ソバルディ 錠 400 mg

ソバルディ®錠 400 mg
第 2 部（モジュール 2）：CTD の概要（サマリー）
2.4
非臨床試験の概括評価
ギリアド・サイエンシズ株式会社
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
目次
1.
非臨床試験の概括評価 ............................................................................................................... 10
1.1.
非臨床試験計画概略 ................................................................................................................... 10
2.
薬理試験....................................................................................................................................... 13
2.1.
効力を裏付ける試験 ................................................................................................................... 13
2.2.
副次的薬理試験 ........................................................................................................................... 13
2.3.
安全性薬理試験 ........................................................................................................................... 14
2.4.
薬力学的薬物相互作用試験 ....................................................................................................... 15
3.
薬物動態....................................................................................................................................... 16
3.1.
分析法........................................................................................................................................... 16
3.2.
吸収............................................................................................................................................... 16
3.2.1.
In vitro 試験............................................................................................................................. 16
3.2.2.
単回投与 ................................................................................................................................. 16
3.2.3.
反復投与 ................................................................................................................................. 17
3.3.
分布............................................................................................................................................... 17
3.3.1.
Sprague-Dawley ラット及び Long-Evans ラットでの組織内分布 .................................... 17
3.3.2.
血漿タンパク結合率 ............................................................................................................. 17
3.3.3.
胎盤通過及び乳汁移行 ......................................................................................................... 17
3.4.
代謝............................................................................................................................................... 18
3.4.1.
In vivo ...................................................................................................................................... 18
3.4.2.
In vitro ..................................................................................................................................... 19
3.5.
3.5.1.
3.6.
排泄............................................................................................................................................... 21
マウス、ラット及びイヌ ..................................................................................................... 21
薬物動態学的薬物相互作用 ....................................................................................................... 21
3.6.1.
代謝に関する薬物相互作用 ................................................................................................. 21
3.6.2.
トランスポーターに関する薬物相互作用.......................................................................... 21
3.7.
その他の薬物動態試験 ............................................................................................................... 22
2
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
4.
毒性試験....................................................................................................................................... 23
4.1.
単回投与毒性試験 ....................................................................................................................... 23
4.2.
反復投与毒性試験 ....................................................................................................................... 23
4.3.
遺伝毒性....................................................................................................................................... 24
4.4.
がん原性試験 ............................................................................................................................... 25
4.5.
生殖毒性試験 ............................................................................................................................... 25
4.6.
局所刺激性試験 ........................................................................................................................... 25
4.7.
その他の毒性試験 ....................................................................................................................... 26
4.7.1.
抗原性 ..................................................................................................................................... 26
4.7.2.
免疫毒性試験 ......................................................................................................................... 26
4.7.3.
代謝物試験 ............................................................................................................................. 26
4.7.4.
不純物・分解生成物 ............................................................................................................. 27
4.7.5.
その他の毒性試験 ................................................................................................................. 27
4.8.
曝露量比....................................................................................................................................... 27
4.9.
標的臓器....................................................................................................................................... 29
4.9.1.
心血管系 ................................................................................................................................. 29
4.9.2.
肝胆道系 ................................................................................................................................. 30
4.9.3.
消化管 ..................................................................................................................................... 30
4.9.4.
造血細胞（赤血球パラメーター・赤血球生成） .............................................................. 30
5.
考察及び結論 ............................................................................................................................... 32
6.
参考文献....................................................................................................................................... 35
3
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
表目次
表 2.4- 1 ソホスブビル又は GS-9851 の各種非臨床試験での NOAEL における曝露量と HCV
感染患者にソホスブビル 400 mg を投与したときの曝露量に基づく曝露量比............... 28
4
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
図目次
図 2.4- 1 ソホスブビルの細胞内代謝経路 ............................................................................................. 11
図 2.4- 2 [14C]ソホスブビルを経口投与後の血漿、尿、糞及び乳汁中の推定代謝経路 ................. 19
5
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
ソホスブビル並びにそのジアステレオマー及び代謝物の説明
構造式
開発番号
（旧開発番号）
一般名
略称
GS-7977
（PSI-7977）
ソホスブビル
SOF
説明
O
O
O
HN P O
O
O
GS-491241
（PSI-7976）
O
N
HO
O
F
O
O
GS-9851
（PSI-7851）
ヌクレオチドプロドラッグ
ジアステレオマー
NH
O
HN P O
O
O
O
N
HO
O
F
O
O
O
GS-566500
（PSI-352707）
ヌクレオチド プロドラッグ：ソホ
スブビル及びそのジアステレオマ
ー（GS-491241）の混合物（1：1）
NH
O
HN P O
O
O
N
HO
O
F
O
O
代謝物
ヌクレオシド誘導体一リン酸アラ
ニン
NH
-
O
HN P O
O
O
O
N
HO
GS-331007
（PSI-6206）
O
F
O
代謝物
ヌクレオシド誘導体
NH
O
HO
N
HO
GS-606965
（PSI-7411）
O
F
O
代謝物
ヌクレオシド誘導体一リン酸
NH
O
O P O
O
O
-
HO
N
O
F
GS-607596
（PSI-7410）
O
代謝物
ヌクレオシド誘導体二リン酸
NH
O
O
O P O P O
O
O
O
-
GS-461203
（PSI-7409）
原薬
ヌクレオチドプロドラッグ
NH
HO
N
O
F
O
NH
O
O
O
O P O P O P O
O
O
O
O
-
HO
N
F
6
O
活性代謝物
ヌクレオシド誘導体三リン酸
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
略号一覧
略号
日本語
英語
ALP
アルカリホスファターゼ
alkaline phosphatase
ALT
アラニンアミノトランスフェラー
ゼ
alanine aminotransferase
AST
アスパラギン酸アミノトランスフ
ェラーゼ
aspartate aminotransferase
AUC
濃度－時間曲線下面積
the area under the concentration versus time
curve
AUC0-x
時間 0 から x 時間までの濃度－時
間曲線下面積
partial area under the concentration versus time
curve from time “0” to time “x”
AUClast
時間 0 から血漿中濃度定量可能最
終時点までの濃度－時間曲線下面
積
the area under the concentration versus time
curve from time zero to the last quantifiable
concentration
BCRP
乳癌耐性タンパク質
breast cancer resistance protein
BSEP
胆汁酸塩排泄ポンプ
bile salt export pump
BxPC-3
ヒト膵臓がん細胞株
human pancreatic adenocarcinoma cells
CatA
カテプシン A
cathepsin A
CC50
50%細胞毒性濃度
drug concentration that results in a 50%
reduction in cell viability
CEM
ヒト T 細胞リンパ腫細胞株
human T cell leukemia cell line
CES1
カルボキシルエステラーゼ 1
carboxylesterase 1
Cmax
最高濃度
maximum observed concentration of drug
CNS
中枢神経系
central nervous system
CYP
シトクロム P450
cytochrome P450
DNA
デオキシリボ核酸
deoxyribonucleic acid
EC50
50%効果濃度
half maximal effective concentration or effective
concentration of compound causing 50% of
maximal inhibition
ECG
心電図
electrocardiogram
FMO
フラビンモノオキシゲナーゼ
flavin-containing monooxygenase
GLP
医薬品の安全性に関する非臨床試
験の実施の基準
Good Laboratory Practice
GT
ジェノタイプ
genotype
HBV
B 型肝炎ウイルス
hepatitis B virus
HCV
C 型肝炎ウイルス
hepatitis C virus
HepG2
ヒト肝がん細胞株
human hepatocarcinoma cell line
hERG
ヒト ether-a-go-go 関連遺伝子
human ether-à-go-go-related gene
7
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
略号一覧（続き）
略号
日本語
英語
Hint1
-
histidine triad nucleotide binding protein 1
HIV
ヒト免疫不全ウイルス
human immunodeficiency virus
HRV
ヒトライノウイルス
human rhinovirus
Huh-7
ヒト肝がん細胞株
human hepatocarcinoma cell line
ICH
日米 EU 医薬品規制調和国際会議
International Conference on Harmonization
IC50
50%阻害濃度
half maximal inhibitory concentration or
concentration of compound causing 50% of
maximal inhibition
IFN
インターフェロン
interferon
LDV
レジパスビル
ledipasvir
MATE
有機カチオン／H 交換トランスポ
ーター
multidrug and toxin extrusion transporter
MRC-5
ヒト肺線維芽細胞株
human fibroblast cell line
MRP
多剤耐性関連タンパク質
multidrug resistance-associated protein
MT-4
ヒト T 細胞白血病細胞株
human T cell leukemia cell line
mtDNA
ミトコンドリア DNA
mitochondrial DNA
NDPK
ヌクレオシド二リン酸キナーゼ
nucleoside diphosphate kinase
NI
ヌクレオシド阻害剤
nucleoside inhibitor
NNI
非ヌクレオシド阻害剤
non-nucleoside inhibitor
NOAEL
無毒性量
no observed adverse effect level
NS5A
非構造タンパク質 5A
nonstructural protein 5A
NS5B
非構造タンパク質 5B
nonstructural protein 5B
OAT
有機アニオントランスポーター
organic anion transporter
OATP
有機アニオントランスポータータ
ンパク
organic anion transporting polypeptide
OCT
有機カチオントランスポーター
organic cation transporter
PBMC
末梢血単核球
peripheral blood mononuclear cells
PC-3
ヒト前立腺がん細胞株
human metastatic prostate carcinoma cells
P-gp
P-糖タンパク質
p-glycoprotein
PI
プロテアーゼ阻害剤
protease inhibitor
PK
薬物動態
pharmacokinetics
QWBA
定量的全身オートラジオグラフィ
ー
quantitative whole body autoradiography
RBV
リバビリン
ribavirin
RNA
リボ核酸
ribonucleic acid
RSV
RS ウイルス
respiratory syncytial virus
TK
トキシコキネティクス
toxicokinetics
+
8
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
略号一覧（続き）
略号
日本語
英語
t1/2
消失半減期
estimate of the terminal elimination half-life of
the drug calculated by dividing the natural log of
2 by the terminal elimination rate constant (λz)
UDPGA
ウリジン二リン酸グルクロン酸
uridine 5’-diphosphate glucuronic acid
UGT
ウリジン二リン酸-グルクロン酸
転移酵素
uridine diphosphate-glucuronosyltransferase
UMP-CMPK
ウリジン一リン酸－シチジン一リ
ン酸キナーゼ
uridine monophosphate cytidine monophosphate
kinase
9
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
1. 非臨床試験の概括評価
1.1. 非臨床試験計画概略
本概要では、ソホスブビル（GS-7977）の評価のために実施した非臨床試験より得られた重要な
情報を記載した。
ソホスブビルは、C 型肝炎ウイルス（HCV）の非構造タンパク質 5B（NS5B）に特異的な新規
の直接阻害薬で、全てのジェノタイプ（GT）に対し in vitro HCV レプリコンリボ核酸（RNA）の
複製に対し強い阻害作用を示す。ソホスブビルは、2’-デオキシ-2’-フルオロ-2’-C-メチルウリジン
一リン酸（GS-606965）のヌクレオチドプロドラッグであり、肝細胞内で活性代謝物であるウリジ
ン三リン酸体（GS-461203）に変換される（図 2.4- 1）。
GS-9851 はソホスブビル及びそのジアステレオマーである GS-491241 を含有し、その比率は約
1：1 である。ソホスブビルは in vitro 又は in vivo で GS-491241 へ変換しないことが示されている
（試験番号 AD-334-2014；2.6.4.2.3 項）。GS-9851 は開発初期の非臨床及び臨床試験で使用された
が、その後の開発及び承認申請にはソホスブビルを選択した。また、主要な毒性試験はソホスブ
ビルを用いて実施された。ソホスブビル又は GS-9851 を経口投与したとき、血漿中にはソホスブ
ビル又は GS-9851 並びに代謝物である GS-566500（ヌクレオシド誘導体一リン酸アラニン）及び
GS-331007（ヌクレオシド誘導体）が存在し、これらは総曝露量の 95%以上を占めた。毒性試験
に使用した動物種でのソホスブビル又は GS-9851 の全身曝露は一過性で、主要代謝物である
GS-331007 と比較してソホスブビル又は GS-9851 の占める割合は低かった。マウス、ラット及び
イヌ血漿中では、大部分が GS-331007 であり、総曝露量の 80%超を占めていた。ラット（試験番
号 SA-PSI-7977-09-0001；2.6.6.8.5.1 項）及びイヌ（試験番号 SA-PSI-7977-09-0002；2.6.6.8.5.2 項）
では、同用量のソホスブビル又は GS-9851 の経口投与で、いずれも同程度の GS-566500 及び
GS-331007 の全身曝露が得られた。また、ソホスブビル及び GS-491241 の活性代謝物を含む全て
の代謝物は同一であることから（図 2.4- 1）、GS-9851 を用いた試験結果はソホスブビルの薬効及
び安全性評価に利用できる。
10
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
図 2.4- 1 ソホスブビルの細胞内代謝経路
ソホスブビルの 12 週及び 16 週間の臨床使用期間に必要な非臨床試験は全て完了した。これら
の非臨床試験には、一連の効力を裏付ける試験及び副次的薬理試験、安全性薬理コアバッテリー
試験、薬物動態（PK）試験、ラット単回経口投与毒性試験並びにマウス、ラット及びイヌを用い
た反復毒性試験、遺伝毒性試験、マウス及びラットを用いたがん原性試験、受胎能・初期胚発生・
出生前及び出生後の発生に関する生殖毒性試験、抗原性の評価、皮膚及び眼刺激性、GS-9851 と
ソホスブビルの比較毒性試験、及び不純物に関する毒性試験を含む。
一連の薬理試験において、GS-461203 は NS5B ポリメラーゼに対して特異的な酵素阻害作用を
示した［50%阻害濃度（IC50 値）
：0.36～3.3 µmol/L］。また、ソホスブビルは安定的に発現した HCV
GT 1a 型、1b 型、2a 型、3a 型及び 4a 型の全長レプリコン細胞、並びに GT 2b 型、5a 型、6a 型由
来の NS5B 配列をコードする GT 1b 型のキメラレプリコン細胞に対していずれも強力な抗ウイル
ス作用を示した［50%効果濃度（EC50 値）：0.014～0.11 µmol/L］。
ソホスブビルの吸収は良好で、毒性評価に用いた動物種（マウス、ラット、ウサギ及びイヌ）
では十分な曝露量が得られた。毒性試験では、ソホスブビルはマウスで 13 週間まで、ラットで
26 週間まで、イヌでは 39 週間まで忍容性良好であることが示された。げっ歯類では血漿中エス
テラーゼ活性が高いため、ソホスブビルは十分に測定できない。したがって、げっ歯類でのソホ
スブビルのトキシコキネティクス（TK）パラメーターは算出しなかった。ウサギとイヌではいく
つかの試験で、ソホスブビルの TK パラメーターを算出した。いずれの動物種でも GS-331007 が
血漿中での主要代謝物であり、総血漿中曝露量の 80%超を占めているため、全動物種で GS-331007
の TK パラメーターを算出した。また、主な毒性試験での未変化体又は代謝物の曝露量（AUC）
と HCV 感染患者に 1 日 1 回ソホスブビル 400 mg を投与したときの全身曝露量（ソホスブビルの
AUCtau：1.03 µg·h/mL、GS-331007 の AUCtau：7.12 µg·h/mL、2.7.2.3.4.4 項）との比をヒトに対する
曝露量比として算出した。
主要な安全性薬理試験、毒性試験及び TK 試験は、日米 EU 医薬品規制調和国際会議（ICH）が
発行するガイドライン、医薬品の安全性に関する非臨床試験の実施の基準（GLP）、又はその他の
11
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
適用可能な国際的な保健当局により公布された規制に従って実施した。予備試験及び探索的試験
は、GLP を遵守した試験施設で実施するか、又は適切な試験計画書及び文書に従って実施するこ
とでデータの完全性を確保した。
本概要で示した非臨床データは、成人 HCV 感染患者の治療に対してソホスブビルの使用を推奨
するものであり、ソホスブビルの良好なベネフィット・リスクプロファイルを裏付けるものと考
える。
12
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
2. 薬理試験
2.1. 効力を裏付ける試験
クローン A 細胞及び初代ヒト肝細胞において、ソホスブビルは活性代謝物であるウリジン三リ
ン酸型 GS-461203 に変換された（試験番号 PC-PSI-7977-09-0005；2.6.2.2.1 項）。また、GS-461203
は HCV GT 1～4 型の NS5B ポリメラーゼに対して酵素阻害活性を示した［IC50 値：0.36～3.3 μmol/L］
（試験番号 PC-334-2010；2.6.2.2.2 項）。
安定的に発現した HCV GT 1a 型、1b 型、2a 型、3a 型及び 4a 型の全長レプリコン細胞、並びに
GT 2b 型、5a 型又は 6a 型由来の NS5B 配列をコードする GT 1b 型のキメラレプリコン細胞を用い
て、ソホスブビルの in vitro 活性を評価した。ソホスブビルは全ての GT レプリコン細胞で強力な
活性を示し、EC50 値は 0.014～0.11 μmol/L であった（試験番号 PC-334-2005；2.6.2.2.3 項）。
被験者由来の分離株から得た NS5B 含有キメラレプリコン細胞に対するソホスブビルの活性を
評価したところ、非臨床試験で使用した実験レプリコン細胞と同様の活性を示した（試験番号
PC-334-2016；2.6.2.2.4 項）。
レプリコン含有細胞株を用いたソホスブビルの in vitro 耐性発現試験において、NS5B S282T 変
異が全てのレプリコン細胞株で検出され、S282T レベルの増加に伴ってソホスブビルに対する感
受性が低下した（試験番号 PC-334-2010；2.6.2.2.5 項）。しかし、S282T 変異はレジパスビル（LDV）
に対する交差耐性はなく、リバビリン（RBV）に対してはより高い感受性を示した（試験番号
PC-334-2006；2.6.2.2.5 項）。また、S282T 変異によって in vitro での RNA 複製能が著しく低下する
ことが示された（試験番号 PC-334-2009；2.6.2.2.5 項）。
一方、非ヌクレオシド阻害剤（NNI）、NS3 プロテアーゼ阻害剤（PI）、ヌクレオシド阻害剤（NI）
及び NS5A 阻害剤の耐性に関連した変異、並びに RBV に関連した変異を含むレプリコン細胞にお
いて、ソホスブビルの活性は保持された（試験番号 PC-334-2017、PC-334-2020 及び PC-334-2006；
2.6.2.2.6 項）。
2.2. 副次的薬理試験
ソホスブビルの HCV 以外のウイルス［ヒト免疫不全ウイルス（HIV）-1、ヒトライノウイルス
（HRV）10 型及び 14 型、RS ウイルス（RSV）、並びに A 型インフルエンザウイルス］に対する
活性を検討した結果、ソホスブビルはいずれのウイルスに対しても最高濃度である 100 μmol/L ま
で抗ウイルス活性を示さず、HCV に対する高い特異性を示した（試験番号 PC-334-2011；2.6.2.3.1
項）。また、GS-9851 は B 型肝炎ウイルス（HBV）に対し、著明な阻害を示さなかった（100 μmol/L
での阻害率：18%）（試験番号 PC-PSI-7851-08-0004；2.6.2.3.1 項）。
肝がん細胞株（Huh-7 及び HepG2）
、前立腺がん細胞株（PC-3）、肺線維芽細胞株（MRC-5）及
び T 細胞白血病細胞株（MT-4）を含む一連のヒト細胞株並びに初代肝細胞及び末梢血単核球
（PBMC、静止及び活性化細胞）を含むヒト初代培養細胞を用いてソホスブビルの細胞毒性を評
価した。ソホスブビルの 50%細胞毒性濃度（CC50）値は、Huh-7 に対して 66 µmol/L であったが、
13
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
それ以外の全てのヒト細胞株及び初代培養細胞ではいずれも検討した最高濃度 （89 又は
100 µmol/L）を超えており、細胞毒性を示さなかった（試験番号 PC-334-2025；2.6.2.3.2 項）。また、
GS-9851、GS-491241 並びに代謝物である GS-566500 及び GS-331007 は、肝がん細胞株（Huh-7 及
び HepG2）、膵臓がん細胞株（BxPC-3）及び T 細胞リンパ腫細胞株（CEM）など検討した複数の
細 胞 系 に お い て い ず れ も 細 胞 毒 性 を 示 さ な か っ た （ 試 験 番 号 PC-PSI-7851-08-0002 、
PC-PSI-7977-09-0004、PC-PSI-7851-08-0027 及び PC-PSI-7851-09-0002；2.6.2.3.2 項）
ソホスブビル及び GS-9851 は、ヒト細胞系のミトコンドリアデオキシリボ核酸（mtDNA）合成
及びシトクロム c オキシダーゼタンパク質発現に対してそれぞれの最高濃度まで影響を与えず、
ミ ト コ ン ド リ ア 毒 性 を 有 す る 可 能 性 は 低 い こ と が 示 さ れ た （ 試 験 番 号 PC-334-2012 、
PC-PSI-7851-08-0009 及び PC-334-2015；2.6.2.3.3 項）。
GS-461203 は、ヒト DNA ポリメラーゼ α、β 及び γ、ヒト RNA ポリメラーゼ II 並びにミトコン
ドリア RNA ポリメラーゼに対していずれも阻害作用を示さず、IC50 値は最高濃度（200 µmol/L）
より高かった（試験番号 PC-334-2013；2.6.2.3.4 項）。
受容体、酵素及びイオンチャネルに対する GS-9851 及び代謝物 GS-331007 の in vitro 相互作用を
評価したところ、GS-9851 及び GS-331007 は 10 µmol/L でいずれの分子に対しても 50%を超える
阻害や誘導を示さず、標的外分子に対する相互作用は認められなかった（試験番号
PC-PSI-7851-09-0004 及び PC-334-2026；2.6.2.3.5 項）。
2.3. 安全性薬理試験
GS-9851 の中枢神経系、心血管系及び呼吸器系に対する影響を検討するため、安全性薬理コア
バッテリー試験を実施した。
ラットを用いて GS-9851 の中枢神経系に対する作用を Irwin 法により評価した結果、最高用量
である 1000 mg/kg まで影響は認められなかった（試験番号 SA-PSI-7851-08-006；2.6.2.4.1 項）。
ヒト ether-à-go-go 関連遺伝子（hERG）カリウムチャネルに対して、GS-9851 及び代謝物
（GS-566500、GS-606965 及び GS-331007）は、最高濃度である 300 μmol/L
（GS-9851 及び GS-566500）
及 び 100 μmol/L （ GS-606965 及 び GS-331007 ） ま で 阻 害 作 用 を 示 さ な か っ た （ 試 験 番 号
SA-PSI-7851-08-009 、 PC-PSI-7851-08-0023 、 PC-PSI-7851-09-0001 及 び PC-PSI-7851-08-0028 ；
2.6.2.4.2.1 項）。
GS-9851 の心血管系に対する作用を、覚醒ビーグル犬を用いたテレメトリー法により評価した
結果、単回最高用量 1000 mg/kg まで心拍数、血圧、脈圧、体温並びに心電図（ECG）パラメータ
ー及び波形に対する影響は認められなかった（試験番号 SA-PSI-7851-08-007；2.6.2.4.2.2 項）。
ラットを用いて GS-9851 の呼吸器系への作用をヘッドアウト式プレチスモグラフィーにより評
価 し た 結 果 、 最 高 用 量 で あ る 1000 mg/kg ま で 影 響 は 認 め ら れ な か っ た （ 試 験 番 号
SA-PSI-7851-08-008；2.6.2.4.3 項）。
14
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
2.4. 薬力学的薬物相互作用試験
ソホスブビルは他の抗 HCV 薬との併用投与の可能性があること、また HCV と HIV に重複感染
した患者の治療に使用される可能性があることから、ソホスブビルと他の抗ウイルス薬との併用
による影響を in vitro で検討した。
ソホスブビルを NS5A 阻害剤 LDV と併用した時、NS5B NNI（GS-9190 及び GS-9669）と併用
した時、NS3 PI（GS-9451、テラプレビル及び boceprevir）と併用した時、又はインターフェロン
（IFN）-α と併用した時、いずれも相加的な抗ウイルス作用が認められた。ソホスブビルと RBV
を併用すると弱い相乗作用を示した。ソホスブビルと併用した薬剤との間にはいずれも明らかな
拮抗作用は認められなかった（試験番号 PC-334-2004 及び PC-334-2018；2.6.2.5.1 項）。
HIV ヌクレオシド／ヌクレオチド誘導体阻害剤を併用しても GS-9851 で処理したレプリコンで
の抗 HCV 作用に変化はなかった。また、GS-9851 は HIV ヌクレオシド／ヌクレオチド誘導体阻
害剤の抗 HIV 活性に対して拮抗作用を示さなかった（試験番号 PC-PSI-7851-08-0005 及び
PC-PSI-7851-08-0030；2.6.2.5.2 項）。
15
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
3. 薬物動態
ソホスブビル又は GS-9851 投与後の吸収、分布、
代謝及び排泄プロファイルを in vitro 及び in vivo
試験で評価した。また、ソホスブビルと他剤併用時の薬物相互作用についても検討した。さらに、
ソホスブビル及び GS-9851 をラット及びイヌに 14 日間反復投与した TK 試験の結果から、ソホス
ブビル及び GS-9851 の PK の類似性を評価した。
3.1. 分析法
ソホスブビルの GLP に基づく TK 試験ではバリデートされた分析法を用いた。その他の試験で
は適切な試験計画書に基づいて測定を実施し、データの信頼性を確保した（2.6.5.2 項及び 2.6.4.2
項）。
3.2. 吸収
3.2.1.
In vitro 試験
ソホスブビルの Caco-2 単層膜細胞での膜透過性は低く、濃度に依存して増加し、排出では飽和
傾向がみられた（試験番号 AD-334-2003；2.6.4.3.1.1 項）。ソホスブビル、GS-491241 及び GS-9851
は、人工胃液及び人工腸液中で安定であった（試験番号 PC-PSI-7977-09-0003 及び PC-PSI
-7851-08-0012；2.6.4.3.1.2 項）。
3.2.2.
単回投与
マウス、ラット及びイヌでのソホスブビル又は GS-9851 単回経口投与後の PK プロファイルを
検討した。マウス及びラットでの GS-9851 単回経口投与後の血漿中には GS-331007 が速やかに検
出されたが、GS-9851 は検出されなかった。この結果から、げっ歯類では血漿中エステラーゼ活
性が高いため、GS-9851 は血漿中で速やかに GS-331007 に変換されることが示唆された。活性代
謝 物 で あ る GS-461203 が 50 mg/kg 投 与 の ラ ッ ト 肝 臓 中 で 検 出 さ れ た （ 試 験 番 号
PC-PSI-7851-08-0017；2.6.4.3.2.1.2 項）。マウスでは 50 mg/kg で実施した薬物動態試験では肝臓中
に GS-461203 は検出されなかったが（試験番号 PC-PSI-7851-08-0019；2.6.4.3.2.1.1 項）、500～2000
mg/kg 投与で実施された毒性試験では検出された（試験番号 SA-PSI-7851-08-005；2.6.6.4.2.1 項）
。
イヌでのソホスブビルの吸収率は 39.7%、肝抽出率は 74%であった。イヌでのソホスブビル 5 mg/kg
経口投与後の肝臓中 GS-461203 の Cmax は 23760 ng/mL と高く、高濃度の GS-461203 が持続して認
められた（t1/2 = 17.8 時間）（試験番号 AD-334-2012 及び AD-334-2011；2.6.4.3.2.1.3 項）。
16
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
3.2.3.
反復投与
イヌ及びサルで GS-9851 の 1 日 1 回 4 日間反復経口投与後の血漿及び肝臓中代謝物の PK を検
討した。両動物種とも肝臓で検出された主要代謝物は GS-331007 及び GS-566500 であった。また、
イヌの肝臓では GS-461203 が高濃度で検出されたが、サルでは検出されなかった（試験番号
PC-PSI-7851-08-0018；2.6.4.3.2.2.1 項）。
マウス、ラット及びイヌでのソホスブビル反復経口投与毒性試験の TK 試験で血漿中ソホスブ
ビル及び代謝物の検討を行った。マウス及びラットでは血漿中エステラーゼ活性が高いために、
ソホスブビルは検出されなかった。GS-331007 の Cmax 及び AUC は、投与量の増加に伴って増加
した。曝露量に明らかな性差はみられず（最大で 3.6 倍）、反復投与による蓄積性もみられなかっ
た（試験番号 SA-PSI-7977-09-0008、SA-PSI-7977-10-0004 及び SA-PSI-7977-10-0003；2.6.4.3.2.2.2
項、2.6.4.3.2.2.3 項及び 2.6.4.3.2.2.4 項）。
ウサギ胚・胎児発生に関する試験で、妊娠ウサギに妊娠 6 日目から 19 日目までソホスブビルを
反復経口投与した後の血漿中ソホスブビル、GS-331007 及び GS-566500 の検討を行った（試験番
号 SA-PSI-7977-11-0005 及び SA-PSI-7977-11-0006；2.6.4.3.2.2.5 項）。ソホスブビルの投与量増加に
伴い、ソホスブビル、GS-331007 及び GS-566500 の曝露量も増加した。AUC0-24 はすべての投与量
でソホスブビルよりも代謝物の方が大きかった。妊娠 19 日目のソホスブビル及び代謝物の
AUC0-24 は妊娠 6 日目と比較して同様か又は大きかった。
3.3. 分布
3.3.1.
Sprague-Dawley ラット及び Long-Evans ラットでの組織内分布
白色及び有色ラットでの[14C]ソホスブビル単回経口投与後の放射能は速やかに吸収され、各組
織に広範に分布した。消化管、リンパ組織及び排泄組織で高い放射能が検出された（10 µg equiv./g
以上）。中枢神経系、骨、水晶体、白色脂肪での放射能濃度は低かった（1 µg equiv./g 未満）。各組
織の放射能は最終測定時点である投与後 144 時間又は 168 時間までに消失し、組織内濃度の大半
は投与後 48 時間までに定量下限（0.073 µg equiv./g）以下となった。ラットでのソホスブビル及び
代謝物のメラニンへの結合性はみられなかった（試験番号 SA-PSI-7977-09-0005；2.6.4.4.1.1 項）。
3.3.2.
血漿タンパク結合率
イヌ及びヒトでのソホスブビルの血漿タンパク結合率は低く（70%未満）、濃度依存性はみられ
なかった。マウス、ラット、ウサギ、イヌ及びヒトでの GS-331007 の血漿タンパク結合率は低く、
10%未満であった（試験番号 PC-PSI-7977-11-0001；2.6.4.4.2 項）。
3.3.3.
胎盤通過及び乳汁移行
妊娠、非妊娠及び分娩後の雌ラットでの[14C]ソホスブビル単回経口投与後の放射能は、速やか
17
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
に吸収され、各組織に広範に分布した（試験番号 SA-PSI-7977-11-0008；2.6.4.4.3 項）。胎盤を通過
した放射能が羊水に検出され、胎児での吸収が認められた。血液及び脳内放射能濃度は、胎児で
母体よりも高かった。胎児の肝臓中放射能濃度は母体肝臓中濃度の約 1/10 であり、腎臓では放射
能は検出されなかった。授乳児ラットでは、肝臓及び消化管内容物にのみ放射能が検出された。
出産後の雌ラットでの単回経口投与後のソホスブビルの乳汁移行を検討したところ、乳汁中放
射能濃度は低かった。投与後 1 時間の乳汁／血漿中放射能濃度比は 0.1 であった。
3.4. 代謝
3.4.1.
In vivo
マウス、ラット及びイヌで[14C]ソホスブビル単回経口投与後の血漿、尿及び糞中代謝物を検討
した。いずれの動物種でも血漿、尿及び糞中主要代謝物は GS-331007 であった。また、妊娠、非
妊娠及び分娩後の雌ラットでの[14C]ソホスブビル単回経口投与後の血漿及び乳汁中主要代謝物は
GS-331007 及びその硫酸抱合体であった（試験番号 PC-PSI-7977-11-0008、CH-PSI-7977-09-0002、
PC-PSI-7977-11-0009 及び CH-PSI-7977-0001；2.6.4.5.1 項）。
[14C]ソホスブビル経口投与後のマウス、ラット、イヌ及びヒト健康被験者での血漿、尿、糞中
の 主 要 代 謝 物 は GS-566500 及 び GS-331007 で あ っ た （ 試 験 番 号 PC-PSI-7977-11-0008 、
CH-PSI-7977-09-0002 及び CH-PSI-7977-09-0001；2.6.4.5.1 項、P7977-0312；2.7.2.2.2 項）。全動物
種で GS-331007 が主要代謝物であり、血漿中総曝露量の 80%超を占めていた。げっ歯類では血漿
中エステラーゼ活性が高いため、マウス及びラットではソホスブビルは検出されなかった。妊娠、
非妊娠、分娩後ラットの血漿及び出産後ラットの乳汁中では、GS-331007 及びその 2 つの硫酸抱
合体が主要代謝物であった（試験番号 PC-PSI-7977-11-0009；2.6.4.5.1.2.2 項）。推定代謝経路を図
2.4- 2 に示す。
18
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
図 2.4- 2 [14C]ソホスブビルを経口投与後の血漿、尿、糞及び乳汁中の推定代謝経路
3.4.2.
3.4.2.1
In vitro
細胞内代謝
ソホスブビル、GS-491241 及び GS-9851 はヒト血漿中では安定であったが、ヒト肝 S9 分画では
不安定であった（試験番号 PC-PSI-7851-08-0013 及び PC-PSI-7977-09-0002；2.6.4.5.2.1 項）。また、
GS-9851 はマウス血液中では不安定であったが、イヌ、サル及びヒト血液中では安定であった（試
験番号 PC-PSI-7851-08-0015 及び PC-PSI-7851-08-0016；2.6.4.5.2.1 項）。
ソホスブビルは、ヌクレオチドプロドラッグであり、活性代謝物 GS-461203 の生成には、肝細
胞内での活性化が必要である。ラット、イヌ、サル及びヒト肝細胞を用いた in vitro 試験で GS-9851
から GS-461203 の生成が認められた（試験番号 PC-PSI-7851-08-0011；2.6.4.5.2.2.6 項）。ヒト肝細
胞でのソホスブビルの代謝能は高く、ソホスブビルの臨床濃度を超える濃度であっても飽和はみ
19
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
られなかった（試験番号 PC-PSI-7851-08-00014；2.6.4.5.2.2.6 項）。14 ドナーから採取した全ての
ヒト肝細胞で GS-461203 の生成が認められ、性差はみられなかった（試験番号 AD-334-2017；
2.6.4.5.2.2.6 項）。代謝能は肝細胞ほど高くはないが、GS-9851 から GS-461203 への代謝は、抗 HCV
活性の評価に用いるクローン A レプリコンを含む肝細胞由来の細胞株でも認められた（試験番号
PC-PSI-7851-08-0010；2.6.4.5.2.2.7 項）
。また、ソホスブビル又は GS-9851 から GS-461203 への代
謝 は 、 ヒ ト の 末 梢 血 単 核 球 細 胞 で も 認 め ら れ た （ 試 験 番 号 PC-PSI-7851-09-0003 及 び
PC-PSI-7977-11-0004；2.6.4.5.2.2.8 項）。
ソホスブビルの細胞内活性化経路を図 2.4- 1 に示す。細胞内活性化経路の第一段階は、カテプ
シン A（CatA）とカルボキシルエステラーゼ 1（CES1）によるイソプロピルエステルの加水分解
である（試験番号 PC-PSI-7851-08-0026、PC-PSI-7851-09-0014 及び PC-PSI-7977-09-0001；2.6.4.5.2.2.1
項、2.6.4.5.2.2.2 項及び 2.6.4.5.2.2.3 項）。
これに続く Histidine triad nucleotide binding protein 1 (Hint1）
によるアミノ酸分離並びにウリジン一リン酸－シチジン一リン酸キナーゼ（UMP-CMPK）及びヌ
クレオシド二リン酸キナーゼ（NDPK）によるリン酸化反応で GS-461203 が生成される（試験番
号 AD-334-2018 及び AD-334-2019；2.6.4.5.2.2.4 項及び 2.6.4.5.2.2.5 項）［1］。
3.4.2.2
CYP、FMO 及び UGT による代謝
ソホスブビル、GS-566500、GS-606965 及び GS-331007 をヒト肝ミクロソームとインキュベート
した結果、ソホスブビルの代謝へのシトクロム P450（CYP）、フラビン含有モノオキシゲナーゼ
（FMO）及びウリジンン二リン酸グルクロン酸転移酵素（UGT）の関与の重要性は低いことが示
された。（試験番号 SA-PSI-7977-09-0004；2.6.4.5.2.3 項）。また、ソホスブビル及び GS-331007 を
ヒト CYP 発現系とインキュベートしたところ、いずれの化合物ともに検討した CYP（CYP1A2、
CYP2B6、CYP2C8、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6 及び CYP3A4）の基質ではないことが示され
た（試験番号 AD-3344-2015；2.6.4.5.2.4 項）。CYP 阻害剤であるリトナビル及びケトコナゾール存
在下でのインキュベートで、ソホスブビルから GS-461203 への活性化に著しい低下はなかった
（20%未満）
（試験番号 AD-334-2010；2.6.4.7.1.2 項）。非特異的 CYP 阻害薬である 1-アミノベン
ゾトリアゾールの存在下で、ソホスブビルの残存率が上昇したことから、ソホスブビルの代謝へ
の CYP の関与が示唆されたが、その程度は小さかった。GS-606965 はウリジン二リン酸グルクロ
ン酸（UDPGA）の存在下で、消失速度がわずかに上昇したことから（60 分間のインキュベート
で約 30%の減少）、GS-606965 の代謝に UGT の関与が示唆されたが、その程度は小さかった。ソ
ホスブビルの代謝への FMO 及び UGT の関与並びに GS-566500 及び GS-331007 の代謝への CYP、
FMO 及び UGT の関与は認められなかった。
20
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
3.5. 排泄
3.5.1.
マウス、ラット及びイヌ
マウス（試験番号 SA-PSI-7977-11-0007；2.6.4.6.1 項）、ラット（試験番号 SA-PSI-7977-09-0003；
2.6.4.6.2 項）及びイヌ（試験番号 SA-PSI-7977-10-0002；2.6.4.6.3 項）での[14C]ソホスブビル経口
投与後の放射能は主に尿中に排泄され、尿中排泄率はそれぞれ投与放射能の 65.6%、72%及び 81%
であった。胆管カニューレ挿入ラットでは、胆汁中に投与量の 6%が排泄された。マウス、ラット
及びイヌでの放射能総回収率は 85%超であり、ほとんどが投与後 48 時間以内に排泄された。
3.6. 薬物動態学的薬物相互作用
3.6.1.
代謝に関する薬物相互作用
3.4.2.2 項で示したように、ソホスブビル及びその代謝物は CYP、FMO 及び UGT 阻害薬との併
用で薬物相互作用を受ける（被相互作用薬）可能性は低い。また、ソホスブビル、GS-607596、
GS-606965、GS-566500、GS-461203 及び GS-331007 は、いずれも CYP3A4、CYP1A2、CYP2C19、
CYP2C9、CYP2C8 及び CYP2D6 に対して顕著な阻害を示さなかった（相互作用薬、IC50 ：
100 µmol/L 超）
（試験番号 PC-PSI-7977-09-0011、PC-PSI-7851-09-0009、及び AD-334-2020；2.6.4.7.1.1
項）。抗 HCV 薬である GS-5816、GS-5885（レジパスビル）
、BMS790052（daclatasvir）、GS-9190、
GS-9451 及び GS-9669 並びに CYP 阻害薬であるリトナビル及びケトコナゾールとのインキュベー
トで、ソホスブビルからの GS-461203 の生成に影響はみられなかった（最大で 30%未満の変化）
（試験番号 PC-PSI-7977-11-0002 及び AD-334-2010 ；2.6.4.7.1.2 項）。また、ソホスブビル、
GS-606965
及び GS-331007 は、UGT1A1 に対して顕著な阻害を示さなかった（IC50：50 µmol/L 超）（試験番
号 AD-334-2013 及び AD-334-2022；2.6.4.7.2 項）。ソホスブビルは、ヒト初代肝細胞で CYP 活性を
誘導せず、mRNA も増加させなかった。CYP2B6 活性並びに CYP2B6 mRNA 及び CYP3A4/5 mRNA
発現量の増加は、陽性対照であるフェノバルビタール及びリファンピンの 15%未満であった（試
験番号 PC-PSI-7977-10-0005；2.6.4.7.1.3 項）。
3.6.2.
トランスポーターに関する薬物相互作用
ソホスブビルは、消化管の排出トランスポーターである P-糖タンパク質（P-gp）（試験番号
8215026 及び AD-334-2002；2.6.4.7.3.1 項）や乳癌耐性タンパク質（BCRP）（試験番号
PC-PSI-7977-11-0006；2.6.4.7.3.2 項）の基質であるため、これらの排出トランスポーターの阻害薬
と併用した場合、消化管からのソホスブビルの吸収が増加する可能性がある。
ソホスブビル及び GS-331007 は、腎臓及び肝臓のトランスポーターを介する薬物相互作用発現
の可能性を示さなかった。ソホスブビル及び GS-331007 は MRP2 の阻害剤ではなかった（試験番
号 AD-334-2016；2.6.4.7.3.2 項）。ソホスブビル及び GS-331007 は、肝臓の取り込みトランスポー
ターである有機アニオントランスポータータンパク質（OATP）1B1 及び OATP1B3 の基質又は阻
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2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
害剤ではなかった（試験番号 PC-PSI-7977-11-0007；2.6.4.7.3.2 項）。ソホスブビル及び GS-331007
は、P-gp 及び BCRP の阻害剤ではなく、GS-331007 はこれらのトランスポーターの基質ではなか
った（試験番号
8215026 及び PC-PSI-7977-11-0006；2.6.4.7.3.1 項及び 2.6.4.7.3.2 項）。ソ
ホスブビル及び GS-331007 は、肝臓に発現する有機カチオントランスポーター（OCT）1 や胆汁
酸塩排出ポンプ（BSEP）の阻害剤ではなかった（試験番号 AD-334-2004、AD-334-2021 及び
AD-334-2005；2.6.4.7.3.2 項）。GS-331007 は腎臓から排泄されるが、腎臓に発現する有機アニオン
トランスポーター（OAT）3、OCT2 及び multidrug and toxin extrusion 1(MATE1) に対する阻害
作用はみられず、OAT1 に対してのみ 33%の阻害がみられた（試験番号 AD-334-2005；2.6.4.7.3.2
項）。
3.7. その他の薬物動態試験
製剤開発のサポートとしてイヌにソホスブビル 400mg を含む 3 種類の製剤を経口投与後の PK
プロファイルを評価した結果、検討に用いた 3 種類の製剤の曝露は類似していた。（試験番号
SA-PSI-7977-11-0004；2.6.4.8.1 項）。
ラット及びイヌにおけるソホスブビル又は GS-9851 の反復経口投与毒性試験の TK 試験で、ソ
ホスブビル及び GS-9851 の類似性を評価した。ラット及びイヌともに、ソホスブビル又は GS-9851
を経口投与後の GS-566500 及び GS-331007 の曝露は類似していたことから、両化合物は PK 的に
類似していることが示唆された。なお、未変化体については血漿中濃度が低いために評価できな
かった（試験番号 SA-PSI-7977-09-0001 及び SA-PSI-7977-09-0002；2.6.4.8.2 項）。
22
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
4. 毒性試験
ソホスブビルの包括的な毒性試験プログラムは完了している。これらの試験により、ソホスブ
ビルの単回及び反復毒性、遺伝毒性、がん原性及び生殖毒性の特性が明らかになった。本項に記
載する毒性試験でソホスブビルの潜在的な毒性は適切に評価されている。
4.1. 単回投与毒性試験
GS-9851 のラット単回経口投与毒性試験では、最高用量 1800 mg/kg まで投薬に関連した毒性は
認められなかった。概略の致死量は、1800 mg/kg 超であった（試験番号 SA-PSI-7851-09-0001；
2.6.6.2.1 項）。1800 mg/kg 投与での主要代謝物 GS-331007 の時間 0 から血漿中濃度定量可能最終時
点までの濃度－時間曲線下面積（AUClast）は 205 µg∙h/mL（雄）及び 176 µg∙h/mL（雌）であった。
4.2. 反復投与毒性試験
マウス、ラット及びイヌを用いて反復経口投与毒性試験を実施した。標的臓器は心臓（ラット
及びイヌ）、肝臓（イヌ）及び消化管（イヌ）であった。また、イヌでは赤血球パラメーターに軽
度（約 10%）な変化が認められた。
ソホスブビルのマウス 14 日間及び 13 週間投与試験では標的臓器は特定されなかった。14 日間
投与試験（試験番号 0515-09260；2.6.6.3.1.1 項）では、試験期間終了時までに 1500 mg/kg/日（高
用量）群の雄で体重減少が認められ、雄 1 匹が投与 10 日に死亡した。しかし、高用量群の雌では
影響はみられなかった。マウス 13 週間投与試験（試験番号 SA-PSI-7977-09-0008；2.6.6.3.1.2 項）
では、300 mg/kg/日群以上の雄及び 1000 mg/kg/日群の雌で体重増加抑制が認められた。1000 mg/kg/
日ではこれに対応する摂餌量の低下が一貫して認められた。マウス 13 週間投与試験における無毒
性量（NOAEL）は雄で 100 mg/kg/日、雌で 300 mg/kg/日であった。マウス 13 週間投与試験の NOAEL
での投与 87 日の GS-331007 の AUClast は雄で 23.7 µg·h/mL、雌で 161 µg·h/mL であった。
ラットでは、7 日間投与試験（試験番号 SA-PSI-7851-08-001；2.6.6.3.2.1 項、GS-9851 投与）に
おいて極めて高い用量（2000 mg/kg/日）で早期死亡及び多発性心筋線維変性が認められた。HCV
感染患者でのソホスブビル 400 mg 投与時曝露量（ソホスブビル及び GS-331007 の AUCtau はそれ
ぞれ 1.03 µg·h/mL 及び 7.12 µg·h/mL）を臨床曝露量としたとき、2000 mg/kg/日群での投与 1 日の
GS-331007 曝露量（AUClast、雄雌合算）は、臨床曝露量より 29 倍 高値であった。本試験の NOAEL
は、中間用量である 250 mg/kg/日であった（GS-331007 の AUClast は雄で 41.4 µg·h/mL、雌で
20.9 µg·h/mL）。500 mg/kg/日の GS-9851 及びソホスブビルを比較したラット 14 日間投与ブリッジ
ング試験では、GS-9851 投与群雄 10 匹中 1 匹に心尖部に軽微な心筋線維変性が認められた。しか
し、本病理組織学的所見はラット、特に雄ラットで自然発生的に頻繁に認められる所見であるた
め、ソホスブビル投与に関連するとはみなさなかった（試験番号 SA-PSI-7977-09-0001；2.6.6.8.5.1
項）［2］。GS-9851 の 28 日間投与試験（試験番号 SA-PSI-7851-09-0003；2.6.6.3.2.2 項）並びにソ
23
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
ホスブビルの 13 週間（試験番号 SA-PSI-7977-09-0007；2.6.6.3.2.3 項）及び 26 週間（試験番号
SA-PSI-7977-10-0004；2.6.6.3.2.4 項）投与試験では、有害作用は溶媒に関連する一般症状の頻度増
加に限定された。これらの試験の NOAEL はいずれも 500 mg/kg/日であった（投与 178 日の
GS-331007 の AUClast は雄 66.5 µg·h /mL、雌 65.5 µg·h /mL）。
イヌでは、GS-9851 の 7 日間投与試験（試験番号 SA-PSI-7851-08-002；2.6.6.3.3.1 項）において
極めて高い用量（1500 mg/kg/日、750 mg/kg/回を 1 日 2 回 6 時間間隔で投与）での忍容性が不良で、
局所消化管刺激の徴候、体重減少、摂餌量低下、アルカリホスファターゼ（ALP）
・アラニンアミ
ノトランスフェラーゼ（ALT）・アスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（AST）・ビリルビン
の上昇、肝細胞肥大、肝細胞内グリコーゲン減少、肝細胞質の微小胞形成及びアポト－シス、QT
及び QTc 間隔の延長（それぞれ 33%及び 19%、雄のみ）、大型非染色細胞数の増加、単核細胞の
胆嚢への浸潤が認められた。1500 mg/kg/日群の投与 7 日の GS-331007 曝露量（AUClast、雄雌合算）
は、臨床曝露量の 124 倍高値であった。これらの作用は全て休薬後 14 日間で回復した。NOAEL
は中間用量である 150 mg/kg/日であった（GS-9851 の AUClast は雄 9.88 µg·h/mL、雌 13.7 µg·h/mL。
GS-331007 の AUClast は雄 120 µg·h/mL、雌 91.6 µg·h/mL）。GS-9851 の 28 日間（試験番号
SA-PSI-7851-09-0002 ； 2.6.6.3.3.2 項 ） 及 び ソ ホ ス ブ ビ ル の 39 週 間 投 与 試 験 （ 試 験 番 号
SA-PSI-7977-10-0003 ； 2.6.6.3.3.4 項 ）の 500 mg/kg/日 群並 びに 13 週 間投 与 試験 （試 験 番号
SA-PSI-7977-09-0006；2.6.6.3.3.3 項）の 100 mg/kg/日群以上で、軟便や嘔吐の頻度増加を伴う局所
消化管刺激の徴候及び赤血球パラメーター・赤血球生成の軽度低下（28 日間投与試験でヘモグロ
ビン濃度約 10%低下）が認められた。これらの所見はいずれも休薬後、回復した。13 週間投与試
験では、500 mg/kg/日群の雄 1 匹で胃粘膜上に黒色の病巣が複数観察され、病理組織学的検査で粘
膜固有層の小出血として観察された。39 週間投与試験では、500 mg/kg/日群の雄 1 匹が投与 172
日に腸管出血を発症して瀕死状態となったため、安楽死させた。このイヌの臨床及び剖検・病理
組織学的検査所見は、特発性出血性胃腸炎と一致し、若齢成犬に発現する原因不明の自然発生疾
患であった［3］が、死亡例の発現は高用量群であり、ソホスブビルとの関連性は明確に否定でき
ない。39 週間投与試験の NOAEL は 100 mg/kg/日であった。NOAEL における投与 39 週の GS-331007
の AUC0-24 は雄で 76.3 µg·h/mL、雌で 104 µg·h/mL であった。
各動物種の最長投与試験における NOAEL での GS-331007 曝露量（AUClast）は、それぞれ臨床
曝露量と比較して、マウスで約 3 倍（雄）及び 23 倍（雌）、ラットで 9 倍（雄雌合算）、イヌで
13 倍（雄雌合算）高値であった。
4.3. 遺伝毒性
GS-9851 は、細菌を用いる復帰突然変異試験（試験番号 SA-PSI-7851-08-003；2.6.6.4.1.1 項）、ヒ
ト末梢血リンパ球を用いた染色体異常試験（試験番号 SA-PSI-7851-08-004；2.6.6.4.1.2 項）、in vivo
マウス小核試験（試験番号 SA-PSI-7851-08-005；2.6.6.4.2.1 項）で遺伝毒性を示さなかった。
24
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
4.4. がん原性試験
マウス（試験番号 TX-334-2002；2.6.6.5.1 項）及びラット（試験番号 TX-334-2001；2.6.6.5.2 項）
を用いたソホスブビルの 2 年間強制経口投与がん原性試験では、それぞれ最高用量の
200/600mg/kg/日（雄／雌）及び 750 mg/kg/日までの投与でソホスブビルにがん原性は認められな
かった。これら最高用量での GS-331007 曝露量は臨床曝露量と比較してそれぞれマウスで 7/30 倍
（雄／雌）、ラットで 16 倍であった。
4.5. 生殖毒性試験
ラット受胎能及び着床までの初期胚発生に関する試験（試験番号 SA-PSI-7977-10-0005；
2.6.6.6.1.1 項）では、500 mg/kg までのソホスブビルを連日経口投与しても雄雌ともに生殖能及び
初期胚発生に影響はみられなかった。本試験の NOAEL は、500 mg/kg/日（高用量）であった。
ラット胚・胎児発生に関する試験（試験番号 SA-PSI-7977-10-0008；2.6.6.6.2.1 項）では、妊娠 6
～18 日にソホスブビルを 500 mg/kg まで連日経口投与したが、子宮内の胎児発育、生存、また胎
児の外表、内臓、骨格形成に影響はなかった。本試験の NOAEL は、500 mg/kg/日（高用量）であ
った（妊娠 18 日の GS-331007 の AUC0-24 は 72.1 µg·h/mL）。
ウサギ胚・胎児発生に関する試験（試験番号 SA-PSI-7977-11-0006；2.6.6.6.2.4 項）では、妊娠 6
～19 日にソホスブビルを 300 mg/kg まで連日経口投与したが、子宮内の胎児発育、生存、また胎
児の外表、内臓、骨格形成に影響はなかった。本試験の NOAEL は、300 mg/kg/日（高用量）であ
った。妊娠 19 日のソホスブビルの AUC0-24 は 8.66 µg·h/mL、GS-331007 の AUC0-24 は 200 µg·h/mL
であった。
ラット受胎能及び着床までの初期胚発生に関する試験並びにラット胚・胎児発生に関する試験
の NOAEL における GS-331007 の曝露量（AUC）は、臨床曝露量と比較して、それぞれ約 8 倍［雄
雌合算、ラット 28 日間投与試験（試験番号 SA-PSI-7851-09-0003）の投与 24 日の AUClast から概
算］及び 10 倍高値であった。ウサギ胚・胎児発生試験では、NOAEL でのソホスブビル及び
GS-331007 の曝露量（AUC）は、臨床曝露量のそれぞれ 8 倍及び 28 倍高値であった。
ラット出生前及び出生後の発生並びに母体機能に関する試験（試験番号 TX-334-2003；2.6.6.6.3.1
項）では、母動物の一般毒性並びに母動物の生殖能及び出生児の成長に関する NOAEL はいずれ
も 500 mg/kg/日であった。
授乳 10 日の NOAEL での母動物における GS-331007 の曝露量（AUClast）
は、83.3 µg·h/mL であり、臨床曝露量の約 12 倍高値であった。放射標識したソホスブビルを用い
て母乳への移行を検討した単回投与試験では、ラットの母乳にソホスブビルは検出されず、主要
代謝物 GS-331007 が検出され、投与 1 時間後の放射能の母乳対血漿中濃度比は 0.1 であった（試
験番号 SA-PSI-7977-11-0008；2.6.4.4.3 項及び PC-PSI-7977-11-0009；2.6.4.5.1.2.2 項）。
4.6. 局所刺激性試験
ソホスブビルは経口剤である。ソホスブビルの反復経口投与毒性試験成績から消化管に対する
局所忍容性を評価した。イヌを用いた試験では、対照群と比較して 100 mg/kg/日以上の用量でソ
25
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
ホスブビル投与に関連した嘔吐及び軟便・下痢の発現頻度が上昇した。13 週間投与試験で
500 mg/kg/日を投与した雄 4 匹中 1 匹で胃粘膜に黒色の病巣が認められ、これは胃幽門部の粘膜固
有層の小出血に対応するものであった。しかし、嘔吐又は軟便・下痢を認めた 500 mg/kg/日群以
上のイヌの消化管では、当該イヌ以外、組織学的変化が認められていないことから、この 1 匹に
認められた剖検・組織学的所見と、1500 mg/kg/日までを投与した全試験を通じて複数の動物で認
められた嘔吐又は軟便・下痢などの一般症状の結果との関連性は明確でない。軟便はラットの試
験でも観察されているが、同様の所見が溶媒対照群の動物にも認められた。したがって、ラット
の消化管に対する作用の一部は投与した溶媒によるものであると考えられた。本所見に関連した
組織学的所見は観察されなかった。
ソホスブビルは、皮膚刺激性はない薬剤に区分され（試験番号 TX-334-2009；2.6.6.7.2 項）、ま
た眼に対する刺激性も重度ではないと予測された（試験番号 TX-334-2008；2.6.6.7.1 項）。有色及
び白色ラットを用いた定量的全身オートラジオグラフィー（QWBA）試験では、ソホスブビル及
び代謝物は皮膚や眼の組織に蓄積しなかった（試験番号 SA-PSI-7977-09-0005；2.6.4.4.1.1 項）。ま
た、ソホスブビルは 290～700 nm の範囲内の光を吸収せず、ソホスブビルに光毒性を示す非臨床
又は臨床所見はなかった。したがって、ソホスブビルについては光毒性試験を実施する必要はな
いと判断した。
4.7. その他の毒性試験
4.7.1.
抗原性
ソホスブビルは皮膚感作性を示さなかった（試験番号 TX-334-2010；2.6.6.8.1.1 項）
。
4.7.2.
免疫毒性試験
ソホスブビルについて独立した免疫毒性試験は実施していない。一般毒性試験の結果で免疫毒
性の評価が可能と判断した。ラット 7 日間反復投与試験ではリンパ球枯渇及び単細胞性リンパ球
壊死が認められ、イヌ 7 日間反復投与試験では胸腺萎縮が認められたが、これらの変化はラット
では致死量（2000 mg/kg/日）で、またイヌでは GS-9851 の忍容性不良の高用量（1500 mg/kg/日）
で発生した。ソホスブビルのラット及びイヌを用いた長期の反復投与毒性試験のデータ（血液学
的検査、リンパ組織重量、リンパ組織の病理組織学的検査及び骨髄細胞充実度）からは、ソホス
ブビルの免疫毒性の可能性は示唆されなかった。
4.7.3.
代謝物試験
ソホスブビルの代謝物については、特に試験は実施していない。ソホスブビルはヒトに特異的
な代謝物はなく、主要代謝物は全動物種間で同様であった（2.6.4.5.1 項）。主要代謝物である
GS-566500 及び GS-331007 については、マウス、ラット及びイヌを用いた反復投与試験、in vivo
26
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
マウス小核試験、マウス及びラットがん原性試験、胚・胎児発生毒性試験並びに出生前及び出生
後の発生並びに母体機能に関する試験で評価されている。
4.7.4.
不純物・分解生成物
原薬又は製剤のロットでソホスブビルに関連する不純物及び分解生成物が特定されている。非
臨床毒性試験で使用した原薬の不純物プロファイルを 2.6.7.4 項に示す。ソホスブビルの工程内中
間体及び潜在不純物に対する in silico 評価では、変異原性、染色体損傷、遺伝毒性、がん原性に
ついて検討したところ、ソホスブビルにない構造アラートは認められなかった（2.3.S.2.6.2.3 項、
不純物に関する管理戦略）。
また、ラット反復投与試験を実施して、ソホスブビルに関連する工程内不純物からの予期せぬ
毒性作用の有無を判定した（試験番号 TX-334-2007；2.6.6.8.4.1 項）。投薬に関連した有害作用は
認められず、ソホスブビルに関連する工程内不純物を含有するロットを投与した動物でみられた
所見とこれまでの試験で観察された所見、又は比較対照ロットでみられた所見に差はなかった。
4.7.5.
その他の毒性試験
ソホスブビルと GS-9851 の 500 mg/kg/日での 14 日間経口投与によるブリッジング試験をラット
（試験番号 SA-PSI-7977-09-0001；2.6.6.8.5.1 項）及びイヌ（試験番号 SA-PSI-7977-09-0002；2.6.6.8.5.2
項）で実施した。その結果、GS-9851 とソホスブビルの毒性及び全身曝露プロファイルに差はな
かった。
4.8. 曝露量比
ソホスブビル又は GS-9851 を用いた各種毒性試験での NOAEL における曝露量（AUC）と HCV
感染患者でのソホスブビル 400 mg 投与時の曝露量（ソホスブビル及び GS-331007 の AUCtau はそ
れぞれ 1.03 µg·h/mL 及び 7.12 µg·h/mL、2.7.2.3.4.4 項）とを比較し、曝露量比を算出した。マウス
及びラットでは血漿中エステラーゼ活性が高く、GS-9851 及びソホスブビルは不安定であるため、
主要代謝物 GS-331007 の曝露量を比較した。ウサギ及びイヌでは未変化体及び GS-331007 の曝露
量を比較した。これらの試験から得られた曝露量比の結果を表 2.4- 1 に示す。いずれの試験にお
いても NOAEL での曝露量比は 2.9 倍以上であった。
27
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
表 2.4- 1 ソホスブビル又は GS-9851 の各種非臨床試験での NOAEL における曝露量と HCV 感
染患者にソホスブビル 400 mg を投与したときの曝露量に基づく曝露量比
Type of study
NOAEL
(mg/kg)
Analytea
Cmaxb
(µg/mL)
(M / F)
1800
GS-331007
15.0 / 15.2
AUC0-tlastb
(µg•h/mL)
(M / F)
Exposure
Marginc
(M / F)
205 / 176
29/25
Single Dose Toxicity Studies
Rats
Repeat Dose Toxicity Studies
14-day in Mice
M: 500
F: 1500
13-Week in Mice
M: 100
F: 300
GS-331007
3.59 /16.1
23.7 /161
3.3/23
7-day in Rats
250
GS-331007
2.74 / 1.35
41.4 / 20.9
5.8/2.9
28-day in Rats
500
Toxicokinetic evaluation was not conducted
GS-9851
0.008 / 0.030
0.007 / 0.068
ND
GS-331007
3.94 / 3.91
55.0 / 59.3
7.7/8.3
13-Week in Rats
500
GS-331007
4.30 / 5.05
74.1 / 62.0
10/8.7
26-Week in Rats
500
GS-331007
3.79 / 4.73
66.5 / 65.5
9.3/9.2
7-day in Dogs
150
GS-9851
4.59 / 5.04
9.88 / 13.7
ND
GS-331007
8.99 / 5.79
120 / 91.6
17/13
GS-9851
4.48 / 10.4
14.0 / 22.4
ND
28-day in Dogs
100
GS-331007
3.54 / 6.01
39.7 / 68.6
5.6/9.6
13-Week in Dogs
100
Sofosbuvir
12.3 / 8.98
24.4 / 19.9
24/19
GS-331007
6.83 / 8.32
86.8 / 90.2
12/13
39-Week in Dogs
100
GS-331007
6.60 / 9.89
76.3 / 104
11/15
Carcinogenicity
Mice
200/600
GS-331007
5.15/30.5
48.0/214
6.7/30
Rats
750
GS-331007
7.60/9.32
96.6/125
14/18
Reproductive Development studies
Fertility and Early Embryonic
Development Study in Rats
500
Embryo-Fetal Development Study in
Female Rats
500
Embryo-Fetal Development Study in
Female Rabbits
300
Prenatal and Postnatal Developmental
Toxicity including Maternal Function
in Rats
500
Toxicokinetic evaluation was not conducted
GS-331007
3.50
72.1
10
Sofosbuvir
1.89
8.66
8.4
GS-331007
22.2
200
28
GS-331007
6.73
83.3
12
NOAEL = No Observed Adverse Effect Level; ND = Not Determined; M = Male; F = Female
a
GS-9851 and/or Sofosbuvir toxicokinetics were not determined for most rodent studies due to instability in rodent
plasma
b
Reported values were obtained at steady state, or as specified.
c
Based on Sofosbuvir and GS-331007 clinical AUCtau at 400 mg (Sofosbuvir = 1.03 µg·h/mL; GS-331007 = 7.12 µg·
h/mL)
28
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
4.9. 標的臓器
ソホスブビル及び GS-9851 を用いた包括的な非臨床試験を実施した。反復投与毒性試験では（マ
ウスで 13 週間まで、ラットで 26 週間まで、イヌで 39 週間まで）、極めて高い用量で標的臓器は
心臓（ラット及びイヌ）
、肝臓（イヌ）、消化管（イヌ）、造血細胞（イヌ）であった。心臓及び肝
臓への毒性は、いずれも 7 日間投与試験でラットへの致死量の投与及びイヌへ不耐量を投与した
際に認められ、低用量を長期にわたり投与しても、これらの臓器に毒性は認められなかった。イ
ヌで観察された消化管への作用及び赤血球パラメーターの軽微な低下に関連した有害作用は臨床
では観察されなかった。ソホスブビルの安全性薬理、遺伝毒性、がん原性、生殖発生毒性及び局
所忍容性試験では、有害作用は認められなかった。ソホスブビル及び GS-9851 投与で観察された
標的臓器への毒性を以下にまとめる。
4.9.1.
心血管系
ラットでは、GS-9851 の高用量群（2000 mg/kg/日）で多発性心筋線維変性が認められ、おそら
くこれが 7 日間投与試験で投与 5 日までに発生した数匹の死亡の原因と考えられた。本所見は炎
症の血液学的検査所見や血清中 AST 濃度の上昇とは関連していなかった。この初期の毒性試験で
は、その他の心筋損傷のバイオマーカー（例えばトロポニン）は評価しなかった。また、当該高
用量群のラット数匹では投与中止後 3 日及び 17 日にも心筋変性が認められており、心筋変性の消
失・回復が認められない、又は遅延していたことが示唆された。続く GS-9851 のラット 28 日間反
復投与試験では、高用量群（500 mg/kg/日）でも心筋変性は認められておらず、対照群と比較して
もクレアチンキナーゼやトロポニン I 濃度に変化はなかった。26 週間までのソホスブビルの長期
投与試験でも心毒性を示す所見は認められず、7 日間投与試験で観察された当該作用は、致死量
に達する極めて高い全身曝露に関連するものであることが示唆された。GS-9851 とソホスブビル
を比較した 14 日間投与ブリッジング試験で GS-9851（500 mg/kg/日）群の雄 1 匹の心尖部に、軽
微な心筋線維変性が認められたが、この病理組織学的所見はラット、特に雄ラットで高頻度で自
然発生する所見であるため、ソホスブビルに関連するものではないと考えられた［2］。7 日間投
与試験における致死量 2000 mg/kg/日での主要代謝物 GS-331007 の曝露量（AUC：雄 219 及び雌
193 µg·h/mL）は、臨床曝露量の約 27～31 倍であった。26 週間長期投与試験では、9 倍までの曝
露量比（雌雄合算）で心臓に変化はなかった。
イヌでは、7 日間投与試験で 1500 mg/kg/日の GS-9851（毒性量）を投与した雄で QTc 間隔の 19%
延長が認められたが、同群の雌では ECG に異常所見はなかった。本試験における 1500 mg/kg/日
群の GS-331007 の Cmax（雄 53.8 µg/mL 及び雌 51.1 µg/mL）は、臨床での 400 mg 投与時の Cmax
（0.582 µg/mL、2.7.2.3.4.4 項）と比較して、約 90 倍（雄雌合算）高値であった。テレメトリーに
よりモニタリングしたイヌを用いた心血管系に対する安全性薬理試験では、GS-9851 は最高用量
の 1000 mg/kg でも心血管系に異常所見を認めなかった（試験番号 SA-PSI-7851-08-007；2.6.2.4.2.2
項）。また、ソホスブビルの 39 週間までの 500 mg/kg/日の 1 日 1 回経口投与、又は GS-9851 の 28
日間投与でも心電図パラメーター（ECG）に影響はみられず、心血管系の異常所見はなかった。
29
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
さらに、健康被験者を対象に治療用量を超える用量 1200 mg を投与してさらに詳細な QT 試験を
実施したところ、QTc に対するソホスブビルの影響は認められず、ECG 又は波形に臨床上重要な
変化はみられなかった（2.7.4.4.2.1 項）。したがって、ソホスブビルが臨床使用において QT 延長
を惹起する可能性は低いと考えられる。
4.9.2.
肝胆道系
イヌでは、GS-9851 の 7 日間投与試験での 1500 mg/kg/日群で ALP、ALT、AST、ウロビリノー
ゲン及びビリルビン濃度が上昇し、関連する肝臓の病理組織学的所見が観察された（肝細胞肥大、
肝細胞質の微小胞形成及びアポトーシス、肝細胞内のグリコーゲン低下、クッパー細胞での色素
沈着、胆嚢への単核細胞浸潤）。14 日間の回復期間終了時には、これらの血液生化学的検査値変
動や病理組織学的所見は認められなかった。また、最高用量 500 mg/kg/日のソホスブビル又は
GS-9851 を連日 39 週間まで経口投与しても、肝臓に関連した血液生化学的検査変動や病理組織学
的所見は認められなかった。イヌ 39 週間投与試験での 500 mg/kg/日群の GS-331007 の曝露量比は
27 倍（雄雌合算）であった。
4.9.3.
消化管
ソホスブビル又は GS-9851 の反復経口投与後に、ラット及びイヌで軟便・下痢を示した個体数
及び発現頻度が増加し、イヌでは嘔吐の個体数及び発現頻度が増加した。ラットでは、溶媒対照
群でも同様の消化管関連の所見が観察されたことから、これらの一般症状の少なくとも一部は溶
媒（30%ポリエチレングリコール 400、30%ポリソルベート 20、20%トウモロコシ油、20%水、又
は 95%ポリエチレングリコール 400、5%ポリソルベート 80）に関連すると考えられた。また、投
与の継続により多数のラットでこれらの消化管関連の一般症状は消失し、試験動物の健康状態に
は影響はなく、関連した病理組織学的所見は認められなかった。イヌでは、これらの一般症状は
病理組織学的所見を伴わなかったが、GS-9851 の 7 日間投与試験での 1500 mg/kg/日群の数匹で観
察された胃粘膜表面の粘液分泌の増加は局所刺激が反映された結果と考えられる。イヌ 13 週間投
与試験では、500 mg/kg/日群の 8 匹中 1 匹の胃粘膜上に点状出血が認められた。イヌ 39 週間投与
試験では、500 mg/kg/日群の 24 匹中 1 匹が、投与 172 日に腸管出血を発現して瀕死状態となった
ため、安楽死させた。このイヌの臨床及び剖検・病理組織学的所見は、特発性出血性胃腸炎と一
致するもので、若齢成犬に発現する原因不明の自然発生疾患であった［3］。しかし、これら 2 匹
のイヌで認められた所見はソホスブビルとの因果関係を否定できない。これまでに実施したソホ
スブビルの臨床試験では、臨床上重要な消化管関連の有害作用は観察されていない（2.7.4.2.1 項）。
4.9.4.
造血細胞（赤血球パラメーター・赤血球生成）
イヌでは、高用量の GS-9851 又はソホスブビルの反復投与により赤血球生成の低下や血中赤血
球パラメーターが低下（赤血球数、ヘモグロビン濃度、又はヘマトクリット値の軽度な低下）す
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2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
る可能性が示唆された。イヌ 28 日間及び 13 週間投与試験では、それぞれ 500 mg/kg/日及び
100 mg/kg/日群以上で血中赤血球パラメーターが軽度低下し、骨髄検査で軽微な赤血球生成の低下
が認められた。しかし、イヌ 39 週間投与試験では、数匹に赤血球生成のわずかな低下が認められ
たものの、500 mg/kg/日群で赤血球パラメーターへの影響はなかった。マウス及びラットでは、い
ずれの用量でも血液学的パラメーターにソホスブビルの影響はみられなかった。即ち、マウスで
は最高用量 1000 mg/kg/日を 13 週間まで投与しても影響はなく、ラットでは最高用量 500 mg/kg/
日を 26 週間まで投与しても影響はなかった。また、26 週間まで投与したラットの骨髄検査にも
異常はなかった。臨床では、健康被験者又は HCV 感染患者にソホスブビル単剤を投与したとき血
液毒性は示されていない（2.7.4.3.1 項）。
31
2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
5. 考察及び結論
非臨床 in vitro 及び in vivo で得られた試験成績により、HCV 感染症の治療薬として推奨される
ソホスブビルの薬理学的根拠は科学的に適切であると考えられた。ソホスブビルの PK 及び毒性
プロファイルは、複数の動物種でその特性が十分に明らかにされている。ソホスブビルは臨床試
験成績により、十分な忍容性と安全性プロファイルが示されており、成人 HCV 感染患者に対する
投与が可能と考えられた。本概要に示す総括的な非臨床プログラムは、以下の点でソホスブビル
の有効性及び安全性を十分に支持するものであると考えられる。
ソホスブビルは、HCV レプリコン細胞を用いた試験において広範にわたる GT の HCV RNA 複
製を強力に阻害した。ソホスブビルの活性代謝物である GS-461203 は NS5B ポリメラーゼを直接
阻害し、ソホスブビルによる RNA 複製阻害の作用機序は NS5B ポリメラーゼの阻害であることが
示された。
一連のヒト細胞株及びヒト初代培養細胞を用いた in vitro 試験においてソホスブビルによる細胞
毒性は認められなかった。また、ソホスブビルはミトコンドリア毒性を有する可能性が低いこと
が示された。さらに、GS-461203 は in vitro でヒト DNA ポリメラーゼ、RNA ポリメラーゼ及びミ
トコンドリア RNA ポリメラーゼの阻害を示さなかった。また、GS-9851（10 µmol/L）は検討した
受容体、酵素及びイオンチャネルに対していずれも相互作用を示さなかった
安全性薬理試験では、GS-9851 が中枢神経系、心血管系及び呼吸器系に影響しないことが示さ
れた。薬力学的薬物相互作用試験では、ソホスブビルと他の抗 HCV 薬との併用により相加的～弱
い相乗的な抗ウイルス作用が認められ、拮抗作用は認められなかった。この結果は、ソホスブビ
ルと他の抗 HCV 薬との併用療法を支持するものである。
マウス、ラット及びイヌにおけるソホスブビル又は GS-9851 経口投与後の吸収は良好であった。
マウス、ラット及びイヌでの[14C]ソホスブビル経口投与後の血漿中主要代謝物は GS-331007 であ
り、血漿中総放射能の 80%超を占めていた。マウス及びラットでは血漿中エステラーゼ活性が高
いために、血漿中に未変化体（ソホスブビル又は GS-9851）は検出されなかった。マウス（500 mg/kg）、
ラット（50 mg/kg）及びイヌ（5 mg/kg）の肝臓中には活性代謝物である GS-461203 が検出された。
マウス、ラット及びイヌにおけるソホスブビル又は GS-9851 の反復投与による明らかな蓄積性は
みられなかった。ラットでの[14C]ソホスブビル経口投与後の組織内分布試験では、消化管、リン
パ系及び排泄系組織に高濃度の放射能が認められた。妊娠ラットでの[14C]ソホスブビル経口投与
後の放射能は胎盤を通過して胎児に移行した。乳汁移行性は低かった。マウス、ラット及びイヌ
では、ソホスブビルは GS-331007 として主に尿中に排出された。
ソホスブビルは他剤との併用で CYP を介した薬物相互作用を生じる可能性は低いが、消化管排
出トランスポーターの誘導剤又は阻害剤との併用で薬物相互作用を受ける可能性があると考えら
れた。ソホスブビルは P-gp 及び BCRP の基質であるため、これらトランスポーターの誘導剤との
併用で吸収が低下し、阻害剤との併用で吸収が増加する。消化管の P-gp の発現は、プレグナン X
受容体やリファンピン、セイヨウオトギリソウなど、この核内受容体と相互作用する P-gp の誘導
剤による影響を受け、ソホスブビルの吸収が低下する可能性がある。BCRP の発現は、アリール
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2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
炭化水素受容体による影響を受けると報告されているが、BCRP の誘導を介した臨床上重要な薬
物相互作用の報告はない。ソホスブビルは、明らかな CYP の阻害剤及び誘導剤ではなく、UGT1A1
も阻害しなかった。さらに P-gp 及び BCRP の阻害剤ではなかった。ソホスブビル及び GS-331007
は、検討した肝臓に発現するトランスポーター（OCT1、OATP1B1、OATP1B3、BSEP など）や腎
臓に発現するトランスポーター（OCT2、OAT1、OAT3、MATE1 など）の基質ではなく、また阻
害剤でもなかった。
ソホスブビルは、広範にわたり加水分解酵素による代謝を受ける。ソホスブビルの細胞内活性
化経路については、その特性が完全に明らかにされている。第一段階は CES1 又は CatA によるエ
ステル開裂、Hint1 によるリン酸アミドの開裂の加水分解ステップ、次にピリミジンヌクレオチド
生合成経路によるリン酸化である。ソホスブビルを in vitro で各動物種の肝細胞とインキュベート
したところ、活性代謝物であるヌクレオシド三リン酸（GS-461203）が効率よく生成された。また、
イヌでの経口投与後の肝臓中には高濃度の GS-461203 が効率よく生成された。ソホスブビルの細
胞内活性化経路は、一般的に薬剤の薬理的有効濃度では阻害されない低親和性／高活性の加水分
解酵素とヌクレオチドのリン酸化経路を介している。
ヒト初代肝細胞を用いたテラプレビル（プロテアーゼ阻害剤［4］）及び CES 阻害剤であるビス
（4-ニトロフェニル）フォスフェート及びによるソホスブビルの活性化への阻害が報告されてい
る［1］。テラプレビルの臨床用量での最大血漿中濃度（総血漿中濃度：5.2 µmol/L、血漿中遊離体
濃度：約 1.7 µmol/L）は CatA に対する IC50 値（0.21 µmol/L）よりも高いため、テラプレビルは臨
床上重要な CatA 阻害剤である可能性がある。テラプレビルは CatA の阻害剤となりうるが、CES1
の阻害剤ではないことが示されている（IC50：100 µmol/L 超［1］）。ソホスブビルは、CatA 及び
CES1 により活性化されるが、ヒト肝細胞内では CES1 がソホスブビル活性化の主要な役割を担っ
ていることから、テラプレビルをソホスブビルと併用してもソホスブビルの活性化に対して臨床
的に重要な影響を起こす可能性は低いと考えられる。
毒性試験における標的臓器は、心血管系、肝胆道系、消化管及び造血細胞（赤血球）系であっ
た。これらの標的臓器は、ソホスブビルの極めて高い曝露で観察され、ラットでは致死量で、イ
ヌでは不耐量で特定された。消化管における毒性は、主に嘔吐や軟便・下痢として発現した。ラ
ット及びイヌにおける消化管関連の一般症状は全て、休薬後に消失した。短期投与試験の極めて
高い用量では、ラットで心筋線維変性が、また雄イヌでは QT/QTc 延長が認められた。しかしな
がら、これに続く長期投与試験ではこれらの所見はみられなかった。これら長期投与試験では、
ラットやイヌで心臓に関連する病理組織学的変化は認められず、また最高用量（500 mg/kg/日）を
投与したイヌでも ECG パラメーターに差はなかった。また、イヌ短期試験では、GS-9851 の高用
量群で病理組織学的所見を伴う肝臓に関連した血液生化学的検査値の変動も認められた。この血
液生化学的検査値の変動及び病理組織学的所見は可逆性で、心臓と同様、ソホスブビルの長期投
与後では肝臓の有害所見はみられなかった。このことは、心臓及び肝臓に関連した毒性所見は高
い曝露で発生し、投与期間の長短に依存するものではないことを強く示唆している。イヌで観察
された血中赤血球パラメーター及び赤血球生成の軽度な低下は、試験動物の健康状態に影響を及
ぼさず、有害作用とはみなさなかった。げっ歯類では赤血球パラメーター又は赤血球生成に変化
はみられなかった。これまでのソホスブビルの臨床試験では、これらの標的臓器への毒性は認め
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2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
られていない（2.7.4.3.1 項）。このように、ソホスブビルの毒性プロファイルの詳細な評価を実施
した結果、ソホスブビルの忍容性は、マウスでは 13 週間まで、ラットでは 26 週間まで、イヌで
は 39 週間まで、いずれも良好であった。各 NOAEL での GS-331007 の AUC 全身曝露量は、HCV
感染患者での推奨臨床用量 400 mg 投与時の曝露量と比較して、マウス、ラット及びイヌでそれぞ
れ 3/23 倍（雄/雌）、9 倍（雄雌合算）
、13 倍（雄雌合算）高値であった。
細菌を用いた復帰突然変異試験、ヒト末梢血リンパ球を用いた染色体異常試験及びマウス小核
試験で、ソホスブビルはいずれも陰性であった。したがって、ソホスブビルは遺伝毒性を持たな
いと考えられる。マウス及びラットを用いたソホスブビルのがん原性試験ではがん原性は認めら
れなかった。生殖発生毒性試験では、ソホスブビルは有害作用を示さなかった。
同定された不純物及び分解生成物については、ソホスブビルの一般毒性試験及び不純物毒性試
験で評価した。ソホスブビルは、皮膚に対する刺激性はないと考えられ、眼に対する刺激性も重
度ではなく、皮膚感作性試験でも陰性であった。
以上のように、複数の動物種（げっ歯類及び非げっ歯類）を用いた一連の in vitro 及び in vivo
試験により、ソホスブビルの非臨床安全性プロファイルが確認されている。したがって、本概要
で示した非臨床データは、成人 HCV 感染患者の治療に対してソホスブビルの使用を推奨するもの
であり、ソホスブビルの良好なベネフィット・リスクプロファイルを裏付けるものと考える。
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2.4 非臨床試験の概括評価
ソバルディ®錠 400 mg
6. 参考文献
1
2
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