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5 1酪農場における牛のサルモネラ症発生事例
５ １酪農場における牛のサルモネラ症発生事例 南波ともみ 吉崎 浩 ○鈴木 博 大野元雄※ 磯田加奈子 三宅結子 長田典子 藤森英雄 岩倉健一 要 約 2012 年 10 月、１酪農場において下痢、発熱、泌乳量の低下を主徴とする伝染性疾病が発生し、搾乳牛 32 頭中 22 頭、哺乳子牛 2 頭中 2 頭が発症し、このうち搾乳牛と哺乳子牛各 1 頭が死亡した。死亡牛の主 要臓器、消化管内容物及び発症牛直腸便から Salmonella Typhimurium (ST) が分離されたことから牛 のサルモネラ症と診断した。分離 ST は多剤耐性を示した。発生及び伝搬要因として、変敗したサイレー ジの給与、老朽化した畜舎設備、特に飼槽及びウォーターカップ等の消毒の徹底の困難さが考えられた。 防疫対策として変敗サイレージの給与中止、抗菌剤及び生菌剤投与及び補液並びに消石灰、逆性石けん 液及び熱湯による畜舎消毒を反復実施した。牛群の発病期間は 21 日間、泌乳量の回復までには 35 日間 を要し、経済的損失額は約 120 万円と推定された。症状回復後も飼養牛全頭の直腸便及び畜舎環境材料 中の ST を継続的に検査した結果、環境材料からは 11 月 30 日の検査まで、直腸便からは 31 頭中１頭は 翌年 3 月 12 日の検査まで ST が分離された。 成牛 3 頭及び哺乳子牛 2 頭を飼養する酪農場で はじめに ある。飼養形態は対頭式つなぎ飼いで、哺乳子牛 牛のサルモネラ症は、我が国では 1970 年頃から 2 頭は、牛舎北側通路につながれていた（図１） 。 子牛における発生が多く見られたが、1990 年以 当該農場では育成牛を北海道に預託しているが、 降においては搾乳牛での発生が多数を占めるよう 発生前 1 ヵ月以内に牛の移出入はなかった。 になっている。近年は毎年、全国で十数件の発生 飼料は、市販配合飼料、乾草、自家製サイレージ 報告があり、 特に Salmonella Typhimurium（ST） およびサプリメントを給与していた。 に起因する症例が最も多く報告されている 2,4,7,8)。 稟告では、発生前にロールベールラップサイ 東京都における近年の搾乳牛のサルモネラ症の発 レージのラップが野鳥により穴が開けられたた 生は、2008 年 2 月に１戸、13 頭（内 2 頭死亡） め、一部変敗したサイレージを給与したとのこと の発生例 1) がある。 であった。また、発生約１週間前に子牛１頭に下 2012 年 10 月、東京都内の１酪農場において搾 痢の発生があり抗生剤により治癒したとの稟告が 乳牛群に下痢、発熱、泌乳量の低下を主徴とする あった。 伝染性疾病が発生し、病性鑑定を実施した結果、 細菌学的検査：発症牛および同居牛全頭の直腸便 ST による牛のサルモネラ症と診断したのでその および環境材料（畜舎塵埃、 飼槽、 ウォーターカッ 発生状況と防疫措置の概要を報告する。 プ、敷料（オガクズ） ）とサイレージからのサル モネラの分離を試みた。 材料と方法 死亡牛 2 頭については、主要臓器、血液、腸内 発生農場の概要：発生農場は、乳用牛 32 頭、育 容物等を材料にＤＨＬ、食塩卵黄寒天培地および 血液寒天培地で好気培養、 チョコレート寒天培地、 ※ 大野獣医科（東京都羽村市） 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 19 － 第2病日（10/17 初診時） 発症牛３頭 育成牛３ 哺乳子牛２ 32 16 牛№1 15 ：農場敷地 発生牛舎 図１ 発生農場の配置図 血液寒天培地を用いＣＯ 2 培養、ＧＡＭ、ＣＷ培 発症牛 2 頭から採材した鼻腔ぬぐい液、糞便およ 地を用い嫌気培養を行った。さらに主要臓器等を び血液を材料として、市販簡易キットを用いてア 緩衝ペプトン水で 41℃ 6 時間増菌培養後、ハー デノウイルス ( キャピラリアアデノ )、ＲＳウイ ナーテトラチオン酸塩培地で 37℃、１夜増菌培 ルス（RSV エクザマン） 、 ロタウイルス（イムノカー 養後、ＤＨＬ寒天培地を用い好気培養した。腸内 ド ST ロタおよび Bio-X） 、 コロナウイルス（Bio-X） 容物等については、ハーナーテトラチオン酸塩培 について検査した。 地で 37℃、１夜増菌培養後、ＤＨＬ寒天培地を パラインフルエンザウイルス、ＲＳウイルス、 用い好気培養した。 コロナウイルスおよび牛ウイルス性下痢ウイルス 同居牛全頭の直腸便については、ハーナーテト についてはＰＣＲ検査を実施した。 ラチオン酸塩培地で 37℃、１夜増菌培養後、Ｄ ウイルス分離は、HmLu1、MDBK-SY および Vero ＨＬ寒天培地を用い好気培養、環境材料は緩衝ペ 細胞に鼻腔ぬぐい液、糞便および血液由来材料を プトン水で 41℃ 6 時間増菌培養後、直腸便材料 接種し、２代継代した。 と同様に培養した。サルモネラの同定は定法に従 病理学的検査：10 月 26 日死亡した搾乳牛１頭及 い分離菌の同定を行った。 び哺乳子牛 1 頭について病理解剖検査及び病理組 薬剤感受性検査は、7 頭の直腸便由来のＳＴ７ 織学的検査を実施した。組織学的検査は主要臓器 株について 1 濃度ディスク法により 18 薬剤につ を 10％ホルマリン固定後、定法によりＨＥ染色 いて検査した。 し、鏡検した。一部の組織標本については、グラ ウイルス学的検査：10 月 18 日、発症牛 5 頭、未 ム染色及びサルモネラＯ 4 群免疫血清を用いた免 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 20 － 総額 120 万円以上 表１ 発生経過と S. Typhimurium の分離状況 疫組織染色を実施した。 ブドウ糖、リンゲル液の補液をあわせて行った。 さらに生菌製剤を全頭に投与した。 結 果 この間、帯黄白色水様ないし灰白色泥状の下痢 発生状況：2012 年 10 月 16 日、飼養者が数頭の を呈していた哺乳子牛１頭 (11 日齢 ) が 10 月 26 搾乳牛に水様性下痢を認めたため、翌 17 日獣医 日死亡した。また、搾乳牛１頭が悪臭ある水様下 師の往診を求めた。獣医師は、10 月 18 日時点で 痢、偽膜様血便、食欲廃絶、起立不能を呈し同日 発症牛が５頭となったことや秋から冬に見られる 死亡した（表１） 。 ウイルス性下痢とは様子が異なることから当所に 初発生から牛群全体の臨床症状が回復するまで 病性鑑定依頼があった。 に 21 日間を要した。この間、発生農場の出荷乳 臨床症状は、40℃前後の発熱と泌乳量の低下及 量は、泌乳量の低下および抗生剤治療にともなう び悪臭ある水様性下痢、一部の牛の粘血便を主徴 廃棄乳をあわせて発生前に比べ最大 57％減少し、 とし、11 月 25 日頃までに牛舎全域に伝搬し、搾 発生期間中の出荷乳量の総減少量は 3,841kg（平 乳牛 32 頭中 22 頭と哺乳牛 2 頭が発症した。大 均減少量 110kg ／日）と推定された。出荷乳量 部分の牛は抗菌剤、補液及び生菌製剤による治療 の回復までには 35 日間を要した（図２） 。 で回復したが搾乳牛及び哺乳子牛各 1 頭が敗血症 このほか、死亡牛損失額、獣医衛生費等を合わ により死亡した（表１） 。 せて本症例の経済的損失額は 120 万円以上と推計 治療は、オキシテトラサイクリンまたはカナマ された（表２） 。 イシンの筋注または静注、重症牛については 5% 細菌学的検査：10 月 18 日採材した 7 頭の直腸便 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 21 － 表２ 牛サルモネラ症による経済的損失額 ○出荷乳量の減少： 発病前 15 日間の平均出荷乳量＝583 ㎏／日 出荷乳量の最大減少量＝△333 ㎏／日（57％減） 出荷乳量の総減少量＝3,841 ㎏／35 日間（平均 110 ㎏／日） 損失乳代＝3,841 ㎏×＠99.18 円／㎏＝380,950 円 ○死亡牛：搾乳牛（妊娠牛）１頭、 哺乳子牛♂1 頭 計 650,000 円 ○獣医衛生費：治療費 計 135,000 円 生菌製剤及び消毒薬購入費 ○その他：子牛の出荷遅延 ふれあい事業（子牛の貸与）自粛 糞尿の外部委託処理自粛 出荷月日 総額 120 万円以上 図２ 牛のサルモネラ発症牛群の出荷乳量の推移 については、その時点では未発症の 2 頭を含め７ 頭全頭からＳＴが分離された。10 月 23 日実施し た飼養牛全頭検査では 37 頭中 31 頭の直腸便から ＳＴが分離された。さらに、牛群全体の症状の回 復後についても定期的に３回、全頭の直腸便検査 を実施した結果、経過とともに保菌牛は大幅に減 少したが、3 月 12 日の検査時でも 1 頭が陽性で あった（表３） 。 環境材料からの ST 分離検査では、畜舎床塵埃、 飼槽、ウォーターカップ、オガクズからＳＴが分 離された。しかし、ラップ内の変敗したサイレー ジからは分離されなかった（表４） 。 薬剤感受性検査成績は、7 頭由来の 7 株全てが 同一の性状を示し、ペニシリン系 (ABPC, PCG, MDIPC, MCIPC, AMPC)、テトラサイクリン系 (OTC, DOXY)、エリスロマイシンおよびストレプトマイ シンに耐性を示した。なお、獣医師によると、治 療に用いたテトラサイクリンは、薬剤感受性試験 で耐性と判定されたことから、一部の発症牛には カナマイシン製剤を投与したが、治療効果はテト ラサイクリンの方が認められたとのことであっ た。 死亡した搾乳牛および子牛各１頭の細菌検査で は、主要臓器、消化管内容等の広範な部位からＳ Ｔが分離された（表５） 。 表３ 飼養牛直腸便からのS. Typhimurium分離成績 検査月日 発症中 回復後 備考 ＊ － － ＋ － ＋ ・ ＋ 廃用 ＋ ・ ・ － － － ・ － － ＋ － ・ ＊ － － － － ・ － － ＋ － ・ － ＊ ＋ ＋ ＋ ・ ＋ ＊ － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ＋ － ＊ ＋ ＋ － ・ － － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ・ － ＊ ＋ ＋ ＋ ・ ＋ ＊ ＋ － ＋ ・ ＋ － ＋ － ＋ － ＊ － ＋ － ・ － － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ＋ － ＊ ＊ － 廃用 ＋ － ・ － － 廃用 － － ・ － － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ＋ － ＊ ＋ ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ・ － ＊ ・ 死亡 ＋ ・ ＋ ・ ＊ － ＋ － ・ － － ＋ － ・ － － ＋ － ・ － ＊ － ＋ － ・ － － ＋ － ＋ － ＊ ＊ ・ 死亡 ＋ ・ ・ ・ 哺乳 － 出荷 ＋ ・ ・ ・ 哺乳＊ ・ 出荷 － ・ ・ ・ 育成 ・ 出荷 － ・ ・ ・ 育成 ・ 出荷 ＋ ・ ・ ・ 育成 ・ 出荷 ・ ・ ・ － 哺乳 ・ 預託帰還 ・ － ・ － 導入 ・ 預託帰還 ・ － ・ ・ 導入 ・ ・ － ・ ・ 哺乳 計 ＊：発症牛、牛№～は牛群が回復後に出生または導入した牛 ＋：陽性、－：陰性、・：未検査 牛№ 病理学的検査：死亡した搾乳牛の解剖所見は、心 筋の出血斑、十二指腸から結腸までの消化管粘膜 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 22 － - 平成 1 - 年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録 表４ 環境材料からのS. Typhimurium分離成績 表５ 死亡牛のS. Typhimurium 検査成績 の充出血、膀胱粘膜の充出血等が認められ（写真 考 察 表５ １） 、死亡哺乳子牛では、回腸は広範に漿膜およ び粘膜の充うっ血が見られ、腸間膜リンパ節の腫 本症例は、40℃前後の発熱と悪臭ある水様性 大、暗赤色化、肝の軽度腫大、脳膜の充血が認め 下痢および一部粘血便を主徴とする臨床症状を呈 られた。 し、短期間で牛群全体に伝搬した。大部分の牛は 病理組織学的検査では、肝細胞の広範な変性、 抗菌剤及び生菌製剤による治療で回復したが重症 壊死、リンパ球等の細胞浸潤、胆汁栓等がみられ、 例では敗血症により死亡した。このような臨床所 壊死巣の中にグラム陰性の菌塊が認められた。同 見と発症牛の直腸便から高率にＳＴが分離され、 部位はサルモネラＯ４群抗血清による免疫組織学 さらに、死亡牛２頭の細菌学的および病理学的検 的染色で陽性を示した（写真２） 。 査結果から、ＳＴによる牛のサルモネラ症と診断 ウイルス学的検査：簡易キットによる検査では、 した。 鼻腔ぬぐい液でアデノウイルスが２頭、ＲＳウイ 今回の感染源のＳＴの侵入経路としては、ＳＴ ルスが１頭で陽性反応を示した。糞便由来材料で に汚染した変敗サイレージの給与が疑われたが、 はすべて陰性であった。ＰＣＲ検査はすべて陰性 飼槽残渣のサイレージからはＳＴが分離されたも であった。培養細胞を用いたウイルス分離検査で のの給与前の変敗サイレージからは分離されな もすべて陰性であった。 かった。また、同一サイレージを給与している他 防疫対策：発症牛の治療のほか、防疫対策として 農場での発生がなかったことから、感染源は特定 飼養牛全頭のＳＴ保菌状況調査及び畜舎環境材料 できなかった。 からのＳＴ分離検査と平行して逆性石けん液およ 発生およびまん延の要因としては、変敗サイ び石灰乳による畜舎床面、腰壁等の消毒、さらに レージ給与による飼養牛のルーメン機能が低下 施設の老朽化により消毒が不完全と思われた飼 し、感染し易い状態となっていたこと、老朽化し 槽、ウォーターカップの清掃と熱湯消毒を実施し た飼槽およびウォーターカップの清掃、 消毒不良、 た。このほか、変敗サイレージの給与中止、糞尿 敷料と糞尿の運搬にバケットローダーを共用して 処理の外部委託の一時中止、ふれあい事業への参 いたこと等が考えられた。 加自粛を指導した（表６，写真３） 。 搾乳牛のサルモネラ症は、泌乳量の低下と抗菌 剤投与に伴う生乳の廃棄等による経済的損失が非 常に大きく問題となっている 1 ～ 3,6 ～ 8)。本症例に 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 23 － ＨＥ染色 Ｏ４群抗血清による免疫組織染色 写真１ 高度に削痩した死亡牛と解剖所見 ＨＥ染色 グラム染色 写真２ 死亡搾乳牛の肝の病理組織所見 上段右：消化管の出血、 下段左：膀胱粘膜の出血、下段右：心筋の出血斑 上段：ＨＥ染色、 下段左：Ｏ４群抗血清による免疫組織染色、 下段右：グラム染色 表６ 実施した主な防疫対応 項 目（実施者） 1.発症牛の治療 （獣医師・飼養者） 2.飼養牛の保菌状況調査 （家保） 3.環境材料のサルモネラ 検査(家保) 4.畜舎等の消毒 （飼養者・家保） 5.その他（飼養者） 防疫措置 ・ＯＴＣ、カナマイシン 筋注 or 静注 ・重症例 ５％ブドウ糖、 リンゲル輸液 ・生菌製剤の投与 ・５回 （10/18, 23, 30, 1/17, 3/12) ・４回 （10/23, 11/2, 30, 1/17） ・石灰散布、出入口石灰帯設置 ・塩化ベンザルコニウム （10/23） ・石灰乳塗布 （10/23, 11/2, 30 ） ・飼槽熱湯消毒 （1/17） ・変敗サイレージ給与中止 ・糞尿処理の外部委託中止 ・ふれあい事業への参加自粛 写真３ 老朽化した飼槽、 ウオーターカップ(左上下) と石灰乳と熱湯による消毒 ( 右上下 ) おいても出荷乳量の大幅な減少、死亡牛２頭、獣 2) 佐藤静夫：わが国における牛のサルモネラ 医衛生費の増加等から少なくとも 120 万円以上の 症 の 発 生 状 況 と 対 策， 臨 床 獣 医，24（3） ， 損失額となった。 10-15（2006） そのため、本症は予防対策が重要であることか 3) 髙田 陽，荒木尚登，池田暁史，竹前愛子， ら、定期的な畜舎施設の清掃、消毒や野生鳥獣の 太田和彦，福岡静男，小菅千恵子，安藤正樹： 侵入防止対策、濃厚飼料多給や不良な飼料給与を 管内一酪農家における牛サルモネラ症の発生 さけルーメン機能を正常に維持することなど、継 と対応，平成 21 年度神奈川県家畜保健衛生 続的に酪農家に対するサルモネラ症予防対策への 業績発表会集録，8 (2009) 注意喚起の必要がある。 4) 玉村雪乃，内田郁夫：牛サルモネラ症由来株 の分子疫学的解析，北獣会誌，56， 257-162 引用文献 (2012) 1) 磯田加奈子，内田 茂：一酪農場で発生した 5) 橋本和典：サルモネラ症，清水悠紀臣ほか編， サルモネラ症への対応、平成 20 年度東京都 獣医伝染病学，第５版，122-123，近代出版， 家畜保健衛生業績発表会集録，27-31 (2009) 東京（1999） 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 24 － 6) 細字晴仁，仲澤浩江，松尾綾子ほか：管内酪 農家で発生したサルモネラ症への迅速な対応 と成果，平成 24 年度神奈川県家畜保健衛生 業績発表会集録，1-6 (2013) 7) 中村政幸：牛のサルモネラ症～子牛から搾乳 牛へ～，臨床獣医，30(2)，10-14 (2012) 8) 中岡祐司，立花 智：北海道における牛サル モネラ症の現状と対策，家畜診療，57(5)， 279-285 (2010) 平成25年度東京都家畜保健衛生業績発表会集録（2015） － 25 －