Protector RNase Inhibitor日本語 - Sigma

一般的研究用試薬
in vitro に推奨されます。
Protector RNase Inhibitor
製品番号
製品番号
3335399 2000 units
3335402 10000 units
バージョン 2005 年 12 月
保存温度 -15∼-25℃
製品構成
バイアル
Protector RNase Inhibitor
（40 ユニット/μl）
組成
・50μl（2000 ユニット包装）
・5×50μl（10000 ユニット包装）
保存バッファー：20 mM Hepes-KOH, 50 mM KCl, 8
mM dithiothreitol, 50% glycerol (v/v), pH
approx. 7.6（4℃）
保存と安定性
未開封のキットは、-15∼-25℃で保存した場合、ラベルに記載の期限まで安定です。
アプリケーション
Protector RNase Inhibitor は様々な RNase を不活化します。
・RNase A
・RNase B
・RNase T2
Protector RNase Inhibitor は、RNase が問題となる様々なアプリケーションにおいて未然
に RNase による分解を防ぎます。
・cDNA 合成反応や in vitro 転写/翻訳反応中の mRNA を保護
・in vitro ウイルス複製中のウイルス RNA の保護
・RNA 抽出精製中の RNA の保護
・RNase プロテクションアッセイ
・RNase-free 抗体の調製
Protector RNase Inhibitor は、RNA を調製・分析する為の一般的な酵素反応を妨害しませ
ん。
アプリケーション
製品
RT-PCR
Transcriptor 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Taq DNA Polymerase
FastStart Taq DNA Polymerase
Expand High Fidelity PCR System
Titan One Tube RT-PCR System
cDNA 合成
Transcriptor 1st Strand cDNA Synthesis Kit
リアルタイム定量 PCR
LightCycler 試薬/キット
in vitro 転写/翻訳
T3/T7/SP6 RNA Polymerase
使用方法
使用濃度
下表のとおり、適切な濃度に調整します。
1 ステップ RT-PCR
5∼10 ユニット
2 ステップ RT-PCR
25∼50 ユニット
in vitro 転写
20 ユニット
RNase コンタミネーションの可能性がある場合、高い濃度で Protector RNase Inhibitor
を使用することもできます。Protector RNase Inhibitor が目的の反応を阻害する事はあ
りません（上述の 16 倍の濃度で Protector RNase Inhibitor を使用しても RT-PCR を阻害
しない事が検証されています）。
追加情報
由来
ラット肺：E. coli に組み替えて発現させています。
保存バッファー
20 mM Hepes-KOH, 50 mM KCl, 8 mM dithiothreitol, 50% glycerol (v/v), pH approx.
7.6（4℃）
不活化
簡単な変性条件（65℃に加熱）で Protector RNase Inhibitor は不活化します。
製品特徴
活性容量
分子量
精製度（SDS-PAGE）
バイオバーデン
DNA 含有率
活性 pH 範囲
等電点
活性温度範囲
リファレンス
1 Blackburn, P. (1979) Ribonuclease inhibitor from human placenta: rapid
purification and assay. J. Biol. Chem. 254, 12484-12493.
2 Protector RNase Inhibitor Enhance Protection of RNA Against Degradation (2002)
Biochemica 4, 29.
3 Finnegan et al (2004). Detection and strain differentiation of European bat
lyssaviruses using in situ hybridisation. Journal of Virological
Methods 121, 223?229.
4 Swayze et al. (2004) Modulation of dopamine mediated phosphorylation of AMPA
receptors by PSD-95 andAKAP79/150. Neuropharmacology 47 764?778.
品質管理
各 Protector RNase Inhibitor は、Titan One Tube RT-PCR Kit と LightCycler DPD Kit*
で機能検証を行っています。Protector RNase Inhibitor は下記の活性のコンタミネーシ
ョンについて検証されています。
検証用バッファー：50 mM Tris-HCl, 10 mM MgCl2, 0.1 mM EDTA, 7 mM βMercaptoethanol; pH 7.5（37℃）
エンドヌクレアーゼ
λDNA の Eco RI/HindⅢ断片の 1μg を Protector RNase Inhibitor と共に 50μl の検証用
バッファー中で 37℃で 1 時間インキュベートします。バンドパターンは変わりません。
ニッキング活性
1μg のスーパーコイル pBR322 DNA を Protector RNase Inhibitor と共に 50μl の検証用
バッファー中で 37℃で 1 時間インキュベートします。スーパーコイル DNA に緩みはありま
せん。
リボヌクレアーゼ（1）
1μg の MS2 RNA を Protector RNase Inhibitor と共に 50μl の検証用バッファー中で 37℃
で 1 時間インキュベートします。MS2 RNA に分解は見られません。
リボヌクレアーゼ（2）
1μgのMS2 RNAをProtector RNase Inhibitorと共に50μlの検証用バッファー中で37℃で1
時間インキュベートし、その後65℃で10分間インキュベートします。MS2 RNAに分解は見ら
れません。
関連製品
製品名
Transcriptor First Strand cDNA
Synthesis Kit
First Strand cDNA Synthesis Kit
cDNA Synthesis System
C. therm Polymerase One-Step RT-PCR
Systeme
Titan One Tube RT-PCR Kit
Titan One Tube RT-PCR System
Transcriptor Reverse Transcriptase
Reverse Transcriptase M-MuLV
Expand Reverse Transcriptase
Reverse Transcriptase AMV
in vitro 転写
SP6 RNA Polymerase
T7 RNA Polymerase
T3 RNA Polymerase
40 ユニット/μl
約 50 kDa
95%以上（単一バンドが可視化される）
50 cfu/ml 以下
100 pg/mg 以下
pH 5.0∼pH 9.0
pH 4.5
+25∼+55℃（60℃でも部分的活性はあります）
ユニット分析
Protector RNase Inhibitor の 1 ユニットは、5 ng の RNase A 活性の 50%を阻害するのに
必要なタンパク質量として定義されます。活性は Blackbum[1]に従って、cyclic
cytidine-2':3'-monophosphoric acid の加水分解の阻害能として測定されます。分析条件
下で、200 ユニットの Protector RNase Inhibitor は、1μg の RNase A 活性の 50%を阻害
します。
SP6/T7 Transcription Kit
DIG RNA Labeling Kit
その他
RNase
RNase, DNase-free
RNase A
RNase H
RNase T1
シグマ アルドリッチ ジャパン合同会社
〒153-8927 東京都目黒区下目黒1-8-1
アルコタワー5階
テクニカルサポート
Tel: 03-6756-8245
Fax: 03-6756-8302
[email protected]
包装単位
50 回反応
製品番号
4379012
30 回反応
10 回反応
50 回反応
250 回反応
50 回反応
25 回反応
100 回反応
250 ユニット
500 ユニット
2000 ユニット
（4×500 ユニット）
500 ユニット
1000 ユニット
5000 ユニット
500 ユニット
1000 ユニット
1483188
1117831
2016338
20116346
1939823
1888382
1855476
3531317
3531295
3531287
1000 ユニット
5000 ユニット
1000 ユニット
5000 ユニット
1000 ユニット
5000 ユニット
1 キット
2×10 回反応分
810274
1487671
881767
881775
1031163
1031171
999644
1175025
100 mg
500 mg
500μg
25 mg
100 mg
25 ユニット
100 ユニット
100000 ユニット
500000 ユニット
109126
109134
1119915
109142
109169
786349
786357
109193
109207
1062603
1785826
1785834
1495062
109118