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特集 miRNA microRNA 発現プラスミド Vantage™ miRNA パネル Precursor miRNA＆miRNA 標的配列 3’ UTR発現クローン RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システム miRNAレンチウイルス発現ベクター In Vivo 新規RNAi試薬デリバリーツール miRNA精製キット 80 M a y 2010 ヤモリが ガラスを 歩けるわけ 注目商品 シグナル伝達 Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ 細胞培養・細胞工学 幹細胞因子がコードされたレンチウイルスベクター バイオメディカル Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip 汎 用 受託サービス 機 器 検証済みshRNAアデノウイルス粒子 モノクローナル抗体作製受託サービス BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 miRNA microRNA 発現プラスミド・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・2 Vantage™ miRNA パネル・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 3 miExpress™ Precursor miRNA＆miTarget™ miRNA 標的配列 3'UTR発現クローン・・・ 4 Luc-Pair™ miR ルシフェラーゼアッセイ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 5 All-in-One™ miRNA qRT-PCR検出キット＆検証済みのmiRNA qPCRプライマー・・・ 5 RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システム・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・6 RNAiBoost™ Reagentキット・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・6 GenoExplorer™ microRNA システム・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 7 miRNAレンチウイルス発現ベクター＆miRNAレンチウイルス粒子・・・・・・・8 新規RNAi試薬デリバリーツール MaxCarrier™ T3™ Conjugationキット・・・・・・9 MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10 miRNA精製キット・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10 新商品&トピックス ■シグナル伝達■ Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ ………………………………………………12 ■細胞培養・細胞工学■ 幹細胞因子がコードされたレンチウイルスベクター ………………………………18 ■バイオメディカル■ Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip ………………………………………19 ■汎用■ 検証済みshRNAアデノウイルス粒子 …………………………………………………20 ■受託サービス■ モノクローナル抗体作製受託サービス ………………………………………………25 ■機器■ BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 …………………………………………………26 汎用 Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ ………………………………………12 検証済みshRNAアデノウイルス粒子 …………………………………………20 ImmunoCruz™ マイクロアレイ………………………………………………13 RNAzol® RT RNA単離試薬 …………………………………………………21 MultiBead™ アッセイキット …………………………………………………14 DyNAmo™ ColorFlash qPCRキット ………………………………………21 リジン特異的ユビキチン化基質＆脱ユビキチン化酵素プローブ …………15 EvaGreen qPCRマスターミックス …………………………………………22 ProteoStat™ タンパク質凝集アッセイ ……………………………………15 Bst Adapter Fill-Inキット ……………………………………………………22 神経変性疾患研究用試薬 ………………………………………………………16 ヒト及びラット IL-1阻害剤 ……………………………………………………23 糖質コルチコイド受容体 HRMキット&FKBP5 HRMキット ………………17 抗体精製用プレパックカラム Ab-Rapid PuRe™ …………………………23 CaptureSelect® 抗体精製マトリックス ……………………………………24 細胞培養・細胞工学 siTrio™（Human、Mouse、Rat）75%ノックダウン保証付きsiRNA ……24 幹細胞因子がコードされたレンチウイルスベクター ………………………18 受託サービス LIFEbank™ ヒト疾患特異的初代培養細胞 …………………………………19 モノクローナル抗体作製受託サービス …………………………………………25 バイオメディカル 機器 Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip ………………………………19 BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 …………………………………………26 研究室のホープ 27 ヤモリがガラスを歩けるわけ 特集 miRNA 新規抗体商品のご案内 28 ヤモリが垂直な壁やガラスにくっつくことができるカラクリをご存じだろうか。ヤ microRNA 発現プラスミド Vantage™ miRNA Multiplex検出アッセイ Precursor miRNA＆miRNA 標的配列 3’ UTR発現クローン RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システム miRNAレンチウイルス発現ベクター In Vivo 新規RNAiデリバリー試薬 miRNA分離キット モリの足は吸盤状になっており、それによって壁に吸着できると一般的には考えら 80 M a y 2010 新規ELISA商品のご案内 30 れている。ところが、ヤモリは真空中でもガラスにくっつくことができる。そこで現 在、有力な説となっているのが「ファンデルワールス力」によるものだ。ファンデル ワールス力とは、分子同士が一定の距離に近づくと働く引力のこと。ヤモリの足は お知らせコ−ナ− 33 ヤモリが ガラスを 歩けるわけ 注目商品 シグナル伝達 Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ 汎 用 細胞培養・細胞工学 幹細胞因子レンチウイルスベクター 受託サービス バイオメディカル Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip 機 器 検証済みshRNAアデノウイルス粒子 モノクローナル抗体作製受託サービス 50万本ほどの繊毛で覆われており、この毛に働くファンデルワールス力を測定した ところ、ヤモリがガラスを歩くのに十分であることを証明する値が出た。ヤモリの 小さな足先は、実に高度な科学的計算に基づいた構造になっているのである。 BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 ――ヤモリ、恐るべし。 出典：雑学解剖研究所（http://why.mods.jp） miRNA miRNA 特集 ［ 特 集 ］ miRNAは、21∼23ntの非コーディングRNAより自然に生じ、多く の生物学的プロセスや疾病の発症に関与しています。miRNAは以下の 複数のステップにより加工されます （図） 。 シ グ ナ ル 伝 達 DNA 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 Pri-miRNA Pre-miRNA 成熟miRNA バ イ オ メ デ ィ カ ル オリジンテクノロジーズ社では、目的miRNAの過剰発現用クローン を提供します。各miRNAを網羅する600bpまでの領域をCMVプロ モーター下流域にクローン化しており、miRNAクローンインサートは、 pre-mir（60∼70nt）とそのfrankingゲノム配列（250∼300nt）か らなります。トランスフェクション後、細胞内機構がCMVによって発現 汎 用 したmiRNA前駆体を成熟RNAに変換します。miRNA発現プラスミド を使って細胞内機能を解析することができます。 今回の特集では、コスモ・バイオがおすすめするmiRNA研究用試薬 をご紹介します。 Cosmo Bio would like to acknowledge and thank Origene Technologies, Inc. for providing miRNA information presented here. 受 託 サ ー ビ ス 機 器 Cosmo Bio News No.80 1 特集 miRNA miRNA ［ 特 集 ］ microRNA 発現プラスミド 簡単に目的miRNAの発現研究が行えます！ オリジンテクノロジーズ社では、目的miRNAの過剰発現用クロー シ グ ナ ル 伝 達 ンを販売しています。 各miRNAを網羅する600bpまでの領域をCMVプロモーター下 流域にクローン化しており、miRNAクローンインサートは、pre-mir （60∼70nt）とそのfrankingゲノム配列（250∼300nt）からなり ます。トランスフェクション後、細胞内機構がCMVによって発現した miRNA前駆体を成熟RNAに変換します。miRNA発現プラスミドを 使って細胞内機能を解析することができます。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 特 長 ●ゲノムワイドにmiRNAをカバー（miRBase Release Ver.13.0） -ヒト646種、マウス486種 ●CMVプロモーターによりmiRNA前駆体を発現 ●全インサートはSgf I /Mlu I 間にクローン化 ●GFPによりトランスフェクションのモニタリングが可能 ●安定細胞樹立用のネオマイシン選択マーカー ●Transfection-ready ●miRNAターゲット研究用に3’ -UTRを持つTrueCloneも別途販売 バ イ オ メ デ ィ カ ル 構成内容 図1 miRNAのプロセシング miRNAは、21∼23ntの非コーディングRNA により自然に起こり、多くの生態学的過程や病 気の発症に関わっている。miRNAは多様なス テップにより処理される。 ●目的のmiRNA発現プラスミド（Transfection-readyプラスミド 10b） ●シーケンシング用コントロールプライマー Origene Technologies, Inc. ■3レベルのバリデーション 略号ORG ■商品検索の手順 ①前駆体配列の配列確認 全配列はオリジンテクノロジーズ社ホームページ上 汎 用 （http：//www.origene.com/）で公開しています。 ②トランスフェクトした細胞のGFP発現を検証 １ ③対象となるmiRNAの過剰発現を実証 受 託 サ ー ビ ス 2 ①オリジンテクノロジーズ社ホームページのmiRNA特集ページ （http：//www.origene.com/MicroRNA/）上の検索欄にご希 方法：HEK293細胞にmiRNA発現プラスミドをトランスフェク 望のmiRNA名を入力します。 （今回は “mir205” を検索します。 ） トして、48時間後にトータルRNAを抽出した。miRNAはABI ②右のGoボタンを押すと検索が開始され品番が表示されます。 （TaqMan® MicroRNA Assay）のRT-PCR法により検出した。 全実験はduplicateで行い、正規化コントロールとしてbeta- 機 器 actinを利用した。 2 Cosmo Bio News No.80 コスモ・バイオホームページ上の商品検索欄に“mir205”を入 れることでも検索できます！ 希望販売価格は￥82,000／10bです。 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 miRNA ［ 特 集 ］ Vantage™ miRNA パネル Luminex™ xMAP® テクノロジーを利用したmiRNAアッセイによるプロファイリング Luminex™ xMAP® 用に開発されたVantage™ miRNA シ グ ナ ル 伝 達 Multiplex検出パネルは、数時間で数百サンプルにおける100種類 までのmiRNA発現レベルを迅速・簡単にプロファイリングします。 一度に大量のmiRNAの発現レベルを測定でき、非常に経済的です。 特 長 ●ハイスループット：96ウェルフォーマットで数百サンプルを1日で プロファインリング。 ●マルチプレックスフォーマット：1サンプルで100種類までの 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 miRNAを解析。 ●どんなタイプのRNAサンプルでもmiRNAを検出： トータルRNA及び濃縮RNAサンプル、保存組織からの劣化した SAPE：Streptavidin -phycoerythrin RNAにも対応。 ●迅速：RNA精製から検出まで3時間以内に完了。 ●全てのMultiplex検出アッセイにサンプル標準化用のコントロール が含まれています。 図1 Vantage™ miRNA Multiplex検出操作の流れ ●お客様専用の検出パネルもアレンジ可能：ご希望のmiRNAの検出 パネルをお作りすることもできます。受託サービス担当までお問 バ イ オ メ デ ィ カ ル い合わせください。 E-mail：[email protected] ■miRNA発現レベル検出方法の比較 マルチプレックス サンプル処理量 フレキシブルアッセイ フォーマット RT ステップ 増幅 4時間以内のプロトコール Vantage™ 検出パネル ○ 高 マイクロアレイ ○ 低 qRT-PCR × 中 ○ × ○ × × ○ × × × ○ ○ ○ ■miRNA Multiplexアッセイに必要なその他のキット キットの種類 RNA精製キット miRNA標識キット※ miRNA検出キット 推奨品 Vantage™ Total RNA Purification Kit （品番：NP100026） Vantage™ microRNA Purification Kit （品番：NP100028） Vantage™ microRNA Labeling Kit（品番：AM100044） Vantage™ microRNA Detection Kit（品番：AM100091） 図2 正常サンプルと腫瘍サンプルにおけるmiRNA発現量の比較 トータルRNAを、正常組織と腫瘍組織から抽出。RNAサンプルは、その後、オリジンテクノロジーズ社の Vantage™ miRNA標識キットで標識し、腫瘍検出パネル1（品番：AM100045）で検出した。 汎 用 ※サンプルを標識するために、 必ずVantage™ microRNA Labeling Kit（品番：AM100044） をご購入ください。 Origene Technologies, Inc. 品 名 Vantage™ microRNA Oncology Detection Panel 1（47-plex） Vantage™ microRNA Pancreatic Cancer Detection Panel 1（12-plex） Vantage™ microRNA Breast Cancer Detection Panel 1（8-plex） Vantage™ microRNA Ovarian Cancer Detection Panel（8-plex） Vantage™ microRNA Cardiac Detection Panel 1（10-plex） Vantage™ microRNA Diabetes Detection Panel 1（11-plex） Vantage™ microRNA Hypoxia Detection Panel 1（10-plex） Vantage™ microRNA Prostate Cancer Detection Panel 1（18-plex） Vantage™ microRNA MiR-plex Control Panel ! 品 番 AM100045 AM100046 AM100047 AM100048 AM100049 AM100050 AM100051 AM100052 AM100090 包 装 50 rxn 50 rxn 50 rxn 50 rxn 50 rxn 50 rxn 50 rxn 50 rxn 1 prep 希望販売価格 ご照会 ￥238,000 ￥182,000 ￥182,000 ￥213,000 ￥226,000 ￥213,000 ￥319,000 ￥35,000 略号ORG 貯 蔵 4 4 4 4 4 4 4 4 6 受 託 サ ー ビ ス 個々のパネル内容は、http：//www.marligen.com/docs/microRNA-panel-list.xlsをご覧ください。 関連商品 ※サンプルを標識するために、Vantage™ microRNA Labeling Kit（品番：AM100044）をご購入ください。 Origene Technologies, Inc. 品 名／構成内容 Vantage™ Total RNA Purification Kit 略号ORG 品 番 NP100026 包 装 50 rxn 希望販売価格 ￥30,000 貯 蔵 3 NP100028 25 rxn ￥29,000 3 AM100044 25 rxn ￥213,000 4 AM100091 50 rxn ￥131,000 3 4 ●細胞溶解液 ●洗浄バッファー ●RNA溶出バッファー ●RNA結合カラム ●洗浄チューブ ●回収チューブ Vantage™ microRNA Purification Kit ●細胞溶解液 ●洗浄バッファー ●RNA溶出バッファー ●ラージRNA除去カラム ●miRNA濃縮カラム ●洗浄チューブ ●回収チューブ Vantage™ microRNA Labeling Kit ●反応バッファー ●25mM MnCl2 機 器 ●ATPミックス ●PAP酵素 ●5xVantage™ ライゲーションビオチンミックス ●T4 DNAリガーゼ ●反応停止液 Vantage™ microRNA Detection Kit ●ハイブリダイゼーションバッファー ●検出試薬 ●洗浄バッファー ●SAPE希釈液 ●プレートシール ●フィルタープレート お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 3 特集 miRNA miRNA ［ 特 集 ］ miExpress™ Precursor miRNA＆miTarget™ miRNA 標的配列 3’ UTR発現クローン 遺伝子発現制御やmiRNAのターゲット遺伝子の同定と検証に有用なmiRNA発現クローン miRNAは、標的となるmRNAの3’ -UTRに結合することにより遺伝子発現を制御します。miRNAによる遺伝子発現制御の異常は、癌や循環 シ グ ナ ル 伝 達 器疾患、その他の様々な病気に関与していることが認められています。 ジーンコピア社では以下の発現クローンを提供しています。 【miExpress™ Precursor miRNA発現クローン】 対応遺伝子とタンパク質における miRNAの調節制御及び機能効果の研究に！ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 商品群 miExpress™ Precursor miRNA発現クローン 動物種 Human Mouse Rat ターゲット遺伝子数 750 450 270 ルシフェラーゼレポーター遺伝子を利用して 制御効果を測定できます 商品群 miTarget™ miRNA 標的配列 3'UTR発現クローン 動物種 Human Mouse ターゲット遺伝子数 25,000 25,000 特 長 特 長 ●ゲノムワイドなmiRNA標的配列3’-UTR発現コンストラクトを哺乳 ●miRBaseデータベース（Ver.13.0）にリリースされている、ヒト （750種）、マウス（450種）及びラット（270種）のprecursor miRNA発現クローンを取り揃えています。 ●全てのmiRNA発現コンストラクトの発現カセットについて、配列 バ イ オ メ デ ィ カ ル 【miTarget™ miRNA 標的配列 3’ UTR発現クローン】 を確認しています。 ●レンチウイルスベースの発現コンストラクトは、非分裂細胞や導入 することが難しい細胞にもmiRNAを形質導入できます。 ●安定発現株選択マーカーのネオマイシンを用いて、長期と一過性 発現研究の両方にお使いいただけます。 ●ベクタープラスミドの導入とウイルス感染導入効果は、EGFPレ ポータータンパク質によって確認できます。 動物細胞の発現ベクターシステムに組み込んでお届けします（図 2） ；2種類のベクターから選択可。 ●発現コンストラクトで使用している全ての3’-UTR配列は、公共の ドメイン遺伝子配列データベースから得たもので、コーディング配 列の下流に挿入されています。 ●発現カセットは、レポーター遺伝子の下流に挿入され、SV40プロ モーターによってコントロールされています。 ●ベクターには、追跡用のレポーター遺伝子が含まれていますので、 トランスフェクション効率や標的細胞中でのmiRNA標的配列コン ストラクトの発現を追跡することができます。 ●ルシフェラー ゼ 活 性 を 比 色 分 析 により定 量し、標 的 m i R N Aと 3’ -UTR標的配列の結合能を測定することができます。Luc-Pair™ miR ルシフェラーゼアッセイ （5ページ参照） と一緒にお使いください。 汎 用 図1 precursor miRNA発現クローンに基づいたレンチウイルスベクターと miRNA遺伝子制御を仲介するベクターのメカニズム ベクター レポーター遺伝子 追跡用遺伝子 pEZX-MT01 ホタル ウミシイタケ ルシフェラーゼ ルシフェラーゼ pEZX-MT02 カイアシ アルカリ ルシフェラーゼ ホスファターゼ 図2 利 点 細胞溶解液を アッセイに使用可 酵素アッセイを行うために 目的の細胞は無駄にならない ヒトmiRNA標的配列発現クローン用のベクター GeneCopoeia, Inc. 受 託 サ ー ビ ス 略号GCP ■商品検索の手順 ジーンコピア社ホームページ上のmiRNA紹介ページ（http://www.genecopoeia.com/ product/mirna/）を開きます。 のアイコンをクリックし、検索ページを開きます。 【キーワード検索】 ①ご希望の分野を選択します。 ②precursor miRNA名、mature miRNA名、precursor miRNA Accession、 mature miRNA Accession、カタログ/製品ID、precursor配列、mature配列 等のキーワードで検索できます。 右のSearchボタンを押すと検索が開始され、品番が表示されます。 機 器 希望販売価格はご照会ください。 4 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 miRNA ［ 特 集 ］ Luc-Pair™ miR ルシフェラーゼアッセイ ジーンコピア社のmiRNA標的配列 3’UTR発現クローン用に最適化されたルシフェラーゼアッセイ Luc-Pair™ miR ルシフェラーゼアッセイキットは、 ホタル及びウミ シイタケのルシフェラーゼの経時的な測定に便利な96ウェルプレー トフォーマットの効果的なシステムです。ジーンコピア社のmiRNA標 120 最大活性（％） レポーターアッセイによりmiRNA活性を 簡単に検証できます 100 80 60 40 20 0 Control miR-125a 図1 標的配列におけるmiRNAの阻害効果を測定 ジーンコピア社のLuc-Pair™ miR ルシフェラーゼアッセイキ ット を 使 用して 、標 的 配 列 3 ’U T R 発 現 ク ロ ー ン に お け る miRNAの阻害効果を測定した。HEK293細胞を6ウェルプ レートにまき、2日目に細胞へ1.0bの標的配列3’ UTR発現ク ロ ー ン（ pEZX-MT01-Lin28 UTR-fLuc）及 び 1.4bの miRNA発現ベクター（またはmiRNAコントロールベクター）を トランスフェクションした。 トランスフェクションして18時間後、 細胞を96ウェルプレートに移し、さらに24時間培養した。ホ タルとウミシイタケの両方のルシフェラーゼ活性は、Victor II で測定した。ホタルのルシフェラーゼ活性は、同じウェル中の ウミシイタケのルシフェラーゼの活性で標準化した。 シ グ ナ ル 伝 達 的配列 3’ UTR発現クローン用に最適化されており、簡単かつ経済 的にmiRNA活性を検証できます。 A B 100000 特 長 RLU RLU 10000 1000 10000 1000 100 ●広範囲にわたり高感度 ●連続的なレポーターシステム ●一貫した再現性 ●経済的 ●シンプルアッセイフォーマット ●ハイスループットスクリーニングにも対応 品 名／構成内容 Luc-Pair™ miR Luciferase Assay Kit ●基質 ●バッファー 100 1 10 100 1 10 100 1000 pMT01（ng） pMRO（ng） 図2 放射光とHEK293細胞にトランスフェクションしたルシフェラーゼ発現ベクター量間の直線関係 HEK293細胞を6ウェルプレートにまき、2日目に細胞へ量を変えてジーンコピア社pMROまたはpEZXMT01 miRNA 3’ UTR標的配列クローンをトランスフェクションした。 トランスフェクションして18時間後、 細胞を96ウェルプレートに移し、さらに24時間培養した。ホタルとウミシイタケの両方のルシフェラーゼ 活性は、Victor IIで測定した。ホタルのルシフェラーゼアッセイにはpMROベクター（A） 、ウミシイタケルシ フェラーゼアッセイにはpEZX-MT01ベクター（B）を用いた。 品 番 LPFR-M010 LPFR-M100 包 装 100 rxn 1,000 rxn GeneCopoeia, Inc. 略号GCP 希望販売価格 ￥34,000 ￥223,000 貯 蔵 5 5 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル All-in-One™ miRNA qRT-PCR検出キット＆検証済みのmiRNA qPCRプライマー miRNA発現の高感度かつ実用的な定量プロファイリング 【All-in-One™ miRNA qRT-PCR検出キット】 All-in-One™ miRNA qRT-PCR検出キットは、PCR技術とSYBR® Greenを組み合わせ、100pgのトータルRNAサンプルから成熟miRNAを 迅速かつ正確に定量解析できます。 汎 用 特 長 ●100pgのトータルRNAからmiRNAを検出。 ●成熟miRNAのみを検出。 ●ジーンコピア社の検証済みmiRNA特異的プライマーと組み合わ 図1 アッセイ原理 3’末端のポリアデニル化ステ ップでは、 M-MLV RTaseとオ リゴdTアダプタープライマー がPoly A miRNAを逆転写し ます。本キットのqRT-PCRミッ クスは、 SYBR® Greenを含み、 逆転写されたmiRNAを特異的 に検出します。 せて使用。 ●ジーンコピア社のprecursor miRNAプラスミドコンストラクトと 併せて実験できます。 ●ジーンコピア社のORF expression-readyクローンを使用した機 能検証研究をフォローアップ。 品 名／構成内容 All-in-One™ miRNA qRT-PCR Detection Kit ●Poly A Polymerase ●RTase Mix, qPCR Mix ●Universal Adaptor PCR Primer ●buffers ●ROX Reference Dye 品 番 AOMD-Q020 AOMD-Q050 包 装 20 rxn 50 rxn GeneCopoeia, Inc. 略号GCP 希望販売価格 ￥68,000 ￥162,000 貯 蔵 5 5 受 託 サ ー ビ ス 【All-in-One™ miRNA qPCR検証済みプライマー】 All-in-One™ qPCR miRNA特異的プライマーは、独自のアルゴ 合わせて使用することで、All-in-One™ miRNAプライマーは、全て リズムでデザインされ、 700種類以上のヒトmiRNAで検証済みです。 のmiRNAの高性能遺伝子発現プロファイリングを行うことができま All-in-One™ SYBR ® Green miRNA qRT-PCRキットと組み お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 す。 商品の検索は、左ページ「商品検索の手順」をご覧ください。 Cosmo Bio News No.80 5 機 器 特集 miRNA miRNA ［ 特 集 ］ RAPAd ® miRNAアデノウイルス発現システム リコンビナントアデノウイルスをすぐに発現できるRAPAd ® システムにmiRNA発現シリーズが新登場！ シ グ ナ ル 伝 達 RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システムは、wild-typeのア ●EF-1αプロモーター：哺乳動物細胞での高レベルの発現を保証。 デノウイルスを大幅に減らし、短時間でリコンビナントアデノウイル ●GFP-Puro融合マーカー：発現細胞のモニタリングと安定発現株 スを産生します。本システムでは、パッケージングシグナルとE1配 の選択用にGFPまたはピューロマイシン耐性。 列が除かれた5’ ITR由来のバックボーンベクターを使用しています。 RAPAd ® miRNAアデノウイルス発現システムは、迅速に個々の miRNA前駆体を発現するリコンビナントアデノウイルスを産生する と同時にヘアピン構造と内因性のプロセシング機構を保存し、適切 に切断されたmiRNAを導き出すように設計されています。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 特 長 ●迅速なウイルス産生：わずか2∼3週間で高感染価のウイルスを産 生できます。 図1 pacAd5 miR-GFP/Puro Shuttleベクター（7900 bp、アンピシリン耐性） Xho I切断部位：26 bp、660 bp、7214 bp ●実質的にwild-typeのウイルス不含：従来の発現系より、100∼ 10,000倍wild-typeプラークの産生を抑えるように設計されて います。 【pacAd5 miR-GFP/Puro Shuttleベクターの特長】 ●miRNAプロセシング：miRNAステムループ前駆体は、Bam HIと バ イ オ メ デ ィ カ ル NheI部位間にクローニング。ヘアピン構造と適切なプロセシングを 保存するため、 miRNAステムループ配列は、 イントロン配列に隣接。 品 名／構成内容 RAPAd® miRNA Adenoviral Expression System プロモーター EF-1α 図2 RAPAd® miRNAアデノウイルス発現システムを使用したリコンビナントアデノウイルスの産生 293細胞にPacIで切断したpacAd5 CMV-GFPベクター及びpacAd5 9.2-100ベクターを導入した。プ レートは、倒立蛍光顕微鏡下でウイルスの存在を観察した。 品 番 VPK-253 包 装 1 kit 品 番 RTV-017 VPK-220 VPK-220-ECO VPK-220-PAN 包 装 10 B 10 B 1 kit 1 kit Cell Biolabs, Inc. 略号CBL 希望販売価格 ￥203,000 貯 蔵 5 Cell Biolabs, Inc. 略号CBL 希望販売価格 ￥114,000 ￥114,000 ￥226,000 ￥226,000 貯 蔵 5 5 5 5 ●pacAd5 miR-GFP/Puro Shuttleベクター ●pacAd5 9.2-100ベクター ●pacAd5 CMV-GFPコントロールベクター ●pacAd5 CMV-ntLacZコントロールベクター 関連商品 品 名 pMXs-miRNA-GFP/Puro Retroviral Expression Vector pSMPUW miRNA Lentiviral Expression Vector ViraSafe™ miRNA Lentiviral Expression System, Ecotropic ViraSafe™ miRNA Lentiviral Expression System, Pantropic 汎 用 RNAiBoost™ Reagentキット RNA干渉効果を増強します！ 少量のsiRNAでも充分です 受 託 サ ー ビ ス siRNAは、mRNA内の単一の標的配列で選択的に相互作用し、配 が、RNA干渉に基づいた解析は、オフターゲット効果やインターフェ ●遺伝子のノックダウン効率を増強 ロン応答のために、偽陽性や偽陰性のヒットにより複雑化されます。 ●少量のsiRNAでも高いRNAiノックダウン効率 セルバイオラボ社のRNAiBoost™ Reagentキットは、siRNAや shRNA量を減らすことで、オフターゲット効果やインターフェロン 応答を軽減し、かつ遺伝子ノックダウンの効率を増強させるために 機 器 特 長 列特異的なmRNA分解やタンパク質合成の阻害を引き起こします ●miRNA前駆体のプロセシングを促進 ●二本鎖siRNA、shRNAまたはmiRNA前駆体を通したRNA干渉 に最適 作られました。また、多様な細胞タイプにおけるmRNAの抑制を増 ●接着細胞と浮遊細胞の両方に使用可能 強するためのsiRNAまたはmiRNAに使用することが可能です。 ●無毒性 品 名／構成内容 RNAiBoost™ Reagent Kit ●RNAiBoost™ Reagent A（100x） 6 ●RNAiBoost™ Reagent B（100x） Cosmo Bio News No.80 品 番 RNAI-200 RNAI-201 包 装 20 rxn 100 rxn Cell Biolabs, Inc. 略号CBL 希望販売価格 ￥50,000 ￥125,000 貯 蔵 5 5 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 miRNA ［ 特 集 ］ GenoExplorer™ microRNA システム 生物種別のmiRNA網羅的発現解析マイクロアレイキット 特 長 シ グ ナ ル 伝 達 ●生物種別にmiRNAの網羅的解析が可能 ヒト、マウス／ラット、ショウジョウバエ、線虫、シロイヌナズナの それぞれに対応する各miRNAアレイキットをラインアップ。 ●前駆体と成熟型miRNAの解析が可能 前駆体と成熟型miRNAに対するプローブと、陽性及び陰性コント ロールプローブを1つのアレイにスポット。 ●トータルRNAからmiRNAを高感度検出 2.5bのトータルRNA（small RNA濃縮不要）でサブフェムトモ 図1 ル感度のmiRNAを検出可能。 操作方法 サブアレイの数はスポットしてあるプローブ の数により異なります。 スライドサイズ：25mm×75mm Triplicate スポット ●2倍未満のmiRNA発現相違を検出 ●高い再現性：CV15％以下 ●最大94%の特異性 図2 チップ上のサブアレイの配置 構成内容 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 hsa-let7a hsa-let7a-1-pre ●miRNAアレイチップ hsa-let7a-2-pre hsa-let7a-3-pre ●標識キット hsa-miR-139 ●ハイブリダイゼーションバッファー hsa-miR-139-pre 図3 前駆体と成熟型miRNAの 同時解析 3 セット の 前 駆 体 及 び 成 熟 型 miRNAに対するプローブを用い て、2種類の異なるマウスのRNA サンプル（コントロールと実験対象） を比較し、比率をグラフで示した。 ●洗浄バッファー1＆2 hsa-miR-196b hsa-miR-196b-pre -2 操作方法 0 2 4 6 Log2 ratio (experimental / control) ①トータルRNAの分離 Small RNAを含むトータルRNAを分離。 バ イ オ メ デ ィ カ ル Ave CV : 4.67 +/- 1.32% トータルRNA（推奨5∼10b）の5’ 末端にビオチン標識リンカー をライゲーション。 ③ハイブリダイゼーション（図1） ビオチン標識miRNAとマイクロアレイチップとのハイブリダイ ゼーションを行います。SA-S Dyeで蛍光標識。 ④スキャニングと検出 635nm（Cy5と同じチャンネル）にて検出。プローブの位置、配列情 報はジェノセンサー社ホームページ上（http：//www.genosensor 100 Chip2 median Normalized Intensity ②ラベリング反応（図1） 10 R2 = 0.9878 1 汎 用 0.1 0.01 0.01 0.1 1 10 図4 アレイ間の高い再現性 異なるアレイ間のシグナル強度を 比較。アレイ間の高い再現性が確 認された。 100 Chip1 median Normalized Intensity corp.com/microRNA_full_kit.html）からダウンロードできます。ス タンフォード型マイクロアレイ用スキャナが対応します。 0d 30 m dm ir3 ir- m m p -5 0a 0a ir3 m ir3 9b -5 m pm 0 m ※チップ上には各プローブが3個ずつスポットされています。miRNAの配列は、Sanger miRBase Release Ver.14.0をベースにしています（2009年12月現在） 。 500 19 m bm 1,360 1,202 316 250 340 1000 ir1 Total 1500 ir- Control ポジティブ ネガティブ 7 4 7 4 4 4 4 4 4 4 m ヒト マウス／ラット 線虫 ショウジョウバエ シロイヌナズナ miRNA（v14.0） 成熟 前駆体 904 445 746 445 195 113 162 80 215 117 m ■チップ上のプローブの種類 Mean Signal Intensity 2000 図5 プローブの高い特異性 ミスマッチを持たないプローブと 1塩基及び2塩基のミスマッチを 持つプローブのペアについて、ヒ ト脳由来のRNAを用いたシグナ ルを示した。最初の2つのペアは、 1塩基のミスマッチ（ホモロジー 94％）、最後のペアは2塩基のミ スマッチ（ホモロジー90%）。ミ スマッチによりシグナル強度に10 倍以上の差がある。 GenoSensor Corporation 品 名 GenoExplorer™ microRNA Kit ! 種交差 Human Mouse/Rat C.elegance Drosophila Arabidopsis 品 番 1101C 1111C 1121C 1131C 1141C 包 装 4 rxn 4 rxn 4 rxn 4 rxn 4 rxn 希望販売価格 ￥262,000 ￥262,000 ￥262,000 ￥262,000 ￥262,000 略号GSC 貯 蔵 4 5 4 5 4 5 4 5 4 5 機 器 上記商品にはサイズ違い（20回分／￥123,000）があります。詳細はコスモ・バイオホームページ上“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：GenoExplorer システム） お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 受 託 サ ー ビ ス Cosmo Bio News No.80 7 特集 miRNA miRNA ［ 特 集 ］ miRNAレンチウイルス発現ベクター＆miRNAレンチウイルス粒子 メチル化による発現抑制を受けないmiRNAレンチウイルス シ グ ナ ル 伝 達 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 【miRNAレンチウイルスベクター】 ヒトmiRNA（hsa-mir）前駆体と ●宿主の染色体に組込まれますので、miRNAは導入細胞株で安定し 約100bp上流及び下流の隣接す て発現します。 るゲノム配列をPCR増幅し、pLV- ●ヒトEF1αプロモーターは、細胞内で発現が抑制されることはあ miRNAベクター（図1）にクローニ りません。CMVやSV40等のウイルスプロモーター活性は、しば ングされています。miRNAが適切 らくするとDNAのメチル化により発現が抑制されることが報告さ に発現して作用しますので、内因性 れています。miRNA前駆体やピューロマイシン選択マーカーの発 のものと同様の機能が期待できま 現に使われるヒトEF1αプロモーターは、ハウスキーピング遺伝 す。 子のプロモーターです。したがって、in vitroやin vivoでメチル化 図1 により発現が抑制されることはありません。 miRNAを発現するレンチウイルスベクター ●EF1αプロモーターから発現したrPuro遺伝子産物は、赤色蛍光 puromycin-N-acetyl-トランスフェラーゼです。レンチ-miRNA 特 長 を導入した細胞は、ピューロマイシンの存在下で選択されるだけ ●pLV-miRNAベクターは、miRNA発現に最適化されています でなく、587/610nm（励起／発光）の波長で赤色蛍光を示しま 他社製品とは異なり、miRNA前駆体がヒトハウスキーピング遺伝 す（図2） 。 子のEF1αプロモーター領域にクローニングされているため、イ ントロン内でのmiRNAプロセスが選択マーカーの発現に与える 影響を最小限に抑えます。miRNA前駆体と選択マーカーが同じ バ イ オ メ デ ィ カ ル 転写ユニットに入っていますので、miRNAの転写活性を簡単にモ ニタリングできます。 ●レンチウイルスによってコードされる遺伝子物資は、分裂細胞や非 分裂細胞にも効果的に導入することができます。レトロウイルスシス 図2 hsa-mir-24-1レンチウイルスを形質導入した293T細胞の顕微鏡画像 テムとは異なり、レンチウイルスの導入は細胞周期に依存しません。 ■miRNAレンチウイルス発現ベクターの比較 miRNA発現 フォーマット 恒常的発現 隣接配列 発現方法 汎 用 発現するmiRNA 選択マーカー 転写／発現 デリバリー効果 コレクション数（706）＊2009.04現在 バイオセティア社 レンチウイルス／ベクター （pLV-miRNA） ○ ∼100bp EF1α-［miRNA］-rPuro （1プロモーター） イントロン内 RFP-Ruro融合 イントロン内のmiRNAの加工は RFP-Ruro発現への影響を 最低限に抑える レンチウイルス-ready 620以上 A社 合成RNA B社 レンチベクター C社 レンチベクター × ― ― ○ ∼200bp CMV-RFP-miRNA-IRES-Puro （1プロモーター） エクソン内 RFP/Puro miRNAの加工がmRNAの 分解を引き起こす ○ ∼250bp CMV-RFP-miRNA-EF1α-GFP （2プロモーター） エクソン内 GFP miRNAとGFPは2つの異なる プロモーターにより発現 パッケージングによる ― パッケージングによる 596以上 ― × ― トランスフェクションによる 470以上 【miRNAレンチウイルス粒子】 受 託 サ ー ビ ス Ready-to-useなmiRNAレンチウイルスストック miRNAレンチウイルスストックは、HEK293T細胞にlentimiRNAベクターとGag-Pol遺伝子産物及び水疱性口内炎ウイルス エンベロープG（VSV-G）を発現するプラスミドをco-transfection して作製しています。レンチウイルスの上清は、 トランスフェクション 後48時間で回収し、−70℃で保存しています。ウイルスの力価は、 図3 EF1αイントロン中にクローニングされたmiRNA発現レンチウイルス 通常1×107 IU/f以上です。 Biosettia Inc. 略号BOT バイオセティア社では、620種以上のヒトmiRNAレンチウイルスベクターを取り揃えています。ベクターは“pLV‐”、ウイルスストックは “Lentiviral stock” で検索してください。希望販売価格等の詳細は、コスモ･バイオまでご照会ください。 機 器 8 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 miRNA ［ 特 集 ］ 新規RNAi試薬デリバリーツール MaxCarrier™ T3™ Conjugationキット 抗体を用いて、RNAi試薬を効かせたいところまで届けます！ 独 自 の Targeted Transport Technologyを 用 い た 構成内容 MaxCarrier™ T3™ Conjugationキットは、in vivo及びin vitroモ デルに抗原・抗体反応を利用してRNAi試薬を目的の組織・細胞にデリ ●T3™ Carrier ●コントロール-脱塩カラム バリーするキットです。 ●脱塩用カラム ●固定用アタッチメントA&B ●1×修飾用バッファー ●Bovine IgG コントロール（1c/f） 本キットは、T3™ キャリアーを目的の細胞及び組織のレセプターや ® 細 胞 外ドメインに特 異 的 な 抗 体にコンジュゲートします。そ の 後 ●Centriprep カラム siRNAをはじめとするRNAi試薬をT3™ コンジュゲートに取り込んで ●T3™ キャリアーコントロール（1.6c/f） ●10×コンジュゲーションバッファー 使用します。T3™ コンジュゲートは細胞へのトランスフェクション及び 【本商品以外に必要なもの】 in vivoへの投与後、目的の細胞及び組織に取り込まれ、エンドソーム ●RNase-freeの一次抗体 から分離し、取り込まれたRNAi試薬をリリースします。この工程は、 ●RNAi試薬（非修飾または修飾されたsiRNA、miRNA、anti- 抗体及びRNAi試薬の前処理を必要とせず、簡単な操作で行えます。 特 長 sense oligo）等 使用方法 ●In vivo/in vitro でsiRNA及びmiRNAを目的の場所にデリバリー します。 ①目的のセルラインに特異的かつレセプターに特異的な抗体を同定 します。 ●ほとんどの細胞及び組織でご使用いただけます。 シ グ ナ ル 伝 達 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ②抗体をT3™ キャリアーにコンジュゲートします。 ●フレキシブル：複数のRNAi試薬を様々なルートでデリバリーします。 ③T3™ コンジュゲートをsiRNAまたはmiRNAと一緒に取り込みます。 ●少量のsiRNAでもご使用いただけます。 ④動物モデルに投与／細胞にトランスフェクトします。 ●オフターゲット効果を減らします。 ⑤T3™ コンジュゲートを目的の細胞に取り込ませます。 ●非毒性です。 ⑥siRNAまたはmiRNAが目的の細胞からリリースされます。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 適 用 抗体が特異的に認識するエピトープを含む細胞及びin vivo モデル にRNAi試薬をダイレクトにデリバリーします。 本キットには、目的のRNAi試薬を抗体にコンジュゲートするのに 必要な試薬が全て含まれています。75kDa未満及び75kDa以上の 抗体用があります。 ■モニター募集 コスモ・バイオでは、本商品のモニターを募集しています。通常のカタロ グサイズ（15∼20回分）を無償提供致します。 詳細は、コスモ・バイオホームページ上「キャンペーン情報」欄をご覧くだ さい。 汎 用 図1 デリバリールート BIOO SCIENTIFIC CORPORATION 品 名 MaxCarrier™ T3™ Conjugation Kit for Ab ＜ 75 kDa 品 番 5150S 5150 5151S 5151 MaxCarrier™ T3™ Conjugation Kit for Ab ≧ 75 kDa お試し お試し お試し 包 装 1 kit（5∼6回分） 1 kit（15∼20回分） 1 kit（5∼6回分） 1 kit（15∼20回分） 希望販売価格 ￥98,000 ￥280,000 ￥98,000 ￥280,000 略号BIO 貯 蔵 3 4 5 3 4 5 3 4 5 3 4 5 受 託 サ ー ビ ス 先着30名様に限り、お試しサイズをご用意しています。 関連商品 MaxCarrier™ T3™ コンジュゲート済みHER2抗体 キャリアーコンジュゲート済みのHER2抗体です。 混合するだけで、 構成内容 HER2を発現している細胞にRNAi試薬を直接デリバリーすることが ●T3™ コンジュゲート済みHER2抗体 できます。 ●RNase-free滅菌済み 1×PBS ●注射用シリンジ BIOO SCIENTIFIC CORPORATION 品 名 MaxCarrier™ Conjugated HER2 Antibody お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 品 番 360101 360102 包 装 1C 2C 希望販売価格 ￥159,000 ￥291,000 略号BIO 貯 蔵 3 4 3 4 Cosmo Bio News No.80 機 器 9 特集 miRNA miRNA ［ 特 集 ］ MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II 効果的にRNAiをin vivo にデリバリー MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II は、中性脂質、非イ シ グ ナ ル 伝 達 オン性の界面活性剤、油脂及び低分子で構成された独自の試薬で、 動物にRNAi試薬をデリバリーします。この画期的な商品は、他の試 薬に比べ、浸潤性の組織・器官に効果的です。 RNAiのリン脂質へのパッケージングは1時間以内です。使用方法 は、100bのRNAi試薬を本商品にトータル量が300e以内になる ように加え、Lipid Extruder（品番：341007） と付属の100nmポ アサイズのフィルターを使うか、またはソニケーションし、動物に直 接投与します。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 図1 使用方法 特 長 ●In vivo デリバリー試薬：浸潤型の組織や器官に効果的です。 ●フレキシブル：様々なRNAi試薬やデリバリーのルートで使用でき ます。ルート別のプロトコールがあります。 ●毒性はありません。 構成内容 バ イ オ メ デ ィ カ ル ●RNA-LANCEr II ●滅菌済み RNase-フリー水 ●ホモジナイザー ●滅菌済み RNase-フリー10×PBS ●シリンジ 図2 GAPDH siRNAを含むMaxSuppressor™ In Vivo RNA-Lancer IIをマウスの心臓に注射し、それぞれの 発現を免疫組織染色及びELISAによって比較した。 BIOO SCIENTIFIC CORPORATION 品 名 MaxSuppressor™ In Vivo RNA-LANCEr II お試し 品 番 3410-01S 3410-01 包 装 10 test 20 test お試し 希望販売価格 ￥47,000 ￥94,000 略号BIO 貯 蔵 4 5 4 5 先着30名様に限り、お試しサイズをご用意しています。 【モニター募集】コスモ・バイオでは、本商品のモニターを募集しています。通常のカタログサイズ（20回分）を無償提供致します。詳細は、コスモ・バイオホームページ上「キャンペーン情報」欄をご覧ください。 miRNA精製キット 汎 用 ゲノムや高分子RNAのコンタミネーションが最小限 特 長 ●迅速かつ簡単なスピンカラムを用いたキットです。 ●フェノールやクロロホルムは必要ありません。 ●200塩基以下の低分子RNAを分離します。 受 託 サ ー ビ ス ●高分子RNA除去カラムとmiRNA分離用カラムを用いるので、ゲノ 図1 ノルジェン社miRNA分離キットと 他社製品の比較 miRNAの精製に成功したのは、ノルジェ ン社製品とTRI試薬のみ。 ムや高分子RNAのコンタミネーションが最小限に抑えられます。 構成内容 ■仕様 ●溶解バッファー ●洗浄バッファー ●溶出バッファー ●高分子RNA除去カラム ●miRNA分離用カラム ●コレクションチューブ ●溶出用チューブ ●プロトコール カラム結合能 最大カラムローディング量 精製できるRNAのサイズ 動物細胞 動物組織 最大サンプル量 バクテリア 植物組織 精製時間（10サンプル） 50 B 600 E 200 nt以下 3x106 cells 25 C 1x109 cells 50 C 45分 Norgen Biotek Corp. 機 器 品 名 microRNA Purification Kit 10 Cosmo Bio News No.80 品 番 21300 包 装 １kit（25回分） 希望販売価格 ￥44,000 略号NOG 貯 蔵 3 http://www.cosmobio.co.jp FAX.03-5632-9619 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 新 商 品 ＆ トピックス コスモ・バイオが取り扱う数多くの商品の中から、ユニークで画期的な 新商品と今後の注目商品を選りすぐり、ご紹介します。 シグナル伝達 今号の新商品＆トピックスの中から注目商品をご紹介します。 P12 ●「Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ」 R&Dシステムズ社 同時に16種類までのタンパク質定量が可能です。何度も免疫沈降やウェスタ 細胞培養・ 細胞工学 P18 ンブロッティングを行う必要はありません。 ●「幹細胞因子がコードされたレンチウイルスベクター」 セルバイオラボ社 幹細胞因子レンチウイルスはエンベロープタンパク質（VSV-G） により感染域を広 げることができ、神経細胞や造血幹細胞等、これまでのレトロウイルスではできな バイオ メディカル P19 かった細胞種への遺伝子導入が可能なツールです。 ●「Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip」 バイオレバ社 植物病原体を迅速に検出するワンステップアッセイです。10∼15分以内にペピ ーノモザイクウイルス （PepMV） を検出する簡単ストリップが新登場！ ●「検証済みshRNAアデノウイルス粒子」 シリオンバイオテック社 汎 用 ノックダウン効率を検証済みのshRNAアデノウイルス粒子は、迅速、簡単かつ 便利にRNAiアッセイにお使いいただけます。 P20 ●「モノクローナル抗体作製受託サービス」 コスモ・バイオ株式会社 常時、細胞融合を行っているため、そのプロセスがライン化しており、安定した 成果が得られるモノクローナル抗体作製受託サービスです。 受託 サ ービス P25 ●「BTX® ECM® 830遺伝子導入装置」 BTX社 In vivoとin vitroで使用可能です！出力電圧、パルス幅、パルス数を正確に制 御でき、細胞へのダメージを最小限に抑えることができます。 機 器 誌面スペースの都合上、ご紹介できなかった新商品もたくさんあります。コーヒー P26 ブレイクにぜひ、 コスモ・バイオホームページ “商品の最新情報” 欄をご覧ください。 Cosmo Bio News No.80 11 miRNA ［ 特 集 ］ N ew Products & Topics Proteome Profiler™ 96 抗体アレイ NEW 96ウェルプレートの1ウェル中に16種類までの抗体がスポットされています 特 長 ●1サンプルを最大16項目解析可能：免疫沈降やウェスタンブロッ シ グ ナ ル 伝 達 ティングを行う必要はありません。 ●迅速：3.5時間で結果が得られます。 ●マイクロプレートを使用：少量サンプルでのハイスループットに最適。 ●1キット96テスト：タンパク質の選択に焦点をあてた、ラージス ケールの研究に最適。 ●高い特異性と感度：個々のタンパク質に対して厳選したキャプ チャー抗体を使用。 ●画素密度解析ソフトウェア：個々のウェルにおけるスポットの画素 密度を解析可能な無料ソフトが利用できます。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 構成内容 図4 アッセイ原理 Proteome Profiler™ 96 抗体アレイは、キャプチャー抗体シリーズを96ウェルマイクロプレートの個々の ウェルに固定化した抗体アレイ。検体をウェルに添加し、サンプル中に存在する目的タンパク質を固定化し たキャプチャー抗体に結合させる（ステップ1） 。次に、ビオチン化検出抗体と、ストレプトアビジン-HRPま たはHRP標識pan-抗リン酸化チロシン抗体の混合液を、結合したタンパク質の検出に用いる（ステップ2） 。 化学発光基質は、結合した検体量に比例してシグナルを発光する（ステップ3） 。カメライメージングシステ ムによって化学発光を検出し、個々のスポットから放出された光強度を決定する。 ●個 々 の ウェル に 1 6 種 類 の キャプ チャー 抗 体 を ス ポットした 96ウェルマイクロプレート ●検出用抗体 ●細胞溶解バッファー ●基質 ●プレートカバー ■仕様 汎 用 細胞溶解液：5∼25 B 3.5時間 化学発光 カメライメージングシステム サンプルサイズ 検出時間 検出方法 データ検出法 バ イ オ メ デ ィ カ ル 図5 インスリン誘導レセプターチロシンキナーゼのリン酸化の検出 （Proteome Profiler™ 96 Phospho-RTK抗体アレイ1を使用） （A）Proteome Profiler™ 96 Phospho-RTK抗体アレイ1（品番：ARZ001）を使用して、インスリンで5 分処理したヒト肝癌由来細胞株HepG2の細胞溶解物と、インスリンで処理していないものの、16種類の異 なるレセプターチロシンキナーゼのリン酸化を同時に検出し、ウェルのイメージを示した。 RS＝Reference Spot. （B）選択したタンパク質のグラフ解析。 分析用ソフトを使用して個々の抗体スポットからスポットの画素密度を 定量化した。 図1 品番：ARZ001のスポットレイアウト 図2 品番：ARZ002のスポットレイアウト 図6 乳癌細胞のErb BファミリーレセプターをNRG1-β1でリン酸化 （A）Proteome Profiler™ 96 Phospho-RTK抗体アレイ1（品番：ARZ001）を使用して、ヒト乳癌由来の MDA-MB-453細胞の溶解物を、ヒトNRG1-β1リコンビナントで5分処理したものと、していないものの、 16種類の異なるレセプターチロシンキナーゼのリン酸化を検出し、ウェルのイメージを示した。 RS＝Reference Spot. （B）選択したタンパク質のグラフ解析。分析用ソフトを使用して個々の抗体スポットからスポットの画素密度 を定量化した。 受 託 サ ー ビ ス 図3 アレイのスポット及びデータの例 1∼5：マイクロプレートアレイ内のスポットレイアウト例。 6∼12：16項目のアレイスポットの検出例。リファレンススポットは、ポジティブコントロールかつウェルの 位置を示す。 カテゴリ 機 器 癌関連 品 名／検出項目 Proteome Profiler™ Human 96 Phospho-RTK Array 1 乳癌関連 Proteome Profiler™ Human 96 Phospho-RTK Array 2 R&D Systems Inc. 略号RSD 検出項目数 16 品 番 ARZ001 包 装 1 kit 希望販売価格 ご照会 貯 蔵 4 8 ARZ002 1 kit ご照会 4 8 ARZ003 1 kit ご照会 4 EGF R, ErbB2, ErbB3, ErbB4, HGF R, IGF-I R, Insulin R, M-CSF R,MSP R, PDGF Rα,PDGF Rβ, SCF R, Tie-2, VEGF R1, VEGF R2, VEGF R3 EGF R, EphB4, ErbB2, ErbB3, ErbB4, HGF R, IGF-I R, MSP R 血管新生関連 Proteome Profiler™ Human 96 Phospho-RTK Array 3 PDGF Rα, PDGF Rβ,Tie-1, Tie-2, VEGF R1, VEGF R2, VEGF R3, EphB4 12 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ ImmunoCruz™ マイクロアレイ miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 目的のタンパク質を迅速かつ高感度に検出する抗体マイクロアレイ サンタクルズ社のImmunoCruz™ マイクロアレイは、細胞溶解物、 構成内容 血清、組織切片中の目的タンパク質を迅速かつ高感度に検出する抗 体マイクロアレイです。検出結果はCy3とCy5の可溶性蛍光色素に ●6枚のコート済みガラススライド ●抽出／標識バッファー より検出します。様々なパスウェイごとのマイクロアレイをライン ●標識停止試薬 ●10×脱塩バッファー アップし、リン酸化マイクロアレイには、生物学的に関連したタンパ ●インキュベーションバッファー ●5×洗浄バッファー1＆2 ク質の特定リン酸化部位を検出する抗体がアレイされています。 ●4ウェルトレイ シ グ ナ ル 伝 達 特 長 ●カテゴリごとに34種類のタンパク質に対する88種類の抗体がス ライドにアレイされています。 ●適用サンプル：細胞溶解物、血清、組織切片 図１ 解析例 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ●少量サンプルでタンパク質の発現分析を迅速・簡単に行えます。 ●信頼性：抗体はtriplicateにアレイされています。 ●モノクローナル抗体とポリクローナル抗体の両方を使用しています。 ●マウス、ラット、ヒトのサンプルに反応します。 ●Cy3及びCy5標識のサンプルの使用に適しています。 ●それぞれのマイクロアレイシステムは、BSAネガティブコントロー ル、Cy3及びCy5標識BSAポジティブコントロール、Cy3及び Cy5抗体を含みます。 ●蛍光検出マイクロアレイスキャナーに対応しています。 ●GAL（GenePix Array List） ファイルが添付されています。 図2 バ イ オ メ デ ィ カ ル 解析例 ■アレイのレイアウト例 Cy3-conjugated BSA Cy5-conjugated BSA ASK 1 （F-9） ERK 2 （C-14） -G ASK 1 （H-300） ERK 2 （D-2） Cot （M-20） ERK 2 （K-23） ERK 3 （D-23） Cy3-conjugated BSA ERK 3 （H-157） ERK 1 （C-16） ERK 3 （I-15） ERK 1 （C-16） -G ERK 4 （N-20） ERK 1 （K-23） ERK 4 （Y-19） Cy5-conjugated BSA ERK 5 （C-20） ERK 1 （K-23） -G （C-20）-R ERK 2 （4C11C11C4） ERK 5 ERK 5 （H-300） ERK 2 （C-14） ImmunoCruz™ Protein Kinase-1 マイクロアレイ （品番：SC-200051） IKKα （H-744） ERK 5 （N-19） MEK-3 （N-20） MEK kinase-1（43-Y） IKKα （M-110） Fnk （H-140） MEK-3/6 （D-3） MEK kinase-1（C-22） IKKα （M-280） IKK-i（K-14） （H-90） MEK kinase-2（N-19） MEK-3/6 JNK （D-2） IKK-i（Q-15） （V-20） MEK kinase-3（H-70） MEK-3/6 JNK （FL） IKKγ （B-3） MEK-4 （C-20） MEK kinase-4（D-19） JNK （FL） IKKγ （FL-419） MEK-5 （H-94） MEK kinase-4（E-6） JNK1 （C-17）-G IKKγ （F-10） MEK-6 （N-19） MEK-1 （H-8） JNK1（D-6） IKKβ （H-4） MEK-7 （C-19） MEK-1/2 （12-B） JNK1（F-3） IKKβ （T-20） MEK-7 （E-7） MEK-2 （A-1） JNK2（L-12） IKKα （B-8） NIK （A-12） MEK-2 （N-20） JNK2（N-18） IKKα （D-5） NIK （H-248） MEK-3 （C-19） JNK2（N-18）-G IKKα （E-20） p38γ （C-16） MEK-3 （I-20） ■シグナルパスウェイ特異的マイクロアレイ p38γ （G5F3） p38γ （N-19） p38β （4H6H6） p38β （BB10） p38β （C-16） p38β （E-20） -R p38β （N-14） p38α （9F12） p38α （A1F7） p38α （C-20） p38α （N-20） BSA Plk （F-8） Plk （H-152） Plk （N-19） BSA SAPK4（C-19） SAPK4（E-7） SAPK4 （N-17） anti-Cy3/Cy5 antibody Snk（H-90） TBK1 （L-15） TBK1 （M-375） anti-Cy3/Cy5 antibody SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY, INC. 汎 用 略号SCB カテゴリ Apoptosis Cell Adhesion Cell Cycle ! Cell Differentiation Channel Protein GDP/GTP Binding Proteins Growth Factor Homeodomain Protein Membrane Receptor Neurobiology Protein Kinase Protein Phosphatase Synthesis＆Degradation Transcription Regulator Transport＆Trafficking 上記商品は、全て包装1system、希望販売価格￥78,000です。商品の品番やアレイされている抗体の詳細情報は、コスモ・バイオホームページ上の“商品検索”をご利用ください。 （キーワード：ImmunoCruz、microarray） ■リン酸化特異的マイクロアレイ カテゴリ Phospho-1 Phospho-2 Phospho-3 ! Signaling Intermediates Steroid Receptor Structural Protein 品 番 SC-200038 SC-200043 SC-200044 SANTA CRUZ BIOTECHNOLOGY, INC. カテゴリ Phospho-4 Phospho-5 Phospho-6 品 番 SC-200045 SC-200046 SC-200047 カテゴリ Phospho-7 Phospho-8 Phospho-9 品 番 SC-200048 SC-200049 SC-200050 上記商品は、全て包装1system、希望販売価格￥78,000です。 アレイされている抗体の詳細情報は、コスモ・バイオホームページ上の“商品検索”をご利用ください。 （キーワード：ImmunoCruz、microarray） カテゴリ Phospho-10 Phospho-11 Phospho-12 Phospho-13 略号SCB 品 番 SC-200039 SC-200040 SC-200041 SC-200042 受 託 サ ー ビ ス 関連商品 CruzScan™ スキャニングサービス CruzScan™ スキャニングサービスはサンタクルズ社が提供する 文で6枚のスライドをスキャンします。解析結果は、スライド上のそれ オプションサービスです。実験後のImmunoCruz™ マイクロアレイ ぞれのスポットを、コントロールと比較した相対的な強度として出力 のスキャニングを行います。このスキャニングサービスは、1回の注 し、 研究に重要なタンパク質を同定します。 ※価格はご照会ください。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 13 機 器 miRNA ［ 特 集 ］ N ew Products & Topics MultiBead™ アッセイキット NEW ヒートショックタンパク質及びサイトカインをマルチに定量できるフローサイトメトリー用キット MultiBead™ アッセイキットは、フローサイトメトリーを使用して、 抗体を結合したビーズを、サイズと蛍光強度に基づいて分離します。 異なる2種類のサイズのビーズはそれぞれ11種類の異なる蛍光強度 シ グ ナ ル 伝 達 を持っているので、1つのウェルで同時に最大36項目定量できます。 670nmフィルターにより、それぞれのビーズサイズを2つの集団に 分け、576nmフィルターでPE標識検出抗体の蛍光を測定すること で目的の測定項目を同時に定量します。 特 長 ●マルチプレックスな性能：時間を節約し、貴重な少量サンプルも 解析可能です。 検出します。 ●定量データ：付属のスタンダードで正確な定量結果が得られます。 ●互換性：一般的なフローサイトメトリーの機器と互換性があります。 構成内容 図1 ●キャプチャービーズカクテル ●抗体カクテル ●SA-PEコンジュゲート ●スタンダードカクテル ●バッファーパック ●解析ソフトウェア アッセイプロトコール 278 178 ※別売のマニホールド（品番987-500）を用いると、洗浄操作が簡単です。 4 10 0 10 0 10 1 2 10 FL5-H 10 3 10 0 4 10 0 10 1 2 10 FL5-H 10 3 10 4 図3 相対蛍光強度によるビーズサ イズの分離 各11個の異なる蛍光強度を持つビー ズサイズは、670nmフィルターを使 用して、APCチャネルで分離される。 この例では、FL5チャネルを使用して APCを測定した。 （ 左）4hmビーズ、 （右）5.4hmビーズをそれぞれ使用し た。 3 10 4 10 3 10 4 10 2 10 0 10 0 10 1 10 2 10 3 10 FSC-H 4 10 図2 サイズによるビーズの分離 4hmビーズを5.4hmビーズと混ぜ合わせた。それぞれ のビーズセットは、11個の異なる蛍光強度を持つビー ズから構成されている。2つのサイズのビーズがフロー サイトメーターで分析され、前方散乱光と側方散乱光に より分離された。 FL5-H 1 10 2 10 1 2 10 1 10 10 0 10 0 0 10 1 10 2 10 FL2-H 3 10 4 10 10 0 10 1 10 汎 用 HSP／シャペロンの種類 Akt、 Hsp27 （phospho-Ser82） 、 Hsp27 （phospho-Ser15） 、 Hsp40、 Hsp60、 Hsp70、 Hsp90α、 Akt （phospho-Ser473） 品 番 980-002 包 装 96 well ■細胞外解析：サイトカイン＆エイコサノイド／Pathplex Panelシリーズ 受 託 サ ー ビ ス 測 定 項 目 機 器 ! 14 品 名 項目数 品 番 希望販売価格 IFN-γ IL-1α IL-1β IL-2 IL-4 IL-5 IL-6 IL-8 IL-10 IL-13 IL-15 IL-17A IL-21 IL-29 MCP-1 MIP-1β PGE2 RANTES TNF-α TXB2 INF 8-Plex 8 980-001 ￥194,000 ● Tumorigenic 9 980-003 ￥218,000 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● Pathplex Panels（Human） INF 17-Plex Th1/Th2 17 11 980-004 980-005 ご照会 ￥267,000 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● Respiratory 11 980-006 ￥267,000 ● 3 10 4 10 Assay Designs, Inc. 略号ASD 希望販売価格 ￥210,000 貯 蔵 4 5 Assay Designs, Inc. 略号ASD Pain 8 980-007 ￥194,000 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● 2 10 FL2-H ■細胞内解析：ヒートショックタンパク質／シャペロン 品 名 HSP/Chaperone 8-Plex MultiBead™ kit 図4 分析物の定量 それぞれの分析物の量は、576nm フィルターを使用してPEチャネル内 のPE標識の蛍光を測定することで決 定される。この例では、FL2チャネル を使用してPEを測定した。 （ 左）4hm ビーズ、 （右）5.4hmビーズをそれぞれ 使用した。 3 10 FL5-H バ イ オ メ デ ィ カ ル ●独自の標識化学：少量の高分子及び低分子分析物も高い再現性で SSC-H 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ● ● ● Cardiovascular 8 980-008 ￥194,000 ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● 上記商品は、全て包装96well、貯蔵4℃と−20℃です。 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ リジン特異的ユビキチン化基質＆脱ユビキチン化酵素プローブ miRNA TOPICS 大好評！ ベストセラー商品です。 脱ユビキチン化酵素アッセイやポリユビキチン結合研究に最適です！ 【 （ ［Kxonly］ Ub）n-ユビキチン化基質サンプラーパック】 【脱ユビキチン化酵素プローブサンプラーパック】 リジン残基特異的に結合したポリユビキチン鎖は、脱ユビキチン ユビキチン（Ub）-プロテアソームシステムは、脱ユビキチン化酵素 化酵素（DUB）の特異性、反応性やポリユビキチン修飾タンパク質の （DUB）として知られるステインプロテアーゼの大きなファミリーを 認識とユビキチン結合部位を持つタンパク質との相互作用の調査に 含んでいます。C末端にチオール反応性の官能基を化学的にライゲー 有用なツールです。本商品は、脱ユビキチン化酵素アッセイやポリユ ションすることで誘導したHA標識ユビキチン分子を、活性部位の共 ビキチン結合研究に有用なユビキチン化基質がセットになっています。 有結合的修飾を通じてDUBの潜在的かつ不可逆的な阻害剤及び DUB活性を有する酵素特異的なプローブとして使用できます。 シ グ ナ ル 伝 達 使用目的 使用目的 ●脱ユビキチン化酵素基質（通常／結合特異的） ●DUB結合型の優先度または特異性のプロファイリング ●脱ユビキチン化酵素（DUB）検出用の活性部位を示すプローブ ●ユビキチン結合タンパク質との相互作用によるポリユビキチン鎖 ●DUBの単離・同定 認識の研究 ●生物サンプル中のDUBの同定 図3 DUB活性部位プローブアッセイの例 レーン1：ユビキチンビニルメチルエステル（HAタグ）のみ レーン2：ユビキチンビニルメチルエステル（HAタグ）及びヒトリコ ンビナントUCH-L1（PGP9.5） （GST） （品番：UW9305-0050） レーン3：ユビキチンビニルメチルエステル（HAタグ）及びラットリコ ンビナントUSP2（触媒ドメイン） （品番：UW9850-0100） ユビキチンビニルメチルエステル（HAタグ）修飾タンパク質は、HA 反応性ポリクローナル抗体を使用して検出した。 図1 Ubn-ユビキチン化コンジュゲートによる基質タンパク質 （X）のユビキチン化を示したSDS-PAGEゲルのクマシーブルー染色 Enzo Life Sciences, Inc. 品 名／構成内容 （ ［K xonly］Ub）n -ubiquitinylated substrates, sampler pack 6 略号BMO 品 番 UW0830-0001 包 装 1 pack 希望販売価格 ￥74,000 貯 蔵 6 UW0895-0001 1 pack ￥50,000 6 11 バ イ オ メ デ ィ カ ル ●Ubn-ユビキチン化基質 ● （K -only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K -only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K27-only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K29-only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K33-only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K48-only）Ubn-ユビキチン化基質 ●（K63-only）Ubn-ユビキチン化基質 Deubiquitinylating enzyme probes, sampler pack ●Ubiquitin Vinyl Sulfone（HA-tagged） ●Ubiquitin Vinyl Methyl Ester（HA-tagged） ●Chloroethyl Ubiquitin（HA-tagged） ●Bromoethyl Ubiquitin（HA-tagged） NEW 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ProteoStat™ タンパク質凝集アッセイ 従来のタンパク質凝集検出色素より、広範囲かつ高感度に検出！ ProteoStat™ タンパク質凝集アッセイは、タンパク質製剤製造 汎 用 特 長 におけるペプチドやタンパク質の凝集をモニタリングする、簡単で 均質な分析評価フォーマットをご提供致します。このアッセイを活用 ●簡単：サンプルの分離や希釈を行わずにタンパク質凝集を検出 することで、タンパク質の加工を合理化し、製剤方法の最適化を可能 ●集約的測定技術のクロスバリデーションに対する便利かつ相補的 な直交方法を提供 にします。 ProteoStat™ 検出試薬は、チオフラビンTといった通常のタンパ や賦形剤 （トレハロース、 ショ糖） に適合 ●一般的なバッファー （PBS等） ク質凝集検出色素と比べ、より広範囲の異なったタンパク質凝集体 ●ハイスループット評価に対応し、 様々なタンパク質製剤に最適化 を検出します。このアッセイは、チオフラビンTよりも、はるかに明 ●生産過程でのタンパク質ダメージに関わる問題解決に有用 るいシグナルを示し、2桁以上高い直線的なダイナミックレンジで、 ●非特異的なアッセイ産物を排除し、 厳密な製造を可能に なミックスを使って導き出される−0.5以上の因子スコアのZ’ ファク ターで求められます。そのため、強くハイスループットなタンパク質 凝集の定量分析が可能です。また、凍結乾燥した天然型タンパク質 の凝集体をネガティブコントロールとポジティブコントロールとして 一緒にご提供しています。 【参考文献】 1．R. Nelson et al.；Nature 435, 773（2005）Abstract 2．T. Arakawa et al.；Bioprocess International 4（10）,32（2006） 3．T. Arakawa et al.；Bioprocess International 5（4）,36（2007） 4．T. Arakawa et al.；Bioprocess International 5（10）,52（2007） 5．R. Krishnamurthy et al.；Bioprocess International 6（5）,32（2008） 品 名 ProteoStat™ Protein Aggregation Assay お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 TM RFU チオフラビン T 下で、1∼5％の濃度なら溶液のままで検出可能です。評価は、簡便 図1 ProteoStat™ 検出試薬とチオフラビンTの比較 25,000 1,000 精製抗ヤギ IgG（ウサギ） （4.26b/e）を凝集させるた 900 めに、pH2.7, 80℃のHCl溶液でインキュベートした。 800 20,000 凝集体からのシグナルは、 凝集体を混ぜてから決定され、 700 異なる比で凝集体と単量体とを混ぜたが、総IgG濃度は 600 15,000 60b/fとした。 50mMリン酸カリウムバッファー、 0 500 pH7に3hM ProteoStat™ 検出試薬または5hMチオ 400 10,000 フ ラビ ン T を 混 合 して 値 を 計 測 し た 。蛍 光 の 値 は 、 拡大図 3hM Proteo Stat 検出試薬 300 ProteoStat™ 検出試薬では、励起光500nm、蛍光 5hM チオフラビン T 200 5,000 603nm、チオフラビンTでは、励起光435nm、蛍光 100 495nmに設定し、BioTek Synergy Mxマイクロプ 0 0 0 10 20 30 40 50 60 レートリーダーを用いて検出した。3点測定は、Greiner B/F IgG 凝集 hClear® black, clear bottom 96ウェルマイクロプ レートに沈着させて行った。ProteoStat™ 検出試薬の シグナルは、チオフラビンTと比べ100倍以上明るかった。また、チオフラビンTと比べて集中カーブも優れ ていた。 チオフラビンTは右軸に、1∼15μgの範囲で記されている。 RFU Proteo StatTM 検出試薬 広範囲のpH（4∼10）において優れた性能を示します。感度はhM以 Enzo Life Sciences, Inc. 品 番 51023-KP002 包 装 1 kit 希望販売価格 ￥70,000 略号ENZ 機 器 貯 蔵 6 Cosmo Bio News No.80 受 託 サ ー ビ ス 15 miRNA ［ 特 集 ］ N ew NEW Products & Topics 神経変性疾患研究用試薬 ミトコンドリア関連の各種疾患研究用試薬が揃っています！ 【Complex IV subunit 1モノクローナル抗体】 チトクロムCオキシダーゼは、O2をH2Oに転換する呼吸鎖におけ シ グ ナ ル 伝 達 るcomplex IVにあたります。チトクロムCオキシダーゼのサブユニ 図2 MELAS症候群 （ミオクローヌス、てんかん、乳酸血症、脳卒中の発症） といった、ミトコンドリアをコードしたtRNAにおける変異をCcoI抗 体（緑）で染色してイメージングした。CcoIサブユニットがある所とな い所の差がはっきりしていることがわかる。抗体は、10％ヤギ血清が 含まれたsubunit 1抗体（品番：MS404） （7.5b/f）で、4℃、一晩 反応させ、サンプルは、線維芽細胞または他の接着細胞で実験した。 ット1は、他のサブユニット2、3と結合して、酵素機能のコア立体構 造を形成します。このサブユニットのHeme Aグループは、サブユニ ット2グループのCupper A（銅イオン）と共に、チトクロムCから complex IVへの電子の伝達を担っています。 サ ブ ユ ニット 1 の 欠 陥 に より、レ ー バ ー 遺 伝 性 視 神 経 萎 縮 症 （LHON） 、後天的で特発性の鉄芽球性貧血（AISA） 、チトクロムC酸 化酵素欠損症（COX欠乏） 、反復性のミオグロビン尿症等が引き起こ 図3 骨格筋の免疫組織化学検査 ミトコンドリアDNAの大きな単一欠損がある患者から採取した組織 切片。 提供：Dr. J. Murphy and D. Turnbull, Mitochondrial Research Group, Newcastle University されます。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル 図4 結腸の免疫組織化学検査 健常老年者から採取した組織切片。 提供：Dr. L. Greaves and D. Turnbull, Mitochondrial Research Group, Newcastle University. For more details, see Taylor et al., J. Clin. Invest. 112：13511360（2003） 図1 ミトコンドリアをヒト（レーン1）、ウシ（レーン2）、ラット（レーン3）、マウス （レーン4）の各心臓から単離し、subunit 1抗体（品番：MS404）で検出し た。マウス（レーン3）の余計なバンドは、血液等を小さい器官から取り除く のが困難だったものと、IgG特異的ヤギ抗マウス二次抗体とが反応したため に現れている。 品 名 品 番 MS404 Anti Complex IV subunit 1 MitoSciences Inc. 略号MIT 希望販売価格 ￥51,000 貯 蔵 4 包 装 100 B 【Complex I 酵素活性測定アッセイキット】 ヒト、マウス、ラットのcomplex I の活性を96ウェルマイクロプレ 構成内容 ートで分析できます。酵素はマイクロプレートのウェルで免疫学的に 捕捉され、NADHからNAD+への酸化反応で生じた電子が色素を還 ●バッファー ●ブロッキング試薬 元し吸光度450nmの値が増加します。 ●界面活性剤 ●NADH 試薬1 ●試薬2 ●96ウェルマイクロプレート complex I の活性は、特異的な翻訳後リン酸化の調節性残基と、酵 素量でコントロールされており、これら2つの因子が細胞代謝を制御 しています。最終的に細胞型と増殖条件がcomplex I の活性測定に 汎 用 影響します。 注意：この活性分析は、複合体 I のジアフォラーゼ型活性を測定します。この活性は、ユビキノンの存在に非依 存的であり、ユビキノン結合部位に結合またはその付近に存在するロテノン等の阻害剤はこの分析を阻 害しません。 しかし、活性分析やここで説明された量の分析の両方が、酵素構築欠損で影響を受けます。 品 名 Complex I Enzyme Activity Microplate Assay Kit 図1 検出原理 品 番 MS141 MitoSciences Inc. 略号MIT 希望販売価格 ￥67,000 貯 蔵 4 6 包 装 1 kit 【フラタキシン定量アッセイキット】 受 託 サ ー ビ ス ヒトでのフラタキシン欠乏では、脊髄の進行性神経変性、肥大型心 筋症、糖尿病が特徴の常染色体劣性遺伝病であるフリードライヒ運 構成内容 動失調（FRDA）が引き起こされます。フラタキシン定量アッセイキ ●20×バッファー ●10×ブロッキング溶液 ットは、このフラタキシンをヒトサンプルから迅速に測定します。フ ●反応液 ●界面活性剤 ラタキシンはプレートのウェル上で免疫学的に捕捉されます。タン ●20×検出抗体 ●20×HRP標識抗体 パク質量は、フラタキシン特異的二次抗体を加えることで測定しま ●96ウェルコート済みマイクロプレート す。HRPが基質を無色から青に変化させ、発色量はウェルで捕捉し たタンパク質量に比例し、600nmの波長の光でモニターできます。 または、1N HCl（別途用意）を加え、任意に反応停止を決定すること も可能です（450nmで測定） 。 機 器 品 名 Frataxin Protein Quantity Microplate Assay Kit ! 16 品 番 MSF41 包 装 1 kit MitoSciences Inc. 略号MIT 希望販売価格 ￥67,000 貯 蔵 4 ミトサイエンス社では、上記商品の他にもミトコンドリア研究用試薬を取り揃えています。ただ今、ミトコンドリア研究試薬リーフレットを配布中です。ご希望の場合は、コスモ・バイオホームページ上の“カタログ請求” また はコスモ・バイオ代理店にご照会ください。 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ 糖質コルチコイド受容体 HRMキット&FKBP5 HRMキット miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 HRM（High Resolution Melt）解析によりSNPを簡単に解析できます 糖質コルチコイド受容体とFKBP5遺伝子に対するSNP解析キットが新登場！ HRM（High Resolution Melt）解析は、核酸配列の遺伝子多型 （SNP）を同定するPCR解析技術です。目的の領域をEvaGreen®を 構成内容 用いてリアルタイムPCR増幅した後、そのPCR産物の解離曲線を描 ●1×マスターミックス くことで、そこに含まれる変異による解離曲線のゆがみを利用した、 ●DNAポリメラーゼ 簡便で迅速な検出法です。 ●3種類のSNPの各遺伝型に対するプラスミドDNA＊ ※これらのキットは、Rotor Gene 6000（Corbett Research社）やRotor Gene Q（QIAGEN社）を用い て検証しています。 ＊プラスミドDNAの詳細内容については、コスモ・バイオホームページ上の商品検索から、品番を入れて検索 し、データシートをご確認ください。 【糖質コルチコイド受容体（Glucocorticoid Receptor：GR）HRMキット （品番：MBK0021） 】 シ グ ナ ル 伝 達 【FKBP5 HRMキット（品番：MBK0022） 】 コルチコステロイドの受容体への細胞内結合は、FKBP（FK506- 糖質コルチコイドは免疫抑制や抗炎症機能に関わっています。糖 binding protein）によって調節され、 FKBP5遺伝子の発現は活性化 質コルチコイド受容体は、細胞質に存在する核受容体スーパーファミ 糖質コルチコイド受容体によって調節されています。FKBP5は糖質 リーに属し、転写因子として働いています。 コルチコイド受容体の転写活性調節の一因となります。通常のSNP 糖質コルチコイド受容体のBcl I、N363S、ER22/23EK多型は、 は、FKBP5 mRNAとタンパク質レベルの増幅に関与し、ヒトでは糖 糖質コルチコイドの感度に影響すると推測されています。糖質コル 質 コ ル チコ イド の 耐 性 に 関 与して い ま す。特 に 、3 種 類 の 新し い チコイド受容体遺伝子で、臨床的に最も関連性のある多型はBcl Iで FKBP5遺伝子の多型は、抑鬱症の再発に関与していることがわかり す。この変異は最近イントロン2に存在するC/Gヌクレオチドとして ました。また、糖質コルチコイドの薬物応答によって、個体差を増加さ 同定され、糖質コルチコイドの感度の増加に関与していることがわか せる要因となっています。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 っています。 使用目的 使用目的 rs1360780、rs3800373、rs4713916多型をHRM解析によ Bcl l、N363S、ER22/23EK多型をHRM解析により同時に検出で り同時に検出できます。 きます。 解析例 バ イ オ メ デ ィ カ ル 解析例 図1 ER22/23EK変異の同定 左）青：G_A-G_A ヘテロ二本鎖の解離曲線。緑と赤：G_G-G_GとA_A-A_A遺伝子型の相対的な温度差。 右）通常の3遺伝子型の解離曲線。 図2 Spiking実験前のBcl I変異の同定 左）青：C-G 遺伝子型の解離曲線。緑：C-CとG-Gの多層曲線 右）通常の解離曲線。 図3 Spiking実験後のBcl l変異の同定 左）青：C-G 遺伝子型の解離曲線。赤：Spiking実験後のG-Gの解離曲線。緑：C-C遺伝子型を示す。 右）通常の解離曲線。 品 名 Glucocorticoid Receptor HRM Kit FKBP5 HRM Kit お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 図1 rs1360780変異の同定 左）青：C-Tヘテロ二本鎖の解離曲線。緑と赤：C-CとT-T遺伝子型の相対的な温度差。 右）通常の3遺伝子型の解離曲線。 汎 用 図2 rs3800373変異の同定 左）青：T-Gヘテロ二本鎖の解離曲線。緑と赤：T-TとG-G遺伝子型の相対的な温度差。 右）通常の3遺伝子型の解離曲線。 受 託 サ ー ビ ス 図3 rs4713916変異の同定 左）青：G-Aヘテロ二本鎖の解離曲線。緑と赤：G-GとA-A遺伝子型の相対的な温度差。 右）通常の3遺伝子型の解離曲線。 品 番 MBK0021 MBK0022 包 装 50 rxn 50 rxn DIATHEVA S. R. L. 略号DTV 希望販売価格 ￥153,000 ￥153,000 貯 蔵 5 5 Cosmo Bio News No.80 機 器 17 siRNA/shRNA ［ 特 集 ］ N ew NEW Products & Topics 幹細胞因子がコードされたレンチウイルスベクター 神経細胞や造血幹細胞等にも導入可能なiPS細胞作製用レンチウイルスベクター レンチウイルスはエンベロープタンパク質（VSV-G）により感染域 【幹細胞因子とGFPの発現】 を広げることができ、神経細胞や造血幹細胞等、これまでのレトロウ イルスではできなかった細胞種への遺伝子導入が可能なツールで シ グ ナ ル 伝 達 す。セルバイオラボ社では、iPS細胞樹立に有用な幹細胞因子がコー ドされたレンチウイルスベクターをお届けします。 【pLentG-KOSMベクター】 図2 pLentG-KOSMベクターを一時的に293T細胞にト ランスフェクトした。それぞれの因子が正しくプロセシ ングされたことをウェスタンブロットによって確認し た。ポジティブコントロールとして、Klf4、Oct3/4、 Sox2、c-Mycを含む発現ベクターを用いた。 pLentG-KOSMは、1つのORFに自己切断性の2Aペプチドを介 してインフレームで融合したレンチウイルスベクターで、CMVプロ モーターを有します。転写因子ORFの下流には、ウイルスのトランス ダクションのレポーターとしてIRES-GFPが続きます。 pLentG-KOSMを用いたiPS細胞の作製は、他の方法よりも高効 率なだけでなく、1つの遺伝子を1つのレンチウイルスにパッケージ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ングするだけなので、時間とコストの節約ができます。 図3 p-LentG-KOSMをMEF細胞に感染させ、3日後にGFP発光を 観察した。 図4 フローサイトメトリーによって、感染 後3日のGFPを発現したMEFを解 析した。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 【KOSM融合遺伝子を含むレンチウイルスを感染させたMEFから生成 されたiPS細胞コロニーの同定】 図1 pLentG-KOSMベクター 特 長 ●1つのポリシストロニックベクターにKlf4、Oct3/4、Sox2、 c-Myc遺伝子を含みます。 図5 誘導された細胞コロニーの多分化能 マーカーの染色（200倍拡大） ●非常に高い生成効率：1つのポリシストロニックウイルス由来の iPS細胞の生成効率は、複数のウイルスを導入したものよりも10 倍、 ウイルスを用いない方法よりも500倍効果的です。 汎 用 ●ポリシストロニックベクターは、GFPレポーター遺伝子も含みます。 ●p53 shRNAベクター（品番：LTV-451） も別途ご購入可能です。 図6 誘導されたES細胞様コロニーのAP 染色（100倍拡大）及び形態（40倍拡大） 品 名 品 番 LTV-700 LTV-451 pLentG-KOSM Lentiviral Vector pLenti-p53 shRNA Lentiviral Vector 受 託 サ ー ビ ス ! 略号CBL 希望販売価格 ￥373,000 ￥139,000 貯 蔵 6 6 Cell Biolabs, Inc. 略号CBL レンチウイルス用の発現システム、パッケージングシステムもご用意しています。詳細はコスモ・バイオ（欄外参照）までお問い合わせください。 ■ViraSafe™ レンチウイルスパッケージングシステム 品 名 ViraSafe™ Lentiviral Packaging System, Ecotropic ViraSafe™ Lentiviral Packaging System, Pantropic パッケージングベクター1 エンベロープベクター パッケージングベクター2 pRSV-Rev pCMV-Eco pCgpV pRSV-Rev pCMV-VSV-G pCgpV ■ViraSafe™ レンチウイルス発現システム 機 器 Cell Biolabs, Inc. 包 装 1 vial（100 E） 100 E 品 番 VPK-205 VPK-206 包 装 1 kit 1 kit 希望販売価格 ￥172,000 ￥172,000 Cell Biolabs, Inc. 構成内容 品 名 発現ベクター パッケージングベクター1 パッケージングベクター2 エンベロープベクター コントロールベクター ViraSafe™ Universal Lentiviral Expression System,Ecotropic pSMPUW Universal pRSV-Rev pCgpV pCMV-Eco pSMPUW-LacZ ViraSafe™ Universal Lentiviral Expression System,Pantropic pSMPUW Universal pRSV-Rev pCgpV pCMV-VSV-G pSMPUW-LacZ ViraSafe™ Lentiviral Expression System（Puro）,Ecotropic pRSV-Rev pCgpV pCMV-Eco pSMPUW-LacZ pSMPUW-Puro ViraSafe™ Lentiviral Expression System（Puro）,Pantropic pRSV-Rev pCgpV pCMV-VSV-G pSMPUW-LacZ pSMPUW-Puro ViraSafe™ Lentiviral Expression System（Neo）,Ecotropic pRSV-Rev pCgpV pCMV-Eco pSMPUW-LacZ pSMPUW-Neo ViraSafe™ Lentiviral Expression System（Neo）,Pantropic pRSV-Rev pCgpV pCMV-VSV-G pSMPUW-LacZ pSMPUW-Neo ! 18 貯 蔵 5 5 略号CBL 品 番 VPK-211-ECO VPK-211-PAN VPK-212-ECO VPK-212-PAN VPK-213-ECO VPK-213-PAN 上記商品は、全て包装1kit、希望販売価格￥226,000、貯蔵−20℃です。 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ LIFEbank™ ヒト疾患特異的初代培養細胞 miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 筋ジストロフィー等のユニークな疾患特異的ヒト初代培養細胞が揃っています！ LIFEbank™ では、幅広いヒト検体からの組織や細胞、及びゲノミ クス／プロテオミクス研究のツールをご提供しています。これらの 製品は様々な発生段階から、また各種病理学的、遺伝学的な病態を 示すものから採取されています。 図1 筋ジストロフィー症患者から単離した皮膚線維芽細 胞の位相差顕微鏡画像 特 長 【LIFEbank™ 疾患特異的システム】 LIFEbank™ 疾患特異的システムは、内分泌または神経疾患（糖尿 図2 筋ジストロフィー症患者から単離した皮膚線維芽細胞 の免疫細胞染色 ヒト線維芽細胞抗体（緑）及びヒトフィブロネクチン抗体（赤） を使用して免疫細胞染色した。また、核はDAPI（青）で染色し た。 病、パーキンソン病やALS等）のような特定の病態を研究するため の疾患特異的初代細胞を提供します。 ■LIFEbank™ 疾患特異的システムの商品例 下記細胞の他に、各々細胞ペレット、細胞溶解液、 トータルRNA、cDNA等をご用意しています。品番等はご照会ください。 DV Biologics LLC カテゴリ 品 名 造血系-筋萎縮性側索硬化症（ALS） Bone Marrow Mononuclear Cells※ Bone Marrow Stromal Cells 外皮系-筋萎縮性側索硬化症（ALS） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-横断性脊髄炎 （TM） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-アストロサイトーマ （AC） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-グリオブラストーマ （GM） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-神経線維腫症 （NF） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-1型糖尿病 （DT1） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 消化器系-関節リウマチ （RA） Dental Pulp Cells 品 番 aH002-f-ALS-2.5 aH005-f-ALS aI001-f-ALS aI001-f-TM aI001-f-AC aI001-f-GM aI001-f-NF aI001-f-DT1 aD010-f-RA 希望販売価格 ￥26,000 ￥263,000 ￥210,000 ￥210,000 ￥184,000 ￥184,000 ￥210,000 ￥184,000 ￥263,000 カテゴリ 品 名 Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-関節リウマチ（RA） 外皮系-全身性紅斑性狼瘡 （SLE） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-乾癬 （Ps） 外皮系-ギラン・バレー症候群（GBS） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-動静脈形成異常 （AVM） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 生殖器系-ロバートソン転座 （RTL） Gonadal Stromal Cells 外皮系-ムコ多糖症 （MPS） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） 外皮系-レッグカルベペルテス症（LCP） Skin Cells（Dermal Fibroblasts） ! 略号DBV 品 番 aI001-f-RA aI001-f-SLE aI001-f-Ps aI001-f-GBS aI001-f-AVM aR005-f-RTL aI001-f-MPS aI001-f-LCP 希望販売価格 ￥184,000 ￥184,000 ￥158,000 ￥210,000 ￥210,000 ￥315,000 ￥210,000 ￥210,000 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 包装は5.0×105cells/vial、※のみ25x105cells/vialです。貯蔵は、液体窒素です。 バ イ オ メ デ ィ カ ル DBバイオロジックス社では、上記商品の他にも様々な細胞を取り揃えています。 ただ今、細胞関連商品リーフレットを配布中です。ご希望の場合は、コスモ・バイオホームページ上の“カタログ請求”またはコスモ・バイオ代理店にご照会ください。 NEW シ グ ナ ル 伝 達 Pepino mosaic virus（PepMV）AgriStrip 植物病原体を10∼15分以内に検出するワンステップアッセイ ペピーノモザイクウイルス（PepMV）ストリップが新登場！ バイオレバ社の迅速ワンステップアッセイAgriStripは、側方流動免 疫クロマトグラフィーに基づいた非常に迅速なアッセイです。本試験 汎 用 特 長 は、疑わしい症状のあるサンプル中の植物病原体を確認するために ●迅速：10∼15分で結果が得られます。 開発されました。ホモジナイズされたサンプル破砕物を数滴キュベッ ●単一試験に最適 ●簡単な操作 トに移し、ストリップを抽出物中に浸すと、数分以内に結果が出ます。 ●特別な実験装置は不要 ●温室や野外で試験可 陽性の場合は、テストラインに色の付い たバンドが観察され、コントロールライ 構成内容 ンにも必ずカラーバンドが現れます ●25ストリップ（乾燥剤バッグ入り） （図1） 。テストストリップは、退色せず永 久的な記録として保存しておくことが ●100ml AgriStrip 抽出バッファー（Ready-to-use） できます。 ●使い捨てピペット（25個） 受 託 サ ー ビ ス ●抽出バッグ（25枚） この試験は非常に簡単で、特別な実 験装置を必要としません。したがって、 ●使い捨てキュベット（25個） AgriStripは温室や野外のような現場 ●キュベットラック での試験時にも、 非常に適しています。 図1 テストストリップ Bioreba AG 品 名 Aac AgriStrip CbMV AgriStrip Ea AgriStrip LMV AgriStrip ! 品 番 161981 170781 153081 160581 品 名 PepMV AgriStrip PMMoV AgriStrip PPV AgriStrip PVS AgriStrip NEW 品 番 161581 161781 150581 110381 品 名 PVX AgriStrip PVY AgriStrip Rs AgriStrip Sss AgriStrip 品 番 110481 112981 170581 111181 品 名 TMV AgriStrip ToMV AgriStrip Xcp AgriStrip Xfr AgriStrip 略号BRA 品 番 190481 152681 170181 150381 機 器 上記商品は、包装1kit （25assay） 、希望販売価格￥41,000、貯蔵は4℃です。 また、 各々にAgriStrip Single strips（AgriStrip 抽出バッファー（Ready-to-use） のみ） をご用意しています。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 19 miRNA ［ 特 集 ］ N ew NEW Products & Topics 検証済みshRNAアデノウイルス粒子 ノックダウン効率は、qRT-PCRまたはウェスタンブロッティングで確認済み！ シリオンバイオテック社の検証済みshRNAアデノウイルス粒子は、 迅速、簡単かつ便利にRNAiアッセイを始めることができます。多数の 重要なターゲットに対するshRNAアデノウイルス粒子をご用意してお シ グ ナ ル 伝 達 り、70∼98%のmRNA阻害効率を示します。また、アデノウイルスベ クターは、 大部分のヒトやげっ歯類細胞等に幅広く形質導入できます。 図1 筋芽細胞におけるChipノックダウンのウェスタンブロッ ティング解析 コントロールベクター（レーン1）とChip mRNAに対する shRNAを発現するアデノウイルスベクターAd-shChip（レー ン2）を導入した筋芽細胞の溶出液におけるChip発現（矢印） を示すウェスタンブロット。 ベクターの詳細 ●ベクター：E1/E3 deleted adenoviral serotype 5 vector ●発現カセット：shRNA under control of human U6 promoter SIRION BIOTECH GmbH 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル 汎 用 品 名 AKAP8 AKAP8 AKT2 AKT2 AKT3 AKT3 APAF1 ATM AurA BAK1 BAX BCL2 BCL2L1 BCR BCR BCR BECN1 BECN1 BID BIRC3 BIRC3 BIRC5 CASP3 CASP3 CASP6 CASP7 CASP8 CASP9 CAT CD31 CD4 CD63 CDH1 CDK5 ! 種由来 ノックダウン効率 品 番 86% MS 710-019774-10 83% MS 710-019774-20 85% HU 710-001626-10 85% HU 710-001626-20 75% HU 710-005465-10 85% HU 710-005465-20 約 70% 710-013229-10 HU 約 70% 710-000051-10 HU 88% HU 710-198433-10 約 90% 710-001188-10 HU 約 85% 710-004324-10 HU 80% HU 710-000657-10 約 80% 710-138578-10 HU 89% HU 710-004327-10 77% HU 710-004327-20 79% HU 710-004327-30 約 80% 710-003766-10 HU 約 85% 710-003766-20 MS 約 85% 710-197967-10 HU 88% HU 710-001165-10 88% HU 710-001165-20 約 95% 710-001168-10 HU 約 70% 710-032991-10 HU 約 70% 710-214131-10 Sus scrofa 約 80% 710-001226-10 HU 約 70% 710-033338-10 HU 約 90% 710-001228-10 HU 約 70% 710-001229-10 HU 88% HU 710-001752-10 86% HU 710-000442-10 82% MS 710-013488-10 83% MS 710-007653-10 80% HU 710-004360-10 92% HU 710-004935-10 品 名 種由来 ノックダウン効率 品 番 90% HU 710-001259-10 CDK6 91% HU 710-001259-20 CDK6 94% HU 710-001261-10 CDK9 90% HU 710-001712-10 CEACAM1 83% HU 710-001712-20 CEACAM1 80% MS 710-181324-10 Ddx6 約 85% 710-030621-10 HU DICER1 90% HU 710-005228-10 EGFR 80% HU 710-001982-10 ERBB3 約 80% 710-003824-10 HU FADD 75% HU 710-012306-10 FAIM2 95% HU, MS 710-012306-20 FAIM2 77% HU 710-012306-30 FAIM2 85% HU, MS 710-002006-10 FGF2 90% HU 710-002006-20 FGF2 88% HU 710-005252-10 FOS 90% HU, MS 710-005252-20 FOS 85% HU 710-005252-30 FOS 80% MS 710-010234-10 FOS 約 80% 710-214312-10 Sus scrofa GNAS 75% HU 710-019884-10 GSK3A 88% 710-002093-10 GSK3B HU, MS, Rat 77% 710-003897-10 IER3 HU 78% 710-003897-20 IER3 HU 88% 710-003897-30 IER3 HU 約 75% 710-001278-10 IKKa HU 約 70% 710-001556-10 IKKb HU 約 80% 710-003639-10 IKKg HU 83% 710-004972-10 JAK1 HU, MS 90% 710-004972-20 JAK1 HU, MS, Rat 78% 710-004972-30 JAK1 HU 86% 710-004972-40 JAK1 HU 80% 710-007250-10 KLF8 HU 75% 710-133815-10 LBR MS 上記商品の包装は、全て1×109 IUです。希望販売価格はコスモ・バイオ（欄外参照）までお問い合わせください。 関連商品 TransMAX アデノウイルス導入エンハンサー試薬 TransMAXはペプチドベース溶液で、アデノウイルスの取り込みを 高め、導入遺伝子の発現を増加させます。 TransMAXは、 アデノウイル 受 託 サ ー ビ ス 品 名 LEF1 LGALS1 LGALS3 LGALS3 LMNA LMNA LMNA LSM1 MDM2 MDR1 MET MET MMP9 mTOR mTOR NOTCH1 NOTCH1 P53 PIK3CA PKCz PRKCA PRKDC RB SH3GL1 SIRT1 SOD1 SOD1 STAT3 STAT3 STUB1 TLR3 TNFR1 TNFR2 TSF1/STK16 TSF1/STK16 サンプルあります 特 長 ス表面と細胞膜を特異的に橋渡しをして、アデノウイルスの導入を高 ●従来に比べて20∼50倍の発現増加 ●ほぼ全ての細胞に対応 めますので、導入困難な細胞にもお使いいただけます。化学的な形 ●アデノウイルス使用量の節約 ●細胞毒性なし 質導入エンハンサーと違って、 TransMAXは細胞毒性がありません。 図1 TransMAXの存在下、非存在下で、NIH-3T3細胞に EGFPを発現するアデノウイルス・セロタイプ5を形質 導入（MOI：200） し、発現量を比較。 図2 TransMAXの存在下、非存在下で、Bt-20 （ヒト乳癌）細胞にAd-EGFPを形質導入しEGFPの発現量を比較。 SIRION BIOTECH GmbH 機 器 略号SIR 種由来 ノックダウン効率 品 番 HU, Rat 84% 710-016269-10 HU 約 70% 710-002305-10 HU 約 85% 710-002306-10 HU 約 95% 710-002306-20 HU 約 70% 710-002306-10 HU 約 70% 710-002306-20 MS 約 75% 710-002306-30 MS 85% 710-026032-10 HU 約 80% 710-002392-10 HU 約 90% 710-000927-10 MS 75% 710-008591-10 MS, HU 72% 710-008591-20 Sus scrofa 約 80% 710-001038004-10 HU 約 70% 710-004958-10 HU 約 70% 710-004958-20 HU 約 75% 710-017617-10 HU 約 65% 710-017617-20 HU 約 95% 710-000546-10 HU 95% 710-006218-10 HU 75% 710-002744-10 MS 約 80% 710-011101-10 HU 78% 710-006904-10 HU 約 90% 710-000321-10 MS 77% 710-005901-10 HU 84% 710-012238-10 HU 97% 710-000454-10 HU 95% 710-000454-20 HU, Rat 89% 710-003150-10 HU 75% 710-003150-20 HU 90% 710-005861-10 Rat 約 80% 710-198791-10 HU 約 60% 710-001065-10 HU 約 60% 710-001066-10 HU 75% 710-003691-10 HU 85% 710-003691-20 品 名 TransMAX Adenovirus Transduction Enhancer Solution ! 20 上記商品にはサンプルをご用意しています。詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 Cosmo Bio News No.80 品 番 750-10 包 装 50 rxn＊ 希望販売価格 ￥105,000 略号SIR 貯 蔵 5 ＊24well plateでご使用の場合 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ RNAzol® RT RNA単離試薬 miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 従来の試薬よりもRNA収率が高く、高品質のRNAが得られます！ クロロホルム使用の必要なし！ RNAzol® RTは、ヒト、動物、植物、バクテリア、ウイルスサンプル からトータルRNA、mRNA、miRNA（10∼40base）を含む シ グ ナ ル 伝 達 200base未満のsmall RNAを従来よりも効果的に単離する試薬で す。RNAzol® RTは、高品質のRNAを単離でき、DNase処理せずに、 RT-PCRが可能です。 サンプルをRNAzol ® RT中で、ホモジナイズまたは溶解します。 DNA、タンパク質、多糖類やその他の分子は、水を加えることにより 沈殿し、遠心によって除去できます。エタノール沈殿後、洗浄と可溶 化することにより、上清から純粋なRNAが単離できます。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 特 長 ●高収量かつ高品質！ ●操作時間は1時間以内。 ●クロロホルム使用の必要なし：クロロホルムによる分離ステップ は必要ありません。水を加えるだけです。 ●様々なアプリケーションで使用可能：RT-PCR、マイクロアレイ、 図1 ラット肝臓のトータルRNA及びsmall RNAサンプルのアジレント社RNAナノチップ及びsmall RNA チップ解析 高品質トータルRNA（A）は、RNA Integrity Number（RIN）値が9.2、28/18Sの値が1.6の高純度RNA。 miRNA領域（Bの挿入図）は、small RNAの約5％の割合で存在していることが示されている。 ポリAセレクション、ノーザンブロッティング及びRNaseプロテク ションアッセイ等。DNase処理の必要がありません。 ●冷却遠心機は必要なし：全てのステップを室温で行えます。 Molecular Research Center, Inc. 品 名 品 番 RN190 RNAzol® RT Reagent NEW 包 装 50 F 100 F 200 F 希望販売価格 ￥15,000 ￥26,000 ￥48,000 バ イ オ メ デ ィ カ ル 略号MOR 貯 蔵 3 3 3 DyNAmo™ ColorFlash qPCRキット 色調の変化でピペッティングエラーを防げます！ SYBR® Greenベースのキット、probe chemistryベースのキット 汎 用 のどちらもご用意しています。 特 長 図1 青＋黄色＝緑 DyNAmo™ ColorFlash qPCRキットの2×マス ターミックスは青色ダイ。40×サンプルバッファーは 黄色。 プライマーを添加したマスターミックスの中に、 テンプレートを添加したサンプルバッファーを加える と溶液が緑色に変化し、可視判断が容易になる。 ●正確なピペッティング！：反応溶液調製時の誤操作のリスクを 最小限に抑制。 ●マルチカラーシステム：白い反応容器を使えばさらに効果的です。 ●最速！：わずか15秒でアニーリングと伸長を同時反応。 ●特異的＆高感度：広範囲な検出テンプレート濃度の特異的・高感度 な検出が可能。 図2 透明または白色プレートでは反応調製が容易 qPCR反応では、白色反応容器の方が透明な容器よ りも高いシグナル強度を示す。従来の無色の反応液 では、白色容器は見えにくく、溶液の調製が困難だっ た。DyNAmo™ ColorFlash qPCRキットは、この 困難を克服し、誤操作を低減することができる。左図 では、青色のウェルには2×マスターミックスのみ、 緑色のウェルにはテンプレートDNAが添加されてい ることがわかる。 ●キャリーオーバーコンタミネーションを防止：UNGの使用が可能 なdUTPを含有。 ●qPCRに特化 Finnzymes Oy 品 名／構成内容 略号FZM 品 番 F-416S 包 装 40 rxn 希望販売価格 ￥8,750 ●2x master mix with blue dye（contains hot start version of a modified Tbr DNA polymerase、SYBR Green I、optimized PCR buffer、5 mM MgCl2、 dNTP mix including dUTP） ●40x sample buffer solution with yellow dye ●50x ROX™ passive reference dyes 貯 蔵 5 F-416L 200 rxn ￥36,400 5 DyNAmo™ ColorFlash Probe qPCR Kit F-456S 40 rxn ￥8,750 5 ￥36,400 5 DyNAmo™ ColorFlash SYBR® Green qPCR Kit ® ●2x master mix with blue dye（contains hot start version of a modified Tbr DNA polymerase、optimized PCR buffer、5 mM MgCl2、 dNTP mix including dUTP） ●40x sample buffer solution with yellow dye ●50x ROX™ passive reference dyes お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 F-456L 200 rxn 受 託 サ ー ビ ス Cosmo Bio News No.80 機 器 21 N ew miRNA ［ 特 集 ］ NEW Products & Topics EvaGreen® qPCRマスターミックス 新世代蛍光試薬EvaGreen® を使用した安価で高感度なqPCR酵素 ABM社のEvaGreen® qPCRマスターミックスは、新世代の蛍光試 薬であるEvaGreen® を用いており、SYBRベースのqPCRマスター ミックスと比べて高い特異性と感度が特長です（図1） 。同じサンプル シ グ ナ ル 伝 達 を異なるqPCR装置で比較しても、EvaGreen® qPCRマスターミッ クスは一貫して強いシグナルと優れた感度をもたらします。また、独 自のホットスタートTaq ポリメラーゼと最適化されたバッファーによ り、より優れたパフォーマンスを実現しています。EvaGreen ® 図1 EvaGreen® と一般的なマスターミッ クスとの比較1 qPCRマスターミックスは、NTC（no template control） において、 しばしば他のqPCRミックスやmiRNA qPCR増幅で見られる非特 異的なシグナルを抑えます（図2）。さらに、他社 マスターミックスに置き換えて使用でき、ABI社 の既存の全てのqPCR装置に対応する商品を取 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 バ イ オ メ デ ィ カ ル り揃えています（表1）。ABM社は優れた品質の EvaGreen® シリーズを低価格でご提供致します。 【参考文献】 Higuchi R., Dollinger G., Walsh PS., Griffith R.；Bio/Technology 10：413-417,1992 図2 EvaGreen® と一般的なマスターミッ クスとの比較2 ■qPCR装置とEvaGreenシリーズの対応表 品 名 2X EvaGreen® qPCR Mastermix-ROX 品 番 MASTERMIX-R 2X EvaGreen® qPCR Mastermix-low ROX 2X EvaGreen® qPCR Mastermix-iCycler 2X EvaGreen® qPCR Mastermix MASTERMIX-LR MASTERMIX-IC MASTERMIX-S ! qPCR装置 ●ABI® 7000、7300、7700、7900、StepOnePlus™、StepOne™ ●Eppendorf ® Realplex 4 ●Stratagene® Mx3000、Mx3005、Mx4000 ●ABI® 7500 ●BioRad® iCycler ® 、iQ™ 5、MyiQ™ ●Roche LightCycler ® 480 ●BioRad® CFX96 ●MJ Research Opticon™ and Opticon™ 2 ●MJ Research Chromo® 4 ●Corbett Rotor-gene® 600、3000 ●Eppendorf ® Realplex 2 上記qPCR装置は以下のメーカーの登録商標です。ABI ®：Applied Biosystems社、BioRad ®、iCycler ® 及びMJ Research Chromo®：Bio-Rad Laboratories社、Eppendorf ® ：Eppendorf社、 Stratagene ® ：Stratagene社、LightCycler ®：Roche社、Rotor-gene® ：QIAGEN社 Applied Biological Materials Inc. 品 名 MasterMix-R MasterMix-LR MasterMix-iC MasterMix-S NEW 使用目的 構成内容 ●遺伝子発現解析 ●マイクロアレイのバリデーション ●ウイルス濃度の定量 ●EvaGreen qPCR Mastermix（2x） （dNTPs、Hotstart Taq polymerase、MgCl2、 fluorescent detection dye、reference dye、 proprietary buffer） 品 番 MASTERMIX-R MASTERMIX-LR MASTERMIX-IC MASTERMIX-S 包 装 4x1.25 F 4x1.25 F 4x1.25 F 4x1.25 F 希望販売価格 ￥37,000 ￥37,000 ￥37,000 ￥37,000 略号APB 貯 蔵 5 5 5 5 Bst Adapter Fill-Inキット DNA配列中のニックやギャップを補修します 汎 用 次世代シークエンスやcDNAライブラリーの構築に！ 超音波処理、Nebulization処理中やDNAの熱変性等で作られる 使用目的 ●次世代のシークエンスライブラリーの構築 DNA配列中のニックは、PCR増幅等のアプリケーションに影響を与 ●cDNAライブラリーの構築 えるため、DNA配列中のニックやギャップを閉じたり、埋めたりするこ ●DNA配列のニックやギャップの補修・除去 とが必要です。また、リンカーとして知られる非リン酸化アダプターを 受 託 サ ー ビ ス STEP 2 用いるcDNAや次世代（Next Gen）シークエンシングライブラリー の構築においても、ニックやギャップを閉じる必要があります。この Adapter Adapter ようなアダプターのライゲーションは通常、よく知られているアダプ ター配列（図1）に隣接する、不明な配列の増幅を妨げている一本鎖 ニックを閉じることで完結します。 Bacillus stearothermophilus Bst Adapter Fill-Inキットには、 STEP 3 STEP 1 （Bst）由来の鎖置換型ポリメラーゼとDNAサンプル中のニックやギ ャップを除去するヌクレオチドを含んだ最適化バッファーが含まれて います。 【参考文献】 Margulies M, et al. Genome sequencing in microfabricated high-density picolitre reactors. Nature 437, 376-380, 2005 機 器 品 名 Bst Adapter Fill-In Kit 22 Cosmo Bio News No.80 図1 非リン酸化リンカーのライゲーションで生じたDNAニックのAdapter Fill-in反応による平滑末端 DNAの作製 品 番 40031-1 包 装 10 rxn Lucigen Corporation 略号LUC 希望販売価格 ￥17,000 貯 蔵 5 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ ヒト及びラット IL-1阻害剤 miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 従来のものより100倍程度強力にIL-1の活性を阻害 IL-1は炎症性サイトカインで、先天性及び獲得性の免疫応答に関 マーとIL-1R II-IgG1Fcホモダイマーも含みますが、IL-1の阻害には 与し様々な疾患の一因となっていると考えられています。IL-1レセ IL-1R-Igヘテロダイマーが、他のホモダイマーより強い阻害活性を プターI（IL-1RI）は、CD121aとしても知られていますが、80kDA 示します。 のタイプ1膜貫通型タンパク質です。IL-1αとIL-1βに結合した シ グ ナ ル 伝 達 IL-1RIは、結合をシグナルに変換します。一方、IL-1R IIはCD121b として知られ、65kDaのタンパク質で、IL-1αやIL-1βに結合しても シグナルを伝えません。シグナル伝達には、別の膜貫通型タンパク質 であるIL-1Rアクセサリータンパク質（IL-1R acp） との複合体が必要 とされます。可溶性のIL-1R acpと、可溶性のIL-1R IIは正常血清に 図1 ヒトIL-1阻害剤のリコンビナントタンパク質の構造 存在し、IL-1R acpの可溶性型は、IL-1αとIL-1βが可溶性IL-1R II に結合する親和力を高めます。IL-1の阻害は様々な疾患動物モデル 図2 ヒトIL-1R-Igヘテロダイマーを含 む培地における阻害活性 IL-1R-Igヘテロダイマーの活性を、ヒト IL-1αリコンビナントと条件培地を24 時間培養した後、ヒト肺線維芽細胞由来 のMRC-5細胞において発現したIL-8遺 伝子発現を阻害する能力を測定した。培 地はhuman IL-1R-Igヘテロダイマーを それぞれ3.6fmol/fと4.5fmol/f含 む培地で、それぞれ75％と97％阻害し た。250pg/fのヒトIL-1αリコンビナ ントによって生じる生物学的反応との ID 50は3.0fmol/f。偽培地は阻害しな かった。偽培地は、pCAGGSをトランス フェクションしたもの。 に役立ち、様々なヒトの疾患に新しい治療として期待されています。 培地条件はpCAGGS-Rat GRO/CINC2αN-Human IL-1R acp-Human IgG1Fc-6Hisと、pCAGGS-Human IL-1R IIHuman IgG1 Fc-Rat GRO/CINC2αC- Myc（図1）をCos-7細 胞 に 共トラン スフェクションした も の から 得ら れ ました（ R P M I 1640,10%FBS,100unit/f penicillin,100b/f streptomycin）。これを0.22eでフィルター精製しました。これはヒトIL- 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 1R-Igヘテロダイマーだけではなく、IL-1R acp-IgG1Fcホモダイ 品 名 IL-1Receptor-Ig heterodimer-containing medium for IL-1 inhibition IL-1Receptor-Ig heterodimer-containing medium for IL-1 inhibition NEW 適用種 Human Rat 品 番 KN-NIGU-M01 KN-NIGU-M02 コスモ・バイオ株式会社 略号CSR 希望販売価格 ￥60,000 ￥60,000 貯 蔵 5 5 包 装 500 F 500 F バ イ オ メ デ ィ カ ル 抗体精製用プレパックカラム Ab-Rapid PuRe™ ラット及びマウスの抗体を10分で簡単に精製！ Ab-Rapid PuRe™ は、ラット、マウスの抗体精製でご好評をいた ■ Ab-Capcher™ とは？ だいているアフィニティゲル担体Ab-Capcher™ が充填されたプレ Ab-Capcher™ は、プロテノバ社 パックカラムです。 本品1個を用いて腹水、培養上清等の試料から の特許技術により開発された抗体結 ラット、マウスの抗体を3∼7c精製することが 合タンパク質Protein A-R28を固 できます（結合量はアプライの流速やグロブリン 定化したゲル担体です。従来のプロテ のサブタイプにより変動します） 。 インAゲルより適応抗体種が広く、プ 汎 用 ロテインGゲルより結合量が大きい 図2 マウスIgG1精製例 マウス腹水1fからモノクローナルIgG1 2.8cを10分以内に精製できた。 画期的なアフィニティゲル担体です。 ■Ab-Capcher™ の結合特性 種名 マウス 図1 精製プロトコール ※シリンジは含まれていませんのでご注意ください。別売のバッファーキット（品番：P-011）を使用してい ただくと、さらに手軽に精製できます。 ラット ニワトリ ヒト ウサギ サブクラス IgG1 IgG2a IgGs IgY IgG IgG Ab-Cap ++++ +++++ +++ − +++++ +++++ 品 名 品 番 P-012-2 P-012-10 包 装 2 column 10 column 品 名 品 番 P-011 P-002-2 P-002-10 包 装 10 rxn 2F 10 F Ab-Rapid PuRe™ 2 Ab-Rapid PuRe™ 10 Protein A + ++++ − − ++++ ++++ Protein G ++ + + − ++ ++ プロテノバ株式会社 略号PTN 希望販売価格 ￥16,000 ￥64,000 貯 蔵 4 4 プロテノバ株式会社 略号PTN 希望販売価格 ￥5,000 ￥25,000 ￥75,000 貯 蔵 4 4 4 受 託 サ ー ビ ス 関連商品 Buffer kit for Ab-Rapid PuRe™ Ab-Capcher™ お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 機 器 23 N ew miRNA ［ 特 集 ］ NEW Products Topics & CaptureSelect® 抗体精製マトリックス プロテインA及びLを超える抗体精製ツール、ヒト化抗体精製用に！ ラクダ科動物のVHHドメインを使用し、抗体クラス＆サブクラスを選びません！ CaptureSelect® の親和性リガンドは、ラクダ科動物の一本鎖の シ グ ナ ル 伝 達 特 長 重鎖抗体の可変部位（VHHドメイン）から開発しました。重鎖抗体は 軽鎖が欠損していますが、VHHドメインに抗原が結合し、一般的な ●プロテインA、プロテインLを上回る親和性。Fc部位（IgG1,2,3, 4） 、κ軽鎖、λ軽鎖に結合 抗体と同等な結合親和性を有します（図1） 。 一般的に抗体精製に使用されているプロテインA/Lには、親和性 ●高い特異性、親和性、安定性 ●IgM精製も可能 ●穏やかな溶出条件 のない抗体クラスやサブクラスがあります。また、結合した抗体を溶 出する際に、低いpH条件を必要とするため、精製されたIgG抗体の 機能を変換するおそれがあり、使用可能な精製方法を見つけるのは 非常に困難でした。 BAC BV社では、免疫したラマ（ラクダ科）の重鎖抗体発現ライブ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ラリーから、特異性、親和性、溶出方法、洗浄条件等の必要条件を満 たすリガンドを単離しました。その結果、Fc部位、κ軽鎖、λ軽鎖特 図1 一般的なIgG抗体とラクダ科動物のIg抗体の構造比較 異的なVHHフラグメントを開発し、プロテインA/Lの全ての特長及 びそれ以上を包括的にカバーするツールを製品化しました。例えば、 IgM、IgA、IgG4の特異的な精製用のリガンドは、ユニークで潜在的 に付加価値の高い性質を有するにもかかわらず、精製が困難であっ 図2 VHHリガンドで精製したIgMとIgA Ph3-4でワンステップ・プロセスで行った。 レーン1：ヒト血清 レーン2：フロースルー レーン3：溶出液 レーン4：分子量マーカー たため見過ごされてきた抗体を精製することが可能になりました。 バ イ オ メ デ ィ カ ル 品 名 CaptureSelect ® IgA CaptureSelect ® IgM CaptureSelect ® Multi Species Fc CaptureSelect ® Human Fc CaptureSelect ® Fab κ CaptureSelect ® Fab λ ! サブタイプ IgAの全てのサブクラス IgGとIgAには結合しない IgG3を含む全てのサブタイプ IgG3を含む全てのサブタイプ IgG、IgA、IgM、IgE IgG、IgA、IgM、IgE 種交差 Human Human/Mouse Multi Human Human Human 品 番 2880.05 2890.05 2855.05 0822.05 0833.05 0849.05 包 装 5F 5F 5F 5F 5F 5F BAC BV 略号BAV 希望販売価格 ￥161,000 ￥161,000 ￥161,000 ￥161,000 ￥161,000 ￥161,000 貯 蔵 4 4 4 4 4 4 上記商品には、サイズ違いがあります。詳細はコスモ・バイオホームページ上の“サイト内検索”をご利用ください。 （キーワード：CaptureSelect） NEW siTrio™（Human、Mouse、Rat）75%ノックダウン保証付きsiRNA 簡単・確実にノックダウン！ 汎 用 カクテルではターゲット配列に対する3種のsiRNAがミックスされ ており、 mRNAのレベルで75%以上のノックダウンを確約します※。 カクテルの利点は、1アッセイでノックダウンできること、またカク テル内の1本にSNPs、ポイントミューテーション、データベースの配 列ミスがあっても3本が補完し合い、 確実な効果が得られることです。 オーダー方法 ①NCBIホームページのアクセッション番号 （Reference Sequence のNM_またはXM_の番号に限ります） を確認。 ②商品名、アクセッション番号、種（ヒト・マウス・ラット）を明記してご 発注ください。以前に同じターゲットのsiTrio™ をご購入された方 はお手元の商品にあるカタログ番号をお申し付けください。 特 長 受 託 サ ー ビ ス ③ご注文の際は、コスモ・バイオホームページ上（サポート情報→書類 ●カクテル3本で75%ノックダウン保証付き※ ダウンロード）からご購入申込書をダウンロードして、当社商品取り ●オーダーはアクセッション番号で 扱いの代理店に、 注文書と共にご提出ください。 ●カクテルで手軽に1アッセイ・ノックダウン ■お問い合わせ ●ヒト、マウス、ラット遺伝子のNCBIデータを網羅 ※100nMのsiRNAを細胞に導入し、導入が確認された細胞で24時間後に対象とするmRNAのレベルを 25%以下にまで抑制します。 【保証対象】使用細胞はどのような細胞を使用していただいてもかまいません。ただし、コントロール試薬 （ポジティブコントロール、ネガティブコントロール）を使用した比較実験が必要です。Lamin A/C、Lamin （Human、Mouse、Rat）等のターゲットでRNA効果（25%以下に抑制）の証明が取れれば、内在性ターゲ ットと外来性ターゲットのどちらの場合も保証の対象となります。siTrio™ の場合は、siTrio™ 用ネガティ ブコントロールをご利用ください。複数siTrio™ の同時導入の場合は対象外となります。 品 名 機 器 siTrio™ フルセット カクテル ! 24 仕 様 ＋各siRNA ＋配列情報 販売支援部 TEL： （03）5632-9615 FAX： （03）5632-9618 E-mail：[email protected] コスモ・バイオ株式会社 構成内容 のフルセットです。 ●カクテル 18 nmol ●各siRNA 3 nmolx3本 ●配列情報 略号MIR 希望販売価格 貯 蔵 ￥66,000 5 siTrio™ 商品は、NCBIデータベースの配列情報の追加・変更や［B-Algo™］のアルゴリズム変更に伴い更新されます。①更新は事前の予告なく実施されることがあります。②更新（バージョンアップ）後は、カタログ番号の 一部が変わります（siTrio™ の場合：SO9A-XXXX→SO9B-XXXX） 。③旧バージョン商品は予告なく取り扱い中止となる場合があります。 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp NEW 新しく発売された商品です。 TOPICS 今後の注目商品です。 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 ［ 特 集 ］ モノクローナル抗体作製受託サービス miRNA NEW 大好評！ ベストセラー商品です。 高い細胞融合率を維持し、安定した成果が得られます！ ■基本サービス 特 長 期 間 ●高い融合率の維持： 常時、細胞融合を行っているため、そのプロセスがライン化してお り、安定した成果が得られます。 20週∼ ●抗原量が少ない場合にも対応： タンパク質抗原の場合、ご用意いただける抗原量に応じた抗体作 製をご提示します。詳しくはお問い合わせください。 基本項目 免疫 ↓ 細胞融合 ↓ スクリーニング ↓ クローニング ↓ 細胞凍結または引渡し 参考価格 シ グ ナ ル 伝 達 ￥1,000,000/抗原 ●精製した抗体の納品： すぐに利用可能な抗体精製のご要望にもお応えします。 ■オプション I ●リーズナブルな価格設定： 期 間 4週 1週 省力化、 効率化に努め、 リーズナブルな価格で提供しております。 ●純度の低い抗原にも対応： ! 基本項目 ペプチド合成（含精製） ハプテン化 参考価格 ￥90,000/10残基＊ ￥50,000∼ 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ＊印は参考価格です。配列数により変動します。 スクリーニングの際、イムノブロッティング等を有効に活用して、 目的の抗体クローンをハンティングする等、様々な対応によりご ■オプション II 要望にお応え致します。 期 間 ─ ●リスクの軽減化： 免疫抗原の種類から抗体産生リスクを予想し、成功率の低い場合 参考価格 ご照会 基本項目 腹水化 大量培養 参考価格 ￥26,000∼/クローン ￥50,000∼/クローン 基本項目 抗体精製 参考価格 ￥65,000/クローン ■オプション III にはお引き受けできない場合があります。 受託サービスの流れ 基本項目 ELISA以外のアッセイ 期 間 4∼6週 4週∼ ■オプション IV 期 間 2週∼ ①マウス免疫 ご支給いただく抗原の詳細を「お見積依頼書＊」にご記入いただき ! バ イ オ メ デ ィ カ ル オプションをご希望の場合は、基本料金・引渡し期間共に加算してください。 ます （ペプチド合成も対応可能ですので、 ご照会ください） 。 コスモ・バイオ株式会社 ＊確認事項の記載がないものはお受けできかねる場合がございます。 ・抗原1種類につきBalb/Cマウス3匹に免疫。免疫途中で全ての マウスが死亡してしまった場合は、再度2匹のマウスを再免疫 （再免疫においてもマウスが死亡してしまった場合には抗体作製 不可能と判断させていただき、 費用のご請求はございません） 。 ②細胞融合∼陽性クローン樹立 最後の免疫後、細胞融合を行い、目的とするハイブリドーマ確定の ため、ELISAにてスクリーニングを行い、陽性クローンを確定し 略号KOJ ■お見積もり・ご注文方法 本サービスをご利用いただく際には「事前見積もり」が必要にな ります。お見積もり依頼書はコスモ・バイオホームページ上（製品 情報→受託サービス）からダウンロードできます。また、お問い 合わせいただければ、お見積もり依頼書をお送り致しますので、 ご連絡をお願い致します。 汎 用 ます。その陽性クローンから抗体価の高い3クローンを選択し次 ステップに移ります（ELISAデータをご送付致します） 。 その際、ELISAにて陽性クローンが1つも取得できない場合は、 MEMO 抗体作製不可能とさせていただき、抗体作製費用の20%を請求致 します。また、ELISAにて陽性と判断したクローンにおいてご評 価を希望される場合には別途ご相談とさせていただきます。 ③モノクローナル抗体産生ハイブリドーマの樹立 ②で選択した3クローンを2度クローニングし、単一のモノクロー 受 託 サ ー ビ ス ナル抗体を産生するハイブリドーマを樹立します。 樹立後、お送りする培養上清において、お客様のご評価にて目的の クローンが得られない場合は、1回のみ別クローンの凍結細胞か ら再度3クローンまでのクローニング作業を致します。 ④納品 機 器 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 25 miRNA ［ 特 集 ］ N ew Products & Topics BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 TOPICS in vivoとin vitroで使用可能です！ オプション ■ピンセット型電極（TWEEZERTRODES™） in vivo 〈特長〉 ●全長約12cmのピンセットをベースに先端部分に円形状の電極を 取り付けたピンセット型電極です。 、プラチナ製が ●電極部素材はステンレス製が2種類（径7mm・10mm） 4種類（径1mm・3mm・5mm・7mm）の6種類が用意されています。 ●電極部間のギャップは1mmから2cmの範囲で調整が可能です。 ●遺伝子導入装置との接続には、 専用のケーブルが用意されています。 ●使用電圧範囲：0∼200V DC ●使用パルス幅：1hsec∼200msec ●使用パルス数：1∼99 （設定電圧値に依存） シ グ ナ ル 伝 達 全6種類 希望販売価格￥155,000∼￥200,000 ※接続ケーブル（￥20,000）が別途必要です。 細 胞 培 養 ・ 細 胞 工 学 ■2ニードル固定型電極（2-Needle Array™） スクエアパルスの特長は、出力電圧、パルス幅、パルス数を正確に 制御できる点です。これにより対象細胞への電気的なダメージを最 小限に抑え、パルス出力後の細胞の生存率を向上させることができ、 より幅広い対象細胞への遺伝子導入に対応できると共に、電気的ダ in vivo 〈特長〉 ●ディスポーザブル式の2本のステンレス製ニードルが固定された 1体型の電極部分と、デルリン製のハンドル部分から構成された 電極です。 ●先端電極間ギャップ（10mm、5mm）によりそれぞれ2種類が用 意されています。 ●遺伝子導入装置への接続用ケーブルは、各ハンドルに付属しています。 ●使用電圧範囲：0∼500V DC ●使用パルス幅：1hsec∼99msec ●使用パルス数：1∼99（設定電圧値に依存） 全2種類、 希望販売価格￥37,800 ※ハンドル（￥37,800）が別途必要です。 メージを受けやすい動物細胞でのin vivo 実験にも有効です。 ■ニードル型電極（Genetrodes™） バ イ オ メ デ ィ カ ル 特 長 ●低電圧側は5Vから1V刻みで、高電圧側は3,000Vまで設定可能。 幅広い種類の細胞への導入条件に対応できます。 ●出力後各設定条件と共に、実効電圧、実効パルス幅をモニターで きます。 ●設定操作はシングルロータリーノブにより簡単に行えます。 in vivo / in ovo 〈特長〉 ●先端部分がゴールド仕様、0.5mmφのニードル状の電極です。 ●先端電極部の長さ、形状（ストレート型、L型）により5種類が用意 されています。 ●専用の固定用具を使用することにより、対象組織に応じて電極間ギャ ップを1mmから10mmの間で1mmおきに調整することができます。 ●遺伝子導入装置との接続には、フック端子付のケーブルを経由し て接続します。 ●使用電圧範囲：0∼200V DC ●使用パルス幅：1hsec∼99msec ●使用パルス数：1∼99（設定電圧値に依存） 全5種類、希望販売価格￥63,000 ※ホルダー（￥65,000） と接続ケーブル（￥35,000）が別途必要です。 ●設定条件は3パターンメモリー可能です。 ●in vivo 実験用として各種形状の電極類が用意されています（オプ ション） 。 ■ヘラ型電極（Genepaddles™） in vivo / in vitro Embryo 〈特長〉 ●先端部分がゴールド表面加工（厚さ0.04mm）されたヘラ型形状 （長方形） の電極です。 ●先端電極部ヘラ部分の大きさの異なる（3×5、5×7mm）2種類 が用意されています。 ●専用の固定用具を使用することにより、対象組織に応じて電極間ギャ ップを1mmから10mmの間で1mmおきに調整することができます。 ●遺伝子導入装置との接続には、フック型端子付のケーブルを経由 して接続します。 ●使用電圧範囲：0∼200V DC ●使用パルス幅：1hsec∼99msec ●短絡保護機能付です。 汎 用 全2種類、希望販売価格￥70,000 ※ホルダー（￥65,000） と接続ケーブル（￥35,000）が別途必要です。 図1 標準構成内容（品番：T830） ・ECM® 830遺伝子導入装置本体 ・BM6200 ディスポーザブルキュベット （2mmギャップ滅菌済み25個） ・BTX630B セーフティースタンド ・BTX660 キュベットラック 受 託 サ ー ビ ス 機 器 ■ノギス型電極（Caliper Electrodes） ■仕様 スクウェア DCパルス設定 高電圧モード 505∼3,000 V（5 V刻み） 電圧設定 低電圧モード 5∼500 V（1 V刻み） 高電圧モード 10∼600 Hsec （1 Hsec刻み） 低電圧モード 10∼999 Hsec（1 Hsec刻み） パルス幅設定 1∼999 ｍsec （1 msec刻み） 1∼10 sec （0.1 sec刻み） パルス数 1∼99 パルスインターバル 100 msec∼10 sec 条件メモリー機能 有 モニタリング機能 有 （パルス出力後実効電圧、 パルス幅表示） パルス形状 BTX 品 名 BTX® ECM® 830遺伝子導入装置 26 Cosmo Bio News No.80 品 番 T830 包 装 1 unit in vivo 〈特長〉 ●ノギスの形状をした電極で、ノギスの操作そのままで電極間隔を 任意にセットできます。 ●電極部は、ノギス先端に装備されており、銅製（1×1cm）とステンレ ス製（1.5×1.5cmまたは2×2cm）の2種類が用意されています。 ●遺伝子導入装置への接続ケーブルは、各電極に付属しています。 ●使用電圧範囲：0∼500V DC ●使用パルス幅：1hsec∼99msec ●使用パルス数：1∼99（設定電圧値に依存） 全2種類、希望販売価格￥116,000 ※ケーブル込みです。 ■フットスイッチ （ECM® 830用） 〈特長〉 ●in vivo実験で両手で電極操作を行いながら、パルス出力操作を行える ようにするためのフットスイッチです。 BTX 略号BXD 希望販売価格 ￥1,450,000 貯 蔵 3 品 名 フットスイッチ （ECM® 830用） 品 番 1250FS 略号BXD 包 装 希望販売価格 1 unit ￥91,000 貯 蔵 3 http://www.cosmobio.co.jp FAX.03-5632-9619 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 Hope in the Laboratory 研究室のホープ うめざわ まさかず 38 vol. 梅澤 雅和さん 東京理科大学薬学部 日本学術振興会 特別研究員 18 18 COSMO BIO NEWS 18A EB-2 19 19 COSMO BIO NEWS 19A EB-2 20 20 COSMO BIO NEWS 大気中の浮遊粒子と急増する疾患の関係とは？ 環境と健康を見つめ、緑の中を今日も走る！ 頼れる先輩でもある。 「目標はマラソン完走最高齢のギネス記録 森や利根運河沿いを、毎日10キロほど走る。走りは単なる趣味 です」と笑う彼にとって、 ランニングは研究者生活のリズムを支え ではなく、梅澤さんの問題意識の原点ともなっているようだ。 るペースメーカーでもあるのだろう。 17A EB-2 梅澤さんの朝はランニングから始まる。キャンパスに隣接する 茨城県出身の梅澤さんは、 中学時代から8年間、 東京都内に通学。 陸上部の練習で路上を走った後に、体に不調を来すことがあった という。高校時代にはアトピー性皮膚炎を発症。しかし、大学2年 の時、キャンパスが都内から緑豊かな野田に移って間もなく、 アト ピーは自然に治ってしまったという。 「この体験から、生活環境と 健康は切っても切り離せない関係にあるという確信を持ちました」。 現在、梅澤さんは大気環境の悪化と、近年、若年層に増加して いる子宮内膜症との関連について研究を進めている。不妊の一 因ともなる子宮内膜症は基礎研究が進んでおらず、原因には不明 環境衛生化学専攻 武田研究室 東京理科大学薬学部 武田健教授らは2006年、排ガス中のナノ粒子が、母マウスを介して仔 の脳に蓄積され、周辺細胞に影響を及ぼしていることを発見。また、化粧 品等に利用されている酸化チタンナノ粒子が、同様に仔の脳や精巣に取 り込まれていることを世界で初めて見出した。 「ナノ粒子はバクテリア、 ウ イルス、プリオンに続いて第4の病原物質と呼びたくなるほど、様々な病 態を引き起こします」と武田教授。近年、急激に増えつつある疾病のメカ ニズムが、 この発見により次々と解明されつつあり、研究室はさわやかな 熱気にあふれる。研究室のモットーは「とにかく仲良くやれ」だと教授は な点が多い。梅澤さんはこれまで、病態形成の要因の一つとして、 笑う。 「互いに教え合ってもらわないと研究が進みませんから。理科大には、 大気中の微粒子による健康影響が重要であることを報告。今後 同窓生同士が助け合う良き伝統があるんですよ」。大学に隣り合う森は、 はさらに進んで、 「体質」という大きなテーマにも取り組んでいき たいという。 「僕自身、走り続けてきたことで体質が変わったとい 同窓生の寄付によって生まれた自然公園であり、野鳥の宝庫。緑濃いこの 地で、 「環境」を切り口に疾病の予防法や治療法の発見を目指す、若き研 究者たちの挑戦は続く。 う実感があります。体質は遺伝のみによるものではなく、自分で かなり変えられる、 ということを科学的に立証できたら」。修士2 年の時に初めて海外誌に論文を投稿。丸1年を経てようやく掲載 にこぎつけた。この経験が、自分の研究を「世界」という視点で根 本から捉え直す良い機会になったという。 研究室では、 研究と私生活との両立といった悩みもしっかり聞く、 武田 健 教授 研究室の皆さん Cosmo Bio News No.80 27 新規抗体商品のご案内 抗体名 ACAP3 Anaphase Promoting Complex 4 Atrogin 1 AUTS2 CAGE1 CAPSL CASA CBY1 CCNJL CCT6A CENPL CPD CPLX3 CPZ CRTC3 CTNA1 DHX34 Dilantin DNAJB3 DREV EGFLAM EHBP1 EIF4E3 EMAL2 Endothelin Receptor ERLIN1 EXOG EZR FCGRT FCRLB FIBG FRYL FUT3 GDPD5 GFM2 GHITM GINS2 GLRX3 GLS2 GLYR GOLSYN GPC5 GUF1 Gα i H2AFY2 Haptoglobin α HEMGN Ichthyin IDO1 IFFO1 IFT52 IMP4 KDEL Receptor 2 KEO 4 KIAA 0226 KRT 83 L2HGDH LPCAT 4 LRIT3 LUZP1 LY6E MAGT 1 MAPE MCA1 MED26 Mitofilin MORC2A MPZL2 MRTO4 MTX1 MUL1 N6AMT2 28 Cosmo Bio News No.80 略号 A PGI ABV FGI EVR C EVR PGI ABG ABV PGI ABG PGI ABG PGI ABG ABG ABG D PRX APB PGI ABG E PGI PGI PGI ABG ASD PGI ABV ABV F PGI PGI ABG PRX ABV G PGI PGI PGI PGI ABV ABG AGR PGI ABV PGI NEB H ABV SCB PGI I SCB ABV PGI PGI PGI K ABV EVR PRX ABV L PGI PGI ABV PGI ABV M PGI ABG ABG ABV MIT PRX ABV ABV PGI PGI N PGI ここに掲載しております商品はごく一部です。コスモ・バイオホームページ上“商品検索”をご利用ください。 品番 包装 希望販売価格 17570-1-AP 150 E ￥68,000 H00029945-D01P 100 B ￥53,000 ATR1-101AP 100 B ￥82,000 EB09003 100 B ￥40,000 EB09265 100 B ￥40,000 17174-1-AP 150 E ￥68,000 AP6551C 0.1 C ￥42,000 H00025776-D01P 100 B ￥53,000 16065-1-AP 150 E ￥68,000 AP6612C 0.1 C ￥42,000 17007-1-AP 150 E ￥68,000 AP6725B 0.1 C ￥42,000 16949-1-AP 150 E ￥68,000 AP6546A 0.1 C ￥42,000 AP6633B 0.1 C ￥42,000 AP6582A 0.1 C ￥42,000 MK01340910 Y104681 17177-1-AP AP6636B 50 B 1F 150 E 0.1 C ￥50,000 ￥64,000 ￥68,000 ￥42,000 14578-1-AP 150 E ￥68,000 17637-1-AP 150 E ￥68,000 17282-1-AP 150 E ￥68,000 AP6734A 0.1 C ￥42,000 905-637 100 B ￥43,000 17311-1-AP 150 E ￥68,000 H00009941-D01P 100 B ￥53,000 H00007430-D01P 100 B ￥53,000 16190-1-AP 17157-1-AP AP6583B MK08260910 H00002525-B01P 150 E 150 E 0.1 C 50 B 50 B ￥68,000 ￥68,000 ￥42,000 ￥50,000 ￥47,000 16494-1-AP 150 E ￥68,000 16941-1-AP 150 E ￥68,000 16296-1-AP 150 E ￥68,000 16247-1-AP 150 E ￥68,000 H00010539-D01P 100 B ￥53,000 AP6650B 0.1 C ￥42,000 AS09 543 1 F ￥68,000 16972-1-AP 150 E ￥68,000 H00002262-D01P 100 B ￥53,000 17489-1-AP 150 E ￥68,000 21006 100 E ￥68,000 H00055506-D01P 100 B ￥53,000 SC-134466 200 B ￥51,000 17616-1-AP 150 E ￥68,000 SC-133278 100 B ￥51,000 H00003620-D01P 100 B ￥53,000 16041-1-AP 150 E ￥68,000 17534-1-AP 150 E ￥68,000 16205-1-AP 150 E ￥68,000 H00011014-D01P 100 B ￥53,000 EB09462 100 B ￥62,000 MK02260910 50 B ￥50,000 H00003889-D01P 100 B ￥53,000 15707-1-AP 150 E ￥68,000 17905-1-AP 150 E ￥68,000 H00345193-D01P 100 B ￥53,000 17483-1-AP 150 E ￥68,000 H00004061-D01P 100 B ￥53,000 17430-1-AP AP6720B AP6721A H00009441-D01P MSM02 MK08520910 H00010205-D01P H00051154-D01P 15529-1-AP 16133-1-AP 150 E 0.1 C 0.1 C 100 B 100 B 50 B 100 B 100 B 150 E 150 E 16954-1-AP 150 E ￥68,000 ￥68,000 ￥42,000 ￥42,000 ￥53,000 ￥51,000 ￥50,000 ￥53,000 ￥53,000 ￥68,000 ￥68,000 抗体名 NBAS NDUFB 2 NGLY 1 NOL12 Nucleophosmin OGDHL Olfactory Receptor 73 OMA1 Parathymosin PMSCL1 PODXL2 PSD 2 PUS3 R3HDM1 RABL2A RNF144B ROGDI RSPH3 RTCD1 RXFP3 SALM2 SBNO1 SCOT SCRIB Serotonin Receptor 3B SFXN4 SH3YL1 SLC44A2 SPB3 SPEG Stilbene Synthase STX17 Thioredoxin Reductase β TLX 1 TM4SF3 TMC1 Tomosyn TRAT1 TRAV20 TRBC1 TRDD3 TROAP TRPG TRPL TSH receptor TSH β TSN TSPAN8 TSPO TTYH1 TUBGCP3 TUFM U2AF2 UBA1 UCN3 UCRC UEV 3 UEVLD UIMC1 UPF2 VASN Vasonatrin VCAN VCL VMD 2 VSNL1 VSX2 WWP1 ZA20D1 ZADH1 ZAN ZBED 5 ZNF 10 ZNRF4 ZPLD1 ZYX 略号 PGI PGI ABG PGI LSP O PGI LSP PGI P APB EVR PGI PGI PGI R PRX PGI ABV PGI PGI PGI KAL S RSD SCB SCB PRX EVR PGI SCB ABV ABG ABV APB PGI T LFR ABV EVR OSS SCB ABV PGI PGI ABV ABV OSS OSS BCH ABV ABV ABG ABV ABV PGI ABG U PGI PGI ABV ABV ABV ABV ABV ABV V ABV ABV ABV ABV ABV PGI ABV ABV Z ABV ABV ABV ABV ABV ABV ABV ABG 品番 14683-1-AP 17614-1-AP AP6689C 15456-1-AP LS-B2930-50 包装 150 E 150 E 0.1 C 150 E 50 B 希望販売価格 ￥68,000 ￥68,000 ￥42,000 ￥68,000 ￥92,000 17110-1-AP LS-C94469-500 17116-1-AP 150 E ￥68,000 500 B ￥82,000 150 E ￥68,000 Y058268 EB08993 16383-1-AP 17404-1-AP 17248-1-AP 100 E 100 B 150 E 150 E 150 E ￥30,000 ￥62,000 ￥68,000 ￥68,000 ￥68,000 MK00290910 50 B ￥50,000 17816-1-AP 150 E ￥68,000 H00255488-D01P 100 B ￥53,000 17047-1-AP 150 E ￥68,000 17603-1-AP 150 E ￥68,000 15996-1-AP 150 E ￥68,000 KX576 200 E ￥55,000 AF5669 SC-166519 SC-133988 MK01470910 EB09495 17647-1-AP SC-135519 H00057153-M01 AP6579A H00010290-D01P Y058207 17815-1-AP 100 B 200 B 50 B 50 B 100 B 150 E 100 B 100 B 0.1 C 100 B 100 E 150 E ￥74,000 ￥51,000 ￥51,000 ￥50,000 ￥62,000 ￥68,000 ￥51,000 ￥47,000 ￥42,000 ￥53,000 ￥30,000 ￥68,000 LF-PA41227 PAB0355 EB09316 OST00104W SC-136105 MAB0932 13132-1-AP 13524-1-AP H00028523-B01 H00010024-A01 OST00142W OST00131W Z8050067 MAB0867 H00007247-A01 AT4381A PAB7095 H00057348-B01 15719-1-AP AT4408A 50 B 100 B 100 B 100 E 50 B 100 B 150 E 150 E 50 E 50 E 100 E 100 E 100 B 100 B 50 E 0.1 C 100 B 50 E 150 E 0.1 C ￥91,000 ￥47,000 ￥62,000 ￥48,000 ￥51,000 ￥47,000 ￥68,000 ￥68,000 ￥47,000 ￥32,000 ￥48,000 ￥48,000 ￥57,000 ￥47,000 ￥32,000 ￥66,000 ￥47,000 ￥47,000 ￥68,000 ￥66,000 15624-1-AP 150 E ￥68,000 15912-1-AP 150 E ￥68,000 PAB7613 100 B ￥47,000 H00029796-M07 100 B ￥47,000 H00055293-B01 50 E ￥47,000 H00055293-B01P 50 B ￥47,000 H00051720-B01P 50 B ￥47,000 PAB6940 100 B ￥47,000 H00114990-D01P PAB5188 MAB0309 H00007414-M01 H00007439-B01 13919-1-AP PAB9842 H00011059-M01 100 B 100 B 100 E 100 B 50 E 150 E 50 B 100 B ￥53,000 ￥47,000 ￥47,000 ￥47,000 ￥47,000 ￥68,000 ￥31,000 ￥47,000 H00056957-B01 50 E ￥47,000 H00145482-B01 50 E ￥47,000 H00007455-M05 100 B ￥47,000 H00058486-B01P 50 B ￥47,000 H00007556-B01P 50 B ￥47,000 H00148066-B01 50 E ￥47,000 H00131368-M01 100 B ￥47,000 AT4653A 0.1 C ￥66,000 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 Catch up ! 酸化ストレスマーカーHNE検出抗体 脂質過酸化の研究に有用なツールです！ 生体内で生じる活性酸素は細胞情報の伝達をはじめエネルギー チン（老人性色素斑）に似た蛍光性物質が生成することが知られて の生産、異物に対する防御等の様々な役割に関与している一方、 おり、LDLの酸化度を評価するための簡易的な指標として用いら 過剰になるとDNAの損傷やタンパク質、脂質の変性等に関与し、 れています。 疾病や老化を助長する因子になることが示唆されています。特に 名古屋大学大学院生命農学研究科の内田先生は、LDLの酸化修 脂質の過酸化による変性は生活習慣病と密接に関与するといわれ 飾に関する研究の結果、LDL中の高度不飽和脂肪酸由来の脂質過 ており、予防や治療の研究ツールに対するニーズが高まっていま 酸化分解物である4-オキソ-2-ノネナール（4-Oxo-2-nonenal： す。コスモ・バイオ抗体ブランドCACでは、脂質の過酸化によって ONE）やHNEがタンパク質中のリジン残基と付加、架橋反応する 生じた分解産物を特異的に認識するユニークなモノクローナル抗 ことにより蛍光性のヒドロキシイミノジヒドロピロール（Hydroxy- 体をラインアップしました。 iminodihydropyrrol：HIDP） 構造を形成することを見出しました。 4-ヒドロキシ-2-ノネナール（4-Hydroxy-2-nonenal：HNE）は アラキドン酸等のn-6系高度不飽和脂肪酸を由来とする脂質過酸 化分解物です。HNEは非常に反応性の高いアルデヒドで、タンパ Hydroxy-2-nonenal-Protein抗体（2C12）は、HIDP構造を特異 的に認識する抗体です。 【Anti（4R）-Hydroxy-2-nonenal-Protein（クローンR310） 】 ク質中の求核性アミノ酸と容易に反応し、いろいろな構造の付加 HNEは脂質過酸化分解により産生される時、ラセミ体として生 体を形成、臨床的には循環器系疾患やアルツハイマー病等の病巣 成、タンパク質中のヒスチジン残基とMichael付加反応し、タン 部で確認されています。 パク質上に異性体付加構造を形成します。 （4R）-Hydroxy-2- 【Anti Hydroxy-2-nonenal-Protein（クローン2C12） 】 nonenal-Protein抗体（R310）はそれらの中でも、R-HNEが付 低密度リポタンパク質（LDL）が酸化されると、LDL中の脂質過 酸化分解物とタンパク質成分であるアポB100が反応、リポフス 加して形成した構造を特異的に認識する抗体です。 提供者：名古屋大学大学院生命農学研究科 内田 浩二 先生 コスモ・バイオ株式会社 品 名 Anti Hydroxy-2-nonenal-Protein Anti（4R）-Hydroxy-2-nonenal-Protein Catch up ! 免疫動物 Mouse Mouse アイソタイプ IgG IgG クローン番号 2C12 R310 適 用 WB, IHC WB, IHC 品 番 N-53000701 N-53000801 マウスCD31（PECAM-1）抗体 包 装 30 B 30 B 略号CAC 希望販売価格 ￥60,000 ￥60,000 貯 蔵 5 5 サンプルあります ホルマリン固定パラフィン切片の組織免疫染色に！ クローンSZ31は、ホルマリン固定パラフィン組織切片で、マウ スCD31（PECAM-1）に特異的に反応するラットモノクローナル 抗体です。CD31はPECAM-1（Platelet Endothelial Cell Adhesion Molecule-1）とも呼ばれ、胚及び成体血管内皮細胞で 図1 マ ウス 腺 癌 の 血 管 及 び 毛 細 血 管 内 皮 細 胞 の CD31抗体（クローン：SZ31）による特異的 染色。 発現します。CD31は、免疫グロブリンスーパーファミリーに属す る130kDaの膜内在性糖タンパク質です。CD31は、血管新生時 に血管内皮細胞間の相互作用における重要な役割を担っていま す。ホルマリン固定切片での染色は、非常に困難でした。CD31の マウスモデルの病態生理学的研究では制限がありました。クロー ンSZ31は、マウスのホルマリン固定パラフィン切片で、CD31の 高品質な免疫組織染色を可能にします。 図2 マウス肺と肝臓の血管及び毛細血管内皮細胞 のCD31抗体（クローン：SZ31）による免疫 染色。 ●免疫組織染色の例：マウスCD31抗体による、ホルマリン固定切 片の標準的な免疫組織染色を行った。全ての組織は、標準的なア ビジン-ビオチンアルカリフォスファターゼ法の手順に従い、ク エン酸バッファーで高温処理し、ヘマトキシリン染色とパパニコ ロウ染色で対比染色した。 図3 マウス脊髄と骨格筋の血管及び毛細血管内皮 細胞のCD31抗体（クローン：SZ31）による 特異的染色。 提供者：Prof. Dr. H. Stein, Institute of Pathology, Charité, Berlin, Germany Dianova GmbH 品 名 Anti CD31 ! 免疫動物 Rat アイソタイプ IgG2a クローン番号 SZ31 種交差 Mouse 適 用 IHC（f）, IHC（p）, WB 品 番 DIA 310 包 装 100 B 略号DNV 希望販売価格 ￥95,000 貯 蔵 4 上記商品にはサンプルをご用意しています。数に限りがありますのでご注意ください。詳細は、コスモ・バイオ（欄外参照）までご照会ください。 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 FAX.03-5632-9619 Cosmo Bio News No.80 29 新規ELISA商品のご案内 Catch up ! CRP ELISAキット CRPを測定する高感度のELISAキットが揃っています 急性期タンパク質は、感染症、炎症、外傷の後に濃度が増加する 進し、細胞毒性を介する細胞を増加させると思われてきました。こ 血漿タンパク質のことです。一番初めに発見された急性期タンパク こ最近の研究から、血漿や血清中の定量によって、検出、予後、ヒト 質は、TilletとFrancesによって1930年代にヒトで発見されまし だけでなくペットや農場の家畜においても、疾患モニタリングによ た。肺炎連鎖球菌のC多糖に結合することから、C反応性タンパク質 って有益な検査をすることができます。 （CRP）と名づけられました。CRPは110kDaから140kDaのα グロブリンで、5つの同一のサブユニットで構成され、環状ペンタマ 構成内容 ーを非共有結合で形成しています。ヒトでは肝臓で合成され、通常 は0.3c/dd以下のレベルで血清の微量成分として存在します。血 ●5×希釈ランニングバッファー ●20×洗浄溶液 清中のレベルは急激に組織がダメージを受けると上昇し、刺激が去 ●100×酵素標識抗体 ●基質 ると低下します。CRPの機能は補体活性を助け、食細胞の機能を促 ●CRPキャリブレーター ●停止溶液 ●抗CRP抗体コートELISAプレート Immunology Consultants Laboratory, Inc. 品 名 交差種 Human Mouse Rat Rabbit Feline Canine Porcine Equine CRP ELISA Kit 測定範囲 3.125∼100 nA/F 0.39∼25 nA/F 12.5∼200 nA/F ─ ─ 6.25∼100 nA/F 7.8∼200 nA/F ─ 品 番 E-80CRP E-90CRP E-25CRP E-15CRP E-20CRP E-40CRP E-5CRP E-70CRP 包 装 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 略号ICS 希望販売価格 ￥57,000 ￥86,000 ￥86,000 ￥86,000 ￥86,000 ￥86,000 ￥97,000 ￥86,000 貯 蔵 4 4 4 4 5 4 4 4 4 5 関連商品 Immunology Consultants Laboratory, Inc. 品 名 交差種 Mouse Rat Rabbit Canine Porcine CRP Reference Serum Catch up ! 品 番 RS-90CRP RS-25CRP RS-15CRP RS-40CRP RS-5CRP 包 装 1F 1F 1F 1F 1F 略号ICS 希望販売価格 ￥23,000 ￥23,000 ￥23,000 ￥23,000 ￥23,000 貯 蔵 4 4 4 4 4 ヒトMASP-3 ELISA 未知なるMASP-3の解明に！ 血清中に存在するマンノース結合レクチン（MBL）やフィコリン 構成内容 は自然免疫に働くレクチンです。MBLにはセリンプロテアーゼ MASPs（MASP-1、MASP-2、MASP-3）が結合しています。細菌 ●洗浄バッファー ●結合バッファー ●希釈バッファー 等の糖鎖にMBL及びフィコリンが結合すると、MASPsにより補体 ●スタンダード ●TMB基質 ●反応停止液 成分が分解され、MBLパスウェイが活性化されます。MASP-3の ●ビオチン標識トレーサー ●フレーム 生理的な役割は明らかにされていません。MASP-3は、主に肝臓 ●ストレプトアビジン−ペルオキシダーゼ ●接着カバー で発現し血液中に分泌されています。MASP-3濃度は一年を通し ●コート済み12マイクロタイターストリップ て安定です。多発性硬化症の患者では、MASP-3レベルとヒト内在 性レトロウイルスの関連が示唆されていますが、MASP-3の欠如 についてはまだ報告がありません。 このMASP-3 ELISAキットでは、MASP-3の未知の生理活性 と欠如による影響の研究が可能です。 特 長 ●MASP-3の生理活性を解明するツールです。 図1 MBLパスウェイ ●信頼性があり、迅速に行えます。 Hycult Biotech 品 名 MASP-3 ELISA Kit 30 Cosmo Bio News No.80 適用種 Human 測定範囲 8∼500 nA/F 品 番 HK339 包 装 1 kit（2x96 well） 希望販売価格 ￥172,000 略号HCB 貯 蔵 4 http://www.cosmobio.co.jp 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 Catch up ! 15-epi-Lipoxin A4 ELISAキット 自己免疫機構、アレルギー応答、創薬等の研究に！アスピリンに誘発されるLipoxin A4アナログ効果の測定が可能 15-epi-Lipoxin A4は、アスピリンに誘発されるエイコサノイド 構成内容 です。アスピリンは、心臓疾患、癌疾患、HIV感染の治療に、優れ た効果を発揮すると考えられています。炎症時には好中球が活性 ●EIAバッファー（30f） 化しますが、15-epi-Lipoxin A4をin vivoで投与すると、好中球 ●洗浄バッファー（20f） ●HRP標識15-epi-LXA4（75e） ●抽出バッファー（5×） （30f） の活性を阻害し炎症を抑制します。15-epi-Lipoxin A4は次の経 ●基質（20f） 路を介して産生されます。 ●抗15-epi-Lipoxin A4抗体コート済み96ウェルプレート ●15-epi-LXA4 標準液（50e） アラキドン酸→15（R）-HETE→15-epi- Lipoxin A4 アスピリンはプロスタグランジンG/H合成酵素のアセチル化に 関係していると考えられ、この合成酵素はアラキドン酸を15（R） - HETEへ変換します。本キットでは、アスピリンに誘発される Lipoxin A4アナログ効果の測定が可能です。 図1 標準曲線 略号NEO Neogen Corporation 品 名 感 度 0.02 nA/F 15-epi-Lipoxin A4 ELISA Kit Catch up ! 品 番 407110 包 装 1 kit 希望販売価格 ￥108,000 貯 蔵 4 5 アポリポプロテインA1＆B ELISA 細胞抽出液、血清、血漿サンプルからのapoA1及びapoBの分析に最適！ apoA1は、HDL（高密度リポタンパク質）の主要タンパク質成 構成内容 分で、抗炎症作用があり血管にたまったコレステロールを肝臓に 運ぶ働きがあります。apoA1値が高いと、アテローム性動脈硬化 ●コート済み96ウェルプレート のリスクが低くなります。 ●ビオチン標識モノクローナル抗体 apoBは、LDL（低比重リポタンパク質）の主要タンパク質成分 ●ストレプトアビジン-HRP で、悪玉コレステロールのキャリアと見なされています。apoB値 ●アポリポタンパク質スタンダード が高いと、アテローム性動脈硬化のリスクが高くなります。血液中 ●ストップソリューション のapoA1とapoB値のバランスは、心疾患の危険度を見るうえで ●TMB基質 ●バッファー 重要な要素かつ指標となっています（1）。 ●希釈液 ●粘着プレートカバー マブテック社のヒトapoA1とapoBのELISAキットは、自社開発 のモノクローナル抗体ペアからなります。いずれのELISAキットの アポリポタンパク質も、Cynomolgus属、Rhesus macaques 属、その他分析可能なサルapoA1とapoBと交差性があることを 確認しております。また、ウシアポリポタンパク質と交差しないの で、肝臓またはHepG2やCaco2といった細胞株抽出液からの apoA1とapoBのモニタリングに最適です。 【参考文献】 1.Walldius G. and Jungner. I., Apolipoprotein B and apolipoprotein A-I： risk indicators of coronary heart disease and targets for lipid-modifying therapy. J. Int. Med. 255：188205（2004） Mabtech AB 品 名 ApoA1 ELISAPRO kit 適用種 Human、Rhesus Monkey、Crab eat Monkey ApoB ELISAPRO kit お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 Human FAX.03-5632-9619 品 番 3710-1HP-2 3710-1HP-10 3715-1HP-2 3715-1HP-10 包 装 1 kit（2 plate） 1 kit（10 plate） 1 kit（2 plate） 1 kit（10 plate） 希望販売価格 ￥78,000 ￥306,000 ￥78,000 ￥306,000 略号MAB 貯 蔵 4 4 4 4 Cosmo Bio News No.80 31 3室温保存 44℃保存 5−20℃保存 6−70℃保存 7液体窒素 −196℃保存 新規ELISA商品のご案内 Catch up ! GHRP-6 EIA 成長ホルモン放出研究に有用！GHRP-6を検出します ■交差反応性 エピトープ ペプチド GHRP-6 Ghrelin（human） H-His-D-Trp-Ala-Trp-D-Phe-Lys-NH2 交差性（％） 100 0 Peninsula Laboratories Inc. Division of Bachem 品 名 GHRP-6 EIA Kit, High Sensitivity Catch up ! 免疫動物 Rabbit 感 度 1.4 nA/F 測定範囲 0∼100 nA/F 品 番 S-1397.0001 包 装 1 kit 希望販売価格 ￥147,000 略号PLI 貯 蔵 4 Oxyntomodulin EIAキット エネルギー代謝研究に有用！ユニークなOxyntomodulin EIAキット OXMまたはglucagon-37として知られているOxyntomodulin は、食物摂取量に比例して胃から放出される天然のペプチドです。 Oxyntomodulin濃度の増加は、食欲低下に関与しています。 Oxyntomodulinの注入は、食物摂取量や体重を減少させ、減量 治療に重要な役割を果たします。 エピトープ H-His-Ser-Gln-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr-Ser-Lys-TyrLeu-Asp-Ser-Arg-Arg-Ala-Gln-Asp-Phe-Val-Gln-Trp-LeuMet-Asn-Thr-Lys-Arg-Asn-Arg-Asn-Asn-Ile-Ala-OH ■交差反応性 図1 ペプチド Oxyntomodulin（glucagon-37） （human,mouse,rat） Oxyntomodulin（bovine, dog, porcine） Glucagon（1-29） （human, rat, porcine） GLP-1（1-37） （human, bovine, guinea pig, mouse, rat） GLP-1（7-36）amide（human, bovine, guinea pig, mouse, rat） GLP-1（7-36）amide（human, bovine, guinea pig, mouse, rat） GLP-1（7-37） （human, bovine, guinea pig, mouse, rat） GLP-2（1-34） （human） 標準曲線 交差性（％） 100 100 31 12.9 0 0 0 0 Peninsula Laboratories Inc. Division of Bachem 品 名 Oxyntomodulin EIA Kit, High Sensitivity Oxyntomodulin EIA Kit, Extraction-free Oxyntomodulin EIA Kit, Extraction-free 免疫動物 Rabbit Rabbit Rabbit ペニンシュララボラトリーズ社 Immunology カタログ2010 配布中！ 感 度 0.6 nA/F 1.7 nA/F 1.0 nA/F 測定範囲 0∼25 nA/F 0∼25 nA/F 0∼25 nA/F 品 番 S-1392.0001 S-1393.0001 S-1394.0001 包 装 1 kit 1 kit 1 kit 希望販売価格 ￥159,000 ￥168,000 ￥168,000 略号PLI 貯 蔵 4 4 4 略号 PLI ペニンシュララボラトリーズ社のイムノロジーカタログで、抗体、EIAキット、その他検出キットをご紹介してい ます。ホルモンやサイトカイン、マーカーペプチド等の各種ペプチドに対する抗体やペプチド検出用EIAキットを豊 富に取り揃えています。 32 Cosmo Bio News No.80 http://www.cosmobio.co.jp FAX.03-5632-9619 お問い合わせ先：TEL.03-5632-9610 お知らせコーナー AAAS（米国科学振興協会）発行 Science Signaling 配布のお知らせ キャンペーン情報 詳細はコスモ・バイオホームページ上“キャンペーン”欄をご覧ください Science Signaling は、生物学におけるシグナル伝達に関 http://www.cosmobio.co.jp/campaign する知識と情報を集約した、AAAS（米国科学振興協会）が発行 ■エピトミクス社 ウサギモノクローナル抗体 するScience の姉妹誌です。 19,000円均一キャンペーン 期 間 コスモ・バイオは、AAASに協賛し、AAASの日本での活動の 2010年5月17日（月）∼6月30日（水） キャンペーン期間中、エピトミクス社ウサギモノクローナル抗体 約1,600商品の中から200商品を￥19,000/100eでご提供 致します。この機会にぜひ、ウサギモノクローナル抗体をお試しく ださい。 部を日本語で紹介するオンラインジャーナルを開設し、季刊誌 等を配布しています。ご希望の方は、コスモ・バイオ取扱代理店 またはコスモ・バイオ宛にご請求ください。 Japanese Scientists in Science 2009 ■RNA研究用試薬 30％OFFキャンペーン 期 間 一環として、Science Signaling に掲載された論文の要約の一 ― サイエンス誌に載った日本人研究者― 2010年5月17日（月）∼7月30日（金） キャンペーン期間中、フェルメンタス社、アムレスコ社、モレキュ ラーリサーチ社のRNA研究用試薬を30％OFFでご提供致します。 ■フェルメンタス社 トランスフェクション試薬 コスモ・バイオは、2009年度に“ Science ”に論文 が掲載された日本人研究者・グループをご紹介する冊 子 「Japanese Scientists in Science 2009 ―サ イエンス誌に載った日本人研究者―」を配布しており ます。 TurboFect™ 30％OFFキャンペーン 期 間 2010年5月17日（月）∼7月30日（金） キャンペーン期間中、フェルメンタス社のsiRNA、DNA、タン パク質トランスフェクション試薬TurboFect™ シリーズを30％ OFFでご提供致します。この機会にぜひお試しください。 メーカー新カタログ紹介 下記メーカーが新カタログを発刊しました。ご要望がござ いましたらコスモ・バイオ商品取扱代理店、またはコスモ・バ ■バイオロジカル・インダストリーズ社 マイコプラズマ イオホームページ上カタログ請求欄よりご請求ください。 感染予防／検出試薬 30％OFFキャンペーン 期 間 2010年5月17日（月）∼8月31日（火） 期間中、対象のマイコプラズマ感染予防試薬及び検出キットを 30％OFFでご提供致します。この機会にぜひお試しください。 ■ハイカルト社 LPS/Microbial toxin研究用試薬 25％OFFキャンペーン 期 間 2010年4月1日（木）∼6月30日（水） エンドトキシン及びMicrobial toxinの感染症研究領域のお客様 に役立つキットがお求めやすくなっています。 学会展示会出展のお知らせ コスモ・バイオでは、下記の学会展示会に出展を予定してお ります。学会にご参加の折には、ぜひお気軽にブースにお立ち 寄りください。普段は見過ごしている “何か” が見つかるかもし れませんよ……。 学会名 日 程 会 場 第43回 日本発生生物学会年会 6/20（日）∼6/23（水） 京都国際会館他 フェルメンタス社カタログ 2010-2011 FER 高品質・低価格な制限酵素でお馴染みのフェルメン タス社の新カタログです。制限酵素の詳細な技術情報 はもちろんのこと、DNA/RNA/タンパク質分子量マーカー、逆転写 酵素及びcDNA合成キット、PCR及びリアルタイムPCR関連試薬、ト ランスフェクション試薬、核酸精製やクローニングキット等が多数紹 介されています。また、 本カタログには、 FastDigest® 制限酵素一覧 の便利なポスターが挟み込まれておりますのでご活用いただけます。 サンタクルズ社カタログ 2010 SCB “シグナル伝達研究のパイオニア”サンタクルズ社の 2010年版新カタログです。今年も多数の新商品が登場 しています。 主要な抗体を49,380品目、 そのほかにsiRNA、 shRNA、 ChemCruz™ バイオケミカル商品、遺伝子導入細胞溶解物等の商品 を豊富に掲載しております。 ベッチル社 Polyclonal Antibody Portfolio カタログ 2010 BET 高品質なポリクローナル抗体でお馴染みのベッチル 社の最新カタログです。シグナル伝達関連のポリク ローナル抗体を多数取り揃え、パラフィン包埋組織切片の染色用に お使いいただける抗体が多数紹介されています。実験データが多数 掲載されておりますので、品質の良さを十分にご納得いただいたう えでお選びいただけるものとなっています。 そのほかに、ポリサイエンス社、バイオチェーン社の最新版カタログ もございます。 Cosmo Bio News No.80 33 お願い 及び 注意事項 ●希望販売価格…「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2010年5月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、 ご注文の際にご確認ください。消費税は含まれ ておりません。 ●使 用 範 囲…掲載の商品は、全て「研究用試薬」です。人や動物の医療用・臨床診断用・食品用等に は使用しないよう、十分ご注意ください。 取扱店