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 組織染色＆in situ ハイブリダイゼーション HISTAR 組織染色標識試薬 HRPポリマー標識二次抗体でより高感度な検出が可能に！ AbD社のHISTAR検出システムキットは、二次抗体にHRP重合ポ シ グ ナ ル 伝 達 リマーを結合させることで免疫組織染色の特異性を特に増すように デザインされています。また、ABC（アビジン-ビオチン複合体）試薬 のような、使用直前に調製する必要のある安定性の短いものとは異 なり、 化学的に安定で、 Ready-to-useです。 HISTARは、今までにないポリマー技術を利用した超高感度間接 標識法です。ポリマーはアビジンもビオチンも含まないため、乳腺や 脂肪組織、腎臓のような組織で認められる内因性ビオチンとは反応 しません。結果としてHISTARでは感度が増し、ABC法キットよりも 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バックグラウンドがとても低く抑えられます。 また発色試薬としてAEC（3-Amino-9-ethylcarbazole）を使用す ることもできます。発色試薬以外の標識試薬やブロッキングバッファー は希釈済みです。 使用目的 マウスやラット、ウサギ等の一次抗体（キットに含まれません）を使 用して、ヒトの組織切片の細胞抗原を染色するための標識試薬です。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 品 名／構成内容 HISTAR Detection System ※ ●ブロッキング試薬（0.03% H2O2） ●血清ブロック ●スペシャルブロック ●ポリマーリンク （HRP）二次抗体 ※ ●発色試薬（0.25％ 3,3-Diaminobenzidine、0.1％ H2O2 Tris HCl Buffer） ※印の試薬はSTAR3000B及びSTAR3000Cには含まれません。 ! 図1 HISTAR検出システムでは、 （二次抗体に共有結合する恐れのある）デキストランのような高分子量の要素を 含まない、特別なポリマー技術を用いています。高密度の酵素によって、一般的なキットを用いる場合よりも、 一次抗体に認識される特異的タンパク質の染色性が高まります。 品 番 STAR3000A STAR3000B＊ STAR3000C＊ 包 装 50 test 150 test 500 test AbD 略号SRT 希望販売価格 ￥65,700 ￥115,200 ￥171,300 貯 蔵 4 4 4 ＊印の商品は、過酸化水素ブロッキング試薬と発色試薬とが別売となります。推奨品は、コスモ・バイオホームページ上の“HISTAR検出システム”商品ページの関連商品をご覧ください。 HistoGeenペルオキシダーゼ染色基質キット DABより高感度かつ特異的な“緑色”の発色基質 DAB染色との多重染色可能！二重染色に最適 汎 用 HistoGreenは、ペルオキシダーゼベースの免疫組織染色と in situ ハイブリダイゼーションで用いる高感度の基質です。シングル またはマルチ染色に適しています。本キットには、必要な試薬が全て 含まれています。 特 長 受 託 サ ー ビ ス ●高感度かつ特異的 図1 CD68をHistoGreenで染色 ABCシステム との二重染色 Pan-Cytokeratin（NovaRed™） 、 CD68（HistoGreen染色） 。 図2 胎児子宮のパラフィン切片を三重染色 CD34（DAB染色）、HLA-DR（HistGreen染色）、 Pan-Cytokeratin（VIP Vector染色）で免疫染色し た。 図3 子宮内膜の凍結切片のABC染色 Pan-Cytokeratin（HistoGreen染色） 、ヘマトキシ リンで対比染色。 図4 リンパ節のパラフィン切片を4重染色 CD20（HistoGreen染色） 、CD34（Vector SG染 色） 、HLA-DR（DAB Vector染色） 、CD8（Vector VIP）染色。 ●微細構造の鮮明化 ●HistoNuclear、FastRedと非常に鮮明な対比染色可能。 ●毒性や発癌性はありません。 ●他のHRP基質と併せて、二重または多重染色できます。 品 名／構成内容 Histo Green, Substrate kit for peroxidase 機 器 ●HistoGreen Chromogen ※全て滴下ボトル入り 4 ●HistoGreen バッファー ●過酸化水素水 ●希釈用ワーキングソリューション Cosmo Bio News No.79 品 番 E109M E109 包 装 1 kit（約60切片分） 1 kit（約1,000切片分） AbCys SA 略号AYS 希望販売価格 ￥10,000 ￥42,000 貯 蔵 4 4 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 免疫組織染色用アクセサリーキット 抗体以外の免疫組織染色用試薬が全て含まれています ベッチル社の免疫組織染色用アクセサリーキットは、免疫組織染色 特 長 シ グ ナ ル 伝 達 に必要な（一次抗体以外の）試薬が250回分含まれています。便利な 滴下ボトルに調製済みの試薬が入っており、ワーキングソリューショ ●2ステップ検出システム ン調製用に滴下ボトルが添付されています。本キットは、ウサギの一 ●時間を短縮 次抗体を用いたホルマリン固定パラフィン包埋組織用に設計されて ●特異的かつ高感度 います。 ●内因性ビオチンをブロックする必要はありません 本キットに含まれるウサギ抗IHC抗体は、従来用いられてきたビオ チン-ストレプトアビジンやビオチン-アビジン検出システムに比べて 構成内容 高感度かつ特異性の高い結果が得られます。 また、ウサギ抗IHC抗体を用いれば、ビオチン標識した二次抗体を ●IHCブロッキング試薬 ●IHC抗体希釈用試薬 用いた時のストレプトアビジンやアビジン-HRPのステップが必要あ ●ウサギ抗IHC標識抗体 ●洗浄液 りません。本キットのシステムではビオチンを用いないので、内因性 ●DAB試薬（A・B・C） ●IHCヘマトキシリン ビオチンをブロックする必要がありません。 ●IHCブルーイング試薬 ●エピトープ回復バッファー Bethyl Laboratories, Inc. 品 名 Immunohistochemistry Accessory Kit（For primary antibodies made in Rabbit） 品 番 IHC-101 包 装 1 kit（250回分） 希望販売価格 ￥87,000 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 略号BET 貯 蔵 4 組織マーキングダイ Davidson Marking System® バ イ オ メ デ ィ カ ル 組織標本の作製に便利なマーキングダイ 使用目的 青 緑 Davidson Marking System® は、凍結及び新鮮な組織の組織断 端を判定するのに便利なマーキングダイです。現在では、ホルマリン 固定された組織でも使用できることが確認されています。緑、黄、黒、 赤、青、オレンジ、紫の7種類の色で、それぞれマーキングすること ができます｡ 汎 用 赤 図1 黄 Davidson Marking System® を用いた染色例 Bradley Products, Inc. 品 名／内 容 Davidson Marking System（7-Color） 品 番 2407 ●組織表面上に7種類の色（緑、黄、黒、赤、青、オレンジ、紫） をつけることができます。トレイ付き。 2406 Davidson Marking System（6-Color） ●組織表面上に6種類の色（緑、黄、黒、赤、青、オレンジ） をつけることができます。トレイ付き。 Davidson Marking System（Original 5-Color） 2401 ●組織表面上に5種類の色（緑、黄、黒、赤、青） を付けることができます。トレイ付き。 2403 Davidson Marking System （3-Dye） ●お好きな色を7色（緑、黄、黒、赤、青、オレンジ、紫）の中から3色選んでいただきます。申込書はコスモ・バイオホーム ページ上の“書類ダウンロード”をご利用ください。トレイ付き。 6601 The Davidson Small Specimen Kit ●小さな組織標本用のマーキングダイです。組織表面上に3種類の色（緑、赤、青） をつけることができます。トレイ付き。 ! 受 託 サ ー ビ ス 略号BRP 包 装 1 kit （2 oz bottle） 1 kit （2 oz bottle） 1 kit （2 oz bottle） 1 kit （2 oz bottle） 希望販売価格 ￥62,000 貯 蔵 3 ￥49,000 3 ￥42,000 3 ￥30,000 3 1 kit （1 oz bottle） ￥22,000 3 機 器 上記商品以外にも各色1ボトルでの取り扱いもございます。詳細はコスモ・バイオホームページ上“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：マーキングダイ） お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 5 組織染色＆in situ ハイブリダイゼーション 特集 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 組織染色キット ターゲット別のパラフィン包埋組織染色キットを豊富に取り揃えました 図1 ヒト脾臓組織をA.F.Bキット（品番：KT 001）を用いて染色した。結核菌 が染色されている。 シ グ ナ ル 伝 達 Diagnostic BioSystems 品 名 A.F.P. Alucian Blue, pH 1.0 Alucian Blue, pH 2.5 C.E.M. Colloidal Iron Congo Red Copper Dieterle's 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 Elastic FITE Fontana-Masson G.M.S. Giemsa Gram McDonald's HELICO STAT ! バ イ オ メ デ ィ カ ル 染色対象／染色時間 結核菌／10分間 硫酸性粘液物質 硫酸性粘液物質 好酸球、マスト細胞 酸性粘液物質／10分間 アミロイド堆積物 銅 スピロヘータ、レジオネラ、ドノバン小体、 ヘリコバクター／30分間 弾性繊維 ハンセン菌、抗酸菌 銀親和細胞、メラニン 糸状菌、ニューモシスティス・カリニ／ 17分間 骨髄、ヘリコバクター・ピロリ グラム陽性菌、グラム陰性菌／5分間 ヘリコバクター・ピロリ／25分間 図2 ヒト結腸組織をAlcian Blue, pH 2.5キット（品番：KT003）を用いて染 色した。mucinが染色されている。 略号DBS 品 番 希望販売価格 KT 001 ￥51,000 KT 002 ￥83,000 KT 003 ￥80,000 KT 004 ￥61,000 KT 007 ￥59,000 KT 008 ￥58,000 KT 033 ￥71,000 KT 010 ￥71,000 KT 012 KT 013 KT 014 KT 015 ￥59,000 ￥56,000 ￥67,000 ￥66,000 KT 016 KT 018 KT 019 ￥67,000 ￥66,000 ￥95,000 Diagnostic BioSystems 品 名 Hepatitis B Iron Luxol Fast Blue Methyl Green Pyronin Mucicarmine Oil Red O P.T.A.H. Periodic Acid Schiff's Stain Pneumocystis Reticulum Chandler's Steiner Sudan Black B Trichome Masson's Von Kossa Warthin-Starry 染色対象／染色時間 B型肝炎ウイルスS抗原 鉄イオン 髄鞘、ニッスル物質 RNA、DNA 上皮性ムチン／10分間 中性脂肪 筋肉、フィブリン グリコーゲン、ムチン ニューモシスチス・カリニ 網状組織繊維 スピロヘータ、レジオネラ （キャット スクラッチ）ヘリコバクター 脂肪顆粒 コラーゲン、筋肉 カルシウム キャットスクラッチ熱／10分間、 ヘリコバクター、レジオネラ 略号DBS 品 番 希望販売価格 KT 020 ￥83,000 KT 021 ￥56,000 KT 022 ￥84,000 KT 023 ￥34,000 KT 024 ￥60,000 KT 025 ￥58,000 KT 029 ￥72,000 KT 027 ￥58,000 KT 030 ￥52,000 KT 031 ￥72,000 KT 035 ￥67,000 KT 032 KT 034 KT 028 KT 036 ￥83,000 ￥68,000 ￥66,000 ￥71,000 上記商品は、全て包装100 test、貯蔵温度は室温です。 組織染色関連商品 各種組織染色に便利なツールを取り揃えています！ 【多目的インキュベーションチャンバー】 免疫染色に適したインキュベーションチャンバーです。透明なアク 庫及びフラン器等 （-20∼＋45℃） リル板を使用していますのでいつでも内部が観察できます。ダークオ で使用可能です。 レンジ、クールグレイの2色をご用意しております。ダークオレンジで ご注意：オートクレーブはかけられ は紫外線の透過が抑えられるため、蛍光抗体法に適しています。保冷 汎 用 【スーパーパップペン リキッドブロッカー】 ●免疫染色（PAP法、ABC法等）や蛍光抗体法の必需品です。 受 託 サ ー ビ ス 図1 多目的インキュ ベーションチャンバー ません！ ●優れた撥水性：作られたサークルはアル ●スライドガラスへ確実に密着し、安心して染色作業が行えます。 コール、アセトンに難溶性で、キシロー ●耐熱性：120℃ ルに溶解します。 図2 スーパーパ ップペン リキッド ブロッカー 【蛍光・酵素抗体標本洗浄機（スライドウォッシャーシステム） 】 ●蛍光・酵素抗体法のスライド標本作製用の洗浄装置。 ●サンプルに適した洗浄速度と洗浄時間を設定できます。 効率がさらに上がります。 ●スライドウォッシャー（品番：SW-4） 、スライドス ●標準タイプで最高4染色バットまで使用することができます。 ターラー（品番：SS-4）は、個々に洗浄機として ●ウォッシングシステムとしてSW-4とSS-4を組み合わせると洗浄 使用することも可能です。 図3 SW-4とSS-4の 組み合わせ 使用目的 湿潤箱 撥水ペン 機 器 スライド標本洗浄機 6 品 名 インキュベーションチャンバー20枚用ダークオレンジ （345x195x48 mm） インキュベーションチャンバー20枚用クールグレイ （345x195x48 mm） インキュベーションチャンバー10枚用ダークオレンジ （195x172x98 mm） インキュベーションチャンバー10枚用クールグレイ （195x172x98 mm） スーパーパップペン リキッド ブロッカー・ミニ スーパーパップペン リキッド ブロッカー スライドウォッシャー 専用4連スターラー Cosmo Bio News No.79 メーカー KMB KMB KMB KMB DAI DAI JFL JFL 品 番 20DO 20CG 10DO 10CG PAP-S-M PAP-S SW-4 SS-4 包 装 1 box 1 box 1 box 1 box 1 pc 1 pc 1 unit 1 unit 希望販売価格 ￥15,000 ￥15,000 ￥10,000 ￥10,000 ￥2,700 ￥4,600 ￥53,000 ￥42,000 貯 蔵 3 3 3 3 3 3 3 3 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 in situ B ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン In situ ハイブリダイゼーション CISH／FISH用プローブキット In situ ハイブリダイゼーションのエキスパートがお届けするFISH/CISH用プローブキット シ グ ナ ル 伝 達 【CISH用プローブ ZytoDot ® シリーズ】 光学顕微鏡で目的の遺伝子とセントロメアを同時に検出できます！ ZytoDot ® シリーズは、Chromogenic in situ hybridization （CISH） 法により、遺伝子増幅や染色体異常を検出するシステムです。 図1 ZytoDot ® 2Cシステムの原理 Zyto Dot ® 2Cシステムは、異なるゲノム 部分をターゲットとするジゴキシゲニン及 びDNP標識カクテルプローブを用いる （①） 。ブロッキング（②）後に、マウス抗ジ ゴキシゲニン／ウサギ抗DNP抗体カクテ ルにより検出（③）。これらの抗体はHRP 標識ヤギ抗マウス抗体（④） とAP標識ヤギ 抗ウサギ抗体（⑤）により検出。AP-Red （⑥）とHRP-Green（⑦）の酵素的反応に より引き起こされる強いシグナルによっ て光学顕微鏡（40倍）で観察可能。 ホルマリン固定、パラフィン包埋組織や細胞、血液、骨髄の塗抹標本、 分裂中期の染色体分布の検出にご利用いただけます。 特 長 ●免疫染色よりも迅速かつ簡単に解析できます。 ●組織の形態変化とCISHのシグナルを同時に観察できます。 ●CISHシグナルは非常に安定で、標本を常温保存できます。 ●シグナルが強く、高価な顕微鏡は必要ありません。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●ZytoDot ® 2Cシリーズの利点 ・2種類のターゲットを同時検出。 ・高コントラストで、シグナルの違いが明確。 ・40×で視覚化可能。 図2 ZytoDot ® 2C SPEC HER2/CEN17 プローブキットを用いてHER2遺伝子の増幅を検出 （A）一つの核周辺に緑（HER2）及び赤色（CEN17）のドット型シグナルが各2つの場合は増幅していないが、 増幅すると （B）のように、また強く増幅すると （C）ように観察される。 ■ZytoDot ® 2Cシリーズの商品 品 名 ZytoDot ® 2C SPEC HER2/CEN 17 Probe Kit ZytoDot ® 2C SPEC EGFR/CEN 7 Probe Kit ! 品 番 C-3022-10 C-3031-10 包 装 10 test 10 test ZytoVision GmbH 略号ZYV 希望販売価格 ￥97,000 ￥97,000 貯 蔵 4 5 4 5 上記商品には、サイズ違い商品があります。また、ZytoDot ® シリーズでは、CENプローブやSPECプローブ単品もご用意しています。 詳細は、コスモ・バイオホームページ上の“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：ZytoDot） 【CISH用プローブ ZytoFast ® シリーズ】 特 長 バ イ オ メ デ ィ カ ル 【FISH用プローブ ZytoLight ® シリーズ】 特 長 ●非常に迅速なCISH反応：ZytoFast® システムの最適化されたプ ロトコールと短いオリゴヌクレオチドプローブの迅速な組織透過性 により、ZytoFast® CISH手順は非常に早く終了します。1色検出 は4時間以内、操作時間は約2時間です。 ●Fluorescence in situ hybridization（FISH）法により転座や欠 損、増幅、染色体異常等を検出するためのシステムです。 汎 用 ●高い選択性と特異性：ZytoLight ® Direct Label System IIを使 用して直接標識したプローブで、これによりシグナル強度が改良さ ●高い感度と特異性：ZytoFast ® プローブは、全て独自のZytoFast ® れ て い ま す。Z y t o L i g h t ® の 単 一 プ ロ ーブ（ S P E C ）は 全 て HighTag systemを使用して標識されたプローブで、シグナル強 ZytoLight ® Repeat Subtraction Techniqueにより加工され 度が改良されています。最適化されたオリゴヌクレオチドプローブ ており、特異性の向上や低バックグラウンドを得ることができます。 により、クロスハイブリダイゼーションのリスクがない高い特異性 繰り返し配列をさらにブロッキングする必要はありません。 を示します。 受 託 サ ー ビ ス 図1 ZytoFast® システムはビオチンあるいはジゴキシゲニンで標識 したオリゴヌクレオチドプローブを用いて（①） 、ビオチンあるいは ジゴキシゲニンに特異的な酵素結合させた抗体で検出する（②）。 発色基質（BCIP/NBTあるいはAEC）と酵素が反応し（③）、強い 色素沈殿を形成。これを光学顕微鏡で観察。 図1 ZytoLight® システムを使用したパラフィン包埋組織片のFISH解析と分裂中期の拡散 （A）乳房組織切片のHER2遺伝子を増幅させて検出。 （B）胞巣状横紋筋肉腫におけるt（2；13）転座を検出。 それぞれ赤色、緑色で検出し、重なり合ったシグナルは黄色を示している。 （ C）CEN X/Y Dual Color Probeを用いた正常男性組織の分裂中期の拡散の検出。 【CISH用プローブ ZytoFast® シリーズ】及び【FISH用プローブ ZytoLight® シリーズ】でも各種遺伝子や染色体をターゲットとした プローブを多数取り揃えています。商品の詳細は、コスモ・バイオホームページ上の商品情報（http://www.cosmobio.co.jp/product/ raku/C04140000.asp）をご覧ください。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 機 器 7 特集 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 組織染色＆in situ ハイブリダイゼーション UltraSensitive® in situ ハイブリダイゼーション検出キット 高感度なin situ ハイブリダイゼーション検出システム UltraSensitive® in situ 検出システムは、固定した細胞や組織の シ グ ナ ル 伝 達 構成内容 in situ ハイブリダイゼーションで、ビオチン標識した核酸プローブ を超高感度に検出できます。抗ビオチン抗体により、シグナルを増感 ●ウサギ抗ビオチン抗体 ●ビオチン標識ヤギ抗ウサギIgG抗体 します。 ●発色基質 ●検出タイプ別標識ストレプトアビジン ●バッファー類 Enzo Life Sciences, Inc. 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 品 名 Ultra Sensitive® Enhanced HRP-AEC Ultra Sensitive® Enhanced HRP-DAB Ultra Sensitive® Enhanced Fluorescent-Streptavidin Ultra Sensitive® Enhanced Alk.Phos-NBT/BCIP C 検出タイプ HRP-AEC HRP-DAB 蛍光標識ストレプトアビジン ALP-NBT/BCIP 品 番 32300 32400 32500 32700 包 装 1 kit（20スライド） 1 kit（20スライド） 1 kit（20スライド） 1 kit（20スライド） 略号ENZ 希望販売価格 ￥28,000 ￥28,000 ￥38,000 ￥28,000 貯 蔵 4 5 4 5 4 4 組織アレイ ヒト腫瘍組織マイクロアレイ 癌の診断や治療に関連した分子マーカーの迅速な解析が可能 バ イ オ メ デ ィ カ ル USバイオマックス社の組織マイクロアレイは、正常組織、悪性腫 特 長 瘍及び転移組織等を1枚のスライドに配置しています。組織マイクロ アレイは、癌の診断、治療に関連した新しい分子マーカー等の潜在 ●免疫組織染色、in situハイブリダイゼーションに適しています。 的なターゲットを迅速に検証することが可能です。 ●パラフィン包埋切片＊1 ●切片の厚さ：4∼5μm＊2 ●スポット直径：0.6∼2mm＊2 ＊1 品番：FMC401のみ凍結切片組織アレイ ＊2 商品によって異なります。 ※ 5∼10％のスポットが欠損している可能性があります。 図1 乳癌組織アレイのスポットの一例 乳 癌 と リ ン パ 節 癌 転 移 組 織 ア レ イ（ 品 番： BR1001）のスポット例。 H＆E染色。 現在、1,240種の組織アレイがラインアップされています。 詳細は、USバイオマックス社ホームページをご参照ください （http：//www.biomax.us） 。 US BIOMAX, INC. 汎 用 項 目 前立腺 品 名 染色対象 症例数 20 Prostate cancer, adjacent normal tissue and normal tissue array 前立腺癌、隣接する正常組織、 及び正常組織；TNM分類データ付き 50 胸部 Breast cancer with matched metastatic lymph nodes tissue array 乳癌とリンパ節癌転移組織 75 乳癌中密度組織；AR/ER/PR/ Breast cancer mid-density tissue array Her-2/P53/EGFR/Ki67免疫組織染色 結果データ付き 206 Breast disease spectrum（breast cancer progression）tissue array 乳房疾患スペクトラム（乳癌進行）組織 12 浸潤性乳管癌組織 Breast infiltrating ductal carcinoma tissue array 高密度乳癌組織；各ステージ、グレード、 322 High-density breast cancer tissue array 及び正常乳房組織を含む 24 大腸 Colon moderately differentiated adenocarcinoma and adjacent 中分化型結腸腺癌組織アレイ normal tissue array 44 Colorectal cancer with matched lymph node metastasis tissue array 結腸直腸癌とリンパ節転移組織 24 消化器 消化器癌組織 GI cancer tissue microarray 48 消化器癌組織 GI cancer tissue microarray 6 腎臓 腎臓癌組織 Kidney cancer test tissue array 10 脳 多発性脳腫瘍組織 Multiple brain cancer tissue array 78 脳腫瘍組織 Brain tumor tissue array 192 肺 高密度肺癌組織 Lung cancer high-density tissue array 12 非小細胞性肺癌（NSCLC）組織 Multiple Lung cancer test tissue array 40 Lung cancer with matched lymph node metastasis tissue array 肺癌とリンパ節癌転移組織アレイ 40 マルチプル Retinoblastoma, nephroblastoma, neuroblastoma and leukemia 網膜芽腫、腎芽腫、神経芽腫、及び 白血病組織 tissue array 20 多臓器癌凍結組織 多臓器 Multiple tumor and corresponding normal FROZEN tissue（14 types）array High density multiple organ cancer and normal tissue array（H&E） 高密度多臓器癌と正常組織；ステージ、 495 グレード情報付き 42 リンパ 非ホジキンリンパ腫組織 Non-Hodgkin's lymphoma tissue array 受 託 サ ー ビ ス 機 器 ! 8 スポット数 品 番 72 BC19021 包 装 1 slide 略号BMX 希望販売価格 貯 蔵 ￥38,000 3 100 150 BR1001 BR1502 1 slide 1 slide ￥38,000 ￥40,000 3 3 208 48 616 BR2082 BR481 BR6161 1 slide 1 slide 1 slide ￥70,000 ￥19,000 ￥121,000 3 3 72 CO724 1 slide ￥32,000 3 99 48 96 24 24 80 200 24 80 80 CO991 GI481 GI961 KD241 GL241 GL803 LC2001 LC242 LC810 MC803 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide 1 slide ￥38,000 ￥19,000 ￥32,000 ￥7,000 ￥7,000 ￥38,000 ￥60,000 ￥7,000 ￥32,000 ￥46,000 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 40 FMC401 1 slide ￥101,000 6 500 MC5001 1 slide ￥101,000 3 80 NHL801 1 slide ￥32,000 3 上記の商品ほぼ全てにHE染色スライドまたはトライアルスライドがあります。詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン パラフィン包埋組織アレイ／パネル 新規遺伝子やタンパク質発現のハイスループット解析に最適！ 組織は、摘出後すぐにホルマリン固定し、病理学的な同定を行って 特 長 シ グ ナ ル 伝 達 います。64∼96種類の異なる組織が、改良型スライドガラス上に配 置されています。組織は約5hm厚です。品質確認のために、β-アク ●免疫組織染色、in situ ハイブリダイゼーションに適しています。 チン抗体及びp53プローブを用いてH.E.染色、免疫染色、in situ ハ ●Ready-to-useで高品質の組織アレイです。 イブリダイゼーションを行っています。 ●RI及び非RI検出のどちらにも適しています。 ●異なるアレイとの比較用に、コントロールとしてヒト胎盤組織が各 アレイに含まれています。 ■ヒト腫瘍組織アレイ 異種腫瘍タイプTeHAT-A-DD 品 名 Human Tumors Array （66 spots/40tumors+12 tumor/ adjacent normalpairs） Human Tumors Array （66 spots/40tumors+12 tumor/ adjacent normalpairs） Breast Tumor Tissue Array BIOCHAIN INSTITUTE INC. 詳 細 スポット数 66 卵巣、膀胱、胸、腎臓、子宮、肺の腫瘍組織。卵巣は腫瘍組織5+ 腫瘍／正常組織ペア2。その他は腫瘍組織7+腫瘍／正常組織 ペア2。 ポジティブ／ネガティブコントロール付き 66 腎臓、結腸、食道、肝臓、直腸、胃の腫瘍組織。腎臓は腫瘍組織 5+腫瘍／正常組織ペア2。その他は腫瘍組織7+腫瘍／正常組 織ペア2。 ポジティブ／ネガティブコントロール付き。 66 乳腺腫瘍組織64+ポジティブ／ネガティブコントロール Colon Tumor Tissue Array 結腸腫瘍組織64+ポジティブ／ネガティブコントロール 66 Rectum Tumor Tissue Array 直腸腫瘍組織64+ポジティブ／ネガティブコントロール 66 Lung Tumor Tissue Array 肺腫瘍組織64+ポジティブ／ネガティブコントロール 66 略号BCH 品 番 T8235714D-2 T8235714D-5 包 装 2 slide 5 slide 希望販売価格 ￥48,200 ￥98,800 貯 蔵 3 3 T8235715D-2 T8235715D-5 2 slide 5 slide ￥48,200 ￥98,800 3 3 T8235721-2 T8235721-5 T8235722-2 T8235722-5 T8235723-2 T8235723-5 T8235724-2 T8235724-5 2 slide 5 slide 2 slide 5 slide 2 slide 5 slide 2 slide 5 slide ￥48,200 ￥98,800 ￥48,200 ￥98,800 ￥48,200 ￥98,800 ￥48,200 ￥98,800 3 3 3 3 3 3 3 3 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル ■ヒト多種器官組織パネル TeHAN 各スライドには、 器官系でまとめられた8種類の異なるヒト （成人） 正常組織切片がアレイされています。 BIOCHAIN INSTITUTE INC. 品 名 Multi-tissue IV Multi-tissue V Multi-tissue VI Multi-tissue VII Multi-tissue VIII Multi-tissue IX Multi-tissue X ! 器 官 神経系 心血管系 泌尿器＆呼吸器系 消化器系 生殖器系 内分泌系 免疫＆血液系 詳 細 延髄、脳梁、脊髄、末梢神経、大脳皮質、中脳、小脳、脳橋 動脈、静脈、心室中隔、心膜、心房、心室、僧帽弁、三尖弁 咽頭、気管、気管支、肺胞、腎臓、尿管、膀胱、前立腺 肝臓、胆嚢、膵臓、耳下腺、食道、胃、小腸、結腸 睾丸、副睾丸、精管、精嚢、卵巣、ファロピウス管、子宮、膣 副腎、膵臓、睾丸、卵巣、視床、肝臓、甲状腺、胸腺 虫垂、肝臓、腎臓、胸骨、リンパ節、扁桃腺、胸腺、脾臓 品 番 T8234601 T8234602 T8234603 T8234604 T8234605 T8234606 T8234607 包 装 5 slide 5 slide 5 slide 5 slide 5 slide 5 slide 5 slide 希望販売価格 ￥37,200 ￥37,200 ￥37,200 ￥37,200 ￥37,200 ￥37,200 ￥37,200 略号BCH 貯 蔵 3 3 3 3 3 3 3 バイオチェーン社では、上記商品の他に、様々なヒト腫瘍組織アレイやマウス／ラット組織アレイを取り揃えています。 詳細は、コスモ・バイオホームページ上の商品情報（http://www.cosmobio.co.jp/product/raku/00750004.asp）をご覧ください。 汎 用 FDA標準規格 ヒト凍結組織アレイ 治療／診断研究における抗体の検証に最適！30器官×3ドナーの凍結組織アレイ 包埋してあります。厚さは5∼8hmで、ガラススライド上にマウント 特 長 されています。免疫組織染色及び in situ ハイブリダイゼーションの ●FDAガイドラインに準じて、30種類の異なるヒト（成人）の正常器 官が2枚のスライドにセットされており、抗体のバリデーションを どちらにもお使いいただけます。RNAやタンパク質発現の細胞内局 在の迅速な解析にも有用です。 受 託 サ ー ビ ス スピードアップできます。 ●1器官につき3人のドナーから供給されています。 ●発現パターン、強度及びターゲットタンパク質の分布情報を得るこ とができます。 使用目的 図1 スライドのスポット例 スライド1の初めの3スポットは、 3人のドナーからの副腎組織。 1枚のスライドには、45のスポットがあり、それぞれ異なる組織 （ドナー）由来です。組織は、切除後すぐに液体窒素で凍結し、OCTで BIOCHAIN INSTITUTE INC. 品 名／内 容 略号BCH FDA Standard Frozen Tissue Array 品 番 T6234701-1 包 装 2 slide 希望販売価格 ￥219,800 ●スライド1：副腎、大脳 、下垂体、胸部、結腸、食道、心臓、肝臓、肺、骨格筋、中皮、末梢神経、坐骨神経、三叉神経、卵巣 ●スライド2：膵臓、胎盤、前立腺、唾液腺、皮膚、小腸、胃、睾丸、胸腺、甲状腺、扁桃腺、子宮、子宮頸部、脊髄 貯 蔵 6 T6234701-2 4 slide ￥395,800 6 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 機 器 9 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 特集 組織染色＆in situ ハイブリダイゼーション D 組織バーチャルスライド作製機器 自動バーチャルスライド作製装置 Toco（トコ） バーチャルスライドがより身近に！高性能CCDカメラ搭載機が新登場 シ グ ナ ル 伝 達 特 長 ●標本をステージにセットしてスタートボタンを押すだけの簡単操作 です。 ●お求めやすい価格。 ●場所をとらないコンパクト設計。 ●高性能CCDカメラ搭載機が新登場（品番：TC001BM3EC）。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 オートフォーカス精度を重視するエリアカメラ方式機での撮影時 間は、これまで2.5分以上が標準的でしたが、カメラそのものから の見直しをすることにより、エリアカメラ方式で1分台の数値を実 現しました。 ●4穴電動レボルバーの採用で、パソコン操作でレンズが選択できま 図1 マルチレイヤー機能 断層撮影したバーチャルスライ ドをマウス操作によってビュー ワー上で切り替え表示。 す （20x、 40x他） 。 ●スライドラックローダー（最大80枚まで）や、マルチレイヤー機能 （図1） 、フォーカス合成機能（図2）等 のオプションもご用意しております。 ●データベースでは、バーチャルスラ バ イ オ メ デ ィ カ ル イドと共に標本の患者情報や診断情 報、また顕微鏡以外の画像も保存で きますので、患者ID等から一発検索 し、診断書類と画像の照合が簡単に できます。 図2 フォーカス合成機能 厚みのある標本を断層撮影し、ピントの合った部分だけを1枚に合成。顕微鏡では見ることのできない全て にピントのあった新しいバーチャルスライドワールドを体験可能。データ容量は通常のバーチャルスライドと ほぼ同様で、サーバーへの負荷がない。 ■仕様 汎 用 受 託 サ ー ビ ス 対象プレパラート 撮影可能範囲 貼り合わせ枚数 撮影時間 撮影性能 76（Ｗ）x26（D）x2.0（T）mm 70 mm x 26 mm 制限なし 10 mm x 10 mm=1分台（対物レンズ20倍使用時） 外形寸法 重量 プレパラート装填枚数 プレパラート固定方法 レンズ選択 照明 対物レンズ Cマウント 停止精度 （X/Y/Z) ピクセルサイズ 使用環境 撮影装置本体 540（W）x370（D）x520（H）mm 40 kg 1枚 プレパラート側面固定方式 4穴電動レボルバー 自社製フラットLED光学系 カールツァイス製 EC-Plan 20倍、40倍（各1） カールツァイス製 0.63倍 ±3 Hm / ±1 Hm / ±0.25 Hm 0.25 Hm/pix（対物レンズ40倍使用時） 10℃∼45℃ （結露なきこと） 株式会社クラーロ 品 名 Toco 自動バーチャルスライド作製装置（専用ソフト 「i-Viewer」1ライセンス込み） ! 品 番 TC001BM3EC 包 装 1 unit 略号CRO 希望販売価格 ￥7,150,000 システムのカスタマイズやネットワーク工事費・設置調整費につきましては別途お見積もりとなりますので、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 オプション スライドローダー／マルチレイヤー機能／フォーカス合成機能 機 器 オプションについての詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照 会ください。 10 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp FAX.03-5632-9619 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 新 商 品 ＆ トピックス コスモ・バイオが取り扱う数多くの商品の中から、ユニークで画期的な 新商品と今後の注目商品を選りすぐり、ご紹介します。 シグナル伝達 P12 今号の新商品＆トピックスの中から注目商品をご紹介します。 ●「Multiplex転写因子アッセイ」 オリジンテクノロジーズ社 ルミネックスアッセイシステムを使用した転写因子アッセイです。複数の細胞経 細胞培養・ 細胞工学 P16 路を同時にスクリーニングできます。 ●「幹細胞機能同定キットシリーズ」 R&Dシステムズ社 神経幹細胞または間葉系幹細胞の機能同定に有用！分化誘導及び増殖に有用 なサプリメントと各種幹細胞特異的な抗体がセットになっています。 ●「特定原材料由来タンパク質迅速検出キット FASTKIT™ スリム」 日本ハム株式会社 バイオ メディカル 偽陽性を示す食品を排除して、リニューアルしました！ 卵、牛乳、小麦、そば等 の食物アレルギー物質を迅速に検出できます。 P18 ●「Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット」 フィンザイム社 サンプルはキット中のHarris Uni-Core™ で切り取り、PCR容液に加えるだけ！ 汎 用 様々な動物組織からダイレクトにDNAを増幅できます。 ●「CapiVate™ タンパク質相互作用LC-MS/MS解析受託サービス」 P18 デュアルシステムズ社 哺乳動物細胞から直接得られた未変性のターゲットタンパク質に結合するタン パク質をLC-MS/MS解析する受託サービスです。 受託 サ ービス ●「Gel Protein Recovery System GPR-800」 プロテアバイオサイエンス社 8タンパク質、20分間、1台でポリアクリルアミドゲルから同時回収できます！ P25 機 器 最少で100ngのタンパク質を効率よく抽出できます。 誌面スペースの都合上、ご紹介できなかった新商品もたくさんあります。コーヒー ブレイクにぜひ、コスモ・バイオホームページ“商品の最新情報”欄をご覧くださ P26 い。 Cosmo Bio News No.79 11 N ew Products Topics & Multiplex転写因子アッセイ NEW ルミネックスxMAP® テクノロジーを利用した転写因子アッセイのプロファイリング in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 細胞質シグナルにおける遺伝子発現の調節は、転写因子のDNAへ 測定原理 の結合を解析することで明らかにされます。オリジンテクノロジーズ 社の核抽出プロトコールでは、細胞内で生じている現在進行形の結 シ グ ナ ル 伝 達 1．核抽出物（5b）とビオチン標識DNAプローブ（各転写因子結合 配列）を混合します。 転写因子複合体は、DNAプローブの二本鎖 合反応をスナップショットを撮るように得ることができます。一方、 領域上のプローブ特異的認識配列に結合します。 RNAやタンパク質発現のマイクロアレイデータは、その変化が生物 学的反応に一因しているため、再現性がありません。転写因子複合 2．混合液を消化試薬（二本鎖DNAヌクレアーゼ）とインキュベーショ 体のDNAの結合活性を測定することによって、その時にキーとなる ンし、転写因子に結合しなかった未反応のプローブを分解・除去し ます （転写複合体と結合したプローブは消化反応から守られます） 。 転写因子調節を特定することが可能となります。 この転写因子解析は、細胞質シグナル伝達と遺伝子発現解析の架 3．プ ロ ー ブ は 、プ ロ ー ブ 上 の 一 本 鎖 の キ ャプ チ ャ ー 配 列 と け橋となります。上流・下流の遺伝子転写を調節するエフェクターを Luminex® ビーズ表面に結合した相補配列とのハイブリダイゼー ションにより、ビーズの表面上でキャプチャーされます。 ダイレクトに測定し、細胞内シグナル伝達のバイオマーカーとしての 機能を果たします。また、遺伝子発現プロファイルに関係する多くの 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 4．ストレプトアビジン-PEを混合液に加え、ビオチン標識DNAプロー ブに結合したストレプトアビジン-PEの蛍光量をLuminex® システ 変化の同定を促進します。 ムで測定します。 使用目的 本アッセイシステムは、核抽出液中に存在する20種類までの転写 因子をルミネックスxMAP® テクノロジーを利用して同時に定量でき ます。親和性と特異性を持つDNA結合プローブと転写因子との複合 体を測定し、3時間以内に96サンプルまでを解析できます。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 特 長 ●迅速：3時間以内にデータが得られます。 ●様々な細胞内パスウェイを同時進行でスクリーニングが可能です。 図1 転写因子アッセイの原理 ●未知の疾患や薬物代謝研究に最適です。 ●従来のEMSA、ELISAまたはレポーター遺伝子アッセイのような 転写因子解析に比べ、少量のサンプルで多くの情報が得られます。 図2 急性肺損傷（ALI）モデ ルにおける結合活性の経時的 変化 毎年、急性肺損傷（ALI）の患 者は16万人もいるが、有効 な治療はない。マイクロアレ イによって根本的な病気のメ カニズムが究明されたが、コ ント ロ ー ル と 処 理 細 胞 で 約 2,000もの差異が生じてし まった。この転写因子プロフ ァイリングによって病気の原 因となるいくつかの転写因子 が明らかになった。 ●様々なサンプルや種に有効：ヒト、サル、げっ歯動物の組織細胞や 初代細胞、細胞株で検証済みです。 ●試験サービス（品番：AM100086,50plex）も行っております。 詳細は、コスモ・バイオ 受託サービス担当までご照会ください （E-mail：[email protected]） 。 汎 用 ※解析には、Luminex® が別途必要になります。 ■Multiplex転写因子プロファイリングキット Origene Technologies, Inc 品 名 Multiplex Transcription Factor Profiling Kit（20-plex） 転写因子結合部位 AP-1, AP2, AR, CRE-ATF, CREB, E2F1-5, E2F6, EGR, GATA, HNF1, HNF4, ISRE, Myc-Max, NF-1, NFkB, p53, PPAR, SMAD 2/3, SP1, YY1 マルチプレックスアッセイに必要な共通試薬のセット Multiplex Transcription Factor Profiling Kit 受 託 サ ー ビ ス ■結合部位特異的試薬 品 名 CRE-ATF AP-1 NFkB AR CREB YY1 E2F1-5 ! 転写因子結合部位 CRE-ATF AP-1 NFkB AR CREB YY1 E2F1-5 包 装 96 test 希望販売価格 ￥508,000 貯 蔵 5 AM100054 96 test ￥42,000 5 Origene Technologies, Inc 品 番 AM100055 AM100056 AM100057 AM100058 AM100059 AM100060 AM100061 品 名 E2F6 SP1 Myc-Max EGR ISRE p53 GATA 転写因子結合部位 E2F6 SP1 Myc-Max EGR ISRE p53 GATA 品 番 AM100062 AM100063 AM100064 AM100065 AM100066 AM100067 AM100068 略号ORG 品 番 AM100053 品 名 AP2 SMAD 2/3 HNF1 HNF4 NF-1 PPAR 転写因子結合部位 AP2 SMAD 2/3 HNF1 HNF4 NF-1 PPAR 略号ORG 品 番 AM100069 AM100070 AM100071 AM100072 AM100073 AM100074 上記商品は、全て包装 96test、希望販売価格 ￥46,000、貯蔵 -20℃です。 関連商品 Origene Technologies, Inc 品 名 機 器 Nuclear Extraction Kit Whole Cell Extraction Reagent Protein Control（NF-1/NFkB） 12 Cosmo Bio News No.79 品 番 PM100001 PM100005 PM100003 包 装 100 rxn 100 rxn 20 F 希望販売価格 ￥24,000 ￥24,000 ￥15,000 略号ORG 貯 蔵 4 6 4 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 Mito-ID™ 膜電位検出キット ミトコンドリア膜電位をその電位状態によって、緑またはオレンジ 特 長 の蛍光を発するMito-ID™ 試薬で測定するキットです。励起された 細胞内で、試薬は緑色蛍光単体としてサイトゾルに、またミトコンド ●超高感度なミトコンドリア膜電位プローブで、電位低下によりオレ リア内に蓄積されオレンジ色の蛍光凝集体として存在します。 しかし、 電位低下が起こった細胞では、緑色蛍光単体としてサイトゾルには存 in situ ミトコンドリアの膜電位をJC-1より高感度に検出！ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン ンジ（590nm）から緑（525nm）に移行。 ●従来法のカルボシアニンダイのJC-1より少なくとも10倍膜感受 在しますが、オレンジ色の蛍光は示さなくなります。一般的に使用さ 性が高い。 れているJC-1と比べてミトコンドリア膜電位変化による感受性、溶 ●JC-1より使いやすく、光安定性と溶解性が高い。 解度、光安定性に優れます。また、キットに含まれているcyanide ●非特異的産物を除去、制御し、生産物を厳密に管理できる。 シ グ ナ ル 伝 達 m-chlorophenylhydrazone（CCCP）は、ミトコンドリアの動態変化 観察を可能にします。 ●癌、 アポトーシス研究 Orange Signal (RFU) 使用目的 ●死細胞の判定 （品番：51018-K100） ●臨床前の薬剤安全評価（ADME-Tox） ●化合物の鑑別試験、作用強度の順位付け 3,000 JC-1 Kit 2,500 Enzo Mito-ID™ Membrane Potential Cytotoxicity Kit 2,000 1,500 1,000 500 図1 HeLa細胞のミトコンドリアをMito-ID™ 膜電位検出試薬で染色し、落射蛍光顕微 鏡で可視化した。オレンジ色の蛍光凝集 体はミトコンドリアに局在（オレンジチャ ンネル）。全ての緑色蛍光単体は主にサ イトゾルに存在する （FITCチャンネル） 。 0 0.1 1 10 100 CCCP concentration(HM) 図2 一般的な蛍光マイクロプレートリー ダーを用いて測定した。ミトコンド リ ア 膜 電 位 は 、オ レ ン ジ 蛍 光 の CCCP濃度の減少として示された。 Mito-ID™ 膜電位検出試薬は、ミト コンドリア膜電位損傷をJC-1より 少なくとも10倍の感度で測定可能 だった。高いZ-factor（≥0.9）の Mito-ID™ 膜電位キットは、優れた シグナル／ノイズとシグナル／バッ クグラウンド比を示す。 Enzo Life Sciences, Inc. 品 名／構成内容 Mito-ID™ Membrane Potential Detection Kit Mito-ID™ Membrane Potential Cytotoxicity Kit（マイクロプレートフォーマット） ●Mito-ID™ 膜電位検出試薬 ●CCCPコントロール ●10xアッセイバッファー1 NEW 略号ENZ 品 番 51018-K100 包 装 1 kit （100回分） 希望販売価格 ￥69,000 貯 蔵 6 51019-KP002 1 kit （2x96 well分） ￥36,000 6 ●Mito-ID™ 膜電位検出試薬 ●ネクローシス検出試薬 ●CCCPコントロール ●10xアッセイバッファー1 ●50xアッセイバッファー2 ●50xアッセイバッファー2 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル iODN（inhibitory oligodeoxynucleotide） 強力なTLR9シグナリングインヒビター Toll-like receptor 9（TLR9）はウイルスDNAやバクテリアDNA の非メチル化CpGモチーフを認識します。TLR9を介したシグナリ ングは短い合成オリゴデオキシヌクレオチド（ODN）により高効率に 行われます。このODNにはCpGモチーフが含まれており、強いワク チンアジュバンドやTh2アレルギー応答のインヒビターとして有望 です。 インヒビターの種類 ●Class I：TLR9特異的競合剤（G-stretch ODN） 。iODNの中に はTLR7やTLR8シグナリングにも影響するものがあります。 ●Class II：テロメア反復付きのODN。STATシグナリングのTLR 非依存性インヒビター。 一方、inhibitory oligodeoxynucleotide（iODN）はTTAGGG マルチマーからなり、TLR9シグナリングを低下させます。いくつか の研究グループで、阻害性DNAモチーフによるTLR9抑制のキネテ ィクス、シグナリングパスウェイ、特異性、配列要求性が研究されて きました。この研究により、従来の種選択性とは関係ない新しい iODNの分類がなされました。 ●Class III：配列非依存性のDNA取り込みインヒビター。 ●Class IV：S化（phosphorothioate）ODN。配列非依存性TLR9 シグナリングのダイレクトな競合剤。 【参考文献】 ・Immunotherapeutic utility of stimulatory and suppressive oligodeoxynucleotides： K. J. Ishii, et al.； Curr. Opin. Mol. Ther. 6, 166（2004） ・Inhibitory oligodeoxynucleotides-therapeutic promise for systemic autoimmune diseases?：P. Lenert； Clin. Exp. Immunol. 140, 1（2005） ・DNA motifs suppressing TLR9 responses：A. Trieu； Crit. Rev. Immunol. 26, 527（2006） Enzo Life Sciences, Inc. 品 名／配 列 iODN（ttaggg）4（class II） 品 番 746-251-T050 包 装 50 test 希望販売価格 ￥27,000 貯 蔵 4 746-250-T050 50 test ￥27,000 4 5'-tttagggttagggttagggttaggg-3' iODN 2088（class I） 略号ALX 品 番 包 装 希望販売価格 746-254-C100 100 B ￥29,000 貯 蔵 4 746-255-C100 100 B ￥29,000 4 Neutral -ODN（Control for iODN） ） 746-256-C100 100 B ￥29,000 4 Dual -iODN（class I） 5'-tgctcctggaggggttgt-3' 746-252-C100 100 B ￥29,000 4 5'-ctcctattggggtttcctat-3' Core -iODN（class I） 品 名／配 列 Super -iODN（class I/II hybrid） 5'-tcctgcaggttaagt-3' 746-253-C100 100 B ￥29,000 4 5'-tcctggagggg-3' ! 受 託 サ ー ビ ス 5'-cctcaatagggtgagggg-3' 5'-tcctggcggggaagt-3' G-type -iODN（class I） 汎 用 機 器 上記商品は、全て合成品、エンドトキシンフリーです。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 13 N ew Products & Topics DetectX™ シトクロムP450 脱メチル化蛍光活性測定キット NEW 薬物代謝に関わるP450の活性を蛍光測定。肝臓ミクロソームで実証済み in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン DetectX™ シトクロムP450 脱メチル化蛍光活性測定キットは シトクロムP450のようなホルムアルデヒド産出酵素の活性を定量 アプリケーション例 的に測定する商品です。蛍光基質はシトクロムP450多成分反応（図 シ グ ナ ル 伝 達 1）に関与しませんが、脱メチル反応産物のホルムアルデヒドを測定 します。単離や洗浄は必要ありません。本キットはシトクロムP450 システム用に検証済みの商品で、脱メチル反応産物であるホルムア ルデヒドを産出するシステムにも使えます。 特 長 ●蛍光アッセイ：波長510nm ●ハイスループット対応 ●シトクロムP450の3A4、2B4、2D6サブファミリーで実証済み 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 構成内容 ●最適化されたシトクロムP450バッファー ●コファクター ●ホルムアルデヒド検出試薬（FDR） ●96ウェルプレート ●ホルムアルデヒド標準品 ●酢酸停止液 H H O H R O FeIII S 7 FeIII 1 S バ イ オ メ デ ィ カ ル RH FeIII e- S H2O 2 2e-,2H+ H2O2 O Fe IV + 6 oxidase 5b H+ S shunt S H2O 3 FeII H+ autoxidation peroxide shunt shunt (1-) OH O 5a FeIII FeIII H+ S (1-) O O (2-) O FeIII O S 図1 O2 4 S e- シトクロムP450触媒サイクル Arbor Assays, LLC（Former Luminos LLC.） 品 名 DetectX™ P450 Demethylating Fluorescent Activity kit 品 番 K011-F1 包 装 1 kit（2 plate） 希望販売価格 ￥53,000 略号LUM 貯 蔵 4 汎 用 NEW sMAdCAM-1 ELISAキット ヒト血漿、尿、母乳サンプル中の粘膜アドレシン細胞接着分子定量キット 炎症性大腸炎（特にクローン病等）での腸粘膜固有層上のsoluble MAdCAM-1の測定が可能 受 託 サ ー ビ ス Mucosal Addressin Cell Adhesion Molecule-1 （MAdCAM-1）は、∼60 kDaのIgスーパーファミリーの細胞表面タ 構成内容 ンパク質です。MAdCAM-1は、腸管関連リンパ組織（パイエル板） ●プレコーティング マイクロタイターストリップ の高内皮静脈（HEV）の表面で選択的に発現しています。主にT細胞、 ●洗浄バッファー ●標準液 B細胞、単球、マクロファージの血管内皮への接着を促進し、リンパ ●TMB基質 ●ストレプトアビジン-ペルオキシダーゼ 球が腸に戻るために重要です。MAdCAM-1は炎症性大腸炎（IBD） 、 ●反応停止液 ●ビオチン標識トレーサー 特にクローン病の腸粘膜固有層において亢進されます。 ●フレーム ●データ収集シート ●接着カバー ●マニュアル MAdCAM-1は炎症性疾患、感染性疾患、悪性疾患によって上昇す るため、これらの疾患のバイオマーカーとして有用です。 機 器 Hycult Biotech 品 名 sMAdCAM-1 ELISA Kit 14 検出範囲 0.4∼100 nA/F Cosmo Bio News No.79 適用サンプル Human：血漿、尿、母乳、体液 サンプル量 血漿：25 E/test 品 番 HK337 包 装 2x96 test 希望販売価格 ￥188,000 略号HCB 貯 蔵 4 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 TOPICS 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 キナーゼ活性検出 セルベースELISA キット R&Dシステムズ社のセルベースELISA キットは、同じマイクロプ in situ ターゲットタンパク質のリン酸化を相対的に検出 特 長 レートウェルで2つのタンパク質を同時に検出することができるキッ トです（図1） 。培養細胞をプレート上で固定してアッセイするので、 ●2種類の蛍光で検出（450nm及び600nm） ライセート調製が不要です。 ●特別な機器は必要ありません！ キナーゼシグナリングやキナーゼインヒビター活性を簡単に検証 シ グ ナ ル 伝 達 ●細胞ライセートの調製は不要 ●10,000細胞/ウェルから検出可能 することができます。 構成内容 ●リン酸化特異的一次抗体 ●トータルタンパク質一次抗体 ●HRP-標識二次抗体 ●AP標識二次抗体 ●HRP特異的基質F1 ●AP特異的基質F2 ●洗浄バッファー ●プレートシーラー 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●96ウェルプレート 図1 アッセイ原理 R&D Systems Inc. 測定項目 （リン酸化部位） Akt（Ser473） CREB（Ser133） EGF Receptor（Tyr1068） ErbB2（Tyr1196） ErbB3（Tyr1262） ERK1/ERK2（Thr202/Tyr204） FRS2（Tyr436） GSK-3 α/β（Ser21/S9） HGF R/c-MET（Tyr1234/Tyr1235） HSP27（Ser78/Ser82） p38 MAP Kinase（Thr180/Tyr182） ! 交差種 HU/MS/Rat HU/MS/Rat HU HU HU HU/MS/Rat HU/MS/Rat HU/MS HU HU/MS HU/MS R&D Systems Inc. 略号RSD 品 番 希望販売価格 KCB887 ￥94,000 KCB2510 ￥95,000 KCB1095 ￥94,000 KCB4438 ￥95,000 KCB5677 ￥95,000 KCB1018 ￥83,000 KCB5126 ￥95,000 KCB1590 ￥95,000 KCB2480 ￥94,000 KCB2314 ￥95,000 KCB869 ￥94,000 測定項目 （リン酸化部位） p70 S6 Kinase（Thr389） PDGF Receptor β（Tyr1021） PDGF Receptor β（Tyr751） PDGF Receptor（Tyr1021） STAT2（Tyr689） STAT3（Tyr705） STAT4（Tyr693） STAT5（Tyr699） STAT6（Tyr641） Tie-2（Tyr992） 交差種 HU/MS MS HU HU HU HU/MS HU HU/MS HU/MS HU 略号RSD 品 番 希望販売価格 KCB8963 ￥94,000 KCB1042 ￥95,000 KCB1767 ￥94,000 KCB2316 ￥94,000 KCB2890 ￥95,000 KCB4607 ￥95,000 KCB4319 ￥95,000 KCB4190 ￥94,000 KCB3717 ￥94,000 KCB2720 ￥95,000 バ イ オ メ デ ィ カ ル HU：Human、MS：Mouse、1 kitは96プレート1枚分、貯蔵は全て4℃です。上記商品は、全てリン酸化抗体と非リン酸化抗体がセットになっています。 また、上記商品以外にもセルベースELISAキットを取り揃えています。 詳細は、 コスモ・バイオホームページ上の“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：セルベースELISA） TOPICS ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン アレルギー関連試薬 各種アレルギー研究に有用な試薬、抗原及び抗体 ■試薬 品 名／内 容 アラム（水酸化アルミニウムゲル） 株式会社エル・エス・エル 略号LSL 品 番 LG-6000 包 装 1 vial 希望販売価格 ￥30,000 貯 蔵 5 LG-6101 2 vial ￥30,000 5 LG-6202 2 vial ￥30,000 5 LG-7000 1 vial ￥40,000 4 LG-8000 1 vial ￥40,000 4 LG-8333 1 vial ￥40,000 6 LG-8444 1 vial ￥40,000 6 LG-8555 1 vial ￥40,000 6 LG-5289 1A ￥50,000 5 水酸化アルミニウム［AI（OH）3・xH2O］ゲル OA動物実験用注射剤 Ovalbumin,chicken egg EB動物実験用注射剤 Evans Blue 百日咳死菌懸濁液 Pseudomonas pertucinogena （Bordetella pertussis） 結核菌死菌懸濁液 Mycobacterium bovis ダニーDf Dermatophagoides farinae ダニーDp Dermatophagoides pteronyssinus ダニーTp Tyrophagus putrescentiae スギ花粉原体 Cryptomeria japonica Pollen ■抗体 品 名 Anti DNP-アスカリス Anti TNP-アスカリス Anti ダニ抽出物 Anti Cry j-1 Anti Cry j-2 株式会社エル・エス・エル 品 番 LB-9009 LB-8109 LB-5199 LB-5201 LB-5202 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 包 装 100 E 100 E 100 E 100 E 100 E 略号LSL 希望販売価格 ￥40,000 ￥40,000 ￥30,000 ￥40,000 ￥40,000 FAX.03-5632-9619 貯 蔵 6 6 6 6 6 ■抗原 品 名 DNP-アスカリス DNP-カゼイン DNP-BSA DNP-BSA（30） DNP-LG（β-Lactoglobulin） DNP-OA（Ovalbumin） DNP-KLH DNP-スギ花粉-Cj DNP-ダニ-Df DNP-ダニ-Dp BPO-BSA BPO-BGG TNP-アスカリス TNP-BSA アスカリス抽出物 スギ花粉抽出物-Cj スギ花粉抽出物-Ja ダニ抽出物-Df ダニ抽出物-Dp ダニ抽出物-Tp ヒノキ花粉抽出物 ブタクサ抽出物 ヨモギ抽出物 ! 株式会社エル・エス・エル 品 番 LG-0009 LG-0047 LG-0017 LG-3017 LG-0067 LG-0024 LG-0089 LG-0528 LG-0533 LG-0544 LG-0317 LG-0577 LG-1109 LG-1117 LG-5009 LG-5280 LG-5229 LG-5339 LG-5449 LG-5559 LG-5779 LG-5889 LG-5999 汎 用 略号LSL 包 装 希望販売価格 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（30 C） ￥30,000 1 vial（30 C） ￥40,000 1 vial（20 C） ￥40,000 1 vial（30 C） ￥30,000 1 vial（30 C） ￥40,000 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（2 C） ￥50,000 1 vial（5 C） ￥40,000 1 vial（5 C） ￥40,000 1 vial（30 C） ￥40,000 1 vial（20 C） ￥40,000 1 vial（5 C） ￥40,000 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（20 C） ￥40,000 1 vial（2 C） ￥40,000 1 vial（5 C） ￥40,000 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（10 C） ￥40,000 1 vial（2 C） ￥40,000 1 vial（5 C） ￥40,000 1 vial（5 C） ￥40,000 貯 蔵 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 受 託 サ ー ビ ス 上記商品の他にも多数取り揃えています。ただ今、ライフサイエンス研究用試薬カタログを配布中です。 ご希望の場合は、コスモ・バイオホームページ上の“カタログ請求”またはコスモ・バイオ代理店にご照 会ください。 Cosmo Bio News No.79 15 機 器 N ew TOPICS Products & Topics 幹細胞機能同定キットシリーズ 分化誘導及び増殖に有用な培養添加剤と各種細胞特異的な抗体セット in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 【神経幹細胞機能同定キット】 各種培養添加剤と各種神経細胞抗体のセットです シ グ ナ ル 伝 達 本キットは、神経幹細胞の短期間のメンテナンス、分化誘導（アス トロサイト、ニューロン、オリゴデンドロサイト）及び増殖に有用な培 養添加剤と各種神経細胞特異的な抗体がセットになっています。 構成内容 ●神経幹細胞メンテナンスサプリメント（100e） （rhFGF basic及 びrhEGF） 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●神経分化誘導サプリメント（1.0f） （IGF-I及びFBS） ●ウシ フィブロネクチン 100×ストック溶液（250e） ●ヒト ネスチン抗体（25e） ●ヒト GFAP抗体（100b） ●神経特異的クラスIIIβチューブリン抗体（25b） 品 名 Neural Stem Cell Functional Identification Kit バ イ オ メ デ ィ カ ル 図1 ●オリゴデンドロサイトマーカー抗体（10b） 適用種 Human Mouse/Rat ヒト神経細胞の分化誘導 品 番 SC011 SC013 包 装 1 kit 1 kit R&D Systems Inc. 略号RSD 希望販売価格 ￥89,000 ￥89,000 貯 蔵 5 5 【間葉系幹細胞機能同定キット】 In vitro 機能分化によるヒト骨髄由来幹細胞（BMSC）／間葉系幹細胞（MSC）の同定用試薬 間葉系幹細胞機能同定キットは、多様な間葉系細胞への多分化能 を検証することで、BMSC/MSCを同定するのにお使いいただけま ●オステオポンチンポリクローナル抗体（品番：SC010のみ） ●コラーゲンII ポリクローナル抗体（品番：SC010のみ） す。このキットには、特別に調製した脂肪生成、軟骨形成、骨形成培地 サプリメントが入っていて、BMSC/MSCを効果的に脂肪生成、軟骨 形成、骨形成系統へと分化させることができます。抗体パネルとして は、FABP-4抗体、アグリカン抗体（品番：SC006のみ） 、オステオカ 汎 用 ルシン抗体、オステオポンチン抗体（品番：SC010のみ） 、コラーゲン II 抗体（品番：SC010のみ）が含まれており、脂肪細胞、軟骨細胞、骨 細胞の成熟表現型を決定することができます。 構成内容 ●脂肪細胞サプリメント（ヒドロコルチゾン、イソブチルメチルキサ ンチン、インドメタシン含有） 受 託 サ ー ビ ス ●骨芽細胞サプリメント（デキサメタゾン、アスコルビン酸リン酸、 β-glycerolphosphate含有） ●軟骨細胞サプリメント（デキサメタゾン、アスコルビン酸リン酸、プ ロリン、ピルビン酸、TGF-3含有） ●ITSサプリメント（インスリン、 トランスフェリン、亜セレン酸、ウシ 図1 ヒトBMSC/MSCの同定 血清アルブミン、リノレン酸含有） ●FABP-4ポリクローナル抗体 ●オステオカルシンマウスモノクローナル抗体（品番：SC006のみ） ●アグリカンポリクローナル抗体（品番：SC006のみ） 機 器 品 名 Mesenchymal Stem Cell Functional Identification Kit 16 Cosmo Bio News No.79 適用種 Human Mouse 品 番 SC006 SC010 包 装 1 kit 1 kit R&D Systems Inc. 略号RSD 希望販売価格 ￥73,000 ￥74,000 貯 蔵 5 5 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 大好評！ 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 CytoSelect™ 悪性形質転換アッセイキット 足場非依存性増殖を測定するための従来型軟寒天コロニー形成試 験は、ディッシュ上に半固形培地を分注し、細胞を3∼4週間培養後、 コロニーをカウントするため、大量のサンプルをテストするには時間 と手間がかかります。また、コロニーサイズが均一ではなく、実験結 果にばらつきが出てしまいます。本アッセイは、コロニーカウント及 in situ 癌遺伝子による足場非依存性増殖を定量測定 ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 【参考文献】 1. Takezawa, K. et al.（2009）. Cancer Res. 69:6515-6521. 2. Kang, M-I. et al.（2009）. Mol. Cancer Ther. 8:571-581. （1）:118-129. 3. Lee, K.B. et al.（2008）. Exp. and Mol. Medicine 40 4. Shen, L. et al.（2008）. Med. Oncol. 25:222-228. 5. Wei, Q. et al.（2008）. PNAS 105:19738-19743. 6．Hirata, H. et al.（2009）. Clin. Cancer Res. 15：5678-5687（品番：CBA-135）. 7． Xie, G. et al.（2009）. Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. 296：G755-G763（品番： CBA-135）. （10） ：e3368（品番：CBA-135）. 8．Ke, X-S. et al.（2008）. PLoS One 3 び長期の培養期間を必要とせずに、形質転換細胞を定量的に測定す ることができます（図1） 。6∼8日という短い培養期間で、癌遺伝子 もしくはsiRNAが導入された細胞を評価することも可能です。 特 長 シ グ ナ ル 伝 達 リカバリー ●培養期間を20日から7日に短縮可能 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●96または384ウェルのハイスループットフォーマット ●コロニーカウントは不要 ●定量的で、 正確な分析が可能 ●リカバリー可能 （特製寒天入りキット＊のみ） ＊下記商品リストをご参照ください。 図1 品 名 CytoSelect™ 96-well Cell Transformation Assay Kit リカバリー ― 適用種 蛍光 CytoSelect™ 96-well Cell Transformation Assay Kit 可 比色 CytoSelect™ 96-well Cell Transformation Assay Kit 可 蛍光 CytoSelect™ 384-well Cell Transformation Assay Kit ― 蛍光 大好評！ アッセイ原理 品 番 CBA-130 CBA-130-5 CBA-135 CBA-135-5 CBA-140 CBA-140-5 CBA-145 CBA-145-5 包 装 1 kit（96 assay） 5 kit（5x96 assay） 1 kit（96 assay） 5 kit（5x96 assay） 1 kit（96 assay） 5 kit（5x96 assay） 1 kit（348 assay） 5 kit（5x348 assay） Cell Biolabs Inc. 略号CBL 希望販売価格 ￥86,000 ￥385,000 ￥117,000 ￥515,000 ￥123,000 ￥546,000 ￥164,000 ￥655,000 貯 蔵 4 4 4 4 4 4 4 4 バ イ オ メ デ ィ カ ル Lympholyte® 免疫細胞濃縮キット 様々な動物種のリンパ球分離に対応しています 特 長 【プロトコール】 ●赤血球と死細胞を除去することで、生きたリンパ球（特に脾臓）を分 汎 用 コスモ・バイオホームページ上の 離します。 “技術情報”よりLympholyte ●リンパ球懸濁液中の死細胞を除去します。 （細胞培養後あるいは抗 ® 推奨プロトコールをご覧くださ 体＋補体での処理後） い。 ●Lympholyte®-H、-Mammal 商品は、それぞれヒト末梢血、動物末 梢血中の生リンパ球と単球の分離にお使いいただけます。 Cedarlane Laboratories Ltd. 略号CL 品 名 Lympholyte® -H 適用種 Human 適用サンプル 末梢血 密 度 1.0770±0.001 品 番 CL5015 包 装 100 F 希望販売価格 ￥5,000 貯 蔵 3 Lympholyte® -M Mouse リンパ球懸濁液 1.0870±0.001 CL5031 100 F ￥15,000 3 Rat リンパ球懸濁液 1.0940±0.001 CL5041 100 F ￥15,000 3 Rabbit Human リンパ球懸濁液 全血 1.0965±0.001 1.113±0.001 CL5050 CL5070 5x30 F 100 F ￥22,000 ￥10,000 3 3 Human すい臓 1.100±0.001 CL5095 500 F ￥33,000 3 Mammalian Mouse Mouse Mouse Mouse Mouse 末梢血 脾臓 脾臓 脾臓 脾臓 脾臓 1.0860±0.001 ― ― ― ― ― CL5115 CL901 CL921 CL931 CL941 CL961 100 F 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit ￥9,000 ￥56,000 ￥56,000 ￥56,000 ￥56,000 ￥65,000 3 4 4 4 4 4 Lympholyte® -Rat Lympholyte® -Rabbit Lympholyte® -Poly （多核性顆粒球） Lympholyte® -1.1 （ランゲルハンス島） Lympholyte® -Mammal T Cell Lympholyte-Pure CD4 Cell Lympholyte-Pure CD8 Cell Lympholyte-Pure B Cell Lympholyte-Pure NK Cell Lympholyte-Pure ! 受 託 サ ー ビ ス 機 器 上記商品にはサイズ違いがあります。詳細はコスモ・バイオホームページ上の“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：Lympholyte） お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 17 siRNA/shRNA ［ 特 集 ］ N ew TOPICS Products & Topics 特定原材料由来タンパク質迅速検出キット FASTKIT™ スリム 偽陽性を示す食品を排除して、リニューアルしました！ FASTKIT™ スリムシリーズは、食品中の特定原材料由来タンパク 質を検出するキットです。食品衛生法により表示が義務付けられて シ グ ナ ル 伝 達 いる「卵」、 「牛乳」、 「小麦」、 「そば」、 「落花生」及び表示が推奨されて ●テストプレート（2テスト×10パック） いる「大豆」をラインアップしています。 ●希釈用緩衝液（50f×1本） 試料溶液を滴下し、15分後に赤紫色のラインを確認するだけの簡 ●濃縮抽出用緩衝液（100f×1本） 単な操作のため、製造機器の洗浄確認等、製造現場での日々の管理 に最適です。 試験方法 ①試料溶液の調整 特 長 ●簡単な操作：試料溶液調整後は、テストプレートに溶液を滴下する だけの簡単な操作です。特別な機器や習熟は不要で、誰でもどこ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 構成内容 1. 食品サンプルの均一化 2. 抽出操作 3. 遠心分離、濾過 4. 希釈用緩衝液による希釈 ②テストプレート操作 1. テストプレートの準備 でも検査可能です。 ●短時間：反応時間は15分。判定部に現れる赤紫色のラインの有無 2. 試料溶液の滴下 ③結果の判定 試料溶液滴下後、15分＊で目視判定 を目視で確認するだけで、検査が可能です。 ●偽陽性を示す食品を排除：卵キットの鶏肉に対する反応性、牛乳キ ＊ふき取り検査の場合には、判定時間に注意してください。 ットの牛肉に対する反応性及び小麦キットのそばに対する反応性 を除去しました。 図1 結果の判定 2本のラインが確認できれば、陽性。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 品 名 FASTKIT™ スリム 卵 FASTKIT™ スリム 牛乳 FASTKIT™ スリム 小麦 FASTKIT™ スリム そば FASTKIT™ スリム 落花生 FASTKIT™ スリム 大豆 NEW 汎 用 感 度 25 nA/F 25 nA/F 25 nA/F 25 nA/F 25 nA/F 25 nA/F 品 番 NFS001 NFS002 NFS003 NFS004 NFS005 NFS006 Phire™ 動物組織ダイレクトPCRキット 包 装 20 test 20 test 20 test 20 test 20 test 20 test 日本ハム株式会社 略号NPH 希望販売価格 ￥32,000 ￥32,000 ￥32,000 ￥32,000 ￥32,000 ￥32,000 貯 蔵 4 4 4 4 4 4 キャンペーン実施中 様々な動物種の組織をそのままダイレクトにPCR マウス、魚類、鳥類、昆虫を含む幅広い動物組織からダイレクトに DNAを増幅できます。PCRの前に、DNAを抽出する必要はありま 特 長 せん。本キット中のPhire™ Hot Star II DNAポリメラーゼは、未精 ●DNA抽出は必要ありません！ 製の動物組織中に存在するPCRに対して阻害を示す物質に極めて耐 ●Phire™ Hot Star II DNAポリメラーゼによって、高い阻害剤耐性 性があります。また、本キットには、動物組織からのDNA増幅に必要 な試薬、サンプリングツールやDNARelease™ Additive等のコン ポーネントが全て含まれています。DNARelease™ Additiveを用 いることで、動物組織からのDNA放出を高めることができます。 と高収量を実現します。 ●サンプルはキット中の Harris Uni-Core™ で切り取り、PCR溶液 液に加えるだけ！ ●様々な動物組織に対応、マウスはもちろん魚類や昆虫にも使用で きます。 受 託 サ ー ビ ス 図2 様々な動物組織からの迅速で信頼性のあるダイ レクトPCR 様々な動物組織の小サンプルを50e PCR反応に直接 用いた。キットに含まれるコントロールプライマーによ って、特異的なDNAフラグメントが増幅された。ショウ ジョウバエ、ゼブラフィッシュでは、コントロールプライ マーを用いたときの塩基配列がフィンザイム社のウェブ サイトで公開されている。 ＋：ポジティブコントロール（精製DNAあり） −：ネガティブコントロール（精製DNAなし） 図1 2つの短時間で簡単なプロトコール 目的によって2種類のプロトコールを選択できる。直接法で は、動物細胞の小片を直接PCR反応に用いる。希釈法では、 動物組織の少量をまずインキュベーションバッファー中で 短時間インキュベートし、この溶液から1eを採ってPCR反 応に加える。同じサンプルから様々な条件下でPCR反応を 行う場合に最適。 Finnzymes Oy 品 名／構成内容 Phire™ Animal Tissue Direct PCR Kit 機 器 品 番 F-140 包 装 200 rxn ●Phire™ Hot Star II DNAポリメラーゼ ●2xPhire™ 動物組織 PCR バッファー （dNTP、MgCl2含有） ●ユニバーサルコントロールプライマー ミックス ●希釈バッファー ●DNARelease™ Additive ●Gel Loading Dye ●Harris Uni-Core™ 0.50 mm ●Harris Cutting Mat™ ! 18 略号FZM 希望販売価格 ￥45,000 ￥31,500 （キャンペーン中の参考価格） 貯 蔵 5 本キットは、2010年1月18日∼3月31日までの期間、30%OFFの価格（￥31,500）でご提供致します。ぜひ、この機会にお試しください。 アプリケーションデータを豊富に掲載したフィンザイム社のDirect PCRの冊子をご用意しております。ご要望の方は、コスモ・バイオ（欄外参照）までお問い合わせください。 また、フィンザイム社ホームページ上で、最新のアプリケーションデータがご覧いただけます（http://www.finnzymes.com/directpcr/index.html） 。 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 TurboFect™ タンパク質トランスフェクション試薬 サンプルあります in situ 高効率でReady-to-useなトランスフェクション試薬 ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 【TurboFect™ タンパク質トランスフェクション試薬（in vitro） 】 効果的！活性化タンパク質のトランスフェクション TurboFect™ タンパク質トランスフェクション試薬は、カチオン 性ポリマー無菌液です。キットに含まれるエンハンサー溶液と組み シ グ ナ ル 伝 達 特 長 合わせて、活性・機能を保持したタンパク質や抗体、ペプチドを細胞 ●高いトランスフェクション効率。様々な細胞株に対応。 質に効率的に導入します。異なるサイズ、正味荷電のタンパク質を、 ●活性・機能を保持したタンパク質のトランスフェクションが可能。 初代培養細胞や接着細胞、懸濁細胞を含む様々な細胞に導入するこ ●他社のトランスフェクション試薬に比べて高い導入効率！ とが可能です。血清の存在下でも非存在下でも使用可能です。また、 ●コントロールに蛍光標識ウサギ抗体付き。 他社の試薬に比べて、より多くのタンパク質分子を細胞に導入する ことができます。 トランスフェクション効率の決定に、コントロールとして蛍光標識 ウサギIgGが含まれています。 使用目的 ●細胞へのタンパク質、抗体、ペプチドの導入 図2 TurboFect™ タンパク質トランスフェクション試薬と他社のタンパク質トランスフェクション試薬と の比較 Alexa Fluor 488標識ヤギIgG抗体をHeLa細胞にトランスフェクションした。トランスフェクション効率は フローサイトメトリーで分析した。 図1 HeLa細胞の核の横断面、共焦点顕微鏡画像 トランスフェクション後2時間固定した細胞。 緑：Alexa Fluor 488標識ヤギIgG抗体をトランスフェクション、青：核を DAPI染色、赤：PE標識マウス抗トランスフェリンレセプターで染色。 品 名 TurboFect™ in vitro Protein Transfection Reagent ! 品 番 R1411 包 装 125 E（20ウェルプレートでトランスフェクション125回分） Fermentas UAB 略号FER 希望販売価格 ￥48,000 貯 蔵 4 5 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル 上記商品にはサンプルをご用意しています。詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 【TurboFect™ DNA, siRNA/DNAトランスフェクション試薬（in vivo） 】 効果的！in vivo で非免疫原性の遺伝子デリバリー TurboFect™ in vivoトランスフェクション試薬は、カチオン性ポ リマー無菌液です。このポリマーはDNAと共に、小型で安定、正電 荷に帯電した複合体を形成します。この複合体はDNAを分解から防 ぎ、in vivo における遺伝子輸送を促進します。また、炎症反応を示 汎 用 さないので、静脈注射、腹腔内注射、腫瘍内注射等を含む様々な方法 でDNAを投与するのに適しています。 図1 TurboFect™ in vivoトランスフェクション試薬を使用したDNA導入後の炎症応答 50bのプラスミドDNAを雌のBALB/cマウスに、TurboFect™ in vivoトランスフェクション試薬を使って 腹腔内にin vivoトランスフェクションした。時間ごとに血清をサンプリングし、炎症反応を促進するサイトカ インであるTNFαの濃度をELISAで測定した。LPS：リポポリサッカライド 使用目的 ●DNAトランスフェクション ●siRNA-DNA共トランスフェクション 特 長 ●炎症反応無し ●様々な方法でのDNA導入が可能 ●簡単な操作 ●再現性のある結果 品 名 TurboFect™ in vivo Transfection Reagent ! 品 番 R0541 図2 フェルメンタス社のTurboFect™ in vivo トランスフェクション試薬と他社のin vivo トランスフェク ション試薬との比較 他社の in vivoトランスフェクション試薬を使って50bのルシフェラーゼ遺伝子をコードしたプラスミド DNAを雌のBALB/cマウスの腹腔内に導入した。メーカーの推薦方法にしたがって行い、24時間後に様々 な器官におけるルシフェラーゼの発光を測定した。 包 装 120 E（50 BDNAを用いてトランスフェクション20回分） Fermentas UAB 略号FER 希望販売価格 ￥92,000 貯 蔵 4 受 託 サ ー ビ ス 上記商品にはサンプルをご用意しています。詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 フェルメンタス社では、この他にin vitro DNAトランスフェクション試薬 （品番：R0531） やsiRNAトランスフェクション試薬（品番：R1401） も取り揃えています。 詳細は、 コスモ・バイオホームページ上の “サイト内検索” で各商品記事をご参照ください （キーワード：TurboFect） 。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 19 機 器 N ew NEW Products & Topics OmicsLink™ Expression-Ready ORF cDNAクローン 様々な発現系（大腸菌、酵母、哺乳類、レンチウイルス、昆虫、小麦無細胞系）に対応！ in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 様々な発現系＆タグの種類が選べるcDNAクローン ジンコピア社のOmicsLink™ Expression-Ready ORF cDNA シ グ ナ ル 伝 達 クローンは、高品質のcDNAライブラリー由来で配列確認済みの完 全長cDNAです。ヒトとマウス遺伝子で45,000種以上のクローンを 取り揃えています。 このクローンは大腸菌、酵母、哺乳類、レンチウイルス、昆虫、無細 胞系の様々な発現系でご使用いただけ、80種類ものベクターと50 種類ものタグ融合タンパク質からお好みのタグ付きベクターをお選 びいただけます。タンパク質発現、精製、機能解析に対応し、無細胞系 の転写・翻訳カップリングシステムにも対応しています。機能ゲノミク ス、プロテオミクス、システムバイオロジーにおけるハイスループッ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 トスクリーニング研究にも最適です。 プロモーター、マーカー、融合タンパク質タグを選択してベクター をお選びください。 図1 ターゲットタンパク質の発現 図2 様々な発現系に対応 特 長 ●Expression-Ready：すぐに発現可能。時間を節約します。 ●豊富なORFクローン数：完全長のヒト及びマウスのクローンを 45,000種以上ご用意 ●様々な発現系に対応：大腸菌、酵母、哺乳類、レンチウイルス、昆 バ イ オ メ デ ィ カ ル 虫、無細胞系 ●80種類のベクター、50種類のタグをご用意 ●配列検証済み ■タグの種類 蛍光タグ 多機能タグ 溶解性及び精製タグ 抗体/免疫沈降タグ eGFP, eYFP, eCFP, mCherry HaloTag®, AviTag™ His, SUMO, GST, MBP, Flag, 3xFlag HA, cMyc GeneCopoeia, Inc. 略号GCP ■商品検索の手順 汎 用 ジンコピア社ホームページ上の検索欄 （http://www.genecopoeia.com/product/search/index.php） を開きます。 【キーワード検索】 ①ご希望の種を選択します。 ②遺伝子名、Accession No.、UniGene ID、Entrez Gene ID、 キーワードで検索できます。 受 託 サ ー ビ ス 【Blast検索】 ①ご希望の種を検索し、シーケンスのタイプ（タンパク質または ヌクレオチド）を選択します。 ②ご希望の遺伝子のシーケンスを入力します。 右のSearchボタンを押すと検索が開始され、品番が表示され ます（右図参照） 。 機 器 希望販売価格はコスモ・バイオ（欄外参照）まで、ご照会ください。 20 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 尿RNA/miRNA/DNA/タンパク質精製キット in situ 尿からmiRNA、DNA／タンパク質を精製するキットが新登場！ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 【尿DNA 精製キット (懸濁液) (品番：27000＆27200） 】 ■尿DNA 精製ミニキット （懸濁液） （品番：27000） の仕様 特 長 5 F （最小） 25 F （最大） 48回分（5 Fの時） 8 回分（25 Fの時） 1回目：150 E 2回目：100 E ＞ 1 kb、150∼250 bp ＜30分 サンプル尿量 ●スピンカラムの使用により30分以内にDNAを精製します。 サンプル数 ●150∼250bpの低分子DNAと1kb以上の高分子DNAの両方を 溶出量 精製します。 ●高品質DNAが得られます。 精製尿DNAサイズ 精製時間 ●得られたDNAは様々な分子生物学実験に使用できます。PCR、qPCR、DNAフィンガープリント法等。 シ グ ナ ル 伝 達 ■尿DNA 精製マキシキット （懸濁液） （品番：27200） の仕様 25 F 50回分 1回目：150 E ２回目：100 E ＞ 1 kb、150∼250 bp ＜30分 サンプル尿量 サンプル数 溶出量 構成内容 ●安定剤 ●結合溶液 I ●Proteinase K ●Pronase ●結合溶液 I ●洗浄液 I ●洗浄液 II ●溶出バッファー ●回収チューブ ●溶出チューブ ●インサート 精製尿DNAサイズ 精製時間 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●ミニフィルタースピンカラム 【尿miRNA精製キット（品番：29000） 】 特 長 構成内容 ●スピンカラムの使用により、30分以内に迅速かつ簡単に処理でき ●安定剤 ●溶解溶液 ●溶出溶液 ●ミニスピンカラム ●0.5∼3fの尿サンプルからmiRNAを精製します。 ●回収チューブ ●溶出チューブ ●フェノールまたはクロロフォルム抽出は必要ありません。 ●インサート ます。 バ イ オ メ デ ィ カ ル ●miRNA、siRNA、tRNA、5S rRNA等 、全 て の smallRNA （200nt）を精製します。 ■尿miRNA精製キット（品番：29000） の仕様 ●阻害剤フリーの尿RNAを精製しますので、様々なアプリケーショ 0.5 F 3F ＜ 200 nt ＜ 30分 最小尿サンプル量 最大尿サンプル量 精製RNAサイズ 精製時間 ンに使用可能です。遺伝子制御・機能解析、RT-PCR、ノーザンブ ロッティング、マイクロアレイ等。 【尿DNA/タンパク質精製キット（品番：27400） 】 特 長 汎 用 構成内容 ●尿中の細胞ゲノムDNA、アポトーシスDNA、尿中細菌DNAを精製 できます。 ●スピンカラムの使用により、迅速かつ簡単に処理できます（12サ ンプル15分） 。 ●安定剤 ●再懸濁バッファー ●DNA結合溶液 ●洗浄液 I ●溶解溶液 ●洗浄液 II ●インサート ●溶出チューブ ●回収チューブ ●DNA溶出バッファー ●Proteinase K ●1∼3fの尿サンプルから尿DNAと尿タンパク質を精製します。 ●タンパク質 pH 結合バッファー ●カラム活性化洗浄バッファー ●阻害剤フリーの尿DNAを精製しますので、様々なアプリケーショ ●タンパク質溶出バッファー中和剤 ●タンパク質ミニスピンカラム ンに使用可能です（PCR、q-PCR、サザンブロッティンブ、メチレ ●DNAマイクロスピンカラム イション感度PCR） 。 ●200bの尿タンパク質まで濃縮と脱塩を同時に行います。 ■尿DNA/タンパク質精製キット （品番：27400） の仕様 最小尿サンプル量 最大尿サンプル量 最大剥離細胞数/細菌数 タンパク質生産量 12サンプル精製分の時間 品 名 Urine DNA Isolation Mini Kit Urine DNA Isolation Maxi Kit Urine microRNA Purification Kit Urine DNA/Protein Isolation Kit お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 品 番 27000 27200 29000 27400 包 装 48 prep 24 prep 25 prep 25 prep 受 託 サ ー ビ ス 1F 3F 1 x 106 最大200 B 15 分（さらに20分インキュベーション） Norgen Biotek Corp. 略号NOG 希望販売価格 ￥55,000 ￥72,000 ￥32,000 ￥40,000 貯 蔵 3 3 3 3 Cosmo Bio News No.79 機 器 21 N ew NEW Products & Topics SERVA Blue Prepサンプル調製キット イオン交換テクノロジーでタンパク質、DNA、RNAを分子量に制限なく、高収率、簡単に精製 in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン SDS-PAGE、二次元電気泳動、マススペクトロメトリー等のアプ 特 長 リケーションでは、脱塩、界面活性剤の除去、タンパク質の濃縮、血 シ グ ナ ル 伝 達 清タンパク質の阻害物質の低減等が必要です。BluePrepキットはタ ●高精製、高収量 ンパク質の抽出や精製のための革新的な技術に基づき、これらの問 ●時間を節約し、サンプルが分解されることなくRNA、DNA、タン 題を解決します。さらに、BluePrepキットの精製技術はイオン交換 ●迅速かつ簡単操作 ●幅広い適用範囲 パク質を抽出できます。 マトリクスを利用したスピンカラムクロマトグラフィーで、この分離 ●イオン交換のため、タンパク質サイズの制限がありません。 原理は分子量の制限が無く、ペプチドだけでなく高分子量タンパク ●SDS-PAGE、IEF、2D-PAGE、マススペクトロメトリー等に互換 質にも適しています。 性があります。 SERVA Electrophoresis GmbH 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル 品 名 CBD Micro Kit 詳 細 サンプル濃縮、バッファー交換、脱塩 カラム能力 50 Fタンパク質 CBD Macro Kit DetergentEx Micro Kit サンプル濃縮、バッファー交換、脱塩 界面活性剤除去 8 Cタンパク質 50 Bタンパク質 DetergentEx Macro Kit Major Serum Protein Removal Kit Urine Concentration Micro Kit Urine Concentration Macro Kit Protein EndotoxinEx Micro Kit Protein EndotoxinEx Macro Kit IB Isolation Micro Kit 界面活性剤除去 血清タンパク質の除去（特異的抗体を使用しません） 尿中タンパク質の精製、濃縮及び脱塩 尿中タンパク質の精製、濃縮及び脱塩 エンドトキシンの急速除去 エンドトキシンの急速除去 封入体からのリコンビナントタンパク質の抽出 8 Cタンパク質 500 Bタンパク質 1 F尿 96ウェル: 600 E尿／20 F 尿 150 Bタンパク質 4 Cタンパク質 1.5 F細菌培養液 IB Isolation Macro Kit ON-Column Digest Kit 2in1 Purification Kit 3in1 Purification Kit 4in1 Purification Kit 封入体からのリコンビナントタンパク質の抽出 タンパク質のトリプシン消化と容量濃縮が同時に行えます トータルRNAとタンパク質の抽出と精製 トータルRNA、ゲノムDNA、及びタンパク質の抽出と精製 トータルRNA、ゲノムDNA、タンパク質、及びmRNAの抽出と精製 100 F細菌培養液 15 Bタンパク質 50 BRNA／200 Bタンパク質 50 BRNA／200 BDNA／200 Bタンパク質 50 BRNA／200 BDNA／200 Bタンパク質 ! 品 番 42070 42071 42072 42073 42074 42075 42079 42080 42081 42085 42086 42076 42077 42078 42082 42088 42087 42089 包 装 25回分 50回分 4回分 25回分 50回分 4回分 25回分 25回分 4回分 20回分 4回分 20回分 50回分 4回分 25回分 20回分 20回分 20回分 略号SER 希望販売価格 ￥125,000 ￥169,000 ￥75,000 ￥125,000 ￥169,000 ￥75,000 ￥114,000 ￥114,000 ￥73,000 ￥114,000 ￥79,000 ￥129,000 ￥187,000 ￥82,000 ￥114,000 ￥102,000 ￥114,000 ￥138,000 上記商品の貯蔵は、全て常温です。各キットの回収、純度及び精製時間につきましては、データシートをご参照ください。 NEW RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システム リコンビナントアデノウイルスをすぐに発現できるRAPAd® システムにmiRNA発現シリーズが新登場！ RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システムは、wild-typeのア デノウイルスを大幅に減らし、短期間でリコンビナントアデノウイル スを産生します。本システムでは、パッケージングシグナルとE1配 汎 用 列が除かれた5’ ITR由来のバックボーンベクターを使用しています。 RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システムは、迅速に個々の miRNA前駆体を発現するリコンビナントアデノウイルスを産生する と同時にヘアピン構造と内因性のプロセシング機構を保存し、適切 に切断されたmiRNAを導き出すように設計されています。 特 長 受 託 サ ー ビ ス ●迅速なウイルス産生：わずか2∼3週間で高感染価のウイルスを産 生できます。 ●実質的にwild-typeのウイルス不含：従来の発現系より、100∼ 図1 pacAd5 miR-GFP/Puro Shuttleベクター（7900 bp、アンピシリン耐性） Xho I切断部位：26 bp、660 bp、7214 bp ・miRNAプロセシング：miRNAステムループ前駆体は、BamHIとNheI部位間にクローニング。ヘアピン構 造と適切なプロセシングを保存するため、miRNAステムループ配列は、イントロン配列に隣接。 ・EF-1αプロモーター：哺乳動物細胞での高レベルの発現を保証。 ・GFP-Puro融合マーカー：発現細胞のモニタリングと安定発現株の選択用にGFPまたはピューロマイシン 耐性。 10,000倍wild-typeプラークの産生を抑えるように設計されて います。 図2 RAPAd ® miRNAアデノウイルス発 現システムを使用したリコンビナントアデノ ウイルスの産生 2 9 3 細 胞 に P a c I で 切 断した p a c A d 5 CMV-GFPベクタ ー 及 び pacAd5 9.2100ベクターを導入した。プレートは、倒 立蛍光顕微鏡下でウイルスの存在を観察し た。 機 器 品 名／構成内容 RAPAd® miRNA Adenoviral Expression System プロモーター EF-1α 品 番 VPK-253 包 装 1 kit Cell Biolabs Inc. 略号CBL 希望販売価格 ￥203,000 貯 蔵 5 ●pacAd5 miR-GFP/Puro Shuttleベクター ●pacAd5 9.2-100ベクター ●pacAd5 CMV-GFPコントロールベクター ●pacAd5 CMV-ntLacZコントロールベクター 22 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 TOPICS 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 12-エピトープタグタンパク質マーカーライセート in situ Ready-to-use！エピトープタグ抗体のポジティブコントロール ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン GST--T7--HSV--cMyc--VSV--Glu-Glu--V5--E-tag--Flag--S tag--HA--6XHisの12種類のタグを融合させたリコンビナントタン パク質です。エピトープタグ抗体のポジティブコントロールとしてお 使いください。 図1 6種類の一般的に使われるエピト ープタグの化学発光検出 各レーンは矢印が示す約41kDaに相 当する12-エピトープタグタンパク質 ライセートのバンドの検出を示す。異 なる6種類のGST、FLAG、HA、Myc、 VSV-GまたはHIS6エピトープタグ特 異的な抗体で検出した。 特 長 ●Ready-to-use：1×ローディングバッファーに溶解しています。 Rockland Immunochemicals, Inc. 品 名 品 番 MB-301-0100 12-Epitope Tag Protein Marker Lysate 包 装 100 E（200ブロット分） 希望販売価格 ￥25,000 略号RKL 貯 蔵 5 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 関連商品 FemtoMax™ 超高感度化学発光ウェスタンブロッティングキット Rockland Immunochemicals, Inc. 品 名／内 容 FemtoMax™ Super Sensitive Chemiluminescent Substrate Kit 一次抗体の免疫動物 Mouse 品 番 KCA002 Rabbit KCA003 ●フェムトグラム単位の抗原を検出できる超高感度ウェスタンブロッティング用キットです。 TOPICS 包 装 1 kit （ミニブロット30枚分） 1 kit （ミニブロット30枚分） 略号RKL 希望販売価格 ￥43,000 貯 蔵 4 ￥43,000 4 ChromaLink™ ビオチン標識キット 1つの試薬でビオチン標識の定量ができます！ ChromaLink™ ビオチンは追跡（トレース）可能なビオチンをアミ ンを有する生体分子や表面に取り込ませます。ChromaLink™ ビオ チンは抗体や他のタンパク質に取り込まれたトータルビオチンの簡 単で直接的な分光定量を可能にします。 シ グ ナ ル 伝 達 試薬に組み込まれた定量法 修飾したタンパク質のA280とA354を測定するだけで、タンパク質 バ イ オ メ デ ィ カ ル あたりに標識されたビオチンの濃度と量を直接測定することができ ます。100eのバッファー中にビオチン標識タンパク質が20bあ れば、標準的なマイクロプレートリーダーやマイクロキュベットを用 特 長 いて再現性のある結果を得られます。 ●コンプリートキット：全ての試薬が含まれています。 ●Built-in定量用シグナル：A280とA354の吸光度を読むだけの簡単 汎 用 な方法で標識したビオチンを定量できます。HABAや蛍光レポー ターアッセイは必要ありません。 ●汎用性：25bから1cの抗体を標識できます。 ●安全で環境にやさしい：水溶性のビオチン試薬、抗体に低刺激、 図1 ビオチン標識テクノロジー ChromaLink™ ビオチンは最新のタンパク質ビオチン標識試薬。水性バッファー中でタンパク質のリジン 残基を修飾する水溶性のスルホスクシンイミジル基を備え（a） 、またリンカーは波長354nmで吸収するUV で追跡可能なビス-アリルヒドラゾン発色団も有している （b） 。このUVの特性により、非破壊的な2波長分光 （C） 。またリンカーは抗体の 光度測定（A280/A354nm）によって標識したビオチンの迅速な定量を可能にする 溶解度が高めながら、ストレプトアビジン／ビオチンの親和性を維持・持続させるための長いPEG3スペー サーを有する （d） 。 DMFが不要です。 構成内容 ●10×修飾バッファー ●Sulfo ChromaLink™ ビオチン ●10×PBS ●Zeba™ 脱塩スピンカラム ●コレクションチューブ ●貯蔵チューブ ●ウシIgG（1c/f） ●ビオチン標識IgG（1c/f） 受 託 サ ー ビ ス ●ソフトウェア（512MB Flash drive） Solulink Biosciences, Inc. 品 名 ChromaLink™ Biotin Labeling Kit 品 番 B-9007-105K 包 装 1 kit 品 番 B-9007-009K 包 装 1 kit 略号SLK 希望販売価格 ￥89,000 貯 蔵 3 Solulink Biosciences, Inc. 略号SLK 関連商品 ビオチン抗体標識キット 品 名 ChromaLink™ Biotin One-Shot™ Antibody Labeling Kit お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 希望販売価格 ￥41,000 機 器 貯 蔵 3 Cosmo Bio News No.79 23 N ew NEW Products & Topics GelRed™ & GelGreen™ 核酸ゲル染色キット 売れ筋のGelRed™ & GelGreen™ 核酸染色試薬にゲル染色キットが新登場！ in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン 従来の問題点“移動度への影響”を解決しました！ GelRed™ と GelGreen™ は毒性が低く、熱安定性の高い核酸染 シ グ ナ ル 伝 達 色試薬です。またバックグラウンドが低く明瞭な結果が得られます。 これらの染色試薬がゲル染色キットになって新登場。より簡単に実験 できます。 特 長 ●毒性が低く安全：様々な安全性試験を実施しています。 ●簡単操作：サンプルとGelRed™ またはGelGreen™ ローディング バッファーをゲルにアプライし、キットに含まれるランニングバッ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ファーで泳動するだけ。 図1 プレステインドゲル 市販されている様々なDNA分子量マー カーを使用。 ●核酸ラダーとの親和性：市販されているDNA/RNAラダーとも相 性が良く、ゆがみの問題や移動度への影響はありません。 ●再利用：ゲルは未使用のウェルがあれば再利用できます。 ●速い電気泳動に対する柔軟性：高圧の電気泳動でも加熱せずに短 時間で泳動できます。 ●安価：ミニゲル100枚分までのローディングバッファーとランニン グバッファーを含みます。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 構成内容 ●6×GelRed™ またはGelGreen™ ローディングバッファー ●200×GelRed™ またはGelGreen™ ランニングバッファー 操作手順 ① 200×ストックのランニングバッファーを1×に調製。 図2 安全性試験 HeLa細胞をそれぞれ他社A、GelGreen™ 及びGelRed™ を37℃でインキュベーションした。インキュベ ーション後、5分、30分の写真を撮った。他社Aは細胞内にすぐに入ったが、GelRed™ とGelGreen™ は 蛍光染色を欠いているので細胞膜を浸透できないことが示された。 ② アガロースゲルを1×ランニングバッファーの中に入れる。 ③ 6×ローディングバッファーを軽くボルテックスし、DNAサンプル を1：5になるように加える。 ④ 泳動装置にゲルをセットし、1×ランニングバッファーを加え、サ 汎 用 ンプルをアプライ。 ⑤ 8∼10 V/cm（cm ＝ ゲル長）で泳動。 ⑥ UVトランスイルミネーターでバンドを可視化。 Biotium, Inc. 品 名 GelRed™ Nucleic Acid Gel Prestaining Kit 受 託 サ ー ビ ス 内 容 条 件 200bp及び 中∼大 DNAフラグメント/UV（302 1.5Kbトラッキングダイ nm）励起：EtBr 50bpトラッキングダイ 小 DNA/RNAフラグメント：PAGE ゲル/UV（302 nm）励起： EtBrフ ィルター 200bp及び 中 ∼ 大 DNAフラグメント /UV GelGreen™ Nucleic Acid Gel Prestaining Kit 1.5Kbトラッキングダイ （254 nm） 、青色光（470 nm）or 488 nm レーザー励起： 緑色フィ ルター 50bpトラッキングダイ 小 DNA/RNAフラグメント：PAGE ゲル/UV（254 nm） 、青色光（470 nm）or 488 nm レーザー励起：緑 色フィルター 品 番 31010 略号BTI 包 装 1 kit （ミニゲル100枚分） 1 kit （ミニゲル100枚分） 希望販売価格 ￥22,000 貯 蔵 3 ￥22,000 3 31012 1 kit （ミニゲル100枚分） ￥22,000 3 31013 1 kit （ミニゲル100枚分） ￥22,000 3 31011 MEMO 機 器 24 Cosmo Bio News No.79 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 CapiVate™ タンパク質相互作用LC-MS/MS解析受託サービス in situ 細胞内でターゲットタンパク質に結合するタンパク質をLC-MS/MS解析 ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン ターゲットタンパク質の細胞内シグナリングパスウェイにおける機能解析 タンパク質の大部分が単離された分子ではなく、高分子複合体の Part 2 ベイトタンパク質複合体の二重タグアフィニティ精製 （図2） 構成で生物学的機能を発揮します。これらの複合体は、多様な細胞 ・一次精製ステップ：Strepタグ 内または細胞外の刺激に応答し、大きく変化します。タンパク質の相 ・二次精製ステップ：HAタグ シ グ ナ ル 伝 達 互作用を理解するためには、複雑 な細胞内でのシグナルや代謝的 効果への寄与、タンパク質複合体 の解析が必須となります。 CaptiVate™ は、ターゲットタ ンパク質に関与するタンパク質複 合体の構成を同定するために開 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 発された最先端の質量分析ベー スの検出プラットフォームです。 図2 特 長 〈技術的な利点〉 ●低レベル発現のベイトでも生理学的条件を確実にします。 ・高感度かつ再現性のある精製方法 ●未変性タンパク質複合体の高効率で特異的な精製が可能です。 ・厳密な条件下でのStrep及びHAタグを使用した精製 ●LC-MS/MSによる複合体パートナーの徹底的な解析。 ・標準的なアフィニティ精製と比較して、バックグラウンドを大幅に ●非特異的なバックグラウンドを排除。 減少 ●高い信頼度で相互作用物質を評価。 Part 3 LC-MS/MSによるタンパク質複合体解析（図3） ・ダイレクトLC-MS/MSによるサンプル調製と解析 受託サービスの流れ ・ヒットはいくつかの検索アルゴリズムと統計学的な検証プログラ Part 1 ターゲットタンパク質を発現する安定細胞株の確立（図1） ムを使用して解析 ・ターゲットタンパク質をコードするcDNAを提供 ・広範なデータ解析と注解 ・cDNAを組込みベクターに入れ、クローニング ・完全なレポートと高い信頼度で評価した相互作用物質のリストを ・高い特異性を持つFlp-In方法による、宿主細胞のゲノムへの安定 バ イ オ メ デ ィ カ ル 提供 なコンストラクトの組込み ・ベイトを発現する安定細胞株の確立 ・ウェスタンブロッティングによるベイトタンパク質の検出 汎 用 図3 〈技術的な利点〉 図1 ・ペプチドシーケンシングに適した最先端のLTQ Orbitrap質量分析 〈特長〉 装置 ・同質遺伝子細胞株で均一な発現レベルが得られます。 ・包括的かつ的確なタンパク質の同定 ・ベイト発現はほぼ生理学的レベルと同等です。 ・独自の混入物データベースに対するデータの選別 ・HEK293細胞株が入手できます（他の細胞株は開発中です。ご照 ・標準タンパク質の質量分析による分析能の評価 会ください） 。 受 託 サ ー ビ ス ・5年以上のAP/MS経験者による解析 Dualsystems Biotech AG 略号DSB ■お見積もり・ご注文方法 本サービスをご利用いただく際には「事前見積もり」が必要になります。お見積もり依頼書はコスモ・バイオホームページ上（製品情報→受託 サービス） からダウンロードできます。また、お問い合わせいただければ、お見積もり依頼書をお送り致しますので、ご連絡をお願い致します。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.79 25 機 器 N ew TOPICS Products & Topics Gel Protein Recovery System GPR-800 8タンパク質、20分間、1台で、ゲルから同時回収！ in situ ［ ハ特 イ集 ブ］ リ組 ダ織 イ染 ゼ色 ー＆ シ ョ ン ゲルからタンパク質を回収していますか？ シ グ ナ ル 伝 達 GPR-800システムは、専用の微小流体用プラスチックチップを高 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 電圧中で使用し、8つの並列したマイクロチャンネル内で同時にタン パク質電気溶出を行うシステムです。バッファーに使用している界面 活性剤は独自に開発した質量分析機器用のものを使用し、質量分析 前の面倒な分解と除去をこれまでになく容易にしています。また、デ ッドボリュームを最小限に抑えたクローズドシステムとなっており、 コンタミネーションとは無縁のタンパク質回収が可能になります。 図1 GPR-800によってゲルから回収したミオグロビンのESI質量分析 各スペクトルはゲルへのロード量を1bから100naまで変えて検討した結果。Aはロード量が100naの際 のスペクトルだが、GPR-800であれば、クーマシーで可視化されるタンパク質スポットのほとんどからタン パク質を回収することができ、質量分析ができることを示す。 プロトコール ① 一次元または二次元アクリルアミドゲル電気 バ イ オ メ デ ィ カ ル 泳動を行い、目的のタンパク質のバンドまた はスポットを切り出します。 ② ゲル断片を専用のGPRチップにセットします。 （最大8サンプル） ③ GPRチップをGPR-800にセットし、スタート ■仕様 処理可能なサンプル数 基本的な処理時間 寸法 重量 使用環境（操作、保管） 電圧 電流 周波数 ヒューズ を押します。20分間でタンパク質が回収され 1∼8サンプル/ラン 20 分 33（W）x36（D）x23（H）cm 9 kg 温度：10∼50 ℃ 湿度：35∼85 ％ （結露のないこと） 100∼240 V 最大0.30 A 50/60 Hz Fast-acting, 250 V, 5x20 mm Mains Fusing：1A High Voltage DC Supply Fusing：200mA ます。 ④ MALDIマス解析、ESIマス解析を行います。 汎 用 バッファーに含まれる界面活性剤はマススペ クトロメトリー用に独自に開発されており、手 早く分解できます。 ■GPRアプリケーションキット GPRシステムでゲルからタンパク質を回収した後に使用しま す。各MS解析に必要な試薬・消耗品で構成されたキットです。 ※ “Surfactant Degradation Reagent” が全キットに入っており、 “GPR Electroelution Buffer” で 使われている界面活性剤 “AALS” を処理することができます。 品 名 特 長 ●最少で100ngのタンパク質を効率よく抽出できます。CBB染色 受 託 サ ー ビ ス ゲルから回収したインタクトタンパク質の質量分析が日常的に実 施できるようになります。 ●1台で8サンプルまでのゲル断片を20分以下で同時に処理するこ 品 番 GPR LC-MS Top-Down Prep Kit, Low MW GPR MALDI Intact Mass Meaurement Prep Kit, Low MW GPR LC-MS Bottom-Up Prep Kit, Low MW GPR MALDI Bottom-Up Prep Kit, Low MW 構成内容 GPR-050 ●C8 GPR SpinTips Prep Kit GPR-055 ●C8 SpinTips Prep Kit ●CHCA Ultrapure MALDI Matrix ●C8 LithTips Prep Kit ●C8 GPR SpinTips Prep Kit ●Trypsin Digestion Kit ●C8 GPR SpinTips Prep Kit ●CHCA Ultrapure MALDI Matrix ●Trypsin Digestion Kit ●C18 GPR LithTips Prep Kit GPR-060 GPR-065 とが可能です。100サンプル以上のゲル断片からのタンパク質回 収も1日で終了することができます。 Protea Biosciences, Inc. 品 名 GPR-800 Gel Protein Recovery System Protein GPRchip 機 器 GPR-800 Protein Recovery Reagent Bundle GPR LC-MS Top-Down Prep Kit, Low MW GPR MALDI Intact Mass Meaurement Prep Kit, Low MW GPR LC-MS Bottom-Up Prep Kit, Low MW GPR MALDI Bottom-Up Prep Kit, Low MW 26 Cosmo Bio News No.79 品 番 GPR-800 GPR-200 GPR-200-10 GPR-200-25 GPR-070 GPR-050 GPR-055 GPR-060 GPR-065 包 装 1 system 1 each 10 pack 25 pack 1 each 1 each 1 each 1 each 1 each 希望販売価格 ￥2,600,000 ￥10,000 ￥88,000 ￥195,000 ￥107,500 ￥28,000 ￥53,500 ￥47,500 ￥73,000 略号PTB 貯 蔵 3 3 3 3 3 5 3 3 3 6 3 6 http://www.cosmobio.co.jp FAX.03-5632-9619 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 Hope in the Laboratory 研究室のホープ まつもと ち ほ 37 vol. 東京農工大学 松本 千穂さん 共同大学院設置推進室 健康科学分野 特任助教 「患者さんに効能を実感してもらえるような薬の開発に貢献 骨粗鬆症を身近に感じ、学部生時代からその発症機構の解明に できたら――」静かにほほえむ松本さんの目は、好奇心に輝く。 EB-2 松本さんの研究テーマは骨代謝。患者の8割を女性が占める 取り組んでいる。現在のテーマは、骨粗鬆症のメカニズム解明 と治療薬・予防薬の開発をにらんだ研究の二本立てだ。柑橘類 等の天然由来因子から、骨粗鬆症予防につながる新しい因子の 細胞分子工学分野 宮浦・稲田研究室 東京農工大学 大学院生命工学専攻 発見を目指す。研究の手法は、動物実験から分子レベルの精査 宮浦・稲田研究室では、癌の骨転移、骨粗鬆症、歯周病、肥満等の生活習 まで多岐にわたる。 「生物ってすごく繊細で奥が深いなと感じま 慣病のメカニズム解明、治療薬や予防法の開発に取り組んでいる。研究室 す。ほんのわずかでも条件が変わると結果が全く変わってしま のモットーは「遺伝子から個体まで」。 「様々な領域で活躍する研究者を育 てるためには、遺伝子から個体まで総合的に判断できる能力が必要。遺伝 いますから」と松本さん。実験には正確な操作、そして対象の微 子解析から動物実験まで、研究テーマに向かってアプローチすることによ 妙な変化を敏感にとらえる集中力と平常心が必要だ。 「忙しい り総合力が身につきます」と宮浦先生は語る。研究室のメンバーは女性が からといって無理に感情を抑えたりせず、喜怒哀楽を素直に出 約40％、のびやかで活気ある雰囲気だ。それもそのはず、宮浦先生は女 性研究者養成プロジェクトの代表でもあり、男女を問わず、 プライベートも すほうが、平常心が保てて、実験にも集中できる気がします。実 充実させながらトップレベルの研究をとすすめる。 「夜中まで研究室に閉 験が成功して、研究室のメンバーと一緒に喜び合える瞬間は、本 じこもっちゃだめ（笑）。健康を損ねて健康の研究をするのは本末転倒で 当に幸せですね」。 すから」。広い視野と自由な感性でテーマに取り組む若き研究者達の、今 後の成果が期待される。 そんな松本さんが中学時代から続けているのが茶道だ。 「無 心になれるところが好きです。始めたころは意識しすぎて動き がかたいと注意されていましたが（笑）」。映画を見て思い切り 泣いたり笑ったりするのも気分転換のひとつになっている。最 近はミニシアター系のヨーロッパ映画がお気に入りだ。心を解 放し、柔らかな感性を保つことが、研究者に不可欠な集中力とひ らめきを養っているのだろう。 宮浦 千里 教授 研究室の皆さん Cosmo Bio News No.79 27 17A 18 18 COSMO BIO NEWS 18A EB-2 19 19 COSMO BIO NEWS 19A EB-2 20 20 COSMO BIO NEWS 生き物の繊細さに目を向け、やわらかな感性で 骨粗鬆症予防につながる新発見を目指す。 新規抗体商品のご案内 抗体名 3BP2 53BP2 5HT1B A ACC2 ACCN1 ACCN2 ACOX3 ACTA1 ADO ADPRHL 2 AIP 2 ALK 2 ALK 3 AMPA 1 AMPD3 AMZ 2 ARF 1 / 3 ARH ASAP 3 AST ATL 2 Barkor BHD BICD2 BIN 2 BNIP2 BORG4 BPIL2 BRE BSN BTN2A2 CACNA1E CACNA1G CACNG4 CASP13 CATB CATD CBLC CCXCR 1 CENPQ CENPT CENTG1 / PIKE CEP 76 CEP135 CEP192 CFHR3 CHCHD4 CHN2 CILP 2 CK1 CKAP4 CLAML4 CLCN1 CLCN3 CLDN11 CLDN20 CLDN3 CLEC 1 CLIP 115 Clonidine CLRN1 CLTA / CLTB CMA1 CNRIP 1 CPA4 CRHSP 24 CRTC 1 CTRC CTRP 9 CTSA CUL 9 Cullin 4B CYK18 DAGLB DAO1 DAPP DBX2 Defensin β1 DHX 57 DHX 58 28 Cosmo Bio News No.79 略号 SCB SCB RSD A EPT OSS OSS SCB ABV PGI PGI SCB RLT RLT OSS ABG PGI BCH SCB ABV ABV PGI B ABG BET ABG PGI BWT BET ABG SCB OSS PGI C OSS ABV OSS ABV ABG ABG LFR LFR RKL BET LFR BET BET BET PGI SCB EVR SCB PSC PGI PGI OSS OSS ABV ABV ABV SCB SCB LSP ABG ABV ABG PGI ABG PSC LFR ABV ALX ABV ABV LFR ABG D ABV ABV PSC SCB SRT BET ABV ここに掲載しております商品はごく一部です。コスモ・バイオホームページ上“商品検索”をご利用ください。 品番 SC-166636 SC-135818 MAB5858 包装 希望販売価格 200 B ¥51,000 50 B ¥51,000 100 B ¥42,000 2666-1 OSA00066G OSA00067G SC-98515 MAB2075 16479-1-AP 16504-1-AP SC-166239 101-M173 101-M174 OSA00097W AP7869C 16664-1-AP Z8050031 SC-130692 PAB11289 PAB10180 16688-1-AP 100 E 500 B 500 B 200 B 100 E 150 E 150 E 200 B 100 B 100 B 100 E 100 B 150 E 100 B 100 B 100 B 1C 150 E ¥60,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥51,000 ¥47,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥51,000 ¥51,000 ¥51,000 ¥48,000 ¥42,000 ¥68,000 ¥57,000 ¥51,000 ¥52,000 ¥52,000 ¥68,000 AP1832A A302-408A AP7761B 14245-1-AP BS3484 A302-379A AP7428A SC-98896 X OSB00024W 16482-1-AP 100 B 100 B 100 B 150 E 100 B 100 B 100 B 200 B 100 E 150 E ¥42,000 ¥68,000 ¥42,000 ¥68,000 ¥52,000 ¥68,000 ¥42,000 ¥51,000 ¥48,000 ¥68,000 OSC00085W PAB9797 OSC00110W PAB9822 AP7367C AP7368C LF-PA40210 LF-PA41275 200-401-B48 A302-313A LF-PA40254 A302-326A A302-250A A302-324A 16583-1-AP SC-98628 EB05207 SC-98878 32-137 16686-1-AP 15894-1-AP OSC00145W OSC00146W PAB11620 PAB11622 PAB11623 SC-99050 SC-135869 LS-C85761-500 AP7339B PAB11423 AP7655B 16827-1-AP AP7338B XW-7123 LF-PA40291 MAB2210 213-003-C100 PAB9959 PAB10227 LF-PA50136 AP7376B 100 E 100 B 100 E 100 B 100 B 100 B 50 B 50 B 100 B 100 B 50 B 20 B 100 B 100 B 150 E 200 B 100 B 200 B 100 F 150 E 150 E 100 E 100 E 500 E 500 E 100 E 200 B 50 B 500 E 100 B 100 B 100 B 150 E 100 B 50 B 50 B 100 B 100 B 100 E 100 E 100 E 100 B ¥48,000 ¥47,000 ¥48,000 ¥52,000 ¥42,000 ¥42,000 ¥70,000 ¥70,000 ¥55,000 ¥68,000 ¥70,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥51,000 ¥40,000 ¥51,000 ¥88,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥47,000 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M OSS ABV O ABG P SCB PGI ABV ABG ASD ASD PGI OSS OSS PGI SCB OSS R OSS S ABG ABG ABV APB RSD ABG PGI ABV ABV PGI PGI PGI GNW ABG 品番 PAB10201 210-530-R050 SC-137192 SC-134323 15949-1-AP PAB11642 包装 希望販売価格 100 B ¥52,000 50 E ¥42,000 200 B ¥51,000 100 B ¥51,000 150 E ¥68,000 100 E ¥47,000 PAB11124 MAB2202 16429-1-AP SC-130919 EB09259 500 E 100 B 150 E 200 B 100 B ¥47,000 ¥47,000 ¥68,000 ¥51,000 ¥62,000 AP6517A 100 B ¥42,000 OSG00020W OSG00017W OSG00021W OSG00019W AP7498C PAB11531 A302-382A 16700-1-AP PAB9896 LF-PA40834 PAB9632 100 E 100 E 100 E 100 E 100 B 100 B 20 B 150 E 100 B 50 B 100 E ¥48,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥42,000 ¥47,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥47,000 ¥70,000 ¥52,000 Z8050028 Z8050029 16925-1-AP 15631-1-AP AP2777C 100 B 100 B 150 E 150 E 100 B ¥57,000 ¥57,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥42,000 AP1987B AF5629 100 B 100 B ¥42,000 ¥75,000 OSP00023W OSP00024W MAB2194 LS-A9847-50 MK05540310 SC-84863 OSK00004W MAB2087 E18310 100 E 100 E 100 B 50 B 100 B 100 B 100 E 100 E 100 E ¥48,000 ¥48,000 ¥64,000 ¥62,000 ¥50,000 ¥51,000 ¥48,000 ¥47,000 ¥26,000 AP7328A PAB10260 LS-A9856-50 100 B 1C 50 B ¥42,000 ¥52,000 ¥62,000 OSM00065W PAB8968 100 E 100 B ¥48,000 ¥52,000 AP7473C 100 B ¥42,000 SC-130556 16082-1-AP PAB10311 AP2836B 905-800-100 905-034 16937-1-AP OSP00008W OSP00007W 14166-1-AP SC-135717 OSP00020W 200 B 150 E 1C 100 B 100 B 100 E 150 E 100 E 100 E 150 E 100 E 100 E ¥51,000 ¥68,000 ¥52,000 ¥42,000 ¥53,000 ¥37,000 ¥68,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥68,000 ¥51,000 ¥48,000 OSR00308W 100 E ¥48,000 AT3851A AT3859A PAB10378 Y054863 AF5638 AT3935A 16597-1-AP PAB5580 H00004184-M04 13646-1-AP 13512-1-AP 14977-1-AP CB18-202-335483 AP2816C 100 B 100 B 50 B 100 E 100 B 100 B 150 E 100 B 100 B 150 E 150 E 150 E 100 B 100 B ¥66,000 ¥66,000 ¥47,000 ¥92,000 ¥75,000 ¥66,000 ¥68,000 ¥47,000 ¥47,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥62,000 ¥42,000 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 略号 ABV PGI ABG ABV PGI PGI LSP ABV ABG ABV ABG ABG ABG ABG SPS 抗体名 SORBS2 SPATA19 SPDEF SUA7 SUCLA1 SUCLG2 Sulfatase 2 SULT1C4 SUPT3H SYF2 SYMPK SYN1 SYNGR2 SYNJ2 Syntaxin 18 品番 H00008470-B01P 16656-1-AP AT4018A PAB1165 14923-1-AP 14240-1-AP LS-C81365-100 PAB2536 AP2819C PAB6282 AT4118A AT4119A AT4122A AT4124A 110 183 Catch up ! 包装 希望販売価格 50 B ¥47,000 150 E ¥68,000 100 B ¥66,000 50 E ¥47,000 150 E ¥68,000 150 E ¥68,000 100 B ¥87,000 100 B ¥47,000 100 B ¥42,000 100 B ¥47,000 100 B ¥66,000 100 B ¥66,000 100 B ¥66,000 100 B ¥66,000 50 B ¥87,000 抗体名 略号 T ABG BET BET APB BET OSS OSS ABG APB ABG ABV PGI ABG PGI TAF1A TAF2 TAF3 TAN1 Tankyrase 1 TAS2R4 TAS2R7 TBB5 TBPIP TCAP TERF 2 TFAP2B TFB1M TFCP2 品番 AT4143A A302-131A A302-359A Y054229 A302-398A OST00280W OST00282W AP7858A Y055351 AT4174A MAB0074 13183-1-AP AT4215A 15203-1-AP 包装 希望販売価格 100 B 100 B 100 B 100 E 100 B 100 E 100 E 100 B 100 E 100 B 100 B 150 E 100 B 150 E ¥66,000 ¥68,000 ¥68,000 ¥92,000 ¥68,000 ¥48,000 ¥48,000 ¥42,000 ¥92,000 ¥66,000 ¥47,000 ¥68,000 ¥66,000 ¥68,000 終末糖化産物AGE認識抗体 AGEs認識抗体を続々ラインアップ！ AGEは、還元糖とタンパク質との間の非酵素的糖化反応（メイ における酸化の指標としても注目されています。また、CELは糖代謝 ラード反応）の後期段階で生成する構造体の総称であり、種々の生 経路から生成するメチルグリオキサールとタンパクの反応から生成 体組織に加齢に依存して蓄積すること、また、糖尿病合併症や動脈 し、ヒト水晶体タンパクに加齢に伴って蓄積が増加することが報告 内に顕著に蓄積していることから、動脈硬化の進展にはグリコール lysine（CEL） 、GA-pyridine lysine（CML） 、Nε（carboxyethyl） - アルデヒド（GA）によるタンパクの修飾が関与していると考えられて 等が存在しており、これらのAGEsを特異的に認識する抗体がコス います。これらのAGE構造体を特異的に認識する本抗体をぜひお モ・バイオの抗体ブランド「CAC」から販売開始されました。CML 試しください。 は脂質の過酸化反応からも生成することが報告されており、生体 提供者：日本女子大学食物学科生化学・食品機能科学 講師 永井 竜児 先生 （492 nm） （492 nm） されています。GA-pyridineは動脈硬化巣の泡沫化マクロファージ れています。既知のAGE構造体としては、Nε（carboxymethyl） （492 nm） 硬化等の加齢関連疾患でAGEの蓄積が有意に増加することが知ら 抗 体 濃 度 抗 体 濃 度 図1 抗CML抗体（2G12） 図2 抗 体 濃 度 抗CEL抗体（CEL-SP） 図3 抗GA-pyridine抗体（2A2） コスモ・バイオ株式会社 品 名 Anti Nε（carboxymethyl） lysine（CML） Anti Nε（carboxyethyl） lysine（CEL） Anti GA-pyridine Catch up ! 免疫動物 Mouse Mouse Mouse アイソタイプ IgG1 IgG1 IgG1 クローン番号 2G12 CEL-SP 2A2 適 用 WB, IHC, ELISA WB, IHC, ELISA WB, IHC, ELISA 品 番 JWU-M01 JWU-M02 JWU-M03 包 装 100 E 100 E 100 E 略号CAC 希望販売価格 ￥50,000 ￥50,000 ￥50,000 貯 蔵 5 5 5 TNFα抗体 クローン5N クローンT1に比べて、30倍の阻害活性を示します！ モノクローナル5N抗体はTumor Necrosis Factor α（TNF α） に反応します。TNFαはホモ三量体の17KDaのタンパク質で、 抗TNFα抗体クローン 5Nは、新しい強力なTNF阻害モノクロー ナル抗体です。 疾患や代謝機能の強力な伝達物質です。TNFαは、in vivoにおい て癌ネクローシスを引き起こし、in vitroにおいて癌細胞に対して 細胞溶解活性を示します。 サイトカインTNFαは様々な疾患や免疫過程において中心的な メディエーターとされています。微生物の様々な生産物や、様々 なサイトカインによって誘導されるだけでなく、多くのサイトカイ 図1 阻害特性はアクチノマイシンD L929テスト によって評価した。 ンの生産にも影響を及ぼします。 Hycult Biotech 品 名 Anti TNF α クローン番号 5N 5N お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 免疫動物 Mouse Mouse FAX.03-5632-9619 種交差 Human Human 適 用 Inhibition,ELISA Inhibition,ELISA 品 番 HM2218 HM2218-05 包 装 100 B 500 B 略号HCB 希望販売価格 ￥56,000 ￥186,000 貯 蔵 4 4 Cosmo Bio News No.79 29 2009年シグナル研究のハイライト コスモ・バイオでは、学術誌Scienceで知られるAAAS（American Association for the Advancement of Science ； 米国科学振興協会） との共同事業として、 シグナル伝達研究 領域のオンラインジャーナル“Science Signaling”の日本におけるオフィシャルサイト“Science Signalingジャパン”をコスモ・バイオホームページ内に開設し、毎週更新されるScience Signaling情報の一部をいち早く日本語にてご紹介しております。今回は、2010年の年頭に あたり、前年のシグナル伝達研究領域のハイライト記事“Breakthroughs of the year 2009” を、AAASの特別協力を得て、 ご紹介致します。 2009：シグナル伝達の 「ブレークスルー ・オブ・ザ・イヤー」 2009: Signaling Breakthroughs of the Year Elizabeth M. Adler Senior Editor of Science Signaling, American Association for the Advancement of Science, 1200 New York Avenue, N.W., Washington, DC 20005, USA 【要約】本年のシグナル伝達ブレークスルー・オブ・ザ・イヤー の候補には、生理学、治療法と医薬品の開発、神経科学、及び植物のシグナル伝達が含まれる。 Science Signaling 編集部は、シグナル伝達ブレークスルー・オブ・ザ・ イヤーで、細胞シグナル伝達研究の新年、そして新たな10年へと読者の皆 様を歓迎する。この年1回の特集号では、Science Signaling 編集部委員 と他の細胞シグナル伝達の研究者に、シグナル伝達の今年のブレークス ルー、すなわち、シグナル伝達の分野における前年の最もエキサイティング な進歩を報告した論文を推薦してもらっている。2009年は Science Signaling が一次調査論文の発表を開始してから初めての丸一年間であっ た。Science Signaling に発表された複数の論文が、シグナル伝達におけ る最もエキサイティングな研究の例として推薦されたことに、我々は感激を 覚えている。2009年シグナル伝達ブレークスルー・オブ・ザ・イヤーの候 補を挙げてくださった全ての科学者の皆様に感謝申し上げ、細胞シグナル 伝達における革新的な進歩について今年の簡単な一覧を掲載させていた だく。候補を挙げてくださった方は、以下のとおりである。Joanne Chory （ソーク研究所、USA） 、Gilberto Fisone（カロリンスカ研究所、スウェー デン） 、David Fruman（カリフォルニア大学アーバイン校、USA） 、Rune Linding（癌研究所（ICR） 、イギリス） 、Gerard Manning（ソーク研究所、 USA）、御子柴克彦（理化学研究所 脳科学総合研究センター）、Norbert Perrimon（ハーバード大学医学部、USA） 、Solomon Snyder（ジョンズホ プキンス大学、USA） 、Eric Vivier（マルセイユ-ルミニ免疫学センター、フ ランス） 、Peter Vogt（スクリプス研究所、USA） 、John Walker （ミズー リ大学、USA） 、Michael Yaffe（マサチューセッツ工科大学、USA） 、及び Jean Zhao（ダナ・ファーバー癌研究所／ハーバード大学医学部、USA） 。 今年の候補には、シグナル伝達経路の従来の境界を覆す研究の治療応用、 免疫抑制薬が中年マウスの寿命を延ばすことができたという発見、植物ス トレスホルモンのアブシジン酸の受容体の同定、統合失調症と学習に関す る新たな洞察、ヒト気道上皮細胞が有害物質を「味わう」という発見、遺伝子 にコードされた光活性化が可能なタンパク質を用い、多様な細胞過程の正 確な時空間的制御を可能にする技術、そして細胞シグナル伝達における他 の刺激的な多くの発見が含まれる。 シグナル伝達研究の展望の1つには、癌等のヒト疾患に関連する機能異常 応答を媒介する経路をより良く理解することによって、より新しく、有効で、 選択的な治療がもたらされる可能性があることが挙げられる。ヒトの多く の癌は、RASファミリーのグアノシントリホスファターゼ（GTPase）の活性 化変異を有する。実際に、KRASはヒトの癌において最も共通に活性化さ れている腫瘍タンパク質である。しかし、腫瘍形成性KRASと既知の下流 エフェクターは、今までのところ、抗新生物薬にとっては手に負えない標的 である。Fruman、Manning、Vogt、及びZhaoは、腫瘍形成性KRASに関 連するタンパク質と経路を同定した複数の研究グループによる論文を候補 に挙げた。これらの研究は、例えば、従来は「RASシグナル伝達経路」の一 部として考えられなかったキナーゼ等、新たな治療標的をもたらし、抗癌療 法をより容易にする可能性がある（1-6）。ハイスループットRNA干渉（RNAi） スクリーニングを用い、Barbieら、Luoら、及びSchollらは、腫瘍形成性 KRASとの合成致死性相互作用に関与するキナーゼ（それぞれTBK1、 PLK1、及びSTK33）を同定した（1, 2, 4）。Singhらは、別のアプローチをと って、腫瘍形成性KRASシグナル伝達に生存を依存する癌細胞に特徴的な 遺 伝 子 発 現 特 性 を 定 義 し 、そ れ に よって 、キ ナ ー ゼ S Y K 及 び R O N （MST1Rとしても知られる）を治療標的候補として同定した（5）。これらの研 究は、 「腫瘍形成性Rasシグナル伝達」の限界を広げた点で注目に値する。 30 Cosmo Bio News No.79 例えば、TBK1が核因子κB （NF-κB） シグナル伝達経路を活性化する一方で、 PLK1は有糸分裂キナーゼである。Meylanらによる論文は、NF-κBシグナ ル伝達を肺癌のマウスモデルにおける腫瘍増殖にきわめて重要であると意 味付け、さらに、NF-κBシグナル伝達の抑制は、腫瘍形成性KRASが誘導す る腫瘍に対して期待できる治療選択肢になるかもしれないという考えを立 証した。 SchollらとBarbieらによる研究にコメントを添える中で、Manningは、 次のように述べている。 「大規模なRNAiスクリーニングによって、キナーゼ STK33及びTBK1は、KRAS誘導性腫瘍に特異的に、増殖に必要不可欠で あることが確認された。このようなスクリーニングは、あまり機能がわかっ ていない多くのヒト遺伝子 （STK33は事実上その機能が記述されておらず、 TBK1はあまり知られていないIκBキナーゼのパラログである）の重要性、 そして明白な線形シグナル伝達経路を超えた視点で、可能性のある新しい 治療標的を見いだすことの大切さをよく浮き彫りにしている。 」 「明白な線形シグナル伝達経路」を超えた視点の重要性は、in vivo の状況 をより現実的に反映する複雑なネットワークへのシグナル伝達において研 究者にはよく認識されており、そのような研究を可能にする方法の出現と 共に、昨年のシグナル伝達ブレークスルーに現れたテーマであるが、今年 も他の複数の候補論文によって強調された。Manningは、2つめの候補研 究にChangらによる論文を選んだ。Changらは、RASシグナル伝達ネット ワークを分解してモジュール［ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ （PI3K）によるAKTのリン酸化や活性化のようなシグナル伝達活性の単位］ にし、特定のモジュールには異なる癌のクラスでの異なるRAS機能に対し て特異的な重要性があることを示した（7）。もちろん、このような非線形解析 は、細胞シグナル伝達に対する我々の視点をとてつもなく複雑化する。 Manningはこれを皮肉って次のようにコメントした。 「ヒートマップという 万華鏡は、シグナル伝達の緻密な詳細がもはや二元的でも明瞭でもなく、 統計学的解析のレンズを通してしか見ることができないこと、すなわち幸せ な革新というよりは悲運の前触れかもしれないというがっかりするような反 応を起こさせる。 」 （図1） 。Perrimonは、マウス樹状細胞の病原体に対する 転写応答を支配する調節ネットワークを定義したAmitらによる論文を候補 に挙げ（8）、次のように述べている。 「この論文は、細胞への刺激、この場合に は病原体による刺激に対する転写応答を制御する調節ネットワークのロジッ クを徹底的に調べるために、新しい定量的ゲノミクス方法論と計算ツール を系統的に適用することの力を例示するものである。将来、この一般的で バイアスのない方法を、例えばシグナル伝達リガンド等の他の刺激に対して 適用することが、シグナル伝達のロジックを解くためのとっておきの方法に なる可能性が高い。」Lindingは、いくつかの候補の1つにSchoeberlらの 論文を選んだ。この論文では、ErbBファミリーのシグナル伝達ネットワーク の計算的解析を用いて、リガンド刺激されたErbBからPI3Kへのシグナル 伝達と関連する癌の期待できる治療標的として、触媒活性のあるErbB3を 同定した（9）。Lindingはこの研究を「先駆的」と表現し、 「ネットワーク生物学 に基づく創薬は絶対に必要であり、極めて強力であることを示した」と述べ た。言及に値する他のネットワークレベルの研究としては、2つの相互作用 している細胞集団におけるシグナル伝達を、同時にかつ独立に観察する技術 を適用することによって、EphB2-エフリンが媒介する細胞間コミュニケー ション（組織形成にとって極めて重要な系）について解析したJørgensenら による研究（10）、及びショウ ジョウバエ（Drosophila）に おけるNotchシグナル伝達 を 解 析 して 個 体 全 体 の RNAiスクリーニングを示 したMummery-Widmerら の研究（11）等がある。 図1 ヒートマップがシグナル伝達の 複雑さをあばく。ヒートマップは、タン パク質相互作用ネットワーク ［shown here as data from Humphries et al（15 . ））、転写調節、リン酸化状態等の 様々なタイプの調節を反映することが でき、細胞調節系の複雑さを明らかに する。 ［Credit： Adam Byron/University of Manchester］ この種のネットワークレベルの解析は、大量のデータの迅速な蓄積と解 析を可能にする方法論に大きく依存するため、Science Signaling 科学編 集長Michael Yaffeは2009年を「データ・ダンプの年」と宣言した。 Yaffeは、特定の知見を2009年のシグナル伝達ブレークスルーとして推薦 するのではなく、データベースへの情報の蓄積、特に翻訳後修飾の大規模 なデータセットを今年のブレークスルーとして注目した。Yaffeは、この点 で特に顕著な功績としては、 「リジンアセチル化の包括的研究（12）、酵母にお けるCDK1基質の同定（13）、細胞の『受け（receiving） 』 『渡し（sending） 』に おいてエフリンが誘導する異なるチロシンリン酸化タンパク質（10）、T細胞シ グナル伝達のホスホプロテオミクス（14）、及びインテグリンシグナル伝達複合 体のプロテオミクス解析（15）がある」とコメントした。 データの蓄積及び解析における進歩はまた、進化への新たな洞察を可能 にした。原生生物の襟鞭毛虫（Monosiga brevicollis）におけるチロシン キナーゼシグナル伝達ネットワークに関する自身の論文が昨年のシグナル伝 達ブレークスルーの候補に挙がったManningは、酵母におけるサイクリン 依存性キナーゼCDK1によるリン酸化部位の進化に関するHoltらの論文（13） を推薦した。 「質量分析法のさらなる進歩のおかげで、この論文は、酵母に おいて全タンパク質の（しばしば引用される数字である）30％がリン酸化 されていることをついに立証した。類似する論文によって、さらに他の生物 種、多くのタイプの組織、生理学的状態にまでカタログが作成され、この研 究が掘り下げられると確信する。CDK1シグナル伝達に注目が集まってい るが、この部位カタログの広がり自体だけでもブレークスルーに値する。こ れらのリン酸化部位の保存に関する最初の解析では、大部分のリン酸化部 位が進化的に不安定であり、機能的に必須ではないか、あるいはタンパク質 配列内で可動的であることが示唆された。これらの部位の規模と不安定さ から、単純なモデル系においてさえもタンパク質リン酸化の包括的な調節 と機能を理解することがどれほど挑戦的であるのかがわかる。 」 Tanらの一組の論文は、タンパク質リン酸化ネットワークの進化へのさら なる洞察を示した。1報めは、ヒト及び複数のモデル生物におけるタンパク 質リン酸化の比較プロテオミクス及びネットワーク進化の研究（16）について 述べ、ヒト疾患への洞察をもたらした。2つめの研究からは、チロシン欠損 がシグナル伝達系のノイズの制御機構を提供するかもしれないことが示唆 された（17）。 多様な増殖因子受容体の下流で作用するPI3Kを介するシグナル伝達は、 ヒトの癌の発症機序、ならびに様々な非哺乳類生物における老化と関連付 けられてきた。これは、TOR（target of rapamycin：ラパマイシンの標的 タンパク質）キナーゼを介するシグナル伝達についても同様である。TOR キナーゼは、PI3K-AKT経路からのシグナルを栄養状態に関する情報と統 合して、細胞の成長及び増殖を制御する。PI3K-AKT経路及びTORシグナ ル伝達に関する我々の理解の進歩は、過去のシグナル伝達ブレークスルー で大きく取り上げられており、2009年も例外でない。PI3Kシグナル伝達、 AKTシグナル伝達、TORシグナル伝達、あるいはこれら3つの組み合わせ に関連する研究は、Fruman、Manning、Snyder、Vogt、及びZhaoから の推薦を獲得した。Zhaoは、PI3Kシグナル伝達経路のこれまでは知られ ていなかった調節因子を同定した3つの研究を候補に挙げた。Yangらは、 E3ユビキチンリガーゼTRAF6がAKTユビキチン化を促進し、それによっ てAKTの膜への動員とリン酸化を促進することを明らかにした（18）。これは、 以前は主に自然免疫応答における役割が知られていたTRAF6を、腫瘍形 成性PI3Kシグナル伝達に関連付ける可能性のある特性である。Fineらに よる研究から、グアニンヌクレオチド交換因子（GEF）P-REX2a（phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate RAC exchanger 2A：ホスファ チジルイノシトール3,4,5-トリスリン酸RAC交換因子2A）が腫瘍抑制因子 PTEN（phosphatase and tensin homolog on chromosome 10：第 10染色体上ホスファターゼ・テンシン・ホモログ） と相互作用して活性を阻 害することによって、PI3K経路の活性化を促進する（19）ことが示された。 PTENは、よく知られた腫瘍抑制因子であり、ホスホイノシトール-リン酸脂 質を脱リン酸化することによって、PI3K経路を介するシグナル伝達を制限 する。3報めのGewinnerらによる論文は、脂質ホスファターゼINPP4B （inositol polyphosphate 4-phophatase type II：タイプIIイノシトール ポリリン酸4-ホスファターゼ）を、PI3K経路における可能性のある2つめの 腫瘍抑制因子として同定した（20）。Gewinnerらは、PTEN及びINPP4Bの 二重欠損が、ヒト乳腺上皮細胞の老化を促進することを示した。さらに興味 深いことに、かなりの割合の基底様乳癌及び卵巣癌に、INPP4B遺伝子座 のヘテロ接合性欠失がみられることを明らかにした。VogtはPI3Kシグナ ル伝達の焦点を免疫系に移し、成熟B細胞の生存がPI3K経路だけに依存し ているという驚くべき発見をしたSrinivasanら（21）の研究を候補に挙げた。 この研究は、B細胞抗原受容体（きわめて重要な生存シグナルを媒介する） を欠損した成熟B細胞の生存が、恒常的活性化型PI3KあるいはPTENの欠 損によって救済されることを示した。この研究を説明する中で、Vogtは次 のように述べている。 「この論文は、基本的な結論を裏付ける見事に洗練さ れた遺伝子的アプローチが際立っている。 」 前年の研究発表を振り返り、どの研究が最も予想外であったか、どの研究 が将来の研究の方向性を決める可能性が最も高いかを熟考する過程は、こ とによると本質的に、時の流れを感じさせるものである。したがって、 Fruman、Manning、及びZhaoが全員、TOR阻害薬ラパマイシンを若くな いマウス（人間の約60歳に相当するマウスで開始）に摂取させると寿命が かなり延長する（22）ことを示したHarrisonらの論文に言及したのは意外で はないかもしれない。Manningは「中年時代が何年も延びることにワクワ クしない人がいるだろうか！」と表現し、この論文は「通常、大部分は細胞培 養において不十分にしか研究されない分野における薬理学的及び全個体的 介入の珍しい例」と付け加えている。Frumanは、 「mTORとその基質が老 化を促進するという発見」に関するHarrisonら、Chenら、Selmanら、及び Zidらの論文を候補に挙げる際に、次のようにコメントしている。 「インスリ ン及び関連ホルモン受容体によるPI3Kの活性化は、様々な生物において 老化を促進することが知られている。ハエ及び線虫のモデル系において、 FOXO転写因子とTORは、寿命制御と関連のあるPI3Kシグナル伝達ネット ワークの2つの異なる中核をなしている。本年は、3つの論文によって、マウ スにおけるTORシグナル伝達の抑制が寿命を延ばすことが示された（22-24）。 これらの論文のうちの1つでは、遺伝学的アプローチ（TOR複合体-1 （TORC1）の基質S6K1の除去（24））を用いている。他の論文では、現在炎 症性疾患や癌に対して臨床応用されているTORC1阻害薬ラパマイシンを 用いている（22, 23）。これらは、個体老化における哺乳類のTORシグナル伝達 の役割を示した最初の研究である。別の重要な研究では、ハエにおいて、異 なるTORC1基質（4E-BP）が特定のmRNAの翻訳を促進することによって 寿命を制御することが示された（25）。これらの進歩は、TORやその基質を標 的とする分子を用いた抗老化薬物療法の開発へ新たな扉を開くものであ る。 」様々な生物において寿命を延ばして老化を先延ばしする操作である食 事（すなわちカロリー）制限は、多様な腫瘍の発生や増殖を低減することも 発見されている。このテーマの最終候補として、ZhaoはPI3K経路を食事 制限の腫瘍抑制効果に関連付けたKalaanyとSabatini（26）の論文を推薦し た。興味深いことに、KalaanyとSabatiniは、恒常的活性化型PI3Kシグナ ル伝達を有する腫瘍が食事制限の有効性に対して抵抗性であるのに対して、 PTENを欠く癌細胞株にPTENを導入したり、恒常的活性化型変異PI3Kで 野生型PI3Kを置き換えたりすることによって、感受性が回復することを発 見した。 Snyderはまた、AKT-mTOR経路の研究にも注目し、統合失調症に直接 関連付けられた最初の遺伝子disrupted-in-schizophrenia 1 （DISC1） が、 AKT活性化を抑制することによって成体海馬における新生神経細胞の発達 を調節することを示したKimら（27）の研究を候補に挙げた。注目すべきこと に、DISC1ノックダウンに伴う発達障害は、ラパマイシンによって救済可能 であった。Snyderは、足場タンパク質DISC1が神経発生に関与することが 示されたと述べ、さらに詳しく言及した。 「mTOR栄養系を調節することが よく知られているAktが、発達障害として広く認識されている統合失調症と も関連付けられた。この論文は、成体海馬の新規発生神経細胞における DISC1の抑制がAktの過剰活性化を引き起こすことを示している。DISC1 欠損に伴う神経発生異常とAkt過剰発現に伴う異常は非常によく似ている。 これらの2つの系を相互に関連付けることによって、神経発生について多く のことが明らかになり、統合失調症の基盤をなす発達異常の解明に役立つ かもしれない。 」 Snyderと同様に、Fisoneは中枢神経系に留意して、Paganiらの研究を 推薦した。この研究は、RASの活性化からマイトジェン活性化プロテインキ ナーゼ（MAPK）シグナル伝達経路を促進するチロシンホスファターゼの SHP2［Src homology 2（SH2）domain-containing protein tyrosine phosphatase 2：Srcホモロジー2（SH2） ドメイン含有タンパク質 チロシンホスファターゼ2］のハエのホモログを、ショウジョウバエの長期記 憶の獲得に関連付けた（28）。休憩を間に入れて分割した訓練は、同等の訓練 をひとまとめに行うよりも効率的に記憶を引き出す。この現象は 「分散効果」 として知られる。Paganiらは、このような間に入れる休憩の長さがSHP2 活性に依存し、MAPKシグナル伝達を延長するSHP2機能獲得変異が長期 記憶を損なうことを発見した。Fisoneは次のように説明する。 「MAPK経路 は、 （中略）休憩期間中に活性化され、次の試行への曝露に際して ［ベースラ インに］ リセットされる。SHP2の機能獲得変異はMAPK活性化を延長する Cosmo Bio News No.79 31 ことによって、MAPKのリセットを阻害する。面白いことに、変異SHP2を 薬理学的に部分阻害すると、この系をリセットして長期記憶の形成を回復さ せるのに十分な程度にまでMAPK活性が低下する。 」彼は、SHP2の機能獲 得変異は、学習障害及び軽度精神遅滞を伴う遺伝性疾患のヌーナン症候群 と関連付けられたと述べ、次のようにコメントした。 「MAPKシグナル伝達 の活性化は、長期行動応答に必要かつ重要な要素であると考えられる。こ の研究は、このシグナル伝達経路の効率的で時間的に管理された不活性化 が、これらの過程において同じくらい重要であることを見事に示している。 」 中枢神経から末梢神経機能に目を移し、Vivierは、副交感神経活性を免疫 系の発達と結びつけたvan de Pavertらの研究（29）を候補に挙げた。ビタミ ンA代謝物のレチノイン酸は、神経系の発達にきわめて重要であり、近隣の ニューロンから放出される可能性が高い。レチノイン酸は、リンパ組織誘導 細胞のクラスター形成に必要なケモカインの発現及び産生を刺激し、それ によってリンパ節発生の開始を促進した（29）。Vivierはまた、Ivanovら（30）の 論文を候補に挙げた。この論文は、共生微生物と胃腸（GI）管にそれらが生息 する哺乳類の関連性に新たな光明を投じたものであり、マウスGI管に特定 の微生物、すなわちセグメント細菌を定着させるだけで、小腸の粘膜固有層 において特定クラスのリンパ球（インターロイキン-17（IL-17）及びIL-22 を分泌するヘルパー 図2 腸のセグメント細菌 T細胞（Th17細胞））の ［Reprinted from Cell ,139, 485-498 （2009）, 蓄積が誘導され、腸病 I.Ivanov, et al, Induction of 原体に対する防御が得 Intestinal Th17 Cells by Segmented Filamentous られることを示した（図 Bacteria, with permission from Elsevier.］ 2） 。 ChoryとWalkerは、植物シグナル伝達の分野において前年中に現れた最 もエキサイティングな研究として、干ばつのような環境ストレスに対する反 応を調節する植物ホルモンのアブシジン酸（ABA）の受容体の同定を候補 に挙げることで意見が一致した（31-41） （図3） 。この発見をもたらした一連の研 究は、Maら（31）及びParkら（32）の論文が発端となった。これらの論文では、 PYR/PYL/RCARタンパク質ファミリーのメンバー（PYR、PYL、RCAR は、それぞれpyrabactin resistance、PYR-like、regulatory components of ABA receptor）がABA受容体として作用することが示唆され た。続いて、Fujiiらがin vitroでシグナル伝達経路を再構築し（33）、複数のグ ループがABA受容体の結晶構造（34-38）を報告し た。Walkerは候補を挙げるにあたって、 「何年 もの間、植物ホルモンABAの受容体を同定し たと主張する報告がいくつもあった」と述べて 次のように続けた。 「複数のタイプのABA受容 体が存在する可能性は依然としてあるが、これ らの論文が示した研究は、植物の成長及び発 達のホルモンによる調節に関する我々の理解 図3 二量体PYR1の結晶構造。PDB ファイル3K3Kに基づく構造 における主要なブレークスルーである。 」 ［Credit： Yana Greenman/AAAS］ 今年のシグナル伝達ブレークスルーの多くは、大規模なデータセットを獲 得して解析することを可能にする方法論の開発に依存したものであった。 Lindingと御子柴による次の一連の候補は著しい技術的進歩に関連するも のである。御子柴の最初の候補は、異なる研究グループによる一連の論文 であり、多様な細胞過程の正確な時空間的制御を可能にする、遺伝子に コードされた人工光活性化タンパク質に関連する研究について述べたもの である（42-44） （図4） 。Airanらは、ロドプシン（光によって活性化される）に由 来する細胞外領域及び膜貫通領域を含むが、ロドプシンの細胞内ループを 別のGタンパク質共役受容体（GPCR）のものと置き換えたキメラタンパク 質を用いた。これは、特定のGタンパク質媒介経路を光で選択的に活性化 することを可能にする技術である（42）。注目すべきことに、側坐核において 特定サブタイプのアドレナリン受容体が媒介するシグナル伝達を光活性化 することによって、マウスの条件付け場所嗜好性に影響を与えることができ た。別の研究でWuらは、低分子量GTPアーゼRac1のキメラ型を可逆的に 刺激した。このキメラ型Rac1では、カラスムギ（Avena sativa） フォトトロ ピン1の光反応性LOV（light oxygen voltage） ドメインが、光によって活 性化されるまで、恒常的活性化型Rac1のエフェクターへの結合を遮断し、 培養細胞において方向性のある遊走を誘導する（43）。Lindingも候補に挙げ た3つめの研究では、Levskayaはシロイヌナズナ（Arabidopsis）フィトク ロームBと転写因子phytochrome interaction factor 3（フィトクローム 相互作用因子3） との光依存性相互作用を利用し、RhoファミリーGEFの触 媒領域を含むキメラを哺乳類細胞の細胞膜に可逆的に導入することによっ 図4 光による切替え可能なタンパク質。新しい手法によっ て、タンパク質活性の光による制御が可能になった。図は細胞 を光に曝露することで局在化が変化するタンパク質のイメー ジ［Credit：Yana Greenman/AAAS］ 32 Cosmo Bio News No.79 て、細胞形態の局所的変化を誘導した（44）。御子柴が最後の候補に選んだの は、組換え遺伝子を子孫に伝えることができる遺伝子組換え霊長類（マーモ セット）の開発を報告した論文である。御子柴は、この非ヒト霊長類遺伝子 組換えモデルの開発を「疾患機構、再生医療、及び変性疾患の生物医学研究 にとってはかりしれなく貴重」と評価し、新分野の幕開けと予告した（45）。 今年の候補に浮上した主要なテーマは、特定のシグナル伝達経路を同定 するために用いられた従来の境界を超えた視点の重要性である。その結果、 例えば「NF-κBシグナル伝達経路」の要素が「Rasシグナル伝達経路」の過 剰活性化を伴う癌の治療における効果的な標的になるかもしれない。同様 に、最初に特徴が調べられ、そしてある場合にはそれにちなんで名前が付け られているタンパク質に関して、その機能と全く関係のない予想外の機能 が 同 定 さ れ ること は 、例 外 というよりは 普 通 の ことに なりつ つ あ る 。 Snyderが挙げた我々の最後の候補は、臓器レベルにおいて同様のことを示 した。これは、ある状況における機能がよくわかっているシグナル伝達系が、 非常に意外なことに、別の系に姿を現す興味深い例である。Shahら（46）は、 気道上皮細胞の繊毛には味覚受容体が あり、繊毛振動頻度を増大させることに よって苦味物質に反応しうることを発見 した（図5）。Snyderは次のように説明 する。 「気道の運動繊毛には苦味受容体 があり、IP 3-カルシウムを介してシグナ ルを送り、有害刺激物を吐き出させる。 これは、運動繊毛が運動性であるのに加 えて感覚性であることを示す初めての証 拠である。おそらく、空中の危険な粒子、 ことによると細菌の苦味様産物がこの ような受容体の天然リガンドである。こ のように、自然は、からだから環境の脅 威を取り除くという共通の目標を達成す るために、根本的に異なる臓器の感覚系 図5 気道の味 ［Figure reproduced with permission from を巧妙に利用したのである。 」 （47）Credit： Nayomi Kevitiyagala/AAAS］ Science Signaling 編集部は、この革新的で境界を押し広げる研究の小 旅行を楽しんだ。読者の皆様にもお楽しみいただけただろうか。シグナル 伝達における新しい年のエキサイティングな未報告の発見が明かされるの を、今後もScience Signaling で一緒にお読みいただければ幸いである。 Related Resources References 1. 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All rights reserved お知らせコーナー キャンペーン情報 第7回 公開講座応援団 2010年度募集のお知らせ 詳細はコスモ・バイオホームページ上“キャンペーン”欄をご覧ください http://www.cosmobio.co.jp/campaign ■フィンザイム社 高性能ポリメラーゼ30%OFFキャンペーン 期 間 2010年1月18日（月）∼3月31日（水） Phusion™、Phire™ シリーズをはじめとしたポリメラーゼ、 PCRキットを30％OFFでご提供致します。 コスモ・バイオは、 「 ライフサイエンスの進歩・発展に貢献す る」ことを第一の会社理念に掲げ、人々に信頼される企業作り を目指しています。様々な社会活動に積極的に参加していくこ とは、私達の願いであり、使命でもあります。私達は、この理念に 基づき、大学等が実施する公開講座の支援を通して、次の世代 を担う“明日の科学者”に、ライフサイエンスの面白さと楽しさ を伝えるお手伝いをします。詳細及びご応募につきましては、コ スモ・バイオホームページ上お知らせコーナーをご覧ください。 ■フェルメンタス社 2009年度公開講座応援団の採択結果がご覧いただけます。 期 間 2010年1月18日（月）∼3月31日（水） ●分子量マーカー＆Taq ポリメラーゼ 50％OFFキャンペーン http：//www.cosmobio.co.jp/company/tools/cbtools_top.asp 第7回の応募締切は、2010年5月12日（水）です。 DNA、RNA、タンパク質用分子量マーカー及びTaq ポリメラー ゼのうち、計80商品を50%OFFでご提供致します。 ●タンパク質抽出キット「ProteoJET™」30％OFFキャンペーン 学会展示会出展のお知らせ 哺乳動物細胞や組織サンプルから、タンパク質を抽出するキット ProteoJET™ シリーズを30%OFFでご提供致します。 コスモ・バイオでは、下記の学会展示会に出展を予定してお ■コスモ･バイオブランド（CSR） 抗原抗体反応増強用 バッファー「IMMUNO SHOT」20%OFFキャンペーン 期 間 2010年1月18日（月）∼3月31日（水） ウェスタンブロッティングやELISA等に有用な反応促進試薬 IMMUNO SHOTシリーズ全6品を20%OFFでご提供致します。 ■i-MyRun ご愛顧感謝＆消耗品・機器お買い得キャンペーン 期 間 2010年1月5日（火）∼3月31日（水） サーマルサイクラーPiko™ （FZM社） 、 クイックスピン （EDW社） 、 キュベット（CLP社） 、バイオハザードバック・ボルテックスミキサー （BMK社） 等を約16∼33％OFFでご提供致します。 ります。学会にご参加の折には、ぜひお気軽にブースにお立ち 寄りください。普段は見過ごしている “何か” が見つかるかもし れませんよ……。 学会名 日 程 会 場 第9回 日本再生医療学会総会 3/18（木）∼3/19（金） 広島国際会議場 日本農芸化学会 2010年度大会 3/27（土）∼30（火） 東京大学安田講堂、 京王プラザホテル他 第99回 日本病理学会総会 4/27（火）∼29（木） 京王プラザホテル メーカー新カタログ紹介 ■アブノバ社 30％OFFキャンペーン 下記メーカーが新カタログを発刊しました。ご要望がござ 期 間 2010年1月18日（月）∼3月31日（水） モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、MaxPab® 抗体、リ コンビナントタンパク質等の対象商品（品番がKA, MAB, PABで 始まる商品を除く）を30％OFFでご提供致します。 ■アムレスコ社 便利で安全なDNA染色ローディング バッファーEZ-Vision™ 50%OFFキャンペーン 期 間 2010年2月15日（月）∼3月31日（水） エチジウムブロマイドの代わりに！ 便利で安全なDNA染色ロー ディングバッファーEZ-Vision™ シリーズ3商品を50%OFFでご 提供致します。 ■ハイカルト社 自然免疫研究用試薬 25%OFFキャンペーン 期 間 2010年1月25日（月）∼3月31日（水） ハイカルト社がお届けする商品の中から、TLR/CD14/IL-1R抗 体及びELISAキットを25%OFFでご提供致します。 いましたらコスモ・バイオ商品取扱代理店、またはコスモ・バ イオホームページ上カタログ請求欄よりご請求ください。 R&Dシステムズ社 カタログ2010 RSD R&Dシステムズ社のカタログはお客様により早 く、効率よくお探しの物質を見つけていただけるカ タログです。アルファベットリストにはタンパク質、 抗体、ELISA・ELISpotキット等を豊富に掲載してい ます。 その他、 技術情報、 分子アッセイ等の商品情報も充実しています。 サザンバイオテクノロジー社 カタログ2010 SBA 低エンドトキシンアザイドフリーのイムノグロブリ ン抗体及び二次抗体をお探しのお客様はぜひ、サザ ンバイオテクノロジー社カタログをご覧ください。 標識や吸収動物種違いで多種類の二次抗体、イムノ グロブリン研究試薬を取り扱っています。フローサイトメトリーにお 使いいただける細胞表面 （CD） 抗体も充実しています。 Cosmo Bio News No.79 33 お願い 及び 注意事項 ●希望販売価格…「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2010年3月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、 ご注文の際にご確認ください。消費税は含まれ ておりません。 ●使 用 範 囲…掲載の商品は、全て「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等に は使用しないよう、十分ご注意ください。 取扱店