スナネズミ (Merionesunguiculatus)

日本栄養・食糧学会誌 Vo
.
14
9 N
o
.6 3
2
1
'
"
'
'
3
2
9 1
9
9
6
スナネズミ (
M
e
r
i
o
n
e
su
n
g
u
i
c
u
l
a
t
u
s
) の肝および胃における
アルコール脱水素酵素アイソザ、イムに関する研究
一一一ラット・マウスおよびモルモットとの比較一一
林
あつみヘ清水真澄ネヘ七戸和博村
長谷場
健 村 * 木 元 幸 一 *
本東京家政大学栄養学科
村日本医科大学実験動物管理室
料*日本医科大学法医学教室
ComparativeStudiesonAlcoholDehydrogenaseIsozymesi
ntheLiverand
e
r
i
o
n
e
su
n
g
u
i
c
u
l
a
t
u
s，Rat，MouseandGuineaPig
StomachofM
*MasumiSHIMIZU
，
'
同 K
azuhiroSHICHINOHE
，
*
*
AtsumiHAYASHI，
TakeshiHASEBA村本 andKoichiKIMOTO*
*Dψ'
a
r
t
m
e
n
t0
1Nutrition，TokyoKaseiUniversi凱 ltabashi-ku，Tokyo173
*
*Dゆ'
a
r
t
m
e
n
t0
1Laborat01YAnimalScience，N争l
j
J
o
η M
e
d
i
c
a
lS
c
h
o
o
l
，B
zmkyo
みu
，T
o
k
y
o113
* D
e
t
a
r
t
m
e
n
t0
1LegalMedicimちNiPponMedicalSchool，Bunkyo・ku，Tokyo113
，
村
NipponEiyδShokuryoG
a
k
k
a
i
s
h
iU
.JPn.Soc.Nu:
t
χ F
oodS
c
i
.
)49，3
2
1
'
"
'
'
3
2
9(
19
9
6
)
Them
u
l
t
i
p
l
i
c
i
t
yo
fa
l
c
o
h
o
ld
e
h
y
d
r
o
g
e
n
a
s
e(ADH)i
s
o
z
y
m
e
swasexaminedi
nt
h
el
i
v
e
randstomacho
f
Mongoliang
e
r
b
i
1
s
.FourADHi
s
o
z
y
m
e
swerer
e
s
o
l
v
e
dandd
i
s
t
i
n
g
u
i
s
h
e
do
nt
h
eb
a
s
i
so
ft
h
e
i
re
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
t
i
c
mob
i
1
i
t
i
e
s
，t
i
s
s
u
ed
i
s
t
r
i
b
u
t
i
o
n
s
，ands
u
b
s
t
r
a
t
eandi
n
h
i
b
i
t
o
rs
p
e
c
i
f
i
c
i
t
i
e
s
.Comparedw
i
t
ht
h
eADHi
s
o
z
y
m
e
s
y
s
t
e
m
sr
e
p
o
r
t
e
dp
r
e
v
i
o
u
s
l
yi
nt
h
emouse，r
a
tandg
u
i
n
e
ap
i
g
，c
1
a
s
s1andI
IADHswerei
d
e
n
t
i
f
i
e
di
nt
h
el
i
v
e
r
andc
1a
s
sIVADHi
nt
h
estomacho
ft
h
eMongoliang
e
r
b
i
.
1C
l
a
s
sI
I
IADHwasd
e
t
e
c
t
e
di
nb
o
t
ho
r
g
a
n
s
.Thus
，
t
h
eADHs
y
s
t
e
m
so
ft
h
eMongoliang
e
r
b
i
1seemt
obei
d
e
n
t
i
c
a
lt
ot
h
o
s
eo
fo
t
h
e
rr
o
d
e
n
t
s
.L
i
v
e
rADHo
ft
h
e
i
1showedsimi
1a
ra
c
t
i
v
i
t
yt
ot
h
o
s
eo
ft
h
emouseandr
a
t
，a
ndwass
i
g
n
i
f
i
c
a
n
t
l
yh
i
g
h
e
rt
h
a
n
Mongoliang
e
r
b
t
h
a
to
ft
h
eg
u
i
n
e
ap
i
g
，t
o
w
a
r
d
se
i
t
h
e
r1
5mMe
t
h
a
n
o
lo
r5mMhexeno
.
1However
，s
tomachADHa
c
t
i
v
i
t
yi
n
，
1
ia
sw
e
l
la
s出 a
to
ft
h
eg
u
i
n
e
ap
i
g
，
wasmuchl
o
w
e
rt
h
a
nt
h
o
s
eo
ft
h
emouseandr
a
tf
o
r
t
h
eMongoliang
e
r
b
b
o
t
hs
u
b
s
t
r
a
t
e
s
.Thea
c
t
i
v
i
t
yi
nb
o
t
hs
p
e
c
i
e
swasa
l
s
omuchl
o
w
e
rt
h
a
nt
h
el
i
v
e
rADHa
c
t
i
v
i
t
i
e
se
v
e
na
t
h
i
g
h
e
rc
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
so
fe
t
h
a
n
o
l，a
l
t
h
o
u
g
hADHa
c
t
i
v
i
t
i
e
si
nt
h
emouseandr
a
tf
o
r5
0
0mMe
t
h
a
n
o
lwere
a
b
o
u
tt
w
i
c
ea
sh
i
g
hi
nt
h
estomacha
si
nt
h
el
i
v
e
r
.A
c
c
o
r
d
i
n
g
l
y
，t
h
ef
i
r
s
t
p
a
s
sm
e
t
a
b
o
l
i
s
mo
fa
l
c
o
h
o
li
nt
h
e
stomachwoulda
p
p
e
a
rt
op
r
o
c
e
e
dt
oal
e
s
s
e
re
x
t
e
n
ti
nt
h
eMongoliang
e
r
b
i
1andg
u
i
n
e
ap
i
g
.F
u
r
t
h
e
r
m
o
r
e，
t
h
el
o
w
e
ra
c
t
i
v
i
t
yo
fstomachADHf
o
rh
e
x
e
n
o
lf
o
u
n
di
nt
h
eMongoliang
e
r
b
i
1andg
u
i
n
e
ap
i
gseemst
or
e
f
l
e
c
t
t
h
ef
e
e
d
i
n
gh
a
b
i
t
so
ft
h
e
s
ea
n
i
m
a
l
s
.
Key 防'
o
r
d
旨 a
l
c
o
h
o
ld
e
h
y
d
r
o
g
e
n
a
s
e，m
o
n
g
o
l
i
a
ng
e
r
b
i
l，r
o
d
e
n
t
s
，l
i
v
e
r
，s
t
o
m
a
c
h
.
(
R
e
c
e
i
v
e
dNovember3
0，1
9
9
5
)
アルコール飲料は，人聞にとって向精神薬的食品とし
て食品のなかでも特別な位置を占めてきたと思われる。
ニズムについては未だ不明な部分も多い。
従来， D
甫乳類 ADHには種々のアイソザイムが報告さ
その主成分であるエタノールの代謝は，おもに肝内のア
れており 1)-4)，組織分布，等電点やピラゾールによる阻
ルコール脱水素酵素 (ADH) [
EC1
.1
.
1
.1
Jによって行わ
害度ならびにエタノールに対する Km値等の違いによ
れることが明らかとなっているが，その酵素的代謝メカ
り，大きく四つのクラスに分類されている。クラス Iは
キ〒 1
7
3東京都板橋区加賀 1
1
8
1
村〒1
1
3東京都文京区千駄木 1
1
5
付事〒 1
1
3東京都文京区千駄木 1
1
5
おもに肝に局在し，アルコール代謝の鍵酵素とされてい
る。その酵素的性質は，アルカリ側に等電点を有し，エ
タノールに対して低い Km値をもち，ピラゾールで強く
3
2
2
日本栄養・食糧学会誌
阻害される。ヒトでは α
-，β ，y-ADH，マウスでは b
a
s
i
c
I
Iに分類される
ADHがこのクラスに相当する。クラス I
ADHは，ほぽ全身の臓器に分布し，アルコール代謝への
実験方法
1
. 動物および試薬
一定の寄与が示唆されている 4)九その酵素的性質として
スナネズミは日本医科大学実験動物管理室で飼育繁殖
は，酸性側に等電点を有し，エタノールに対してはきわ
した 1
0週齢雄(体重 6
0
.
1:
l
:3
.
5g
)，雌 (
4
9
.
7:
l
:
1
.6
g)各
めて高い Km値 (>1M) をもち，ピラゾールで阻害され
3匹を用いた。マウスは ddY系 7週齢雄 (
2
3.
8:
l
:1
.3g
)，
.
6土 0
.
8g
) 各 3匹，ラットは Sprague-Dawley
雌(19
2
3
8
.2:
l
:1
8
.9g
)，雌(18
8
.
3土 2
3
.
6g
)
(
S
D
)系 7週齢雄 (
各 3匹，そしてモルモットは H
a
r
t
l
e
y系 7週 齢 雌 3匹
(
2
0
2
.
2:
l
:6.
4g
)を埼玉実験動物供給所より購入して用い
ない。ヒトでは X-ADH，マウスでは acidicADHが相当
Iに関しては，クラス Iとクラス I
I
Iの中間
する。クラス I
の性質を有し，ヒトでは
7
t-ADH
，マウスでは
ADH-β が
相当する。最初，このクラスは肝と胃に存在するとされ
てきたが， 1
9
9
0年 P
a
r
e
sらのにより胃におザるこの
た。餌(標準固型飼料，オリエンタル酵母社製)および
ADHは，肝のクラス I
Iとは異なるクラス IVに分類さ
れ，アルコール代謝における「初回通過効果 (
f
i
r
s
t
p
a
s
s
水は実験に供するまで自由に摂取させ，エーテル麻酔
m
e
t
a
b
o
l
i
s
m
)Jに 関 与 し て い る こ と が 示 唆 さ れ て い
る7)-9)。ヒトにおいては胃 ADHの活性が低い，クラス
W 欠損の例が報告されており 1
0
うこのタイプの人は飲酒
n
i
c
o
t
i
n
a
m
i
d
ea
d
e
n
i
n
ed
i
n
u
c
1
e
o
t
i
d
e(β-NAD)，4
・
m
e
t
h
，p
h
e
n
a
z
i
n
em
e
t
h
o
s
u
l
f
a
t
e (PMS) は Sigma
y
l
p
y
r
a
z
o
l
e
社より，エタノ}ルは残留農薬試験用試薬特級を和光純
時の血中アルコール濃度が高いことが知られている 11)。
薬工業勝)より， t
r
a
n
s
・
2
・
hexen
・1
・o
I(ヘキセノール)， 3，
ι
3
下，心臓採血後，肝臓と胃を摘出し酵素試料とした。 β-
ス等の研究を通して現在では四つのクラスに分類されて
4
ぺb
i
p
h
e
n
y
l
e
n
e
)b
i
s(
2，
5
d
i
p
h
e
n
y
l
2
H
・t
e
t
r
a
z
o
l
i
u
m
(
4，
c
h
l
o
r
i
d
e
) (ネオテトラゾリウム)は A
l
d
r
i
c
h社より購入
おり凶 同，それらはそれぞれの酵素的性質および組織分
した。
このように鴫乳類の ADHはヒト，ウマ，ラット，マウ
布に応じて，アルコール代謝や生理的代謝に寄与してい
2
. 酵素液の調製
るものと予想される。これら，各クラスの ADHのアル
肝臓および胃を，その重量の 5倍量の 5mMトリス塩
コール代謝および生理的代謝にお貯る役割分担を明らか
.
5，0
.
5mMNADおよび 0.25Mショ糖
酸緩衝液 (pH7
にするためには，種々の動物種にお砂るアルコール代謝
を含む)中でヒスコトロン(~槻日音医理科器械製作所)
能および生理的特徴と各 ADHアイソザイム活性との関
を用いてホモジナイズし， 1
0
0，
000Xgで 6
0分の遠心分
係を検討することが重要である。たとえば，クラス I
離により得た上清を酵素液とした。これらの抽出操作は
ADHを遺伝的に欠損した動物種 (ADH-d
e
e
rmouse)
では，正常種 (ADH+d
e
e
rmouse)の約 50%のアルコー
氷中または 4C下で行った。
ル代謝能を示すことが知られている 5)17)。また，われわれ
は以前，へキセノールを多く含む青葉等を食するディア
マウスの胃の ADHが，マウスと同様ヘキセノー Jレに高
い活性を示すことを報告した九
ところで，スナネズミは分類上ラットやマウスと同様
蓄歯目に属するが，本来砂漠を生棲地とするため，他の
醤歯類に比べ食性を異にし，また，水分摂取量ならびに
0
3
. ADH活性測定法
ADHの活性は， 1mMNADを含む 0
.
1Mグリシン緩
衝液 (pH1
0
.
7
)に酵素液を加え，基質として各種濃度の
エタノールまたはヘキセノールを添加し，3TCにお抄る
NADHの産生速度を目立分光光度計(10
0
1
0型)を用い
340nmで測定した。酵素の活性単位は， 1μmolNADH/
minを 1u
n
i
tとした。
4
. タンパク量測定法
尿排j
世量の少ない水代謝を特徴とする問。さらに，アル
i
o
-Radp
r
o
t
e
i
na
s
s
a
y法制により，
タンパク量は， B
コールは抗利尿ホルモンの分泌を抑制することにより，
牛血清アルブミン (BSA)を標準として 595nmで測定し
水代謝に大きな影響を及ぽすことが知られている 19)。
た
。
これらのことから，各 ADHアイソザイムの活性と食
性，およびアルコール代謝と水代謝との関係を研究する
上でスナネズミは興味ある対象であるが，この動物種の
アルコール代謝および ADHに関する報告はまだ見当た
らない。そこで本動物種の肝と胃にお貯る各クラスの
5
. ディスク電気泳動法による ADHアイソザイムの
検出
ADHアイソザイム検出のためのディスク電気泳動お
)の方法に準じて行った。
よび活性染色は， Hasebaら4
0
.
1M L
-アルギニンと 0.76mMNADを含む 7.5%ポリ
.
5
)
2
4
)を作製し， 3.5mML-ア
アクリルアミドゲル (pH9
ADHアイソザイムの分布様態およびそれらの活性を，
0
)
，ラット 2
1
)
，モルモット 2
2
)
すでに報告されているマウス 2
ルギニンと 0.5mMNADを含む 38.4mMβーアラニンの
等の醤歯類と比較検討し，各アイソザイムのアルコール
泳動用緩衝液 (pH9
.
0
)で
， 2Cにて約 2時間電気泳動を
代謝および食性にお貯る寄与について考察した。
行った。泳動後のゲルの活性染色は， 2
.
2mMNAD，0
.
7
5
0
3
2
3
Vo.
l4
9 No.6 1
9
9
6
(
b
)
(
a
)
言
400
-
∞
2
Z
0
也
‘
o
‘
a
d
-;
。
、
、
コ
a
E
、
、
コ
E
}
>
-
E
∞
・
・
-
∞
3
∞
4
‘
ー
〉
H
〉
4
U
~
z
Z
0
帽
o
4
c(
M
o
n
g
o
l
i
a
ng
e
r
b
i
l mouse
r
a
t
g
u
i
n
e
ap
i
g
specles
∞
1
o
M
o
n
g
o
l
i
a
ng
e
r
b
i
l mouse
r
a
t
gUlneap
l
g
species
F
i
g
.1
. L
i
v
e
rADHa
c
t
i
v
i
t
i
e
so
fv
a
r
i
o
u
sr
o
d
e
n
t
s
.
L
i
v
e
rfromeachr
o
d
e
n
twashomogenizedi
n
d
i
v
i
d
u
a
l
l
yi
n5v
o
l(w
/
v
)o
fe
x
t
r
a
c
t
i
o
nbu
任e
r(
5mMT
r
i
s
H
C
l，
pH7
.
5，c
o
n
t
a
i
n
i
n
g0
.
5mMNADand0
.
2
5Ms
u
c
r
o
s
e
).Thehomogenatewasc
e
n
t
r
i
f
u
g
e
da
t1
0
0，
0
0
0X gf
o
r1
n0
.
1Mg
l
y
c
i
n
ebu
旺e
r(pH1
0.
7
)c
o
n
t
a
i
n
i
n
g1mMNAD
h.ADHa
c
t
i
v
i
t
yo
ft
h
ee
x
t
r
a
c
twasa
s
s
a
y
e
da
t3TCi
and1
5mMe
t
h
a
n
o
lo
r5mMhexenolbymeasuringt
h
er
a
t
eo
fNADHp
r
o
d
u
c
t
i
o
na
t3
4
0nm.P
r
o
d
u
c
t
i
o
no
f1
μMNADHp
e
rminwasd
i
f
i
n
e
da
soneu
n
i
to
fenzymea
c
t
i
v
i
t
y
.a
)L
i
v
e
rADHa
c
t
i
v
i
t
ywase
x
p
r
e
s
s
e
da
smU/
)L
i
v
e
rADHa
c
t
i
v
i
t
ywase
x
p
r
e
s
s
e
da
sm U/
gbody
mgo
fl
i
v
e
rp
r
o
t
e
i
nandt
h
ev
a
l
u
e
sa
r
emeans土 SD.b
r
e
n
c
ei
nt
h
ea
c
t
i
v
i
t
yw
i
t
he
t
h
a
n
o
lo
rh
e
x
e
n
o
la
ss
u
b
s
t
r
a
t
eamonga
n
i
m
a
l
swas
w
e
i
g
h
t
.A s
i
g
n
i
f
i
c
a
n
c
eo
fd
i百e
a
s
s
e
s
s
e
dbyt
t
e
s
t(
ρ<0
.
0
5
)
.目 1
5mMe
t
h
a
n
o
la
ss
u
b
s
t
r
a
t
e;口，5mMh
e
x
e
n
o
la
ss
u
b
s
t
r
a
t
e
.
mMネオテトラゾリウム， 1
.
3
8mMPMSおよび，基質と
ノールを基質として測定した結果を F
i
g
.1に示した。ス
して各種濃度のエタ ノールを含む 0
.
1M グリシン緩衝
ナネズミの ADH活性は，エタノールおよび、ヘキセノー
液 (pH1
0.
7
)中で 3TC約 3
0分間イ ンキュベートするこ
ルのいずれを基質とした場合も，マウス，ラットと同様，
とにより行った(ネオテトラゾリウム法 :NT法)。また，
F
i
g
.1(
a
)
)。また，図に
モルモットより有意に高かった (
ヘキセノーノレを基質として用いることにより，エタノー
は示さなかったが，各動物種の両基質問の ADH活性を
ノレでは検出されにくい他のすべてのクラスの ADHアイ
有意差検定すると，スナネズミ，ラ ッ トについてはエタ
ソザイムも検出した。 ADHの阻害剤である 4
m
e
t
h
y
l
-
ノールの方が有意に高く，マウスは有意差はみられな
.
1M グリ シン緩衝液に 2
.
2
p
y
r
a
z
o
l
eを用いる場合は， 0
かったものの同様の傾向にあった。しかしモルモ ッ トは，
.
2mM4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eを 添 加 し
mMNADお よ び 1
ヘキセノールに対する活性の方が有意に高かった 。 ま
3TCで 5分間のプレインキュベーション後，同様に染色
た，体重 g当りの活性をみたところ，体が小さい種ほど
した。
ADH活性は高い傾向にあった (
F
i
g.1(
b
)
)。この結果
ADHアイソザイムの同定は，電気泳動上の移動度，エ
タノールとへキセノールに対する基質特異性および 4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eに対する阻害感受性などにより行った。
は，アルコール代謝速度と各動物種の体重が反比例する
という報告 25) に相応した。
2
. 肝 ADHアイソザイムの電気泳動
各動物種における肝 ADHのアイソザイムを電気泳動
6
. 統計処理
実験データ (
F
i
g
.1
，3
，6
) は，平均値±標準偏差で示
した。 F
i
g
.1および 3の結果については，エタノールあ
により検索し，それらの活性をデン シ トメータで検討し
た
。 F
i
g
.2には泳動パターンの写真を示した。
るいはへキセノールを基質としたときのスナネズミに対
0
8mMエタノールを基質と
いずれの種においても， 1
する各動物種のデータについて，また，各動物種におけ
した場合，陰極側から順に ADHの
、
活
'
性
ノ Tンド A，Bが検
るエタノールとへキセ ノールのデータ間で F検定後，等
出された(la
ne(
1
)
)。バ ン ドA は
， 4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
e添
分散性を示したものについては S
t
u
d
e
n
t
'
st
t
e
s
tにより，
加で消失したが，バ ン ドBは薄くなったが消失しなかっ
また等分散性を示さなかったものについては W
e
l
c
h
'
s
た(la
ne(
2
)
)。 また，すべてのクラスのアイソザイムが
t
t
e
s
tにより有意差 を判定した。
検出可能な 5mMへキセ ノールを基質とした場合，エタ
結 果
ノールで検出されたバンド A および B に加え，バンド C
が明瞭に検出された(la
ne(
3
)) 4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eはエ
0
1
. 各種蓄歯類における肝 ADH活性の比較
タノールのときと同様，バンド A を強く阻害したが，バ
スナネズミ，マウス，ラット，モルモットにおける肝
ン ド Bお よ び Cは ほ と ん ど 阻 害 さ れ な か っ た ( la
ne
ADH活性を， 15mMエ タ ノ ー ル ま た は 5mMへキセ
(
4
)
)。 また，いずれの動物種においても，活性バンド B
3
2
4
日本栄養・食糧学会誌
gUlnea pl
g
M
on90Iian 9er
biI
A
8
B.
.
.
.
.
+
調関 開 -
(
3
)
調
・
・
.
'
(
4
)
+
(
3
)
(
4
)
+ (1)
(
3
)
(
2
)
(
4
)
(
3
)
(
2
)
Fig.2
.D
i
s
ce
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
so
fl
i
v
e
rADHisozymesfromv
a
r
i
o
u
sr
o
d
e
n
t
s
.
(
4
)
(
1
)
(
2
)
圃日
(
1
)
(
2
)
rat
use
務
A
A
B
B→
C→
嬢
+
戸 長
(
1
)
製聾
踏
L
i
v
e
re
x
t
r
a
c
twass
u
b
j
e
c
t
e
dt
oe
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
son7.5%a
c
r
y
l
a
m
i
d
ed
i
s
cg
e
l(
0.
1ML
a
r
g
i
n
i
n
eb
u
f
f
e
r，pH9
.
7
)
u
s
i
n
g3
8
.
4mMβ-alanine/3.5mML
a
r
g
i
n
i
n
eb
u
f
f
e
r (pH9
.
0
)c
o
n
t
a
i
n
i
n
g0
.
5mM NAD. Theenzymewas
s
t
a
i
n
e
di
n0
.
1Mg
l
y
c
i
n
ebu
百e
r(pH1
0
.
7
)c
o
n
t
a
i
n
i
n
g2
.
2mMNAD，0
.
8mMn
e
o
t
e
t
r
a
z
o
l
i
u
m，1
.
4mMp
h
e
n
a
z
i
n
e
. Lane1
，1
0
8mMe
t
h
a
n
o
l;Lane2
，1
0
8mMe
t
h
a
n
o
l+1
.
2mM4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
e;
m
e
t
h
o
s
u
l
f
a
t
eanda
l
c
o
h
ol
，1
5mMh
e
x
e
n
ol;Lane4
，1
5mMh
e
x
e
n
o
l十 1
.
2mM4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
e
.
Lane3
および C はエタノールよりもへキセノールを基質とし
いて検出されたことより，クラス I
Iと推定された。パン
た場合の方が濃く検出された。この傾向は，とくにバン
0
8mMエタノールでは検
ド Cは，最も陰極側に位置し 1
ドC において著しかった。
出されず，ヘキセノールを基質とした場合に著しく強く
各クラスの ADHアイソザイムの電気泳動上の移動度
検出され， 4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eで 阻 害 さ れ な い こ と よ
は動物種によってかなり異なるが，各 ADHバンドの基
り27)，クラス I
I
Iと推定された。モルモットおよびラット
質特異性および阻害剤特異性は，精製した各 ADHアイ
において検出された ADHパンド A，B，C も，同様にそ
ソザイムの活性変化をほぼ反映していることが確認され
，I
I，I
I
Iと推定された。
れぞれクラス 1
ている 26)。したがって，各クラスの ADHを電気泳動上の
3
. 胃 ADH活性の比較
バンドで同定する場合，移動度のみならずアルコールに
Fig.3に示すように，スナネズミの胃 ADH活性はエ
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eに対する阻害感受
対する基質特異性， 4
タノールおよびへキセノールのいずれを基質とした場合
性および組織分布等を検討することにより，同定するこ
も，マウス，ラットに比べてその活性は有意に低く，モ
とが可能で、ある。図 2においてマウスのバンド A，B，C
ルモットと同程度であった。また，いずれの種において
は既報収 6) に照らし合わせて，それぞれクラス 1
，I
I，I
I
I
も，胃の ADH活性は，肝とは異なりエタノールよりもへ
と同定された。スナネズミの場合，バンド A は最も陽極
キセノールに対する活性が有意に高かった。
0
8mMエタノールを基質とした場合に強
側に位置し， 1
4
. 胃 ADHアイソザイムの電気泳動
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによって最も強く阻害さ
く検出され， 4
次に，胃 ADHアイソザイムを調べるために，電気泳動
れることから，クラス Iと推定された。バンド B は，移
後，全クラスの ADHアイソザイムが検出可能なヘキセ
動度が A と Cの中間で，エタノールよりもへキセノー
ノールを用いて活性染色を行い，アイソザイムパターン
-m
e
t
h
ルを基質とした場合の方が活性が高く， 4
を観察した(デンシトメータの結果は省略)
0F
i
g
.
4に示
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eで完全には阻害されないこと，また，肝にお
すようにいずれの蓄歯類においても 2本の活性バンドが
3
2
5
Vol
.4
9 NO.6 1996
E}hZ ﹀ZU帽zod ﹃
(E-20a
﹄ mE
ミd
クラス I
I
Iと同定されている 5)26)。スナネズミの胃 ADH
え
500
において陽極側のバンド E は，肝 ADHのバンド C と同
400
じ移動度で(la
ne (
1
)
，
300
影響を受けない(la
ne (2))ことから，クラス I
I
Iと推定
X
(
3
)
)，4-meth)
匂y
r
a
z
o
l
eにより
された。陰極側のバンド D は，マウスの場合と同様肝の
200
(
la
ne (
1
)， (
3
)
)，4
-
バンド A より移動度が若干大きく
100
2
)
)ことか
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる影響がみられた(lane(
0'----'-
M
o
n
g
o
l
i
a
ng
e
r
b
i
lm
o
u
s
e
r
a
t
ら，胃に特異的なクラス IVと推定した。ラットやモル
g
u
m
e
ap
l
g
モットの胃 ADHのバンド D も，肝のバンド A(クラス
specles
c(クラス IIIADH)の中間の移動度
c
t
i
v
i
t
i
e
s o
fv
a
r
i
o
u
s
F
i
g
.3
. Stomach ADH a
r
o
d
e
n
t
s
.
1ADH) とバンド
StomachADHa
c
t
i
v
i
t
ywasa
s
s
a
y
e
dbyt
h
esame
5mMe
t
h
a
n
o
l
methodsa
sd
e
s
c
r
i
b
e
di
nF
i
g.1.目 1
r
出
1
:h
exenola
ss
u
b
s
t
r
a
t
e
.
a
ss
u
b
s
t
r
a
t
e;口，5r
の抑制が認められたこと(la
ne(
2
)
)，胃に特徴的である
を示し(la
ne (
1
)
， (
3
)
)，4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eにより活性
ことより，クラス IVと推定された。
5
. スナネズミ肝および胃 ADHアイソザイムの活性
に対するエタノール濃度の影響
検出された(la
ne(
1
)) 4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによりノ fンド
晴乳類 ADHの各クラスのエタノールに対する Km値
E は阻害されなかったが，バンド D には影響がみられた
はクラス Iで数 mMまたはそれ以下，クラス I
Iで数十
0
(
la
ne(
2
))。マウスの胃 ADHにおいては，組織分布，基
mM，クラス IVで数百 mMおよびクラス I
I
Iで数 M であ
質特異性および 4
m
e
t
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる阻害特性などか
ることが知られている収川町。そこで，試料の量と反応時
ら，陰極側のバンド Dはクラス IV，陽極側のバンド Eは
間を同じにして，基質のエタノール濃度を変化させるこ
・
Mongolian gerbiI
sto ach
liver
繍園開
十竺ア
gUlnea plg
1iver
stOllach
期開即
t
0
"
"
"
'
ー
間
E→
+
‘F
(
2
)
・
.Ouse
sto ach
sto ach
明噸圃・w
(
4
)
JU
(
4
)
q
，
‘
、
、
E
，
，
E
一
-叩 ・
r
‘
，
、q u
，
，
、
‘
E
n7L
、
、‘，，
，
，
、
︼
，
l
，，.‘、
+
r
a
t
Iiver
ぜ 判 明明 。
規卿闘胸囲曹
A→
B→
E
、
、‘.，
ー
，
t
+
C→
零y乃
(
2
)
(
3
)
(
4
)
(
J
)
可曹暫
(
2
)
3
(
3
)
(
4
)
F
i
g
.4
. D
i
s
ce
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
so
fstomachADHi
s
o
z
y
m
e
so
fv
a
r
i
o
u
sr
o
d
e
n
t
s
.
D
i
s
ce
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
sanda
c
t
i
v
i
t
ys
t
a
i
n
i
n
gwereperformedbyt
h
esamemethodsa
sd
e
s
c
r
i
b
e
di
nF
i
g
.2
1
) and(
2
)o
feachr
o
d
e
n
tshowedADHisozymep
a
t
t
e
r
n
so
f
(
h
e
x
e
n
o
lwasu
s
e
da
sas
u
b
s
t
r
a
t
e.
)
.Laneso
f(
t
h
es
t
o
m
a
c
h
.Lane (
2
) wass
t
a
i
n
e
di
nt
h
ep
r
e
s
e
n
c
eo
f4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
e
. Lanes (
3
) and (
4
) wereADH
isozymep
a
t
t
e
r
n
so
ft
h
el
i
v
e
r，a
sshowni
nF
i
g
.2
3
2
6
日本栄養・食糧学会誌
(
1
)
(
2
)(
3
)(
4
) (
5
) (
6
)
・
thnoI
{
I
I
} 日.
0
0
6 0.015 0.
1 0.25
0
.
5
・
st0 ach
F
i
g.5
. E妊e
c
t
so
fe
t
h
a
n
o
lc
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
s on ADH
isozymea
c
t
i
v
i
t
i
e
si
nt
h
el
i
v
e
randstomacho
f
Mongoliang
e
r
b
i
L
+
(
1
) (
2
) (
3
) (
4
) (
5
) (
6
) (
7
) (
8
) (
9
)
・
thnol{l
I
} 0.
0
0
6日
ー
日1
50
.
1
1
5
0.25 日.
5
2
.5
D
i
s
ce
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
s was performed by t
h
e same
methodsa
sd
e
s
c
r
i
b
e
di
nF
i
g
.2
.
A
c
t
i
v
i
t
ywass
t
a
i
n
e
dby
u
s
i
n
gv
a
r
i
o
u
sc
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
so
fe
t
h
a
n
o
la
sas
u
b
s
t
r
a
t
e
.
1
)，0.
0
0
6M ;l
a
n
e(
2
)，0
.
0
1
5M ;l
a
n
e(
3
)，0
.
1
Lane (
M;l
a
n
e(
4
)，0.
25M;l
a
n
e(
5
)，0.5M;l
a
n
e(
6
)，1M;
a
n
e(
8
)，2M ;l
a
n
e(
9
)，2
.
5M
.
l
a
n
e(
7
)，L5M ;l
M
o
n
g
o
l
i
a
ng
e
r
b
i
l
guineap
i
g
150
。430O
。
a
.
，
色
』E
圃
、
E
M
』
、
1
コ
E
5
h叩50
・
ω
B
岡
百
E
B
2
h
. m
10
o
z
《
o
z
d
n
。
。
ethanol(M)
ethanol(M)
、
町ouse
r
a
t
200
200
。
z
包
•0
、
2
3
E
z
s
，
h 1田
2
J
•E
P
0 1
曲
o
z
《
o
z
《
盲
邑
E
ethanol(M)
ethanol(M)
F
i
g
.6
.E
f
f
e
c
t
so
fe
t
h
a
n
o
lc
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
sonl
i
v
e
randstomachADHa
c
t
i
v
i
t
i
e
so
fv
a
r
i
o
u
sr
o
d
e
n
t
s.
.
0
0
6，
ADHa
c
t
i
v
i
t
i
e
so
ft
h
el
i
v
e
randstomachwerea
s
s
a
y
e
dbyu
s
i
n
gv
a
r
i
o
u
sc
o
n
c
e
n
t
r
a
t
i
o
n
so
fe
t
h
a
n
o
l(
0，0
0
.
0
1
5，0
.
1，0
.
2
5，0
.
5，1
，L 5and2M
)a
sas
u
b
s
t
r
a
t
e
.L
i
v
e
rADHa
c
t
i
v
i
t
ywase
x
p
r
e
s
s
e
da
smean:
tSDm U/
c
t
i
v
i
t
ywaso
b
t
a
i
n
e
dfrommixedhomogenateo
ft
h
estomachs
mgo
ft
h
r
e
ea
n
i
m
a
l
s.While，stomachADHa
i
v
e
r;0 stomach.
fromt
h
r
e
ea
n
i
m
a
l
s
. l
，・
，
Vol
.4
9 No.6 1
9
9
6
3
2
7
とにより，スナネズミの 3本の肝 ADHバンドおよび 2
よぴモルモットの胃 ADHは著しく低活性で，高濃度エ
本の胃 ADHバンドへの影響を検討し，デンシトメータ
タノール下でも肝 ADH活性を凌ぐことはなかった。し
により観察した。 F
i
g
.
5には泳動パターンの写真を示し
たがって，これらの動物種は，胃 ADH活性の低い種であ
た
。
ることが明らかとなった。
.
1M (
l
a
n
e
肝 ADHのバンド Aはエタノール濃度 0
(
3
))をピークとして活性の値下がみられ，バンド Bは
1
'
"1
.5M (
I
a
n
e(
6
)， (
7
)
)の聞で弱いながら活性が認め
られた。一方，バンド Cは 2
.
5M (
Ia
n
e(
9
)
)まで活性が
上昇した。これらのことは， A，B，Cの順にエタノール
7
. エタノールを基質とした場合のスナネズミ肝およ
び胃 ADHの広司値
スナネズミの肝および胃の組織粗抽出液を用いて
Aはエタノールに対し最も低い Km値を有することか
ら，クラス Iに相当することが確認された。また，バンド
ADHのエタノールに対する，見掛貯の Km値を求めた。
肝 ADHの Km値は， L
i
n
e
w
e
a
v
e
r
B
u
r
kp
l
o
t解 析 か ら
0.35mMと求められた。この値は，ラットの Km値1.4
21
20
) よりも小さしむしろマウスの K
mM
m値 0
_
1
5mM
)
22
およびモルモットの Km値 0
.
2
9mM )に近かった。ー
方，胃 ADHについては， 2
9.6mMと 1
9
4.
4mMという
Cはエタノ-)レに対し最も高い Km値を有することか
二つの Km値が求められ，後者は，すでに報告されてい
I
Iに相当し，バンド Bは肝のみに検出され，
ら，クラス 1
20
)およびラット胃
るマウス胃 ADHの 広n値 2
3
2mM
エタノールに対する Km値を含め，種々の酵素的性質が
ADHの 広n値 3
4
0mM21)に近かった。
に対する Km値が高くなることを示している。したがっ
て
，F
i
g
.2の結果に加えて，スナネズミ肝 ADHのバンド
Iに相
バンド A とCの中聞を示したことより，クラス I
当することがそれぞれ確認された。
Ia
n
e(
6
)
)
また，胃 ADHについては，ノてンド Dは 1M (
で最大活性を示したが，バンド E は 2
.
5M (
I
a
n
e(
9
)
)ま
考
察
スナネズミは，水利用の効率がよく 4
5日以上も水な
しで暮らせるといわれており 29)，その理由として，スナネ
i
g
.4の結果と合
で活性の増大を示した。したがって， F
ズミの脳内の抗利尿ホルモンの濃度は，ラット等より約
わせて，バンド E は，高濃度エタノールでも活性が飽和
3倍も高い 3のこと等が考えられている。アルコールは抗
せず， 4
・
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eで阻害されないことより，肝の
利尿ホルモンの分泌を抑制することにより，利尿効果を
バンド Cと同じくクラス 1
I
Iと同定された。またバンド
示し，水代謝に大きな影響を及ぽす 19)。このように特徴
Dに つ い て は 1Mで最大活性を示すこと， 4m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる影響がみられたことから，胃に特異的
な存在が報告されているクラス 1
Vに相当することが確
的な水代謝を示すスナネズミのアルコール代謝およびア
認された。
およびアイソザイムの分布を他の醤歯類と比較した。
・
6
. 肝および胃の ADH活性へのエタノール濃度の
影響
肝および胃にお砂る，おのおのの ADHアイソザイム
ルコールの水代謝への影響を検討することを今後の目的
として，今固まず本動物種の肝と胃におげる ADH活性
スナネズミ肝において，電気泳動上，最も陰極側に見
いだされた ADHのバンド Aは，他の醤歯類のバンド A
と同様に低濃度エタノールで活性が高く， 4
・
me
吐l
y
l・
強く受げることが，泳動ノすンドの強度変イじにより確認さ
p
y
r
a
z
o
l
eで 最 も 強 く 阻 害 さ れ た こ と か ら ， ク ラ ス I
F
i
g
.2
)。また，最も陽極側に検出
ADHと同定された (
れた。そこで，肝および胃におげる ADH活性のエタノー
されたバンド(肝では C，胃では E
)は，他の醤歯類のバ
の活性は，その Km値に応じてエタノール濃度の影響を
ル濃度依存性を検討した (
F
i
g
.6
)。肝 ADH活性はいず
ンドと同様，その活性がエタノール 2
.5Mまで飽和され
れの動物種においても，エタノール濃度 15mM前後で最
ず
， 4
・
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eで阻害されなかったことから，ク
高活性を示し，それ以上の濃度では活性が低下し， 0
.5M
ラス I
I
Iと同定された (
F
i
g
.4
，5
)。胃のバンド Dは肝ク
前後から一定の活性を示した。これは，エタノールの濃
ラス Iより若干大きい移動度をもち，クラス Iと異なり l
度が低いときにはクラス 1ADHが高活性を示すが， 1
5
mM以上ではその活性が低下し，逆にクラス I
Iおよびク
ラス 1
I
Iの活性が反映する (
F
i
g
.5
)ことによるものと推
察された。また，胃 ADH活性においては，マウス，ラッ
トではエタノール 0
.5M前 後 の 濃 度 を 境 に し て ， 肝
ADH活性よりはるかに高くなった。このことはこれら
M前 後 の エ タ ノ ー ル で 最 大 活 性 を 示 し ， 4m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる阻害は低かったことから，クラス IVと
F
i
g
.4
，5
)。このように，スナネズミにおけ
同定された (
る ADHアイソザイムシステムは，他の蓄歯類と同様で
あることがわかった。また，それぞれの ADHクラスの
電気泳動におげる移動度は動物種によって異なっていた
の種の胃では中および、高濃度エタノールでよく働くクラ
が，いずれの種でも陰極側からクラス 1
，I
V，I
I，I
I
Iの順
Vおよび I
I
Iが高活性で存在する (
F
i
g
.4
，l
a
n
e(
1
)
，
ス1
F
i
g
.4
)。
であった (
(
2
))ことによるものと推察された。一方，スナネズミお
・
スナネズミにおいて，アルコール代謝能の指標となる
3
2
8
日本栄養・食糧学会誌
要
肝 ADH活性は，
15mMエタノールおよび 5mMヘキセ
事
旬
ノールのいずれの基質でもモルモットより有意に高く，
ADHアイソ
ADH活性を
ラットやマウスと同程度であった。一方，アルコール代
スナネズミの肝と胃にお貯る各クラスの
謝の初回通過効果の指標となる胃 ADH活性は，スナネ
ザイムの存在ならびにそれら組織にお付る
ズミとモルモツトにおいてマウスやラットより著しく低
マウス，ラット，モルモット等の醤歯類と比較検討した。
かった。また，スナネズミの胃 ADHのエタノールに対
29.6mMと 1
9
4.
4mMというこつの値が
2
3
2
求められた。すでに報告されているマウス胃 ADH(
2
20
mM
DHの Km値 (
3
4
0mM
1
)
)
と
)
) および，ラット胃 A
比較すると，今回のスナネズミ胃の 1
9
4
.
4mMの方の Km
値はクラス I
VADHの広百値を反映したものと推定さ
I
Iのエタノールに対する
れる。しかしながら，クラス I
Km値は 1M以上であることから 27)，Km値 29.6mMは
，
いかなる ADHの活性を反映したものであるかは不明
する Km値は，
で，今後の検討課題である。
各動物種の胃 ADHアイソザイムであるクラス
I
I
Iと
I
Vは，肝の主要な ADHアイソザイムであるクラス Iよ
りいずれもエタノールに対する Km値が高いことが知ら
れており 20)21)，本研究にお砂るスナネズミ胃の ADHク
I
I
Iと I
Vのいず、れの活性ノてンドも 0
.
2
5
M以上のエ
タノールで明瞭に検出された (
F
i
g
.5
，s
t
o
m
a
c
hl
a
n
e
(
4
))。そこで，各動物種の肝と胃の ADH活性をエタノー
ラス
ル濃度を変えて比較すると，マウスとラットにおいては，
(
<
0
.
1M
)の場合，肝 ADH活性の方
が高いが，高濃度になると明らかに胃 ADH活性の方が
F
i
g
.6
)。このことは，これらの醤歯類では
高くなった (
低濃度エタノール
アルコール摂取後の消化管内での高濃度のエタノール代
スナネズミは，肝においては，電気泳動により 3本の
ADHバンド (
A
，B
，C
)が検出された。陰極側のバンド
A は低濃度エタノ}ルを基質とした場合に濃く染色さ
れ
，
4
・
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eで強く阻害されたことから，クラ
ス Iと同定された。陽極側のバンド Cはへキセノールに
対して強い活性を示し，エタノールを基質とした場合
2.5Mまで活性が飽和せず， 4
・
m
e
t
h
yl
p
y
r
a
z
o
l
eにより阻
I
I
Iと同定された。クラス I
とクラス I
I
Iの聞にみられたバンド Bは，肝に存在する
I
Iの中閣の酵素的性質を有することよ
ことおよび Iと I
り，クラス I
Iと同定された。胃においても 2本のバンド
害されないことより，クラス
(D，E)が検出された。陰極側のバンド D は，胃に特異
1Mで最大活性を示したこと，
4
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる阻害感受性が肝のクラス
IADHより低いことより，クラス I
Vと同定された。陽
極側のバンド Eは肝のバンド Cと同様の基質特異性お
よび 4
・
m
e
t
h
y
l
p
y
r
a
z
o
l
eによる阻害感受性および移動度
より，クラス I
I
Iと同定された。以上のように，スナネズ
ミの ADHアイソザイムシステムは他の醤歯類と同様で
的であること，エタノール
また
あった。
ADH活性は，マウスやラッ
15mMエタノールおよび 5mMヘキセノール
スナネズミの肝にお砂る
トと同様，
謝に，胃の ADHが大きな役割を果たすことを示唆する。
のいず、れの基質でもモルモットより有意に高かった。一
一方，スナネズミおよびモルモットでは，胃の ADH活性
方，スナネズミの胃 ADH活性はいずれの基質でもモル
はエタノール濃度を上げても上昇はそれほどみられず低
モットと同様，マウスおよびラットに比べ著しく低かっ
値のままであり
(
F
i
g
.6
)，これらの動物種ではアルコー
ル代謝にお貯る胃の役割は小さいものと考えられた。さ
I
I
Iおよび I
V
た。また，肝 ADHはいずれの種においても，
15mM以
上のエタノール濃度では活性の低下がみられたが，胃
を含む胃の ADH活性がヘキセノールに高活性を示した
ADH活性はマウスやラットにおいては逆に上昇し，
0
.
2
5
M以上になると逆転し，肝の活性より高くなった。
(
F
i
g
.3
) ことは，これらの動物種がディアマウス 5) と類
このことは，胃が摂取された高濃度のアルコールを代謝
似した食性をもっていることが示唆された。一方，スナ
する場として重要であると考えられた。一方，スナネズ
らに，マウスおよびラットにおいてクラス
ネズミおよびモルモットでは，胃 ADH活性がエタノー
ミおよびモルモットにお抄る胃 ADH活性は，高濃度エ
ルのみならずヘキセノールに対しでも著しく低かった
タノールでも有意な活性の上昇はみられず，低値のまま
(
F
i
g
.3
)。このことは，スナネズミが砂漠の植物の根や種
であった。したがって，これらの動物種のアルコール代
を摂食するとされている 3のように，これらの醤歯類がマ
謝にお貯る胃の役割は小さいと考えられた。さらに，動
ウスやラットと違った食性をもつことと関係していると
物種聞にお貯る各 ADHアイソザイム活性の相違は，と
考えられた。
くに胃 ADHのへキセノールに対する活性で著しく，各
以上のように，ヒトにおいても胃 ADHの活性が低い
クラス
動物種の食性との関連が示唆された。
I
V欠損の例が報告されている 10) ことから，胃
ADHアイソザイムのアルコール代謝および栄養代謝に
おげる役割を研究するための動物モデルとして，スナネ
ズミ(およびモルモット)は有用と思われる。
文
献
1
)S
t
r
y
d
o
m
，D
.
]
.a
n
dV
a
l
l
e
e
，B
.
L
.
:A
n
a
l
.B
i
o
c
h
e
m
.，
1
2
3
，4
2
2(
1
9
8
2
)
3
2
9
Vo.
l4
9 NO.6 1
9
9
6
2
) Val
1
e
e，B.L.andBazzone
，T
.
]
.:]
s
o
z
y
m
e
sCur
χ T
o
p
.
，2
1
9(
19
8
3
)
B
i
o
l
.M
e
d
.R
e
s
.，8
3
)S
t
e
p
h
e
n，P
.
F
.，M
i
l
l
e
r
，P
.，G
i
r
i，R.andG
o
l
d
r
n
a
n，D
.:
P
r
e
t
.B
i
o
c
h
e
m
.，1
9
，1
2
9(
19
8
9
)
4
) Haseba，T
.，S
a
t
o，S
.，I
s
h
i
z
a
k
i，M.，Y
a
r
n
a
r
n
o
t
o，，
.
1
Kurosu，M. andWatanabe
，T
.:B
i
o
m
e
d
. R釘
.
， 1
2
，
1
9
9(
1
9
91
)
5
) Haseba，T
.
，Y
a
r
n
a
r
n
o
t
o，
，
.
1K
a
r
n
i
i，H.，Ohno，Y
.and
Watanabe
，T
.:B
i
o
c
h
e
m
.G
e
n
e
t
.，3
3
，3
4
9(
1
9
9
5
)
6
)P
a
r
e
s
，X
.，Moreno，A
.
，C
a
d
e
r
l
u
n
d，E
.，Hoog
，
]
.
0
.and
，
1
l]
.:FEBSL
e
t
t
.，2
7
7，1
1
5(
1
9
9
0
)
]
o
r
n
b
a
7
)]
u
l
k
u
n
e
n，R
.
]
.
K
.
， D
iPadva，C
.andL
ie
b
e
r
，C
.S
.:
L依 Sci 3
7，5
6
7(
19
8
5
)
吋
8
) 大畑充，山内異義，平川淳一，水原裕治，中山一，
中島尚登，中原正雄，木村和夫，北原敏久，小倉和雄，
藤沢測，亀田治男:アルコール代謝と肝， 9
，1
8
(
19
9
0
)
9
) Moreno，A.andP
a
r
e
s
，X
.:
よB
i
o
l
.Chem.，2
6
6
，1
1
2
8
(
1
9
9
1
)
1
0
) Baraona，E
.，Yo
k
o
y
a
r
n
a，A
.
，I
s
h
i
i，H
.
， Munoz
，R
.H
.，
Tagaki，T
.，T
s
u
c
h
i
y
a，M. and L
ie
b
e
r
，C
.S
.
:L約
S
c
i
.，
4
9，1
9
2
9(
1
9
91
)
1
1
) アルコール医学生物学研究会(編):アルコールと医学
生物学， V01
.1
4，3
8(
1
9
9
4
)，東洋書庖(東京)
1
2
)P
a
r
i
z
e
k，R
.
， Kovar
，]
.a
nd Skursky，L.:C
o
l
l
e
c
t
.
C
z
e
c
h
.C
h
e
m
.Commun.，4
6
，7
9
8(
19
81
)
1
3
)T
a
l
b
o
t，B.G
.，Q
u
r
e
s
h
i，A
.
A
.
，C
ohen
，R
.a
ndT
h
i
r
i
o
n，
]
.
P
.:B
i
o
c
h
e
m
.G
e
n
e
t
.，1
9
，8
1
3(
19
8
1
)
1
4
)S
e
e
l
e
y，T
.L
.
，M
ather
，P
.B
.a
ndH
o
l
r
n
e
s
，R
.S
.:Comj
う
.
B
i
o
c
h
e
m
.P
h
y
s
i
o
l
.，7
8，1
3
1(
19
8
4
)
1
5
)B
o
s
r
o
n，W.F.，G
a
i
t
h
e
r
，]
.
W
. and Magnes
，L
.
]
.
:
A
l
c
o
h
o
l
.C
l
i
η.E
.
r
:
砕.R
e
s
.，9
，2
2
8(
19
8
5
)
，W
.P.，L
i
a
n
g，S
.
]
.
.andV
a
l
l
e
e，B.L.:
1
6
)D
a
f
e
l
d
e
c
k
e
r
B
i
o
c
h
e
m
i
s
t
η，2
4
，6
4
7
4(
19
8
5
)
1
7
)B
u
r
n
e
t
t，K.G
. and F
e
l
d
e
r
，M.R.:B
i
o
c
h
e
m
.P
h
a
r
m
a
c
o
l
.，2
9，1
2
5(
19
8
0
)
2
8(
19
8
6
)，西村書庖(東
1
8
) 佐藤徳光:動物実験の基本， 2
京)
1
9
) 荒川泰行，大久保仁:医学のあゆみ， 1
5
4
，8
5
9(
19
9
0
)
2
0
)A
l
g
e
r
，M.
E
.
，S
e
e
l
e
y
，T
.L
.a
ndH
o
l
r
n
e
s
，S
.R
.:E
u
r
.
]
.
B
i
o
c
h
e
m
.，1
3
7，1
3
9(
19
8
3
)
.，F
a
r
r
e
s
，]
.a
ndP
a
r
e
s
，X
.:E
u
r
.
]
.B
i
o
c
h
e
m
.，
2
1
)]
u
l
i
a，P
1
6
2，1
7
9(
19
8
7
)
o
m
p
.
2
2
) Wing-Ming Keung and Wing-Ping Fong:C
B
i
o
c
h
e
m
.P
h
y
s
i
o
l
.，89B，8
5(
19
8
8
)
，]
.
A
.a
ndL
o
t
t，]
.
A
.:C
l
i
n
. Chem.，2
4，1
9
3
1
2
3
)]
o
n
s
o
n
(
19
7
8
)
，2
5
6(
1
9
7
6
)，
2
4
) 日本生化学会(編):タンパク質の化学 1
東京化学同人(東京)
2
5
)V
i
d
e
l
a，L
.
， F
l
a
t
t
e
r
y，K.V
.，Sel
1e
r
s
，E
.
A
.a
ndI
s
r
a
e
l，
Y
.:
]
.Phan
ηa
c
o
l
.Eゆ• T
h
e
r
.，1
9
2
，5
7
5(
19
7
5
)
.， Hirakawa， K
.
， T
o
r
n
i
t
a， Y
. and
2
6
) Haseba， T
明T
a
t
a
n
a
b
e， T.:E
l
e
c
t
r
o
p
h
o
r
e
s
i
s'
8
3， 3
9
3 (
19
8
4
)，
WalterdeG
r
u
y
t
e
r& C
o
.(
B
e
r
l
i
n，NewYork)
2
7
) Haseba，T
.:
かn
.
]
.A
l
c
o
h
o
lS
t
u
d
.DrugD
e
t
e
n
d
.，2
0，
3
3
3(
1
9
8
5
)
白
，X
.andMoreno，A.:
]
.B
i
o
l
.Chem.，2
6
6，1
1
2
8
2
8
) Par
(
19
91
)
2
9
) 藤原公策，前島一淑，宮鳥宏彰，森脇和郎，揮崎坦，
横山昭:実験動物学事典， 2
2
7(
1
9
8
9
)，朝倉書庖(東
京)
3
0
)E
g
g
l
e
t
o
n，M.C
.:
よP
h
y
s
i
o
l
.，1
0
1，1
7
2(
19
4
2
)
(
19
9
5年 1
1月 3
0日受理)
/