Comments
Description
Transcript
⑳ IiI⑳ - 新潟県農業総合研究所
西片・近藤・梅田:豚のコリネパクテリウム病の予防法 5 3 豚のコリネバクテリウム病の予防法 Staphylococcushyicussubsp・hyicusに起因する豚の関節炎(再録) 西片良樹・近藤新二・梅田雅夫 要約幼若豚の関節炎について病因究明を行ったところ,起因菌はS・hyicusと同定された。菌は噛 乳中に受傷した局所の創傷から侵入したものと考えられ,実質臓器からは有意菌および既知ウイルスは分 離されなかった。高い感受性を示した薬剤としては,カナマイシン,エリスロマイシン,オレアンドマイ シン,キタサマイシン,テトラサイクリン,オキシテトラサイクリン,クロラムフェニコールおよびノポ ピオシンなどがあり,ペニシリンの感受性は低かった。主要病変は蹄冠部および四肢の関節部にみられた が各実質臓器に著変はなく,惨出性表皮炎の症状は潔められなかった。豚の鼻腔および耳翼にはS、hyicus が高率に付着していることが知られた。 以上のことから,幼若豚に多発した関節は豚の惨出性表皮炎の起因菌であるS・hyicusによるものであ ることが示唆された。 ⑳ 養豚経営の規模拡大が進み,省力管理が進むにともな い飼養環境が低下し,流行性肺炎・萎縮性鼻炎などの慢・ 性呼吸器病をはじめ膿鰯性疾患が全国的に多発傾向にあ 作成し,その遠沈上消をESK細胞およびCPK細胞に 接種した後,回転培養を行い,7日間観察した。 る。ながでも,ActinomycesCorynebacterium)pyog enesluこ起因すると考えられる馳蹄の異常や関節炎は獲 4.病理学的検査:放血殺した発症豚の病理学的検査お 豚 経 営 上 , 大 き な 障 害 と な っ て い る 1 7 , 1 8 , 1 9 , 2 0 , 2 1 ) ま た , 学的検査は10%ホルマリン液で固定後,薄切し,ヘマト キシリン・エオジン(H・E)染色を施し鏡検した。 本病は食肉衛生の面からも重要視され,.と畜場では重症 豚を鰻毒症として廃棄処分にしているので養豚家にとっ ては経済的損失が大きい。 I i I ⑳ 3.ウイルス学的検査:Nn1およびNoL7の各臓器乳剤を よび病理組織学的検査は常法により実施した。病理組織 5.臨床生化学的検査:発症豚から採血し,赤血球数, 白血球数,ヘマトクリット値および白血球百分比の測定 を行い,また,血清を分離し,血清蛋白分画を行い,グ ルタミン酸オギザロ酢酸(GOT)の測定をユニテスト そこで,本病の予防技術を検討するために感染抗体 (プロテアーゼ抗体)と病豚の発生調査を行ったところ, 分娩房の床面構造が原因で哨乳豚に関節腫大,歩行障害 などをともなう関節疾患が発生し子豚の生産性阻害要因 6.豚体付着S・hyicusの検査:母豚10頭およびそれぞ になっていることについては,既に報告した。②これら, れの子豚96頭,計106頭について,滅菌綿棒で鼻腔および システム(アコム)により実施した。 子豚の関節疾患について病因究明を行ったところ,豚の ・耳翼の内側面を拭い,Devrieseの培地に接種,37℃, 惨出性表皮炎の原因菌であるStaphylococcushyicus subsp・hyicus(以下「S・hyicus」という)の感染が 知られたので,その成緬の概要について報告する。 48時間,好気培養して菌分離を行った。 . 成 績 1.発生状況:当場で飼育している子豚(噛乳豚を含む 材料および方法 1.材料:新潟県畜産試験場のけい養豚で,可検材料と しては蹄冠部,手関節および足関節に腫脹がみられ,破 行を呈している13日から30日令の庸乳豚,4腹の7頭を 供試した。 2.細菌学的検査:発症豚を放血殺し,それぞれの臓器 および関節異常部を直接スタンプ法で,7%羊血液加寒 天培地およびDHL寒天培地に接種し,37℃,18∼48時 間,好気培養および嫌気培謎(スチール・ウール法)を 体重35kgまでの子豚)のうちで患部の腫脹,硬結,熱感, 発赤をともない破行を呈し,手関節炎(写真1),足関 節炎(写真2),肘関節炎,膝関節炎,指骨関節炎,馳 骨関節炎および蹄炎と臨床的に診断されたものは,1982 年。1.9%(21/1,117頭),1983年。3.4%(31/760 頭),1984年。3.4%(48/1,393頭)の発生であった。 このうち,1984年5月から同年10月までの間に発生した 4症例,7頭の発生状況は表1に示すとおりである。症 例1は1腹12頭中の5頭が3日令から手関節および足関 実施し,分離菌ば成書80により同定した。また,薬剤感 節の腫脹を呈したので治療を行い4頭は治癒したが,残 受性検査は一濃度デスク「昭和」(日水)を用いて感受 りの1頭・Nqlは,さらに,廻脹が重度となり破行を呈 性デスク用培地に接種し,37℃,24時間,好気培養後に した21日令の哨乳豚である。症例2は1腹10頭中の2頭 判定した。 で,Nol2は10日令から左右前肢蹄冠部が腫脹し,破行を 新潟畜試研究報告.第7号(1987) 5 4 呈した。また,Nn3は15日令から右前肢蹄部の睡脹およ び左足関節が軽度の腫脹を呈した。いずれも17日令の晴 乳豚である。症例3は1腹9頭中の4頭に発生したうち の3頭で13日令の哨乳豚である。これらは,いずれも7 日令の発生で,NbL4は左右前肢蹄冠部が腫眼し歩行不能, NOL5は右膝関節が腫脹し破行,また,NOL6は右前肢蹄冠 部が腿眼し破行を呈した。症例4は1腹17頭中の1頭 (NOL7)で,28日令に左足関節が腿脹し破行を呈した29 日令の噛乳豚である. 関節異常部は表1に示したとおりであり,これらの噛 乳豚には診出性表皮炎の症状は認められなかった。 2.細菌学的検査成績 (1)菌分離成績:表2に示すとおり,各実質臓器から は有意菌は分離されず,各関節病変部からS、hyicusが 有意に分離され,StaphylocOccusaureus,α一溶血性 連鎖球菌も同時に分離された例もあった。 (2)分離菌の生化学的性状:API20Staphを用いて 実施した性状検査では,表3に示すとおり,プロファイ ルは6516053,6514153,6514151で,いずれも,Shy‐ icusと同定されたが硝酸塩還元,VP,尿素分解の性状 が異っていた。 (8)薬剤感受性検査:NoL7豚の右足関節膿癌,同部位 表 1 発 生 状 況 節 足 蹄冠部 ○ 肢 膝関節' ○ ○ ○ ○ ○ 4 の肉芽および右内腸骨リンパ節から分離されたShy‐ icusの3株を用いた,一濃度デスク法による成績は表4 に示すとおりである。感受性の高い薬剤は,アミノグリ コシド系ではカナマイシン,マクロライド系ではエリス ロマイシン,オレアンドマイシン,キタサマイシン,テ トラサイクリン系ではテトラサイクリン,オキシテトラ サイクリン,クロラムフェニコール系ではクロラムフェ ニコール,その他,ノポピオシンなどであり,感受性の 低い薬剤はペニシリンであった。 後 関○ 節 手 関○ 肢 ○○○ 11 71 71 31 31 32 9 2 3 30 15 1 77782 2 1234567 1 前一瞬 症例Na・個体N、発生日令殺日令 関節異常部位 3.ヴイルス学的検査成織:NoL1豚の脳,心,肺,肝, 牌および腎ならびにNol7豚の腎および糖巣からウイルス 分離を賦みたが表5に示すとおり既知のウイルスは分離 されなかった。 4.病理学的検査成績:関節および四肢蹄部における病 理学的所見は表6に示すとおりである。 (1)病理解剖学的検査成鎖:各検体の実質臓器には著 変は鰹められず,主要病変は蹄冠部および四肢の関節部 にみられ,その断面では周囲結合織の増生および関節の §=醒垂J繭■…竺耀霊轟堂謹上聖鼎…ー=・‘』蓋壷華蓉 霊 雷 表 2 菌 分 雛 壷 : 当 Nnl Nu2 .Na3 成 積 Nq4 Nq5 Nn6 Nq7 心 肺 S・hyicus+ S・hyicus+ ー 肝 ー 一 腎 十二指腸 E・coli+ 直 腸 E・cOlioo 手 関 節 瀧職e;+ 足 関 節 :釧鱒十 股 関 節 ● 膝 関 節 ● 前肢蹄冠部 ● E・coli。。 E・colioo E・coli⑥。 E,colioc E・coIioo 一 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● S・hyiuso◎ ● S,hyicus++bEcoli S・hyicus-H弓E,coli StaPIwiococc瞳.sp Bacillus朴 後肢蹄冠部 ● 鮫下リンパ節 ● 蹴径リンパ節 ● ● 腸骨リンパ節 ● ● sta哨溌僻季p α、瀧勝二緋 S,町icus+ ● α・溶血strepoo S、hyicus舟 S・aureus舟。 .α・溶血strepL舟 α溶血strep・升 S・hyicus÷ S・aureus弁 ● S・hyicuso。 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● S・aureus÷. 1 h S・hyicus.:Staphylococcushyicussubsphyicus S・aureus:Staphylococcusaureus・ strep:Streptococcus. E・coli:E ● E・Colioo E、coli+ 園ヰ・筒顕・鼓田罷鞠su与染魁遵Ⅷ︾qト灘S蝋罫群 牌 ● S・hyicusc◎ +:接種培地上に形成されたコロニー数く10 什 : ” 1 0 ∼ 3 0 - H + : ” 3 1 ∼ 1 0 0 . . : 〃 1 0 0 < :nonetr蟹mtm⑧nt 、、 5 6 . 新潟畜試研究報告 第7号(1987) 表 3 分 離 菌 の 生化学的性状 項 グラム染色 カタラーゼ 目 Na2石股関節由来株 グラム隅性球菌 恥4左後肢蹄ラ茜部由来株 グラム隅性球園 NqL7右足関節由来株 グラム隅性球菌 十 十 十 アルギニン加水分解 VP 果 糟 +++ アルカリフオスファターゼ 尿素分解 炭水化物分解 ブドウ糟 マンノース ++ 変芽穏 乳 糟 ・ トレハロース. F一一十十十一十十十一十十一一・一一一十 コアグラーゼ 硝酸塩壁ラ昔 F一一十十十十十十十一十十 OF F一十十一十十 オキシターゼ マンニッ.ト キシリトール. メリピオース ラフィノース ー キシロース 一 白艇i a−メチルグリコシド N−アセチルグリコサミン APIプロファイル + 十 十 + 一 、 + 6514151 6514153 6516053 表4分離菌の薬剤感受性検査成積 名 ペニシリン系 薬 剤 名 ペンジルペニシリン PCG 質 マクロライド系 キタサマイシン スピラマイシン タイロシン ペプタイド系 コリスチン ボリミキシンB クロラムフェニコール系 クロラムフェニコール TC OTC CL PL 計什 ノボピオシン 一 スルファジメトキシン ニトロフラン系 フラゾリドン ニトロフラントイン そ の 他 ナリジキシックアシド * 123 サルファ剤 :Nn7右足関節腫鰯由来. S ・hyicus ” :、NOL7右足関節肉芽由来 :NoL7右腸骨リンパ節由来 A〃 FZ NF **寺什:きわめて感受性 十:かなり感受性 十:やや感受性ミ ー:耐性 雑一十一十十一弁 合成抗菌剤 そ の 他 升針群寺井 物 エリスロマイシン オレアンドマイシン 等帯苓 性 テトラサイクリン オキシテトラサイクリン 皿皿画却癌 テトラサイクリン系 カナマイシン フラジオマイシン 帯計器#十 抗 十升十 ジヒドロストレプトマイシン アミノグリコシド系 ︾皿皿 AB−PC アンピシリン 3’十+一寺斗主帯堂排特帯十十 群 区分 西片・近藤・梅田:豚のコリネパクテリウム病の予防法 5 7 表6病理学的検査成積 表5ウイルス分離成積 眼 溺 挫創 肉芽形成 腫 脹 浮 腿 項目 P 2 3 ・印:nonetreatment 45 6 節節部節部節部部部節部部節 関関緬関蝿関蝿蝿蝿関蝿蝿関 1 手足恋.股錐手織識識足燕錘足 個 体N、異常部位 2 1 6 3 6 38 (個/鋤) 17,000 0 1 . 7 7 3 . 6 2 2 . 3 6合2 ●3 。8 ● i i l 0 0 白血球数 8 ヘマトクリット(形) 3 ●●●●●。●●●● 赤血球数(万個/nmm) ○○ ○○○○ ○○ ○○○○ ○○ ○○. 血液性状検査成菰 弱詑 6 4伽00392165 項百一廻竺 ○○ ○.○ ○ ○ ○ ○○ ○ ○○○○ 7 表7 ○○ 2 . 5 4 5 6 7 5 4 0 4 5 3 4 3 6 1,047 34 27.5 30 38 1 1 , 1 0 0 8,700 6,200 25,500 0 0 0 0 0 . 5 0 . 5 0 . 5 2 . 5 7 . 0 1 . 0 5 . 9 4 7 . 0 6 7 . 5 3 1 . 5 6 3 . 8 4 6 . 5 2 2 . 0 6 5 . 0 2 6 . 6 3 . 0 2 . 0 ・3.7 3 . 5 0 − . 5.8 6.0 5.6 6 . 1 5 . 7 6.1 5 . 4 36.7 22.7 37.9 4 3 . 5 3 3 . 7 50.0 3 5 . 6 36.3 44.7 32.7 2 5 . 4 3 8 . 6 23.6 4 0 . 7 17.9 20.4 16.4 1 8 . 4 1 7 . 8 16.9 1 7 . 9 9.1 12.1 13.0 1 2 . 7 9 . 9 9 , 5 5 . 7 0 . 5 1 1 . 0 0 0.55 0.58 110 0.29 6 2 0.61 90 0.77 150 8 5 9 0 143 新潟畜試研究報告第7号(1987) 5 8 う,ならびに,関節繊毛の黄色化が認められた。重症例 では黄白色チーズ様物の膿璃形成もみられた。 (2)病理組織学的検査成織:蹄冠部では真皮の増生, 浮腫がみられ,膿鰯形成も散見され,関節部においても 同様の肉芽形成をともなう結合織の増生を認め,膿鰯形 成もみられ,化膿性関節炎の像を示し,重症例では骨髄 汚染に起因する化膿菌感染の発症が主なものとされてい る。今回の例は外傷からの局所感染によるものと考え, A c t i n o m y c e s p y o g e n e s , S t r e p t o c O c c u s s p p ・ の 感 染 を疑い検査したが否定されたので病因検索を行ったとこ ろ異常部位からS・hyiCusが有意に分離された。 S ・ h y i c u s は 1 9 7 8 年 , D e v r i e s 2 O に よ り 豚 の 惨 出 性 表 へ波及している例もみられた。 皮炎の原因菌とみなされて以来,多くの国において発生 5.臨床生化学的検査成績:表7に示すとおり白血球の 増加,ヘモグラムでは好中球の高いものがみられ,血清 がみられ4,①,わが国においても多くの報告がある9,]4, 典また,常在菌として豚の体表,牛の乳房およびニワ 6.s、hyicusの豚体付着状況:表8に示すとおり母豚 トリの体表からも分離されている1‘3.12,15)。しかし,S・ hyicusが分離される疾病で豚の惨出性表皮炎以外の報告 は少ない。Phi11ipsら5)は腐敗性多発性関節炎を呈し は鼻腔から10頭中8頭(80%),耳翼から10頭中7頭 た豚の大腿股関節および肩関節からS・hyicusを純培養 (70%),また,子豚は鼻腔から96頭中79頭(82.3%), 状に分離しその病原だろうとしている。野田のは生後2 表8健康豚からのShyicus分離状況 ∼3日令の新生豚の手関節炎からS、hyicusを分離し, 噛乳時に頻発する手根部の擦過傷から菌の侵入の可能性 蛋白分画においてはα一グロブリンの増加,アルブミン およびA/G比の低下がみられた。 を指摘している。乾らJODは幼豚の関節は蹄の創傷に化膿 菌の増殖が加わって蹄の内部組織における化膿性炎を生 吐 慢 じ,その後,上行性に炎症が広がる過程で諸関節の化膿 I j / 耐 1 ' J 囚/1m 性壊死性炎を発生するとしている。 今回の噛乳豚の関節炎は,早いもので生後3日令から 関節の腫脹が潔められ,破行を呈する感染の初期には蹄 冠部が腫脹し,病理組織学的にも真皮の増生,浮腫がみ られ,皮膚のひ薄な哨乳豚では豚房の床面と接する表皮 の傷口から菌が侵入したものと考えられ,さらに,日令 が進むにつれて手関節,足関節などの表皮感染から,ま たは,上行性に多発性関節炎が発生し,ついには,骨髄 炎にまで発展したものと考えられた。 これら,関節炎を呈した子豚は歩行困難のため噛乳不 足により発育不良となった。血液性状検査においても, アルブミンおよびA/G比の低下など低栄養性の変化が *印の子豚は,Bordetellabronchiseptica予 防のために,.O日令,7日令,14日令,21日令及 び28日令に硫酸カナマイシンを左右の鼻腔内に 0.85趣(100,W”)をそれぞれ噴霧した。 耳翼から96頭中88頭(91.7%)と,それぞれ高率に分離 された。子豚の生後日令は3日令から29日令までである が,日令による差はなかった。なお,硫酸カナマイシン を鼻腔噴霧した4腹の子豚のうち,腹NoL6の子豚から菌 は分離されなかったが他の3腹の子豚からは高率に分離 された。 考 察 家畜の分野における関節炎は外傷性あるいは感染性原 因によるとされている。感染性の関節炎としては,豚で は豚丹毒,マイコプラズマ,ヘモフィールス,パスツレ ラ,プラセラなどの細菌感染症,または,幼若豚の厨帯 みられ,このため菌の侵入を群す結果をまねいたものと 考えられた。 S・hyicusの菌体側の病原性を示す物質としては,菌 体が産生するフィプリジン,ゼラチナーゼおよびプロテ アーゼが注目されており,なかでも,蛋白分解酵素であ るプロテアーゼ産生の高い株が発見されており,菌の病 原因子として検討されている'31. 関節炎を呈した子豚は噛乳ができなくなるため淘汰の 対象となり経済的損失が大きい。Shyicusは豚舎内に 常在化し,豚体に高率に付著していることが認められた ことから菌の侵入を防止するためには豚体が受傷しない ような豚房の配慮が必要である。とくに,子豚が哨乳時 に豚房の床面で表皮に受傷しないように分娩房の床面柵 造を改善するとともに,豚舎伽豚体消毒を励行し,浦潔 な敷料を十分に使用することが感染防止には有効と考え られる。また,筆者らは関節腫脹を呈した感染初期に有 5 9 西片・近藤・梅田:豚のコリネパクテリウム病の予防法 効な薬剤(表4を参照)の注射と患部へ消炎剤の塗布は 病性の進行を阻止する成果を得ているので本病の治療法 18)原文男:Bun・AzabuUniv・Vet・Med、1 として応用価値のあるものと考えられる。 19)鈴木達郎,金子晋,斉藤調ほか:日獣会誌,26, 稿を終えるにあたり,ご助言,ご指導を賜った農林水 産省家畜衛生試験場北陸支場,竹内正太郎第3研究室長, ならびに,病因の検索に協力をいただいた新潟県中央家 畜保健衛生所,病性鑑定課の方々に深謝します。 (2)187∼202(1980) 188∼192(1973) 20)東量三:畜産の研究,24,1212∼1216,1300∼1302 ( 1 9 7 0 ) 21)東通三,竹内正太郎:豚病学,365∼375,近代出 版,東京(1977) 引用文献 1)Devries,L、A、,:Am.』・Vet,Bes.,38, 787∼792(1977) etal.:1,t.』・Syst・Bacterio1.,28,482∼ 490(1W8) 3)DevrieS,L,A、,Oeding,P.,J・appl. B a c t . , 3 9 , 1 9 7 ∼ 2 0 7 ( 1 9 7 5 ) 4)Hunter,A,,:Brit・Vet.』.,126,225∼ 2 2 9 ( 1 9 7 0 ) W, W、E、,:Am E、,King,R、E、,Kloos, J・Vet,Res,41,274∼276 ( 1 9 8 0 ) 6)Underdah1,N・嵐,Grace,0.,.Twiehaus, M・』.,Am.』・Vet・Res、026,617∼624 ( 1 9 6 5 ) 7)野田一臣:家畜衛生研修会妃録(病性鑑定:細菌部 門),第8号,47∼48(1984) 8)坂崎利一(訳):医学細菌同定の手ぴき,第2版, 62∼261,近代出版,東京(1979) 9)田原健,長谷学,手塚博愛ほか:第93回日本獣医学 会講演要旨,115(1982) 10)儲純夫,成田実,石川義春:家畜衛試研究報告,81, 20 28(1981) 11)Reddy,C,A,,C◎mell,C・P.,Fraga, A,M、,:Int.』・SySt.Bact.,:32−4. 419∼429(1982) 12)竹内正太郎,小林良則,両角徹雄ほか:第99回日本 獣医学会繍演要旨,152(1985) 13)竹内正太郎,小林良則,中川遁夫ほか:第97回日本 獣医学会蔚演要旨,135(1984) 14)中林大,尾田進,本間穂澗ほか:昭和56年度家畜病 性鑑定年報(病性鑑定課),27∼32(1982) 15)Devries,L,A、,Derycke,』.,:ReS・Vet・ Science,26,356∼358(1979) 16)矢口長彦,小林芳次ほか:第23回全国家畜保健衛生 業綴発表会鱗演要旨,25(1982) 17)平棟孝志,東量三,柴田璽孝ほか:日獣会誌,15, 111∼113(1962) 究報告,6,141∼153(1985) 申 2)Devries,1,.A.,Hajek,V,,Oeding,P., 5)Phllips 22)西片良樹,近藤新二,原島昇笠ほか:新潟県畜試研 6 0 新潟畜試研究報告第7号(1987) Arthritisofyoungpigscausedby S t a P h l o c o c c u s h y i c u s s u b s p ・ h y i c u s . (recordedanew) YoshikiNISHIKATA,ShinjiKONDOH,MasaOUMEDA Summary Thepresentstudywasundertakentodeterminethecauseofinfantilearthritisin、8wine. ご ThecausativeorganismwasidentifiedasStaphylococcushyicussubsp・hyicus,Itwa8 estimatedthattheorganismi、vadesswinebodiesthroughthelocaltraumasreceivedduring sUckling,forneithersignificantbacterianoralready・knownviruseswereisolatedfrom theparenchymalorgans、Theorganismshowedhighsensi-tivitytokanamycin,erythromycin, oleandomycin,kitasamycin,tetracycline,oxytetracycline,chloramphenicol,andnovobiocin whilelowsensitivitytopenicilin・Lesionswerelocatedmainlyinthecoronetsandappendicularjoints,andnoremark-ableChangewasobservedinanyparenchymalOrgan・Anysignof exudativegpidermiswasnotrecognized,either・ColonizationofS、hyicuswasobservedin highdensityinthenasalcavityandauricula・ Fromtheseobservation,itwaSsuggestedthatthearthritisfrequentlyobservedinyounger pigswascausedbyS・hyicuswhichi8thecausativeoranismofexudativeepidermitis.