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マルチカラールック® Ultra-HTS発光試薬

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マルチカラールック® Ultra-HTS発光試薬
多色ルシフェラーゼ発光測定用試薬
Single & 96well plate兼用
マルチカラールック® Ultr a-HTS発光試薬
甲虫由来の3色のルシフェラーゼ発光を利用した転写活性測定システムの「マルチカラールック®」に、新
しくHTS仕様のマルチカラールック® Ultr a-HTS発光試薬が加わりました。HTS測定(特許出願済)に最適
な長時間発光&細胞溶解成分を含む1液タイプです。細胞溶解成分が別包装の2液タイプの従来製品に比
べて、最大5倍の高発光に性能アップしていますのでsingle測定にもお奨め致します。発光スペクトルが安
定な赤、オレンジ、緑の3色のルシフェラーゼ遺伝子と組み合わせて御使用ください。
同一検体での同時測定により、因子相関性の実証が可能に
● 2種のレポーターアッセイを測定
● 2種の誘導因子の組み合わせ差異や、単一時との比較検証
● 3色発光により2因子+コントロール補正で正確性アップ
マルチカラールック®の発光機構
N
S
S
3 Luciferases
CO O H
+ ATP + O2
HO
Mg2+
HO
D-Luciferin
N
N
S
S
O
+ AMP + PPi + CO2
Oxyluciferin
Red light
(λmax= 630 nm)
Or ange light (λmax= 580 nm)
Gr een light (λmax= 550 nm)
マルチカラールック®ベクターで発現させたルシフェラーゼは、pHで
発光スペクトルが変動しない特性があります。また、3色の発光基質
は共通です。これらを応用し、1種類の発光試薬を添加するだけで3
色発光が得られます。
緑色、 オレ ン ジ色、 赤色ルシフェラーゼ の発光スペクトル
1 .2
1
Normalized intensity
N
0 .8
0 .6
0 .4
0 .2
0
400
5 00
600
70 0
Wave len gth (n m)
マルチカラールック® Ultra-HTSによる測定結果
◆Fig..1 NFκB誘導とCRE誘導の同時測定
®
マルチカラールック Ultra-HTSの測定例
●TNF-α添加によるcis作用性DNA応答配列(NFκB)誘導
●フォルスコリン添加によるcAMP応答配列(CRE)誘導
14.0
相対発光量(RLU)
12.0
NFkB
CRE
NFκB+TK+Green Luc.
CRE+TK+Orange Luc.
10.0
(‐)
F (+)
T (+)
F (+) T (+)
8.0
6.0
4.0
2.0
0.0
(-)
F(+)
T(+)
誘導物質
F(+)T(+)
SV40+Red Luc.
: 誘導刺激なし
: フォルスコリン添加
: TNF-α添加
: フォルスコリンとTNF-αを同時に添加
マルチカラールック®の赤色ルシフェラーゼをインターナルコント
ロールに使用し、緑色ルシフェラーゼとオレンジ色ルシフェラー
ゼをNFκBとCRE のレポーター測定に使用した。
2つの誘導を同時に行い、2種のレポーターアッセイが、同一検体
にて1回で測定できる事を実証した。
東洋ビーネット株式会社
東洋インキグループ
マルチカラールック® Ultra-HTSの特長
簡
便
迅
速
高感度
高精度
:
:
:
:
細胞溶解と発光操作が1step の1液タイプ
試薬添加後10分から測定可能
最高の発光強度(当社従来製品と比べ、最大5
(当社従来製品と比べ、最大5倍強度)
3色の発光バランスが良く、長時間安定(半減期2
(半減期2時間)
マルチカラールック® Ultra-HTSの基本性能
◆Fig..2 従来品(2液タイプ)との発光量比較
◆Fig..3 発光各色の長時間安定性(カイネティクス)
マルチカラールック ® Ultra-HTSの発光カイネティクス
6
120%
5
100%
発光量相対値(RLU)
最大発光量相対値(RLU)
各色の最大発光量の比較
4
3
2
1
0
2液タイプ
Ultra-HTS
2液タイプ
Red Luc.
Ultra-HTS
2液タイプ
Orange Luc.
Ultra-HTS
80%
60%
Red Luc.
40%
Orange Luc.
20%
Green Luc.
0%
0
10
20
30
40
Green Luc.
50
60
70
80
90
100
110
120
(min)
Fig.2: 弊社従来製品の2液タイプと比べ、3色とも2倍以上に高発光。特に発光量が低かった赤色発光が5倍強の高発光に改善された。
Fig.3: 弊社推奨の赤色発光をコントロールに用いた時のオレンジと緑の発光量相対値を示したもの。2時間経過しても発光量比は変動せず、HTS
測定に最適な長時間発光である事を示している。
〈 製品リスト 〉
コード
メーカーコード
302-31541
MCL-H10
308-31543
MCL-H50
306-31544
MCL-H100
302-31546
MCL-H1000
製
品
名
マルチカラールック®
Ultra-HTS 発光試薬
構成内容
細胞溶解成分入り発光試薬(凍結乾燥品)
Buffer 10ml
各1本
細胞溶解成分入り発光試薬(凍結乾燥品)
Buffer 50ml
各1本
細胞溶解成分入り発光試薬(凍結乾燥品)
Buffer 50ml
各2本
細胞溶解成分入り発光試薬(凍結乾燥品)
Buffer 50ml
各20本
保 存
希望納入価格(円)
−20℃、遮光
24,500
−20℃、遮光
99,000
−20℃、遮光
185,000
−20℃、遮光
照会
従来製品の細胞溶解剤と発光試薬が別包装の2液タイプは、受注生産となりました。ご希望の方は弊社までご連絡ください。
(ご注意)
◆弊社は、多色ルシフェラーゼ発光に関わる細胞溶解組成と発光試薬およびHTS測定の手法を特許出願しております。発光試薬をご購入の際
は、お客様のご登録が必要です。登録時に HTS測定(Micro plateを使用した測定)のご利用の有無を確認させていただきます。
◆多色ルシフェラーゼを用いたシステムは、産業技術総合研究所より特許出願されており、弊社は産総研より実施許諾を受けています。ベク
ターをご購入の際は、お客様のご登録が必要です。
◆このシステムは、最大3色の混合発光となります。分光および単色光量の測定算出は、弊社までお問い合わせください。
◆「マルチカラールック® 」シリーズは研究専用試薬です。研究用途以外のご使用は避けてください。
製造元 東洋ビーネット株式会社 バイオプロダクツ部
東京都中央区京橋二丁目3番13号 Tel :03-3272-1954
E-mail: [email protected]
URL: http://www.toyo-b-net.co.jp
販売元 和光純薬工業株式会社
大阪市中央区道修町三丁目1番2号
Tel :06-6203-3741(代表)
東京都中央区日本橋本町四丁目5番13号 Tel :03-3270-8571(代表)
E-mail: [email protected]
URL: http://www.wako-chem.co.jp
販売店
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