BSE 確認検査（WB法、免疫組織化学的染色法）について

BSE 確認検査（ＷＢ法、免疫組織化学的染色法）について
島田敏之、磯貝勝人、山中章弘、花井博司、竹内政行
村田実、山口隆央、鶴田益清、林 樹
１
はじめに
平 成 13 年 10 月 18 日 か ら 、と 畜 場 に 搬 入 さ れ る 全 て の 牛 を 対 象 に Ｂ Ｓ Ｅ 検 査 が 実 施 さ れ 、
現在、国内で７頭のＢＳＥ牛が確認されている。
愛 知 県 は 、本 年 Ｂ Ｓ Ｅ 確 認 検 査 専 用 検 査 室 を 整 備 し 、ス ク リ ー ニ ン グ（ エ ラ イ ザ ）検 査 、
確認検査（ＷＢ法、免疫組織化学的染色法）を一括して検査を実施する体制になりつつあ
る。
そこで、厚生労働省開催のＢＳＥ確認検査に係る技術研修内容と、現在の当所の整備状
況を合わせて報告する。
２
確認検査
（１）ＷＢ法
１）方法
牛海綿状脳症確認検査ＷＢプロトコール
２）工程
試薬調整（毎検査時に調整必要）
乳剤の調整
試料調整（１２０分）
ＳＤＳ－ＰＡＧＥ（９０分）
ウエスタンブロット（１２０分）
免疫染色（２４０分）
（２）免疫組織化学的染色法
１）方法
標識ポリマー法
２）工程
固定（再固定６０分）
包埋、ギ酸処理（５７０分）
薄切、オートクレイブ処理（１５０分）
染色（２００分）
（平成１４年度愛知県獣医衛生関係研修会）