p.10 - フナコシ

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フナコシニュース 2008 年 9 月 15 日号
●
http://www.funakoshi.co.jp/
New
細胞培養
株式会社 生物資源応用研究所は，平成 16 年度に開始し
た JST の研究開発課題「羊膜由来幹細胞を用いた細胞遺
伝子治療用の細胞ベクターの研究開発」
（開発代表者：桜
川 宣男氏）の成果を元に平成 20 年 2 月に設立されたバ
イオベンチャーです。
品 名 メーカー 商品コード
包装 / 価格（￥）
ヒト可溶化羊膜〈HSAP〉
BRA
HSAP-FD-1
1 mg /
New
25,000
フローサイトメトリー
高い細胞増殖亢進作用を有するコート剤
FagoFlow Kit/SpermFlow Kit
ヒト可溶化羊膜（HSAP）
フローサイトメーターを用いて，顆粒球の食作用活性を測
定するキットと，ヒト精液中の精子数および白血球数などを
測定するキットです。
ヒト羊膜から抽出し，凍結乾燥した細胞培養器材のコート
剤です。本製品をコーティングすることで，足場依存性細胞
の接着および増殖が促進されます。
※本製品は，ヒト由来成分を含んでいます。微生物学的な安全性は確立
されていますが，取り扱いには十分ご注意下さい。
※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。
※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。
■ FagoFlow Kit
血液試料中の顆粒球の食作用活性を調べるキットです。E. coli で刺
激すると，顆粒球は貪食後に NADP オキシダーゼを活性化し，反応性
の酸化中間体を細胞内に生成します。この中間体が Dihydrorhodamine
特 長
（DHR）123 を酸化することで生成される Rhodamine の蛍光をフロー
◆ マウス，ラットおよびヒトの線維芽細胞，血管内皮細胞や間葉系幹
サイトメーターで検出します。
顆粒球の食作用活性が低下すると，慢性肉芽腫症を引き起こすとされ
細胞をはじめとした足場依存性細胞の初代培養，継代培養における
ています。
増殖を促進します。
◆ 本製品でコーティングした培養器材で増殖させた間葉系幹細胞は，
50
骨，軟骨および脂肪細胞への分化が可能であり，多分化能に影響を
60
40
ん。
◆ コート方法は従来のコート剤とほぼ同様で，簡便かつ短時間の処理
細胞数
◆ 使用時は水溶液とするため，コートする培養器材の形状を選びませ
細胞数
与えません。
40
30
20
A
B
20
10
で培養器材のコーティングが可能です。
扱いが容易であり，溶解後は凍結状態で長期保存も可能です。
◆ インフォームドコンセントを得られたプラセンタから分離されてお
り，完全なヒト由来の製品です。
0
0
0 102
A：
B：
103
104
蛍光強度
105
0 102
103
104
蛍光強度
105
による刺激なしの顆粒球のヒストグラム（コントロール）
で刺激をした顆粒球のヒストグラム
試薬 ＴＥＬ ０３
◆ γ線照射済みで，さらに 2 段階の検査によって微生物学的な安全性
キット内容
が確立されています。
memo
妊娠中に胎児を包んでいる羊膜は，羊水の分泌・保持や胎児の
５
- ６８４ １
- ６２０
- ６８４ １
- ７７５
ＦＡＸ ０３ ５
保護といった役割を担っています。この羊膜は，羊膜上皮細胞と
羊膜間葉細胞およびそれぞれを隔てる羊膜基底膜から構成されて
います。また，羊膜には細胞増殖を促進させる様々な細胞外基質
● E. coli , lyophilized
● DHR123
● Lysing reagent
● DMSO
品 名 メーカー 商品コード
FagoFlow Kit (100 tests)
EXB
ED7022
包装 / 価格（￥）
1 kit /
が含まれており，火傷の治療や角膜再生において治療効果を高め
励起 488 nm ／蛍光 525 nm の波長が扱えるフローサイトメーターが必要。
る基材として利用されています。本製品は，細胞増殖に必要な細
測定試料：全血（ヘパリン処理）
65,000
■ SpermFlow Kit
胞外基質を可溶化し，凍結乾燥したものです。
ヒト精液を試料として，下記項目をフローサイトメーターで測定する
線維芽細胞
羊膜間葉細胞
骨髄間葉系幹細胞
キットです。
◆ 精子数／白血球数：既知濃度の内部標準を試料に加えて測定します。
白血球の検出には蛍光標識された抗 CD45 抗体を用います。
◆ 精子生存率：Propidium Iodide を用いて死細胞を検出します。
◆ 先体完全性：抗 Intra-Acrosomal Protein (IAP) 抗体を用いて測定
細胞数（×105）
お問い合わせ先
◆ 粉末状の凍結乾燥品のため凍結保存が不要です。水溶性のため取り
100
100
50
0
0
5
4
8
12（日）
080915s_P10-11_k_n_i.indd 10
5
11
17（日）
0.5
可溶化羊膜コーティング
コントロール
5
10
15（日）
本 製 品 に よ り，
様々な細胞が高
い細胞増殖亢進
作用を示した。
します。IAP は精子の先体中に存在しており，先体が損傷している
場合，IAP が検出されます。
◆ Intra-Acrosomal Protein (IAP) の存在：精子膜を透過処理した後，
抗 IAP 抗体を用いて検出します。
2008/08/29 16:14:16
http://www.funakoshi.co.jp/
77.1％
細胞数
前方散乱光
C
B
細胞増殖測定キット
300
XTT Cell Proliferation Assay Kit
200
13.3％
63.9％
30
D
2.54％
100
0
0
100
11
400
90
60
フナコシニュース 2008 年 9 月 15 日号
細胞増殖
A
120
●
101
102
103
100
蛍光強度
精液中の精子数の測定
A：全細胞
B：精子
C：内部標準（蛍光ビーズ）
101
102
103
蛍光強度
精液中の白血球数の測定
（左図 A：全細胞のヒストグラム）
D：白血球
in vitro における細胞増殖を比色で迅速（3 ∼ 4 時間）
に測定できるキットです。細胞増殖の誘導／阻害，細胞周期
に関与する薬物候補のスクリーニングに有用です。生細胞で
は NADH 酸化還元酵素により XTT が水溶性のホルマザン
に変換されることを利用しています。
特 長
キット内容
◆ [3H]-thymidine 法や BrdU 法に比べて簡便かつ迅速に細胞の増殖を
● Anti-IAP, labeled with FITC
● Propidium iodide
● Anti-CD45 antigen, labeled with PE-DY647
測定できます。
◆ 洗浄操作が不要で，96 ウェルフォーマットで測定が可能です。
◆ 測定範囲：103 ∼ 105 細胞
● Permeabilization reagent
◆ 測定波長：450 nm
● Internal standard (fluorescent beads)
品 名 メーカー 商品コード
包装 / 価格（￥）
SpermFlow Kit (25 tests)
EXB
ED7021
操作法概略
1. 96 ウェルプレートを用い，100 μl の培地中で細胞（104 ∼ 105
1 kit /
91,000
励起 488 nm，蛍光測定に , FITC/PI（Beckman-Coulter Type の場合）/PC5 チャネル
個／ウェル）を培養する（被検物質の存在／非存在下）。
2. Electron mediator solution に 溶 解 し た XTT を， 各 ウ ェ ル に
が扱えるフローサイトメーターが必要。測定試料：ヒト精液
10 μl ずつ添加する。
3. オービタルシェーカーで 1 分間穏やかに混和する。
プレートバックライト
Kajixx
4. 37℃の CO2 インキュベーター内で，2 時間（接着細胞）または 4
時間（浮遊細胞）インキュベートする。
マイクロプレートのウェル確認用照明装置です。均一な照明と使い
やすいサイズで，簡単にウェル底の目視確認ができます。ウェル壁面
6. マイクロプレートリーダーで，450 nm の吸光度を測定する。
お問い合わせ先
についた液滴もしっかり確認でき，少量の液体の分注精度確認にも最
適です。
5. オービタルシェーカーで 1 分間穏やかに混和し，均一に発色させる。
キット内容
● Electron mediator solution
品 名 メーカー 商品コード
消灯時
XTT Cell Proliferation Assay Kit
CAY
10010200
CAY
10010200
点灯時
包装 / 価格（￥）
96 tests /
480 tests /
7,500
28,200
in vitro における細胞増殖を比色で迅速
（3 ∼ 4 時間）に測定できるキッ
プレートバックライト S
にはマイクロプレートが
ぴったり収まります。
トです。細胞増殖の誘導／阻害，細胞周期に関与する薬物候補のスクリー
ニングに有用です。生きている細胞では NAD（P）H 酸化還元酵素に
より MTT がホルマザンに変換されることを利用しています。
品 名 メーカー 商品コード
プレートバックライト S (10.5 × 14.8 × 1.0 cm)
KJX
KL-01
プレートバックライト L (36.4 × 26.7 × 1.0 cm)
KJX
KL-02
品 名 包装 / 価格（￥）
1 piece /
59,000
1 piece / 118,000
プレートバックライトに関するお問い合わせ先：当社テク
ニカルサポート（機器技術担当：Tel.03-5684-1619，
Fax 03-5684-5643，e-mail：[email protected]）
080915s_P10-11_k_n_i.indd 11
メーカー 商品コード
MTT Cell Proliferation Assay Kit
CAY
10009365
CAY
10009365
測定範囲：5 × 102 ∼ 105 細胞，測定波長：570 nm
包装 / 価格（￥）
500 tests /
2,500 tests /
11,300
42,200
５
- ６８４ １
- ６２０
- ６８４ １
- ７７５
ＦＡＸ ０３ ５
■ MTT Cell Proliferation Assay Kit
試薬 ＴＥＬ ０３
● XTT reagent
2008/08/29 16:14:19