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遺伝子導入技術 - Bio-Rad
遺伝子導入技術 遺伝子導入技術 386 トランスフェクション試薬 387 エレクトロポレーション 390 エレクトロポレーション試薬 390 エレクトロポレーションシステム 391 パーティクルデリバリーシステム 398 遺伝子導入技術 遺伝子導入技術 生体内へDNAおよびRNAを遺伝子導入することは、生命現象を解析する上で最も一般的なツールの一つとなっています。現在では、様々 な標的や実験系に合わせて多くの遺伝子導入技術が確立されています。バイオ・ラッドは1986年のジーンパルサー発売以来、常にこ の分野のリーダーとして多くの製品を提供しております。 ◦ roplast s, mito chondri a) ◦ lles (ch lo Attach ed ◦ Fungi Organe Adhere nt Cells, — Gen e Knock downs Trypsin ized ◦ Ex Vivo ◦ Organ ◦ ◦ Bacteria Skin or ◦ ◦ Plants Page Yeast ◦ ◦ Detach ◦ ◦ Detach ◦ ◦ Leaves ◦ ◦ Pollen ◦ Transfection Technologies Plant C 388 389 遺伝子導入セレクションガイド Plant C siLentFect™ lipid reagent for RNAi TransFectin™ lipid reagent Plant C Adhere nt Cells, s Mamm alian C ells s (e.g., Culture r Tissue Cells o sion Ce ll Suspen s Culture ungi Other F Organs in Vivo Bacteri a Bacteri a egative ositive Gram-N Gram-P itu ves ms in S Meriste in Situ ed Lea ed Meri stems xplants ell Call us or E ultures erent C ell Adh ell Susp ension Culture s blood) バイオ・ラッドは、遺伝子導入に関連する様々なアプリケーションに、豊富なラインアップでお応えいたします。次の表から標的の種 類やアプリケーションを選択し、最適な手法や製品をお選びいただけます。それぞれの製品に関する詳細は、次ページ以降をご参照 ください。 Animals Lipid Transfection Electroporation Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーション システム 392 Gene Pulser Xcell™ コンプリートシステム 394 ◦* ◦* ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ Gene Pulser Xcell CEシステム 394 ◦* ◦* ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ Gene Pulser Xcell PCシステム 394 ◦ ◦ ◦ ◦ MicroPulser™エレクトロポレーター 396 ◦ ◦ ◦ ◦ Biolistic Particle Delivery Helios® gene gun システム 399 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ PDS-1000/He™ 401 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ PDS-1000/He Hepta™ システム 401 ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦ ◦最適 ◦適 ◦可 *プロトプラスト化が必要 トランスフェクション試薬(P.387) エレクトロポレーション(P.390) 核酸 Ions パーティクルデリバリー(P.398) Gene A 脂質 DNA coated microcarrier 導入 複合体形成 Cell Membrane B リポソーム Sample 細胞 Gas エンドサイ トーシス Helios Gene Gun System Particle Delivery Method 分析 386 遺伝子導入技術 C www.bio-rad.com トランスフェクション試薬 トランスフェクション試薬 カチオン性脂質によるトランスフェクションは、広範囲の真核細胞に適しています。市販されている多くの脂質性トランスフェクショ ン試薬は、カチオン性脂質と、dioleoylphosphatidylethanolamine(DOPE)やコレステロールなどの脂質の水性懸濁液です。カチオ ン性脂質は、陽電荷表面を有する小さなリポソームを形成します。カチオン性脂質懸濁液にDNAを加えると、DNAの陰電荷を有する リン酸基がリポソームの陽電荷表面と相互に作用します。これらの脂質ーDNA複合体は陰電荷を有する細胞膜表面と結合します。一 般的に、脂質ーDNA複合体は、エンドソームおよびリソソームを通じて細胞内に取り込まれると考えられています。 核酸 脂質 導入 複合体形成 リポソーム 細胞 エンドサイトーシス 分析 セレクションガイド siLentFect™ Lipid Reagent TransFectin™ Lipid Reagent 特 長 RNAi用試薬 汎用性試薬 用 途 siRNA 遺伝子発現 siRNA(shRNA) 細胞株 多様な細胞 例:A549、BHK、HeLa、 K562、Jurkat、Vero、 Primary Fibroblasts 多様な細胞 例:A549、MCF-7、 HeLa、HUVEC、Jurkat、 Primary Fibroblasts www.bio-rad.com 遺伝子導入技術 387 トランスフェクション試薬 siLentFect™ Lipid Reagent for RNAi RNA抽出キット: P.2 ラボチップ電気泳動: P.152 siLentFectは幅広い細胞種で利用可能で、導入が難しい細胞に 対しても有効です。上皮細胞でのタイトジャンクションの研究 によく用いられるCaco-2細胞は導入が比較的困難な細胞系です が、シカゴ大学の研究室ではsiLentFectを用いてsiRNAを導入し、 MLCK1遺伝子の発現抑制に成功しました。詳細はBulletin 5370 に記載されております。 MCF-7細胞への蛍光siRNAの効果的な導入 左図:Hoechst核染色 右図:蛍光ラベルsiRNA ●● siRNAとの親和性が高くなっていますので、siRNAと試薬の使 ●● 幅広い細胞種において高い遺伝子導入効率を示します。 ●● 至適な濃度では細胞毒性は低く抑えられていますので、適正 な発現抑制効果実験を行うことができます。 ●● siLentFectを用いてsiRNAとdsDNA vectorsを同時に導入する ことが可能です。 Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of Plates/Wells Culture Volume of Vessel Size Plating Media siRNA conc. Volume of Serum Free Medium siLentFect Reagent 96well 0.1ml 5-20nM 20μl 0.05-0.4μl 24well 0.5ml* 5-20nM 50μl 0.25-2.0μl 12well 1.0ml* 5-20nM 100μl 0.5-4.0μl 6well/35mm 2.5ml* 5-20nM 250μl 1.0-5.0μl 60mm 5.0ml* 5-20nM 500μl 2.5-10μl 100mm 10.0ml* 5-20nM 1.0ml 5.0-20μl 0.0 0.25 0.5 0.75 1.0 2.0 siLentFect volume, μl/well Luciferase activity, RLU 用量を少なくできます。 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 Downregulation, % リアルタイム PCR試薬: P.420 最 近 で はsmall interfering RNA(siRNA) に よ る ジ ー ン サ イ レ ンシングが遺伝子発現解析研究における重要なツールとなって きています。ジーンサイレンシングでは、特に低い細胞毒性が リポフェクションを評価する時の重要なファクターです。細胞 毒性が高い場合、細胞の生存率の低下や形態の変化により正 確な発現抑制効果の測定が難しくなります。バイオ・ラッドの siLentFect Lipid ReagentはsiRNAの導入に特化したリポフェク ション試薬です。siRNAとのアフィニティが高く、かつ細胞毒 性を抑えた試薬ですので、siRNAを用いたジーンサイレンシン グ実験に適しています。 3.0 3,000 2,500 2,000 1,500 1,000 500 0 0 2 10 siRNA, nM 20 50 0 20 40 60 80 100 0.0 0.25 0.5 0.75 1.0 2.0 3.0 siLentFect volume, μl/well Downregulation, % リアルタイム PCR機器: P.411 A405 See Also セルカウンター: P.24 0 20 40 60 80 100 0 2 10 20 siRNA, nM 50 siLentFect Lipid ReagentとsiRNAの使用量の違いによる導入効果 上段:恒常的にlacZを発現させたCHO細胞に対して、lacZをターゲットに したsiRNAを導入したときのsiLentFect Lipid Reagentの使用量の違いによ るβガラクトシターゼ活性(左)とノックダウン効率(右)。24wellプレー トを使用。 下段:恒常的にルシフェラーゼを発現させたCHO細胞に対して、ルシフェ ラーゼをターゲットにしたsiRNAの使用量の違いによるルシフェラーゼ活 性(左)とノックダウン効率(右)。siLentFect Lipid Reagentは96wellプレー トで、1wellあたり0.3μl使用。 *Carefully aspirate medium 15-60 minutes prior to transfection and add onehalf volume of medium. Examples of Cell Lines Successfully Transfected With siLentFect Lipid Reagent* Cell Line Cell Type Cell Line Cell Type 184htrt Human breast epithelial LNCap Human prostate adenocarcinoma 4T1 Mouse mammary tumor MCF-7 Human breast adenocarcinoma A549 Human lung carcinoma Murine EC Mouse endothelial Caco-2 Human colon adenocarcinoma NIH 3T3 Mouse embryo fibroblast CHO-K1 Chinese hamster ovary epithelial PC-3 Human prostate cancer COS-7 SV40-transformed African green monkey kidney Primary fibroblast Human foreskin fibroblast HEK 293 Human embryonic kidney Primary keratinocyte Human keratinocyte HeLa Human cervical adenocarcinoma Primary ovarian Epithelial HepG2 Human liver carcinoma SVEC4 Vascular endothelial HUVEC Human umbilical vein endothelial VSMC Vascular smooth muscle *詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。 Ordering Information カタログ番号 170-3360 170-3361 170-3362 388 遺伝子導入技術 品名 siLentFect Lipid Reagent, 0.5ml siLentFect Lipid Reagent, 1.0ml siLentFect Lipid Reagent, 5×1.0ml 価格 ¥34,000 ¥53,000 ¥168,000 保存 4℃ 4℃ 4℃ www.bio-rad.com トランスフェクション試薬 TransFectin™ Lipid Reagent TransFectin Lipid Reagentは、カチオン性脂質を用いたトランス フェクション試薬です。様々な細胞において、高い遺伝子導入 効率とタンパク質の高レベルな発現を実現します。 ●● 幅広い細胞において高い遺伝子導入効率を示します。 ●● 他の高効率な試薬と比べて、 細胞毒性は低く抑えられています。 ●● タンパク質の高レベルな発現を実現します。 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 セルカウンター: P.24 リアルタイム PCR機器: P.411 RNA抽出キット: P.2 1 2 3 Volume of TransFectin, μl プラスミドDNA 抽出キット: P.4 4 TransFectin LipidReagentの使用量の違いによる導入効果 K562細胞に対して、βガラクトシターゼを発現させるためのプラスミド DNAを導入したときのTransFectin LipidReagentの使用量の違いによるβ ガラクトシターゼ活性。 1wellあたり4×105 cellを培養した24wellプレートを使用。導入後、24時 間後測定。 プラスミドDNAの使用量はそれぞれ0.25μl(■)、1.00μl(■)使用。 ●● シンプルな3ステップのプロトコールです。 ●● トランスフェクション後の培地交換は不要です。 ●● 40〜90% O.D. 405 See Also confluenceの細胞に使用できます。 ●● 血清含有培地上の細胞へ使用できます。 Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of Plates/Wells Culture Vessel Size Surface Volume of Area (cm2) Plating Media Plasmid DNA Volume of Serum TransFectin Free Medium Reagent 96well 0.32 0.1ml 50-200ng 25μl 0.1-0.6μl 24well 1.9 0.5ml 0.25-1.0μg 50μl 0.25-4.0μl 12well 3.8 1.0ml 0.50-2.0μg 100μl 2.0-8.0μl 6well/35mm 9.2 2.0ml 1.0-4.0μg 250μl 5.0-15μl 60mm 21 5.0ml 2.0-8.0μg 500μl 15-20μl 100mm 60 10.0ml 12-36μg 1.5ml 40-60μl 無血清培地50μlに対して 0.25〜1μgのプラスミドDNA 無血清培地50μlに 対して0.5〜4μlの TransFectin 等容量のTransFectinおよび DNA溶液を混和 20分間インキュベートして DNA-リポソーム複合体を形成 培養細胞 混和後、DNA-リポソーム 複合体を細胞に直接添加 (100μl/24ウェルプレート) 一晩インキュ ベートした 後に測定 TransFectinの3ステッププロトコール Examples of Cell Lines Successfully Transfected With TransFectin Lipid Reagent* Cell Line Cell Type Cell Line Cell Type A375 Human malignant melanoma K562 Human bone marrow, chronic myelogenous leukemia A549 Human lung carcinoma LLC-MK2 Monkey epithelial kidney ACHN Human renal adenocarcinoma LNCaP Human prostate adenocarcinoma BHK Newborn Syrian golden hamster kidney MEF Mouse embryo fibroblast CHO Chinese hamster ovary NBT-II Rat bladder carcinoma COS-7 SV40-transformed African green monkey kidney Neuro-2a Mouse neuroblastoma CV-1 African green monkey fibroblast kidney NIH 3T3 Mouse embryo fibroblast HEK 293 Human embryonic kidney SH-SY5Y Human neuroblastoma HeLa Human cervical adenocarcinoma SW480 Human colorectal adenocarcinoma Hep G2 Human epithelial liver carcinoma Vero African green monkey kidney *詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。 Ordering Information カタログ番号 170-3350 170-3351 170-3352 品名 TransFectin Lipid Reagent, 0.5ml TransFectin Lipid Reagent, 1.0ml TransFectin Lipid Reagent, 5×1.0ml www.bio-rad.com 価格 ¥29,000 ¥45,000 ¥147,000 保存 4℃ 4℃ 4℃ 遺伝子導入技術 389 エレクトロポレーション エレクトロポレーション試薬 エレクトロポレーション エレクトロポレーションは、短パルスの電流を利用して、DNA やRNAなどの高分子を細胞内に導入する技術です。細胞を電気 パルスにさらすと細胞膜に一時的に孔が形成され、核酸はこの 孔を通過して細胞内に入り込むと考えられています。この手法 には、エレクトロポレーション装置とエレクトロポレーション 用のキュベットが必要です。バイオ・ラッドは、Gene Pulser MXcellシステム、Gene Pulser Xcellシステム、MicroPulserおよ び専用のエレクトロポレーションキュベットを提供しています。 Gene Pulserに最適化されたGene Pulserエレクトロポレーショ ンバッファーをご用意しています。 Ions Gene A Cell membrane B C エレクトロポレーション(電気穿孔法)の原理 ターゲットとなる細胞を高電圧の電場にさらすと、細胞膜と細胞質の間 で一時的に極端な電位差が生じます(A)。この影響で細胞膜の構造が変 化し、透過性が上昇します(B) 。電場から開放されると、細胞膜の構造 は回復しますが、この際に、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖、 低分子などの物質が、細胞内に取り込まれます(C) 。エレクトロポレーショ ンは、このような細胞膜の構造変化を利用し、目的となるDNAを細胞内 へと導入する方法です。 エレクトロポレーション試薬 See Also セルカウンター: P.24 ラボチップ電気泳動: P.152 タンパク質電気泳動: P.174 Gene Pulser® エレクトロポレーションバッファー 浮遊系細胞、初代培養細胞などへ有効なエレクトロポレーショ ン用バッファーです。 動物細胞へのsiRNA、プラスミドDNAの導入に威力を発揮します。 特長 ●● 高い遺伝子導入効率を維持しながら、導入細胞の致死率を低 減させます。 ●● Gene Pulserシリーズを含む様々なエレクトロポレーション装 置に使用可能です。 ●● 様々な細胞株にsiRNA、プラスミドDNAの遺伝子導入を可能 にします。 ※他の試薬使用時のエレクトロポレーション条件とは、大きく 異なります。目安としては、PBS使用時の1/2〜1/3の電気容 量(μF)が至適条件に近い条件となります。 Ordering Information カタログ番号 165-2676 165-2677 390 遺伝子導入技術 品名 Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 1.8ml×10本 Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 30ml 価格 ¥29,000 ¥42,000 保存 4℃ 4℃ www.bio-rad.com エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム エレクトロポレーションシステム Gene Pulser® システム エクスポネンシャルパルス (減衰波) と スクエアパルス (矩形波) 使用するパルスの波形は、エレクトロポレーションの効率を向 上させる重要な条件のひとつです。一般に用いられている電気 パルスの波形はエクスポネンシャルパルスとスクエアパルスで す。Gene Pulser XcellおよびGene Pulser MXcellはその両方を供 給することができます。 PulseTrac回路 独自のPulseTrac回路が抵抗値やコンデンサー容量を測定し、供 給されるパルスの誤差を最小限に抑えます。また、サンプル抵 抗値の事前測定機能やアーク防止機能により、貴重なサンプル の浪費を防ぐことができます。さらに、余分な電気を自動的に 放電する機能やコンデンサーのキャリブレーション機能などが、 安全で信頼性の高い実験を支援します。 V0 Voltage, V エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広 く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与える ことで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増すこ とにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖などの物 質を取り込ませます。 V0 e τ A Time, ms A. エクスポネンシャルパルスは最も広く使用されている波形である。コ ンデンサーより放出されたパルスの電圧は、時間とともに減衰する。使 用されるエクスポネンシャルパルスはタイムコンスタントと電場強度の 2つのパラメータで表現される。タイムコンスタント(τ)は、設定した電 圧を初期電圧V0とするとき、電圧がV0の37%まで減少するのに要する時間 と定義される。タイムコンスタントは回路の抵抗値(R)とコンデンサー容 量(C)により規定される(τ=R×C)。電場強度(E、単位はkV/cm)は初期 電圧V0とキュベットの電極間距離で規定される。 Voltage, V V0 B Vt t Time, ms B. スクエアパルスはエクスポネンシャルパルスでは生存率が低い細胞に 対して使用される。スクエアパルスを使用することで、一般に生存率が 向上すると言われている。エクスポネンシャルパルスのタイムコンスタ ントを十分に大きくした条件下で、パルスを任意のタイミングで終了さ せることにより、ほぼ一定の電圧を維持したスクエアパルスを供給する。 個々のスクエアパルスは設定電圧およびパルスの長さ(t)で表現される。 また、複数のパルスを使用する際は、パルスの間隔もパラメーターのひ とつとなる。実際には、初期電圧とパルス終了時の電圧には僅かな差が 生じるが、この差はpulse droop(Vt)と呼ばれ、通常は5%以内に抑えら れる。 www.bio-rad.com 遺伝子導入技術 391 エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーションシステム See Also セルカウンター: P.24 エレクトロ ポレーション バッファー: P.390 タンパク質 電気泳動関連: P.174 Gene Pulser Mxcellは全く新しいプレートタイプのエレクトロポ レーションシステムです。 反応容器は96well、24well、12wellの3種類の専用プレートがあ り、1プレート内でウェルごとに24種類までの異なるプログラ ムを実行できます。内蔵されたプログラムを使用することで、 1回の実験でエクスポネンシャルパルス(減衰波)、スクエアパ ルス(矩形波)の両方をパルスすることや、電圧、電気容量の グラジェントパルスをかけることが可能であり、その細胞に最 適な導入条件を簡単に見つけることができます。 本体 ●● プレートタイプの簡単操作。 プレート チャンバー ●● プリセットプログラムによる簡便な条件検討が可能。 ●● 1度の実験で24種類のプログラムを実行可能。 ●● エクスポネンシャルパルス、 スクエアパルスの同時実行が可能。 ●● 1プレートあたり2分で操作完了。 ●● 専用シングルキュベットチャンバーを接続することでキュ エレクトロポレーション プレート96Well ベットの使用が可能。 エクスポネンシャルパルス(減衰波)での条件検討 96well/Exp, Vgrad/Cgrad ウェルセットABCD1~12: 電圧勾配(ΔV )、350μF、 1000Ω A B C ウェルセットEFGH1~12: コンデンサー容量勾配(ΔC )、 250V、1000Ω 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 100 100 100 200 200 200 300 300 300 400 400 400 200 200 200 350 350 350 500 500 500 1000 1000 1000 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 100 100 100 200 200 200 300 300 300 400 400 400 10 10 10 15 15 15 20 20 20 30 30 30 ΔV (V) D E F G ΔC (μF) H スクエアパルス(矩形波)での条件検討 96well/Sqr, Vgrad, Dgrad ウェルセットABCD1~12: 電圧勾配(ΔV )、2000μF、 1000Ω、20ms A B C ウェルセットEFGH1~12: パルス持続時間勾配(ΔD )、 250V、2000μF、1000Ω ΔV (V) D E F G ΔD (ms) H エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)の組合せ条件検討 Opt 96well/Exp, Sqr ウェルセットABCD1~12: エクスポネンシャルパルス 1 E X P A 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 150V 200V 250V 300V 350V 450V 250V 250V 250V 250V 250V 250V 350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 200μF 250μF 350μF 500μF 750μF 1000μF B C ウェルセットEFGH1~12: スクエアパルス D S Q R E 150V 20ms 200V 20ms 250V 20ms 300V 20ms 350V 20ms 450V 20ms 250V 5ms 250V 10ms 250V 15ms 250V 20ms 250V 25ms 250V 30ms F G H 392 遺伝子導入技術 www.bio-rad.com エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム Gene Pulser MXcell用Single ShockPodキュベット チャンバー ●● プロトコールはキュベット、プレート共通です。 ●● チャンバーは片手で操作可能です。 ●● 軽量です。 ●● キュベットチャンバーは標準的キュベットが使用可能です。 Gene Pulser MXcell用 Single ShockPod Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート Gene Pulser MXcellエレクトロポレーションシステム用の電極付 反応プレートです。 デスポザーブルであるため、コンタミネーションの心配があり ません。 プレートの種類は96well、24well、12wellの3種類です。 Gene Pulser MXcell Sample Volume Selection Guide Well Volume Cell Concentration Number of Well Sets 12-well plate 1.0–1.5ml 1×106 to 1.5×107 12 24-well plate 500–800μl 5×105 to 8×106 24 96-well plate 100–200μl 1×105 to 2×106 24 0.4cm cuvette 400–800μl 4×105 to 8×106 N/A Format 仕様 Gene Pulser MXcellシステム 入力電圧 100-120VACまたは220-240VAC 50/60Hz 消費電力 最大240W 規格 安全性EN61010、EMC EN61326 Class A サイズ・重量 31×30×14cm 6.62kg 出力波形 エクスポネンシャルパルス、スクエアパルス 設定電圧(V) 10〜500(2V刻み) コンデンサ容量(μF) 25〜2,475(25μF刻み) 設定抵抗値(Ω) 50〜1,500(50Ω刻み)、∞ サンプル抵抗値(Ω) 最低10(10〜500V設定時) スクエアパルス幅(msec) 0.05〜9,999.95(10〜500V設定時) スクエアパルス数 1〜3(10〜500V設定時) スクエアパルス間隔(sec) 0.1〜10(10〜500V設定時) Ordering Information カタログ番号 165-2670JA 165-2670JB 165-2673 165-2681 165-2681B05 165-2682 165-2682B05 165-2683 165-2683B05 品名 Gene Pulser MXcellシステム Gene Pulser MXcellシステムSingle Shock Pod付 Gene Pulser MXcell用Single Shock Pod Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well (5枚) Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well (5枚) Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well (5枚) www.bio-rad.com 価格 ¥1,320,000 ¥1,440,000 ¥250,000 ¥38,000 ¥180,000 ¥38,000 ¥180,000 ¥38,000 ¥180,000 遺伝子導入技術 393 エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム Gene Pulser Xcell™ エレクトロポレーションシステム See Also セルカウンター: P.24 タンパク質電気泳動: P.174 エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広 く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与える ことで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増す ことにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖など の物質を取り込ませます。エレクトロポレーションにおいて、 一般に用いられている電気パルスの波形はエクスポネンシャ ルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)です。Gene Pulser Xcellはその両方を供給することができます。従来品Gene Pulser、Gene PulserⅡの後継機種です。これまでのGene Pulser シリーズにて得られた設定パラメータは、Gene Pulser Xcellに そのまま使用できない場合があります。その場合は、再検討が 必要となります。 PCモジュール CEモジュール 特長 ●● エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩 形波)の両方を供給することができるため、原核細胞・真核細 胞を問わず幅広いターゲットへの応用が可能です。 本体 ●● 易しい操作方法と広い表示画面により、初めての方でもすぐ にお使いいただけます。 ShockPod™ Cuvette Chamber ●● 広く使用されている哺乳動物や微生物へのプリセットプロト コールが内蔵されており、条件検討の手間を軽減します。 ●● 独自のPulseTrac回路は、正確なパルス供給、サンプルの抵抗 値測定、パルスの実効値やタイムコンスタントの表示等、様々 な側面で実験の信頼性を高めます。 ●● 最大で144件のユーザープロトコールを保存し、呼び出して 使用することができます。また、過去100件分の実験結果を 自動的に保存します。 ●● 高電圧回路(PC module)使用時には最大3000Vまでの電圧 を供給できます。 プリセットプロトコール Mammalian Cells Bacterial Cells Fungal Cells CHO E. coli S. cerevisiae COS7 A. tumefaciens P. pastoris 3T3 P. aeruginosa C. albicans 293 S. aureus S. pombe HeLa B. cereus D. discoideum BHK21 S. pyrogenes A549 L. plantarum CV1 K562 HL60 Jurkat HuT78 394 遺伝子導入技術 www.bio-rad.com エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム Gene Pulser Xcellコンプリートシステム 入力電圧 100-120VACまたは220-240VAC、50/60Hz 消費電力 最大240W 使用環境 温度:0-35℃、湿度:0-95% 規 格 安全性EN61010、EMC EN61326 Class A サイズ(W×D×H) Main unit:31×30×14cm CE module:31×28× 9cm PC module:31×28× 5cm 重 量 Main unit:6.62kg CE module:3.08kg PC module:1.90kg 出力波形 エクスポネンシャルパルス、スクエアパルス 高電圧回路(PC module使用) 低電圧回路(CE module使用) 設定電圧(V) 200〜3000(10V刻み) 設定電圧(V) 10〜500(2V刻み) コンデンサー容量(μF) 10、25、50 コンデンサー容量(μF) 25〜3275(25μF刻み) 設定抵抗値(Ω) 50〜1000(50Ω刻み)、∞ 設定抵抗値(Ω) なし サンプルの抵抗値(Ω) 最低20(200〜2500V設定時) 最低600(2500〜3000V設定時) サンプルの抵抗値(Ω) 最低20 スクエアパルス幅(msec) 0.05〜5 スクエアパルス幅(msec) 0.05〜100 スクエアパルス数 1〜2 スクエアパルス数 1〜10 スクエアパルス間隔(sec) 5〜30 スクエアパルス間隔(sec) 0.1〜10 Ordering Information カタログ番号 165-2660J1 165-2661J1 165-2662J1 165-2666J1 品名 Gene Pulser Xcellコンプリートシステム(動物細胞、植物プロトプラスト、バクテリア用) 構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit Gene Pulser Xcell CE module Gene Pulser Xcell PC module Gene Pulser Xcell ShockPod エレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm, 0.4cm 各50個 Gene Pulser Xcell CEシステム(動物細胞、植物プロトプラスト用) 構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit Gene Pulser Xcell CE module Gene Pulser Xcell ShockPod エレクトロポレーションキュベット0.2cm, 0.4cm 各50個 Gene Pulser Xcell PCシステム(バクテリア用) 構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit Gene Pulser Xcell PC module Gene Pulser Xcell ShockPod エレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm 各50個 Gene Pulser Xcellコアユニット 価格 ¥1,450,000 ¥1,050,000 ¥950,000 ¥930,000 構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit Gene Pulser Xcell ShockPod 165-2666 165-2667 165-2668 165-2669 165-2086 165-2088 165-2089 Gene Pulser Xcell Main unit Gene Pulser Xcell CE module Gene Pulser Xcell PC module Gene Pulser Xcell ShockPod エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個 ¥850,000 ¥550,000 ¥450,000 ¥80,000 ¥24,800 ¥24,800 ¥24,800 ※エレクトロポレーションキュベットはGene Pulser Xcell、Gene PulserⅡ、MicroPulserで使用できます。 www.bio-rad.com 遺伝子導入技術 395 エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム MicroPulser™ エレクトロポレーター MicroPulserはバクテリア、菌類などの微生物専用のシンプルな エレクトロポレーターです。エレクトロポレーションは化学的 遺伝子導入方法などと比べ、その効率は最も高い手法のひとつ です。 特長 ●● バクテリア、菌類のプリセットプログラムにより、標準的な プロトコールがすぐにご利用いただけます。 ●● アーククエンチング機能(アーク防止機能)により、誤って 高塩濃度に調整されたサンプルへのパルス発生を防止します。 ●● プリセット以外にもマニュアル設定が可能です。最大3000V まで出力が行え、より高い効率での導入の可能性が広がります。 ●● タイムコンスタント(τ) 、実効電圧の表示が可能です。 ●● コンパクト、軽量設計です。 E. coli パルサー、Gene Pulserシリーズにて得られた設定パラメーター は、MicroPulserにそのまま使用できない場合があります。その場合 は再検討が必要となります。ご注意願います。 ●● 電気容量(10μF) 、抵抗値(600Ω)は固定設計です。 Fungi Bacteria プリセットプログラムおよび実験例 Program Species Cuvette Size Preset Conditions Ec1 Escherichia coli 0.1cm 1.80kV, 1pulse Ec2 Escherichia coli 0.2cm 2.50kV, 1pulse StA Staphylococcus aureus 0.2cm 1.80kV, 1pulse, 2.5msec Agr Agrobacterium tumefaciens 0.1cm 2.20kV, 1pulse Ec3 Escherichia coli 0.2cm 3.00kV, 1pulse Sc2 Saccharomyces cerevisiae 0.2cm 1.50kV, 1pulse Sc4 Saccharomyces cerevisiae 0.4cm 3.00kV, 1pulse ShS Schizosaccharomyces pombe 0.2cm 2.00kV, 1pulse Dic Dictyostelium discoideum 0.4cm 1.00kV, 2pulse, 1.0msec Pic Pichia pastoris 0.2cm 2.00kV, 1pulse Unless the pulse time is truncated below 5msec, the unit will deliver the optimal time constant 〜5msec to samples in high-resistance media. 仕様 インプット電圧 100-120V 最大消費電流 2A RMS(100-120V) 最大出力 3,000V, 100A 出力波形 エクスポネンシャルパルス(減衰波) 出力電圧 200〜3000V 10Vステップ 操作環境 温度 3.5-35℃ 湿度 0-95% 規格 消費電力 サイズ 重量 EN61010 Meets EN61000-3-2 and EN61000-3-3 harmonic, flicker and voltage fluctuation standards that will be mandatory in 2001 FCC, Class A EC 1010, CE 200W 21(W)×31(D)×8(H)cm 2.9kg Ordering Information カタログ番号 165-2100 396 遺伝子導入技術 品名 MicroPulserエレクトロポレーター 構成内容:MicroPulser本体、ショッキングチャンバー、 キュベット10個(0.1cm 5個、0.2cm 5個) 価格 ¥498,000 www.bio-rad.com エレクトロポレーション エレクトロポレーションシステム エレクトロポレーションキュベット 再現性のあるエレクトロポレーションを行うには、ハイクオリ ティーなキュベットが必要です。Gene Pulser Xcell本体または、 MicroPulserから出力された正確なパルスは損失することなく キュベットに伝わります。バイオ・ラッドのキュベットは減菌 済で個別に包装されているので、無駄なく清潔にご使用いただ けます。大腸菌やバクテリアの高効率形質転換には、0.1cmキュ ベットを用い、高い電場強度を使用します。酵母の形質転換は、 0.2cmキュベットを用い、動物細胞の場合は0.4cmキュベットを 使用します。バイオ・ラッドは再現性のある結果が得られるよ うハイクオリティーなキュベットを提供します。 導入効率 Gene Pulserシリーズ、MicroPulser用に規定されたキュベットに より、最大のエレクトロポレーション効率が得られます。 検査と試験キュベットには製造過 程中に数種の検査と、品質保証の ために実際にエレクトロポレー ション試験が行われています。 殺菌キュベットはそれぞれフタを もち、γ線による3段階の殺菌が行 われ、1個ずつ包装されています。 スムーズな電極表面アルミニウム 電極はサンプル全体に均一の電場 がかかるよう、エッチングクリー ニングが11段階行われています。 頑丈な構造キュベットは非常に高 い電圧(電場)パルスがかかるた め、丈夫なポリカーボネート製と なっています。 色による識別0.4cm、0.2cm、0.1cm キュベットはそれぞれ包装が色分 けされています。 徹底された洗浄 キュベット内はクリーンルーム環 境内での組立てと、2種類の洗浄 繰り返しによってコンタミネー ションの心配がありません。 堅固なチャンバー継ぎ目のない チャンバーはサンプル漏れの可能 性を排除し、またその堅固な構造 のため電極間は常に平行に保たれ ます。 キュベット容量 キュベットタイプ 容量 キャップの色 0.1cm 20μl〜 80μl 茶色 0.2cm 40μl〜400μl 緑色 0.4cm 200μl〜800μl* 青色 エレクトロポレーションキュベットは1回のみの使用を お勧めしております。再使用または当社製以外のキュベッ トの使用は品質保証の対象外となりますのでご注意願 います。 *350μl〜400μlが最適です。 Ordering Information カタログ番号 165-2088 165-2086 165-2089 165-2088B05 165-2086B05 165-2089B05 165-2091 165-2092 165-2093 165-2091B05 165-2092B05 165-2093B05 165-2091B10 165-2092B10 165-2093B10 品名 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個×5箱 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個×5箱 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個×5箱 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 500個 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 500個 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 500個 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 2,500個 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 2,500個 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 2,500個 エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 5,000個 エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 5,000個 エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 5,000個 www.bio-rad.com 価格 ¥24,800 ¥24,800 ¥24,800 ¥99,400 ¥99,400 ¥99,400 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥650,000 ¥650,000 ¥650,000 ¥1,000,000 ¥1,000,000 ¥1,000,000 遺伝子導入技術 397 パーティクルデリバリーシステム パーティクルデリバリーシステム 多様な細胞と形質転換 PDS-1000/Heは、ターゲット細胞より小さいマイクロキャリア (微粒子)にDNAをコーティングし細胞に撃ち込むことにより形 質転換します。今日、利用できるいくつかの形質転換法のうち、 パーティクルデリバリー法は、細胞種に関わらず、広範囲な応 用が期待できます。この方法は、従来の胚へのマイクロインジェ クション法に比べ、操作が非常に簡単であり、時間がかかりま せん。このパーティクルデリバリー法は、撃ち込みの前後処理 が少なくて済み、インタクトな培養細胞への形質転換にも便利 な方法です。 最近のレポートでは、化学的方法、リポフェクション、エレク トロポレーションでさえ難しいセンシティブな哺乳動物細胞に PDS-1000/He を用いてin vitro で形質転換する方法が報告されて います。また、より少量のDNAと細胞でトランジェントまたは ステーブルな形質転換が可能です。初代のパーティクルデリバ リー装置は火薬式でした。ヘリウムの方式を用いたPDS-1000/ Heは、これよりも再現性、使用上の安全性に優れており火薬に よるコンタミネーションがありません。また、組織に与えるダ メージも非常に少なくなっています。一定の圧力で破裂するラ プチャーディスクを用いて、マイクロキャリア(微粒子)の速 度をコントロールしています。 Sample DNA coated microcarrier Gas Helios Gene Gun System Particle Delivery Method 2つのパーティクルデリバリー Factors Affecting Transformation Helios Gene Gunシステム PDS-1000/He* 状態 In situ, in vitro, in vivo, ex vivo In vitro, ex vivo, in vivo(plants) エリア 狭い(2cm2) 広い(40cm2) He圧 100-600psi** 種類 動物:皮膚、器官 培養細胞(マウス、 ウサギ、魚など) 450-2,200psi 動物:培養細胞 (付着性動物細胞、 植物細胞) 植物:葉、分裂組織 酵母、バクテリア、その他微生物 植物:卵、藻類、菌類、 植物、バクテリア 酵母、バクテリア、その他微生物 オルガネラ、葉緑体、ミトコンドリア 詳しい情報はwww.bio-rad.com/genetransfer/をご覧ください。 *この製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要です。 **高圧ガス保安法の規制に基づき、560psi以下でご使用ください。 本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。 また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。 ご購入にあたっては、設置条件およびご使用上の注意点等をお問い合わせください。 398 遺伝子導入技術 www.bio-rad.com パーティクルデリバリーシステム Helios® Gene Gun システム Helios Gene Gunシステムは多彩な目的細胞にin vivo にて迅速 に直接撃ち込むために独特なハンドヘルドタイプの銃身部を持 ちます。細いチューブ内壁に目的細胞に導入するDNAもしくは RNAをコーティングした金粒子を付着させそれをヘリウム圧に て撃ち込みます。専用のチュービングプレップステーション及 びチュービングカッターにより一度に約40のサンプルカート リッジが作製できます。サンプルカートリッジホルダーには一 度に最大12のサンプルカートリッジが装着できます。必要に応 じて連続に撃ち込みを行うことや、ターゲット部を変えて撃ち 込むことが可能です。 Helios Gene Gunシステムを用いて遺伝子導入を行うことによ り、in vivo をターゲットとした新しく幅広い研究の可能性が広 がります。この可能性は遺伝子治療(特にガン治療、傷の治療 および感染症)を研究する上で特に有効と考えられています。 植物への応用としては茎頂組織や葉のin vivo トランスフォー メーションなどが行われています。 またDNAワクチン(Genetic Immunization)の分野では皮膚に 直接撃ち込むことによりDNA量を少なく(μgオーダー)手間の かかるタンパク質精製の過程が省けます。体液性免疫や細胞媒 介性免疫においてはこの技術が動物において試みられています。 Helios Gene GunシステムはPDS-1000/Heと 同様にBiolistic技術をもとに開発された、パー ティクルデリバリーシステムである。 DNAをコーティングした金粒子をヘリウム ガス圧力によって加速し目的の細胞へ撃ち 込む。 仕様 Helios Gene Gun Tubing Prep Station 85×10cm Physical 大きさ 20×25cm 重さ 1.4kg 5.1kg 材質 スーパーエポキシ、ポリカーボネート アルミニウム、アクリル シリンダー アセタール バレルライナー ライトン O-リング ベイトン Electrical 最大電流 10mA peak 125mA 電源 9V DCアルカリ電池 100-120V、50/60Hz 電池寿命 約1000回 Functional 圧力 600psi(≒42kg/cm2) maximum helium 30psi(≒2.1kg/cm2)N2 この商品は高圧ガス保安法の規制に基づき、560psi以下でご使用ください。 発砲数 1ホルダー当り最大12サンプル チュービングへの注入 マニュアル式 使用環境 周辺温度 10-32℃ 0-60℃ 相対湿度 30-80%(湿度) 10-90%(湿度) www.bio-rad.com 遺伝子導入技術 399 パーティクルデリバリーシステム Ordering Information カタログ番号 165-2431J2 品名 Helios Gene Gunシステム(100/120V 50/60Hz用) 価格 ¥6,400,000 構成内容: 「Helios Gene Gunキット」 Helios Gene Gun(1)、カートリッジエクストラクターツール(1)、カートリッジホルダー(5)、 交換用バレルライナー(5)、O-リング(5)、電池9V(1)「ヘリウムホースアッセンブリー」 「ヘリウムレギュレーター」(GA580フィメールフィッティング プレッシャーリリーフ/バルブ付)、 最大圧2,600psi(1)「チュービングプレップステーション(100/120V)」 チュービングプレップステーション(1)、3/16"メールルアー(2)、チュービングサポートシリンダー(1)、 1/8"レンチルアー(2)、パワーコード(1)、レンチ(1,5/64")、O-リング(5)、 シリンジホルダー(1、10cc用)、N2レギュレーターホース(Nalgene 12ft) 「シリンジキット」シリンジアダプターチュービング(5ft、0.104"ID×0.192"OD)、 シリンジ10cc(5)、1/8"フィーメールルアーフィッティング(5)「チュービングカッター」 チュービングカッター(1)、レザーブレード(10)「Helios 条件設定キット」0.6μm金粒子(0.25g)、 1.0μm金粒子(0.25g)、1.6μm金粒子(0.25g)、PVP(0.5g、MW360,000) Helios Gene Gun 関連製品 165-2424 Helios Gene Gun用条件設定キット ¥110,000 構成内容:0.6μm金粒子(0.25g)、1.0μm金粒子(0.25g)、 1.6μm金粒子(0.25g)、Heliosカートリッジキット(1) 165-2262 165-2263 165-2264 165-2440 ¥55,000 ¥55,000 ¥55,000 ¥29,000 165-2441 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ0.6μ金粒子、0.25g PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.0μ金粒子、0.25g PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.6μ金粒子、0.25g Helios Gene Gun用カートリッジキット 構成内容:PVP(MW360,000、0.5g)、 カートリッジバイアル(5)、乾燥剤(5)、 ゴールドコート用チューブ(50ft) Helios Gene Gun用ゴールドコート用チューブ(50ft) スペアパーツ 165-2416 165-2417 165-2426 165-2435 Helios Gene Gun用O-リング 5個 Helios Gene Gun用バレルライナー 5個 Helios Gene Gun用カートリッジホルダー 5個 Helios Gene Gun用カートリッジエクストラクターツール ¥3,000 ¥12,000 ¥22,000 ¥3,000 165-2475 Helios Gene Gun用Diffusion Screen 5個 ¥11,000 ¥25,000 ※Helios Gene Gunにはこの他に別途購入品(ヘリウムガス、窒素ガス、窒素レギュレーター等)が必要です。詳細はお問い合わせください。 Helios Gene Gunシステムご使用に関して Helios Gene Gunシステムは、高圧ガスを使用するため高圧ガス保安法の対象となります。以下の点を遵守していただくことにより、 高圧ガス保安法で定める“適用除外”となります。 ●● 本体へは、ヘリウムガス以外を供給しないでください。 ●● ヘリウム供給元へ接続するレギュレーターの2次圧(出力)を1Mpa未満にしてください。 ●● 全ガス漏洩時、実験室の酸素濃度が18%未満にならない環境でご使用ください。 (10m 3 のボンベをご使用の場合は、目安として 60m3以上の容積が必要となります) ●● 実験室には十分な換気設備を備え、ガス漏洩時、ガスが滞留しないようにしてください。 ●● 弊社納品後のシステムは、構成品の除去や入れ替え、改造など行わないでください。 400 遺伝子導入技術 www.bio-rad.com パーティクルデリバリーシステム PDS-1000/He™ and Hepta™ システム PDS-1000/Heは、減圧装置とヘリウムの圧力を用いて、目的の 細胞へマイクロキャリアを効果的に加速して撃ち込む装置です。 撃ち込み前にチャンバーのドアを閉め、チャンバー内を陰圧に します。これは、DNAでコーティングしたマイクロキャリアの 空気抵抗を抑えるために必要で、安全インターロックになって います(この装置は、チャンバー内が陰圧にならないと作動し ません)。 “Fire”スイッチを押し、ヘリウムガスがメーターバルブで調整し た目盛りまで上部シリンダー内に流れ込みます。ガスは、設定 したラプチャーディスクが破裂圧力に到達するまで送られます。 破裂により、ヘリウムガス衝撃圧力が発生し、マイクロキャリ アアッセンブリーに伝わります。 この衝撃圧力はプラスチックのマクロキャリア上のDNAコー ティングしたマイクロキャリアをターゲット細胞の方向へ移動 させます。 マクロキャリアアッセンブリーとターゲットサンプル間にス トッピングスクリーンが取り付けられており、発射されたプラ スチックディスク(マクロキャリア)はこのスクリーンで停止し、 マイクロキャリアのみスクリーンを通過して、ターゲット細胞 へ撃ち込まれます。 Gas acceleration tube Macrocarrier Rupture disk Microcarrier launch assembly Stopping screen DNA-coated microcarriers Target cells Target shelf PDS-1000/Heの作動方式図解 矢印は、ヘリウムの流れる方向。 PDS-1000/He Heptaアダプター PDS-1000 HeptaアダプターはPDS-1000/Heと接続することに よって、従来のPDS-1000システムより、一度に7〜10倍の多く の細胞へ導入することが可能です。 注意:本 製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要で す。現在、所有されているPDSシステムに、Heptaアダプターを導 入される場合も、新たに届出が必要です。 特長 ●● パーティクルデリバリー法なので、リポフェクションのよう に導入後の細胞毒性がありません。 ●● C. Heptaアダプター elegans の研究で、多数の実績があります。 PDS-1000/He装置 マイクロキャリアランチアッセンブ リー、ヘリウムプレッシャーゲージ (上部)装備のメインチャンバー、中 央のゲージ(装置左側)は、チャンバー 内の陰圧をモニターし、下方2つのノ ブは、吸引とベント速度を調整。 ●● ストッピングスクリーン以外の消耗品は標準システムと共通 です。 Bombardment Parameters* Cell Type Vacuum, " Hg Target Distance, cm Helium Pressure, psi Particle Size Yeast 28 6 1,300 0.6μm gold Algae 29 6 1,300 0.6μm gold Plant Embryos 28 6 1,300 1.0μm gold Callus or cell cultures 28 9 1,100 1.0μm gold Subcellular organelles 28 6 1,300 0.6μm gold Animal Tissue cultures 15 3 1,100 1.6μm gold Tissue sections 25 9 1,100 1.6μm gold * Recommended settings as starting parameters for bombardment of a variety of cell types. Many factors affect bombardment efficiency, but most users will find it sufficient to optimize the major variables individually, then test their interactions on a limited scale. www.bio-rad.com 遺伝子導入技術 401 パーティクルデリバリーシステム Ordering Information カタログ番号 品名 PDS-1000/He* 165-2257J1 PDS-1000/He 165-2258J1 PDS-1000/He Hepta システム 165-2225 PDS-1000/He Hepta アダプター PDS-1000/He 消耗品 165-2278 PDS-1000/He条件設定キット500回 構成内容:1.0μm金粒子および1.6μm金粒子0.25g 8種類のラプチャーディスク100枚 マクロキャリア500枚 ストッピングスクリーン500枚 165-2280JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回 構成内容:1.0μm金粒子0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚 マクロキャリア500枚 ストッピングスクリーン500枚 165-2281JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回 165-2282JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回 165-2283JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回 165-2284JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回 165-2285JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回 165-2286JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回 165-2287JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回 165-2290JA 価格 ¥5,400,000 ¥7,200,000 ¥1,800,000 ¥175,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 ¥145,000 165-2291JA 165-2292JA 165-2293JA 165-2294JA 165-2295JA 165-2296JA 165-2297JA PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回 構成内容:1.6μ金0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚、マクロキャリア500枚、 ストッピングスクリーン500枚 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回 PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回 ¥150,000 165-2326 165-2327 165-2328 165-2329 165-2330 165-2331 165-2332 165-2333 PDS-1000/Heラプチャーディスク 450psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 650psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 900psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,100psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,350psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,550psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,800psi** 100枚 PDS-1000/Heラプチャーディスク 2,000psi** 100枚 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 ¥23,000 165-2262 165-2263 165-2264 165-2335 165-2336 165-2226 165-2322 PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、0.6μ金粒子0.25g PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.0μ金粒子0.25g PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.6μ金粒子0.25g PDS-1000/He用マクロキャリア、500枚 PDS-1000/He用ストッピングスクリーン、500枚 PDS-1000/He Hepta用ストッピングスクリーン 50枚 PDS-1000/Heマクロキャリアホルダーパッケージ、5個 ¥55,000 ¥55,000 ¥55,000 ¥36,000 ¥25,000 ¥93,000 ¥29,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 ¥150,000 *このシステムには別途購入品が必要です。また、消耗品は附属されておりません。 **1psi≒0.07kg/cm2≒6.9kPa 本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。 また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。 402 遺伝子導入技術 www.bio-rad.com