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遺伝子導入技術 - Bio-Rad

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遺伝子導入技術 - Bio-Rad
遺伝子導入技術
遺伝子導入技術
386
トランスフェクション試薬
387
エレクトロポレーション
390
エレクトロポレーション試薬
390
エレクトロポレーションシステム
391
パーティクルデリバリーシステム
398
遺伝子導入技術
遺伝子導入技術
生体内へDNAおよびRNAを遺伝子導入することは、生命現象を解析する上で最も一般的なツールの一つとなっています。現在では、様々
な標的や実験系に合わせて多くの遺伝子導入技術が確立されています。バイオ・ラッドは1986年のジーンパルサー発売以来、常にこ
の分野のリーダーとして多くの製品を提供しております。
◦
roplast
s, mito
chondri
a)
◦
lles (ch
lo
Attach
ed
◦
Fungi
Organe
Adhere
nt Cells,
— Gen
e Knock
downs
Trypsin
ized
◦
Ex Vivo
◦
Organ
◦
◦
Bacteria
Skin or
◦
◦
Plants
Page
Yeast
◦
◦
Detach
◦
◦
Detach
◦
◦
Leaves
◦
◦
Pollen
◦
Transfection Technologies
Plant C
388
389
遺伝子導入セレクションガイド
Plant C
siLentFect™ lipid reagent for RNAi
TransFectin™ lipid reagent
Plant C
Adhere
nt Cells,
s
Mamm
alian C
ells
s (e.g.,
Culture
r Tissue
Cells o
sion Ce
ll
Suspen
s
Culture
ungi
Other F
Organs
in Vivo
Bacteri
a
Bacteri
a
egative
ositive
Gram-N
Gram-P
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ves
ms in S
Meriste
in Situ
ed Lea
ed Meri
stems
xplants
ell Call
us or E
ultures
erent C
ell Adh
ell Susp
ension
Culture
s
blood)
バイオ・ラッドは、遺伝子導入に関連する様々なアプリケーションに、豊富なラインアップでお応えいたします。次の表から標的の種
類やアプリケーションを選択し、最適な手法や製品をお選びいただけます。それぞれの製品に関する詳細は、次ページ以降をご参照
ください。
Animals
Lipid Transfection
Electroporation
Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーション
システム
392
Gene Pulser Xcell™ コンプリートシステム
394
◦*
◦*
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
Gene Pulser Xcell CEシステム
394
◦*
◦*
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
Gene Pulser Xcell PCシステム
394
◦
◦
◦
◦
MicroPulser™エレクトロポレーター
396
◦
◦
◦
◦
Biolistic Particle Delivery
Helios® gene gun システム
399
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
PDS-1000/He™
401
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
PDS-1000/He Hepta™ システム
401
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦
◦最適
◦適
◦可
*プロトプラスト化が必要
トランスフェクション試薬(P.387)
エレクトロポレーション(P.390)
核酸
Ions
パーティクルデリバリー(P.398)
Gene
A
脂質
DNA coated
microcarrier
導入
複合体形成
Cell Membrane
B
リポソーム
Sample
細胞
Gas
エンドサイ
トーシス
Helios Gene Gun System Particle Delivery Method
分析
386
遺伝子導入技術
C
www.bio-rad.com
トランスフェクション試薬
トランスフェクション試薬
カチオン性脂質によるトランスフェクションは、広範囲の真核細胞に適しています。市販されている多くの脂質性トランスフェクショ
ン試薬は、カチオン性脂質と、dioleoylphosphatidylethanolamine(DOPE)やコレステロールなどの脂質の水性懸濁液です。カチオ
ン性脂質は、陽電荷表面を有する小さなリポソームを形成します。カチオン性脂質懸濁液にDNAを加えると、DNAの陰電荷を有する
リン酸基がリポソームの陽電荷表面と相互に作用します。これらの脂質ーDNA複合体は陰電荷を有する細胞膜表面と結合します。一
般的に、脂質ーDNA複合体は、エンドソームおよびリソソームを通じて細胞内に取り込まれると考えられています。
核酸
脂質
導入
複合体形成
リポソーム
細胞
エンドサイトーシス
分析
セレクションガイド
siLentFect™ Lipid Reagent
TransFectin™ Lipid Reagent
特 長
RNAi用試薬
汎用性試薬
用 途
siRNA
遺伝子発現
siRNA(shRNA)
細胞株
多様な細胞
例:A549、BHK、HeLa、
K562、Jurkat、Vero、
Primary Fibroblasts
多様な細胞
例:A549、MCF-7、
HeLa、HUVEC、Jurkat、
Primary Fibroblasts
www.bio-rad.com
遺伝子導入技術
387
トランスフェクション試薬
siLentFect™ Lipid Reagent for RNAi
RNA抽出キット:
P.2
ラボチップ電気泳動:
P.152
siLentFectは幅広い細胞種で利用可能で、導入が難しい細胞に
対しても有効です。上皮細胞でのタイトジャンクションの研究
によく用いられるCaco-2細胞は導入が比較的困難な細胞系です
が、シカゴ大学の研究室ではsiLentFectを用いてsiRNAを導入し、
MLCK1遺伝子の発現抑制に成功しました。詳細はBulletin 5370
に記載されております。
MCF-7細胞への蛍光siRNAの効果的な導入
左図:Hoechst核染色 右図:蛍光ラベルsiRNA
●● siRNAとの親和性が高くなっていますので、siRNAと試薬の使
●● 幅広い細胞種において高い遺伝子導入効率を示します。
●● 至適な濃度では細胞毒性は低く抑えられていますので、適正
な発現抑制効果実験を行うことができます。
●● siLentFectを用いてsiRNAとdsDNA
vectorsを同時に導入する
ことが可能です。
Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of Plates/Wells
Culture
Volume of
Vessel Size Plating Media
siRNA
conc.
Volume of Serum
Free Medium
siLentFect
Reagent
96well
0.1ml
5-20nM
20μl
0.05-0.4μl
24well
0.5ml*
5-20nM
50μl
0.25-2.0μl
12well
1.0ml*
5-20nM
100μl
0.5-4.0μl
6well/35mm
2.5ml*
5-20nM
250μl
1.0-5.0μl
60mm
5.0ml*
5-20nM
500μl
2.5-10μl
100mm
10.0ml*
5-20nM
1.0ml
5.0-20μl
0.0 0.25 0.5 0.75 1.0
2.0
siLentFect volume, μl/well
Luciferase activity, RLU
用量を少なくできます。
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
Downregulation, %
リアルタイム
PCR試薬:
P.420
最 近 で はsmall interfering RNA(siRNA) に よ る ジ ー ン サ イ レ
ンシングが遺伝子発現解析研究における重要なツールとなって
きています。ジーンサイレンシングでは、特に低い細胞毒性が
リポフェクションを評価する時の重要なファクターです。細胞
毒性が高い場合、細胞の生存率の低下や形態の変化により正
確な発現抑制効果の測定が難しくなります。バイオ・ラッドの
siLentFect Lipid ReagentはsiRNAの導入に特化したリポフェク
ション試薬です。siRNAとのアフィニティが高く、かつ細胞毒
性を抑えた試薬ですので、siRNAを用いたジーンサイレンシン
グ実験に適しています。
3.0
3,000
2,500
2,000
1,500
1,000
500
0
0
2
10
siRNA, nM
20
50
0
20
40
60
80
100
0.0 0.25 0.5 0.75 1.0 2.0 3.0
siLentFect volume, μl/well
Downregulation, %
リアルタイム
PCR機器:
P.411
A405
See Also
セルカウンター:
P.24
0
20
40
60
80
100
0
2
10
20
siRNA, nM
50
siLentFect Lipid ReagentとsiRNAの使用量の違いによる導入効果
上段:恒常的にlacZを発現させたCHO細胞に対して、lacZをターゲットに
したsiRNAを導入したときのsiLentFect Lipid Reagentの使用量の違いによ
るβガラクトシターゼ活性(左)とノックダウン効率(右)。24wellプレー
トを使用。
下段:恒常的にルシフェラーゼを発現させたCHO細胞に対して、ルシフェ
ラーゼをターゲットにしたsiRNAの使用量の違いによるルシフェラーゼ活
性(左)とノックダウン効率(右)。siLentFect Lipid Reagentは96wellプレー
トで、1wellあたり0.3μl使用。
*Carefully aspirate medium 15-60 minutes prior to transfection and add onehalf volume of medium.
Examples of Cell Lines Successfully Transfected With siLentFect Lipid Reagent*
Cell Line
Cell Type
Cell Line
Cell Type
184htrt
Human breast epithelial
LNCap
Human prostate adenocarcinoma
4T1
Mouse mammary tumor
MCF-7
Human breast adenocarcinoma
A549
Human lung carcinoma
Murine EC
Mouse endothelial
Caco-2
Human colon adenocarcinoma
NIH 3T3
Mouse embryo fibroblast
CHO-K1
Chinese hamster ovary epithelial
PC-3
Human prostate cancer
COS-7
SV40-transformed African green monkey kidney
Primary fibroblast
Human foreskin fibroblast
HEK 293
Human embryonic kidney
Primary keratinocyte
Human keratinocyte
HeLa
Human cervical adenocarcinoma
Primary ovarian
Epithelial
HepG2
Human liver carcinoma
SVEC4
Vascular endothelial
HUVEC
Human umbilical vein endothelial
VSMC
Vascular smooth muscle
*詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。
Ordering Information
カタログ番号
170-3360
170-3361
170-3362
388
遺伝子導入技術
品名
siLentFect Lipid Reagent, 0.5ml
siLentFect Lipid Reagent, 1.0ml
siLentFect Lipid Reagent, 5×1.0ml
価格
¥34,000
¥53,000
¥168,000
保存
4℃
4℃
4℃
www.bio-rad.com
トランスフェクション試薬
TransFectin™ Lipid Reagent
TransFectin Lipid Reagentは、カチオン性脂質を用いたトランス
フェクション試薬です。様々な細胞において、高い遺伝子導入
効率とタンパク質の高レベルな発現を実現します。
●● 幅広い細胞において高い遺伝子導入効率を示します。
●● 他の高効率な試薬と比べて、
細胞毒性は低く抑えられています。
●● タンパク質の高レベルな発現を実現します。
0.9
0.8
0.7
0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0.0
セルカウンター:
P.24
リアルタイム
PCR機器:
P.411
RNA抽出キット:
P.2
1
2
3
Volume of TransFectin, μl
プラスミドDNA
抽出キット:
P.4
4
TransFectin LipidReagentの使用量の違いによる導入効果
K562細胞に対して、βガラクトシターゼを発現させるためのプラスミド
DNAを導入したときのTransFectin LipidReagentの使用量の違いによるβ
ガラクトシターゼ活性。
1wellあたり4×105 cellを培養した24wellプレートを使用。導入後、24時
間後測定。
プラスミドDNAの使用量はそれぞれ0.25μl(■)、1.00μl(■)使用。
●● シンプルな3ステップのプロトコールです。
●● トランスフェクション後の培地交換は不要です。
●● 40〜90%
O.D. 405
See Also
confluenceの細胞に使用できます。
●● 血清含有培地上の細胞へ使用できます。
Suggested Reagent Quantities for Different Sizes of
Plates/Wells
Culture
Vessel Size
Surface
Volume of
Area (cm2) Plating Media
Plasmid
DNA
Volume of Serum TransFectin
Free Medium
Reagent
96well
0.32
0.1ml
50-200ng
25μl
0.1-0.6μl
24well
1.9
0.5ml
0.25-1.0μg
50μl
0.25-4.0μl
12well
3.8
1.0ml
0.50-2.0μg
100μl
2.0-8.0μl
6well/35mm
9.2
2.0ml
1.0-4.0μg
250μl
5.0-15μl
60mm
21
5.0ml
2.0-8.0μg
500μl
15-20μl
100mm
60
10.0ml
12-36μg
1.5ml
40-60μl
無血清培地50μlに対して
0.25〜1μgのプラスミドDNA
無血清培地50μlに
対して0.5〜4μlの
TransFectin
等容量のTransFectinおよび
DNA溶液を混和
20分間インキュベートして
DNA-リポソーム複合体を形成
培養細胞
混和後、DNA-リポソーム
複合体を細胞に直接添加
(100μl/24ウェルプレート)
一晩インキュ
ベートした
後に測定
TransFectinの3ステッププロトコール
Examples of Cell Lines Successfully Transfected With TransFectin Lipid Reagent*
Cell Line
Cell Type
Cell Line
Cell Type
A375
Human malignant melanoma
K562
Human bone marrow, chronic myelogenous leukemia
A549
Human lung carcinoma
LLC-MK2
Monkey epithelial kidney
ACHN
Human renal adenocarcinoma
LNCaP
Human prostate adenocarcinoma
BHK
Newborn Syrian golden hamster kidney
MEF
Mouse embryo fibroblast
CHO
Chinese hamster ovary
NBT-II
Rat bladder carcinoma
COS-7
SV40-transformed African green monkey kidney
Neuro-2a
Mouse neuroblastoma
CV-1
African green monkey fibroblast kidney
NIH 3T3
Mouse embryo fibroblast
HEK 293
Human embryonic kidney
SH-SY5Y
Human neuroblastoma
HeLa
Human cervical adenocarcinoma
SW480
Human colorectal adenocarcinoma
Hep G2
Human epithelial liver carcinoma
Vero
African green monkey kidney
*詳しくは Bulletin 5343、または www.bio-rad.com/transfectionprotocols/をご参照ください。
Ordering Information
カタログ番号
170-3350
170-3351
170-3352
品名
TransFectin Lipid Reagent, 0.5ml
TransFectin Lipid Reagent, 1.0ml
TransFectin Lipid Reagent, 5×1.0ml
www.bio-rad.com
価格
¥29,000
¥45,000
¥147,000
保存
4℃
4℃
4℃
遺伝子導入技術
389
エレクトロポレーション
エレクトロポレーション試薬
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションは、短パルスの電流を利用して、DNA
やRNAなどの高分子を細胞内に導入する技術です。細胞を電気
パルスにさらすと細胞膜に一時的に孔が形成され、核酸はこの
孔を通過して細胞内に入り込むと考えられています。この手法
には、エレクトロポレーション装置とエレクトロポレーション
用のキュベットが必要です。バイオ・ラッドは、Gene Pulser
MXcellシステム、Gene Pulser Xcellシステム、MicroPulserおよ
び専用のエレクトロポレーションキュベットを提供しています。
Gene Pulserに最適化されたGene Pulserエレクトロポレーショ
ンバッファーをご用意しています。
Ions
Gene
A
Cell membrane
B
C
エレクトロポレーション(電気穿孔法)の原理
ターゲットとなる細胞を高電圧の電場にさらすと、細胞膜と細胞質の間
で一時的に極端な電位差が生じます(A)。この影響で細胞膜の構造が変
化し、透過性が上昇します(B)
。電場から開放されると、細胞膜の構造
は回復しますが、この際に、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖、
低分子などの物質が、細胞内に取り込まれます(C)
。エレクトロポレーショ
ンは、このような細胞膜の構造変化を利用し、目的となるDNAを細胞内
へと導入する方法です。
エレクトロポレーション試薬
See Also
セルカウンター:
P.24
ラボチップ電気泳動:
P.152
タンパク質電気泳動:
P.174
Gene Pulser® エレクトロポレーションバッファー
浮遊系細胞、初代培養細胞などへ有効なエレクトロポレーショ
ン用バッファーです。
動物細胞へのsiRNA、プラスミドDNAの導入に威力を発揮します。
特長
●● 高い遺伝子導入効率を維持しながら、導入細胞の致死率を低
減させます。
●● Gene
Pulserシリーズを含む様々なエレクトロポレーション装
置に使用可能です。
●● 様々な細胞株にsiRNA、プラスミドDNAの遺伝子導入を可能
にします。
※他の試薬使用時のエレクトロポレーション条件とは、大きく
異なります。目安としては、PBS使用時の1/2〜1/3の電気容
量(μF)が至適条件に近い条件となります。
Ordering Information
カタログ番号
165-2676
165-2677
390
遺伝子導入技術
品名
Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 1.8ml×10本
Gene Pulserエレクトロポレーションバッファー 30ml
価格
¥29,000
¥42,000
保存
4℃
4℃
www.bio-rad.com
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser® システム
エクスポネンシャルパルス
(減衰波)
と
スクエアパルス
(矩形波)
使用するパルスの波形は、エレクトロポレーションの効率を向
上させる重要な条件のひとつです。一般に用いられている電気
パルスの波形はエクスポネンシャルパルスとスクエアパルスで
す。Gene Pulser XcellおよびGene Pulser MXcellはその両方を供
給することができます。
PulseTrac回路
独自のPulseTrac回路が抵抗値やコンデンサー容量を測定し、供
給されるパルスの誤差を最小限に抑えます。また、サンプル抵
抗値の事前測定機能やアーク防止機能により、貴重なサンプル
の浪費を防ぐことができます。さらに、余分な電気を自動的に
放電する機能やコンデンサーのキャリブレーション機能などが、
安全で信頼性の高い実験を支援します。
V0
Voltage, V
エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広
く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与える
ことで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増すこ
とにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖などの物
質を取り込ませます。
V0
e
τ
A
Time, ms
A. エクスポネンシャルパルスは最も広く使用されている波形である。コ
ンデンサーより放出されたパルスの電圧は、時間とともに減衰する。使
用されるエクスポネンシャルパルスはタイムコンスタントと電場強度の
2つのパラメータで表現される。タイムコンスタント(τ)は、設定した電
圧を初期電圧V0とするとき、電圧がV0の37%まで減少するのに要する時間
と定義される。タイムコンスタントは回路の抵抗値(R)とコンデンサー容
量(C)により規定される(τ=R×C)。電場強度(E、単位はkV/cm)は初期
電圧V0とキュベットの電極間距離で規定される。
Voltage, V
V0
B
Vt
t
Time, ms
B. スクエアパルスはエクスポネンシャルパルスでは生存率が低い細胞に
対して使用される。スクエアパルスを使用することで、一般に生存率が
向上すると言われている。エクスポネンシャルパルスのタイムコンスタ
ントを十分に大きくした条件下で、パルスを任意のタイミングで終了さ
せることにより、ほぼ一定の電圧を維持したスクエアパルスを供給する。
個々のスクエアパルスは設定電圧およびパルスの長さ(t)で表現される。
また、複数のパルスを使用する際は、パルスの間隔もパラメーターのひ
とつとなる。実際には、初期電圧とパルス終了時の電圧には僅かな差が
生じるが、この差はpulse droop(Vt)と呼ばれ、通常は5%以内に抑えら
れる。
www.bio-rad.com
遺伝子導入技術
391
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser MXcell™ エレクトロポレーションシステム
See Also
セルカウンター:
P.24
エレクトロ
ポレーション
バッファー:
P.390
タンパク質
電気泳動関連:
P.174
Gene Pulser Mxcellは全く新しいプレートタイプのエレクトロポ
レーションシステムです。
反応容器は96well、24well、12wellの3種類の専用プレートがあ
り、1プレート内でウェルごとに24種類までの異なるプログラ
ムを実行できます。内蔵されたプログラムを使用することで、
1回の実験でエクスポネンシャルパルス(減衰波)、スクエアパ
ルス(矩形波)の両方をパルスすることや、電圧、電気容量の
グラジェントパルスをかけることが可能であり、その細胞に最
適な導入条件を簡単に見つけることができます。
本体
●● プレートタイプの簡単操作。
プレート
チャンバー
●● プリセットプログラムによる簡便な条件検討が可能。
●● 1度の実験で24種類のプログラムを実行可能。
●● エクスポネンシャルパルス、
スクエアパルスの同時実行が可能。
●● 1プレートあたり2分で操作完了。
●● 専用シングルキュベットチャンバーを接続することでキュ
エレクトロポレーション
プレート96Well
ベットの使用が可能。
エクスポネンシャルパルス(減衰波)での条件検討
96well/Exp, Vgrad/Cgrad
ウェルセットABCD1~12:
電圧勾配(ΔV )、350μF、
1000Ω
A
B
C
ウェルセットEFGH1~12:
コンデンサー容量勾配(ΔC )、
250V、1000Ω
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
100
100
100
200
200
200
300
300
300
400
400
400
200
200
200
350
350
350
500
500
500
1000
1000
1000
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
100
100
100
200
200
200
300
300
300
400
400
400
10
10
10
15
15
15
20
20
20
30
30
30
ΔV
(V)
D
E
F
G
ΔC
(μF)
H
スクエアパルス(矩形波)での条件検討
96well/Sqr, Vgrad, Dgrad
ウェルセットABCD1~12:
電圧勾配(ΔV )、2000μF、
1000Ω、20ms
A
B
C
ウェルセットEFGH1~12:
パルス持続時間勾配(ΔD )、
250V、2000μF、1000Ω
ΔV
(V)
D
E
F
G
ΔD
(ms)
H
エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)の組合せ条件検討
Opt 96well/Exp, Sqr
ウェルセットABCD1~12:
エクスポネンシャルパルス
1
E
X
P
A
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
150V
200V
250V
300V
350V
450V
250V
250V
250V
250V
250V
250V
350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 350μF 200μF 250μF 350μF 500μF 750μF 1000μF
B
C
ウェルセットEFGH1~12:
スクエアパルス
D
S
Q
R
E
150V
20ms
200V
20ms
250V
20ms
300V
20ms
350V
20ms
450V
20ms
250V
5ms
250V
10ms
250V
15ms
250V
20ms
250V
25ms
250V
30ms
F
G
H
392
遺伝子導入技術
www.bio-rad.com
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser MXcell用Single ShockPodキュベット
チャンバー
●● プロトコールはキュベット、プレート共通です。
●● チャンバーは片手で操作可能です。
●● 軽量です。
●● キュベットチャンバーは標準的キュベットが使用可能です。
Gene Pulser MXcell用
Single ShockPod
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート
Gene Pulser MXcellエレクトロポレーションシステム用の電極付
反応プレートです。
デスポザーブルであるため、コンタミネーションの心配があり
ません。
プレートの種類は96well、24well、12wellの3種類です。
Gene Pulser MXcell Sample Volume Selection Guide
Well Volume
Cell Concentration
Number of
Well Sets
12-well plate
1.0–1.5ml
1×106 to 1.5×107
12
24-well plate
500–800μl
5×105 to 8×106
24
96-well plate
100–200μl
1×105 to 2×106
24
0.4cm cuvette
400–800μl
4×105 to 8×106
N/A
Format
仕様
Gene Pulser MXcellシステム
入力電圧
100-120VACまたは220-240VAC 50/60Hz
消費電力
最大240W
規格
安全性EN61010、EMC EN61326 Class A
サイズ・重量
31×30×14cm 6.62kg
出力波形
エクスポネンシャルパルス、スクエアパルス
設定電圧(V)
10〜500(2V刻み)
コンデンサ容量(μF)
25〜2,475(25μF刻み)
設定抵抗値(Ω)
50〜1,500(50Ω刻み)、∞
サンプル抵抗値(Ω)
最低10(10〜500V設定時)
スクエアパルス幅(msec)
0.05〜9,999.95(10〜500V設定時)
スクエアパルス数
1〜3(10〜500V設定時)
スクエアパルス間隔(sec)
0.1〜10(10〜500V設定時)
Ordering Information
カタログ番号
165-2670JA
165-2670JB
165-2673
165-2681
165-2681B05
165-2682
165-2682B05
165-2683
165-2683B05
品名
Gene Pulser MXcellシステム
Gene Pulser MXcellシステムSingle Shock Pod付
Gene Pulser MXcell用Single Shock Pod
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 96well (5枚)
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 24well (5枚)
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well
Gene Pulser MXcell用エレクトロポレーションプレート 12well (5枚)
www.bio-rad.com
価格
¥1,320,000
¥1,440,000
¥250,000
¥38,000
¥180,000
¥38,000
¥180,000
¥38,000
¥180,000
遺伝子導入技術
393
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser Xcell™ エレクトロポレーションシステム
See Also
セルカウンター:
P.24
タンパク質電気泳動:
P.174
エレクトロポレーションは、効率の良い遺伝子導入法として広
く使用されている手法です。目的の細胞に電気パルスを与える
ことで細胞膜の構造を一時的に変化させ、その透過性を増す
ことにより、周囲に溶解している核酸、タンパク質、糖など
の物質を取り込ませます。エレクトロポレーションにおいて、
一般に用いられている電気パルスの波形はエクスポネンシャ
ルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩形波)です。Gene
Pulser Xcellはその両方を供給することができます。従来品Gene
Pulser、Gene PulserⅡの後継機種です。これまでのGene Pulser
シリーズにて得られた設定パラメータは、Gene Pulser Xcellに
そのまま使用できない場合があります。その場合は、再検討が
必要となります。
PCモジュール
CEモジュール
特長
●● エクスポネンシャルパルス(減衰波)とスクエアパルス(矩
形波)の両方を供給することができるため、原核細胞・真核細
胞を問わず幅広いターゲットへの応用が可能です。
本体
●● 易しい操作方法と広い表示画面により、初めての方でもすぐ
にお使いいただけます。
ShockPod™ Cuvette
Chamber
●● 広く使用されている哺乳動物や微生物へのプリセットプロト
コールが内蔵されており、条件検討の手間を軽減します。
●● 独自のPulseTrac回路は、正確なパルス供給、サンプルの抵抗
値測定、パルスの実効値やタイムコンスタントの表示等、様々
な側面で実験の信頼性を高めます。
●● 最大で144件のユーザープロトコールを保存し、呼び出して
使用することができます。また、過去100件分の実験結果を
自動的に保存します。
●● 高電圧回路(PC
module)使用時には最大3000Vまでの電圧
を供給できます。
プリセットプロトコール
Mammalian Cells
Bacterial Cells
Fungal Cells
CHO
E. coli
S. cerevisiae
COS7
A. tumefaciens
P. pastoris
3T3
P. aeruginosa
C. albicans
293
S. aureus
S. pombe
HeLa
B. cereus
D. discoideum
BHK21
S. pyrogenes
A549
L. plantarum
CV1
K562
HL60
Jurkat
HuT78
394
遺伝子導入技術
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エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
Gene Pulser Xcellコンプリートシステム
入力電圧
100-120VACまたは220-240VAC、50/60Hz
消費電力
最大240W
使用環境
温度:0-35℃、湿度:0-95%
規 格
安全性EN61010、EMC EN61326 Class A
サイズ(W×D×H)
Main unit:31×30×14cm
CE module:31×28× 9cm
PC module:31×28× 5cm
重 量
Main unit:6.62kg
CE module:3.08kg
PC module:1.90kg
出力波形
エクスポネンシャルパルス、スクエアパルス
高電圧回路(PC module使用)
低電圧回路(CE module使用)
設定電圧(V)
200〜3000(10V刻み)
設定電圧(V)
10〜500(2V刻み)
コンデンサー容量(μF)
10、25、50
コンデンサー容量(μF)
25〜3275(25μF刻み)
設定抵抗値(Ω)
50〜1000(50Ω刻み)、∞
設定抵抗値(Ω)
なし
サンプルの抵抗値(Ω)
最低20(200〜2500V設定時)
最低600(2500〜3000V設定時)
サンプルの抵抗値(Ω)
最低20
スクエアパルス幅(msec)
0.05〜5
スクエアパルス幅(msec)
0.05〜100
スクエアパルス数
1〜2
スクエアパルス数
1〜10
スクエアパルス間隔(sec)
5〜30
スクエアパルス間隔(sec)
0.1〜10
Ordering Information
カタログ番号
165-2660J1
165-2661J1
165-2662J1
165-2666J1
品名
Gene Pulser Xcellコンプリートシステム(動物細胞、植物プロトプラスト、バクテリア用)
構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit
Gene Pulser Xcell CE module
Gene Pulser Xcell PC module
Gene Pulser Xcell ShockPod
エレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm, 0.4cm 各50個
Gene Pulser Xcell CEシステム(動物細胞、植物プロトプラスト用)
構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit
Gene Pulser Xcell CE module
Gene Pulser Xcell ShockPod
エレクトロポレーションキュベット0.2cm, 0.4cm 各50個
Gene Pulser Xcell PCシステム(バクテリア用)
構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit
Gene Pulser Xcell PC module
Gene Pulser Xcell ShockPod
エレクトロポレーションキュベット0.1cm, 0.2cm 各50個
Gene Pulser Xcellコアユニット
価格
¥1,450,000
¥1,050,000
¥950,000
¥930,000
構成内容:Gene Pulser Xcell Main unit
Gene Pulser Xcell ShockPod
165-2666
165-2667
165-2668
165-2669
165-2086
165-2088
165-2089
Gene Pulser Xcell Main unit
Gene Pulser Xcell CE module
Gene Pulser Xcell PC module
Gene Pulser Xcell ShockPod
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個
¥850,000
¥550,000
¥450,000
¥80,000
¥24,800
¥24,800
¥24,800
※エレクトロポレーションキュベットはGene Pulser Xcell、Gene PulserⅡ、MicroPulserで使用できます。
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遺伝子導入技術
395
エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
MicroPulser™ エレクトロポレーター
MicroPulserはバクテリア、菌類などの微生物専用のシンプルな
エレクトロポレーターです。エレクトロポレーションは化学的
遺伝子導入方法などと比べ、その効率は最も高い手法のひとつ
です。
特長
●● バクテリア、菌類のプリセットプログラムにより、標準的な
プロトコールがすぐにご利用いただけます。
●● アーククエンチング機能(アーク防止機能)により、誤って
高塩濃度に調整されたサンプルへのパルス発生を防止します。
●● プリセット以外にもマニュアル設定が可能です。最大3000V
まで出力が行え、より高い効率での導入の可能性が広がります。
●● タイムコンスタント(τ)
、実効電圧の表示が可能です。
●● コンパクト、軽量設計です。
E. coli パルサー、Gene Pulserシリーズにて得られた設定パラメーター
は、MicroPulserにそのまま使用できない場合があります。その場合
は再検討が必要となります。ご注意願います。
●● 電気容量(10μF)
、抵抗値(600Ω)は固定設計です。
Fungi
Bacteria
プリセットプログラムおよび実験例
Program
Species
Cuvette Size
Preset Conditions
Ec1
Escherichia coli
0.1cm
1.80kV, 1pulse
Ec2
Escherichia coli
0.2cm
2.50kV, 1pulse
StA
Staphylococcus aureus
0.2cm
1.80kV, 1pulse, 2.5msec
Agr
Agrobacterium tumefaciens
0.1cm
2.20kV, 1pulse
Ec3
Escherichia coli
0.2cm
3.00kV, 1pulse
Sc2
Saccharomyces cerevisiae
0.2cm
1.50kV, 1pulse
Sc4
Saccharomyces cerevisiae
0.4cm
3.00kV, 1pulse
ShS
Schizosaccharomyces pombe
0.2cm
2.00kV, 1pulse
Dic
Dictyostelium discoideum
0.4cm
1.00kV, 2pulse, 1.0msec
Pic
Pichia pastoris
0.2cm
2.00kV, 1pulse
Unless the pulse time is truncated below 5msec, the unit will deliver the optimal time constant 〜5msec to
samples in high-resistance media.
仕様
インプット電圧
100-120V
最大消費電流
2A RMS(100-120V)
最大出力
3,000V, 100A
出力波形
エクスポネンシャルパルス(減衰波)
出力電圧
200〜3000V 10Vステップ
操作環境
温度 3.5-35℃
湿度 0-95%
規格
消費電力
サイズ
重量
EN61010
Meets EN61000-3-2 and EN61000-3-3
harmonic, flicker and voltage fluctuation
standards that will be mandatory in 2001
FCC, Class A
EC 1010, CE
200W
21(W)×31(D)×8(H)cm
2.9kg
Ordering Information
カタログ番号
165-2100
396
遺伝子導入技術
品名
MicroPulserエレクトロポレーター
構成内容:MicroPulser本体、ショッキングチャンバー、
キュベット10個(0.1cm 5個、0.2cm 5個)
価格
¥498,000
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エレクトロポレーション
エレクトロポレーションシステム
エレクトロポレーションキュベット
再現性のあるエレクトロポレーションを行うには、ハイクオリ
ティーなキュベットが必要です。Gene Pulser Xcell本体または、
MicroPulserから出力された正確なパルスは損失することなく
キュベットに伝わります。バイオ・ラッドのキュベットは減菌
済で個別に包装されているので、無駄なく清潔にご使用いただ
けます。大腸菌やバクテリアの高効率形質転換には、0.1cmキュ
ベットを用い、高い電場強度を使用します。酵母の形質転換は、
0.2cmキュベットを用い、動物細胞の場合は0.4cmキュベットを
使用します。バイオ・ラッドは再現性のある結果が得られるよ
うハイクオリティーなキュベットを提供します。
導入効率
Gene Pulserシリーズ、MicroPulser用に規定されたキュベットに
より、最大のエレクトロポレーション効率が得られます。
検査と試験キュベットには製造過
程中に数種の検査と、品質保証の
ために実際にエレクトロポレー
ション試験が行われています。
殺菌キュベットはそれぞれフタを
もち、γ線による3段階の殺菌が行
われ、1個ずつ包装されています。
スムーズな電極表面アルミニウム
電極はサンプル全体に均一の電場
がかかるよう、エッチングクリー
ニングが11段階行われています。
頑丈な構造キュベットは非常に高
い電圧(電場)パルスがかかるた
め、丈夫なポリカーボネート製と
なっています。
色による識別0.4cm、0.2cm、0.1cm
キュベットはそれぞれ包装が色分
けされています。
徹底された洗浄
キュベット内はクリーンルーム環
境内での組立てと、2種類の洗浄
繰り返しによってコンタミネー
ションの心配がありません。
堅固なチャンバー継ぎ目のない
チャンバーはサンプル漏れの可能
性を排除し、またその堅固な構造
のため電極間は常に平行に保たれ
ます。
キュベット容量
キュベットタイプ
容量
キャップの色
0.1cm
  20μl〜  80μl
茶色
0.2cm
  40μl〜400μl
緑色
0.4cm
200μl〜800μl*
青色
エレクトロポレーションキュベットは1回のみの使用を
お勧めしております。再使用または当社製以外のキュベッ
トの使用は品質保証の対象外となりますのでご注意願
います。
*350μl〜400μlが最適です。
Ordering Information
カタログ番号
165-2088
165-2086
165-2089
165-2088B05
165-2086B05
165-2089B05
165-2091
165-2092
165-2093
165-2091B05
165-2092B05
165-2093B05
165-2091B10
165-2092B10
165-2093B10
品名
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm(動物細胞、植物プロトプラスト用)、50個×5箱
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm(酵母用)、50個×5箱
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm(バクテリア用)、50個×5箱
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 500個
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 500個
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 500個
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 2,500個
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 2,500個
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 2,500個
エレクトロポレーションキュベット 0.4cm 5,000個
エレクトロポレーションキュベット 0.2cm 5,000個
エレクトロポレーションキュベット 0.1cm 5,000個
www.bio-rad.com
価格
¥24,800
¥24,800
¥24,800
¥99,400
¥99,400
¥99,400
¥150,000
¥150,000
¥150,000
¥650,000
¥650,000
¥650,000
¥1,000,000
¥1,000,000
¥1,000,000
遺伝子導入技術
397
パーティクルデリバリーシステム
パーティクルデリバリーシステム
多様な細胞と形質転換
PDS-1000/Heは、ターゲット細胞より小さいマイクロキャリア
(微粒子)にDNAをコーティングし細胞に撃ち込むことにより形
質転換します。今日、利用できるいくつかの形質転換法のうち、
パーティクルデリバリー法は、細胞種に関わらず、広範囲な応
用が期待できます。この方法は、従来の胚へのマイクロインジェ
クション法に比べ、操作が非常に簡単であり、時間がかかりま
せん。このパーティクルデリバリー法は、撃ち込みの前後処理
が少なくて済み、インタクトな培養細胞への形質転換にも便利
な方法です。
最近のレポートでは、化学的方法、リポフェクション、エレク
トロポレーションでさえ難しいセンシティブな哺乳動物細胞に
PDS-1000/He を用いてin vitro で形質転換する方法が報告されて
います。また、より少量のDNAと細胞でトランジェントまたは
ステーブルな形質転換が可能です。初代のパーティクルデリバ
リー装置は火薬式でした。ヘリウムの方式を用いたPDS-1000/
Heは、これよりも再現性、使用上の安全性に優れており火薬に
よるコンタミネーションがありません。また、組織に与えるダ
メージも非常に少なくなっています。一定の圧力で破裂するラ
プチャーディスクを用いて、マイクロキャリア(微粒子)の速
度をコントロールしています。
Sample
DNA coated
microcarrier
Gas
Helios Gene Gun System Particle Delivery Method
2つのパーティクルデリバリー
Factors Affecting
Transformation
Helios Gene Gunシステム
PDS-1000/He*
状態
In situ, in vitro,
in vivo, ex vivo
In vitro, ex vivo,
in vivo(plants)
エリア
狭い(2cm2)
広い(40cm2)
He圧
100-600psi**
種類
動物:皮膚、器官
培養細胞(マウス、
ウサギ、魚など)
450-2,200psi
動物:培養細胞
(付着性動物細胞、
植物細胞)
植物:葉、分裂組織
酵母、バクテリア、その他微生物
植物:卵、藻類、菌類、
植物、バクテリア
酵母、バクテリア、その他微生物
オルガネラ、葉緑体、ミトコンドリア
詳しい情報はwww.bio-rad.com/genetransfer/をご覧ください。
*この製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要です。
**高圧ガス保安法の規制に基づき、560psi以下でご使用ください。
本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。
また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。
ご購入にあたっては、設置条件およびご使用上の注意点等をお問い合わせください。
398
遺伝子導入技術
www.bio-rad.com
パーティクルデリバリーシステム
Helios® Gene Gun システム
Helios Gene Gunシステムは多彩な目的細胞にin vivo にて迅速
に直接撃ち込むために独特なハンドヘルドタイプの銃身部を持
ちます。細いチューブ内壁に目的細胞に導入するDNAもしくは
RNAをコーティングした金粒子を付着させそれをヘリウム圧に
て撃ち込みます。専用のチュービングプレップステーション及
びチュービングカッターにより一度に約40のサンプルカート
リッジが作製できます。サンプルカートリッジホルダーには一
度に最大12のサンプルカートリッジが装着できます。必要に応
じて連続に撃ち込みを行うことや、ターゲット部を変えて撃ち
込むことが可能です。
Helios Gene Gunシステムを用いて遺伝子導入を行うことによ
り、in vivo をターゲットとした新しく幅広い研究の可能性が広
がります。この可能性は遺伝子治療(特にガン治療、傷の治療
および感染症)を研究する上で特に有効と考えられています。
植物への応用としては茎頂組織や葉のin vivo トランスフォー
メーションなどが行われています。
またDNAワクチン(Genetic Immunization)の分野では皮膚に
直接撃ち込むことによりDNA量を少なく(μgオーダー)手間の
かかるタンパク質精製の過程が省けます。体液性免疫や細胞媒
介性免疫においてはこの技術が動物において試みられています。
Helios Gene GunシステムはPDS-1000/Heと
同様にBiolistic技術をもとに開発された、パー
ティクルデリバリーシステムである。
DNAをコーティングした金粒子をヘリウム
ガス圧力によって加速し目的の細胞へ撃ち
込む。
仕様
Helios Gene Gun
Tubing Prep Station
85×10cm
Physical
大きさ
20×25cm
重さ
1.4kg
5.1kg
材質
スーパーエポキシ、ポリカーボネート
アルミニウム、アクリル
シリンダー
アセタール
バレルライナー
ライトン
O-リング
ベイトン
Electrical
最大電流
10mA peak
125mA
電源
9V DCアルカリ電池
100-120V、50/60Hz
電池寿命
約1000回
Functional
圧力
600psi(≒42kg/cm2)
maximum helium
30psi(≒2.1kg/cm2)N2
この商品は高圧ガス保安法の規制に基づき、560psi以下でご使用ください。
発砲数
1ホルダー当り最大12サンプル
チュービングへの注入 マニュアル式
使用環境
周辺温度
10-32℃
0-60℃
相対湿度
30-80%(湿度)
10-90%(湿度)
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遺伝子導入技術
399
パーティクルデリバリーシステム
Ordering Information
カタログ番号
165-2431J2
品名
Helios Gene Gunシステム(100/120V 50/60Hz用)
価格
¥6,400,000
構成内容:
「Helios Gene Gunキット」
Helios Gene Gun(1)、カートリッジエクストラクターツール(1)、カートリッジホルダー(5)、
交換用バレルライナー(5)、O-リング(5)、電池9V(1)「ヘリウムホースアッセンブリー」
「ヘリウムレギュレーター」(GA580フィメールフィッティング プレッシャーリリーフ/バルブ付)、
最大圧2,600psi(1)「チュービングプレップステーション(100/120V)」
チュービングプレップステーション(1)、3/16"メールルアー(2)、チュービングサポートシリンダー(1)、
1/8"レンチルアー(2)、パワーコード(1)、レンチ(1,5/64")、O-リング(5)、
シリンジホルダー(1、10cc用)、N2レギュレーターホース(Nalgene 12ft)
「シリンジキット」シリンジアダプターチュービング(5ft、0.104"ID×0.192"OD)、
シリンジ10cc(5)、1/8"フィーメールルアーフィッティング(5)「チュービングカッター」
チュービングカッター(1)、レザーブレード(10)「Helios 条件設定キット」0.6μm金粒子(0.25g)、
1.0μm金粒子(0.25g)、1.6μm金粒子(0.25g)、PVP(0.5g、MW360,000)
Helios Gene Gun 関連製品
165-2424
Helios Gene Gun用条件設定キット
¥110,000
構成内容:0.6μm金粒子(0.25g)、1.0μm金粒子(0.25g)、
1.6μm金粒子(0.25g)、Heliosカートリッジキット(1)
165-2262
165-2263
165-2264
165-2440
¥55,000
¥55,000
¥55,000
¥29,000
165-2441
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ0.6μ金粒子、0.25g
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.0μ金粒子、0.25g
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ1.6μ金粒子、0.25g
Helios Gene Gun用カートリッジキット
構成内容:PVP(MW360,000、0.5g)、
カートリッジバイアル(5)、乾燥剤(5)、
ゴールドコート用チューブ(50ft)
Helios Gene Gun用ゴールドコート用チューブ(50ft)
スペアパーツ
165-2416
165-2417
165-2426
165-2435
Helios Gene Gun用O-リング 5個
Helios Gene Gun用バレルライナー 5個
Helios Gene Gun用カートリッジホルダー 5個
Helios Gene Gun用カートリッジエクストラクターツール
¥3,000
¥12,000
¥22,000
¥3,000
165-2475
Helios Gene Gun用Diffusion Screen 5個
¥11,000
¥25,000
※Helios Gene Gunにはこの他に別途購入品(ヘリウムガス、窒素ガス、窒素レギュレーター等)が必要です。詳細はお問い合わせください。
Helios Gene Gunシステムご使用に関して
Helios Gene Gunシステムは、高圧ガスを使用するため高圧ガス保安法の対象となります。以下の点を遵守していただくことにより、
高圧ガス保安法で定める“適用除外”となります。
●● 本体へは、ヘリウムガス以外を供給しないでください。
●● ヘリウム供給元へ接続するレギュレーターの2次圧(出力)を1Mpa未満にしてください。
●● 全ガス漏洩時、実験室の酸素濃度が18%未満にならない環境でご使用ください。
(10m
3
のボンベをご使用の場合は、目安として
60m3以上の容積が必要となります)
●● 実験室には十分な換気設備を備え、ガス漏洩時、ガスが滞留しないようにしてください。
●● 弊社納品後のシステムは、構成品の除去や入れ替え、改造など行わないでください。
400
遺伝子導入技術
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パーティクルデリバリーシステム
PDS-1000/He™ and Hepta™ システム
PDS-1000/Heは、減圧装置とヘリウムの圧力を用いて、目的の
細胞へマイクロキャリアを効果的に加速して撃ち込む装置です。
撃ち込み前にチャンバーのドアを閉め、チャンバー内を陰圧に
します。これは、DNAでコーティングしたマイクロキャリアの
空気抵抗を抑えるために必要で、安全インターロックになって
います(この装置は、チャンバー内が陰圧にならないと作動し
ません)。
“Fire”スイッチを押し、ヘリウムガスがメーターバルブで調整し
た目盛りまで上部シリンダー内に流れ込みます。ガスは、設定
したラプチャーディスクが破裂圧力に到達するまで送られます。
破裂により、ヘリウムガス衝撃圧力が発生し、マイクロキャリ
アアッセンブリーに伝わります。
この衝撃圧力はプラスチックのマクロキャリア上のDNAコー
ティングしたマイクロキャリアをターゲット細胞の方向へ移動
させます。
マクロキャリアアッセンブリーとターゲットサンプル間にス
トッピングスクリーンが取り付けられており、発射されたプラ
スチックディスク(マクロキャリア)はこのスクリーンで停止し、
マイクロキャリアのみスクリーンを通過して、ターゲット細胞
へ撃ち込まれます。
Gas ­acceleration
tube
Macrocarrier
Rupture disk
Microcarrier launch
assembly
Stopping screen
DNA-coated
­microcarriers
Target
cells
Target shelf
PDS-1000/Heの作動方式図解
矢印は、ヘリウムの流れる方向。
PDS-1000/He Heptaアダプター
PDS-1000 HeptaアダプターはPDS-1000/Heと接続することに
よって、従来のPDS-1000システムより、一度に7〜10倍の多く
の細胞へ導入することが可能です。
注意:本 製品を導入される場合は高圧ガス保安法に関する届出が必要で
す。現在、所有されているPDSシステムに、Heptaアダプターを導
入される場合も、新たに届出が必要です。
特長
●● パーティクルデリバリー法なので、リポフェクションのよう
に導入後の細胞毒性がありません。
●● C.
Heptaアダプター
elegans の研究で、多数の実績があります。
PDS-1000/He装置
マイクロキャリアランチアッセンブ
リー、ヘリウムプレッシャーゲージ
(上部)装備のメインチャンバー、中
央のゲージ(装置左側)は、チャンバー
内の陰圧をモニターし、下方2つのノ
ブは、吸引とベント速度を調整。
●● ストッピングスクリーン以外の消耗品は標準システムと共通
です。
Bombardment Parameters*
Cell Type
Vacuum, " Hg
Target Distance, cm
Helium Pressure, psi
Particle Size
Yeast
28
6
1,300
0.6μm gold
Algae
29
6
1,300
0.6μm gold
Plant
Embryos
28
6
1,300
1.0μm gold
Callus or cell cultures
28
9
1,100
1.0μm gold
Subcellular organelles
28
6
1,300
0.6μm gold
Animal
Tissue cultures
15
3
1,100
1.6μm gold
Tissue sections
25
9
1,100
1.6μm gold
* Recommended settings as starting parameters for bombardment of a variety of cell types. Many factors affect bombardment efficiency, but most users will find it
sufficient to optimize the major variables individually, then test their interactions on a limited scale.
www.bio-rad.com
遺伝子導入技術
401
パーティクルデリバリーシステム
Ordering Information
カタログ番号 品名
PDS-1000/He*
165-2257J1
PDS-1000/He
165-2258J1
PDS-1000/He Hepta システム
165-2225
PDS-1000/He Hepta アダプター
PDS-1000/He 消耗品
165-2278
PDS-1000/He条件設定キット500回
構成内容:1.0μm金粒子および1.6μm金粒子0.25g
8種類のラプチャーディスク100枚
マクロキャリア500枚
ストッピングスクリーン500枚
165-2280JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回
構成内容:1.0μm金粒子0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚
マクロキャリア500枚
ストッピングスクリーン500枚
165-2281JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回
165-2282JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回
165-2283JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回
165-2284JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回
165-2285JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回
165-2286JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回
165-2287JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.0μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回
165-2290JA
価格
¥5,400,000
¥7,200,000
¥1,800,000
¥175,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
¥145,000
165-2291JA
165-2292JA
165-2293JA
165-2294JA
165-2295JA
165-2296JA
165-2297JA
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+450psi** ラプチャーディスク)500回
構成内容:1.6μ金0.5g、450psi** ラプチャーディスク500枚、マクロキャリア500枚、
ストッピングスクリーン500枚
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+650psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+900psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,100psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,350psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,550psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+1,800psi** ラプチャーディスク)500回
PDS-1000/Heスタンダードプレッシャーキット(1.6μ金+2,000psi** ラプチャーディスク)500回
¥150,000
165-2326
165-2327
165-2328
165-2329
165-2330
165-2331
165-2332
165-2333
PDS-1000/Heラプチャーディスク 450psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 650psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 900psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,100psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,350psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,550psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 1,800psi** 100枚
PDS-1000/Heラプチャーディスク 2,000psi** 100枚
¥23,000
¥23,000
¥23,000
¥23,000
¥23,000
¥23,000
¥23,000
¥23,000
165-2262
165-2263
165-2264
165-2335
165-2336
165-2226
165-2322
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、0.6μ金粒子0.25g
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.0μ金粒子0.25g
PDS/Helios用マイクロキャリアパッケージ、1.6μ金粒子0.25g
PDS-1000/He用マクロキャリア、500枚
PDS-1000/He用ストッピングスクリーン、500枚
PDS-1000/He Hepta用ストッピングスクリーン 50枚
PDS-1000/Heマクロキャリアホルダーパッケージ、5個
¥55,000
¥55,000
¥55,000
¥36,000
¥25,000
¥93,000
¥29,000
¥150,000
¥150,000
¥150,000
¥150,000
¥150,000
¥150,000
¥150,000
*このシステムには別途購入品が必要です。また、消耗品は附属されておりません。
**1psi≒0.07kg/cm2≒6.9kPa
本装置は高圧ガスを取扱うため、各都道府県への「高圧ガス保安法」に基づく届出(または許可等)が必要となります。
また、移設する際も、納品時と同様の届出が必要になる場合がございます。
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遺伝子導入技術
www.bio-rad.com
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