第十六改正日本薬局方第二追補 D-マンニトールの

LC Technical Note
第十六改正日本薬局方第二追補
147
D-マンニトールの分析
GL Sciences Inc.
日米欧三薬局方でD-マンニトールが調和合意され、それに基づき第十六改正日本薬局方（JP16）第二追補で試験項
目などが改正となり、高速液体クロマトグラフィー(HPLC)による分析が追加されました。
D-マンニトールの純度試験（４）及び定量法では、長さ30 cmのカラムを温度85 ℃でHPLC分析を行いますが、オーブ
ン機種によってはカラムサイズが大きすぎて入らない場合やオーブン温度が高すぎて制御できない場合があります。
GL7700シリーズのカラムオーブンCO7730では、カラム収納部の高さが365 mmあり温度が85 ℃まで制御できるため、
D-マンニトールの分析を行うことが可能なシステムとなっています。
今回、GL7700シリーズを用いて第二追補の条件に従い、HAMILTON HC-75(Ca2+)カラムでHPLCによる分析が良好
に行えましたのでご紹介します。
(R. Hirano)
D-マンニトール定量法
Analyte:
400
システム適合性試験用溶液 (1)
1,3. Isomalt
2. Maltitol
4. D-Mannitol
5. D-Sorbitol
4-a
0
200
mV
5
0
10
20
30
Time (min)
システム適合性試験用溶液 (2)
mV
20
2
1
0
3
0
10
20
30
Time (min)
800
標準溶液
0
200
400
mV
600
4-b
0
10
20
30
Time (min)
HPLC 条件
・ システム
・ カラム
・ 溶離液
・
・
・
・
温度
検出器
注入量
流速
GL7700 HPLC system
HAMILTON HC-75 (Ca2+) (9 m, 300 x 7.8 mm I.D.)
H2O
85 ℃
RI (40 ℃)
20 μL
0.5 mL/min
・システムの性能
相対保持時間 (1 to 4-a)
相対保持時間 (2 to 4-a)
相対保持時間 (3 to 4-a)
相対保持時間 (5 to 4-a)
分離度 (4-a, 5)
: 0.69 (約 0.6)
: 0.74 (約 0.69)
: 0.77 (約 0.73)
: 1.19 (約 1.2)
: 4.90 (≧ 2.0)
・システムの再現性
ピーク面積(4-b)の相対標準偏差 (%)(n=6) : 0.10 (≦ 1.0)
*()内数値は薬局方規格値
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D-マンニトール純度試験(4)
800
試料溶液
Analyte:
0
200
400
mV
600
1-a
1. D-Mannitol
2. D-Sorbitol
0
10
20
Time (min)
試料溶液
(拡大図)
2
0.4
-0.2
0.0
0.2
mV
0.6
0.8
30
1-a
0
10
20
30
Time (min)
20
標準溶液(1)
0
mV
1-b
0
10
20
Time (min)
1-b
30
0.4
-0.2
0.0
0.2
mV
0.6
0.8
標準溶液(1)
(拡大図)
0
10
20
30
Time (min)
0.4
1-c
-0.2
0.0
0.2
mV
0.6
0.8
標準溶液(2)
0
10
20
30
Time (min)
HPLC 条件
・ システム
・ カラム
GL7700 HPLC system
HAMILTON HC-75 (Ca2+) (9 m, 300 x 7.8 mm I.D.)
・
・
・
・
・
H2O
85 ℃
RI (40 ℃)
20 μL
0.5 mL/min
溶離液
温度
検出器
注入量
流速
・検出の確認
ピーク面積比：(1-c)／(1-b) = 2.15 % (1.75 ～ 3.25 %)
・システムの再現性
ピーク面積(1-b)の相対標準偏差 (%)(n=6) : 0.06 (≦ 1.0)
*()内数値は薬局方規格値
**D-マンニトール直後の負ピークは空気由来のピークであるため、
溶離液や試料の脱気状況などによって増減します。
GL Sciences LC Technical Note
カラムオーブンCO7730
D-マンニトール分析カラム
カラム（JP16第二追補本文より抜粋）：
内径7.8 mm, 長さ30 cmのステンレス菅にジビニル
ベンゼンで架橋させたポリスチレンにスルホン酸基
を結合した9 μmの液体クロマトグラフィー用強酸性
イオン交換樹脂（架橋度：8%）（Ca型）を充填する．
カラムHAMILTON HC-75(Ca2+)
HC-75(Ca2+) 9 μm, 300 x 7.8 mm I.D.
Cat.No. 7845-79642
基材：ポリスチレンジビニルベンゼン
官能基：スルホン酸
架橋度：8%
温度設定範囲：４℃－８５℃
温度制御範囲：（室温＋１０）℃－８５℃
収納空間：Ｗ２２０×Ｈ３６５×Ｄ９５ｍｍ
大きさ：Ｗ２６０×Ｈ４１５×Ｄ４２０ｍｍ
ジーエルサイエンス株式会社はHAMILTON COMPANY社製
HPLC用ポリマーカラムの日本総代理店です。
DG7760
分析装置：GL7700 シリーズ
D-マンニトール分析システム
①
②
③
④
⑤
脱気装置
送液ポンプ
オートサンプラー
RI検出器
カラムオーブン
DG7760
PU7710
AS7720
RI7754
CO7730





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