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MISSION® 3`UTR Lenti GoClone
biosilencing Non-CodingRNA 関連製品キャンペーン キャンペーン期間: 2013年1月15日 ~4月26日 掲載製品 すべて 40% OFF Functional Genomics MISSION® esiRNA for Long Non-Coding RNA MISSION esiRNA Long-Non Coding RNA は Long Non-coding RNA をターゲットとした RNAi 試薬です。 esiRNA は多数の siRNA がプールされているため、オフターゲット効果を低減し、経済的に RNAi スクリーニングを行うことが 可能なツールです。 特徴 ・オフターゲット効果の低減 : 複数の siRNA が含まれています。これらが同時に作用するため、 ターゲット lncRNA に対するオフターゲット効果が低減されます。 ・低コストの実験 : 1 つの lncRNA について 1 つの esiRNA で済むため、 低コストでの RNAi 実験が可能となります。 ・豊富なプレデザイン : esiRNA は、マウス 643 クローン、ヒト 1,245 クローンを保有しています。 個別クローンおよびコントロール コントロール 製品名 製品番号 (X は数字) 個別 esiRNA Human : 1,245 種 Mouse : 643 種 容量 20µg 50µg 通常価格 EHNCXXXXX EMNCXXXXX キャンペーン価格 ¥28,000 ¥50,000 ¥16,800 ¥30,000 ※在庫状況により納期が異なります。ご注文前にあらかじめご確認ください。 製品名 容量 Negative Controls EHUEGFP esiRNA targeting EGFP EHUFLUC esiRNA targeting FLUC 20 µg, 50 µg 20 µg, 50 µg EHURLUC esiRNA targeting RLUC 20 µg, 50 µg esiRNA targeting human KIF11 20 µg, 50 µg Positive Control EHU019931 • ネガティブコントロー ル:RLUC、FLUC、eGFP をターゲットとした esiRNA をご利用いただけます。 • ポジティブコントロール:eg5 (KIF11) をターゲットとした esiRNA をご 利用いただけます。 仕様: Human: 1,245 esiRNAs Mouse: 643 esiRNAs 50 ng/ul RNA in nuclease free TE buffer 対象 lncRNA に関する製品の検索は 弊社 HP(下記 URL)をご利用ください。 尚、検索は各 lncRNA に対応する Genbank_ID を用いてください。 References Chakraborty,D., et al. 2011. Combined RNAi and localization for functionally dissecting long non-coding RNAs. Nat Methods 9(4), 360-2 (2012). sigma.com/ncesirna sigma.com/yfgjapan Human microRNA Mimics MISSION® miRNA Mimics は成熟 miRNA として機能するようにデザインされており、miRNA の機能解析に適したツー ルです。特殊な修飾とデザインにより、オフターゲット効果を低減しています。 特徴 製品名 ・ 1,900 種類以上の miRNA(miRBase ver.17) ・特殊な修飾とデザインによるオフターゲット 効果の減少 1,920 種類 , 5 nmol HMI0001 - HMI1920 ¥39,800 3 ’- d Td TACCU U UAC AU U CC U U C AC AC ACC - N H 2 - 5’ U G G - A AU G UA AGGA AG U GUGUGG Sense strand キャンペーン価格 ¥23,880 Negative Control Extra base creates bulge 3’ 5’ 通常価格 Individual clones MISSION miRNA mimic design and modification 5’- 製品番号 - 3’ Control1, 5 nmol HMC0002 -5NMOL ¥39,800 ¥23,880 Control2, 5 nmol HMC0003 -5NMOL ¥39,800 ¥23,880 ※ 通常納期 : 2 週間∼ 1 ヶ月。ご発注時にご確認ください。 Amine Anti-sense strand 特徴的なデザインと修飾により、センス鎖によるオフターゲット効果を 低減するよう設計されている。 対象 miRNA に関する製品の検索は 弊社 HP(右記)をご利用ください。 sigma.com/yfgjapan microRNA Quantification Kit MystiCq ™は成熟 miRNA を qPCR を用いて測定するためのキットです。最新の miRBase ver.18 をもとにデザインされ、 バリデートされたプライマーを用いることで個々の miRNA を特異的に検出することが可能です。 microRNA cDNA Synthesis 製品名 MystiCq microRNA cDNA Synthesis Mix 製品番号 使用回数 価格 MIRRT 25RXN 100RXN ¥45,800 ¥151,800 製品番号 使用回数 価格 キャンペーン価格 ¥27,480 ¥91,080 qPCR Primers 製品名 MystiCq microRNA qPCR Assay Primer MIRAPxxxxx 250RXN MystiCq microRNA qPCR Control Primer MIRCPxxxxx 250RXN MystiCq Universal PCR Primer MIRUP 500RXN SYBR® Green qPCR Ready Mix 製品名 製品番号 MystiCq microRNA SYBR Green qPCR ReadyMix ™ MIRRM00 MystiCq microRNA SYBR Green qPCR ReadyMix, Low ROX ™ MIRRM01 MystiCq microRNA SYBR Green qPCR ReadyMix, with ROX MIRRM02 MystiCq microRNA SYBR Green qPCR ReadyMix, iQ ™ MIRRM03 ¥15,000 ¥15,000 ¥15,000 使用回数 価格 100RXN 500RXN 2000RXN 100RXN 500RXN 2000RXN 100RXN 500RXN 2000RXN 100RXN 500RXN 2000RXN ¥39,800 ¥171,800 ¥606,000 ¥39,800 ¥171,800 ¥606,000 ¥39,800 ¥171,800 ¥606,000 ¥39,800 ¥171,800 ¥606,000 キャンペーン価格 対象の miRNA 特異的プライマー ¥9,000 に関する製品の検索は弊社 HP ¥9,000 ( 下記 ) をご利用ください。 ¥9,000 sigma.com/mysticq キャンペーン価格 ¥23,880 ¥103,080 ¥363,600 ¥23,880 ¥103,080 ¥363,600 ¥23,880 ¥103,080 ¥363,600 ¥23,880 ¥103,080 ¥363,600 ※ qPCR ReadyMix はお使いの機器に適 した製品を事前にご確認ください。 qPCR 機器 適応表はこちら sigma.com/mysticqreadymix-jp MISSION® 3'UTR Lenti GoClone™ Human miRNA ターゲット解析のため、プレクローニングされた 3'UTR クローン クローニングされた1万種類以上のクローン 製品概要 Sigma®レンチウイルスシステムに導入されたHuman 3’UTR Sigma と SwitchGear Genomics™ は MISSION 3’UTR Lenti GoClone 製品において提携を結びました。SwitchGear の持つ、ルシフェラーゼ レポーターと 3’UTR を導入したプレクローンのブランド『GoClone』と、 Sigma の持つ MISSION レンチウイルスデリバリーシステムを組合せ、 luciferase miRNA mimic or non-targeting control 3’UTR promoter MISSION 3’UTR Lenti GoClone Vector pLSG_UTR_RenSP Lenti GoClone viral particle transfect より簡便で、確実な細胞導入に成功しました。 transduce RISC complex ■ Convenience: express inhibit hibit クローニング済みなので、即時トランスフェクション可能 Light output with miRNA mimic Light output with control integrate Specific activity of miRNA mimic on target UTR Hybrid LUC-3’UTR Transcript ■ Flexibility: トランスフェクションの難しい細胞や分化した細胞への導入がレンチ ウイルスデリバリーで可能 ■ Experimental consistency: 1. 目的細胞に選択した MISSION 3’UTR Lenti GoClone を導入 2. 導入プロモーターにより、LUC-3’UTR ハイブリットコンストラクトが発 現します。RenSP( 最適化された Renilla Luciferase レポーター ) はル 簡便に安定発現細胞株を作製可能 ■ Quality: 優れた性能を提供する、経験に基づいた最高のウイルス品質 ■ Optimized: 最適化されたウミシイタケルシフェラーゼレポーターによる高感度化 シフェラーゼ基質の導入により発光します。 3. ここに MISSION miRNA mimic をトランスフェクションします。 4. 導入した miRNA が GoClones の 3’UTR と特異的に相互作用を起こす と、LUC-3’UTR の発光が抑制されます。 5. ルシフェラーゼ基質の蛍光測定にはルミノメーターを使用します。 sigma.com/lentigoclone MISSION 3'UTR Lenti GoClone 製品名 製品番号 フォーマット 価格 個別クローン (対応遺伝子に対するクローンはご検索ください) HUTRxxxxx ¥70,000 MISSION 3'UTR Lenti Housekeeping Control HUTR001C ¥70,000 MISSION 3'UTR Lenti Empty Vector Control HUTR002C MISSION 3'UTR Lenti Non-target Control 1 HUTR003C MISSION 3'UTR Lenti Non-target Control 2 HUTR004C MISSION LightSwitch Luciferase Assay Reagent MLS0001 0.2nL/ ≧ 105TU ¥70,000 ¥70,000 ¥70,000 100 assays ¥23,600 キャンペーン価格 ¥42,000 ¥42,000 ¥42,000 ¥42,000 ¥42,000 ¥14,160 ※在庫状況により納期が異なります。ご注文前にあらかじめご確認ください。 対象遺伝子に関する製品の検索は 弊社 HP(右記 URL)をご利用ください。 sigma.com/yfgjapan MISSION Lenti GoClone 専用注文用紙 ➡ sigma.com/rnai-jp MISSION 3' UTR Lenti GoClone 製品は、「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する 法律(通称カルタヘナ法)」の使用規制対象品となります。ご使用に際しては、規制に則し適切にお取り扱い下さい。 また、本製品をご購入の際には、弊社へのご登録をお願い致しております。施設申請の際は sigma.com/rnai-jp を ご参照ください。 MISSION® Target ID Library microRNA ターゲットスクリーニング用ライブラリー MISSION Target ID Library Vector Overview 特長 ・網羅的なターゲット 3' UTR のスクリーニング Human cDNA が組み込まれたライブラリーにより、 複数の UTR 領域のスクリーニングが簡単に行えます BamHI,1 SmaI,7 PstI,13 EcoRI,19 HindIII,31 SnaBI,279 4878 ,SnaBI 4539 ,SpeI ・効率的 CMV 4302 ,Bg1II PstI,786 5000 TKzeo 4169 ,SspI ポジティブ / ネガティブセレクションを組合せ、 バックグラウンドを抑えた UTR スクリーニングが可能です 4000 p3’TKzeo 1000 SmaI,267 5,190 bps 3485 ,ScaI SfiI,1624 SfiI,1637 EcoRI,1672 PvuII,1762 2000 3000 MISSION Target ID Library ワークフロー polyA MISSION Target ID Library Transfection: MISSION Target MISSION® Target ID Library Transfection Transfection PvuII,2296 細胞に Target ID を導入します(約 3-5 日)。 Zeocin Selection (Positive Selection): ゼオシンによる細胞のセレクションを行います。 導入されているゼオシン耐性遺伝子により、 Target ID がゲノムに取り込まれた細胞のみがセレクションされます。 Zeocin selection (Positive Selection) 幾つかの細胞においては、内在性の miRNA がコンストラクトの 3' UTR に作用し、TKzeo を発現抑制してしまい、死滅する場合があります。 興味のある miRNA が対象細胞において発現しておらず、それらの遺伝子ターゲットが ポジティブセレクションにおいて選択可能である事が必要です。 microRNA Transfection: microRNA transfection Target ID ライブラリ−が導入された細胞に、目的の miRNA を導入します。 Ganciclovir Selection (Negative Selection): 安定発現株が得られたら、ガンシクロビル処理を行ないます。 ガンシクロビルの存在下で、HSV チミジンキナーゼ (HSVTK) が作用すると 細胞は死滅します。これに対し、対象 miRNA が 3' UTR のターゲットサイトと作用し TKzeo の発現が制御されるとガンシクロビルセレクション耐性となります。 PCR and Sequencing: Ganciclovir selection ターゲット同定のために、ゲノム DNA を抽出し、キット付属のプライマーを 利用して PCR を行います。増幅 DNA はシーケンス解析によって配列同定を行います。 (Negative Selection) sigma.com/targetid PCR and Sequencing 製品 MISSION Target ID Library 直販用:住所・電話番号入り 価格 Cat.No. MREH01-1SET ¥600,000 キャンペーン価格 ¥400,000 Ⓒ 2013 Sigma-Aldrich Co. LLC. All rights reserved. SIGMA, SAFC, SIGMA-ALDRICH, ALDRICH, and SUPELCO are trademarks of Sigma-Aldrich Co. LLC, registered in the US and other countries. FLUKA is a trademark of Sigma-Aldrich GmbH, registered in the US and other countries. SAFC brand products are sold through Sigma-Aldrich, Inc. Purchaser must determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply. Please see product information on the Sigma-Aldrich website at sigma-aldrich.com. MISSION is a registered trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC.. ReadyMix is a trademark of SigmaAldrich Co. LLC.. SYBR is a registered trademark of Molecular Probes, Inc.. GoClone is a trademark of SwitchGear Genomics. iQ is a trademark of Bio-Rad Laboratories, Inc.. MystiCq is a trademark of Quanta BioSciences Inc.. ROX is a trademark of Life Technologies Corporation.. ・本カタログに掲載の製品及び情報は2013年1月15日現在の内容であり、収載の品目、製品情報、価格等は予告なく変更される場合がございます。 最新の情報は、弊社Webサイト(sigma-aldrich.com/japan)をご覧ください。 ・掲載価格は希望納入価格(税別)です。詳細は販売代理店様へご確認ください。 ・弊社の試薬は試験研究用のみを目的として販売しております。医薬品原料並びに工業用原料等としてご購入の際は、弊社ファインケミカル事業部までお問い合わせ願います。 シグマ アルドリッチ ジャパン お問合せは下記代理店へ 〒 140-0002 東京都品川区東品川 2-2-24 天王洲セントラルタワー 4 階 製品に関するお問い合わせは、弊社テクニカルサポートへ TEL:03-5796-7330 FAX:03-5796-7335 E-mail : [email protected] 在庫照会・ご注文方法に関するお問い合わせは、弊社カスタマーサービスへ TEL:03-5796-7320 FAX:03-5796-7325 E-mail : [email protected] http://www.sigma-aldrich.com/japan SAJ1534 2013.1