蛋白質核酸酵素:ヒト内在性レトロウイルス遺伝子の構造と発現

ルス遺伝子の構造と発現加藤宣之・加藤美枝子
ヒ トレ トロウ イル ス は, エ イズ や 成 人T細 胞 白血 病 の原 因 ウ イル ス と して注 目 さ れ,
さ
かんに 研 究 が な され て い る。 一 方, す べ ての 脊 椎 動 物 の染 色 体 上 に は, レ トロ ウ イ ル ス 様
構 造 を もつ 内在 性 レ トロ ウ イル ス遺 伝 子 が 多数 存 在 して い る 。 近 年, 多 くの こ の よ うな 遺
Database Center for Life Science Online Service
伝 子 が ク ロー ン化 さ れ,
る 。 本 稿 で は,
情 報 が 蓄積 しつ つ あ る が,
ERV3と
依 然 と して そ れ らの機 能 は 不 明 で あ
呼 ばれ る 内在 性 レ トロ ウ イル ス遺 伝 子 の構 造 と 発現 に 関 す る 最
新 の 知 見 を 中 心 に そ の 周 辺 を 概 説 し, そ の 生 物 学 的 機 能 お よび 意 義 を 考 察 す る 。
は じめ に
レ トロ ウイ ル ス はRNAを
遺 伝 子 と し, 細
に 従 い, 宿 主 の遺 伝 子 と して 安 定 な 形 で継 代 さ れ る。 こ
胞 に感 染 後, この遺 伝 子 に コー ドさ れ て い る逆 転 写 酵 素
の 内在 性 レ トロ ウイ ル スDNAは,
の働 き に よ り 生 成 したDNAが
DNA上
宿 主 染 色 体 に組 み込 ま
れ る とい う特 徴 を 有 して い る。 組 み込 まれ た ウイ ル ス
DNAか
らは, 再 びRNAが
転 写 され て ウ イル ス粒 子 が
すべ ての脊椎動物 の
に 多 数存 在 して い る^<1)>。
従 来, 内 在 性 レ トロ ウ イ ル スは 進 化 の過 程 に お け る外
来 性 レ トロ ウ イ ル ス感 染 を 示 す 化 石 と考 え られ が ち で あ
るが, そ の真 の生 物 学 的 意 義 は い まだ 不 明 で あ る。 ト リ
形 成 され る。
こ の レ トロウ イ ル ス の研 究 は,
ト リや マ ウ スな どの 動
や マ ウ ス では, 多 くの 内在 性 レ トロウ イ ル ス遺 伝 子 に つ
物 系 に お い て進 展 して いた が, 近 年, ヒ トにお い て も,
い てか な り詳 し く調 べ られ てお り, 細胞 分 化 や発 生 へ の
成 人T細 胞 白血 病 ウ イ ル ス (HTLV-I)
原
関 与 を示唆 す る報 告 も あ る^<2,3)>。
また, そ れ 自体 で は発 癌
な どが
性 が な い と考 え られ て い るが, マ ウ ス の系 で は 内 在性 レ
やAIDSの
因 ウイ ル ス で あ る ヒ ト免 疫 不 全 ウ イ ル ス (HIV)
発 見 され,
レ トロウ イ ル ス と ヒ トとのか か
わ り合 い が大 き く ク ロー ズ ア ップ され て き
て い る。 図1に は, 現 在 ま で に 同定 され て
い る ヒ トレ トロ ウイ ル ス を大 ま か に分 類 し
て み た 。個 体 間 で 水平 伝 播 す る よ うな レ ト
ロ ウ イル スは 外 来 性 と呼 ば れ るの に 対 して,
内 在 性 レ トロ ウ イル スは ウイ ル スDNAの
図1.
形 で通 常 の遺 伝 子 と同 様, 元 来, 正 常 人 の
HTLV-I,
染 色 体 に組 み 込 まれ て い る もの で あ り, 生
HIV-1,
HSRV
殖 細 胞 を通 して 親 か ら子 ヘ メ ンデ ル の 法 則
Nobuyuki
Kato,
Tsukiji,
Mieko
Chuo-ku,
Kato,
国 立 が ん セン タ ー 研 究 所
Tokyo
104,
(〒104
H
ヒ ト レ トロ ウ イ ル ス の 分 類
: 成 人T細
胞 白 血 病 ウ イ ル ス,
2 : ヒ ト免 疫 不 全 ウ イ ル ス,
タ イ プI,
タ イ プ1,
タ イ プII。
タ イ プ2。
: ヒ ト ス ピ ュ ー マ レ トロ ウ イ ル ス 。
東 京 都 中 央 区 築 地
5-1-1)
[National
Cancer
Center
Research
Institute,
Japan]
国 立 小 児 病 院 医 療 研 究 セン
ター
(〒154
東 京 都 世 田谷 区太 子 堂
3-35-31)
[National
Children's
Medical
Research
Center, Taishido, Setagaya-ku, Tokyo 154, Japan]
Structure and Expression of Human Endogenous Retroviral Genes
Key【ヒ
wordト】 【内 在 性 レ トロ ウ イル ス 】 【遺 伝 子発 現 】
2357
26
蛋 白 質
核 酸
酵 素
Vol. 33
No.
13
(1988)
トロ ウ イル ス遺 伝 子 ど う しの 組 換 え に よ り発 癌性 を 獲 得
い う3つ の必 須 遺 伝 子 が, 数 百 ヌ ク レオ チ ドに 及 ぶ 両端
した 例 が知 られ て きて い る^<4∼6)>。
そ の詳 細 に関 して は, 優
の く り返 し配 列 (long terminal
repeat ; LTR)
には さ
れ た 総 説 が あ るの で, こ こ では 割 愛 させ て いた だ く^<7,8)>。 まれ た 形 を とっ て お り, これ ら の遺 伝 子 は, ウ イル ス粒
最 近 で は, ヒ トに つ い て も研 究 が 進 展 し, 多 くの内 在 性
子 の形 成, 増 殖, 感 染 な どに必 要 な 蛋 白質 を コ ー ドして
レ トロウ イ ルス 遺 伝 子 フ ァ ミ リー の 同定 が な さ れ て い
い る。 また, LTRに
る。 そ して, す べ て の ヒ トが す べ て の フ ァ ミリー を有 し
ばか りで な く, 転 写 調 節 や 宿 主DNAへ
て い る こ とが 明 らか に な りつ つ あ る。 筆 者 ら もERV3
か わ る情報 が複 雑 に組 み込 ま れ て い る。
は 転 写 の開 始, 終 止 に関 す る情 報
の組 込 み に か
レ トロ ウイ ル ス の起 源 は確 定 して い な い が,
と呼 ばれ る ヒ ト内在 性 レ トロ ウイ ル ス遺 伝 子 の構 造 解 析
シ ョウ
お よび そ の発 現 に 関 して 多 くの 知 見 を 得 た の で, そ れ ら
ジ ョウバ エ や酵 母 に 存 在 す る 転移 性遺 伝 要 素 (transpo
の 成果 を 含 め て本 稿 を進 め, ヒ ト内在 性 レ トロ ウイ ル ス
sablegenetic
の 生物 学 的 意 義 を 考 察 した い 。
とか ら, レ トロ ウ イ ル スは これ らTGEか
element
; TGE)
の構 造 と よ く似 て い る こ
ら進 化 した と
も考 え られ て い る^<17,18)>。TGEと レ トロ ウ イル ス との 類
I.
ヒ ト内 在 性 レ トロウ イ ル ス お よび
似 点 の1つ に は,
Database Center for Life Science Online Service
その遺伝子の発見
1970年
代 か ら80年
代 前 半 にか け て, 胎 盤^<9,10)>,
卵母
ウイ ル スDNAが
逆 転 写 され る際 に
必 要 な プ ライ マ ー の結 合 部 位 (primer
binding
pbs)
流 に 隣 接 し, 特
の 存 在 が あ る。pbs
定 の転 移RNA
(tRNA)
は5'-LTR下
の3'末
端 側 約18ヌ
site ;
ク レオ チ
細 胞^<11)>,
奇 形 癌 腫 細胞^<12)>,
胎 児^<13)>な
どで 電 顕 的 にC型^<*1>
ドが こ の pbs
の レ トロ ウイ ル ス粒 子 が 観 察 され, 遺 伝 子 レベ ル に お い
マ ー と して利 用 され て い る。 外 来性 レ トロ ウイ ル ス や
て も, 1974年,
TGEの
初 め て Todaro
らが, ヒ トDNA上
に
に結 合 し, 逆 転 写 反 応 に お け る プ ライ
プ ラ イ マ ーtRNAの
種 類 は, 個 々 の フ ァ ミ リー
ヒ ヒ内 在性 レ トロ ウイ ル ス遺 伝 子 と類 似 した遺 伝 子 の存
に特 異 的 で あ る。 た とえ ば,
在 を 示 唆 す る報 告 を 行 な った^<14)>。
性C型
さ らに, DNA組
換 え技 術 の進 歩 に伴 い, ほ ぼ 同 時 期
に, か つ 独 立 的 に2つ
の研 究 室 よ りヒ ト内 在 性 レ トロ ウ
イ ル ス遺 伝 子 が 初 め て 単 離 され, そ の存 在 が 確 固 た る も
の とな った^<15,16)>。
彼 らは, 類 似 の 霊 長 類 由来 の 内在 性 レ
トロ ウ イル ス遺 伝 子 の pol 領 域 を プ ロ ー ブ に用 いた に も
マ ウス お よび ヒ トの外 来
レ トロ ウイ ル ス で は プ ロ リ ンtRNAが,
B型 レ トロ ウ イ ル ス で は リジ ンtRNAが
い る。 そ の他, TGEの
tRNAが
一 種 で あ る297で
また,
利 用 され て
はセ リン
プ ライ マ ー とな っ て い る。 そ して, 現 在 ま で
に単 離 され た 内在 性 プ ロ ウ イル スに つ い て, プ ラ イ マ ー
tRNAを
予 想 して み る と, 驚 くこ とに, そ の種 類 が 多 岐
か か わ らず, 得 られ た 遺 伝 子 間 の塩 基 配 列 上 の相 同性 は
に渡 っ て お り, 数 多 くの異 な った フ ァ ミ リー の存 在 を示
低 く, 両 者 は別 個 の フ ァ ミ リー に属 す る もの で あ っ た。
唆 して い る。 プ ロ ウイ ル ス 内部 の塩 基 配 列 な どが 出揃 っ
そ の後, 続 々 と新 しい フ ァ ミリー に属 す る遺 伝 子 群 が
て い な い 現 時 点 に お い て は, プ ロウ イ ル ス の コ ピー数 や
に は 多 くの 異 な った 種 類 の 内 在
プ ラ イマ ーtRNAの
性 レ トロ ウイ ル ス遺 伝 子 が存 在 して い る こ とが 判 明 して
の 分 類 を試 み た。
単 離 さ れ, ヒ トDNA上
違 いを も とに 内 在 性 プ ロ ウ イル ス
きて い る。 次 節 に お い て, これ ら遺 伝 子群 の 分 類 を 行 な
い つ つ, そ れ らの遺 伝 子 溝 造 に つ い て ま とめ て み た い。
1.
EkV1,
II.
1コ ピー タ イプ のC型 プ ロ ウ イル ス
ERV3お
よびS71と
名 づ け られ た3種 類 の
内 在 性 プ ロ ウ イ ル スが, こ の タ イ プに 属 す る。 これ ら の
プ ロウ イ ル ス の 構 造
プ ロウ イ ル ス は1倍 染 色 体 あた り, そ れ ぞ れ1コ
内 在 性 レ トロ ウ イ ル ス遺 伝 子 は, 外 来 性 レ トロウ イ ル
スが 宿 主DNA上
に組 み 込 まれ た 形 (プ ロ ウ イル ス) と
基 本 的 に 同 じ構 造 を有 して い る。 した が っ て, 本 稿 で は
在 し, 外 来 性 のC型
ピ ー存
レ トロ ウイ ル ス と部 分 的 相 同性 を 示
す。
ERV1とERV3は
筆 者 らが 滞 在 した Cohen
博士 の
以後, これ らの遺 伝 子 を 内在 性 プ ロ ウイ ル ス と呼 ぶ こ と
研 究 室 に 事 い て, チ ンパ ン ジ ー の 内在 性 プ ロウ イ ル ス
にす る。 プ ロ ウイ ル ス は 多 く の 場 合, gag
(CH2)
質), pol
*1
(逆転 写 酵 素) お よび env
(構造 蛋 白
(外被 膜 蛋 白質)
電 顕 的 観 察 に お け る ウ イル ス粒 子 の形 態 で , A,
の がC型
2358
の 特 徴 で あ る。
B, C,
と
D型
の pol 領 域 を プ ロー ブ と して ヒ トの全 染 色 体 ラ
イ ブ ラ リー よ り単 離し た も の であ る^<16,19)>。
に もか かわ ら
と区 別 され てい る。 核 様 体 が 出芽 の過 程 と と もに 完 成 され てい く
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウイ ル ス 遺 伝 子 の 構 造 と発 現
27
図2.
ERV3プ
ロ ウ イ ル ス の遺 伝 子 構 成
ヒ ト全 染 色 体 ラ イ ブ ラ リー よ り単 離 され た λ クローン に挿 入 さ れ て い た ヒ トDNAの
を 示 す 。 下 線1∼4は
ず, 両 者 の pol 領 域 以 外の 部 位 は お互 い に塩 基 配 列 上 相
ドンが 見 つ か った こ とか ら, ERV3そ
同性 が 低 く, 通 常 の条 件 下 では ハ イ ブ リダイ ズ しな い 。
ル ス粒 子 形 成 は 考 え に く く, ERV3は
不完 全な プロウ
イ ル ス で あ る と考 え ら れ る。ERV3は
第7染 色 体 に存
ERV1は,
染 色 体18q22とq23の
お り^<20,21)>,
ERV1の
Database Center for Life Science Online Service
部 分 (約16kb)
塩 基 配 列 が 決 定 さ れ た 部 分 で あ る。
間 に存 在 して
塩 基 配 列 決 定 は ヒ トにお け る 内在 性
れ 自体 か らの ウ イ
在 し^<19)>,
詳 細 な解 析 の結 果, 7q36に
位 置 して い る こ と
プ ロ ウイ ル ス の存 在 を直 接 的 に証 明 した 最 初 の報 告 とな
が判 明 して い る^<26)>。
こ のERV3に
っ た^<19)>。
しか し, ERV1は,
ス は, 新 世 界 お よ び 旧 世 界 ザル に も存 在 して お り, 現
トロ ウイ ル ス (BaEV)
ス (M-MuLV)
塩 基 配 列 上, ヒ ヒ内在 性 レ
や Moloney
と部 分 的 に50%以
も のの, 5'-LTRを
マ ウス 白 血病 ウイ ル
上 の相 同 性 を 示 した
欠 失 した も の で あ った 。pol
領域に
お け る塩 基 配 列 はERV1とCH2間
で99%の
が あ り, さ らに, それ らの3'-LTR下
流 の領 域 も保 存 さ
れ て い る こ とか ら, ヒ トに お け るERV1は
ー のCH2に
一方
相同性
チ ンパ ンジ
対 応 す る も の で あ る と考 え られ る^<16)>。
, ERV3は,
アル ギ ニ ンtRNAに
対 応 す る pbs
よ く似 た プ ロ ウ イ ル
在, そ れ らの ク ロ ー ニ ン グが 進 行 中 で あ る^<26)>。
サ ル 肉 腫 付 随 ウ イ ル ス (SSAV)
の ゲ ノム 全 体 を プ ロ
ー ブ と して ク ロ ー ン化 され たS71と
イ ル スは,
い う内在 性 プ ロ ウ
C型 レ トロ ウイ ル ス に 相 同性 を 示 す gag
pol 領 域 お よび1つ
のSSAV関
る^<27)>。
最 近, このS71は
連LTRを
有 して い
染 色 体18q21に
濾 胞 性B細 胞 リ ンパ腫 に お け る14
と
同 定 され^<28)>,
; 18転 座 の位 置 に対
応 して い るの で 注 目 され る。
を もち, 図2に 示 す よ うに, 5'-LTR-gag-pol-env3'-LTRの
遺 伝 子 構 成 を もつ9.9kbの
ル ス で, 図2の1∼4の
乳 類 のC型
内在 性 プ ロ ウイ
領 域 の 塩 基 配 列解 析 に よ り, 哺
レ トロ ウ イル ス と の 部 分 的 相 同 性 が 見 い だ
され た^<19)>。env領 域 には,
(open reading
frame ; ORF)
合 部 位 (Asn-X-Ser/Thr)
型 的 な577ア
1,940bpの
長 い読 取 り枠
が あ り, 7ヵ 所 の糖 鎖 結
を もつ レ トロ ウイ ル ス に典
ミノ酸 か らな る 外被 糖 蛋 白質 の 生 成 が予
想 され て い る^<22)>。ERV3の 両LTRは,
スに 特 徴 的 なTG---CAの
DNAへ
レ トロ ウイ ル
末 端 配 列 を も ち, 宿 主
組 み込 まれ る際, ウ イ ル ス と宿 主DNAの
点 で形 成 され る4bpの
た, LTRに
は 転 写 開始 に 必 要 なTATA配
配 列 や ポ リA付 加 シ グナ ル で あ るAATAAA配
か に, 13bpの
境界
く り返 し配列 も み られ る^<23)>。
ま
く り返 し配 列 がU3領
列,
CAT
列 のほ
域 に存 在 し, それ
2.
マ ル チ コ ビー タ イ プ のC型 プ ロ ウ イ ル ス
こ の タ イ プ に属 す る プ ロ ウイ ル ス群 と して は, Martin
らに よ り得 られ た も のが 詳 細 に調 べ られ て い る。 彼 らが
得 た い くつ か の ク ロー ンは, MuLV
相 同性 を示 すC型
で,
や BaEV
と部 分 的
レ トロ ウ イ ル ス関 連 の プ ロウ イ ル ス
1倍 染 色体 あ た り50か
ら100コ
ピー も存 在 し, 1
つ の フ ァ ミ リー を 形 成 して い る^<15)>。
さ らに, こ の フ ァ ミ
リーは8.8kbの
プ ロ ウ イ ル ス のほ ぼ 全 長 を もつ ク ラ ス
と env 領 域 を 欠 失 した 約6kbの
遺 伝 子 を もつ ク ラ スに
分 け られ る^<29,30)>。
プ ロ ウイ ル ス の 全 長 を も つ クラス の
LTRは
典 型 的 な 転 写 調 節 シ グ ナ ル を もち, pbs
配 列 か ら グル タ ミン酸tRNAが
の塩 基
そ の プ ラ イ マ ー と して
予 想 され て い る。 全塩 基 配 列 が 決 定 され た こ の ク ラス の
1つ の ク ロー ン (4-1)^<31)>の gag や pol 領 域 に は, 9カ
らは グル コ コル チ コ イ ド^<24)>あ
る いは プ ロゲ ス テ ロ ン受
所 の終 止 コ ドンが あ り, 胎 盤 な ど で観 察 され る レ トロ ウ
容 体^<25)>が
作 用 す る と考 え られ るTGTTCT配
イル ス粒 子 が この ク ロ ー ンか ら生 じる とは考 え に くい 。
い る。 した が っ て, ERV3は
列 を含んで
グル コ コル チ コイ ドや プ ロ
ゲ ス テ ロ ンに よ り発 現 調 節 され て い る可 能 性 が あ る。 し
しか し, env 領 域 に は約1.3kbのORFが
あ り, 3'側
を若 干 欠 いた 糖 蛋 白質 の 生成 が 可能 で あ る。 この フ ァ ミ
や pol 領 域 お よび 膜 貫 通 (ト
リー に属 す る プ ロ ウイ ル ス は 多数 存 在 す るた め, ウ イ ル
ラ ンス メ ンブ レ ン) 蛋 白質 を コー ドす る領 域 内 に終 止 コ
ス粒 子 を形 成 で き る少 数 の プ ロ ウ イル ス の存 在 は否 定 で
か し, 残 念 な こ とに, gag
2359
2360
28
蛋 白 質
核 酸
きな い。 ま た, こ の フ ァ ミ リー と約70%の
す2コ
酵 素
Vol. 33
相同性を示
4.
そ
A.
MMTV関
色体 特 異 的 に 存在 す る
の で, 胎 児 の性 別 診 断 な どに利 用 で き るか も しれ な い。
そ の他 の フ ァ ミリー と して, RTVL-Hプ
ロ ウイ ル ス
の全 塩 基 配 列 も最 近 決 定 され て い る^<33)>。RTVL-Hは
ス チ ジ ンtRNAに
対応 す る pbs を も ち, 第11染
ヒ
色体
の β-グロ ビ ン遺 伝 子 ク ラス タ ー近 傍 を 解 析 中偶 然 見 い
有 し, 全 長5.8kbで
トロ ウ イル ス, と くに, HTLV-Iの gag
した 構 造 を もつ が, env
(UUUア
上 のORF
プ ロ ー ブ と して 得 られ た プ ロ
LTRは
こ の タ イ プ の プロ ウ イルス 群 は,
プ ロ リ ンtRNAに
対応 する
立 的 に報 告 され て い る^<36∼40)>。
そ れ らは, マ ウ ス乳 癌 ウ イ
ル ス (MMTV)
(IAP)
あ る い は ハ ム ス タ ー の 小 胞 内A粒 子
の ウ イル ス ゲ ノ ムDNAを
プ ロ ー ブ と して,
ヒ
ト全 染 色 体 遺 伝 子 ライ ブ ラ リーか ら単 離 され, そ れ ぞ れ
の 塩 基 配 列 解 析 に よ り, 得 られ た ク ロー ンは 同 じフ ァ ミ
リー に 属 す る プ ロ ウ イ ル ス で あ る こ と が 確 認 され て い
る。
哺 乳 類 のC型
名 づ け ら れ た ク ロー ンに 関 して は,
ロ ー ニ ン グの 手 法 を 用 い た もの で あ った 。
原 田 お よ び 筆 者 ら は,
精 製 し た プ ロ リ ンtRNAを
す る こ と に 成 功 し,
P1,
P2,
oneyマ
LTRを
もち, そ の env
レ トロ ウイ ル ス に類 似 した
領 域 はA型
に最 も近 く, ま た
pol 領 域 はB型 の も のに 類 似 してい る。 こ の よ うな モ ザ
イ ク型 プ ロ ウ イル スは 進 化 にお け る複 雑 な遺 伝 子 間 の相
P3)
pbs
は ビス ナ ウイ ル ス^<41)>やD型レ トロ ウ イル
ス (SRV-1^<42)>やMPMV^<43)>)
ン チ コ ドン) に対 応 して い る。 また,
LTRは968bpと
比 較 的 長 く, 両LTR間
の塩 基 配 列 も
わ ず か2塩 基 のみ 異 な る だ け で あ り, 各 領 域 のORFも
み 込 まれ た も の と推 察 され る。
ヒ トDNAに
Kroger
ら は,
Mol
に 相 補 的 な22bpの
プ ロ リン
を も つ プ ロ ウ イ ル ス, HuRRS-P
分 の 塩 基 配 列 の 比 較 に よ り, HuR
RV-P3はHuRRS-Pと
同 じ種類 に 属 す る こ とが判 明
そ の5'-LTR中
して 得 られ た ク ロー ンの 中 に
に AluI
フ ァ ミ リ ー が1コ
ピー挿 入
さ れ て い る も の が あ り, お そ ら く宿 主DNA上
イ ル ス と し て 組 み 込 ま れ た の ち に, AluI
移 動 挿 入 し, 5'-LTRの
にプ ロウ
フ ァ ミリーが
不 活 性 化 を導 いた も
の で は な い か と推 測 さ れ る 。 こ れ ら の プ ロ ウ イ ル ス 群 の
内 部 構 造 は ま だ 解 析 が 進 ん で お ら ず,
C.
ど の 程 度,
他 のプ
イ ソ ロ イ シ ンtRNAに
組
対応する
pbs
をもつ プ
ロウ イル ス
こ の タ イ プ の プ ロ ウ イ ル ス は,
伝子
(Hpr)
伝 子 の 第1イ
完 全 な も の に近 い。 したが っ て, こ の モ ザ イ ク型 内在 性
進 化 上 か な り最 近,
3種 類 の プ ロ ウ イ ル ス 群 (HuRRV-
を 単 離 した 。 一 方,
対 応 す る pbs
5'-LTRに
リボ ヌ
伝 子 と区 別
合 成 オ リ ゴ ヌ ク レ オ チ ドを プ ロ ー ブ と して,
で 利 用 され て い る リジ ン
tRNA_<1,2>(CUUア
プ ロ ウ イル スは,
ク ロ ー ニ ン グ の 際,
ウ ス 肉 腫 ウ イ ル ス の pbs
tRNAに
tRNA
ロウ イ ル ス群 と の相 同 性 を 示 す か は 不 明 で あ る。
互 作 用 の結 果 を反 映 して い る も の と考 え られ る。HERV
-K10の
列 を 含 む が,
理 に よ り プ ロ リ ンtRNA遺
は,
タ イ プ の プ ロ ウ イ ル ス はD型
ク レ オ チ ドを プ ロ ー ブ と
端 のCCA配
遺 伝 子 は 含 ま な い こ とか ら,
ク レ ア ー ゼA処
ア
7-メ チ ル グ ア ノ シ ン の 部 分 で 特
はtRNA末
HERV-K10は
の ど の型 とも部 分 的相 同性 を有 して い た。 つ ま り, こ の
ヒ トで も こ の タ イ
さ れ て い る^<48,49)>。
偶 然 に も そ れ ら はか な りユ ニ ー ク な ク
し て い る。HuRRV-P1と
レ トロ ウ イル ス
をもつプロウ
筆 者 ら と他 の 研 究 室 か らほ ぼ 同 時期 に単 離
そ の全 塩 基 配 列 が 決 定 さ れ て い る^<39)>。
そ れ に よ る と,
奇 妙 な こ とにA∼D型
(約
レ トロ ウ イ ル ス は す べ て プ ロ リ ンtRNA
を 単 離 した 。LTR部
HERV-K10と
pbs
を プ ラ イ マ ー と して 利 用 し て い る が,
し た 。Pbs
3つ の研 究 室 か ら独
その
特 徴 的 な 長 いLTR
ル カ リーア ミ ン処 理 し,
マ ル チ コピ ー タ イ プ の モ ザ イ ク型 プ ロウ イ ル ス
し か し,
とは 異 な って い る。
異 的 に 切 断 し て 得 た3'側30ヌ
3.
じ リ ジ ンtRNA_3
に 対 応 して い る。
約42qbpでMMTVに
は,
イル ス
ウイ ル ス群 の報 告 もあ るが^<35)>,
その詳細については検討
され て い な い。
領 域 に 相 同 性 を も つNMWV
場合 と同
ン チ コ ド ン)
プ の も の が,
は な く, 蛋 白質 の 生 成 に つ い て は 否 定 的 で あ る^<33)>。
ま た, BaEVのLTRを
と pol
1,330bp)
と pol に類 似
い。 解 析 した ク ロ ー ンに関 して は, 600bp以
連 プ ロ ウ イル ス
MMTV^<46)>やHIV-1^<47)>の
レ
に相 当 す る遺 伝 子 は含 ん で いな
他
4と 名 づ け ら れ た プ ロ ウ イ ル ス^<44,45)>のpbs
B.
そ の 内部 に哺 乳 類C型
の
(1988)
MMTVの gag
だ され た も の で あ る^<34)>。
この プ ロ ウ イル ス は415bpの
Database Center for Life Science Online Service
13
ピー の 内在 性 プ ロ ウ イル ス がY染 色 体上 に も見 い
だ され て い る^<32)>。
これ らはY染
LTRを
No.
の 解 析 中 偶 然 見 い だ さ れ た も の で, Hpr
ロビ ン遺 伝 子
遺
ン ト ロ ン 内 に 組 み 込 ま れ て い た^<50)>。
この内
在 性 プ ロ ウ イ ル ス の pbs
し, RTVL-Iと
ハ プ ト グロ ビ ン 関 連 遺
は イ ソ ロ イ シ ンtRNAに
命 名 さ れ て い る 。Hpr
(Hp)
対応
遺 伝 子 は ハ プ トグ
と と も に 染 色 体16q21-22に
存在
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウ イ ル ス遺 伝 子 の構 造 と発 現
して い るが, Hpr
遺 伝 子 に組 み 込 ま れ たRTVL-Iが
性 プ ロ ウイ ル スがヒ ト染 色体 上 に存 在 して い るか が わ か
Hpr 遺 伝 子 を 偽遺 伝 子 化 して い るか否 か は不 明 で あ る。
こ のRTVL-Iは,
全 長 約9kbで
要 な情 報 を含 ん でい るが, env
を コー ドす る領 域) に AluI
両LTRは
の3'側
29
転写に必
る。 次 節 に お い て は, これ らプ ロ ウイ ル ス の 細 胞 丙 に お
け る発 現 に関 して述 べ てみ た い。
(膜 貫通 蛋 白質
フ ァ ミ リーが 挿 入 され て い
III.
プ ロウ イ ル ス の 発 現
る との こ とで あ る^<51)>。
D.
に は, 内在 性 プ ロ ウ イル スに 関 連 す る と
転 写 レベ ル で の 発 現
前 節 で述 べ た プ ロウ イ ル ス フ ァ ミ リー の うち2,
3に
考 え られ る トラ ンス ポ ゾ ン様 の構 造 も, さ ら に多 数 存 在
つ い て は, RNAの
して い る。 本 稿 で は, 詳 し く述 べ な いが, た とえ ば, そ
転 写 量 お よび 特 異 性 に 関 し て は よ くわ か って い な い。
れ らの1つ
筆 者 らは1コ
LTRを
と して “O” フ ァ ミリーが あ り, 350bpの
もつ2.3kbの
10,000コ
構 造 単 位 が1倍 染 色 体 あた り,
ピー も あ り, さ らに, LTRの
と呼 ば れ て い る) で30,000コ
され て い る^<52,53)>。
そ して,
Database Center for Life Science Online Service
1.
トラ ン ス ポ ゾ ン様 因 子
ヒ トDNA上
DNA中
み
(solo-LTR
ピー存 在 して い る と推 定
この 大部 分 は 染色 体 外 性 環 状
に見 いだ され て い る。 しか し, ク ロー ン化 さ れ
たTHE-1遺
伝 子 に は 明 白な pbs が 存 在 せ ず,
その生
ピー タ イ プ のERV3プ
ロ ウ イル ス に関 し
て詳 細 に検 討 した。 ま ず 最初 に,
レ トロ ウ イル ス粒 子 が
高 頻 度 に観 察 され るこ とが 知 られ て い る正 常 胎 盤 か ら全
RNAを
抽 出 した 。RNAの
抽 出 方 法 は,
リチ ウムー尿
素 法 の 原 報^<55)>を
改 良 して 用 いた 。 こ の方 法 の特 色 は,
超 遠 心操 作 を 必 要 と しな い し, 一 般 に用 い られ て い る グ
ア ニ ジ ウ ムチ オ シ ア ネ ー ト法 と比 較 して収 量 も よ く, 10
kb程
成 機 構 は 不 明 であ る^<54)>。
発 現 が 報 告 され て い るが, そ れ ら の
度 のRNAも
無 傷 の ま ま抽 出 で き る 点 に あ る。
以 上 述 べ た 多 くの フ ァ ミ リー に 関 して は, 表1に わ か
ノー ザ ンブ ロ ッ トの結 果, 図3に 示 す よ うに, 調 べ た
りや す くま とめ て み た 。 これ に よ り, い か に多 くの 内在
胎 盤 全 例, とくに 絨 毛 膜 に 多 量 に 発 現 して い る こ とが 観
表1.
a)
チ ソバン ジ ー内 在 性 プロ ウ イル ス,
e)
β-グ ロ ビン 遺 伝 子 下 流 に 偶 然 見 い だ され た,
粒 子,
b)
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウ イル ス遺 伝 子 群 の分 類
マ ウ ス 白血 病 ウ イ ル ス,
f)
成 人T細
c)
ヒ ヒ内在 性 レ トロ ウイ ル ス,
胞 白血 病 ウ イ ル ス,
i) ハ プ トグロ ビン 関連 遺 伝 子 の イン トロン 中 に 偶 然 見 い だ され た 。ND
g)
d)
サ ル 肉腫 付 随 ウイ ル ス,
マ ウス 乳 癌 ウ イ ル ス,
h)
マ ウス 小 胞 内A
: 未決定。
2361
30
蛋 白 質
核 酸
酵 素
Vol. 33
No.
13
(1988)
個 人 差 を除 外 す るた め, で き る か ぎ り 同一 患 者 の正 常
お よび 癌 組 織 を 集 め る努 力 を した。 図4に,
そ の1例 を
示 した が, ほ とん どの組 織 に お い てERV3の
発 現 が認
め られ た 。 胎 盤 を除 くす べ て の正 常 お よび癌 組 織 で は9
と3.5kbRNAあ
7.3kbRNAは
RNAは,
る い は9kbRNAの
み が検 出 され ,
検 出 され なか った 。 した が っ て, 7.3kb
胎 盤 特 異 的 なRNAプ
ロセ シ ン グに よる も の
と考 え られ る。 図5に 現 在 ま で得 られ て い る結 果 を ま と
め て み た。 大 部 分 の組 織 にお い て は, 正 常 と癌 の間 に差
は認 め られ ず, そ れ らの発 現 量 は胎 盤 の10%以
図3.
ヒ ト胎 盤 お よび 胎 児 に お け るERV3の
発現
そ れ ぞ れ の組 織 か ら抽 出 した 全RNA10μgを
流 し, ERV3
の env 領 域 (1,9kbのORFを
含 む) を プ ロ ー ブに 用 い て,
ノ ーザン ブ ロ ッ トを 行 な っ た 。
1か ら7ま で は 妊 娠3カ
月 目ま で の も の を示 し, 8と9は
妊
娠 末 期 の双 子 の胎 盤 を 示 す 。BRL社
のRNA
ladder (9.5∼
0.33kb)
を マ ー カー と し て用 い てRNAの
サ イ ズ を 推 定 した 。
Database Center for Life Science Online Service
下 であ
った。 しか し, 同時 に い くつ か 興 味 あ る結 果 も得 た。
あ る 胃癌 患 者 で は, 正 常 お よび癌 組 織 に お い てERV
3の 発 現 が ほ とん ど観 察 され な い に もか か わ らず, ポ リ
ープ部 に お い て は 特 異 的 に そ の発 現 量 が 増 加 して いた
(胎盤 の25%程
度)。 こ の現 象 が 一 般 化 で き るか ど うか
は, 症 例 を増 や す こ とが 必 要 だ し, 大 腸 ポ リー プ につ い
察 され た。 そ の発 現 量 は ドッ トブ ロ ッ トの 結 果 か ら 全
て も検 討 の価 値 が あ る。 また, ホ ル ボ ル エ ス テ ル (TPA)
mRNAの0.05%程
に よ り マ ク ロフ ァ ー ジ様 細 胞 に 分 化 したU937細
度 と推 定 してい る。 こ の発 現 量 は
妊 娠 の時 期 に関 係 な く, おそ ら く全 期 間 を通 して維 持 さ
は胎 盤 の60%程
れ て い る と考 え られ, 9, 7.3お
の5'-LTR中
mRNAが
よび3.5kbの3種
類の
検 出 さ れ た。 しか し, 同 時 に得 られ た 胎 児 に
お い て は, 非 常 にそ の発 現 量 が 低 く, 組 織 特 異 性 が 予 想
胞で
度 に発 現 量 が 増 加 し て い た 。ERV3
に は, TPAに
よる転 写 活 性 の 上 昇 に 関 与
す る と考 え られ る塩 基 配 列^<56)>は
存 在 して い な いた め,
こ
の発 現 誘 導 は 別 の機 構 を 介 して い る もの と思 わ れ る。
され た 。 そ こ で, 組 織 特 異 性 あ る いは, 正 常 お よび 癌 組
最 も興 味 あ る結 果 と しては, 胎 盤 由 来 の絨 毛 膜 癌 細 胞
織 に お け る発 現 量 の違 い を調 べ る こ とを 目的 と して, 臨
に お い て得 られ た 。 例 外 な く高 い発 現 量 を示 す 正 常 胎 盤
床 材料 か ら ヒ トの組 織 を多 数 集 め た 。 そ の 際, 発 現量 の
に比 べ て, そ こか ら派 生 した 絨 毛 膜 癌 樹 立 細 胞 株 で は,
図4.
ヒ ト各組 織 に お け るERV3の
発現
図3と 同様 に ノー ザン ブ ロ ッ トを 行 な っ た (各 上 図)。RNAの
品質 を確 か め る た め,
し て 同 じ メン ブ レン に 対 して 再 度 ノー ザン ブ ロ ッ トを 行 な っ た (各 下 図)。
A1
B1,
2362
トリの β-ア クチンcDNAを
プロー ブ と
: 甲 状 腺, 2 : 腎臓, 3 : 精 巣, 4 : 子 宮 筋 層, 5 : 胸 腺, 6 : 脾 臓, 7 : 胎 盤 (以 上 正 常)。
2 : 神 経 膠 腫, 3 : 乳 腺 (正 常), 4 : 乳 腺 (癌), 5 : 横 紋 筋 肉腫, 6 : ウ ィル ムス 腫 瘍, 7, 8平 滑 筋 肉 腫, 9 : 胎 盤 (正 常)。
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウイ ル ス 遺 伝 子 の 構 造 と発 現
ERV3のRNA発
+ :培養細胞。
現 量 の 比 較
そ れ ぞ れ の組 織 や 細 胞 か ら抽 出 した 全RNAの
一 定 量 に 対 して,
○ : 正 常 組 織,
図5.
● : 癌 組 織,
31
ERV3の env
領域
を プ ロ ー ブ と して ドッ トプ ロ ッ トを 行 な い, そ れ らの 発 現 量 を 比 較 推 定 した 。
1 : ウ ィル ムス 腫 瘍, 2 : 胃 ポ リー プ, 3 : U-937,
4 : U-937
(TPA処
理)。
図6に 示 す よ うに, 調 べ た5例 全 例 でRNAの
発 現 はほ
ぼ完 全 に抑 制 さ れ て い た^<57,58)>。
さ ら に筆 者 ら は, 絨 毛 膜
癌 の 前駆 体 と考 え られ て い る胞 状 奇 胎 組 織 を調 べ る機 会
Database Center for Life Science Online Service
を 得 た が, この 胞 状 奇 胎 に お い て も完 全 に転 写 は抑 制 さ
れ て い た 。 この こ とは 癌 化 の初 期 にす で に転 写 抑 制 が起
こ って い る こ とを 示 唆 して い る。 こ の転 写 抑 制 の原 因 と
して, 当 初, プ ロ ウ イル ス の構 造 上 の変 異 を考 え た が,
プ ロ ウ イル ス上 の 特 定 の欠 失 や 組 換 え は 認 め られ ず,
さ らに,
メチ ル化 の パ タ ー ンに も 差 は 認 め られ な か っ
た^<57,58)>。
予 想 外 に, 高 い発 現 量 を示 した 正 常 胎 盤 にお い
A
〓 図6.
ERV3 env
絨 毛 膜 癌 細 胞 に お け るERV3発
現の抑制
の領 域 を プ ロー ブ と した ノ ー ザン ブ ロ ッ ト。
B
ト リの β-ア クチンcDNAを
ロ ッ ト。
プ ロー ブ と した ノ ーザン ブ
C
泳 動 後 の臭 化 エ チ ジ ウ ム に よる 染 色 。
筆 者 ら の経 験 に よ る と, 従 来 か ら 信 じ られ てい る よ うな 染 色
に よ る転 写 お よび ハ イ ブ リダ イ ゼ ー シ ョン の効 率 の 低下 は ニ ト
ロセ ル ロ ー スに お い て認 め られ な い 。
1 : 胎 盤 (正 常),
EIfa,
8kbRNAは
4 : GCC-SV,
2∼6 : 絨 毛 膜 癌 細 胞
5 : JAR,
(2 : Dosmi,
3 :
6 : BeWo)。
図7.
ERV3プ
ロ ウ イル スか ら 転 写 され るRNA分
子種の構造
胎 盤 に お い て は, 他 の3種 のRNAに
比 べ て転 写 量 が 少 な い た め確 認 で きな い が, 他 の 組 織 で は9あ
る い は3.5
kbRNAと
同 程度 に 転 写 さ れ て い る。
IVS : イン トロン, 〓
: エ キ ソン 。
2363
I
32
蛋 白 質
て もERV3プ
ERV3の
核 酸
酵 素
Vol.33
No.
13
(1988)
ロ ウ イル スは 高 度 に メチ ル 化 され て お り,
発 現 誘 導 には 何 か 特 異 的 な 転 写 因 子 の 関 与 が
想 定 され る。
正 常 胎 盤 に お い てERV3プ
る3つ のRNA分
ロ ウ イル スか ら 発 現す
子 種 の構 造 に 関 し て は,
ERV3が1コ
幸運 に も
ピ ー で あ る こ とか ら 詳 細 な ノ ーザ ンプ ロ
ッ トやS1ヌ
ク レア ーゼ マ ッ ピ ン グに よ る解 析 が 可能 で
あ った 。 結 果 は, 図7に 示 す よ うに 予 想 外 で あ った。 当
初, 筆 者 らは9kbのRNAをERV3の
ゲ ノムRNA
と予 想 して い た が,
3種 のRNAに
の 大部 分 (5.9kb)
を欠 くス プ ラ イ ス され たmRNAで
あ った。3種
らの3'側
のRNAは
す べ て gag
と pol
同 じ転 写 開 始 点 を もつ が, そ れ
が大 き く異 な って い る。3.5kbmRNAは
レト
ロ ウイ ル ス一般 に 観 察 され る env 蛋 白質 を コー ドす る
Database Center for Life Science Online Service
mRNAに
流20ヌ
対 応 し, 3'-LTR内
に存 在 す るAATAAA下
ク レオ チ ドで ポ リAが 付 加 して い る。 一 方,
お よび7.3kbmRNAは,
3'-LTRを
9
越 え,さ らに370
ヌ ク レオ チ ド下 流 に お い て 再 び ス プ ラ イ ス され て い
た^<59)>。
した が って, 9お よび7.3kbmRNAは,
の 3'側 下 流 に そ れ ぞ れ5.5お
それ ら
よび3.8kbの
プロ ウ イ
ル ス 以 外 の ヒ ト由 来 の 情報 を 含 ん で い る こ とに な る。
最 近, 筆 者 らは, 3'-LTR下
を想 定 して, 胎 盤mRNAよ
流 に あ る種 の細 胞 遺 伝 子
り作 製 した λgt10のcDNA
ライ ブ ラ リー (ラ ン ダ ム プ ライ マ ー を 使 用) か ら こ の
下 流 領 域 を 含むcDNA断
片 (2.6kb)
を単離す るこ と
に成 功 した^<60)>。
サ ザ ン ・ノ ーザ ン プ ロ ッ トに よ る解 析 か
ら, 3'-LTR下
流 約8kbに600ヌ
ク レオチ ド以下 の エ
キ ソ ンが 確 認 され, さ らに 下 流 に 多 くの エ キ ソ ンの存 在
が 示 唆 され た。 一 部 の塩 基 配 列 を決 定 した とこ ろ, 図8
に示 す よ うに, ORFが
存 在 して お り, さ ら に下 流 に続
い て い る も の と思 わ れ る。 お ど ろ くこ とに, そ のORF
内 に は, 転 写 調 節 蛋 白質 な ど に見 られ るZn^<2+>結合 フ ィ
ンガ ー構 造^<61)>の
少 な く とも9回
以 上 の く り返 しが 存 在
し, と くに, シ ョウ ジ ョウバ エ の “Kruppel” 遺 伝 子 に
関 連 す る マ ウス の mkr2
遺 伝 子^<62)>と
高 い相 同性 を 示 し
た 。 興 味 深 い こ と に, ORF上
配 列 やCAT配
流 の適 当 な位 置 にTATA
列 が 存 在 して い る。“Kruppel” 遺 伝 子 は
胚 形 成 にお いて 重 要 な 遺 伝 子 で あ る こ とを考 え る と, ヒ
トに お け る この部 分 も独 自の プ ロモ ー タ ー に よ り胚 形 成
期 に特 異 的 に発 現 して い る可 能性 が あ る。 したが っ て,
ERV3は
あ る種 のDNA結
合蛋 白質 を コ ー ドす る遺 伝
子 の近 傍 に組 み込 まれ て い た こ とに な る。
そ の ほ か,
筆者 らは,
り, か つERV3か
2364
上記3種
のmRNAと
は異 な
ら転 写 され る と考 え られ る8kbの図8. ERV3の9および7.3kb RNAの3'-LTR 下流に相当する領域のcDNA断片の構造胚形成期などの
Database Center for Life Science Online Service
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウ イ ル ス遺 伝 子 の構 造 と発 現
図9.
細 胞遺 伝 子近 傍 へ の レ トロ ウイ ル ス 組 込 み に よ っ て起 こ る異 常 なRNAプ
トリ白血 症 ウイ ル ス (ALV)
の場 合^<63)>。
A
B
マ ウス 白 血 病 ウ イル ス (M-MuLV)
が生じる。
C
ERV3の
mRNAを
33
場 合 。---
の 場 合^<64)>。
こ の 場 合,
: 推 定 され る イン トロン, 〓
見 いだ して い る^<60)>。
ノー ザ ン プ ロ ッ トに よ る
解 析 で は, この8kbmRNAはERV3の5'-LTR領
域
の プ ロ ー ブで 検 出 され るが, 3'-LTR
(U3の
み) な ど
c-myb
ロセ シン グの バ タ ーン
領 域 に 新 しい エ キ ソン (〓
で 示 した)
: 推 定 され る エ キ ソン 。
お り^<65)>,
そ の発 現 調 節 にお け る プ ロ ウイ ル ス の 関 与 が 予
想 され て い る。
ERV3以
外 の フ ァ ミ リー に つ い て も,
い くつ か 発 現
の他 の 領 域 の プ ロ ー ブ とは ハ イ ブ リダ イ ズ しな い 。 さ ら
に関 す る報 告 が み られ る の で簡 単 にふ れ て お きた い 。 マ
に, 3'-LTR下
ル チ コ ピ ー タ イ プのC型
流 に 隣 接 す る領 域 の プ ロー ブで も検 出 さ
れ な い こ と よ り, 3'-LTRか
ら転 写 が 開 始 さ れ たRNA
env やLTR領
プ ロ ウ イ ル ス フ ァ ミ リー で は,
域 を 含む4つ
分 子 種 とは 考 え に くい 。 したが っ て, こ の8kbmRNA
は 図7に 示 す よ うに, 5'-LTRか
ら転写 が始 ま り, ス プ
て い る^<66,67)>。3.0と1.7kbに
ラ イ シ ン グに よ り 直 接3'-LTR下
流域に 及んでい るも
の であ る と推 定 して い る。
cDNA断
よび1.7kb)
のRNA分
2.2お
子 種 (3.6, 3.0,
が 胎 盤, 乳腺, 大 腸 な どで 検 出 され
対 応 す る と 考 え られ る
片 も単 離 解 析 され て い るが, それ らは 内部 に終
止 コ ドンを 有 して お り, レ トロウ イ ル ス に典 型 的 な 蛋 白
外 来 性 レ トロ ウ イル スの 場 合 に お い て も, ERV3の
質 の生 成 は 否 定 的 で あ る^<68)>。
マ ル チ コ ピー タ イ プ の モ ザ
場 合 と 同様 の変 則 的 な ス プ ラ イ シ ン グパ ター ンが最 近2
イ ク型 プ ロ ウ イル ス フ ァ ミ リー で も小 野 らが そ のRNA
例 ほ ど報 告 され て い る^<63,64)>。
それ らは,
の 発 現 を報 告 して い る^<69)>。
ゲ ノ ム サ イ ズ のRNAと
ル ス (ALV)
ト リ白血 症 ウイ
が発 癌遺 伝 子 で あ る c-erb Bに,
血 病 ウ イル ス (M-MuLV)
が c-myb
マ ウス 白
遺 伝 子 に組 み込 ま
られ る8.8kbmRNAが
考え
乳 癌 由 来 の細 胞 株 (T47D)
含 む 数 種 の 培 養 細 胞 で 検 出 され て い るが,
を
そ の発 現量
れ た 場 合 で あ り, 図9AとBに
示 す よ うに, どち らの ケ
ー スに お い て も, そ れ ぞ れ の5'-LTRか
ら転 写 が始 ま
は あ ま り高 くな い よ うで あ る。 また, 黒 色 腫 由 来 の 細 胞
り, gag あ る い は env 領 域 か ら直 接 ス プ ライ シ ン グに よ
お よび6.8kb)
り c-erb Bや
いRNA分
c-myb
遺伝 子 に 連 結 した 異 常 なRNA分
子 種 が 検 出 され, 癌 化 の 原 因 と考 え られ て い る。ERV3
に な る もの と思わ れ る。 最 近,
で は8.8kbの
ほ か に3種
のRNA
(20, 14
が 検 出 され て い る。 ゲ ノ ム サ イ ズ よ り長
子 種 に つ い て は, ERV3の
場 合 と同 じ よ うな
将
転 写 様 式 を反 映 して い るの か も しれ な い。 こ の フ ァ ミリ
ー のLTR中
には , グル コ コル チ コイ ドあ る い は プ ロ ゲ
の関 係 が 明 らか
ス テ ロ ン受 容 体 が 作 用 す る と考 え られ る共 通 配 列 が存 在
の 場 合 もそ れ らの転 写様 式 と よ く似 て お り (図9C),
来, この下 流 遺 伝 子 の発 現 とERV3と
(HMT-2)
唾 液 腺 型 の α-ア ミラー
ゼ 遺 伝 子 の 転写 調節 領 域 に も, 4-1に 代 表 され る マ ル チ
コ ピー タイ プ のC型 プ ロ ウイ ル ス の挿 入 が見 いだ され て
して お り, 実 際, mRNAの
発現 は エ ス トラジ オ ー ル お
よび プ ロ ゲ ステ ロ ンに よ り顕 著 に誘 導 され る^<69)>。
また, 最 近, MMTV関
連 プ ロ ウ イ ル ス と して紹 介 し
2365
34
蛋 白 質
核 酸
酵 素
Vol. 33
No.
13
(1988)
た フ ァ ミ リーに つ い て も, 9つ の グル ー プ分 け が な さ
であ る。 実 際, ヒ トに お い て ク ロー ン化 され た 内在 性 プ
れ, 各 グル ー プに お け るRNAの
ロ ウ イル スの ほ とん どは, す で に 感染 性 の あ る ウイ ル ス
発 現 が 検 討 され てい
る^<70)>。
そ れ に よ る と, ほ とん ど の グ ル ー プ で1.2か
12kbに
及 ぶ そ れ ぞ れ に特 徴 的 なRNA分
ら
子種が発現 し
て お り, 詳 細 な 検 討 が 待 た れ る と ころ で あ る。
粒 子 を 形成 で きな い構 造 とな って お り, プ ロ ウイ ル ス の
遺 伝 子 形態 す ら と って い な い もの もあ る。 した が っ て,
こ の よ うな 内 在 性 プ ロ ウイ ル ス は不 活 性 な もの と して 捉
他 の フ ァ ミ リーに 関 して は, 現 在 まで の と ころ 転 写 レ
え られ るで あ ろ う。 しか し, 冒頭 に も述 べ た よ うに, 胎
ベ ル で の解 析 は 進 ん で い な い。 しか し, 近 い将 来, ERV
盤 組 織 な どに お い て は, C型 レ トロ ウイ ル ス粒 子 が 観 察
3に お い て み られ た よ うな 異 常 な 転 写 様 式 が, 他 の フ ァ
さ れ て お り, ウイ ル ス粒 子 を形 成 で き る少数 の 内在 性
ミ リーに お いて も 証 明 され る ので は な い か と 期 待 され
プ ロ ウ イル ス の存 在 も示 唆 され て い る。 この よ うな ウ イ
る。
ル ス粒 子 の 形 成 が あ る頻 度 で起 こ る とす る と, 逆 転 写 さ
れ た ウ イル ス ゲ ノ ムDNAが
2.
遺 伝 子産 物
す で に 述 べ た よ うに, 蛋 白質 の生 成 が 可 能 な 数 種 の内
在 性 プ ロ ウ イル スが 得 られ て い るが, 今 まで の と ころ,
Database Center for Life Science Online Service
宿 主DNAへ
組 み込 ま れ
る で あろ う。 この 組込 み は あ る程 度 ラ ン ダ ムに起 こる と
考 え られ,
それ に 伴 って 細 胞 遺 伝 子 の 機 能 を 破 壊 した
り, 遺 伝 子 の発 現 制御 に影 響 を与 え る ケ ー スが 想 定 され
これ らの 遺 伝 子産 物 を 同 定 ・単 離 した とい う報 告 は な い 。
る。 さ らに は,
ERV3の env
DNA再
領 域 か ら予 想 さ れ る生成 物 に つ い て は,
大 腸 菌 の 系 で 大量に 発 現 され た env 蛋 白質 を ウサ ギ に
内在 性 プ ロ ウイ ル ス それ 自体 を 介 す る
配 列, あ る い は転 座 に よる影 響 も考 え られ る。
そ の よ うな例 と して, マ ウス で は発 癌 遺 伝 子 の1つ で あ
免 疫 して 得 られ た 抗 体 を用 い て蛋 白質 の 同 定 を試 み て い
る c-mos
る段 階 に あ る。
免 疫 グ ロブ リ ン遺 伝 子 の不 活 性 化^<78)>が
報 告 さ れ て お り,
胎 盤 な どで は, 霊 長 類 由 来 の レ トロ ウ イル ス関 連 gag
や イ ン ター ロイ キ ン3遺 伝 子 の活 性 化^<76,77)>や
ま た, 発 癌 遺 伝 子 産 物 が 内在 性 プ ロ ウイ ル ス のLTRを
抗 原 が 免 疫 学 的 手 法 を 用 い て 検 出 され た 例 が あ る^<71∼73)>。活 性化 す る とい う話 も あ り^<79)>興
味 深 い。 しか し, ヒ トの
しか し, これ ら の抗 原 が 内 在 性 プ ロ ウ イル スか らの 産物
例 は ま だ報 告 され て お らず, 非 常 に低 頻 度 で起 こ る現 象
で あ る証 拠 は な い 。 また, ERV1の gag
な の か も しれ な い。
対 応 す る合成 ペ プチ ド (11ア
用 い て75Kの
領 域 の一 部 に
ミノ酸) に 対 す る 抗 体 を
蛋 白質 を 検 出 した 報 告 も あ る が^<74,75)>,
ERV-1が5'-LTRを
欠 く こ と, さ らに, RNAが
一 方 , 内在 性 プ ロウ イ ル スが 宿 主 の生 存 に有 利 に 働 い
て い る の で は な いか とい う見 方 も あ る。 そ の一 つ に は,
検出
外 来 性 レ トロウ イ ル ス感 染 に対 す る遺 伝 的 宿 主 抵 抗 性 因
領 域 か ら由
子 と して の役 割 が 考 え られ る。 マ ウ スや ト リで は, こ の
来 した産 物 とは考 え に くい。 こ の よ うに, 内在 性 プ ロ ウ
よ うな 因子 の い くつ か が 内 在 性 プ ロ ウ イル ス の産 物 で あ
イ ル ス の産 物 に関 して は, ほ とん ど不 明 で あ り, 今 後 の
る こ とが 判 明 して い る。 つ ま り, 内 在 性 レ トロ ウ イル ス
大 き な課 題 で あ る。
由来 の env の細 胞 表 面 発 現 に伴 い, そ れ が 細 胞 表 面 上 の
IV.
の受 容 体 へ の吸 着 を阻 止 す る とい うも の で あ る。 そ の例
さ れ な い こ とか ら考 え る と, ERV-1の gag
ウイ ル ス受 容 体 を吸 収 し, 類 似 の外 来 性 レ トロ ウ イル ス
プ ロ ウ イル ス の生 物 学 的 意 義
と して は, マ ウ ス のFv-4遺
す べ て の 脊 椎 動 物 のDNA上
に 何 百 何 千 コ ピー と存
伝 子^<80)>,
ニ ワ トリのev-3,
6, 9遺 伝 子^<81)>が
知 られ て い る。ERV3の
プ ロ ウ イル ス
在 す る 内在 性 プ ロウ イ ル ス は, 多 くの場 合, 化 石 化 しつ
につ い て も, env 領 域 の発 現 が 認 め られ る こ とか ら, 宿
つ あ る プ ロウ イ ル ス, つ ま り進 化 の 過 程 で 宿 主DNA
主 抵 抗 性 を 担 う遺 伝 子 であ る可 能 性 が あ る。 この よ うな
に 組 み 込 まれ た 外 来 性 レ トロ ウ イ ル ス の痕 跡 と して取 り
宿 主 抵 抗 性 は ヒ トに お い て も充 分起 こ りう る現 象 で あ る
扱 わ れ て い る。 は た し て, そ うであ ろ うか?
が, ATLの
は,
本節で
ヒ トお よび 比 較 的 研 究 の 進 行 して い る ト リや マ ウス
の 系 で 明 らか にな った こ とか ら, こ の点 に関 して 考 察 し
て み た い。
原 因 とな るHTLV-IやAIDSの
ル ス で あ るHIVの
原因 ウイ
感 染 に 対 す る宿 主 抵 抗 性 因 子 は ど う
や ら ヒ トには 存 在 して い な い よ うで あ る。
別 の可 能 性 と して は, 進 化 の 過 程 で 内 在 性 プ ロ ウイ ル
化 石 説 の根 拠 とな る も の と して は, 宿 主 に何 の影 響 も
ス 内 で の再 編 成 が起 こ り, そ の遺 伝 子産 物 が発 生 や 分化
与 え な け れ ば, プ ロ ウイ ル ス の多 数 の 痕 跡 は 何 の制 約 も
な ど に密 接 に 関 与 して い るの で は な い か とい う点 が 考 え
受 け ず に メ ンデル の法 則 に 従 い継 代 され る とい う考 え 方
られ る。 ヒ ト以 外 の 系 で は, この説 を 示 唆 す る報 告 は 従
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウイ ル ス 遺 伝 子 の 構 造 と発 現
来 か ら散 見 され るが, 最 も注 目され る の は, 免 疫 グ ロブ
プ ロ ウイ ル ス群 か らは, 正 常 の大 腸 粘 膜 にお い てLTR
リン の1つ の ク ラス で あ るIgEの
を 含 む3.6kbのmRNAが
合 因 子 (IgE-BF)
生 合 成 を調 節 す る結
の 遺 伝 子 が マ ウス の 内在 性 レ トロ ウ
イ ル ス の一 種 で あ る小胞 内A粒 子 (IAP)
の遺 伝 子 の一
多 量 に発 現 して い る と報 告
して い る。 しか し, 大 腸 癌 で は, そ の発 現 が 有 意 に低 下
して い る。 こ のmRNAはLTR以
部 で あ った とい う事 実 で あ る^<82∼84)>。
つ ま り, ウイ ル ス ゲ
は 含 ま ず, “solo”LTRか
外 の ウ イル ス ゲ ノ ム
らの転 写 物 と考 え られ る こ と
ノ ム 自身 が 宿 主 の新 しい遺 伝 子 に な って しま った例 とい
か ら, こ の “solo”LTRが,
え る。 そ の他 に, 赤 血 球 形成 能 を有 す る体 液性 因子 (エ
現 を調 節 して い る 可 能 性 が あ る。ERV3プ
リス ロ ポ イエ チ ン) の遺 伝 子 が 多 くの レ トロ ウイ ル ス の
の系 で も, 先 に述 べ た よ うに, LTRが
gag
領 域 と相 同性 を示 す こ と^<85)>か
ら, 内 在 性 プ ロ ウイ ル
スが 利 用 され てい る可 能 性 が 考 え られ て い る。
ERV3プ
ロ ウイ ル ス の env
そ の下 流 の 細胞 遺 伝 子 の発
ロウ イ ル ス
下 流 のDNA結
合 蛋 白 質 を コー ドす る遺 伝 子 の発 現 を 調 節 して い る と考
え られ るか ら, 内在 性 プ ロ ウ イル スのLTRは
領 域 は 胎 盤 に お い て 多量
に発 現 して い る こ とを 先 に示 した が, 一 般 に,
レ トロ ウ
イ ル ス の env 領 域 か ら産 生 され る 遺 伝 子 産 物 に は 興 味
深 い 性質 が あ る。 そ れ は, 外 被 糖 蛋 白質 (MuLVで
は
gp70) の 細 胞融 合 能 と膜 貫 通 領 域 の蛋 白質 (MuLVで
Database Center for Life Science Online Service
35
宿主 にお
け る細 胞遺 伝 子 の発 現調 節 に 広 く利 用 され て い るの か も
しれ な い。 また, ERV3プ
ロ ウ イ ル ス の場 合, プ ロ ウイ
ル スの 発 現 抑 制 と絨 毛 膜 癌 と の強 い相 関 を認 め て い る^<57)>。
こ の場 合 の転 写 抑 制 は,
ERV3プ
再 配 列 あ る いはDNAの
メチ ル化 に よる もの では な い こ
ロ ウ イ ル ス の 欠失 や
の免 疫 抑 制 効 果 で あ る^<86,87)>。
哺 乳 類 にお い て
とか ら, 癌 化 に よっ てひ き起 こ され た 転 写 因 子 な ど の異
は, 細胞 融合 と免 疫 抑 制 は着 床 や 胎 盤 形 成 に 関与 す る現
常 に よ る も の で あ る と 考 え る のが 妥 当 で あ ろ う。 し か
はp15E)
象 で あ る こ とか ら, ERV3の env
領 域 か らの産 物 が こ
れ らに 密 接 に か かわ っ て い るのか も しれ な い。
い くつ か の 可能 性 を示 した が, す べ て の 内在 性 プ ロウ
し, 絨 毛 膜 癌 に お け る特 定 の発 癌 遺 伝 子 の 活 性 化 お よび
染 色 体 異 常 は 今 の とこ ろ 見 つ か っ て お らず,
ERV3プ
ロ ウイ ル ス の発 現 抑 制 が癌 化 へ の1つ の ステ ッ プ と な っ
イル スが 宿 主 に とっ て不 必要 な もの か否 か につ い て は,
て い る可 能 性 あ る い はERV3遺
現 在 の と ころ, そ の解 答 は 得 られ て い な い。 それ は, 内
抑 制 因子 と して作 用 して い る可 能 性 も残 され て い る。
伝子産物 が腫瘍化へ の
在 性 プ ロ ウ イル スが ま った く存在 して い な い とされ て い
た ニ ワ トリに も^<88)>,
別 種 の プ ロ ウイ ル ス群 が 多数 見つ か
った か ら で あ る^<89,90)>。
この 点 を 明 らか に す るた め の別 の
お わ りに
ヒ ト内在 性 プ ロ ウイ ル スに 関 す る研 究 の現
ア プ ロー チ と して, プ ロ ウ イル スの 構 造変 化 や発 現 異常
状 を 紹 介 した が, ま だ理 解 で きな い 点 が 多 く残 され て い
と種 々 の疾 病 との関 連 を 探 る研 究 もな さ れ つ つ あ る。 仮
る。 そ れ らは, これ らプ ロ ウイ ル ス の起 源, プ ロウ イ ル
に, 内在 性 プ ロウ イル スの 欠 失 や 異 常 が 特 定 の疾 患 と結
スか らの 生 成 産 物 の 機 能, 細 胞遺 伝 子 と の相 互 作 用, 疾
びつ い て い るな らば, そ の プ ロ ウイ ル ス は正 常細 胞 に お
病 と の関 係 な ど であ る(図10に
い て何 らか の機 能 を果 た して い た と予 想 され る。
疾 病 へ の 関 与 に 関 して は, 癌 化 の み な らず, 従 来 か らマ
Gattoni-Celli らは^<67)>,
マ ル チ コ ピ ー タ イ プのC型 関 連
図10.
ウ ス (NZBマ
そ れ らを ま とめ てみ た)。
ウ スな ど^<91)>)
で 提 唱 され て い る 自己 免 疫 疾
内在 性 プ ロ ウ イル ス の起 源 とそ の遺 伝 子 産 物 の機 能 に 関 す る モデ ル
破 線 で 示 す よ うに, い まだ 未 解 決 の部 分 が 多 い。
2367
36
蛋 白 質
核 酸
酵 素
患 と の 関 連 を ヒ トに お い て も示 唆 す る報 告 が あ り^<92)>,
内
在 性 レ ト ロ ウ イ ル ス と 自 己 免 疫 疾 患 と の 関 係 も興 味 深 い
課 題 で あ る 。 ま た,
Vol. 33
No.
13
19•zO'Connell,
C.,
hen,M.:
20)
nell,C.,
プ ロ ウ イ ル ス 群 は 格 好 の 素 材 で あ る と思 わ れ る。 そ の ほ
(1983)
21)
プ ロ ウ イ ル ス のLTRを
利 用 した相 同組 換 え とい う
夢 の よ う な 研 究 に 将 来 利 用 さ れ る か も しれ な い 。 い ず れ
S.
こ の 分 野 の 分 子 生 物 学 的 研 究 は,
ま だ 日が 浅 い
23)
進 行 しっ つ あ る 現 在,
意 外 な 事 実 が 明 ら か に さ れ る 日が
く る の で は な い か と期 待 さ れ る。
ERV3に
関 す る 研 究 の 大 部 分 は,
レデ リ ッ クが ん 研 究 所 の Maurice
れ た もの で あ り, Maurice
Cohen
に 深 く感 謝 致 します 。 ま た,
25)
ご助 言 を い た だ い た 多 く
Larsson
Database Center for Life Science Online Service
博 士 に 感 謝 致 しま す 。
(1987)
M.,
Powers,
M.,
Virology,
C.,
Scheidereit,
C.,
Sci.
USA,
81,
von
der
313,
Leib-Mosch,
2)
Liebermann,
Sachs,
3)
32,
D.,
L.:
Hehlmann,
29)
Repaske,
S.:
Proc.
7371-7375
Natl.
J.,
Virology,
7)
pp.
Sci.
J.:
1,
181-191
(1982)
4,
333-339
(1986)
Janowski,
158,
Coffin,
Acad.
M.,
82-102
in
A.:
1109-1203,
Cold
34)
Viruses,
Spring
P.:
Vol
Harbor
Stoye,
Vol.
9)
J.,
2,
Coffin,
pp.
Kalter,
S.
Panigel,
10)
13)
Dirksen,
59,
K.,
Kurth,
R.:
Mondel,
Viruses,
Heberling,
K.,
Strickland,
Cancer
Int.,
37)
R.
50,
J.
28,
551-557
Lower,
J.,
Virol.,
64,
2549-2559
Wi
Proc.
USA,
71,
4513-4518
Bryan,
Proc.
Natl.
T.,
Can
Acad.
S.,
Sci.
USA,
Natl.
I.,
Acad.
Sci.
285,
H.
Natl.
M.:
C.,
Cohen,
M.:
USA,
79,
Mizutani,
550-554
Cell,
4709-4713
S.,
Temin,
43)
78,
599-600
Ono,
Martin,
R.
Virol.,
Bryan,
T.,
Biol.,
R.,
Rab
54,
764-
Willey,
7,
(1982)
M.:
R.,
1559-1562
46)
P. S.:
M.,
Virol.,
Proc.
61,
Natl.
(1984)
Takano,
T.:
Nucleic
(1982)
W.,
Chiu,
Tronick,
Sci.
I. -M.,
B.
S.,
Schlom,
USA,
79,
5503-
Virol.,
C.,
58,
R.
Tro
A.,
Sch
(1985)
937-944
(1986)
Miyata,
589-598
Sweet,
S.
1208-1211
T.,
60,
J. F. H.,
Aaronson,
228,
Virol.,
K.
Wong,
A.,
Yasunaga,
J.
Deen,
T.,
Ushikubo,
(1986)
W.:
J.
Virol.,
57,
422-
(1986)
Sonigo,
P.,
Alizon,
Cole,
Haase,
Power,
A.,
D.,
B.,
P.,
K.,
Retzel,
Wain-Hobson,
F. E.
E.,
Klatz
E.,
S.:
Tiol
Cell,
42,
A.,
Bryant,
Luciw,
M.
P.
A.:
L.,
Gar
Science,
(1986)
45,
B.,
C.,
Hunter,
375-385
E.,
Wain-Hob
(1986)
Westley,
Diggelman,
4127-4139
F. E.
P.
P. J.,
Barker,
Cell,
May,
Staskus,
Danos, O.,
Marx,
Barr,
1567-1572
May,
M.,
S.,
(1985)
M.
Sonigo,
Moore,
J.
7510-7514
2865-2878
Roe,
J.
M.,
11,
45)
J. D.:
Acad.
R.,
M.:
743-749
(1980)
J.
Cell.
81,
Science,
Buetti,
(1980)
21,
T.,
(1984)
O'Neill,
B.,
Drohan,
R.,
s on,S.:
Proc.
H.
Mar
USA,
(1982)
231,
Khan,
44)
O'Connell,
K.,
Nature,
R.,
Proc.
dner,M.
(1981)
T.
A.
10,
J.:
369-382
(1974)
Rasheed,
P. E.,
Sci.
Bryan,
E.,
Henthorn,
Callahan,
l ais,P.,
42)
J.:
B.,
A.:
Kurihara,
mann,D.,
(1983)
G.
P.
M.
USA,
Res.,
432
41)
(1982)
Todaro,
Steele,
943-947
Freeman,
L.,
Callahan,
38)
R.,
J.
Erfle,
666-677
(1987)
M.,
H.:
(1981)
Int.
T.,
155,
R.,
A.
Mol.
L.,
Sci.
l om,J.:
Lower,
P. H.:
Nature,
Werner,
Acad.
225,
A.:
D.
D.
J. E.,
Cancer.
H.,
Rabson,
Rabson,
Acad.
nick,S.
1081-
P.,
R.
Steele,
M.
Mager,
L.,
40)
Cancer,
E.,
A.,
Shimotohno,
Temin,
Natl.
Sundstrom,
Hofschneider,
Sci.
4892-4896
J.
B. O.,
Gen.
R.
M.
A.:
R.,
Natl.
Martin,
J.,
5507
(1977)
J.
281-287
S.:
J.
Frank,
Benveniste,
Natl.
Levy,
Nilsson,
H.,
16•zBonner,
2368
Natl.
R.,
Int.
Boller,
Acad.
18)
J.
E.,
15•zMartin,
17)
J.,
A.
1187-1192
Larsson,
A.
R.
C.,
M.:
(1985)
39•zOno,
E.
cer,30,
14)
Tumor
(1973)
dehn,S.:
12)
Fowler,
A.:
RNA
Scheidereit,
Beato,
Virology,
O'Neill,
R.,
Acids
36)
Laboratory
(1985)
Helmke,
M.,
Inst.,
11)
in
357-404
S.,
Hellman,
1084
J.:
Acad.
(1983)
B.,
Noda,
1,
(1984)
8)
Natl.
S.,
G.,
Brack,
Science,
Mager,
35)
Tumor
1204-
(1987)
(1987)
RNA
226,
(1984)
Janich,
Schutz,
Proc.
4060-4066
E.
Proc.
3029-3033
R.:
P. E.,
Martin,
USA,
Reddy,
M.:
Beato,
C.,
678-682
Silver,
33)
5) ˆä•ì—m“ñ : ŽÀŒ±ˆãŠw,
Merregaert,
32)
(1980)
(1982)
4) •²•ûŒ÷•K : •×–E•HŠw,
6)
B.,
Science,
Kato,
(1985)
A.:
772
121-134
C.,
(1985)
R.: Ž„•M
Steele,
(1983)
107,
Cell
O'Connell,
M.:
D.,
R.,
son,A.
Hoffman-Liebermann,
74-77
(1986)
28)
30)
5-6
Virology,
Rasheed,
79,
Cell,
O'Con
Cytogenet.
Cohen,
Hehlmann,
31•zRepaske,
R.:
R.:
Co
M.: Ž„•M
V.,
(文献番号を太字にした ものは特に重要な文献であ ることを示す)
Jaenisch,
M.,
303,
449-458
Ahe,
706-709
27)
M.
1)
Cohen,
147,
R.,
Cohen,
80,
献
B.
G.,
(1984)
tin,M.
文
I.,
167-170
26)
の方 々 に深 く感 謝 致 します 。 ヒ トの 種 々 の 組 織 を 集 め る た め ご
尽 力 を い た だ い た ス ウ ェー デン, ウ プサ ラ大 学 の Erik
Reeves,
W.
(1984)
Nature,
44,
Renkawitz,
博 士 の も とで 行 な わ
博 士 な らび に 研 究 室 の 皆 様
ご指 導,
J.,
T.
G.:
M.
1206
24)
Bonner,
W.
O'Connell,
米 国 メ リー ラン ド州 の フ
Cohen
J.,
Nash,
Nash,
225-235
Genet.,
22•zCohen,
こ と も あ り, 多 く の ヒ ト内 在 性 プ ロ ウ イ ル ス 群 の 解 析 が
S. J.,
138,
Renan,
N.:
に せ よ,
O'Brien,
Virology,
O'Brien,
分 子 進 化 と い う観 点 か ら も こ れ ら の
か,
(1988)
B.
H.:
R.,
Rochefort,
Nuleic
Acids
H.,
Res.,
(1983)
B.,
Westley,
B.
R.:
J.
Virol.,
60,
(1986)
R.,
Dixon,
M.,
Smith,
R.,
Peters,
G.,
ヒ ト内 在 性 レ トロ ウイ ル ス 遺 伝 子 の構 造 と発 現
Dickson,
47)
S.,
48)
C.:
Harada,
M.:
F.,
61,
B.,
480-490
Sonigo,
Cell,
P.,
40,
Tsukada,
Res.,
Kroger,
Virol.,
S.,
Alizon,
Acids
49)
J.
Wain-Hobson,
9-17
N.,
15,
9153-9162
Horak,
I.:
(1987)
Danos, O.,
64)
Cole,
Kato,
N.:
Nucleic
65)
(1987)
J.
Maeda,
51)
Maeda,
52)
Sun,
Virol.,
61,
N.:
J.
Biol.
Chem.,
260,
L.,
Paulson,
K.
E.,
Misra,
Database Center for Life Science Online Service
L.:
R.,
A.,
P.,
Imbra,
R.
68)
M.,
Biochem.,
N.,
J.
69)
Biol.,
70)
J.
Chiu,
R.,
H.
Jonat,
49,
Cohen,
C.,
729-739
M.:
B.,
Her
Int.
J.
Can
Larsson,
E.:
J.
Pfeifer-Ohlsson,
S.,
Kato,
Ohlsson,
2182-2192
R.,
M.,
Lars
Cohen,
Wingender,
1902
62)
74)
16,
K.,
T.
Rottman,
Kung,
Deutsch,
U.,
Gruss,
P.:
H.
M.,
-J.:
P.
Crittenden,
Cell,
A.,
Goodwin,
L. B.,
41,
719-726
Raines,
(1985)
K.,
Gene,
C. F.,
Mar
(1983)
Kalled,
S.,
Acad.
Hamagishi,
Issei
Sci.
Y.,
Martin,
M.
M.,
(1987)
C.,
H.,
62,
Suni,
A.:
USA,
Steele,
J.
P.
Virol.,
S.,
B.,
B.,
E.,
56,
H.:
Hanson,
J.
I. M.,
Westley,
B.
R.:
J.
(1988)
T.,
Mellors,
347-356
S.,
E.
559-566
Zervoudakis,
Maeda,
F.
Wahlstrom,
28,
Ushikubo,
Chretien,
May,
1203-1210
J.,
Maeda,
Vaheri,
A.:
Int.
J.
(1981)
R.
C.,
I.
A.:
Mellors,
J.,
Jerabek,
Amer.
J.
Path.,
H.,
Mori,
(1983)
S.,
Yonezawa,
Kobayashi,
R.
Suni,
K.,
T.,
C.:
Yoshizaki,
Akahonai,
Int.
J.,
Narvanen,
Pakkanen,
J.
Y.,
Cancer,
Yachi,
38,
R.
J.
G.,
M.
76)
M.,
USA,
Copeland,
T.,
36,
G.,
607-611
A.,
A.,
309-316
T.,
Cohen,
81,
S.:
Suni,
Saksela,
M.,
Aho,
E.,
Oroszlan,
(1985)
D.,
Canaani,
E.:
T.,
Proc.
6197-6201
A.,
379-382
Givol,
T.,
Copeland,
Oroszlan,
Narvanen,
Lehtonen,
Cancer,
Rechavi,
300,
Sci.
T.,
Wahlstrom,
Vaheri,
Cohen,
Acad.
kanen,R.,
A.,
R.,
T.,
Wahlstrom,
A.,
Maroney,
T.,
K.:
Garon,
Natl.
2059-2062
G.
Cell,
(1987)
W.,
F.
Franklin,
Natl.
187975)
771-778
Nilsen,
A.,
Res.,
Nishide,
604-607
Kawakami,
61,
M.,
(1987)
Acids
380-
(1986)
M.:
(1988)
Chowdhury,
48,
63)
Nucleic
6,
(1985)
Copeland,
E.:
E.,
Kirsch,
M.,
Mellors,
(1988)
60) ‰Á“¡•é”V‚ç : –¢”-•\ƒf•[ƒ^
61)
B.,
M.,
M.,
Potter,
(1986)
A.
112,
Cell.
P.
Proc.
6127-6131
Ono,
L.
73)
N.,
J.,
72)
N.,
306,
S.,
Cancer,
(1987)
(1988)
121-128
61,
J.,
Stein,
C.,
Biol.,
Matsubara,
Steele,
J.:
Virol.,
Biochem.,
H.
Cell.
Tomita,
T.,
Nature,
Gattoni-Celli,
Virol.,
(1985)
Mol.
Eur.
Cell,
E.,
Rydnert,
Virol.,
A.:
176-182
L.,
71)
M.,
Kato,
36,
son,E.,
359-361
M.:
F.:
M.:
380-385
Cohen,
Misra,
Kadyk,
A.,
B.,
Rochefort,
Rahmsdorf,
Larsson,
cer,41,
W.,
G.,
III,
Mol.
(1988)
A.
Rabson,
Morse
Mori,
229-235
83,
12,
(1980)
Karin,
N.,
C.
M.
Rush,
Imagawa,
J.,
rlich.,P.,
Schmid,
316,
Rougeon,
303-314
Angel,
59•zKato,
Kadyk,
Res.,
(1987)
C.,
57•zKato,
C. W.,
Acids
Rush,
Nature,
Shih,
Auffray,
N.,
C. W.,
233-243
107,
Schmid,
C.,
Horii,
M.,
Tykocinski,
Deke,
Schindler,
196,
E.,
Nucleic
(1984)
Paulson,
J.
K.
L.:
L.
J. F.:
bacher,K.
Leinwand,
Leinwand,
58)
M.,
tin,M.
67)
R.,
56)
Emi,
6698-6709
N.: Ž„•M
2669-2690
55)
(1986)
66•zRabson,
L.,
54)
392
62,
2071-2075
(1985)
53)
G.
Mushinski,
Ogawa,
(1987)
50)
Shen-ong,
M.,
(1985)
37
(1984)
J.,
Pak
Vaheri,
S.:
Int.
Nature,
(1982)
2369
38
蛋 白 質
77)
Ymer,
S.,
Tucker,
pel,A.
J.,
Campbell,
H.
255-258
(1985)
ture,317,
78)
Hawley,
R.
Gibson,
D.
Acad.
79)
Luria,
S.,
81)
Biol.,
82•zKuff,
H.,
J.
Database Center for Life Science Online Service
84)
2370
Moore,
Na
Murialdo,
H.,
Proc.
J.
F.,
86)
Natl.
(1982)
Virol.,
S.,
Martin,
768-777
57,
998-
Braverman,
S.
Spring
Harbor
44,
1111-1121
(1980)
L.,
K.
Mietz,
W.,
Sci.
H.,
J.
A.,
Martens,
USA,
Ono,
M.,
87)
M.,
83,
88)
B.,
Astrin,
Syinp.
6583-6587
S.
M.
Proc.
W.,
Jardieu,
P.,
L.,
90)
Natl.
(1986)
T.:
Nature,
Mietz,
J. A.,
318,
(1985)
K.
89)
Quant.
Trounstine,
C. L.:
Miyata,
Repaske,
(1985)
Cold
Acad.
388-389
Ha
I. G.:
7425-7429
M.:
55,
W.
E.
Toh,
J.,
N.:
79,
Laigret,
Virol.,
Moore,
83)
J.,
Vol. 33
85)
Hozumi,
USA,
C.
Young,
M.
Horowitz,
Hayward,
M.:
Sanderson,
D.,
酵 素
(1986)
Ikeda,
R.:
J.,
Shulman,
M.,
Sci.
1003
80)
G.,
Q.
核 酸
Trouns
91)
92)
No.
13
(1988)
tine,M. L., Kuff, E. L., Ishizuka, K., Martens,
C. L.: J. Immunol., 136, 4283-4290 (1986)
Patarca, R., Haseltine, W. A.: Nature,
318,
390 (1985)
Itohara, S., Tomiyama, T., Ushimi, C., Sekika
wa,K.: J. gen. Virol., 69, 797-804 (1988)
Cianciolo, G. J., Hunter, J., Silva, J., Haskill,
J. S., Snyderman, R.: J. Clin. Invest, 68,
831-844 (1981)
Astrin, S. M., Buss, E. G., Hayward, W. S.:
Nature, 282, 339-341 (1979)
Dunwiddie, C., Faras, A. J.:
Proc.
Natl.
Acad. Sci. USA, 82, 5097-5101 (1985)
Dunwiddie, C. T., Resnick, R., Boyce-jacino,
M., Alegre, J. N., Faras, A. J.: J. Virol., 59,
669-675 (1986)
Levy, J. A.: J. Rheumatol., 2, 135-148 (1975)
Query, C. C., Keene, J. D.: Cell, 51, 211-220
(1987)