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STEMCELL Technologies 社 培地製品カタログ
S p e c i a l i z e d C e ll Culture Media 2016-2017 APPLICATION CATALOG A Global Biotechnology Marketing Company STEMCELL Technologies 社 培地製品 • Spec i al i z ed M e d i a f o r H e m a t o p o i e t i c , M e s e n c h y m a l a n d N eur al St e m C e l l s • H y br i dom a G e n e r a t i o n a n d Tr a n s f e c t e d C e l l S e l e ct io n Contents 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 神経幹細胞 研究用培地 MethoCult- ヒト細胞用コロニーアッセイ培地.................. 4 Neurospheres- マウス・ラット凍結神経幹細胞.............. 22 MethoCult- ヒト細胞用スターターキット ...................... 7 NeuroFluor CDr3 神経前駆細胞検出用蛍光プローブ........ 22 MethoCult Express- NeuroCult- マウス神経幹細胞培養培地........................ 23 7日間での総コロニー数カウント用培地.......................... 8 MethoCult- マウス細胞用コロニーアッセイ培地............... 9 MethoCult- ラット細胞用コロニーアッセイ培地 .............. 10 MethoCult用サポート試薬・器具 .......................... 10 NeuroCult- ラット神経幹細胞培養培地........................ 24 NeuroCult- ヒト神経幹細胞培養培地.......................... 25 NeuroCult NCFC Assay Kit .......................... 26 NeuroCult Chemical Dissociation Kit....................... 27 NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit..................... 27 コロニー判定自動化装置 NeuroCult SM Neuronal Supplement.......................28 STEMvisionTMコロニー判定自動化装置......................... 11 造血コロニーアッセイ用コラーゲン培地 MegaCult-C ヒト巨核球前駆細胞アッセイキット............. 12 MegaCult-C ヒト染色キット .......................... 13 MegaCult-C マウス巨核球前駆細胞アッセイキット.......... 14 MegaCult用サポート試薬 .......................... 14 造血前駆細胞 長期培養培地 MyeloCult ヒト＆マウス長期培養用培地....................... 14 造血幹/前駆細胞増殖用 無血清培地 StemSpan Serum Free Expansion Media................. 16 神経生理学用 無血清培地 BrainPhysTM ..........................29 上皮細胞 研究用培地 EpiCult- 乳腺上皮細胞培養培地 .......................... 30 MammoCult- Mammosphere アッセイ用培地 ............. 31 ProstaCult マウス前立腺上皮前駆細胞の増殖用培地....... 31 PneumaCult- Ex&ALI ヒト気管支上皮細胞用培地.......... 32 IntestiCult マウス腸管オルガノイド形成・維持用培地....... 33 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした細胞 のための選択＆クローニング培地 ClonaCell-HY ハイブリドーマクローニングキット............ 34 ALDH活性に基づく幹細胞/前駆細胞同定キット ClonaCell-TCS トランスフェクトセルクローニング培地..... 35 ALDEFLUOR- ALDH活性に基づく幹細胞/ .......................... 17 前駆細胞同定キット ClonaCell-FLEX クローニング向けメチルセルロース........ 37 間葉系幹細胞 研究用培地 マウス間葉系幹細胞培養用関連製品 .......................... 18 （注）ヒト用製品はES/iPS&間葉系幹細胞研究用試薬カタログに掲載 ES/iPS細胞 研究用培地 ES-Cult マウスES/iPS細胞の維持培養......................... 19 ES-Cult- マウスES/iPS細胞から造血系細胞への分化....... 20 ClonaCell-CHO CHO細胞用クローニング培地............... 36 エリスロポエチン測定キット EPO ELISA .......................... 37 EPO イムノアフィニティー精製用プレート...................... 37 価格表 価格表 .......................... 38 ES-Cult- マウスES/iPS細胞から内皮系細胞への分化....... 20 （注）ヒト用製品はES/iPS&間葉系幹細胞研究用試薬カタログに 掲載 研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・ 血管内皮細胞 研究用培地 CFU-HILLアッセイ用培地 （※）本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。 .......................... 21 食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 STEMCELL Technologies 社の MethoCult 製品は、Terry Fox Laboratory の研究者により開発された製法に従って、 造血系細胞の成育が最適になるように調製されたメチルセルロースベースの造血前駆細胞コロニーアッセイ用培地で す。メチルセルロースは、培地を固まらせずに粘稠性を増大させる性質があり、寒天のような半固体状サポートシステ ムよりも赤血球系コロニーをより良く成長させるとともに最適な顆粒球コロニーを形成させるため、ゲル化剤として広 く用いられています。 MethoCult 製品のすべては、Terry Fox Laboratory の規格に準拠した厳重な品質管理のもとに調製されており、ロッ ト間の品質差がありません。それぞれ目的別の製品がありますので用途に合わせてご利用下さい。 ① ② ③ ④ 1. 細胞の準備 2. MethoCult に細胞を加えボルテックス 3. Blue-End needle とシリンジを用いてディッシュに分注し、37℃、5% CO2 下で湿度を保って培養 （ヒト 14-16 日間、マウス 7-14 日間） 4. コロニーの観察およびカウント （コロニーをピックアップして、染色、PCR、染色体解析などを行うこともできます） ▶ MethoCult - ヒト細胞用コロニーアッセイ培地 製品 ヒト造血前駆細胞コロニー測定用の培地です。 使用量 通常完全培地及び EPO 抜き培地においては、Culture Dish 1 枚当たり MethoCult 1mL に細胞溶液 0.1mL を加え使用 します。 その他不完全培地においては、添加成分を液状メディウムに溶解し、所定の割合で混合したものを Culture Dish 1 枚当 たり 1mL 使用します。例えば、MethoCult H4230 を使用する場合は、Culture Dish 1 枚当たり MethoCult H4230 の 0.8mL に液状培地中 CSF 及び EPO の 0.2mL を混合したものに細胞溶液 0.1mL を加えて使用します。 保存法 -20℃に保存、凍結融解を繰り返さないで下さい。 4 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 ヒト MethoCult アプリケーション別 培地選択 組成は P.6、商品コードは P.7 を参照 アプリケーション 商品名 • BM、PB、MPB、CB、分離した細胞（例・CD34+ 細胞）を用いた一般的 • MethoCult H4435 Enriched な造血コロニーアッセイ • MethoCult H4034 Optimum • CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-G、CFU-M、CFU-GEMM が観察可能 • MethoCult H4434 Classic • BM、PB、MPB、CB、分離した細胞（例・CD34+ 細胞）を用いた造血コロニー • MethoCult H4535 Enriched without EPO アッセイ • MethoCult H4035 Optimum without EPO • CFU-GM、CFU-G、CFU-M が観察可能 • CB を用いた短時間での造血コロニーアッセイ（7 日間で観察可能） • MethoCult H4534 Classic without EPO • MethoCult Express → P.8 参照 • Progenitor の総コロニー数の観察に最適化 + • BM、PB、MPB、CB、分離した細胞（例・CD34 細胞）を用いた、無血 清培地での造血コロニーアッセイ向け • MethoCult SF H4436 • CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-G、CFU-M、CFU-GEMM が観察可能 • BM、PB、MPB、CB、分離した細胞（例・CD34+ 細胞）を用いた、無血 清培地での造血コロニーアッセイ向け • MethoCult SF H4536 • CFU-GM、CFU-G、CFU-M が観察可能 • BM、PB などを用いた条件培地による造血コロニーアッセイ • CFU-E、BFU-E、CFU-GM、CFU-G、CFU-M、CFU-GEMM が観察可能 • MethoCult H4431 • MethoCult H4531 あるいは H4533 を用いた EPO 非依存性の erythroid • MethoCult H4433 progenitor assay のポジティブコントロールとしても使用可能 • CSF の代わりに条件培地を用いた造血コロニーアッセイにおける、EPO • MethoCult H4531 非依存性の erythroid progenitor の観察 • 分離した細胞を用いた造血コロニーアッセイ • ヒト LTC-IC アッセイ • MethoCult H4533 • MethoCult H4435 Enriched • MethoCult H4435 Enriched without EPO • MethoCult H4435 Enriched • MethoCult H4435 Enriched • MethoCult H4034 Optimum • サル 造血コロニーアッセイ用培地 • MethoCult H4434 Classic • MethoCult H4535 Enriched without EPO • MethoCult H4035 Optimum without EPO • 成長因子など、ユーザーご自身で添加・調製可能な MethoCult • 血清含有培地、EPO 含有培地、無血清培地を販売 • MethoCult のベースとなる培地 • ユーザーご自身で成分を添加・調製可能 • MethoCult H4534 Classic without EPO • MethoCult H4230 • MethoCult H4230 (with EPO) • MethoCult SF H4236 (serum free) • MethoCult H4100 BM-Bone Marrow；PB-Peripheral Blood；MPB-Mobilized Peripheral Blood；CB-Cord Blood 5 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 ヒト MethoCult コンポーネントの有無 ヒト MethoCult® H4034 Optimum H4035 Optimum without EPO H4434 Classic H4534 Classic without EPO H4435 Enriched H4535 Enriched without EPO H4436 H4536 H4431 H4531 H4433 H4533 H4100 H4236 H4330 H4230 商品コード MC FBS BSA コンポーネント INSULIN + 2-ME TRANSFERRIN EPO ST-04034V ST-04044V ST-04044 ST-04064 ST-04035 ST-04045 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ST-04434 ST-04444 ST-04464 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ST-04534 ST-04544 ST-04464 ST-04435 ST-04445 ST-04535 ST-04545 ST-04436 ST-04536 ST-04431 ST-04531 ST-04433 ST-04533 ST-04100 ST-04236 ST-04330 ST-04230 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● 成長因子 SCF,GM-CSF,IL-3 その他 ● G-CSF ● G-CSF ● ● ● ● ● ● ● IL-6,G-CSF ● IL-6,G-CSF ● ● IL-6,G-CSF IL-6,G-CSF Agar-LCM Agar-LCM PHA-LCM PHA-LCM ● MC=Methylcellulose;2-ME=Mercaptoethanol;Agar-LCM=Agar-Leukocyte Conditioned Medium; PHA-LCM=Phytohemagglutinin-Leukocyte Conditioned Medium ヒト MethoCult CFC アッセイに使用する細胞量（35mm ディッシュ） 細胞の種類 Bone Marrow - Ammonium Chloride Treated Bone Marrow - Mononuclear Cells* Cord Blood - Mononuclear Cells* Normal Peripheral Blood - Mononuclear Cells* Mobilized Peripheral Blood Progenitor (e.g. CD34+) Cell Enriched (BM,CB,MPB) 細胞数（35mm） 2 x 104 - 1 x 105 1 - 5 x 104 5 x 103 - 2 x 104 1 - 2 x 105 1 - 5 x 104 0.5 - 2 x 103 *Mononuclear cells (MNCs) isolated by density-based cell separation (light density, 1.077 g/mL) ヒト正常細胞における標準的な Progenitor 数 細胞の種類 Bone Marrow - Ammonium Chloride Treated per 105 cells (n=50) Bone Marrow - Mononuclear Cells* per 105 cells (n=17) Bone Marrow - CD34+ Cell Enriched per 103 cells (n=15) Cord Blood - Mononuclear Cells* per 105 cells (n=16) Normal Peripheral Blood - Mononuclear Cells* per 105 cells (n=30) Mobilized Peripheral Blood per 105 cells (n=19) CFU-E 31(1-78) 188(1-506) 30(1-59) 9(1-48) 2(1-10) 8(1-27) PROGENITOR の種類 BFU-E CFU-GM 115(1-251) 100(30-170) 175(1-477) 408(1-990) 34(1-74) 54(7-101) 104(1-310) 115(1-303) 30(1-62) 9(1-18) 121(1-257) 111(1-257) CFU-GEMM 5(1-15) 10(1-30) 2(1-5) 25(1-59) 2(1-5) 23(1-67) CFC numbers were determined using MethoCult® H4434 Classic. Values are expressed as means; the range is defined by means ± 2 standard deviations. *Mononuclear cells (MNCs) isolated by density-based cell separation (light density, 1.077 g/mL) 6 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 商品コード ST-04034V ST-04035 ST-04044 ST-04044V ST-04045 ST-04100 ST-04230 ST-04236 ST-04330 ST-04431 ST-04433 ST-04434 ST-04435 ST-04436 ST-04444 ST-04445 ST-04531 ST-04533 ST-04534 ST-04535 ST-04536 ST-04541 ST-04544 ST-04545 商品名 MethoCult H4034 Optimum MethoCult H4035 Optimum without EPO MethoCult H4034 Optimum Special MethoCult H4034 Optimum (4 mL/tube) MethoCult H4035 Optimum without EPO MethoCult H4100 MethoCult H4230 MethoCult SF BIT H4236 MethoCult H4330 MethoCult H4431 MethoCult H4433 MethoCult H4434 Classic MethoCult H4435 Enriched MethoCult SF BIT H4436 MethoCult H4434 Classic MethoCult H4435 Enriched MethoCult H4531 MethoCult H4533 MethoCult H4534 Classic without EPO MethoCult H4535 Enriched without EPO MethoCult SF BIT H4536 MethoCult H4531 MethoCult H4534 Classic without EPO MethoCult H4535 Enriched without EPO 梱包単位 3 mL x 4 mL x 3 mL x 3 mL x 3 mL x 3 mL x 3 mL x 3 mL x 100 mL 100 mL 24 tubes 12 tubes 24 tubes 40 mL 80 mL 80 mL 90 mL 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 24 tubes 24 tubes 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 100 mL 24 tubes 24 tubes 24 tubes ▶ MethoCult - ヒト細胞用スターターキット 製品 メチルセルロースをベースとした培地 MethoCult を用いた造血幹細胞コロニーアッセイを行うための試薬・器具類を全て 取り揃えたスターターキットです。造血幹細胞コロニーアッセイを初めて行う方、 或いは、 検体数が少ない方に最適です。 キッ ト中の MethoCult の種類の違いにより、種々のキットをご用意しております。 コンポーネント • MethoCult（3mL x 24 本） • 細胞洗浄用 2％ FBS in Iscove's MDM（100mL x 6 本） • Plating syringes（30 本） • RBC lysing 用 Ammonium chloride solution （100mL) • Blunt-end needles (30 本） • Technical Manual • Assay dishes（70 枚） • Colony Atlas • Scoring dishes（5 枚） 商品コード ST-04064 ST-04464 ST-04564 商品名 Starter Kit MethoCult H4034 Optimum Starter Kit MethoCult H4434 Classic Starter Kit MethoCult H4534 Classic without EPO 梱包単位 1 kit 1 kit 1 kit 7 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 ▶ MethoCult Express - 7 日間での総コロニー数カウント用培地 製品 従来の MethoCult を用いた造血コロニーアッセイでは結果を得るために 14 日間必要でしたが、MethoCult Express を用いることにより 7 日間でコロニー総数をカウントすることができるようになります。コロニーを形成する細胞の増 殖を促進する培地組成となっています。 特長 • 移植片の品質を 7 日間で評価可能 • Progenitor の増殖とコロニー形成を促進するために最適化された組成 • 培養を 14-16 日続けることで Colony lineage の同定も可能 臍帯血移植における CFC アッセイの重要性 ▶ 移植片におけるトータルの colony-forming cell (CFC) 数や colony-forming unit-granulocyte,macrophage (CFUGM) は、好中球、血小板移植や移植後の生着のよい指標になります。特に臍帯血 (CB) 移植においては、臍帯血ユニッ ト解凍後のトータル CFC 数が他のパラメーター（凍結保存前の CFC 数やトータル有核細胞数、CD34 陽性細胞数など） よりも回復と生着に強く相関があることが分かっております。移植片の前駆細胞含有量を移植前に評価することは、以 下のような理由から臍帯血移植に非常に重要と考えられています。 • 前駆細胞含有量は臍帯血ユニット間で大きな違いがある • 移植に有効な細胞数は限られている • ex vivo での操作（凍結保存や解凍を含む）による様々な影響 7 日間で CFC アッセイが行えるメリット ▶ MethoCult Express を使用した 7 日間の CFC アッセイにより、臍帯血バンクや移植施設は保存や移植に最適な臍帯血 ユニットを従来の半分の時間で選択することが可能となります。コロニーのタイプを識別する必要がなく、トータルの CFC 数を測定するのであれば、コロニーが完全に成熟し形状学的に判別することを待つ必要がありません。 A) Da y 7, 2X objective B ) Da y 14, 2X objective Colonies derived from cord blood progenitors in MethoCult® Express at (A) day 7 and (B) day 14 with a 2X objective lens;at (C) day 7 and (D) day 14 with a 4X objective lens. C) Da y 7, 4X objective 商品コード ST-04437 ST-04447 MethoCult Express MethoCult Express D) Da y 14, 4X objective 商品名 梱包単位 100 mL 3 mL x 24 tubes 8 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 ▶ MethoCult - マウス細胞用コロニーアッセイ培地 製品 マウス造血前駆細胞コロニー測定用の培地です。 マウス MethoCult アプリケーション別培地選択 アプリケーション • 骨髄、脾臓、胎仔肝臓、分離した細胞（例・lineage-、SCA1+、c-KIT+）を用いた造血コロニーアッセイ • BFU-E、CFU-GM、CFU-G、CFU-M、CFU-GEMM が観察可能 • 骨髄、脾臓、胎仔肝臓、分離した細胞（例・lineage-、SCA1+、c-KIT+）を用いた造血コロニーアッセイ • CFU-GM、CFU-G、CFU-M が観察可能 商品名 • MethoCult GF M3434 • MethoCult GF M3534 • 骨髄などから BFU-E の観察に適した培地 • MethoCult SF M3436（serum free） • 骨髄などから CFU-pre-B の観察に適した培地 • LTC-IC アッセイから primitive hematopoietic progenitor の検出 • CFU-E、late BFU-E の検出向け • MethoCult M3630 • MethoCult GF M3434 • MethoCult GF M3334 • ユーザーご自身で成長因子を添加し、他の造血幹細胞を形成させることも可能 • MethoCult M3231 • 成長因子など、ユーザーご自身で添加・調製可能な MethoCult • MethoCult M3234 • 血清含有培地、EPO 含有培地、無血清培地を販売 • MethoCult SF M3236 (serum free) • MethoCult のベースとなる培地 • MethoCult M3134 • ユーザーご自身で成分を添加・調製可能 マウス MethoCult コンポーネントの有無 コンポーネント マウス METHOCULT GF M3434 GF M3534 M3630 SF M3236 SF M3436 GF M3334 M3234 M3231 M3134 商品コード ST-03434 ST-03444 ST-03534 ST-03630 ST-03236 ST-03436 ST-03334 ST-03234 ST-03231 ST-03134 MC FBS BSA0 INSULIN+ TRANSFERRIN ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● 2-ME 成長因子 EPO SCF, IL-6, IL-3 ● ● ● ● ● その他 IL-7 ● MC=Methylcellulose; 2-ME=Mercaptoethanol マウス MethoCult CFC アッセイに使用する細胞量（35mm ディッシュ） 細胞の種類 Mouse Bone Marrow Mouse Bone Marrow Mouse Bone Marrow Adult Spleen and Peripheral Blood Fetal Liver (day 12-15 pc) *LinYolk sac Mouse Bone Marrow CFC アッセイ CFU-E, Mature BFU-E BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM CFU-pre-B BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM BFU-E, CFU-GM, CFU-GEMM BFU-E 使用する METHOCULT M3334 M3434 M3630 M3434 M3434 M3434 M3434 M3436 細胞数（35mm ディッシュ） 2 x 105 2 x 104 2 x 104 2 x 105 2 x 104 2 x 103 5 x 104 3 - 8 x 104 Notes: 1.The plation concentrations were established using C57BL/6 strains. For other strains, transgenic or treated mice, plate cells at 2-3 cell densities to establish optimal plating concentrations. 2.Cell purification steps are generally not necessary. RBCs can be removed from spleen and peripheral blood samples by ammonium chloride lysis (ST-07800/07850). *Lin- cells from mouse bone marrow and fetal liver are isolated using StemSep®(ST-13056) or EasySep®(ST-19756) progenitor cell enrichment kits. 9 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用メチルセルロース培地 マウス正常骨髄細胞における標準的な Progenitor 数 METHOCULT® MEDIUM PROGENITOR CFU-E Mature BFU-E BFU-E CFU-GEMM CFU-GM CFU-Pre-B BFU-E M3334 M3434 M3630 M3436 CFC PER 106 BONE MARROW CELLS 1700 ± 400 250 ± 60 400 ± 130 170 ± 70 3200 ± 800 1050 ± 30 720 ± 460 Assays performed using 6-12 week old C57BL/6 mice. Values are expressed as means; the range is defined by mean ± 2 standard deviations. 商品コード ST-03134 ST-03231 ST-03234 ST-03236 ST-03334 ST-03434 ST-03436 ST-03444 ST-03534 ST-03630 MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult MethoCult 商品名 M3134 M3231 M3234 SF M3236 M3334 GF M3434 SF M3436 GF M3434 GF M3534 M3630 梱包単位 40 mL 80 mL 80 mL 80 mL 90 mL 100 mL 100 mL 3 mL x 24 tubes 100 mL 100 mL ▶ MethoCult - ラット細胞用コロニーアッセイ培地 製品 ラット造血前駆細胞コロニー測定用の培地です。CFU-GM、CFU-G、CFU-M の各種コロニーが観察可能です。 アプリケーション • ラットを用いた in vitro での薬剤安全性の評価 • トランスジェニックラットにおける造血発生の評価 • ラット細胞への遺伝子導入の最適化 商品コード ST-03774 商品名 MethoCult GF R3774 梱包単位 100 mL ▶ MethoCult 用サポート試薬・器具 商品コード ST-01738 ST-01739 ST-02698 ST-07060 ST-07700 ST-07800 ST-07850 ST-07806 ST-07906 ST-27000 ST-27100 ST-27150 ST-27301 ST-27302 ST-27500 ST-28110 ST-28120 ST-28230 ST-28240 ST-29940 商品名 ErythroClear Red Blood Cell Depletion Reagent kit ErythroClear Red Blood Cell Depletion kit Human LDL 3% Acetic acid with Methylene Blue Iscove's MDM +2% FBS Ammonium Chloride Solution Ammonium Chloride Solution HetaSep HetaSep STEMgrid-6 35 mm Culture Dishes 35 mm Culture Dishes SmartDish SmartDish 60 mm Gridded Scoring Dishes Blunt End Needles Blunt End Needles 3 cc Syringes 3 cc Syringes Cord Blood Colony Atlas 梱包単位 臍帯血 2 mL 用 臍帯血 2 mL 用 5 mg 100 mL 100 mL 100 mL 500 mL 20 mL 100 mL 1枚 10 枚 500 枚 5枚 50 枚 5枚 100 本 2000 本 30 本 100 本 1冊 10 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 コロニー判定自動化装置 STEMvisionTM コロニー判定自動化装置 製品 STEMvision は、メチルセルロース培地を用いた造血コロニー形成細胞アッセイの判定を自動で行うための機械です。 MethoCult 培地と SmartDish プレートを組み合わせたアッセイ系での使用に最適化されています。 特長 製品仕様 • コロニーカウントの自動化と標準化 大きさ 478 mm（幅）x 335 mm（奥）x 347 mm（高） • 作業時間の短縮 重量 STEMvisionTM 27 kg および PC 12 kg • コロニー画像のデジタル化と永久保存 電源 120V/240V, 1.5A, 60Hz/50Hz • 経時的な変化をイメージングにより記録可能 商品コード ST-22000 ST-22001 ST-22005 ST-22006 ST-22007 ST-22008 ST-22009 ST-22011 STEMvision STEMvision STEMvision STEMvision STEMvision STEMvision STEMvision STEMvision 商品名 Instrument Human Cord Blood 7-day CFU analysis package Color Human Cord Blood 14-day CFU analysis package Color Human BM 14-Day CFU analysis package Color Human MPB 14-Day CFU analysis package Mouse M3434 Assay Mouse M3534 Assay Mouse M3436 Assay STEMvision による判定のイメージ 赤色の丸がエリスロイド系、黄色の丸がミエロイド系、 青色の丸が混合コロニーを示す 専用器具 SmartDish はメニスカスフリーの 6 ウェルプレートです。ウェルの縁 のコロニーもカウントできるため、より正確な結果が得られます。 商品コード ST-27301 ST-27302 SmartDish SmartDish 商品名 梱包単位 5枚 50 枚 11 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用コラーゲン培地 造血コロニーアッセイ用コラーゲン培地 これまで造血性細胞のコロニー形成能・分化を検出するために、種々の半固体培養系が用いられてきました。最適濃度 の造血成長因子を添加したメチルセルロースベース培地により、赤血球・顆粒球 / マクロファージ系統のコロニー形成 細胞の形態学的基準に基づくルーチン定量に便利で再現性のある系が得られます。しかし、マクロファージなどのある 種の細胞と区別するのが容易ではない巨核球を同定するには特定の染色法が必要です。メチルセルロースベースの培養 物は固定することができず、さらに細胞的または分子的な分析を実施するにはコロニーを個別に適採・加工する必要が あります。そこで、一部の用途に対しては、メチルセルロースベースの半固体培養物の代替としてコラーゲンゲルを使 用することが有効です。コラーゲンゲルは、造血細胞など種々の細胞の増殖を促進することがわかっています。 インキュベーションに続いて、培地全体を脱水・固定し、その次に細胞化学的または免疫染色を実施することが可能です。 得られたスライドは長期保存が可能なため、アッセイ結果のアーカイブとして保管することができます。 ▶ MegaCult-C ヒト巨核球前駆細胞アッセイキット 製品 MegaCult-C は、無血清培地とコラーゲン溶液を用いた巨核球前駆細胞アッセイ用の培養・固定・染色用のキットです。 細胞学的または免疫染色を実施することが可能です。 得られたスライドは長期保存が可能なため、アッセイ結果のアーカイブとして保管することができます。 特長 • 臍帯血、動員末梢血、骨髄に由来する造血前駆細胞の定量 • 形態学的、細胞学的、または免疫細胞学的な染色技術を用いたコロニー型の決定 • 本能性血小板血症および真性多血症の患者サンプル中の巨核球・赤血球前駆細胞増殖の調査 • コラゲナーゼ（ST-07902) を用いたコラーゲンゲルからの細胞単離 操作手順 12 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用コラーゲン培地 特長 • CFU-Mk 検出用のアッセイキットです。 • 無血清培地を用いることで、FBS に含まれる TGF- β等による巨核球前駆細胞の成長の阻害、その他の不確定な要因 を排除します。巨核球の培養に最適なサイトカイン（TPO、IL-3、IL-6）入り完全培地と、サイトカイン抜きの添加 試験用の培地があります。 • ダブルチャンバースライドを用いることで、培養した全てをそのまま簡単に固定、 染色可能です。培養した細胞全体や、 コロニーを採取して顕微鏡用のスライドガラスに移す操作は不要です。 • 固定したコロニーは、巨核球に特異的な抗体（GPIIb/IIIa(CD41) に対する一次抗体）とビオチン化二次抗体 - アビ ジン結合アルカリフォスファターゼの検出システムを用いて免疫組織染色して同定します。難しいマクロファージと の識別や細胞数の少ないコロニーの同定が増幅・染色を用いることで明確になります。巨核球前駆細胞コロニーと Mixed コロニーの同定が可能です。（巨核球系はピンク色、その他は薄い青） • １キット 24 検体用です（1 検体あたり 2 アッセイとした場合） 。1 検体あたり 1 アッセイとした場合は 48 検体のアッ セイが可能です。 • チューブに小分け済みの製品と、ボトル製品がございます。 商品コード ST-04960 ST-04961 ST-04964 ST-04965 ST-04970 ST-04971 ST-04972 ST-04973 ST-04974 MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C MegaCult-C 商品名 Collagen and Medium without Cytokines Collagen and Medium with Cytokines Collagen and Medium without Cytokines Collagen and Medium with Cytokines Complete Kit without Cytokines Complete Kit with Cytokines Complete Kit without Cytokines Complete Kit with Cytokines Collagen and Medium with Lipids without Cytokines 梱包単位 1.7 mL x 24 tubes 2.0 mL x 24 tubes 50 mL 50 mL 1.7 mL x 24 tubes 2.0 mL x 24 tubes 50 mL 50 mL 50 mL ▶ MegaCult-C ヒト染色キット 製品 ヒト用 MegaCult-C で用いる染色キットです。 コンポーネント • Primary antibody（染色用一次抗体） • anti-TNP isotype negative control antibody （コントロール抗体） • Secondary Biotin Conjugated Goat anti-Mouse IgG antibody • Avidin-alkaline Phosphatase conjugat 商品コード ST-04962 商品名 MegaCult-C CFU-Mk Staining Kit • Alkaline phospatase substrate tablets and buff er tablets • Evans blue counterstain • Human serum • 10% BSA Solution 梱包単位 1 kit 13 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血コロニーアッセイ用コラーゲン培地 / 造血前駆細胞 長期培養培地 ▶ MegaCult-C マウス巨核球前駆細胞アッセイキット 製品 マウス用の MegaCult-C です。巨核球の同定には酵素法による染色でアセチルコリンエステラーゼを検出して巨核球を 同定します。 商品コード ST-04960 ST-04964 ST-04974 商品名 MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines MegaCult-C Collagen and Medium without Cytokines MegaCult-C Collagen and Medium with Lipids without Cytokines 梱包単位 1.7 mL x 24 tubes 50 mL 50 mL ▶ MegaCult 用サポート試薬 商品コード ST-02698 ST-04813 ST-04902 ST-04911 ST-04963 ST-05810 ST-07902 商品名 Human LDL MegaCult-C Double Chamber Slides Collagen Solution Filter cards & Polypropylene Double Chamber Slides ES-Cult Endothelial Collagen and Medium Kit Collagenase 梱包単位 5 mg 16 Slides 35 mL 48 ｾｯﾄ 48 ｾｯﾄ 1 kit 5 mL 造血前駆細胞 長期培養用培地 MyeloCult は長期培養用の培地で、LTC-IC アッセイにご利用いただけます。 LTC-IC アッセイ ヒト細胞の長期培養では、5 週間以降に検出されたコロニー形成細胞 (CFC) は LTC-IC の子孫に相当します。試験細胞 懸濁液中の LTC-IC を定量するには、放射線を転射した骨髄細胞、あるいは適切なヒトまたはマウスの線維芽細胞株の 支持細胞層上で LTC-IC 細胞を培養する必要があります。 限界希釈法は、LTC-IC の発生頻度および 1 個の LTC-IC あたりの平均 CFC 産生数が確立されれば、サンプルの LTCIC 含有量をバルク培養 LTC-IC アッセイによって測定できます（骨髄、臍帯血、動員末梢血など同じ供給源からの試験 細胞を使用しており、アッセイ条件が同一である場合）。その後、CFC の合計アウトプットを 1 個の LTC-IC あたりの 平均 CFC 産生数で割ることによって LTC-IC 含有量を算出します。 ▶ MyeloCult ヒト＆マウス長期培養用培地 製品 ヒトあるいはマウスの造血性細胞の骨髄系細胞長期培養地です。MyeloCult 長期培養用培地は、長期造血細胞の増殖を 最適に促進する性能に関する広範なスクリーニングを経て選定されています。 MyeloCult 製品に使用されているすべての血清は、増殖性ストローマ細胞にサポートされた状態でヒト・マウス骨髄造 血細胞またはマウス B リンパ系細胞（Whitlock-Witte) の培養を確立できるかどうか厳しいスクリーニングを経て選定 されています。 用途 LTC-IC の発生頻度の定量および表現型・機能的特性の研究 ▶ 長期培養において骨髄造血を開始し、それを数週間にわたって維持することが可能な幼弱な造血前駆細胞は、LTC-IC (Long term culture initiating cell ) と呼ばれてきました。ヒトまたはマウスサンプル中の LTC-IC の発生頻度は LTCIC アッセイを用いて測定することが可能です。MyeloCult および関連製品を用いた実験によると、LTC-IC は表現型、 細胞周期特性、増殖能力がそれぞれ異なる異種細胞集団であることがわかりました。 14 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血前駆細胞 長期培養用培地 遺伝子導入の促進 MyeloCult 中での培養により、原始造血前駆細胞にレトロウイルス遺伝子を導入し、それらのトランスフェクション細 胞を増殖させることが容易になります。 ▶ 骨髄造血調節因子の評価 骨髄造血の調節における間質由来因子の役割（正または負の調節因子あるいはその両方、および付着性分子）は、 MyeloCult を用いた長期培養で評価することが可能です。 ▶ ▶ in vitro での多能性造血細胞の増殖 ヒトのコロニー形成細胞（CFC）および LTC-IC は、MyeloCult に懸濁して培養することで増殖させることができます。 MyeloCult による長期静置培養で増殖したマウス全能性造血細胞は、照射マウスでリンパ球骨髄造血を維持することが 可能です。 正常細胞と悪性細胞の違いの研究 MyeloCult は CML、AML、再生不良性貧血の患者由来の LTC-IC 培養に使用されています。 ▶ CD34+ 細胞からナチュラルキラー（NK）細胞への分化の研究 臍帯血由来の CD34+ 細胞のサブポピュレーションは、IL-2 および IL-7、または幹細胞因子 (SCF) および IL-15 の存 在下で MyeloCult 中で培養することによって、NK 細胞への分化を誘発することが可能です。 ▶ NK 細胞株の培養 MyeloCult はヒト NK-92 細胞株の培養に使用されています。 ▶ 限界希釈法による LTC-IC Assay MyeloCult ® バルク培養法による LTC IC Assay STEP 1 STEP 1 フィーダ細胞を定着させる フィーダ細胞を定着させる Test cells MyeloCult® 3 mg/mL = feeder cel l = feeder cel l MyeloCul t ® 3 mg/mL MyeloCult® Test cells 段階希釈した Test Cells を加える STEP 2 PRODUCTS FOR HEMA T OPOIETIC STEM CELL RESEARCH STEP 2 数がわかっている Test Cells を加える = LTC-IC = LTC-IC = CFC = CFC = mature cel l = mature cel l STEP 3 維持培養する STEP 3 維持培養する STEP 4 収集してプレートにまく MethoCult® STEP 4 収集してプレートにまく MethoCult® STEP 5 スコアリングする STEP 5 STEP 6 LTC-IC の発生頻度を計算する 商品コード ST-05100 ST-05150 ST-05300 ST-05350 MyeloCult MyeloCult MyeloCult MyeloCult H5100 H5100 M5300 M5300 商品名 コロニーの総数をカウントする 梱包単位 100 mL 500 mL 100 mL 500 mL H5100 はヒト用、M5300 はマウス用です 15 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 造血幹 / 前駆細胞増殖用 無血清培地 造血幹 / 前駆細胞増殖用 無血清培地 造血幹細胞および前駆細胞を in vitro で維持・増殖させたり、アッセイを行う技術は、造血に関する研究の発展に大 きく貢献してきました。従来、造血細胞の培養にはウシ胎仔血清（FBS) を含む培地が用いられていました。しかし、 TGF- βやその他の阻害因子の濃度は、血清のバッチ間で異なります。これらのばらつきを最小限にするため、特に特 定の調節因子または成長因子の作用に関する研究においては、無血清培地の使用に高い関心が寄せられています。 ▶ StemSpan Serum Free Expansion Media 製品 STEMCELL Technologies 社は、造血幹細胞および造血前駆細胞の維持・増殖をサポートする血清代替物や無血清培地 のリーディングサプライヤーとして、StemSpan シリーズの培地・サイトカインカクテルを提供しています。 用途 正常な骨髄、動員末梢血、臍帯血に由来する造血細胞の増殖に適しています。 • CD34+ 細胞 • コロニー形成細胞（CFC） • Long term culture initiating cells ( LTC-IC ) 以下の細胞に由来する樹状細胞の発生・培養に適しています。 • ヒト CD34+ 細胞および末梢血 CD14+ 細胞 • マウス骨髄 培地にサイトカインまたは成長因子を含まないため、下記 のアプリケーションが可能です。 • 骨髄、臍帯血、動員末梢血に由来する造血細胞の維持または増殖に最適な条件決定 • 造血における正負の調節因子の作用に関する研究（組成が明確なため新規の制御因子の同定が容易です） 【培地】 商品コード ST-09600 ST-09650 ST-09605 ST-09655 ST-09800 ST-09850 ST-09805 ST-09855 商品名 StemSpan SFEM StemSpan SFEM II StemSpan H3000 StemSpan ACF 梱包単位 100 mL 500 mL 100 mL 500 mL 100 mL 500 mL 100 mL 500 mL 成分 説明 BSA, rh Insulin, Human Transferrin 造血系細胞の培養・増殖用の無血清培地。適切な成長 (Iron-saturated), 2-ME, Iscove's 因子やサイトカインを加えることで各細胞に最適な培 MDM, Supplements 養環境を実現可能。 造血系細胞の培養・増殖用の無血清培地（StemSpan BSA, rh Insulin, Human Transferrin SFEM を改変した培地）。CC100, CC110 など適切なサ (Iron-saturated), 2-ME, Iscove's イトカインを加えて増殖に用いたり、赤芽球や巨核球 MDM, Supplements への分化に用いることが可能。 ヒト造血系細胞の培養・増殖用のゼノフリー培地。適 ヒト由来およびヒトリコンビナントタ 切な成長因子やサイトカインを加えることで各細胞に ンパク 最適な培養環境を実現可能。 リコンビナントタンパク、合成成分 ヒト造血系細胞の培養・増殖用のアニマルコンポーネ ントフリー（※）培地。適切な成長因子等を加えるこ とで各細胞に最適な培養環境を実現可能。 ※ヒトや動物由来の成分を含みません。 【サイトカインカクテル、サプリメント】 商品コード 商品名 梱包単位 ST-02690 StemSpan CC100 1 mL StemSpan CD34+ ST-02691 Expansion Supple- 10 mL ment (10X) StemSpan Erythroid ST-02692 Expansion Supple- 1 mL ment (100X) StemSpan ST-02693 Myeloid Expansion 1 mL Supplement (100X) StemSpan MegaST-02696 karyocyte Expansion 1 mL Supplement（100X） ST-02697 StemSpan CC110 1 mL ST-02698 Human LDL 5 mg 成分 rhFlt-3L, rhSCF, rhIL-3, rhIL-6 説明 ヒト造血前駆細胞の増殖用サプリメント rhSCF, rhTPO, rhIL-3, rhIL-6, rhヒト CD34+ 前駆細胞の増殖用サプリメント Flt-3L, other supplements rhSCF, rhIL-3, rhEPO ヒト赤血球前駆細胞の増殖と分化用サプリメント rhSCF, rhTPO, rhGM-CSF, rhG-CSF ヒトミエロイド前駆細胞の増殖と分化用サプリメント rhSCF, rhTPO, rhIL-6, rhIL-9 rhFlt-3L, rhSCF, rhTPO ヒト血漿由来低密度リポタンパク ヒト巨核球前駆細胞の増殖および、巨核球・血小板産生 用サプリメント（旧名：StemSpan CC220） ヒト造血前駆細胞の増殖用サプリメント 無血清培地への添加により、各種前駆細胞の増殖と生存 を促進 rh-recombinant human 16 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ALDH 活性に基づく幹細胞 / 前駆細胞同定キット ALDH 活性に基づく幹細胞 / 前駆細胞同定キット ALDH（Aldehyde dehydrogenase) は、生きている全ての primitive な細胞で活性が高く、mature な細胞では活 性が低いことが知られています。ALDEFLUOR の試薬、BAAA（Bodipy-aminoacetaldehyde) は細胞に取り込まれ、 ALDH によって BAA- (Bodipy-aminoacetate、蛍光発光）に変換されるため、ALDH の活性の高い細胞は強い緑色の 蛍光を発します。さらに、細胞膜の状態が悪い、死んだ細胞や弱っている細胞では産出した BAA- を細胞内に保持でき ないため、生細胞のみが同定されます。従来の免疫学的染色で分離した細胞でコロニーアッセイを行った場合、必ずし もすべての細胞がコロニー形成能を持つわけではないため、アプリケーションによってはより精度の高い細胞の絞り込 みが必要とされます。ALDEFLUOR では、本当にコロニー形成能の高い primitive な生細胞のみを同定することができ ます。 ▶ ALDEFLUOR - ALDH 活性に基づく幹細胞 / 前駆細胞同定キット 製品 ALDEFLUOR は、細胞の ALDH 酵素活性を測定してヒト骨髄・動員末梢血・臍帯血中の幹細胞 / 前駆細胞を同定す る試薬です。※ ALDHbr の細胞集団は、CD34+cells、CD133+cells、c-Kit+cells、Lin-cells、Colony forming cells、 LTC-IC、NOD/SCID repopulating cells を含みます。 特長 コンポーネント（ST-01700） • 従来の抗体染色とは異なる、幹細胞 / 前駆細胞同定法 • Dry ALDEFLUOR reagent、50 μ g • 細胞膜が intact な状態で、primitive な生細胞のみを同定 • Diethylaminobenzaldehyde(DEAB)、 • in vivo 、in vitro 共にノントキシック 1.5mM in 95% ethanol、1 mL • 簡便なプロトコル、高い再現性 • 2N HCl、1.5 mL • 新鮮および凍結サンプルの両方に使用可能 • Dimethylsulphoxide（DMSO)、1.5 mL • 細胞表面マーカーに対する蛍光標識抗体と併用可能 • ALDEFLUOR Assay Buffer、25 mL x 4 本 • 一般的なフローサイトメーターおよびセルソーターで測定 • ALDEFLUOR Quick Reference Guide 原理 細胞の ALDH（酵素）+BAAA（基質、Bodipyaminoacetaldehyde) FACS PROFILE RESULTS WITH ALDEFLUOR Live cell gate (based on scatter) Side Scatter → BAA-（Bodipy-aminoacetate、蛍光発光） ALDEFLUOR の使用が確認されているアプリケーション • 造血幹細胞 Forward Scatter • 内皮前駆細胞 ALDEFLUOR® • 神経前駆細胞 • 腫瘍幹細胞 Side Scatter Side Scatter • 間葉系前駆細胞 ALDEFLUOR® + ALDH enzyme inhibitor (negative control) Green Fluorescence • 乳腺幹細胞 Green Fluorescence Representative Data Plots for Human Apheresis Products. ※ 使用文献につきましてはお問合せ下さい 商品コード ST-01700 ST-01701 ST-01702 ST-01705 商品名 ALDEFLUOR ALDEFLUOR Assay Buffer ALDEFLUOR Assay Buffer ALDEFLUOR DEAB 梱包単位 40 tests 25 mL 55 mL 1 mL 17 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 間葉系幹細胞 研究用培地 間葉系幹細胞 研究用培地 （注）ヒト用製品は ES/iPS& 間葉系幹細胞研究用試薬カタログに掲載 ▶マウス間葉系幹細胞培養用関連製品 製品 マウス緻密骨から分離・回収したマウス間葉系幹細胞を専用培地と Hypoxia Chamber で培養することで効率的に増殖す ることができます。低酸素条件での培養は iPS 細胞の樹立においても好成績を示しております。 Hypoxia Chamber を使用することで大掛かりなインキュベーター装置を使用することなく、簡単に低酸素条件を整えるこ とができます。 マウス間葉系幹細胞の分離・培養 マウス間葉系幹細胞分離 （緻密骨より細胞を調整） ↓ 増殖能を有するマウス間葉系幹細胞は、 骨髄よりも緻密骨（compact bone) から より多く得ることができます。 Hypoxia Chamber Single Flow Meter 専用培地と Hypoxia Chamber で培養 ↓ 10 倍以上も増殖効率がアップ マウス間葉系幹細胞分離用試薬 商品コード ST-19771 ST-18000 →詳細は細胞分離製品カタログをご覧ください 商品名 EasySep Neg Mouse Mesenchymal Progenitor Cell Kit from Compact Bone EasySep Magnet 梱包単位 4x10^8 cells 用 1個 Hypoxia chamber とガス流量計 商品コード ST-27310 ST-27311 Hypoxia Chamber Single Flow Meter 商品名 梱包単位 1 セット 1個 Hypoxia Chamber には、35mm ディッシュが 84 枚（10mm ディッシュなら 12 枚）入ります。 マウス間葉系幹細胞用培地 商品コード ST-05512 ST-05501 ST-05502 ST-05503 ST-05504 商品名 MesenCult Proliferation Kit with MesenPure ( Mouse ) MesenCult MSC Basal Medium ( Mouse ) Mesenchymal Stem Cell Stimulatory Supplements ( Mouse ) Adipogenic Stimulatory Supplement ( Mouse ) MesenCult Osteogenic Stimulatory Kit ( Mouse ) 梱包単位 500 400 100 100 500 mL mL mL mL mL 18 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ES/iPS 細胞 研究用培地 ES/iPS 細胞 研究用培地 （注）ヒト用製品は ES/iPS& 間葉系幹細胞研究用試薬カタログに掲載 ▶ ES-Cult マウス ES/iPS 細胞の維持培養 製品 ES 細胞は白血病阻止因子 (LIF) の存在下、厳密な特定の in vitro 培養条件において未分化状態のまま維持されます。 LIF の使用を中止すると、ES 細胞は内胚葉、外胚葉および中胚葉の三胚葉由来の細胞を含む胚葉体 (EB) と呼ばれる複 雑な構造物に分化します。 この細胞はその後、膵臓細胞、神経細胞、造血細胞、心筋細胞、脂肪細胞、上皮細胞、内皮細胞、リンパ系細胞および 骨芽細胞などのさまざまな細胞へ分化誘導することができます。ES 細胞を in vitro 分化させると、細胞過程および分子 過程の検討、薬物のスクリーニングのほか、組織工学および細胞治療への利用可能性を模索する上で強力無比な系とな ります。 用途に応じ、充分なスクリーニング、品質管理を行った ES 細胞培養用製品を取り揃えております。 • 胚の発生時および分化時の遺伝子発現パターンの解析 • 有望な治療法に対する特異的細胞の産生に適したモデル系の作製 • 機能研究を目的とする遺伝子組み換え ES 細胞（ノックアウト、トランスジェニック、アンチセンス）の作製 • 外部刺激が発生過程に及ぼす作用の評価 • 遺伝子トラップ法、Degenerate PCR 法または RNA サブトラクション法を用いる、発生過程で制御を受ける新たな 遺伝子の同定 商品コード ST-03150 ST-00321 ST-00322 ST-00324 ST-00325 ST-02524 ST-02740 ST-06902 ST-06952 ST-36250 商品名 ES-Cult Complete Maintenance Kit Murine PEF Day E12.5, Passage 2 (CD-1 embryos) Murine PEF Day E14.5, Passage 2 (CD-1 embryos) Hygromycin 耐性 Mouse PEF Day E13.5, Passage 1 Puromycin 耐性 Mouse PEF Day E13.5, Passage 2 Human BMP-4 Murine LIF ES-Cult FBS ES 細胞維持用 ES-Cult FBS ES 細胞維持用 DMEM with 4500 mg/L D-glucose 梱包単位 1x10^6 1x10^6 3x10^6 3x10^6 1 Kit cells 以上 cells 以上 cells 以上 cells 以上 10 µg 10 µg 100 mL 500 mL 500 mL 19 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ES/iPS 細胞 研究用培地 ▶ ES-Cult - マウス ES/iPS 細胞から造血系細胞への分化 Maintenance Maintain undifferentiated cells on MEFs or gelationcoated culture dishes with mLIF. 製品 2 段階 in vitro 分化法を用いることによって、胚 葉体（EB) 内部から発生する造血細胞の定量性が 1 大幅に向上しました。最初の分化段階では、メ チルセルロースベースの半固形培地で ES 細胞が Primary Differentiation Suspend undifferentiated cells in methylcellulose based medium to promote EB formation. EB を形成します。様々な培養期間終了後に EB を回収し、トリプシン -EDTA またはコラゲナー 2 ゼで分散させて単一細胞の浮遊液にします。適 Secondary Hematopoietic Differentiation Harvest and disrupt EBs to obtain single cell suspension. 切なサイトカインを含有するメチルセルロース 培地でこの細胞を再び平板培養すると、特定の 種類の造血前駆細胞への分化が誘導されます。 STEMCELL Technologies 社では、マウス胚性幹 3 Plate and Incubate 4 Count Colonies 細胞系の in vitro 造血細胞分化を実施するための 製品シリーズを取り揃えております。 ES-Cult は、キット製品あるいは培地単品で購入 いただけます。 商品コード ST-03120 ST-03160 ST-03161 商品名 ES-Cult M3120 ES-Cult Hematopoietic Differentiation Kit without Cytokines ES-Cult Hematopoietic Differentiation Kit with Cytokines Plate in methylcellulose based medium containing appropriate cytokines for hematopoietic colony formation. May also be cultured in liquid suspension cultures for further studies. Count and evaluate colony types using inverted microscope and gridded scoring dishes. Alternatively, individual colonies may be plucked for routine staining, PCR, or cytogenetic analysis. 梱包単位 40 mL 1 kit 1 kit ▶ ES-Cult - マウス ES/iPS 細胞から内皮系細胞への分化 製品 血管形成（前駆体の中胚葉細胞から血管芽細胞への分化による血管網原基の形成）および血管新生（既存の血管からの 出芽、分裂および再形成による新しい血管の形成）の過程を詳細に理解するため、胚性幹細胞が広く用いられています。 血管新生は、固形腫瘍の増殖および転移に関する癌生物学研究、創傷治療研究、炎症性疾患研究および循環器病学研究 などの数多くの研究分野で重要です。血管新生研究のモデル系となる以下のような方法が確立されています。あらかじ めスクリーニングした FBS のほか、内皮前駆細胞の豊富な胚葉体 (EB) の形成に必要な血管新生サイトカインを含有す るメチルセルロース培地で未分化のマウス ES 細胞を平板培養します。11 日間増殖させたのちに、そのままの状態の EB を回収し、内皮細胞の発生に必要な同じサイトカインを添加したコラーゲン基質上で継代培養します。EB は 3 日後、 血管新生を示す中心部からの発芽を開始します。 Mouse ESCs in the undifferentiated state 商品コード ST-03120 ST-05810 Day11 EB prior to culture in collagen 商品名 ES-Cult M3120 ES-Cult Endothelial Collagen and Medium Kit Sprouting EB grown in ES-Cult® Endothelial Collagen-Based Medium 梱包単位 40 mL 1 kit 20 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 血管内皮細胞 研究用培地 血管内皮細胞 研究用培地 血管形成は、隣接する既存血管からの内皮細胞の増殖、移行、再形成（脈管形成） 、また中胚葉性前駆細胞からの内皮前駆 細胞の分化（血管新生）を伴います。内皮前駆細胞（EPC) または血管芽細胞は当初、胚発生の間しか存在しないと考えら れていました。しかし数年にわたって蓄積された根拠により、これらは成人期にも残存することが示唆されました。このこ とから、虚血組織または損傷組織の新規血管形成および種々の病気の危険因子の臨床評価に EPC を用いることへの関心が 高まっています。 ▶ CFU-HILL アッセイ用培地 5Day EPC(CFU-hill) Colony Assay Unprocessed peripheral blood (PB) 製品 CFU-Hill Liquid Medium Kit は、骨髄または末梢血由来の MNC から、ヒト内皮前駆細胞を効果的に培養するために最適化された Ficoll-PaqyeTM PLUS キットです。サイトカイン添加の必要はありません。 用途 • 末梢血・骨髄由来 EPC の表現型の決定 Collect mononuclear cells Wash 2X with PBS+2%FBS CFU-Hill Medium 100mL • 内皮系統の分化経路の研究 • 臨床試験における診断ツールとしての使用 EPC 培養アッセイ 末梢血 (PB) および骨髄 (BM) に由来する内皮前駆細胞を培養・ 定量するための in vitro アッセイ法が確立されています。コロニー FOR RESEARCH USE ONL Y STEMCELL Technologies Inc Va ncouver, BC (604)877-0713 Resuspend in CFU-Hill Liquid Medium Plate 5 x 106 cells/well on fibronectincoated 6-well plate Day 0 2 days Collect non-adherent cells は放射状の扁平細胞で包囲された細胞の集合体として観察され、 ここでは DAY 5 EPC 由来コロニー (CFU-Hill) と呼びます。 これらの細胞の内皮系統は、von Willebrand ファクター、血管 内皮成長因子レセプター 2、CD31 の免疫染色によって確認する ことができます。 Plate 1 x 106 cells/well on fibronectin-coated 24-well plate Day 2 3 days Count colonies 文献 Day 5 1. Hill JM, et al., N Engl J Med 348: 593-600, 2003 2. Yoder MC, et al., Blood 109: 1801-1809, 2007 3. Rohde E, et al., Stem Cells 25: 1746-1752, 2007 4. Van Beem RT, et al., J Immunol 180l: 5141-5148, 2008 5. Thum T, et al., Am Coll Cardiol 46: 1693-1701, 2005 6. Shaff er RG, et al., Cytometry B Clin Cytom 70: 56-62, 2006 7. Palange P, et al., Eur Respir J 27: 529-541, 2006 8. Asosingh K, et al., J Immunol 178: 6482-6494, 2007 9. Sobrino T, et al., Stroke 38: 2759-2764, 2007 商品コード ST-05900 ST-05950 商品名 CFU-Hill Liquid Medium Kit (Human) CFU-Hill Liquid Medium Kit (Human) CFU-Hill Colony Cultured in CFU-Hill Liquid Medium 梱包単位 100 mL 500 mL 21 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 神経幹細胞 研究用培地 神経幹細胞研究用の培地類、細胞、試薬類です。 ▶ Neurospheres - マウス・ラット凍結神経幹細胞 製品 マウス Neurosphere マウス CNS の異なる３部位 (Cortex, Striata, Ventral Mesencephalon) に由来する発生 14 日目 (E14) の凍結 Neurosphere (Passage 1) です。 ラット Neurosphere 発生 18 日目 (E18) のラット Cortex もしくは Hippocampus、 Spinal Cord に由来する凍結 Neurosphere (Passage1, Day4) です。 商品コード ST-00330 ST-00331 ST-00332 ST-00340 ST-00341 商品名 Murine Striatal Neurospheres Murine Cortex Neurospheres Murine Ventral Mesencephalon Neurospheres Rat Cortex Neurospheres, E18 Rat Hippocampus Neurospheres, E18, P1 梱包単位 5x10^6 5x10^6 5x10^6 1x10^6 1x10^6 cells cells cells cells cells ▶ NeuroFluor CDr3 - 神経前駆細胞検出用蛍光プローブ 製品 NeuroFluor CDr3 は神経前駆細胞を選択的に生きたまま標識できる膜透過性の蛍光プローブです。標識した細胞は蛍 光イメージングや FACS に使用できます（励起 579 nm、発光 604 nm） 。 特長 • マウス、ラットおよびヒトの神経前駆細胞を固定せず選択的に標識可能 • 生細胞の蛍光イメージング、フローサイトメトリー、FACS に利用可能 • ヒト多能性幹細胞から EB を経て神経誘導する際の確認に利用可能 • 非毒性、非持続性 • シンプルで迅速なプロトコール マウス subventricular zone (SVZ) 由来 P1 neurospheres から解離した生細胞の染色像 (A) NeuroFluor CDr3（赤） (B) NeuroFluor CDr3（赤）＋ DAPI（青） スケールバー：50 um 商品コード ST-01800 NeuroFluor CDr3 商品名 梱包単位 0.5 mL 22 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult - マウス神経幹細胞培養培地 製品 マウス神経幹細胞の培養に最適に調製された NeuroCult Basal Medium および NeuroCult NSC 分化用サプリメント、 NeuroCult NSC 培養・増殖用サプリメントです。発生 14 日目 (E14) のマウス NSC は、自己複製、多数の子孫の産生、 そして成体哺乳動物 CNS に見られる 3 種類の主要な表現型への子孫の分化といった幹細胞機能を示す、独特な細胞集 団です。マウス E14 CNS から単離した幹細胞は、上皮細胞成長因子 (EGF) の存在下、組成の明らかな無血清培地中で は in vitro で未分化の増殖状態を維持することが可能です。この増殖培地中で EGF 応答性 NSC はニューロスフィアと 呼ばれる球体として増殖しますが、これは週単位での継代が可能で、そのため細胞数を算術的に増加させることができ ます。この幹細胞を培地から取り出して分化に適した培地中で培養すると、その子孫をニューロン、星状細胞、乏突起 膠細胞という 3 種類の腫瘍な CNS 表現型に分化させることができます。 神経幹細胞研究用製品フロー Precursor Cell NeuroCult® Proliferation Kit (Mouse) A Neurosphere NeuroCult® Differentiation Kit (Mouse) B Neurons D Oligodendrocytes C Astrocytes and Neurons E GABA-nergic Neurons A：NeuroCult Proliferation Kit で培養したマウス Neurosphere。 B：神経細胞体の免疫蛍光染色とその写真。マウスモノクローナル抗β チューブリン（ST-01409) を用いて同定。 C：星状細胞はウサギポリクローナル抗 GFAP（ST-01415) を用いて同定し、ニューロンはマウスモノクローナル抗 MAP2（ST-01410) を用いて同定。 D：乏突起膠細胞の免疫蛍光染色。マウスモノクローナル抗 04 乏突起膠細胞マーカー（ST-01416) を用いて同定。 E： GABA ニューロンの免疫蛍光染色。ウサギポリクローナル抗 GABA を用いて同定。 商品コード ST-05700 ST-05701 ST-05702 ST-05703 ST-05704 NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult 商品名 Basal Medium (Mouse) Proliferation Supplement (Mouse) Proliferation Kit (Mouse) Differentiation Supplement (Mouse) Differentiation Kit (Mouse) 梱包単位 450 50 500 50 500 mL mL mL mL mL 23 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult - ラット神経幹細胞培養培地 製品 神経幹細胞は、マウスおよびヒトの NSC を刺激する共通のマイトジェンに応答して増殖するラット胚性 CNS から単離 されてきました。懸濁培養中の固有 Neurosphere に由来するラット成長因子応答性細胞は継代によりその総数を増加 させることが可能で、またニューロン、星状細胞、乏突起膠細胞への分化が可能です。しかし、培養中の細胞の増殖は 約 30 日後に停止する傾向があります。ラット細胞は、多くの研究者が CNS 疾患の様々な実験系において選択する細 胞であるため、培養中で何代か継代した後にラット成長因子応答性細胞の増殖が制限されることは重大な問題です。 たとえば、ラットモデルは細胞移植および虚血傷害の研究においてほぼ例外なく使用されるため、ラット CNS 細胞か らエピジェネティックに刺激された NSC 系統を産生できる能力は非常に役立つと考えられます。 ラット幹細胞および前駆細胞を in vitro で増殖させる上での困難を克服するためには、ラット細胞を長期間にわたり 増殖できる培地が不可欠です。STEMCELL Technologies 社では、胚性ラットおよび成体ラットの神経幹細胞、前 駆細胞の培養に最適に調整された NeuroCult NS-A Basal medium および NeuroCult NS-A 分化用サプリメント、 NeuroCult NS-A 培養・増殖用サプリメントを提供しており、ラットの Neurosphere の継代培養が可能です。さらに NeuroCult の場合、特別に加工した培養プレートは不要です。 NeuroCult NS-A 増殖用キット（ラット用） 無血清培地と、ラット CNS から単離したラット神経幹細胞および前駆細胞に最適な成長・増殖用サプリメントのセッ トです。上皮細胞成長因子、基本線維芽細胞成長因子、ヘパリンを添加して組成を最適化した場合、この培地で少なく とも第 10 継代の間はラット NSC の増殖が可能で、また培養中 60 日間以上は細胞数が安定して増加します。 NeuroCult NS-A 分化用キット（ラット用） ラットの神経幹細胞および前駆細胞をニューロン、星状細胞、乏突起膠細胞へ分化させることが可能です。 Positive Cells (%) 90 80 Passage 5 70 Passage 10 60 50 40 30 20 10 0 Neuron Oligodendrocyte Astrocyte Neural Cell Type Neurons, oligodendrocytes and astrocytes are observed after culturing with the NeuroCult® NS-A Proliferation Kit (Rat) for more than 5 passages (prior to differentiation). 商品コード ST-05771 ST-05772 商品名 NeuroCult NS-A Proliferation Kit (Rat) NeuroCult NS-A Differentiation Kit (Rat) Neurons (red) were detected with a mouse monoclonal β-Tubulin lll antibody (ST-01409), oligodendrocytes (green) with a mouse monoclonal O4 Oligodendrocyte Marker antibody (ST-01416) and astrocytes (blue) with a rabbit polyclonal GFAP antibody (ST-01415). 梱包単位 500 mL 500 mL 24 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult - ヒト神経幹細胞培養培地 製品 神経幹細胞（NSC) は最初にげっ歯類から単離され、後にヒトの胎児および成人の中枢神経系（CNS) 中にも存在する ことがわかりました。特性試験により、ヒト NSC の成長制御に関する in vitro の機能特性はマウス NSC およびラット NSC のそれとは異なることが示され、最適な培養条件下では、ヒト NSC はマウス細胞よりも成長速度が遅く、マウス NSC の 2 日に対し 5~12 日という 2 倍の時間が必要でした。ヒト NSC の最適な増殖を in vitro で長期間維持するには、 EGF と FGF- βの両成長因子を培地に添加する必要があります。いくつかの論文において、神経障害の動物モデル中に 移植されたヒト胎児 NSC のグラフト化の成功例が報告されています。種々の神経変性障害の細胞治療にヒト NSC に関 する特性試験をさらに進めることが必要です。しかしその前には、移植処置に十分な量の機能性ヒト NSC の産生とい う大きな問題が存在しています。このため、ヒト NSC の長期増殖を促進する、最適化・標準化された効率的な培養系 が必要です。 STEMCELL Technologies 社では、ヒト神経幹細胞、前駆細胞の培養に最適に調製された NeuroCult NS-A 分化用サプ リメント、NeuroCultNS-A 培養・増殖用サプリメントを提供しております。 NeuroCult NS-A 増殖用キット（ヒト用） 無血清培地と、CNS から単離したヒト神経幹細胞 A B および前駆細胞に最適な成長・増殖用サプリメン トを含有しています。上皮細胞成長因子、基本線 維芽細胞成長因子、ヘパリンを添加して組成を最 適化した場合、この培地で長期間のヒト NSC の増 殖が可能です。 Neurons NeuroCult NS-A 分化キット（ヒト用） C Oligodendrocytes D ヒト神経幹細胞および前駆細胞をニューロン、星 状細胞、乏突起膠細胞に効率的に分化させる成分 を含有しています。 Astrocytes NeuroCult-XF Proliferation Medium ヒト神経幹細胞および前駆細胞を Neurosphere と して増殖させるための Xeno-Free な無血清培地で す。 Mature Oligodendrocytes A. ニューロンの免疫蛍光染色。マウスモノクローナル抗 b チューブリンを用いて 同定。倍率 10 倍 B. 星状細胞の免疫蛍光染色。ウサギポリクローナル抗 GFAP を用いて同定。倍率 20 倍 C. 未成熟乏突起膠細胞の免疫蛍光染色。ウサギポリクローナル抗 04 乏突起膠細 胞マーカーを用いて同定。倍率 20 倍 D. 成熟乏突起膠細胞の免疫蛍光染色。抗ガラクトセレブロシド抗体を用いて同定。 倍率 20 倍 商品コード ST-05751 ST-05752 ST-05761 商品名 NeuroCult NS-A Proliferation Kit (Human) NeuroCult NS-A Differentiation Kit (Human) NeuroCult-XF Proliferation Medium (Human) 梱包単位 500 mL 500 mL 500 mL 25 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult NCFC Assay Kit 製品 神経幹細胞（NSC）の長期間にわたる自己複製能、多分化能を保持しながら Neurosphere に分化して多数の子孫を産 生する能力を調べるアッセイとして、従来から液体培地を用いた Neurosphere アッセイと呼ばれる試験が行われてい ます。Neurosphere アッセイは哺乳類の成長因子応答性 NSC を検出・単離するための標準試験となっており、中枢神 経系 (CNS) の幹細胞に関する細胞生物学・分子生物学の理解を目的として行われる多くの研究の根幹を成すものとい えます。また、幹細胞機能に対する影響による外部シグナル因子のスクリーニングや、NSC に関する生物学的研究に も使用されています。 しかしながら、Neurosphere アッセイは、幹細胞による高い増殖能を有する細胞と、より成熟の進んだ細胞および前 駆細胞に特長的な低い増殖能を有する細胞とを直接識別するものではありません。NSC は Neurosphere アッセイに よって同定されますがこのアッセイで産生されたすべての Neurosphere が NSC 由来というわけではありません。し たがって、Neurosphere アッセイにより Neurosphere 数の単純な定量から決定した NSC 数は、真の数を過大評価し ている可能性があります。神経幹細胞と前駆細胞とを識別できるアッセイへのニーズから、STEMCELL Technologies 社は NCFC（Neural Colony-Forming Cell) アッセイと呼ばれるコラーゲンベースのアッセイを開発しました。 このアッセイでは神経幹細胞と前駆細胞を定量できます。NCFC アッセイで形成したコロニーの直径が 2mm 以上の場 合、その元細胞は NSC の機能的条件をそなえていたと考えられ、2mm 以下の増殖能の弱かった細胞は前駆細胞とし て区別されます。 NCFC Assay 概要 Cultured neurospheres Primary CNS tissue Dissociate Dissociate Cells OR Cells Filter Filter NeuroCul t® NCFC serum-free medium PLUS cytokines supplements collagen solution Plate into 35 mm dish Incubate 21 days Score NCFC colonies (size and frequency) A >2.0 mm B 1.0-2.0 mm C 0.5-1.0 mm D <0.5 mm (Grid 2.0 mm x 2.0 mm) 商品コード ST-05740 ST-05742 商品名 NeuroCult NCFC Assay Kit (Mouse) NeuroCult NCFC Assay Kit (Rat) 梱包単位 1 kit 1 kit 26 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult Chemical Dissociation Kit 製品 コンポーネント 胎児や成体のマウス CNS 組織由来の Neurospheres を非物 • NeuroCult Chemical Dissociation Solution A • NeuroCult Chemical Dissociation Solution B 理的且つ非酵素的に解離させるための化学的解離キットです。 • NeuroCult Chemical Dissociation Solution C Neurosphere 中の細胞へのダメージを最小限に抑えます。物 理的解離法 (Trituartion) で細胞を解離させ、継代培養を行っ た時に比べて高い viability とトータル細胞数が得られます。 NeuroCult Chemical Dissociation Kit による Neurospheres の解離の様子 (a)(b):2 分後 (c)(d):5 分後 (e)(f):7 分後 2 分後 ５分後 ７分後 商品コード ST-05707 商品名 NeuroCult Chemical Dissociation Kit (Mouse) 梱包単位 1 kit ▶ NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit コンポーネント 製品 NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit は成体のマウスと ラット CNS 組織から酵素処理により高い viability で single cell suspention を得るための "ready-to-use" な細胞解離用 キットです。４つの最適化された溶液から構成されており、 • NeuroCult Tissue Collection Solution • NeuroCult Enzymatic Dissociation Solution • NeuroCult Enzyme inhibition Solution • NeuroCult Resuspension Solution 成体マウスもしくはラットの CNS からの酵素的組織消化、 酵素反応の不活性化、single cell suspention への再懸濁を 行います。 商品コード ST-05715 商品名 NeuroCult Enzymatic Dissociation Kit for Adult CNS Tissue (Mouse and Rat) 梱包単位 1 kit 27 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経幹細胞 研究用培地 ▶ NeuroCult SM Neuronal Supplement 製品 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は、マウスおよびラットのプライマリーニューロン培養のために標準化され た無血清サプリメントです。多くの機能性ニューロンを再現性高く得られ、グリア細胞のコンタミネーションを最小限 に抑える（<1% GFAP+）ように最適化されています。また、NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は、低および 高細胞密度のプライマリーニューロンの培養を短期、長期ともにサポートします。 NeuroCult SM2 Neuronal Supplement は、culture substrate（PDL 等）不要の無血清サプリメントです。プレート へのコーティング作業が必要ないため、コーティングによるバラツキ・手間を省くことができます。 従来の無血清サプリメント B27 との比較 今までの無血清サプリメントと比較して NeuroCult SM1 Neuronal Supplement は mature なニューロンの培養に非 常に優れています。従来よりも神経突起の長さが長くなり、枝分かれ部位の数が増えることが示されています。さらに、 電気生理学的特性を示す成熟ニューロンの数が多く得られます。 皮質ニューロンの培養 A B Magnification: 20X （B）従来の無血清サプリメント より長い神経突起の伸長 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (SM1) で培養し たニューロンの方が従来の無血清サプリメント（TSFS） と比較してより長い神経突起を伸ばした。 * Average neurite outgowth (µm) （A）NeuroCult SM1 Neuronal Supplement Magnification: 20X TSFS より多い枝分かれ部位 NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (SM1) で培養し たニューロンの方が従来の無血清サプリメント（TSFS） と比較してより多くの枝分かれ部位を有した。 Average number of branch points （B27） * TSFS （B27） 商品コード ST-05711 ST-05712 ST-05721 ST-05722 ST-05731 NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult NeuroCult SM1 SM1 SM2 SM2 SM1 商品名 Neuronal Supplement Neuronal Culture Kit Neuronal Supplement Neuronal Culture Kit without Vitamin A SM1 SM1 梱包単位 10 mL 1 Kit 2 mL 1 Kit 10 mL 28 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 神経生理学用 無血清培地 神経生理学用 無血清培地 ▶ BrainPhysTM BrainPhys は、無血清・神経培養用の基礎培地で、プライマリーニューロンおよびヒト多能性幹細胞（ES/iPS） 由来ニューロンの培養に適しています。従来の神経培養培地や DMEM と異なり、細胞の生存だけでなく in vitro での神経機能をより良くサポートするように設計されていますので、培地を交換せずに活動電位発生やシナプス 活動を含む神経機能解析を行うことができます。 BrainPhys は下記文献の組成を元に開発されています （Table S5 参照）。 Bardy C et al. (2015) Neuronal medium that supports basic synaptic functions and activity of human neurons in vitro. Proc Natl Acad Sci. 112(20):E2725-34 特長 •生理的：脳の細胞外環境を再現 •活性： 神経機能が改善され、シナプス活性の高いニューロンの比率が上昇 •簡便：培地交換することなく機能解析が可能 •多用途：ES/iPS 細胞由来ニューロンおよび中枢神経系プライマリーニューロンの長期培養が可能 •信頼性：細心の原料スクリーニングと QC で、最小限のロット間差を実現 データ例 BrainPhys で 成 熟 さ せ た 神 経 細 胞 で は シ ナ プ ス 活 性 が 向 上 し ま す。 下 図 は ラ ッ ト E18 cortical neuron を BrainPhys (A, C) または従来のメディウム (B, D) で成熟させ、興奮性 (AMPA) および抑制性 (GABA) のシナ プス活性を測定した結果です。 必要試薬 使用時には NeuroCult SM1 Neuronal Supplement (ST-05711)、N2 Supplement-A (ST-07152) などのサプ リメントの添加を推奨致します。その他、各種の低分子化合物やサイトカインを添加して使用頂けます。 商品コード ST-05790 ST-05711 ST-07152 ST-07156 商品名 BrainPhys Neuronal Medium NeuroCult SM1 Neuronal Supplement N2 Supplement-A N2-Supplement-B 梱包単位 500 10 5 5 mL mL mL mL 29 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 上皮細胞 研究用培地 上皮細胞 研究用培地 ▶ EpiCult - 乳腺上皮細胞培養培地 ヒト乳腺は、嚢様腺胞の排液を行う一連の分岐管からなる複合管状胞状腺です。これらの管や腺胞は、管胞細胞と、そ の下層をなす平滑筋様の筋上皮細胞という 2 種類の上皮細胞系統で主に構成されています。 最近の報告によると、乳腺上皮内には、表現型が互いに異なる前駆細胞および非前駆細胞の上皮細胞が存在することが 明らかになりました。前駆細胞のサブセットには、管腔細胞および筋上皮細胞の両方に分化可能な二分化能前駆細胞 （EpCAM+MUC1-CD49f+CD10+) と、管腔限定前駆細胞（EpCAM+MUC1+CD49f+Cd10-) があります。 これらのサブポピュレーションは、フローサイトメトリーまたは免疫磁気細胞分離のいずれかを用いて正常な乳腺組織 または培養乳腺上皮細胞から単離することができます。この細胞の成長・分化能は、 in vitro において低密度でプレーティ ングした時のコロニー形成能を見ることでモニタリングが可能です。 製品 ヒト・マウスの乳腺組織の解離、乳腺上皮細胞サブセットの濃縮、乳腺細胞の培養や特性を決定するための無血清培地です。 乳腺上皮細胞の解離、濃縮、培養 解離 乳腺細胞の Single cell suspension（細胞が１つ１つ バラバラになった状態の懸濁液）は、次の 2 段階の処 理で得ることができます。 EpiCult を使用したヒト・マウス乳腺上皮細胞の 単離・培養のプロトコール概要 乳腺組織 解離１ STEP 1 コラゲナーゼ / ヒアルロニダーゼカクテルを用いて、 組織を酵素的に乳腺類器官に解離します。 STEP 2 この乳腺類器官を、トリプシン、DNase、ディスパー ゼを用いて、Single cell suspension にします。 濃縮 ヒト細胞のサブセットは、上皮細胞接着分子 (EpCAM)、 CD49f、CD10、MUC1 糖タンパク質の発現の違いを利 用して、フローサイトメトリーまたは EasySep を用いた 免疫磁気細胞分離法により細胞懸濁液中から単離するこ とができます。 EpiCult-C (ST-05630) コラゲナーゼ / ヒアルロニダーゼ（ST-07912） 組織解離フラスコ（ST-27300） 乳腺類器官 解離２ EpiCult-C 乳腺上皮細胞の単細胞懸濁液 濃縮 EasySep またはフローサイトメトリーを用いた濃縮 培養 EpiCult-B (ST-05601) 中で CFC assay により乳腺前駆細胞 の検出（or EpiCult-C (ST-05630) 中で培養） 検出 （or 培養） マウス乳腺上皮細胞は、EasySep を用いて非上皮細胞 を除去し、その後フローサイトメトリーで CD24 または CD49f（あるいはその両方）を発現する細胞を濃縮する ことによって単離することができます。 培養 ヒト・マウス乳腺上皮細胞は精製の有無を問わず、組織 培養用プラスチック製品または EpiCult-B（ヒト・マウス 乳腺上皮細胞の増殖を促進する目的で設計された特製培 地）を用いた 3 次元のコラーゲンゲル内で培養すること ができます。 A. 純粋なヒト筋上皮細胞コロニー B. 純粋なヒト管腔細胞コロニー C. 混合ヒトコロニーの位相差顕微鏡写真。すべてのコロニー写真は、 放射線照射した NIH3T3 支持細胞層の存在下で EpiCultTM-B で培養 し、Wright-Giemsa 染色を行ったものです。 30 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 上皮細胞 研究用培地 商品コード ST-05601 ST-05610 ST-05630 ST-07900 ST-07901 ST-07904 ST-07910 ST-07912 ST-07913 商品名 EpiCult-B Medium Kit (Human) EpiCult-B Medium Kit (Mouse) EpiCult-C Human Medium Kit DNAse (1mg/mL) Trypsin EDTA Hydrocortisone Powder Trypsin-EDTA (0.05%) Collagenase/Hyaluronidase Dispase 梱包単位 100 mL kit 500 mL kit 500 mL kit 1 mL 500 mL 100 mg 500 mL 10 mL 100 mL ▶ MammoCult - Mammosphere アッセイ用培地 製品 MammoCult Medium (Human) は、ヒト乳腺幹細胞 / 前駆細胞を Mammosphere として培養するための無血清な培 地です。組成は human mammary progenitors が溶液中で生存、増殖を促進するように最適化されており、系統的制 限、二分化能前駆細胞を CFC（コロニー形成細胞）アッセイで検出することが可能です。 Mammosphere アッセイは、in vitro での乳腺幹細胞 / 前駆細胞の評価方法として乳がん幹細胞研究の分野で幅広く 使われるようになっています。 特長 • 文献で紹介されている従来の組成（Dontu の組成）と比較して 11 倍の mammosphere 形成ユニット数を passage 3 で実現、passage 1 でも最大２倍の数の mammosphere を形成 • 乳腺前駆細胞が従来の組成よりも保存される • 従来の組成培地と比較してより大きな mammosphere を多数形成 コンポーネント • MammoCult Basal Medium (Human) : 450mL • MammoCult Proliferation Supplements (Human) : 50mL ※ 使用には別途 Hydrocortisone と Heparin を添加する必要がございます。 商品コード ST-05620 ST-07904 ST-07980 商品名 MammoCult Human Medium Kit Hydrocortisone powder 0.2% Heparin Solution 梱包単位 500 mL kit 100 mg 2 mL ▶ ProstaCult マウス前立腺上皮前駆細胞の増殖用培地 製品 ProstaCult Proliferation Kit はマウス前立腺上皮前駆細胞の生存と増殖のために最適化された無血清培地です。 ProstaCult は、 ロ ッ ト 間 の バ ラ つ き が 少 な く、Prostate Colony-Forming Cells の 成 長 と 算 定 に 優 れ て い ま す。 Prostate Colony を生育させることにより、前立腺前駆細胞の評価やキャラクタライズへの利用が可能です。 商品コード ST-05640 商品名 ProstaCult Medium (Mouse) 梱包単位 500 mL 31 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 上皮細胞 研究用培地 ▶ PneumaCult-Ex & ALI ヒト気管支上皮細胞用培地 製品 PneumaCult-Ex はプライマリーヒト気管支上皮細胞（HBECs）の増殖をサポートする、血清 及び BPE（ウシ下垂体 抽出物）を含まない培地です。HBECs を少なくとも 3 継代以上、効率よく増殖させることができます。 PneumaCult-ALI は HBECs を Air-Liquid Interface (ALI) で培養するための、血清 及び BPE（ウシ下垂体抽出物）を 含まない培地です。PneumaCult-ALI で 3 次元 (3D) 培養することでヒト気管支上皮細胞は優れた層形成及び粘膜毛様 体分化を示し、in vivo のヒト気道と同様の形態となります。気道上皮細胞の発生研究、疾患モデル、吸引製剤を含む 前臨床薬物開発にご利用頂けます。 特長 • 血清及び BPE（ウシ下垂体抽出物）フリー • PneumaCult-ALI で培養した細胞は in vivo のヒト気道と良く似ています • 21 日以内に分化した細胞を得られます PneumaCult による HBECs 培養スキーム コンポーネント PneumaCult-Ex (ST-05001) • PneumaCult-Ex Basal Medium：490 mL • PneumaCult-Ex 50X Supplement：10 mL PneumaCult-ALI (ST-05008) • PneumaCult-ALI Basal Medium：450 mL • PneumaCult-ALI 10X Supplement：50 mL • PneumaCult-ALI Maintenance Supplement (100X)：5 x 1 mL ※培地には Hydrocortisone（ST-07904 など）および Heparin（ST-07980）を別途添加する必要があります 商品コード ST-05001 ST-05008 PneumaCult - Ex PneumaCult - ALI 商品名 梱包単位 500 mL 500 mL 32 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 上皮細胞 研究用培地 ▶ IntestiCult マウス腸管オルガノイド形成・維持用培地 製品 IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse) はマウス腸管オルガノイドを効率良く形成し、長期培養するための 無血清培地です。腸管オルガノイドは、腸管上皮と幹細胞のダイナミクスを研究するための in vitro 器官培養系です。 オルガノイドは成体腸管上皮の全細胞タイプを含み、 極性のある上皮の特徴を持ちます。また in vivo の腸を特徴づける、 機能的な管腔と crypt-villus（陰窩 - 絨毛）構造を持ちます。本培地で培養された腸陰窩は迅速にオルガノイドを形成し、 発生・機能解析・腸疾患モデル・幹細胞および再生医療研究といったアプリケーションにご利用頂けます。 特長 • 成体腸管上皮の特徴と組織を再現した、簡易な in vitro 培養系 • 無血清で defined な培地組成のため、結果の再現性が高い • 1 週間以内で腸管オルガノイドの形成が可能 • シンプルなフォーマットと簡便なプロトコール コンポーネント • IntestiCult OGM (Mouse) Basal Medium：90 mL • IntestiCult OGM (Mouse) Supplement 1：5 mL • IntestiCult OGM (Mouse) Supplement 2：5 mL 商品コード ST-06005 ST-37350 ST-07174 ST-36254 商品名 IntestiCult Organoid Growth Medium (Mouse) D-PBS Without Ca++ and Mg++ (PBS) Gentle Cell Dissociation Reagent DMEM/F12 with 15 mM HEPES 梱包単位 100 mL kit 500 mL 100 mL 500 mL ※他に、Corning の Matrigel などが必要になります（詳しくは製品添付書をご覧ください） 33 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした細胞のための 選択＆クローニング培地 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした細胞のため の選択＆クローニング培地 ClonaCell は目的に応じた成長因子や阻害因子を含んだメチルセルロースベースの半固形ゲル状培地です。 増殖した細胞が分散せずコロニーを形成するため選択とクローニングを同時に行う事ができます。 ▶ ClonaCell-HY ハイブリドーマクローニングキット 製品 ClonaCell-HY はモノクローナル抗体産生ハイブリドーマの選択・クローニングキットです。ハイブリドーマの成長と 選択に最適な成長因子を含むメチルセルロース培地を基本としています。細胞調製用の試薬や培地類を含むキットです。 試薬単品もございます。 特長・用途 • HAT 選択とクローニングが１ステップで終了できます。 • モノクローナル抗体産生、ハイブリドーマの作製期間が 11-26 日間短縮されます。 • 限界希釈 や再クローニングは不要です。 • 操作が少ないため、培養においてコンタミネーションのリスクが減少します。 • グロースファクター、B-cell stimulation を加えたメチルセルロース培地が single cell の成長に最適な環境を提供し ます。 • ダイレクトクローニングにより、成長の遅い抗体産生能のあるコロニーの選択率がよくなります。 • ワンステップで 100mm ディッシュ 10 枚に 1000 個以上のクローンを産生するため、多数のハイブリドーマのスク リーニングが可能です。 ClonaCell の方法 従来法 1 ClonaCell-HY の流れ 1 1 day 1 day 2 2 10-14days 7-10days 0da 3 自動化に対応 ClonaCell EasyPick 3 2days 14days 4 4 1 day 1 day 5 約 16-20 days 14days 6 1 day 約 38-41 days 商品コード ST-03800 ST-03801 ST-03802 ST-03803 ST-03804 ST-03805 ST-03806 ClonaCell-HY ClonaCell-HY ClonaCell-HY ClonaCell-HY ClonaCell-HY ClonaCell-HY ClonaCell-HY 商品名 Hybridoma Kit Pre-Fusion Medium A Pre-Fusion Medium B Recovery Medium C Cloning Medium D Growth Medium E Pre-tested PEG 梱包単位 1 kit 500 mL 500 mL 100 mL 90 mL 500 mL 1.5 mL 34 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした細胞のための 選択＆クローニング培地 ▶ ClonaCell-TCS トランスフェクトセルクローニング培地 製品 ClonaCell-TCS の流れ ClonaCell-TCS は メ チ ル セ ル ロ ー ス 培 地 を 用 い る 事 で、 Transfected cell の選択とクローニングを 1 ステップで行 step える半固形培地です。目的の遺伝子と共に抗生物質耐性遺 1 Transfect Transfect Cell 伝子を細胞に組み込む事で、培地中に含まれる抗生物質に 耐性を持つ細胞だけを選択的に培養すると共に、メチルセ ルロース中では１つの細胞からできたコロニーとして増殖 するため限界希釈なしで短期間にクローニングする事が可 能です。（従来法に比べ 15-20 日間の短縮）。 ClonaCell®-TCS methylcellulose-based medium containing selection agent 特長 • 抗生物質の選択とトランスフェクタントのクローニング Pluck individual transfectants (clones) step 2 step 3 step 4 step 5 Simultaneously Select and Clone Harvest を 1 ステップで行うため、15-20 日間、従来法と比べて 短縮できます。 • 培地交換や限界希釈は不要です。 • 多数のトランスフェクタントのスクリーニングが 可能で Grow individual transfectants す。ワンステップで 100mm ディッシュ 10 枚に 1000 個以上のクローンを産生します。 • 操作が少ないため、カルチャーにおいて、コンタミネー ションのリスクが減少します。 FACS ELISA Screen Western Blot • Transfected された非粘着細胞は、クローンのコロニー を形成させます。 • より急速にセルを育てることによって、他のクローンの Expand transfectants producing desired protein 成長を排除します。 STEPS Transfect cell line Recovery Select ( and Clone ＊ ) (Harvest and ＊ ) Expand Screen Clone Transfectants Screen Total Days Expand LIQUID MEDIA (DAYS) 1 1-2 7-14 4 1 >14 1 29-37 ClonaCell®-TCS (DAYS) 1 1-2 7-14 4 1 0 0 14-22 ※ Combined steps with the ClonaCell®-TCS method. 商品コード ST-03812 ST-03813 ST-03814 ST-03822 ST-03823 商品名 G418 Hygromycin ClonaCell-TCS Medium ClonaCell-TCS/G418 Kit ClonaCell-TCS/Hygromycin Kit 梱包単位 200 mg 100 mg 80 mL 80 mL kit 80 mL kit 35 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 ハイブリドーマおよびトランスフェクトした細胞のための 選択＆クローニング培地 ▶ ClonaCell-CHO CHO 細胞用クローニング培地 製品 ClonaCell-CHO は、CHO 細胞を用いた細胞のスクリーニングに最適化した、トランスフェクト細胞の選択とクローニ ングを１ステップで行えるメチルセルロース半固形培地です。 特長 • 従来法に比べ、クローニングの時間を 2 週間以上短縮します。 • 選択用培地はメチルセルロースを含む半固形状のため、クローニング時に限界希釈は不要です。 • ジヒドロ葉酸レダクターゼ（DHFR）やグルタミン合成酵素（GS）による選択に適しています。 従来法と ClonaCell-CHO での方法の比較 ClonaCell-CHO を用いたクローニング方法は、従来の限界希釈法のようにクローニングを繰り返す必要がないため、 期間を大幅に短縮することができます。 【 従来法 】 【 ClonaCell - CHO 】 STEP 1 STEP 2 STEP 3 STEP 4 STEP 5 融合 1 Day STEP 1 選択 7 - 10 Days STEP 2 選択とクローニング 10 - 14 Days 限界希釈法による クローニング 14 Days STEP 3 コロニー分離 1 Day STEP 4 増殖 2 - 4 Days STEP 5 スクリーニング 1 Day スクリーニング 1 Day 限界希釈法による サブクローニング 14 Days 合計日数：15-21 Days STEP 6 融合 1 Day スクリーニング 1 Day 合計日数：38 - 41 Days ClonaCell-CHO の培地組成 商品名 ClonaCell-CHO CD ClonaCell-CHO ACF 無血清 ● ● Chemically-defined ● アニマルコンポーネントフリー ● ● タンパクフリー ● • ClonaCell-CHO CD には、メチルセルロースフリーな適応用培地「ClonaCell-CHO CD liquid Medium」もあります。 • ClonaCell-CHO ACF には、非動物性由来のリコンビナントタンパクを含有しています。 商品コード ST-03815 商品名 ClonaCell-CHO CD Medium ST-03816 ClonaCell-CHO ACF Medium ST-03817 ClonaCell-CHO CD Liquid Medium ST-03820 ClonaCell-CHO ACF Supplement 梱包単位 説明 90 mL 合成成分のみを含む 動物由来成分不含（ACF） 。 90 mL CD よりクローニング効果は高い ST-03815 と基本組成が同じでメチルセル 500 mL ロース不含の液体培地 アニマルコンポーネントフリーのサプリメ ントで、クローニング用の液体培地、半固 2.5 mL 形培地に添加するだけで血清含有培地と同 等のシングルセルの増殖がみられる 36 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 エリスロポエチン測定キット ▶ ClonaCell-FLEX クローニング向けメチルセルロース 製品 ClonaCell-FLEX は高濃度のメチルセルロース培地で、お手持ちの培地と等量混合することでクローニング用半固形培 地にします。ハイブリドーマ、トランスフェクト細胞、CHO 細胞など様々な細胞のクローニングを、限界希釈のステッ プを経ないため短時間で可能にします。 無血清、Chemically-defined、アニマルコンポーネントフリーかつタンパクフリーです。 商品コード ST-03818 ClonaCell-FLEX 商品名 梱包単位 45 mL エリスロポエチン測定キット ▶ EPO ELISA 製品 コンポーネント ヒトエリスロポエチン測定用 ELISA キットです。 • 96-well (12 strips of 8 wells ) Microtiter Plate Precoated with Anti-Epo Monoclonal (Capture) Antibody • Assay Buffer (Buffer A) 特徴 • Sample Diluent (Buffer B) 感度 測定範囲 測定時間 測定可能サンプル 測定に要するサンプル量 1 ～ 2mU/mL 約 1 ～ 100mU/mL 約 2 ～ 3 時間 血清、血漿、尿、培養上清 100 μ L/ ２回アッセイ分 • Pre-diluted Epo Standards • Detection Antibody (Biotinylated Anti-Epo Antibody) • Streptavidin-Horseradish Peroxidase (HRP) Conjugate • Tetramethylbenzidine (TMB) Substrate Solution • Stop Solution • 10X Wash Buffer • Adhesive Covers • Instruction Manual 商品コード ST-01630 商品名 Erythropoietin(EPO)ELISA 梱包単位 1 kit ▶ EPO イムノアフィニティー精製用プレート 製品 ヒト EPO 精製用の anti-EPO-26 コート済みプレートです。血清、血漿、尿やその他サンプルからヒト EPO を精製す ることができます。 商品コード ST-01640 商品名 EPO Immunoaffinity Isolation Plate 梱包単位 1 plate 37 本カタログに掲載の製品は、「研究用」です。研究目的にのみ使用し、人や動物の医療用・臨床診断用・食品用としては使用しないようにご注意ください。 S P E C I A L I Z E D C E L L C U LT U R E M E D I A A P P L I C AT I O N C ATA LO G SSTC-16-0497