【目的】 上皮細胞における有機イオンや電解質の輸送ル… トは大きく 2 つ

28pmC100
上皮細胞 にお ける尿酸輸送 と cl
a
udi
nの発現
塚 田 愛 2,3,大槻 純 男 4,福富 俊 之 1,市田 公美 2,楼井 裕 之 1
○ 木村 徹 1,
(l杏林大 医薬理 ,2東京薬大薬病態生理 ,3都立大塚病 院薬 ,4熊本大 院薬 )
【目的】上皮細胞 にお ける有機 イオ ンや電解質の輸送ルー トは大 きく 2 つ に分類
r
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rルー トであ り､ トランス
され る｡ 1つは､細胞 を横切 って輸送 され る t
ポー ターや チ ャネル を介 す る輸 送 で あ る も う 1つ が細胞 と細胞 の 間 を通 る
pa
r
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rルー トである｡本研究では､上皮細胞 を用いた尿酸の pa
r
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r輸送
お よびそれ に関与す る c
l
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udi
nについて検討 を行 った｡
Be
Wo)
､腎尿細管 由来上皮細胞 (
MDCK
【
方法 】胎盤械 毛癌細胞 由来上皮細胞 (
LLCPKl
)
､大腸癌 由来上皮細胞 (
ca
c
o2)を用いた｡ トランス ウェル上 に細胞 をコ
ンフルエ ン トになるまで培養 し､タイ トジャンクシ ョン(
TJ
)
の形成 を t
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e(
TER)とデ キス トランの透過性で確認 を行 った｡TJの形成確認後
4℃ 条件 下で放射 ラベル され た尿酸 の輸送実験 を行 い､それ ぞれ の細胞 にお け る
pa
r
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r輸送 を観察 した｡ さらに､ ヒ ト胎盤 ､ Be
Wo細胞､お よび Ca
c
o2細
胞 にお ける c
l
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udi
n分子の発現 を､RTPCR お よびプ ロテオ ミクスによ り調べた｡
【
結果 ･考察 】細胞 を トランス ウェル上に培養 L TJを形成 していることを確認 し
たのち､
尿酸の pa
r
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c
e
l
l
ul
a
r輸送 を観察 した｡その結果 ､
腎臓 由来の MDCK,LLCPKl
細胞では尿酸 をほ とん ど通過 させ なかったが､胎盤 由来の BeWo細胞では 4℃ で も
尿酸の上下間での輸送が観察 され ､pa
r
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c
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l
ul
a
r経路での輸送が示唆 された｡腸管
2細胞 には､尿酸 を通過 させ るクロー ンとそ うでない クロー ンがあっ
由来の Cacoた｡ この結果 ､尿酸 は腎臓 では t
r
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､胎盤 では pa
r
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c
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ul
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r経路で運 ばれ､
腸管では両者 が混在 してい る可能性 を示唆 した｡今後､発現が確認 された cl
a
udi
n
に関 して機能解析 を行 い､尿酸輸送 に関与す る cl
a
udi
nの同定 を行 う予定である｡
｡
,