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アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定と その診断的意義について

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アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定と その診断的意義について
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アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定と
その診断的意義について
奈良県立医科大学中央臨床検査部
中井
忍,出国さよみ
忠
清水良純,波賀義正,間瀬
奈良県立医科大学病態検査学教室
岡本康幸,坂本貞和,辻井啓之,中野
博
STUDIESO NDETERMINATIONOFAPOLIPOPROTEINS
BYTURBIDIMETRICIMMUNOASSA
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ANDTHEIRDIAGNOSTICSIGNIFICANCE
SHINOBUNAKAI,SAYOMIIDETA,
YOSHIZUMISHIMIZU,YOSHIMASAHAGAandTADASHIMASE
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(
3
9
9
)
アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定とその診断的意義について
は,正常血糖で乳び血清あるいは TGが 4
0
0m
g
!d
l以上
緒 言
アポリポ蛋白(アポ蛋白〉は,
でないものとした.
リポ蛋白を構成する蛋
白部分であるが,同時にリポ蛋白受容体との結合を介し
た細胞内への脂質の取り込みやリポ蛋白リパーゼや
L
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eなどリポ蛋白代謝
また別に f
r
巴s
hな冠動脈疾患〔以下 CHDと略す) 7名
(すべて男性で,平均年齢 5
4才〉について検討した.
2
. 方法
I
I,B,C
I
I,CI
I
I,Eは免疫比濁法
アポ蛋白 A 1,A
田
目
に重要な役割を演じる酵素の活性化に関与するなど多く
(第一化学薬品製キット,アポオート「第一」使用),血
の機能を有している 1) したがって,総コレステローノレ
清脂質は酵素法,また HDL-Chはリンタングステ γ 酸
(TCh), トリグリセリド (TG),高比重リボ蛋白コレス
Mg++法による沈殿法にて測定し,低比重リポ蛋白コレ
テローノレ (HDL-Ch) などの今日一般に行なわれている
ステローノレ (LDL-Ch) は換算式を用いて計算した 3). な
脂質検査に加えてアポ蛋白の変動をみることは,脂質代
お測定は自動分析機日立 7
1
5
0にて行なった.臨床参考範
謝異常の病態を解析するうえで有用であると考えられる.
囲 (CRR) は既報により,度数分布計算による反復切断
アポ蛋白の測定系には一元免疫拡散法 (SRID法),ロ
ケット免疫電気泳動法〔ロケット法),放射免疫測定法
(RIA法),酵素免疫測定法 (EIA法),免疫比濁法など各
補正法にて算出した 4).
成績はすべて平均士標準偏差で表現し,平均値の差の
t
u
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tの t
t
e
s
tにて行なった.
検定は S
種の方法が応用されている 2). 今回我々は,自動分析機に
成
応用が可能な免疫比濁法によりアポ蛋白を測定し,基礎
的検討を行ない,また冠動脈疾患におけるその診断的意
績
1.免疫比濁法によるアポ蛋白測定の基礎的検討
a) 直線性
義についても検討した.
アポ A-12
4
0m
g
!d
l,アポ A-II7
3
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l,アポ B
対象および方法
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l,アポ C
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g
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l,アポ C-I
アポ E 8
.
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g
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lまで良好な直線性が得られた (
F
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g
.1
)
.
1.対象
本院各科外来を受診した 20-60才の男女あわせて
3
8
6名〔男 1
7
6名,女 2
1
0名〕を対象とした. これらの例
b) 同時再現性
3種の血清についてそれぞれ 2
0回測定を行ない,変動
2
0 C ト - , / イ1
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.
同
忍 〔 他 8名
〉
中 井
(
4
0
0
)
係 数 (CV) を求めた.各 CVはアポ A-10.88-1
.7
3
られなかった.アポ Bでは, 2
0才代の男性値よりも 3
0才
%,アポ A-II0.95-2.94%,アポ B 1
.25-2.80%,ア
0才代のアポ Bは男女と
代の男性値の方が高値となり, 5
I1.66-8.83%,アポ C-1
I
I1.86-9.06%,アポ
ポ C-I
0才代よりも高値となった.アポ C-IIでは 3
0才代の
も4
E1
.20-11.09%で、あっ T
こ. i
E
lL,アポ C-I
I, CI
I
I,
0才代の男性値よりも有意に高値を示し, 4
0
男性値が 2
Eにおいて CVが 5 %を超えていたのはそれぞれ mean
才代の女性値よりも 5
0才代の女性値の方が有意に高値
=0.83,2.03,0.93mg/dlの低い濃度を示した血清で,中
0才以上の例で男性に比べ女性の方が
となった.また、 3
・高濃度にあった他の血清ではすべで CVが 5 %以下と
I
I
Iにおいては, 5
0才代で男
有意に低値を示した.アポ C
良好な結果が得られた.
0才代よりも高値となった.アポ Eは
, 3
0才代の
女とも 4
c) 日差再現性
0才代の男性値よりも高値となり,かつ 5
0才
男性値が 2
3種類の血清を用いて 1
0日間の日差再現性を検討し
0才代よりも有意に高値となった.また 4
0才代の
代は 4
I
I
I,Eにおいて m巴an=3.090m
g
たところ,一部(アポ C
0才代よりも高値を示した.
女性値が 3
Tabl巴 2は対象例のうち TCh2
2
0mg/d
l以下,かっ
/d
,
l 1.220mg/d
l、
で CVニ 1
2
.
5
3%
, 1
0
.
0
8%であったも
TG1
5
0mg/dl以下の条件に合致する例でのアポ蛋白の
の〉を除いて CVが 5 %以下であった.
d) 共存物質の影響
CRR,および正規分布型における歪度を示している.
び
各アポ蛋白においてピリノレピン,ヘモグロビン,明L
HDLの主要な構成蛋白であるアポ A-1,および LDL
の影響についてそれぞれを添加し測定を行なったところ,
の主要な構成蛋白であるアポ Bの分布型は査度の比較で
アポ C
I
I
Iを除いてピリノレピン 4
0mg/d
l,ヘモグロピン
みると同一例の HDL-Chや LDL-Chに比べ正規分布へ
5
5
0m
g
/
d
l,乳び 2
.
0%までほとんど影響はみられなかっ
の適合度は良好であった.また変動係数も, HDL-Ch
I
I
Iはピリノレビン 2
0m
g
/d
lで約 1
8%の正誤差,
た. アポ C
6
.
7
28.3%,LDL-Ch29.5%であるのに対し,アポ A-11
5
0m
g
/d
lで
、
約1
6%の正誤差,乳び 2
.
0%
ヘモグロビン 5
%,アポ B 1
8
.
5%といずれもアポ蛋白のほうが良好であ
で約 8 %の正誤差となった.
った.
2
. 各アポ蛋白の年齢別,性別変動と CRRの設定
Table1に年齢別,性別におけるアポ蛋白値の変動を
3
. リポ蛋白中コレステローノレと主要な構成アポ蛋白と
の関係
HDLの主要な構成蛋白であるアポ A-1と HDL-Ch,
0才代と 4
0才代の例で女性が有意
示した.アポ A-Iは 2
に高値を示した.アポ A-IIについてはあきらかな差はみ
LDLの主要な構成蛋白であるアポ B と LDL-Chの関係
Table1
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Male
Female
Male
Female
Male
Female
Male
Female
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F巴male
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乱
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アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定とその診断的意義について
Table2
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回
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4
CRR
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2
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m
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)
)
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m
g
/dl
34.6~86.4
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ロ
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10
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日
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1
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20
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中 井
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nt
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.
をF
i
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.2に示す.いずれも,良好な正の相関を示した
と考えられるのに対して,
リポ蛋白中の主要なアポ蛋白
が,各アポ蛋白に対するコレステローノレ値には上限が存
は各リポ蛋白の量的な変動〔粒子数〉をよく反映すると
在することが示唆される分布となった.
考えられる(例えば LDL 1粒子当たり l分子のアポ B
4
. CHD例におけるアポ蛋白の変動
がついていることが知られている 6
)
)
. よって,各アポ蛋
Table3は
, CHD例における脂質およびアポ蛋白値を
白の変動は,それぞれのリポ蛋自の量的な変動を表現す
示している.参考値に比べ,アポ A-1はほぼ正常であっ
るものとしては脂質検査より優っているものと考えられ
たが, HDL.Chは低値をとる傾向にあった一方, LDL-
る.また,
Chは高値とは言えない例も多く含まれており,全体とし
変動および質的変化の総和を表現じており,また,それ
リポ蛋白中コレステローノレはリポ蛋白の量的
て有意な変化はなかったが,アポ Bはいずれの例でも高
らの比率はリポ蛋白の質的変化の一部を表現し得ると推
く参考値に対しでも明らかな高値を示した.そのためア
察された.さらに,アポ A-1と HDL.Ch,アポ B と
ポ B/A-I比は高値を示した.また HDL.Ch/アポ A-1
LDレChの相関図から,各アポ蛋白に対するコレステロ
比は有意な低値を示し, LDL.Ch/アポ B比も低値を示し
ーノレ値には上限が存在することが示唆される分布となっ
ており,各アポ蛋自に対応するコレステローノレ濃度には
た.
飽和量が存在するのではないかと考えられる.したがっ
考 案
て
, アポ蛋白とリポ蛋白中コレステローノレの比をとるこ
自動分析装置を用いての免疫比濁法によるアポ蛋白測
とによって各リポ蛋白の構造上の変化が推測できるかも
定は直線性,同時再現性, 日差再現性,共存物質の影響
しれない.最近我々は, HDL.Ch/アポ A-1比が HDLの
の検討成績からみて, 日常のノレーチン検査に充分適応可
亜分画の変動と関連が深いという成績を得ている(臨床
能であると考えられた.また,アポ蛋白測定値の性差は
病理 i
np
r
e
s
s
)
.
A-1および C-IIで軽度認められ, A-1では女性が,ま
CHDでは, TChや LDL.Chが 高 値 を と る 傾 向 や
た C-IIでは男性が高値を示す傾向がみられた.加令によ
HDL-Chの低値傾向が認められたが,より明瞭な変化は
る影響は B,C-IIおよび Eで年齢とともに次第に増加す
アポ B~こ認められており,その結果アポ B/ A
-1比は高
る傾向がみられた.今回求められた各アポ蛋白の CRR
, LDL-Ch/アポ B比は
値を示し, HDL.Ch/アポ A-1比
は,今までに報告されているものとほぼ一致した成績を
それぞれ低下していた.これは,木疾患の危険因子の評
示している 5)
価にアポ Bの値や B!A-1比がより有用であることを示
ところで,今日一般的には, HDLや LDLなどのリポ
唆する所見と考えられる.また, LDL-アポ Bの増加に対
リポ蛋白中のコレステローノレである
して, LDL.Chが正常な場合があり, CHDとの関連の深
HDL.Chや LDL-Chの変動により検討されている.しか
いことが紹介されているが'l,このことも我々の成績を
し,アポ A-1と HDL.Ch
,アポ Bと LDL.Chの歪度およ
支持するものと考えられる.
蛋白の変動は,
び変動係数の比較から見てもわかるように,
リポ蛋白中
コレステローノレは比較的多くの変動因子の影響を受ける
アポリポ蛋白の免疫比濁法による測定とその診断的意義について
結
語
(
4
0
3
)
態.代謝 2
2:6
4
7
6
5
6,1
9
8
5
.
2
) 古賀俊逸:アポ蛋白の免疫学的測定法.臨床検査
2
8:1
6
7
6
1
6
8
0, 1
9
8
4
.
以上の成績から
1.自動分析機での免疫比濁法によるアポ蛋白測定は日
3
) Friedewald,W.T
.,Levy,R
.1
. andF
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2
. アポ蛋白測定値の性差は A-,
I C-IIで軽度認めら
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, B, C-II, Eで加令による増加傾向が認められた
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3
. 各リポ蛋白の量的な変動を表現するものとしては
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8
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9
9
5
0
2,1
9
7
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.
目
目
C
l
i
n
.
変動因子の多いリポ蛋白中コレステローノレよりも各リポ
4
) 岡本康幸,中野博,波賀義正,清水良純,河本弘
蛋白を構成する主要なアポ蛋白の変動の方が優っている
美.生化学検査データの臨床参考範囲 (CRR)設定
と考えられた.
0:2
9
3
3
0
0, 1
9
8
9
.
に関する検討.奈良医学雑誌 4
4
. リポ蛋白中コレステローノレはリポ蛋白の量的変動お
5
) 野間昭夫,五島雄一郎,秦 蔑哉.免疫比濁法によ
よび質的変化の総和を表現すると考えられた.
るアポ蛋白 A-I, A-II, B, C
-II, C
I
I
I, Eの
5
. 主要なアポ蛋白とリポ蛋白中コレステローノレとの比
正常値の検討.動脈硬化 1
6:8
3
2,1
9
8
8
.
率は,
リポ蛋白の質的変化の一部を表現すると推察され
6
) Schaefer,E
.J
.,Eisenberg,S
. andLevy,R
.I
.
た
L
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p
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p
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t
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b
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s
m
.]
.L
i
p
i
d
6
. CHDの危険因子の評価にアポ Bや B/A-I比の有
R
e
s
.1
9
:6
6
7
6
8
7,1
9
7
8
.
用 性 が 示 唆 さ れ た 7 )
Sniderman,A.,Shapiro,S
.,Marpole,D
.,S
k
i
n
-
文
献
1)山本章,山村卓,横山信治:アポ蛋白異常と病
ner,B
.
, Teng,B
. andKwiterorich,P
.O
.J
r
.
P
r
o
c
. Na
t
.
l Acad. S
c
i
. USA7
7・6
0
4
6
0
8,1
9
8
0
.
Fly UP