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和光純薬時報 Vol.84 No.2(2016.04)

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和光純薬時報 Vol.84 No.2(2016.04)
ISSN 1347-4804
April 2016
Vol.84 No.2
Endometrioid
Control
MLS128
（Tn）
MLS132
（Sialyl Tn）
MSW113
（Sialyl Lea）
〔総 説〕
「がん関連糖鎖抗原を認識する単クローン抗体 MLS128, 132 及び MSW113」
中田 博……… 2
〈テクニカルレポート〉
「蛍光組織染色が可能なシアリダーゼ蛍光プローブ」
大坪 忠宗、池田 潔、南 彰、高橋 忠伸、鈴木 隆……… 5
「反応性代謝物検出のための Presep® XenoScreenTM 96well Plate を用いた試料前処理について」
須藤 勇紀……… 8
〔製品紹介〕
培 養
有機合成
Johnson Matthey 社製 カップリング反応用貴金属触媒 … 10
KY03-I ………………………………………………… 19
不斉合成酵素触媒 アマノリパーゼ …………………… 10
CKI-7 二塩酸塩，MF ………………………………… 19
神経細胞用培地 ………………………………………… 20
環境・分析
9
トリプシン EDTA 溶液
（フェノールレッド不含）
，AF …… 20
シリカゲルプレート ……………………………………… 11
コラゲナーゼ タイプ A/B/C …………………………… 21
局方一般試験法用 容量分析用標準液 ……………… 11
汎用粉末培地 …………………………………………… 22
水質管理目標設定項目対応 農薬混合標準液………… 12
ヒト ES/iPS 細胞モニタリングキット …………………… 28
XenoScreen
…………………………………………
TM
ポジティブリスト関連標準品 …………………………… 14
免 疫
QTofMS 用溶媒………………………………………… 15
がん関連抗糖鎖モノクローナル抗体 ……………………
食品分析用 リパーゼ H、リパーゼ S…………………… 15
プリスタン，合成品 ……………………………………… 22
抗糖鎖モノクローナル抗体シリーズ …………………… 23
細胞生物・生化学
BTP3-Neu5Ac-Na ……………………………………
4
7
抗りん酸化α- シヌクレイン，モノクローナル抗体
（pSyn#64）
，
10 ×高効率転写バッファー…………… 16
ビオチン結合、FITC 結合 …………………………… 24
タンパク質還元剤 ……………………………………… 17
視神経研究用ポリクローナル抗体 ……………………… 24
アクアブロット
TM
YM-254890 …………………………………………… 17
遺 伝 子
ストレプトアビジン………………………………………… 17
Ni-NTA アガロース HP ………………………………… 26
YNT-185･2HCl ……………………………………… 18
PIPA（ピロール・イミダゾール）からなるポリアミド …… 26
ピモニダゾール塩酸塩…………………………………… 18
TA- エンハンサークローニングキット …………………… 27
〔お知らせ〕
細胞培養関連商品紹介サイト「Culture-wako.com ∼カルチャーワコードットコム∼」開設のご案内 …… 18
1
R
esearch
がん関連糖鎖抗原を認識する単クローン抗体 MLS128,132
及び MSW113
1 はじめに
京都産業大学 中田 博
たころ、ヘテロマウス（Balb/c, nu/+）
の脾細胞を担がんヌードマウスの腹腔
るエピトープの構造 2, 3）
内に投与した。約 1 ヶ月後、腫瘍の退
がん関連糖鎖抗原の内、いわゆる糖
一般的に上皮性細胞はムチンと呼ば
縮したマウスの脾細胞を用いて、常法
鎖不全によって出現する抗原に T 抗
れる高分子の糖タンパク質を産生す
によりハイブリドーマを得た。この方
原や Tn 抗原がある。Tn 抗原は元来、
る。ムチンは膜結合型と分泌型に大別
法により単クローン抗体、MLS128 と
Tn 症候群と呼ばれる患者の赤血球膜
され、いずれも O- グリカンに富み、
MLS132 を得た。
上に見出されたものである。通常、腸
糖含量は 50％を越える。本来の生物
技術的には、ハイブリドーマの選択
内細菌の抗原に対して抗体がつくられ
学的機能は消化管や気道などの粘膜を
を簡便化する目的で、先ずムチン型糖
血清中に存在している。Springer ら
保護する物質である。がん化に伴っ
鎖に反応する抗体を検出するアッセイ
は、上皮性がんに T や Tn 抗原が高
1）
て、糖鎖の質的変化と上皮組織の崩壊
系を確立した 。すなわち、ムチン上
頻度に発現していることを見出し、こ
（極性の消失）による存在状態の変化
の糖鎖はペプチド鎖上に密集して結合
れらの抗原ががん関連糖鎖抗原とされ
が見られる。すなわち、正常な状態で
していることが多く、プロテアーゼに
た。ヒト大腸がん由来細胞株 LS180
は組織のアピカール側のみに存在して
よる切断を受けにくい。従って、消化
を免疫原として作製した単クローン抗
いたムチンががん組織全体や血流中に
後も O- グリカンを含む糖ペプチドは
体 MLS128 は同細胞から調製したム
も見出されるようになる。糖鎖の質的
比較的高分子であることを利用して、
チン型糖ペプチドの他、羊顎下腺ムチ
変化はがん関連糖鎖抗原の発現として
ペプチド断片や N- グリカンを含む糖
ン（OSM）とも強く反応した。OSM
捉えられ、それらの多くに対して単ク
ペプチドからゲル濾過によって分離
をシアリダーゼ処理しても反応性に変
ローン抗体が作製されてきた。がん関
し、プレートに固相化した。さらに、
化は見られなかったが、α-N - アセチ
連糖鎖抗原の研究は糖脂質の糖鎖に発
ハイブリドーマの培養上清の抗体価の
ルガラクトサミニダーゼ処理により反
現されているものについて先行する形
測定にはプロテイン A を用いて IgG
応性は消失した。また、プロナーゼ処
で始まった。糖脂質が比較的精製し易
のみを選択した。この手法で得た単ク
理により反応性は減弱した。これらの
く、その糖鎖の均一度も高いことが主
ローン抗体の中で組織化学的手法によ
性質及び Tn 赤血球を凝集することか
な理由である。しかし、がん患者血清
りがん細胞及びがん組織と強く反応す
ら抗 Tn 抗体であることがわかった。
中に見出される抗原は、通常、高分子
る単クローン抗体を産生するハイブリ
アシアロ OSM を種々のプロテアーゼ
のムチン型糖タンパク質であること、
ドーマを選択した。
処理して得られた断片を MLS128 抗
我々の従来の研究成果からも糖タンパ
ク質糖鎖のがん性変化としては、ムチ
ン型糖鎖に最も顕著に見られることか
ら、ムチン型糖鎖を認識する単クロー
3 つの単クローン抗体の
2
エピトープの解析
体カラムに通し、結合した糖ペプチド
をさらに HPLC（逆相カラム）により
精製し、アミノ酸配列を決定した。そ
の結果、抗原活性の高い糖ペプチドに
上述した方法により得た抗体は、免
共通してみられる構造は GalNAc-Ser
当研究室では、がん関連糖鎖抗原に
疫原とした細胞から調製したムチン型
（GalNAc）-Thr（GalNAc）-Thr であった
対する単クローン抗体の作製、エピ
糖ペプチド、N- グリコシド型糖ペプ
（図 1）。さらに、グリコホリン A を
トープの解析、腫瘍マーカーとしての
チド、糖脂質を固相化し、それぞれの
材料としてエピトープの解析を行っ
利用及び生物学的機能の解析などの研
抗体の反応性を調べるとともに、シア
た。Tn 赤血球症のグリコホリン A は
究を行ってきた。免疫原としては、ヒ
リダーゼ処理前後における反応性の変
入手困難であることから、正常グリコ
ト大腸がん由来細胞株 SW1116 や LS180
化の有無について調べた。MLS128 は
ホリン A をシアリダーゼ及びβ - ガ
を用い、免疫方法としては 2 つの手法
ムチン型糖ペプチドとのみ反応し、シ
ラクトシダーゼ処理することにより
を試みた。1 つは一般的に用いられて
アリダーゼ処理後も反応性を示した。
Tn 抗原活性が生じることを確認した
いる方法で、直接がん細胞をマウスの
MLS132 もムチン型糖ペプチドとのみ
上で、アシアロアガラクトグリコホリ
腹腔に投与するもので、IgG を得るた
反応したが、シアリダーゼ処理により
ン A を材料としてエピトープの構造
めに長期にわたって免疫した。この方
反応性は消失した。MSW113 はムチ
を解析した。グリコホリン A は N- 末
法で単クローン抗体 MSW113 を得た。
ン型糖ペプチドと糖脂質と反応し、シ
端近傍に 2 つの糖鎖クラスターをもつ
もう 1 つの方法はがん細胞をヌードマ
アリダーゼ処理により反応性を消失し
可能性のある配列（Ser-Thr-Thr, Thr-
ウス（Balb/c, nu/nu）の背皮下に注
た。
Ser-Thr-Ser）を有するが、Mellors ら
ン抗体に対象を絞った。
が調製したグリコプロテアーゼ処理に
射し、直径約 1cm の腫瘍が形成され
2
1）単クローン抗体 MLS128 の認識す
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
示し、MSW113 は NS19-9 では認識で
きない修飾されたシアリル Lea を含む
糖鎖構造を認識することが示唆され
た。すなわち、ヒト初乳より単離され
たオリゴ糖を用いて両単クローン抗体
の反応性を比較すると NS19-9 はシア
リル Lea を含む枝分かれをもつ糖鎖、
糖脂質に見られるシアリル Lea に続く
還元末端のラクトース構造を欠如した
糖鎖などに対して著しく反応性が低い
ことがわかった。
図１．単クローン抗体の認識するエピトープの構造
がん関連糖鎖抗原に対
3 する単クローン抗体を
用いた研究の進展
より 2 つのクラスター間を切断し、そ
であった。この糖ペプチドをシアリ
れぞれの糖ペプチドを分離し、抗原活
ダーゼとα-N - アセチルガラクトサミ
性を測定した。その結果、2 つのクラ
ニダーゼ処理後にアミノ酸配列を解析
松本らはシンデカン 1 上に Tn 抗原
スターは同等の抗原活性を有し、クラ
すると FSGETSTTVISGTNV である
（Clustered Tn antigen, トリメリック
スター内の Ser、Thr の配列順序に抗
こ と が わ か っ た。 す な わ ち、TSTT
Tn） が 発 現 し、 同 抗 原 の 発 現 は が
原活性は影響を受けないことがわかっ
に連続して結合した SAα2-6GalNAc
ん細胞の転移能を亢進することを見
た。なお、その後の研究で連続した
が強い抗原活性をもつことがわかった
出した 7）。すなわち、高転移性のマウ
GalNAc-Ser/Thr の数と結合活性の強
さについては測定温度によっても影
響を受けることが明らかにされてい
4）
る 。
2）単クローン抗体 MLS132 の認識す
るエピトープの解析
5）
単クローン抗体 MLS132 もヒト大
（図 1）。
ス Lewis lung carcinoma に お い て
3）単クローン抗体 MSW113 の認識す
るエピトープの解析 6）
ppGalNAc-T13 の発現亢進がみられ、
その結果 MLS128 反応性の Tn 抗原の
単クローン抗体 MSW113 はヒト大
発現が上昇した。さらに、同抗原を発
腸がん由来細胞株 SW1116 を免疫原
現するコアタンパク質はシンデカン 1
として作製されたものであるが、同細
で あ る こ と が わ か っ た。Tn 抗 原 を
胞より調製したムチン型糖ペプチドに
発 現するシンデカン 1 はインテグリ
腸がん細胞 LS180 を免疫原として作
加えて、ヒト初乳オリゴ糖とも反応し、
ンα5β1 及び MMP-9 と相互作用し、
製されたものであるが、同細胞より調
シアル酸を除去することにより抗原性
これらの複合体は glycolipid-enriched
製されたムチン型糖ペプチドに加えて
を消失した。ヒト初乳を除タンパク質
microdomain に 集 結 し、 が ん 細 胞 の
OSM とも反応した。その反応性はシ
した後、ゲル濾過によって得たシアル
浸潤・転移能を高めることがわかっ
アリダーゼ処理により消失すること、
酸を含有するオリゴ糖画分を MSW113
た。
OSM の糖鎖の大半は SAα2-6GalNAc
抗体カラムに通し、エピトープを含む
がん関連糖鎖抗原を認識する単ク
であることから MLS132 の認識する
オリゴ糖を得た。さらに、NH2-60 カ
ローン抗体は腫瘍マーカーの検出試薬
エピトープは SAα2-6GalNAc-Ser/Thr
ラムを用いて分画し、10 種以上のオ
として期待されてきた。早期発見など
1
（シアリル Tn 抗原）であることが予
リゴ糖を単離した。FAB-MS 及び H-
の目的には必ずしも対応しきれていな
想された。OSM をトリプシン処理して
NMR を 用 い て 構 造 を 解 析 し た と こ
いが、創意工夫によって新たなツール
得た糖ペプチドを逆相カラムにより分
a
ろ、すべてのオリゴ糖でシアリル Le
としての可能性も残されている。子宮
画し、さらに MLS128 抗体カラムに通
を含有していた。シアリル Lea は単ク
内膜症と卵巣がん患者の血液中には、
して強い抗原活性をもつ糖ペプチドを
ローン抗体 NS19-9 の認識するがん関
CA125 抗原（MUC16 上の抗原）が共
単離した。さらに、サーモリシンで処
連糖鎖抗原 CA19-9 として知られてい
通に検出される。その量的な差によっ
理した消化物を逆相カラムで精製し、
る。NS19-9 と MSW113 は同じシアリ
て、両疾患を区別しているが、CA125
強い抗原活性をもつ糖ペプチドのアミ
ル Lea を認識するが、各種がん患者血
を発現する MUC16 の他の糖鎖に違い
ノ酸配列を解析したところ、いずれの
清中の抗原量を同一患者で測定したと
が見出されれば、質的な差として両疾
糖ペプチドも FXGEXXXXVIXGXNV
ころ、MSW113 がより高い陽性率を
患を明確に区別できると考えた。抗
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
3
glycophorin A for an anti-Tn antibody（MLS
128）.", Proc. Natl. Acad. Sci. U S A ., 90, 2495-9
（1993）.
4）Matsumoto-Takasaki, A., Hanashima, S., Aoki, A.,
Yuasa, N., Ogawa, H., Sato, R., Kawakami, H.,
Mizuno, M., Nakada, H., Yamaguchi, Y. and
Fujita-Yamaguchi, Y. : "Surface plasmon resonance and NMR analyses of anti Tn-antigen
MLS128 monoclonal antibody binding to two
or three consecutive Tn-antigen clusters.", J.
Biochem ., 151, 273-82（2012）.
5）Tanaka, N., Nakada, H., Inoue, M. and
Yamashina, I. : "Binding characteristics of
an anti-Siaα2-6GalNAcα-Ser/Thr （sialyl
Tn）monoclonal antibody（MLS 132）.", Eur. J.
Biochem ., 263, 27-32（1999）.
6）Kitagawa, H., Takaoka, M., Nakada, H., Fukui, S.,
Funakoshi, I., Kawasaki, T., Tate, S., Inagaki, F.
and Yamashina, I. : "Isolation and structural
図２．卵巣がん及び子宮内膜症患者血清中の MUC16 上に発現されるシアリル Tn 抗原
（sTn）
studies of human milk oligosaccharides that
are reactive with a monoclonal antibody
MSW 113." J. Biochem ., 110, 598-604（1991）.
7）Matsumoto, Y., Zhang, Q., Akita, K., Nakada, H.,
CA125 抗 体 に よ っ て プ レ ー ト 上 に
MUC16 を ト ラ ッ プ し、MUC16 上 の
シアリル Tn 抗原を測定すると子宮内
膜症ではすべての症例（n=21）で陰
Nakada, H., Kawasaki, T., Funakoshi, I. and
Hamamura, K., Tsuchida, A., Okajima, T.,
Yamashina, I. : "Characterization of mucin
Furukawa, K., Urano, T. and Furukawa K. :
antigens recognized by monoclonal antibodies
"Trimeric Tn antigen on syndecan 1 produced
raised against human colon cancer cells.",
by ppGalNAc-T13 enhances cancer metastasis
Cancer Res ., 51, 331-5（1991）.
via a complex formation with integrin α5β1
2）Nakada, H., Numata, Y., Inoue, M., Tanaka, N.,
性であったが、卵巣がん患者（n=36）
Kitagawa, H., Funakoshi, I., Fukui, S. and
8）
。
で は 44 ％ が 陽 性 で あ っ た（ 図 2）
現在、さらなる改良を加えており、有
用な診断法の開発が期待される。
8）Akita, K., Yoshida, S., Ikehara, Y., Shirakawa, S.,
structure recognized by an anti-GalNAcα-Ser
Toda, M., Inoue, M., Kitawaki, J., Nakanishi, H.,
Biol. Chem ., 266, 12402-5（1991）.
Narimatsu, H. and Nakada, H. : "Different levels
of sialyl-Tn antigen expressed on MUC16 in
3）Nakada, H., Inoue, M., Numata, Y., Tanaka, N.,
Funakoshi, I., Fukui, S., Mellors, A. and
1）Fukui, S., Horie, T., Numata, Y., Kitagawa, H.,
Chem ., 288, 24264-76（2013）.
Yamashina, I. : "Elucidation of an essential
（Thr）monoclonal antibody（MLS 128）.", J.
〔参考文献〕
and matrix metalloproteinase 9." J. Biol.
Yamashina, I. : "Epitopic structure of Tn
patients with endometriosis and ovarian
cancer." Int. J. Gynecol. Cancer , 22, 531-8
（2012）.
P roducts
がん関連抗糖鎖モノクローナル抗体
コード No.
品 名
010-25901
Anti Sialyl-Le Antigen, Monoclonal Antibody（MSW113）
a
016-25903
010-25881
Anti Sialyl-Tn Antigen, Monoclonal Antibody（MLS132）
016-25883
017-25891
013-25893
Anti Tn Antigen, Monoclonal Antibody（MLS128）
アイソタイプ
規 格
IgG3
糖鎖研究用
IgG3
糖鎖研究用
IgG3
糖鎖研究用
容 量
希望納入価格（円）
100μℓ
30,000
500μℓ
120,000
100μℓ
30,000
500μℓ
120,000
100μℓ
30,000
500μℓ
120,000
☞製品情報は P. 23 をご参照下さい。
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 …− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
4
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
echnical Report
蛍光組織染色が可能なシアリダーゼ蛍光プローブ
広島国際大学 薬学部 大坪 忠宗、池田 潔
静岡県立大学 薬学部 南 彰、高橋 忠伸、鈴木 隆
はじめに
哺乳動物組織においてシアリダーゼ
活性の高感度検出が可能となれば、神
経などの生理機能解明のみならず、大
腸がんの治療や診断などにおいて有用
である。シアリダーゼ活性を測定する
プローブとして、4- ニトロフェニル誘
導体（PNP-Neu5Ac）
、5- ブロモ -4- ク
ロロ -3- ヒドロキシインドール誘導体
図１．BTP 類の構造とシアリダーゼ基質
図２．BTP 類の蛍光特性
（A）異なる置換基を持つ BTP の固体状態
（B）O-グリコシル化誘導体の固体状態
（C）O-グリコシル化誘導体の溶液状態
（X-Neu5Ac）、4- メチルウンベリフェ
ロ ン 誘 導 体（4MU-Neu5Ac） が 市 販
さ れ て い る。PNP-Neu5Ac は、 ニ ト
ロフェノールが遊離するため、溶液全
体が黄色に染まり裸眼で確認できるこ
とから好んで使われる。しかし目立た
ない色であり、培養液などの背景色の
影響を受けやすく感度・精度が悪い。
他 方 X-Neu5Ac か ら 遊 離 し た X は、
空気酸化を受けて不溶性インジゴ色素
を生成し、組織に定着して青く染める
ことが可能である。両者はいずれも比
色に基づく手法であるため感度が低
く、哺乳類の組織に発現している低い
シアリダーゼ活性を測定するには不十
図３．BTP 類の紫外可視、蛍光スペクトル
分である。これに対して一般的な蛍光
も強く発光する。（３）高感度測定の
類を合成し、その内 BTP2 ∼ 4 につ
基質である 4MU-Neu5Ac は高感度で
ために、オンオフが可能。（４）励起
いて応用も含めて検討した 6, 7）。
あり、細胞破壊系でのシアリダーゼ活
光・自家吸収・細胞組織由来の蛍光な
シアリダーゼ検出
性測定にはよい基質であるが短所も多
どの影響を抑えるため、十分大きなス
・グリコシル化された BTP 類は固体・
い。例えば 4MU は溶液状態で発光す
トークスシフトを示す。（５）蛍光波
溶液を問わず弱い蛍光性しか示さな
る一方、高い水溶性のために拡散しや
長を選択できる。以上のような特性を
い。また、その蛍光も BTP 単独の
すく、組織染色には不向きである。ま
持つ蛍光色素として、2-benzothiazol-
ものに比べると短波長であった（図
た 4MU の発光特性は pH の影響を強
2-yl-phenol（BTP）類に着目した（図
2B, C）。Arthrobacter ureafaciens
く受けるために、蛍光強度が組織や培
1）。BTP は有機 EL 材料として研究
由来、または Clostridium perfringens
4）
養液の pH に依存する（pH : 7.79 以
された過去をもつ古典的な分子である
（C. welchii ） 由 来 シ ア リ ダ ー ゼ で
下では発光しにくい）。シアリダーゼ
が、構造的に水には極めて難溶である
BTP-Neu5Ac を 処 理 す る と、 蛍 光
検出用の高感度な化学発光基質 NA-
とともに pH の影響を受けにくく、固
強度が顕著に増加し、もとの BTP
Star も市販されており、インフルエ
体状態で蛍光性を示す（図 2A）。また
由来の蛍光が回復した 6）。
ンザウイルス検出に広く利用されてい
発光過程が一般の蛍光色素とは異なる
るが、発光半減期が約 5 分と短く、測
ため、150 nm 以上という大きなストー
などを、BTP-Neu5Ac
（10-1,000 μM）
定には特殊な機器が必要である。
クスシフトを示し（図 3）、フェノー
を 含 む 緩 衝 液（pH 7.3） 中 で イ ン
®
・Wistar 系雄性ラットの脳急性切片
こうした背景に基づき、以下のよう
ル性水酸基上の置換基の有無によって
キュベートし、組織染色を行った。
な特性を併せ持つ新規なシアリダーゼ
蛍光性のオンオフ制御ができる（図
脳白質領域に強い蛍光が観察された
蛍光プローブの開発を行った。
2B, C）。さらに目新しい骨格ではない
（ 図 4）。 こ れ ら の 蛍 光 は、 シ ア リ
ため、誘導体も多く知られていて発色
ダーゼ阻害剤（2- デオキシ -2, 3- デ
（１）培養液や組織染色液に拡散す
ることなく、細胞無固定でも蛍光組織
染色が可能。（２）低い pH 条件下で
5）
はかなり自由に選ぶことが出来る 。
様々な蛍光波長を示す BTP-Neu5Ac
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
ヒドロ -N- アセチルノイラミン酸、
DANA）を作用させることで消失
5
図４．ラット脳イメージング
A : BTP2-Neu5Ac, B : BTP3-Neu5Ac, C ∼ E : BTP4-Neu5Ac
図５．マウス大腸がん BTP4-Neu5Ac 染色
図６．ヒト大腸がん摘出標本 BTP4-Neu5Ac 染色
した 6）。
で反応後、紫外線照射によりウイル
スのシアリダーゼ活性のドットを検
BTP-Neu5Ac や BTP を 培 養 細 胞
（Colon26 NL-17）を同所移植して作
出した。さらにインフルエンザ A
（イヌ腎 MDCK 細胞）に添加し、細胞
製した大腸がんモデルマウスから 1
型ウイルス感染細胞を固定化せず
から流出する乳酸脱水素酵素量で細胞
週 間 後 に 大 腸 を 摘 出 し、BTP4-
に、培養上清を BTP3-Neu5Ac 含有
毒性を評価した結果、両者共に細胞毒
Neu5Ac で染色した結果、がん部位
培地に置換する簡便な操作のみで蛍
性は検出されなかった。
6）
が強く染色された（図 5） 。
光発色を確認した（図 7A）。ザナ
こ れ ら の 結 果 か ら BTP3-Neu5Ac
・手術によって摘出されたヒト大腸
ミビル添加により感染細胞の蛍光染
は、インフルエンザウイルス感染細胞
が ん 組 織（UICC-T 分 類、T3） を
色は阻害されたことから、この蛍光
のシアリダーゼ活性を検出する高感
BTP4-Neu5Ac で 染 色 し た と こ ろ、
発色はウイルスのシアリダーゼ活性
度・迅速・簡便な実験用基質として有
ヒト大腸がんにおいてもがん部位が
に特異的であることを確認した。ウ
用性が高い。さらに、ラットにおいて
強く染色された。がん部位は、ヘマ
イルス感染価の指標やウイルス株の
シアリダーゼ活性を高感度、かつ特異
トキシリン・エオジン染色によって
分離に利用されるプラークフォーミ
的に検出できるとともに、がんの検出
6）
。
確認した（図 6）
ングアッセイにおいて、ウイルスプ
プローブとして有用である。
・インフルエンザウイルスをドットブ
ロットした膜を BTP3-Neu5Ac 溶液
6
おわりに
・BALB/c マ ウ ス に 大 腸 が ん 細 胞
ラークの蛍光発色も確認した（図
7）
。
7B）
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
本プローブによって、組織学的にシ
アリダーゼ活性の詳細な組織分布を知
A インフルエンザ A 型ウイルス感染濃度（MOI）
0.01
0.1
1
B インフルエンザ A 型ウイルスのプラークフォーミングアッセイ
感染
非感染
図７．ウイルスプラークの蛍光発色
ることが可能となった。BTP は分子
Perkin Trans . 2 , 2111-2117（1984）.
サイズが比較的小さく、酵素の活性中
Yokochi, T., Horii, Y., Fukumoto, H.,
えられる。現在、他のウイルス検出法
の開発
やガラクトシダーゼ
9）
10）Takahashi, T., Otsubo, T., Ikeda, K., Minami,
Kanazawa, H., Shimizu, K., Ohata, K.,
心に比較的アクセスが容易であると考
8）
2245-2249（2013）.
６）Minami, A., Otsubo, T., Ieno, D., Ikeda, K.,
A. and Suzuki, T. : Biol. Pharm. Bull ., 37
（10）,1668-1673（2014）.
Taguchi, R., Ishibashi, S., Sai, S., Inada, M.,
Takahashi, T., Oku, N. and Suzuki, T. :
やア
PLOS ONE , 9, e81941（2014）.
ルカリフォスファターゼ 10） をはじめ
７）Kurebayashi, Y., Takahashi, T., Otsubo, T.,
とする他の分解酵素用の蛍光プローブ
Ikeda, K., Takahashi, S., Takano, M.,
の開発も行っている。
Agarikuchi, T., Matsuda, Y., Minami, A.,
Kanazawa, H., Uchida, Y., Saito, T., Kawaoka,
Y., Yamada, T., Kawamori, F., Thomson, R.,
〔参考文献〕
von Itzstein, M. and Suzuki, T. : Sci. Rep ., 4,
4877（2014）.
１）Miyagi, T., Takahashi, K., Moriya, S., Hata, K.,
Yamamoto, K., Wada, T., Yamaguchi, K.
８）（a）Takano, M., Takahashi, T., Agarikuchi, T.,
and Shiozaki, K. : Adv. Exp. Med. Biol ., 749,
Kurebayashi, Y., Minami, A., Otsubo, T.,
257-267（2012）.
Ikeda, K., Kanazawa, H. and Suzuki, T. :
２）Miyagi, T. and Yamaguchi, K. : Glycobiology ,
Virology , 464-465, 206-212 （2014）.（b）
Takano, M., Takahashi, T., Agarikuchi, T.,
22, 880-896（2012）.
３）Nomura, H., Tamada, Y., Miyagi, T., Suzuki, A.,
Kurebayashi, Y., Minami, A., Otsubo, T.,
Taira, M., Suzuki, N., Susumu, N., Irimura, T.
Ikeda, K. and Suzuki, T. : J. Virol. Methods ,
and Aoki, D. : Oncol. Res ., 16, 289-297
209, 136-142 （2014）.（c） Takahashi, T.,
Takano, M., Kurebayashi, Y., Agarikuchi, T.,
（2006）.
４）（a）Yang, Y. and Hamaguchi, K. : J. Biochem .,
Suzuki, C., Fukushima, K., Takahashi, S.,
87, 1003（1980）
（b）
.
Graber, M. L., Dilillo, D. C.,
Otsubo, T., Ikeda, K., Minami, A. and Suzuki,
T. : Biol. Pharm. Bull. , 38, 1214-1219（2015）.
Friedman, B. L. and Pastoriza-Munoz, E. P. :
Anal. Biochem ., 156, 202（1986）.
９）Otsubo, T., Minami, A., Fujii, H., Taguchi, R.,
５）Anthony, K., Brown, R. G., Hepworth, J. D.,
Takahashi, T., Suzuki, T., Teraoka, F. and
Hodgson, K. W. and May, B. : J. Chem. Soc.
Ikeda, K. : Bioorg. Med. Chem. Lett ., 23,
蛍光プローブ
蛍光光度法を用いて生体等の局所環
境及びその変化を検出する物質。
シアリダーゼ
糖鎖末端からシアル酸を脱離させる
糖加水分解酵素の一種であり、イン
フルエンザウイルスの感染、記憶や
シナプス可塑性などの神経機能に関
与 す る。ま た、細 胞 の 分 化・成 長・
アポトーシスに関与することが知ら
れているとともに、大腸、腎臓、前
立腺、卵巣などのがん細胞では、シ
アリダーゼが異常に高発現すること
が報告されている 1-3）。
ザナミビル
インフルエンザウイルスのシアリ
ダーゼ特異的阻害剤。
P roducts
シアリダーゼの蛍光基質
BTP3-Neu5Ac-Na
コード No.
024-18011
020-18013
品 名
BTP3-Neu5Ac-Na
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 規 格
細胞生物学用
容 量
1mg
5mg
希望納入価格（円）
11,000
30,000
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
7
echnical Report
反応性代謝物検出のための Presep® XenoScreenTM
96well Plate を用いた試料前処理について
和光純薬工業株式会社 試薬化成品研究所 須藤 勇紀
医薬品は通常、動物実験や臨床試験
ベーションし、生成した反応性代謝物
1 mmol/ℓとなるように調液します。
を経て有効性と安全性が確認された
をトラッピング試薬付加体として捕捉
前処理では 96well plate 用の吸引マニ
後に、当局に承認された物質のみが
し、LC/MS などにより測定する方法
ホールドを用いて減圧下で処理しまし
製造・販売されます。臨床試験、上
です 4, 5）。一般にトラッピング試薬と
た。LC/MS 条件を表 1 に示します。
市後に発症する副作用は全副作用の
してグルタチオン（GSH）がよく使用
３．結果
約 80 % を占めますが、それら副作用
されます 6, 7）。しかし、グルタチオン
TIC ク ロ マ ト グ ラ ム の 比 較 を 図 2
は薬理作用から予測が可能であり、通
エチルエステル体（GSHEE）の方が
に示します。保持時間 5.2 分付近にブ
常、用量を減量することにより回避
検出感度良く分析できるとの報告もあ
ランク溶液と被験薬物溶液とのピーク
1）
8, 9）
することが可能です 。一方で特異体
り
質性薬物毒性（IDT：Idiosyncratic
ステル安定同位体置換体（GSHEE-d5）
drug toxicity）と呼ばれ、動物実験や
を併用することで選択性を向上させ
示 し ま す。 ク ロ ザ ピ ン の 代 謝 物 +
臨床試験では発見されることがほとん
ることができます 4, 10）。今回、トラッ
GSHEE 及び GSHEE-d5 の付加体は H
どなく、医薬品として上市後に多くの
ピ ン グ 試 験 に 必 要 な Buffer 類 や
体 が m/z：660、D 体 が m/z：665 で
患者に使用されて初めて発現する重篤
GSHEE と GSHEE-d5 が 1 つのチュー
検出されるとの報告 11） がありますの
な副作用があります 1）。IDT の発生に
ブに小分けされた迅速分析が可能な
でこの結果は一致します。このように
ついてはいくつかの仮説が提唱されて
キット XenoScreenTM GSH-EE に合わ
Presep® XenoScreenTM 96well Plate
いますがその中でも医薬品の反応性代
せて、試料前処理用プレート Presep®
を利用して反応性代謝物を検出するこ
謝物が大きな要因のひとつであると
XenoScreenTM 96well Plate の 使 用 例
とができます。次に参考データとして
考えられ、その評価が重要とされてい
を紹介します。
反応性代謝物 11） が既知であるアセト
２．実験方法について
アミノフェン、オメプラゾール、ジク
ます
2 , 3）
。
１．トラッピング試験について
、さらにグルタチオンエチルエ
に違いがあることが分かります。保持
時間 5.2 分の MS スペクトルを図 3 に
反応性代謝物の発生が既知の薬物ク
ロフェナク、チクロピジンを SIM モー
トラッピング試験は肝ミクロソーム
ロザピン 11）を対象に Q1 Scan モード
ド で 分 析 し ま し た。 薬 物 4 種 類 の
などの酵素源を医薬品候補化合物と
による分析を行いました。実験フロー
SIM クロマトグラムを図 4 に示しま
トラッピング試薬共存下でインキュ
を図 1 に示します。被験薬物溶液は
す。クロザピンと同様に m/z 差 5 の
〈試験液の調製〉
クロザピン 6.5 mg+ ジメチルスルホキシド 500 μℓ
+ アセトニトリル 1,500 μℓ
上記の溶液 1 mℓをアセトニトリルで 10 mℓにメスアップ
被験薬物溶液
ジメチルスルホキシド 500 μℓ
+ アセトニトリル 1,500 μℓ
上記の溶液 1 mℓをアセトニトリルで 10 mℓにメスアップ
〈反応液の調製〉
TM
XenoScreen GSH-EE に超純水
840 μℓを分注する。
20 mg/mℓ肝ミクロソームを 50 μℓ分注する。
〈前処理〉
反応液に 50 mmol/ℓのジチオトレイトール水溶
液を 50 μℓボルテックスで撹拌、氷冷する。
反応液を 10,000×g、4 ℃で 10 分間遠心
分離し、上清を試験液とする。
®
TM
Presep XenoScreen 96well Plate の使用す
るwell にメタノール、超純水を 1 mℓずつ通液する。
試験液 1 mℓを通液する。
超純水、5 % メタノールを 1 mℓずつ通液し、
well を洗浄する。
被験薬物溶液またはブランク溶液を 10 μℓ
分注し、プレインキュベートまで氷冷する。
メタノールを 1 mℓ通液し、測定試料とする。
反応液を 37 ℃、5 分間プレインキュベートする。
反応液に 20 mmol/ℓのβ-NADPH 水溶液を
100 μℓ加え、37 ℃、60 分間インキュベートする。
ブランク溶液
図１．実験フロー
表１．LC/MS 条件
8
機器
カラム
移動相A
移動相B
Prominence LC-20A（島津製作所）
Wakopak® Ultra C18-3 Φ 2.0 mm × 50 mm
0.05 % ぎ酸水溶液
0.05 % ぎ酸 - アセトニトリル溶液
グラジエント条件
0min.（A：B=98：2）→10min.
（10：90）→15min.（10：90）
→15.01min.
（98：2）→20min.
（98：2）
流量
カラム温度
注入量
0.2 mℓ/min.
40 ℃
5μℓ
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
機器
イオン化
測定モード
Curtain gas
Ion Spray Voltage
Temperature
Ion Source gas 1
Ion Source gas 2
3200 QTRAP（SCIEX 社）
ESI positive
Q1 Scan
20
5500
300
70
60
Intensity, cps
Intensity, cps
対象：アセトアミノフェン
1.00×108
9.50×107
9.00×107
8.50×107
8.00×107
7.50×107
7.00×107
6.50×107
6.00×107
5.50×107
5.00×107
4.50×107
4.00×107
3.50×107
3.00×107
2.50×107
2.00×107
1.50×107
1.00×107
5.00×106
0.00
1.00×104
ブランク溶液
ブランク溶液
H体 m/z : 485
5000.00
0.00
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
1.00×104
5000.00
0.00
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
5.00×104
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
9.8×104
1
2
3
4
5
6
7
8
9
11
10
Time, min
12
13
14
15
16
17
18
19
16
16
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
被験薬物溶液
2
4
6
10
8
12
14
Time, min
16
3933
0
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
2.0×104
2
4
6
10
8
12
14
Time, min
16
5.1×104
20
18
20
18
20
18
20
オメプラゾール溶液
D体 m/z : 684
4.0×104
2.0×104
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
18
20
対象：ジクロフェナク
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
Time, min
12
13
14
15
16
17
18
ブランク溶液
H体 m/z : 611
4000
19
2000
0
図２．TIC クロマトグラムの比較
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
1000
0
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
2.5×10
2.0×104
2.0×105
0.0
1.5×105
1.0×105
2
4
6
8
10
12
14
16
660.5
661.0 661.5 662.0
662.5
663.0
663.5
664.0
664.5
665.0
665.5
666.0
666.5 667.0
667.5
668.0
668.5
20
18
20
ジクロフェナク溶液
D体 m/z : 616
5.0×10
660.0
18
Time, min
3.8×104
4
659.5
20
ジクロフェナク溶液
H体 m/z : 611
4.0×104
5
18
ブランク溶液
D体 m/z : 616
2000
2.9×105
Intensity, …
18
オメプラゾール溶液
H体 m/z : 679
4.0×104
0.0
20
ブランク溶液
D体 m/z : 684
5.9×104
0.0
18
ブランク溶液
H体 m/z : 679
4000
0
20
対象：オメプラゾール
5667
2000
1.20×108
1.15×108
1.10×108
1.05×108
1.00×108
9.50×107
9.00×107
8.50×107
8.00×107
7.50×107
7.00×107
6.50×107
6.00×107
5.50×107
5.00×107
4.50×107
4.00×107
3.50×107
3.00×107
2.50×107
2.00×107
1.50×107
1.00×107
5.00×106
0.00
18
アセトアミノフェン溶液
D体 m/z : 490
5.0×104
0.00
20
アセトアミノフェン溶液
H体 m/z : 485
1.00×105
0.00
18
ブランク溶液
D体 m/z : 490
669.0
0.0
図３．保持時間 5.2 分の MS スペクトル
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
18
20
対象：チクロピジン
3.3×104
反応性代謝物 + GSHEE 及び GSHEE-d5
0.0
の付加体ピークを確認することができ
ブランク溶液
H体 m/z : 631
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
3533
ました。今回の検討結果が反応性代謝
0
物の分析に貢献できれば幸いです。
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
3.2×104
0.0
〔参考文献〕
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
18
20
18
20
チクロピジン溶液
D体 m/z : 636
5000
0
20
チクロピジン溶液
H体 m/z : 631
7667
１）山田久陽 他：日本薬理学雑誌，127（6），473
（2006）.
２）大 江 知 之： 日 本 薬 理 学 雑 誌，134（6），338
（2009）.
３）Naito, S. et al . : J. Toxicol. Sci ., 32（4）, 329
（2007）.
４）山岡俊和：和光純薬時報，84（1），5（2016）.
５）Ramirez-Molina, C. et al . : Rapid Commun.
Mass Spectrom ., 23（22）,3501（2009）.
６）Yan, Z. et al . : Anal. Chem ., 76（23）, 6835
（2004）.
18
ブランク溶液
D体 m/z : 636
2
4
6
8
10
12
14
Time, min
16
18
20
図４．薬物 4 種類の SIM クロマトグラム
７）Mutlib, A. et al . : Rapid Commun. Mass
Spectrom ., 19（23）,3482（2005）.
８）Soglia, J. R. et al . : J. Pharm. Biomed. Anal .,
36（1）,105（2004）.
９）Wen, B. et al . : J. Mass Spectrom ., 44（1）, 90
（2009）.
10）Yamaoka, T. et al . : J. Pharmacol. Toxicol.
Methods , 76, 83（2015）.
11）山岡俊知：特願 2011-113846，国際公開番号
WO2012/160798.
XenoScreenTM
コード No.
244-00961
292-35311
品 名
XenoScreenTM GSH-EE（Tube type）
Presep® XenoScreenTM 96well Plate
規 格
薬物動態研究用
薬物動態研究用
容 量
12 本
1個
希望納入価格（円）
24,000
37,000
詳しくは、当社 HP（http://www.wako-chem.co.jp/siyaku/product/analysis/XenoScreenTubetype/index.htm）
をご参照下さい。
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 …− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
9
ew Products
0価パラジウム
高品位・高活性触媒
Johnson Matthey 社製 カップリング反応用貴金属触媒
この度、ジョンソン・マッセイ・ジャパン・インコーポレ
イテッドの協力のもと、同社の高活性な貴金属触媒の取扱
いを始めました。
No.
NEW
NEW
NEW
NEW
NEW
今回、 テ ト ラ キ ス
（トリフェニルホスフィン）パ ラジウ
NEW
NEW
ム（0）のような汎用的なパラジウム触媒の他に Buchwald
No.
②
NEW
O
O
NEW
Pd 2
Pd
NEW
3
2
C34H28O2Pd＝575.00
CAS No. 32005-36-0
NEW
C51H42O3Pd2＝915.72
CAS No. 51364-51-3
④
Pd
P
⑤
PPh3
Cl
Ph
P Ph
PdCl2
Fe
P Ph
Ph
PPh3
Pd
Cl
4
NEW
CH2Cl2
C34H28Cl2FeP2Pd・
CH2Cl2＝816.64
CAS No. 95464-05-4
⑥
⑧
Pd
Cl
Pd
Cl
C6H10Cl2Pd2＝365.89
CAS No. 12012-95-2
O
Pd2+
2
⑨
Cl
P
Cl
Pd
P
NEW
NEW
NEW
C32H56Cl2N2P2Pd＝708.07
CAS No. 887919-35-9
有機合成用
Tris（dibenzylideneacetone）
dipalladium（0）
【Pd（dba）
2
3】
有機合成用
Tetrakis（triphenylphosphine）
palladium（0）
【Pd（PPh3）4】
有機合成用
コード No.
品 名
⑩
1g
5g
1g
5g
1g
5g
25g
9,000
28,000
9,500
32,000
6,000
17,000
65,000
容量 希望納入価格（円）
規 格
041-34001 trans -Dichlorobis
4 047-34003 （triphenylphosphine）palladium
049-34002 （Ⅱ）
021-18881 [1,1'-Bis（diphenylphosphino）
ferrocene]dichloropalladium
（Ⅱ）, Dichloromethane Adduct
027-18883 【[Pd（dppf）Cl ]・CH Cl 】
2
2 2
045-34021 Di-μ-chlorobis[（η-allyl）
6
041-34023 palladium（Ⅱ）]
164-27571
7 160-27573 Palladium（Ⅱ）Acetate
162-27572
048-34011 Dichlorobis[di-t -butyl
（ p -dimethylaminophenyl）
8 044-34013
phosphino]palladium（Ⅱ）
042-34014 【（Amphos）2PdCl2】
No.
NEW
NEW
NEW
NEW
P
OMe
容量 希望納入価格（円）
有機合成用
有機合成用
1g
5g
25g
6,000
18,000
75,000
1g
8,500
5g
28,000
1g
5g
1g
有機合成用 5g
25g
250mg
14,000
50,000
8,500
27,000
照 会
10,000
有機合成用
1g
27,000
5g
照 会
有機合成用
ホスフィン
N
-Bu
-Bu
-Bu -Bu
C4H6O4Pd＝224.51
CAS No. 3375-31-3
NEW
NEW
N
O
NEW
NEW
C72H60P4Pd＝1155.56 C36H30Cl2P2Pd＝701.90
CAS No. 14221-01-3 CAS No. 13965-03-2
⑦
規 格
5
NEW
③
品 名
Bis（dibenzylideneacetone）
palladium（0）
【Pd（dba）2】
2価パラジウム
Ligand など主要 10 品目を取り揃えています。
①
コード No.
024-18871
1
020-18873
202-20221
2
208-20223
209-20231
3 205-20233
207-20232
-Pr P
コード No.
品 名
規 格
046-34051 2-Dicyclohexylphosphino-2',6'9
042-34053 dimethoxybiphenyl【S-Phos】
043-34061 2-（Dicyclohexylphosphino）-2',
10
4',6'-triisopropyl-1,1'-biphenyl
049-34063 【X-Phos】
容量 希望納入価格（円）
有機合成用
有機合成用
1g
5g
12,000
40,000
1g
9,500
5g
34,000
不斉合成酵素触媒
-Pr
OMe
-Pr
C26H35O2P＝410.53
CAS No. 657408-07-6
C33H49P＝476.72
CAS No. 564483-18-7
アマノリパーゼ
生体触媒の利用は、「不要なものを出さない」
、「不要な
ものを作らない」というグリーンケミストリーの観点から
反 応 例
注目される手法であり、光学活性な化合物を容易に得るた
めの便利な手法の一つです。本品は、天野エンザイム社製
不斉酵素触媒のリパーゼ、及びアシラーゼです。活性を保
証していますので、安定した品質でご使用いただけます。
NEW
NEW
NEW
NEW
NEW
NEW
NEW
〔参考文献〕
NEW
1）Gatland, A. E., Pilgrim, B. S., Procopiou, P. A. and Donohoe, T. J. :
Angew. Chem. Int. Ed ., 53 , 14555（2014）.
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 NEW
NEW
コード No.
品 名
015-26311
011-26313
125-06541
121-06543
129-06561
125-06563
122-06551
128-06553
121-06521
127-06523
D-Aminoacylase
Amano
Lipase AK
Amano
Source
E. coli
≧5.0
munits/g
有機合成用
Pseudomonas ≧20,000
有機合成用
fluorescens FIP units/g
Lipase AS
Amano
Aspergillus
niger
≧12,000
有機合成用
units/g
Lipase AYS
Amano
Candida
cylindracea
≧30,000
有機合成用
units/g
Lipase G Amano Penicillium
50
camembertii
≧50,000
有機合成用
units/g
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
10
Activity 規格/メーカー
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
容量
希望納入価格（円）
10munits
50munits
10g
50g
10g
50g
10g
50g
10g
50g
13,000
32,000
6,500
18,500
6,000
13,000
4,500
10,500
7,500
16,000
［次頁に続く］
ew Products
NEW
NEW
NEW
NEW
コード No.
品 名
Source
328-58341
324-58343
128-06531
124-06533
Lipase M Amano
10
Mucor
javanicus
Lipase PS
Amano SD
Lipase PS
127-06501 IM Amano,
Immobilized on
125-06502 Diatomaceous
Earth
Activity 規格/メーカー
ワコー
ケミカル
−
Burkholderia ≧23,000
有機合成用
cepacia FIP units/g
Burkholderia
cepacia
≧500
units/g
有機合成用
局方一般試験法用
容量
希望納入価格（円）
10g
50g
10g
50g
3,300
7,000
5,500
14,000
当社では国内試薬メーカーで初めて局方一般試験法用の
5g
5,000
容量分析用標準液について（独）製品評価技術基盤機構・
25g
12,000
技術基盤機構認定制度）認定プログラムによって、標準物
容量分析用標準液
認定センター（IAJapan）が運営する ASNITE（製品評価
質生産者認定を取得し、認証標準物質の供給を開始しまし
た。本品は、日本薬局方に準じた調製及び標定を行ってい
薄層クロマトグラフ用
ます。
シリカゲルプレート
本品購入者には、不確かさが付与された認定シンボルを
付した認証書を発行することができます（認証書発行に際
ご好評頂いています薄層クロマトグラフィー製品に分取
しましてお客様の郵便番号、住所、宛先が必要となりま
用 PLC プレートを追加しました。
す）。
分取・精製用
■ PLCプレート-ワコー
特 長
シリカゲル 70PF254 PLC プレート - ワコーは、分取用の
●日本薬局方に準じた調製及び標定を行い、濃度を保証
PLC プレートです。分取したい試料の量によって使い分け
●認定シンボルを付した認証書を発行
ができる層厚 1mm と 0.75mm の 2 種類のラインアップです。
認証書内容…特性値（ファクター）、不確かさ、保証期
限、測定年月日、発行日
分析・分取用
■ TLCプレート-ワコー
シリカゲル TLC プレート - ワコーは、細孔径 7nm（70 Å）
の多孔質シリカゲルをガラス板上に均一に塗布した TLC
プ レ ー ト で す。 蛍 光 物 質 を 添 加 し て る 70F254 タ イ プ、
70FM タイプ、蛍光物質不含のシリカゲル 70 タイプの各
種取扱いしています。
コード No.
近日
発売
層厚
規 格
Silicagel 70 PF254
195-12871 Plate-Wako
品 名
0.75mm
10枚
薄層クロマト
15,000
グラフ用 （20cm×20cm）
希望納入価格（円）
Silicagel 70 F254
197-18193 PLC Plate-Wako
1mm
10枚
薄層クロマト
照 会
グラフ用 （20cm×20cm）
容 量
199-17813
10枚
（5cm×10cm）
193-17811
25枚
16,800
薄層クロマト （20cm×20cm）
グラフ用
100枚
（5cm×20cm） 22,500
197-17814
Silicagel 70 F254
TLC Plate-Wako
193-17816
0.25mm
196-17884
Silicagel 70 FM TLC
198-17883 Plate-Wako
（広領域紫外線250400nm対応）
192-17881
0.25mm
…2 ∼ 10℃保存
容量 希望納入価格（円）
2,200
080-10035 1mol/ℓ Hydrochloric Acid ＊
局方一般試験法用 500mℓ
1,800
＊
局方一般試験法用 500mℓ
2,200
084-10055 0.2mol/ℓ Hydrochloric Acid ＊
2,200
200枚
（5cm×10cm） 25,500
局方一般試験法用 500mℓ
082-10095 0.1mol/ℓ Hydrochloric Acid ＊
局方一般試験法用 500mℓ
1,800
10枚
（5cm×10cm）
085-10105 0.05mol/ℓ Hydrochloric Acid
2,200
3,000
局方一般試験法用 500mℓ
196-17605 0.5mol/ℓ Sulfuric Acid ＊
局方一般試験法用 500mℓ
2,200
100枚
薄層クロマト
24,500
グラフ用 （5cm×20cm）
190-17625 0.25mol/ℓ Sulfuric Acid
＊
局方一般試験法用 500mℓ
2,200
193-17615 0.05mol/ℓ Sulfuric Acid ＊
局方一般試験法用 500mℓ
1,800
NEW
197-18115 0.1mol/ℓ Silver Nitrate Solution
局方一般試験法用 500mℓ
4,300
NEW
0.1mol/ℓ Sodium Thiosulfate
198-17925
Solution
局方一般試験法用 500mℓ
2,100
NEW
191-17915 1mol/ℓ Sodium Hydroxide Solution 局方一般試験法用 500mℓ
1,900
NEW
0.1mol/ℓ Sodium Hydroxide
194-17905
Solution
1,900
2,700
薄層クロマト
100枚
グラフ用 （5cm×20cm） 22,500
25枚
（20cm×20cm） 16,000
195-17871
規 格
局方一般試験法用 500mℓ
10枚
（5cm×10cm）
Silicagel 70 TLC
191-17873 Plate-Wako
品 名
083-10025 2mol/ℓ Hydrochloric Acid ＊
25枚
（20cm×20cm） 19,500
199-17874
コード No.
2,900
…− 20℃保存 087-10045 0.5mol/ℓ Hydrochloric Acid
局方一般試験法用 500mℓ
＊認証標準物質
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
11
ew Products
農薬混合標準液 新製品
水質管理目標設定項目対応 農薬混合標準液
平成 25 年 3 月 28 日の通知で水質管理目標設定項目に含
まれる農薬類の分類見直しが行われ、120 種の農薬が対象
農薬リスト掲載農薬類として分類されました。この内、標
準検査法が設定されていなかった農薬類について、平成
27 年 3 月 25 日に新規試験法が告示されました。新規に告
別添方法21対象成分
■ 農薬混合標準液 水質-7（イミノクタジン, ジクワッ
ト, パラコート各20μg/mℓ水溶液）
混合成分
イミノクタジン、ジクワット、パラコート
分 析 例
■ LC/MS による分析
示された試験法の内、「別添方法 20 の 2」「別添方法 21」
1. イミノクタジン
2. ジクワット
3. パラコート
1
及び「別添方法 22」に対応した農薬混合標準液を販売し
ています。既存試験法に対応した製品と併せて、ぜひご活
用下さい。
2
別添方法20の2対象成分※1
■ 農薬混合標準液 水質-6（フェリムゾン※2, ピラクロニ
ル, ネライストキシン各20μg/mℓメタノール溶液）
混合成分
フェリムゾン、ピラクロニル、ネライストキシン
分 析 例
■ LC/MS による分析
1. ネライストキシン
2. ピラクロニル
3.（ ）
-フェリムゾン
4.（ ）
-フェリムゾン
2
3
4
5
装置
カラム
カラム温度
溶離液
0
5
10
装置
カラム
カラム温度
溶離液
：LC/MS-8040（島津製作所製）
：Wakosil-Ⅱ 5SIL-AQ 2.0mmΦ×15cm
：40℃
：ぎ酸アンモニウム緩衝液※3 70
+ アセトニトリル 30（体積比）
流量
：0.4mℓ/min.
検出器
：質量検出器
イオン化法 ：ESI 法
※３…ぎ酸アンモニウム 9.45g + 900mℓ水 + ぎ酸（→ pH 3.6）+
水（→ 1ℓ）
本品を測り取る際の器具及び容器は、ポリテトラフルオロエチレ
ンまたはポリプロピレン製のものをご使用下さい。
〈Presep® RPP-WCX を用いた固相抽出条件〉
10
15
min.
：LC/MS-8040（島津製作所製）
：Wakosil-Ⅱ 3C18HG 2.0mmΦ×15cm
：40℃
：A）5mmol/ℓ酢酸アンモニウム溶液
B）5mmol/ℓ酢酸アンモニウム - メタノール溶液
時間（分）
0 ∼ 25
25 ∼ 30
B（％）
50 ∼ 70
70
流量
：0.2mℓ/min.
検出器
：質量検出器
イオン化法 ：ESI 法
※１…本品成分以外の別添方法 20 の 2 対象成分は 63 種農薬混
合標準液 水質 -4［コード No. 168-26011、164-26013］
をご使用下さい。
※２…フェリムゾンは E 体（Peak No.3）と Z 体（Peak No.4）
を 合 算 で 20μg/mℓ 含 有 し て い ま す。E 体 と Z 体 は 各
10μg/mℓで製造していますが、比率は保管中に変化する
場合があります。
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 固相カラムのコンディショニング
①メタノール 5mℓ ②超純水 10mℓ
↓
サンプル通液 50mℓ 各農薬として 1mg/ℓ
（チオ硫酸ナトリウム約 20mg/ℓ）
↓
水 3mℓを用いて洗浄
↓
メタノール 1mℓを用いて洗浄
↓
10％ぎ酸アセトニトリル 3mℓを用いて溶出
↓
LC/MS/MS
〈添加回収率（％）〉
イミノクタジン
80.5
ジクワット
99.8
パラコート
88.5
Presep® RPP-WCX を用いた水道水中の上記農薬に関する
分析例の詳細は「和光純薬時報 Vol.83 No.4（2015）.」テク
ニカルレポートにてご確認いただけます。
当社 HP →ジャーナル→和光純薬時報→ Vol.83 No.4（2015.1）
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
12
min.
■ イミノクタジン、ジクワット、パラコートの固相抽出
1
0
3
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
［次頁に続く］
ew Products
別添方法22対象成分
■ 農薬混合標準液 水質-8（グリホサート, グルホシネー
ト, AMPA各20μg/mℓ水溶液）
※５…四ほう酸ナトリウム 十 水和物 5g + 水 80mℓ→水浴中加熱
溶解→冷却 + 水（→ 100mℓ）
※６…クロロぎ酸 9- フルオレニルメチル 0.1g + アセトニトリル
（→ 100mℓ）
※７…5mmol/ℓ酢酸アンモニウム溶液 60 + アセトニトリル 40
（体積比）
本製品を測り取る際の器具及び容器は、ポリテトラフルオロエチ
レンまたはポリプロピレン製のものをご使用下さい。
混合成分
グリホサート、グルホシネート、アミノメチルりん酸
（AMPA）
分 析 例
コード No.
■ LC/MS による分析※ 4
NEW
1. グリホサート
2. グルホシネート
3. アミノメチルりん酸
2
1
NEW
品 名
対応試験法
規格
容量
希望納入価格（円）
農薬混合標準液 水質-6
1mℓ×5A 18,000
168-27611 （フェリムゾン, ピラクロ
別添方法 残留農薬
ニル, ネライストキシン各 20の2 試験用
1mℓ
9,000
164-27613 20μg/mℓメタノール溶液）
危
3
NEW
NEW
NEW
NEW
1mℓ×5
162-27631 農薬混合標準液 水質-7
（イミノクタジン, ジクワット, 別添方法 残留農薬
パラコート各20μg/mℓ水溶
21
試験用
1mℓ
168-27633 液）
照 会
169-27641 農薬混合標準液 水質-8
（グリホサート, グルホシ
ネート, AMPA各20μg/mℓ
165-27643 水溶液）
1mℓ×5
20,000
1mℓ
10,000
容量
希望納入価格（円）
別添方法 残留農薬
22
試験用
照 会
関連商品
0
装置
カラム
カラム温度
溶離液
5
10
min.
コード No.
：LC/MS-8040（島津製作所製）
：Wakopak® Ultra C18-5 4.6mmΦ×15cm
：40℃
：A）5mmol/ℓ酢酸アンモニウム溶液
B）アセトニトリル
時間（分）
0 ∼ 15
対応試験法
規格
163-23881 15種農薬混合標準液 水質-2 別添方法 残留農薬 1mℓ×5A 30,000
（各20μg/mℓアセトン溶液）
5
試験用
1mℓ 10,000
169-23883
危
流量
：0.5mℓ/min.
検出器
：質量検出器
イオン化法 ：ESI 法
※４…分析サンプルは前処理として下記条件で誘導体化をしています。
〈Presep®-C C18（ODS）
（Short）を用いたサンプル調製例〉
標準液 20μℓ+ 水（→20mℓ）
↓
ほう酸溶液※5 1mℓ+ クロロぎ酸
9- フルオレニルメチル溶液※6 2mℓ
↓←50℃、20min. 加熱
室温冷却 + 2% りん酸 1.2mℓ
↓
サンプル
160-23891 28種農薬混合標準液 水質-3
（各20μg/mℓアセトニトリ
166-23893 ル溶液）
危
63種農薬混合標準液
水質-4
164-26013
（各20μg/mℓアセトニトリ
168-26011 ル溶液）
危
48種農薬混合標準液
水質-5
167-26003
（各20μg/mℓアセトン溶液）
161-26001
危
別添方法 残留農薬 1mℓ×5A 35,000
18
試験用
1mℓ 11,000
別添方法 残留農薬 1mℓ×5A 60,000
20の2 試験用
1mℓ 20,000
別添方法 残留農薬 1mℓ×5A 45,000
5の2
試験用
1mℓ 18,000
前処理カラム
コード No.
品 名
規 格
容量
Presep® RPP-WCX
292-34831
試料前処理用 10本×10
（60mg/3mℓ）
®
（Short） 試料前処理用 10個×5
297-47451 Presep -C C18（ODS）
希望納入価格（円）
45,000
25,000
分析用カラム
固相カラムコンディショニング
①アセトニトリル 3mℓ ②水 3mℓ
↓
サンプル通液 毎分 2 ∼ 4mℓ
↓
5mmol/ℓ酢酸アンモニウム 1mℓを用いて洗浄
↓
酢酸アンモニウム - アセトニトリル溶液※7 6mℓを用いて溶出
↓
溶出液 + 酢酸アンモニウム アセトニトリル溶液（→7mℓ）+ 水（→10mℓ）
↓
LC/MS
…− 20℃保存 品 名
164-26633 66種農薬混合標準液 水質-1-2 別添方法 残留農薬 1mℓ×5A 59,000
（各20μg/mℓアセトン溶液）
5
試験用
1mℓ 19,000
168-26631
危
B（％）
30 ∼ 100
…2 ∼ 10℃保存
混合標準液
コード No.
品 名
タイプ
容量
希望納入価格（円）
237-50243
231-50241
238-63963
232-63961
Wakopak® Wakosil-Ⅱ
3C18HG Φ2.0mm×150mm
W
D
W
D
1本
1本
1本
1本
47,000
47,000
41,000
41,000
W
1本
48,000
Wakopak® Wakosil-Ⅱ 5SILAQ Φ2.0mm×150mm
Wakopak® Ultra C18-5
235-02651
Φ4.6mm×150mm
各種混合標準液の成分などの詳細は siyaku.com でご確認
いただけます。
注：記載されている測定条件、チャートなどは参考データで
あり、農薬混合標準液を保証するデータではありません。
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
13
ew Products
■ピンドン標準品
品目追加
化学名：2（Trimethylacetyl）
-1,3indandione
別 名：Pival
含量
（HPLC）
：98.0% 以上
外 観：黄色、結晶性粉末∼粉末
備 考：殺鼠剤
ポジティブリスト関連標準品
ポジティブリスト関連の残留農薬試験用標準品及び HPLC
用動物用医薬品標準品の追加品目をご紹介します。品目は順
O
O
CH3
O H3C
次追加しています。
CH3
C14H14O3＝230.26
CAS No. 83-26-1
■ 農薬標準品
■シアントラニリプロール標準品
■ピフルブミド標準品
化学名：3-Bromo-1（3-chloro-2-pyridyl）
4’
-cyano-2’
-methyl-6’
（methylcarbamoyl）
pyrazole5-carboxanilide
別 名：Cyazypyr
含量
（qNMR）
：98.0% 以上
外 観：白色、結晶性粉末∼粉末
備 考：殺虫剤
化学名：3’
-Isobutyl-N -isobutyryl-1,3,5trimethyl-4’
-[2,2,2-trifluoro-1methoxy-1（trifluoromethyl）
ethyl]
N
pyrazole-4-carboxanilide
H 3C N
含量
（qNMR）
：98.0% 以上
外 観：白色∼わずかにうすい黄褐色、結晶
性粉末∼粉末
H3C
備 考：ダニ駆除剤
Br
N
Cl
N
O
NH
N
NH
O
CH3
CH3
CH3
O
H3C
CH3
CH3
N
CF3
O
OCH3
CF3
CH3
C25H31F6N3O3＝535.52
CAS No. 926914-55-8
CN
C19H14BrClN6O2＝473.71
CAS No. 736994-63-1
■ピフルブミド代謝産物 B 標準品
化学名：3’
-Isobutyl -1,3,5-trimethyl-4’
[2,2,2-trifluoro-1-methoxy-1（trifluoromethyl）
ethyl]pyrazoleN
4-carboxanilide
H 3C N
含量
（qNMR）
：98.0% 以上
外 観：白色∼わずかにうすい黄褐色、結晶
H3C
性粉末∼粉末
■ ハロキシホップメチル標準品
化学名：Methyl 2-{4-{[3-Chloro-5（trifluoromethyl）
-2-pyridinyl]oxy}
phenoxy}propanoate
別 名：Verdict
含量
（qNMR）
：98.0% 以上
外 観：白色、結晶性粉末∼粉末又は塊
備 考：除草剤
CH3
N
O CH
O
F3C
O
O
CH3
Cl
HO
O
O
HO
N
残留農薬
試験用
100mg
30,000
Haloxyfop-methyl Standard
残留農薬
試験用
100mg
14,000
031-24671 Cyantraniliprole Standard
NEW
088-10271
NEW
132-18561
Maleic Hydrazide-O -βglucoside Standard
残留農薬
試験用
100mg
25,000
NEW
139-18571 Mandestrobin Standard
残留農薬
試験用
100mg
30,000
NEW
169-27521 Pindone Standard
残留農薬
試験用
100mg
12,000
NEW
163-27541 Pyflubumide Standard
残留農薬
試験用
50mg
30,000
NEW
160-27551
残留農薬
試験用
50mg
30,000
■ マンデストロビン標準品
CH3
H3C
O
CH3
H
N
O
C19H23NO3＝313.39
CAS No. 173662-97-0
…2 ∼ 10℃保存
希望納入価格（円）
NEW
C10H14N2O7＝274.23
CAS No. 6216-73-5
O
…− 20℃保存 Pyflubumide Metabolite B
Standard
CH3
その他のポジティブリスト関連品目は下記よりご参照下さい。
当社 HP →カテゴリーから選ぶ→分析・環境→食品分析
→ 01 . 残留農薬・動物用医薬品（ポジティブリスト制度）
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
14
OCH3
容量
品 名
NH
OH
化学名：
（RS ）
-2-Methoxy-N -methyl-2-[α（2,5-xylyloxy）
-o -tolyl]acetamide
含量
（qNMR）
：98.0% 以上
外 観：白色、結晶性粉末∼粉末
備 考：殺菌剤
CF3
O
規 格
コード No.
O
CH3
C21H25F6N3O2＝465.43
CAS No. 926914-68-3
■ マレイン酸ヒドラジド -O -β- グルコシド標準品
HO
H3C
H
N
CF3
C16H13ClF3NO4＝375.73
CAS No. 69806-40-2
化学名：6（β-D-Glucopyranosyloxy）
3
（2H ）
-pyridazinone
含量
（qNMR）
：90.0% 以上
外 観：白色、結晶性粉末∼粉末
CH3
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
ew Products
高感度・高分解能 MS での測定に
食品分析用
QTofMS 用溶媒
リパーゼ H, from Candida cylindracea
高感度・高分解能 MS を用いる測定に使用できる不純物
リパーゼ S, from Candida cylindracea
の少ない溶媒として、QTofMS 用溶媒を商品化しました。
リパーゼは、脂質（トリグリセリド）を脂肪酸とグリセ
高感度・高分解能 LC/MS による測定は、さまざまな要
リンに分解する酵素です。食品中の脂質試験などにもご使
因による不純物ピークによって、バックグラウンドノイズ
用頂けます。ご活用下さい。
が高くなってしまうことがあります。本品はカラム接続に
よるグラジエント測定を行い、多変量解析によって不純物
特 長
ピークを確認しています。
●位置特異性を持たず、油脂を脂肪酸とグリセロールにほ
ぼ完全に加水分解
特 長
●リパーゼ H は高いコレステロールエステラーゼ活性を
● QTofMS による適合性試験実施
もつ
・フルスキャンによる幅広い質量範囲の保証
（質量範囲 m/z 50 ∼ 3 , 000）
製品概要
・測定データを多変量解析により保証
●起源：Candida cylindracea
●カラム接続によるグラジエント測定（UHPLC 測定）
●活性：リパーゼ H 360 units/mg 以上
●パーティクル保証
リパーゼ S 30 units/mg 以上
●使い切りやすい 500 mℓ包装
スキャン測定に最適 !!
〔参考文献〕
１）Koyama, K. et al . : J. Oleo Sci ., 64
（10）,1057
（2015）.
コード No.
NEW
NEW
127-06442
NEW
126-06451
NEW
赤：A 社
緑：B 社
黒：C 社
紫：QTofMS 用
測定装置
カラム
溶離液
検出器
MS 装置
イオン化法
質量範囲
極性
コード No.
NEW
NEW
NEW
018-26225
212-01601
164-27515
130-18545
：Waters ACQUITY UPLC H-Class
：Wakopak® Ultra C18-2, 2.1mmφ×5cm
：QTofMS 用［超純水：AcCN］［グラジエント］
：UV 210nm
：飛行時間型質量分析計（Waters Xevo G2-X2）
：ESI
：m/z 50 ∼ 3,000
：positive
品 名
Acetonitrile
Ultrapure Water
2-Propanol
Methanol
…2 ∼ 10℃保存
規 格
危
危
危
希望納入価格（円）
容量
QTofMS用 500mℓ
QTofMS用
1ℓ
QTofMS用 500mℓ
QTofMS用 500mℓ
…− 20℃保存 5,000
2,400
3,800
1,800
129-06441
124-06452
品 名
規 格
Lipase H, from Candida
cylindracea
食品分析用
Lipase S, from Candida
cylindracea
食品分析用
容量
希望納入価格（円）
1g
5,000
25g
15,000
1g
5,000
25g
15,000
関連商品
コード No.
メーカーコード
−
B686657
−
C379690
−
C379692
031-21511
−
071-05711
−
137-16051
−
品 名
3-Bromo-1,2propanediol-d5
規格/メーカー 容量 希望納入価格（円）
危
1mg
TRC
25mg 28,500
TRC
2.5mg
2-Chloro-1,3-propanediol
危
2-Chloro-1,3propanediol-d5
危
45,000
TRC
45,000
3-Chloro-1,2-propanediol
食品分析用 100mg 20,000
危
Dioleate Standard
Glycidyl Oleate Standard
危
3-MCPD Standard
危
食品分析用 100mg 20,000
食品分析用 100mg
8,000
TRC : Toronto Research Chemicals Inc.
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
15
ew Products
タンパク質のメンブレンへの転写効率を改善
アクアブロット
Ⓑ 低分子量領域−露光時間1秒−
10×高効率転写バッファー
TM
本品
1
本品は、従来の Towbin（トリス - グリシン）系バッ
2
Towbin
3
1
42,000MW
2
Towbin（SDS）
3
1 2
42,000MW
3
42,000MW
ファーよりも転写効率に優れた 10 ×転写バッファーです。
脱イオン水で 10 倍希釈し、ご使用下さい。調製時にメタ
ノールを加える必要はありません。
17,000MW
21,500MW
17,000MW
21,500MW
21,500MW
17,000MW
ご注意：PVDF メンブレンの親水化処理にはメタノールが必要です。
発光強度の相対値（Towbin buffer=1.0）
特 長
●従来よりも高い転写効率
●転写バッファーを変えるだけ
●メタノール添加不要
デ ー タ
■ 従来の転写バッファーとの比較 −定電圧条件−
本品
Towbin
123
Towbin（SDS）
123
123
Ⓐ
Lane No.
1. ミオシン
（200,000MW）,
β- ガラクトシダーゼ
（116,300MW）,
アルドラーゼ
（42,000MW）,
ミオグロブリン
（17,000MW）
2. ミオシン
（200,000MW）,
β- ガラクトシダーゼ
（116,300MW）,
トリプシンインヒビター
（21,500MW）
Ⓑ 3. Lane No. 2 の 10 倍量
〈条件〉
■本品
（10 倍希釈）
アクアブロットTM10× 高効率転写バッファー
■Towbin buffer
25mmol/ℓ Tris, 192mmol/ℓ Glycine with 10v/v% Methanol
■Towbin buffer
（SDS）
25mmol/ℓ Tris, 192mmol/ℓ Glycine, 0.05w/v% SDS with 10v/v% Methanol
ゲル：スーパーセップ TM エース，10-20%，17 ウェル
［コード No. 198-15041］
メンブレン：クリアトランス ® SP PVDF メンブレン，疎水性，0.2μm
［コード No. 033-22453］
［コード No. 295-72404］
化学発光試薬：イムノスター ® ゼータ
1
2
Towbin
3
1
2
200,000MW
Towbin（SDS）
3
2.0
1.5
42,000MW
1.0
21,500MW
17,000MW
0.5
0.0
本品
Towbin
buffer
Towbin
buffer（SDS）
25 V 定電圧で 60 分間（セミドライ式）転写を行い、発光強度の
値が適切に比較できる露光時間を選び、各タンパク質間の発光強
度値を読み取り相対的に表した。
高分子量タンパク質は長い露光時間を必要とするため、低分子量
タンパク質のシグナルを読み取った後、PVDF メンブレンを切り
取り別途測定した。
定 電 圧 条 件 で ア ク ア ブ ロ ッ ト TM 10 × 高 効 率 転 写 バ ッ フ ァ ー
は、高分子量領域、低分子量領域どちらにおいても Towbin 及び
Towbin（SDS）バッファーよりも高い転写効率を示した。
コード No.
品 名
019-26211 AquaBlotTM 10×High
015-26213 Efficiency Transfer Buffer
規格
1 2
200,000MW
3
200,000MW
希望納入価格（円）
容量
（300mℓ分） 2,000
ブロッティ 30mℓ
ング用
13,500
1ℓ
（10ℓ分）
関連商品
その他転写バッファー
コード No.
品 名
規格
AquaBlotTM 10×Tris-Glycine Transfer Buffer
Ⓐ 高分子量領域−露光時間30秒−
本品
2.5
012-25101
容量 希望納入価格（円）
ブロッティ
1ℓ
ング用 （10ℓ分）
10×組成：250mmol/ℓ Tris, 1.92mol/ℓ Glycine
メタノールと脱イオン水で希釈し、ご使用下さい。
7,200
AquaBlotTM 10×Tris-Glycine-SDS Transfer
Buffer
ブロッティ 1ℓ
019-25111 10×組成：250mmol/ℓ Tris, 1.92mol/ℓ Glycine.,
7,800
ング用 （10ℓ分）
0.5w/v% SDS
メタノールと脱イオン水で希釈し、ご使用下さい。
発光強度の相対値（Towbin buffer=1.0）
116,300MW
116,300MW
116,300MW
ブロッティング用メンブレン
コード No.
品 名
12.0
10.0
8.0
200,000MW
6.0
116,300MW
4.0
2.0
＊
0.0
本品
希望納入価格（円）
容量
Towbin buffer
…2 ∼ 10℃保存
＊
Towbin
buffer（SDS）
＊検出限界付近
の発光強度
…− 20℃保存 洗浄バッファー
コード No.
161-25521
163-24361
206-19131
207-18061
品 名
1×PBS
（-）
-T
PBS-T, pH 7.4
（×10）
1×TBS-T
TBS-T, pH 7.4
（×10）
規 格
生化学用
ブロッティング用
生化学用
ブロッティング用
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
16
規格
®
ブロッティ
1巻
Nitrocellulose
032-22663 ClearTrans
28,500
危
Membrane, 0.2μm
ング用 （30cm×3m）
®
1巻
ClearTrans SP PVDF Membrane, ブロッティ
033-22453 Hydrophobic,
0.2μm
ング用 （26cm×3.3m） 37,000
14.0
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
容量 希望納入価格（円）
5ℓ
1ℓ
5ℓ
1ℓ
13,000
9,000
13,000
9,200
ew Products
品目追加
GPCR/Gq ファミリー選択的阻害剤
タンパク質還元剤
YM-254890
当社では、タンパク質の SH 基の保護やジスルフィド結
YM- 254890 は、土壌細菌から単離された環状デプシペ
合の切断に使用される還元剤を取り揃えています。新たに
プチドです。G タンパク質共役型受容体（GPCR）を構成
溶液タイプを追加しました。
する G αサブユニットのうち、カルシウムイオン濃度上
昇に関与する Gq ファミリー（Gq、G 11 及び G 14）を特異
■ 1mol/ℓ（±）-ジチオトレイトール
（DTT）溶液
的に阻害します。構造解析により Gq ファミリーの GDP/
1 mol/ℓに調製した
（±）-ジチオトレイトール水溶液で
GTP 交換反応を阻害することで G タンパク質の活性化を
す。0 . 2μm フィルターろ過済みです。開封後はなるべく
阻害していることが報告されています。
速やかにご使用下さい。
特 長
■ 0.5mol/ℓ TCEP溶液, 中性
● Gq、G 11、G 14 を介したシグナル伝達を特異的に阻害
中性に調整した 0. 5mol/ℓ TCEP 水溶液（TCEP として）
●膜透過性低分子化合物
です。チオールフリーの還元剤です。pH 調整には水酸化
●in vivo、in vitro 両方の系で作用
ナトリウムを使用しています。0 . 2μm フィルターろ過済
みです。開封後はなるべく速やかにご使用下さい。
H3C
O
CH3
HN
O
O
CH3
N
O
H3C
CH3
O
O
N
CH2
O
H3C
NH
O
O
CH3
N
H3C
O
CH3
H
N
H3C
O H3C
O
NH
CH3
O
O
CH3
CH3
CH3
OH
C46H69N7O15＝960.08
CAS No. 568580-02-9
〔参考文献〕
1）Nishimura, A. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 107
（31）,13666（2010）.
1 mℓ包装 1 mℓ× 10 包装
コード No.
NEW
NEW
NEW
NEW
品 名
コード No.
規 格
044-33871 1mol/ℓ（±）-Dithiothreitol
040-33873 （DTT）Solution
207-20151 0.5mol/ℓ TCEP Solution,
203-20153 Neutral pH
生化学用
生化学用
希望納入価格（円）
容量
1mℓ
3,400
1mℓ×10
20,000
1mℓ
3,500
1mℓ×10
22,000
品 名
133-06864 2-Mercaptoethanol
139-06861
危
（±）-Dithiothreitol
【DTT】
207-09232 3-Mercapto-1,2201-09235 propanediol
205-19863
203-19864
30,000
照 会
安価・高品質
ストレプトアビジン
TCEP Hydrochloride
異的に結合する性質を利用して、目的タンパク質の高感度
容量
98.5%以上
（cGC）
25g
2,100
検出（イムノブロッティング、免疫組織染色、ELISA な
生化学用
100g
5,000
ど）に用いられます。
2mℓ×5A
5,200
100mg
2,200
●外観：白色∼うすい褐色、結晶性粉末
●ビオチン結合能：10 ∼ 20units/mg
●含量（SDS-PAGE）
：90 . 0 % 以上
97.0%以上 SH基酸化
（Titration） 防止用
危
希望納入価格（円）
規 格
049-08972
209-19861
1mg
10mg
含 量
041-08971
041-08976
細胞生物学用
容量 希望納入価格（円）
比べ、非特異反応が低く抑えられています。ビオチンと特
137-06862
045-08974
規 格
生されるビオチン結合性タンパク質です。卵白アビジンに
その他の還元剤
047-08973
NEW
品 名
257-00631
YM-254890
253-00633
ストレプトアビジンは、Streptomyces avidinii より産
関連商品
コード No.
NEW
98.0%以上
和光特級
（Titration）
98.0%以上
生化学用
（Titration）
…2 ∼ 10℃保存
3,600
1g
5g
9,500
10g
17,000
25g
33,500
25mℓ
2,100
500mℓ
13,000
1g
6,000
10g
35,000
50g
140,000
…− 20℃保存 コード No.
品 名
198-17861
194-17863 Streptavidin
192-17864
規 格
免疫化学用
容量 希望納入価格（円）
1mg
5mg
25mg
5,000
12,000
45,000
関連商品
コード No.
品 名
Streptavidin, Peroxidase
190-17441
Conjugated, Solution
規 格
容量 希望納入価格（円）
細胞生物学用 1mℓ
45,000
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
17
ew Products
非ペプチド性オレキシン 2 受容体アゴニスト
低酸素応答研究に
YNT-185･2HCl
ピモニダゾール塩酸塩
YNT- 185 ･ 2 HCl は、非ペプチド性のオレキシン 2 受容
ピモニダゾールは、2 - ニトロイミダゾール誘導体で、低
体（OX 2 R）アゴニストです。オレキシンは神経伝達を司
酸素状態の生きた細胞に取り込まれ結合する性質があるた
るペプチドの一つで、視床下部に存在するオレキシン産生
め、多くの研究において、組織や細胞の低酸素領域の検出
神経から分泌されます。オレキシン受容体には、1 型、2
に利用されています。
型の 2 種類の受容体が存在し、特に 2 受容体は、睡眠・覚
低酸素状態は、多くの疾患に関連していると言われてお
醒の制御に重要であり、脳内のオレキシン欠乏が、日中に
り、特に固形腫瘍の内部は低酸素状態にあることが知られ
耐え難い眠気を生じる睡眠障害であるナルコレプシーの原
ています。また、近年では、造血幹細胞の増殖能や分化能
因であることが分かっています。ナルコレプシーモデルマ
への関連も報告されています。
ウスの脳室内にオレキシンを投与することにより、症状が
●外観：白 色～うすい褐色、
結晶性粉末～粉末
●水溶状：試験適合
●含量（HPLC）
：95.0% 以上
改善されることが報告されていますが、オレキシンはペプ
チドのため、血液脳関門を通過できず、脳内に投与しない
限り、治療効果は期待できません。
YNT- 185 ･ 2 HCl は、マウス脳室内投与、腹腔内投与の
いずれの場合においても、覚醒時間の延長効果を示し、ま
コード No.
NEW
CH3
NEW
S
O
O
H
N
H
N
・HCl
・HCl
C33H37N5O5S・2HCl・nH2O
（C33H37N5O5S・2HCl＝688.66）
（無水物）
CAS No. 1804978-82-2
1）N agahara, T., Saitoh, T., Kutsumura, N., Irukayama-Tomobe, Y.,
Ogawa, Y., Kuroda, D., Gouda, H., Kumagai, H., Fujii, H., Yanagisawa,
M. and Nagase, H. : J. Med. Chem ., 58 , 7931（2015）.
コード No.
NEW
品　名
254-00641 YNT-185 Dihydrochloride
250-00643 Hydrate
容量 希望納入価格（円）
生化学用
  50mg 27,000
100mg 47,000
新サイト開設のご案内
～カルチャーワコードットコム～
・nH2O
〔参考文献〕
NEW
規　格
Culture-wako.com
N
H
O
品　名
細胞培養関連商品紹介サイト
H3C
CH3
O
N
O
・HCl
161-27461
Pimonidazole Hydrochloride
167-27463
CH3
N
規　格
容量 希望納入価格（円）
規　格
容量 希望納入価格（円）
細胞培養関連商品の紹介サイト　Culture-wako.com（カル
チャーワコードットコム）を開設しました。
当社にて販売しているお勧め細胞培養関連商品をカテゴリー
ごとにご紹介しています。製品の種類や、細胞の分類でお勧
め商品をご覧頂くことができます。
また、トピックスにて、キャンペーンや新発売情報を随時発
信しています。是非、ご覧下さい。http://culture-wako.com/
   5mg   14,000
細胞生物学用
100mg 140,000
関連商品
コード No.
オレキシン
品　名
159-03161 Orexin A（Human）
156-03171 Orexin B（Human）
153-03181 Orexin B（Rat, Mouse）
細胞生物学用 0.1mg
細胞生物学用 0.1mg
細胞生物学用 0.1mg
20,000
14,500
14,500
013-24771 [Ala11, D-Leu15]-Orexin B
194-17221 SB-668875
細胞生物学用 1mg
細胞生物学用 1mg
53,000
65,000
オレキシン受容体アゴニスト
その他、オレキシン関連試薬は当社 HP（http://www.wakochem.co.jp/siyaku/product/life/Orexin/index.htm） を ご 参
照下さい。
…2 〜 10℃保存
…− 20℃保存　…− 80℃保存　表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
18
N
HO
1）Parmar, K. et. al . : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 104 , 5431（2007）.
2）Ralph, E. et. al . : Cancer Res ., 58 , 3547（1998）.
3）小林稔、原田浩：生化学 , 85 , 187（2013）.
れています。
H3C
NO2
N
C11H18N4O3・HCl＝290.75
CAS No. 70132-51-3
〔参考文献〕
たナルコレプシーモデルマウスの症状を改善すると報告さ
●外観：白色〜わずかにうすい褐色、結晶性粉末～粉末
●含量（HPLC）
：98.0% 以上
●溶解性：生理食塩水（pH 2.4）…1.3mol/ℓ 1）
1）
●EC50：OX2R…0.028μmol/ℓ（free base）
1）
OX1R…2.750μmol/ℓ（free base）
N
和光純薬時報　Vol.84, No.2（2016）
ew Products
プロテインフリー心筋細胞誘導化合物
マスターファイルに登録済み
KY03-I
CKI-7 二塩酸塩，MF
ヒ ト ES/iPS 細 胞 を 心 筋 細 胞 へ 分 化 誘 導 さ せ る 化 合
1）
本品は、培地添加物として 2016 年 3 月に原薬等登録原簿
物 と し て KY02111 が 報 告 さ れ て い ま す 。KY03-I は、
（マスターファイル：MF）に登録されました。製造工程や
KY02111 より低濃度（3μmol/ℓ）で効率良く心筋細胞に
分析試験のバリデーション、要因変更管理を実施し、恒常
分化誘導できる化合物です。
的に安定した品質の製品を得られる体制で製造しています。
ヒト ES/iPS 細胞から心筋細胞への分化誘導法は複数報
CKI- 7 は、CK 1 阻害剤です。SB 431542 と Y- 27632 と共
告されていますが、それらの分化誘導法には血清や動物由
に使用することで、血清フリー、フィーダーフリー条件下
来のタンパク質、高価なサイトカインが使用されていま
でヒト ES 細胞とヒト iPS 細胞を網膜前駆細胞に分化誘導
す。そのため、動物由来物による感染リスクやコストと
すると報告されています。
いった点が懸念されています。しかし、本品を含む KY 化
特 長
合物を用いると血清やタンパク質、サイトカインを使用せ
ずに、従来法と比較して効率良くヒト ES/iPS 細胞を心筋
● MF 登録済み※
細胞へ分化誘導できます。
登録番号：228MF40005
本品は、細胞培養用途に使用しやすいようにエンドトキ
●アニマルフリー
シン及びマイコプラズマ試験を実施しています。
●国産
●含量（HPLC）
：98 . 0 % 以上
N
●溶解性：DMSO（5mg/mℓ）I
S
●エンドトキシン試験：
10 EU/g 未満
動物由来原料不使用の化学合成品
H
N
O
O
O
合成∼包装までをすべて日本国内で実施
●高い品質安定性
CH3
CH3
連続複数ロット合格実績
C19H19IN2O3S＝482.34
CAS No. 1609117-17-0
製品概要
●マイコプラズマ試験済み
●外観：白色∼うすい褐色、
〔参考文献〕
結晶性粉末∼粉末
1）Minami, I., Yamada, K., Otsuji, T. G., Yamamoto, T., Shen, Y., Otsuka, S.,
Heuser, J. E., Uesugi, M., Aiba, K. and Nakatsuji, N. : Cell Rep ., 2 , 1448
●水分：0 . 5 % 以下
●エンドトキシン：
NEW
品 名
規 格
032-24721
NEW
038-24723
NEW
036-24724
NEW
032-24726
CultureSure KY03-I
®
細胞培養用
容量
希望納入価格（円）
2mg
12,000
10mg
50,000
25mg
100,000
100mg
340,000
関連商品
コード No.
品 名
規 格
1mg
12,000
40,000
100mg
照 会
細胞培養用
300μℓ
25,000
細胞生物学用
1mg
20,000
5mg
13,000
細胞培養用
032-23104
CultureSure® 10mmol/ℓ
038-24681 CHIR99021 DMSO Solution,
危
Animal-derived-free
029-16241 6-Bromoindirubin-3’
-oxime
247-00951
細胞生物学用
243-00953 XAV939
NEW
241-00954
…2 ∼ 10℃保存
25mg
52,000
100mg
180,000
…− 20℃保存 ・2HCｌ
O
N
0 . 05 EU/mg 未満
Cl
C11H12ClN3O2S・2HCl＝358.67
CAS No. 1177141-67-1
●生菌数試験、マイコプラズマ試験済み
コード No.
NEW
038-24821
NEW
034-24823
品 名
CKI-7 Dihydrochloride, MF
規 格
細胞培養用
容量 希望納入価格（円）
5mg
27,000
25mg
96,500
希望納入価格（円）
5mg
038-23101
®
034-23103 CultureSure CHIR99021
容量
S
●溶解性：水に可溶
（2012）.
コード No.
O
●含量（HPLC）
：98 . 0 % 以上
Kadota, S., Morone, N., Barve, M., Asai, Y., Tenkova-Heuser, T.,
NH2
HN
関連商品
コード No.
259-00613
257-00614
品 名
Y-27632, MF
（MF登録番号：227MF40013）
規 格
細胞培養用
容量 希望納入価格（円）
5mg
50,000
25mg 200,000
※原薬等登録原簿（MF）への登録は、厚生労働省（独立行政法
人医薬品医療機器総合機構）による、品質及び安全性に関する
確認または評価が行われたことを意味するものではありませ
ん。
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
19
ew Products
関連商品
初代神経細胞の培養が上手くいかずお困りの方に
凍結神経細胞
神経細胞用培地
コード No.
本品は、ラット、マウスの初代神経細胞用無血清培地で
す。中枢神経細胞の培養に最適化されています。この度、
住友ベークライト株式会社から技術導入し商品化しまし
※本品は、ラットグリア細胞培養上清を含有しています。
特 長
容量
Cerebral Cortex, from Mouse
1本
細胞培養用
150
（embryonic day 15）
（2胎児）
43,800
NEW
033-24871
Cerebral Cortex, from Rat
（embryonic day 17）
1本
（2胎児）
50,000
NEW
036-24861
Cerebral Striatum, from Rat
1本
細胞培養用
150
（embryonic day 17）
（2胎児）
50,000
NEW
082-10291
Hippocampus, from Mouse
1本
56,300
細胞培養用
150
（embryonic day 16）
（2.5胎児）
NEW
085-10301
Hippocampus, from Rat
（embryonic day 19）
150
150
細胞培養用
細胞培養用
1本
62,500
（2.5胎児）
※ 150 …− 150℃保存
●低密度培養可能
神経細胞用分散液
デ ー タ
■ 生存維持活性評価：神経突起伸展確認（MAP 2 免疫染色）
培養3日目
培養7日目
コード No.
品 名
規 格
培養3日目
291-78001
Neuron Dissociation
Solutions
細胞培養用
4セット
照 会
NEW
297-78101
Neuron Dissociation
Solutions S
細胞培養用
10セット
照 会
添加剤
培養7日目
培養14日目
コード No.
品 名
規 格
030-11951
×10
（妊娠 18 日目マウスの胎児小脳より分散）
細胞数：6.6×105 cells/mℓ
培養スケール：500μℓ/dish（ガラスボトムディッシュ）
培養条件：培養 3 日目、7 日目に培地半量交換、3 日目より Ara-C 2μmol/ℓ添加
（データご提供：東京慈恵会医科大学再生医学研究部 岡野ジェ
イムス洋尚先生、小川優樹様）
148-09671 Neuron Culture Medium
…2 ∼ 10℃保存
生化学用
希望納入価格（円）
4,200
500mg
9,000
1g
13,800
アニマルフリートリプシン EDTA
トリプシン EDTA 溶液（フェノールレッド不含）, AF
菌試験済みのトリプシン EDTA 溶液です。接着細胞の剥
細胞数：2.5×10 5 cells/mℓ
（妊娠 17 日目ラットの胎児大脳
半球より分散）
培養スケール：
200μℓ/well（48well プレート）
培養条件：
： 37℃、5%CO2 で
Ara-C（−）
5 日間培養
Ara-C（+）
：37℃、5%CO2 で
3 日間培養後、
200μmol/ℓ Ara-C
10μℓ/well を添加し、
さらに 2 日間培養
（計 5 日間培養）
品 名
Cytosine-1-β-D（+）034-11954 arabinofuranoside
【Ara-C】
【Cytarabine】
036-11953
容量
100mg
本品は、マイコプラズマ試験、エンドトキシン試験、無
■ 生存維持活性評価（MTT アッセイ）
規 格
容量
希望納入価格（円）
細胞培養用
100mℓ
50,000
…− 20℃保存 離、各種組織の細胞分散などにご使用いただけます。リコ
ンビナントトリプシンを原料とした動物由来物不含製品で
す。ウイルス汚染の心配がなく、実験に安心してご使用い
ただけます。
特 長
●動物由来物不含
●細胞剥離能が高く、剥離後の生存率が良い
規格項目
外観、pH、浸透圧、無菌試験、エンドトキシン試験、マ
イコプラズマ試験、実用試験（Vero 細胞が 10 分後完全に
剥離し、生細胞率が 90 % 以上）
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
20
希望納入価格（円）
※酵素液、分散液、除去液のセットがそれぞれ 4 セット、10 セッ
ト入っています。
他社培地 + 他社サプリメント + 5％FBS
NEW
容量
NEW
培養14日目
×10
コード No.
希望納入価格（円）
030-24881
●神経突起伸展が非常に早い
本品
規 格
NEW
た。同社の神経細胞用培養液（品番：MB-X9501）の後継
品となります。
品 名
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
［次頁に続く］
ew Products
デ ー タ
アニマルフリーコラゲナーゼ
■ 細胞剥離能
コラゲナーゼ タイプ A/B/C
細胞：MDCK 細胞
培地：E-MEM+10%FBS
播種細胞数：5.0×104 cells/cm2
培養方法：静置培養
培養器材：12 ウェルプレート
培養環境：37℃、5%CO2、4 日間
本品は、Clostridium hystolyticum 由来の動物由来物フ
リーのコラゲナーゼです。動物由来物を含まない培地で培
養しています。そのため、動物原料に起因する BSE や病
原菌混入の心配がありません。
活性の異なる 3 種類の製品を発売しました。
製品概要
培養後、37℃、5%CO 2 で 15 分間処理し、剥離細胞数を測定した。
他社品と比較し良好な細胞剥離能を示した。
●外観：褐色、結晶∼粉末又はフレーク
■ 継代培養時の影響
●由来：Clostridium hystolyticum
タイプ コラゲナーゼ活性 カゼイナーゼ活性 クロストリパイン活性 トリプシン活性
細胞：MDCK 細胞
培地：E-MEM+10%FBS
播種細胞数：3.0×10 5 cells
培養方法：静置培養
培養器材：T25フラスコ
培養環境：37℃、5%CO2
37℃、5 %CO 2 で 15 分間トリプシン処理後に継代培養を行った。
細胞の増殖に本品の影響がないことを確認した。
NEW
品 名
規 格
容量 希望納入価格（円）
203-20251
Trypsin-EDTA Solution without
Phenol Red, AF
207-20271
Trypsin-EDTA Solution（High Trypsin）
細胞培養用 100mℓ
without Phenol Red, AF※1
細胞培養用 100mℓ
6,000
9,500
関連商品
トリプシンEDTA（ブタパルボウイルス試験済み原料を使用）
コード No.
品 名
202-16931 0.05w/v% Trypsin-0.53mmol/ℓ
EDTA・4Na Solution with Phenol
204-16935 Red
209-16941 0.25w/v% Trypsin-1mmol/ℓ
EDTA・4Na Solution with Phenol
201-16945 Red
0.5w/v% Trypsin-5.3mmol/ℓ
206-17291 EDTA・4Na Solution with Phenol
Red（×10）
0.5w/v% Trypsin-5.3mmol/ℓ
208-17251 EDTA・4Na Solution without
Phenol Red（×10）
メーカーコード
品 名
631-24973 06369880103 Trypsin, Porcine,
recombinant（ Pichia
635-24971 03358658103 pastoris ）,GMP Grade
8.0units/mg
以下
0.1units/mg
以下
B
300units/mg
以上
300units/mg
以上
5.0units/mg
以下
0.5units/mg
以下
C
200units/mg
以上
150units/mg
以上
3.0units/mg
以下
0.1units/mg
以下
NEW
NEW
NEW
品 名
038-24561 Collagenase Type A,
034-24563 Animal-derived-free
035-24571 Collagenase Type B,
031-24573 Animal-derived-free
032-24581 Collagenase Type C,
038-24583 Animal-derived-free
コード No.
品 名
500mg
30,000
100mg
10,000
500mg
30,000
100mg
10,000
500mg
30,000
細胞分散用
6,200
25,500
92,500
コラーゲン
分析用
25mg
19,900
Collagenase, Purified
細胞分散用
5,000
units
25,000
units
16,000
Collagenase, recombinant,
Animal-derived-free
細胞分散用
240,000
units
24,000
100mg
500mg
1g
50mg
100mg
1g
100mg
1g
50mg
5,700
16,500
30,500
8,000
8,300
38,000
7,900
33,000
8,500
100mℓ
1,800
500mℓ
6,800
035-24071
細胞培養用 100mℓ
4,200
031-24073
細胞培養用 100mℓ
4,200
…− 20℃保存 10,000
希望納入価格（円）
034-13291 Collagenase
ロシュ・ダ
1g
250,000
イアグノス
ティックス 3.5MU 照 会
細胞分散用
100mg
容量
6,800
メーカー 容量※ 2 希望納入価格（円）
細胞分散用
希望納入価格（円）
100mg
1g
5g
1,800
細胞培養用
細胞分散用
容量
規 格
100mℓ
細胞培養用
容量 希望納入価格（円）
規 格
関連商品
500mℓ
規 格
※ 2 ：容量は各包装に含まれるタンパク質量です。3. 5MUは約15gの
タンパク質量に相当します。溶液品で濃度は約70mg/mℓです。
…2 ∼ 10℃保存
150units/mg
以上
038-22361
034-22363 Collagenase
032-22364
リコンビナントトリプシン
コード No.
NEW
NEW
※ 1 ：トリプシン EDTA 溶液（高トリプシン）（フェノールレッド
不含），AF は通常品［コード No. 203 - 20251］の 5 倍量の
トリプシンを含有しています。
150units/mg
以上
コード No.
NEW
コード No.
A
036-23141
031-17601
037-17603
035-17604
031-22591
038-17851
032-17854
035-17861
039-17864
038-23961
Collagenase TypeⅠ
コラゲナーゼ/カゼイナーゼ/トリプシン
活性がバランスよく含まれているタイプ
細胞分散用
Collagenase TypeⅠ, Filtered
細胞分散用
Collagenase Type Ⅴ
トリプシン活性が低いタイプ
Collagenase Type X
トリプシン活性が高いタイプ
Collagenase Type X, Filtered
細胞分散用
細胞分散用
細胞分散用
62,000
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
21
ew Products
関連商品
便利なプレミックスタイプ
緩衝剤
汎用粉末培地
当社では、汎用基礎培地をはじめとする細胞培養関連試
薬を多数取り揃えています。この度、粉末のプレミック
ス・使い切りタイプの製品に MEMα及び RPMI- 1640 を
追加しました。
品質試験：外観、浸透圧、pH、エンドトキシンなど
コード No.
容量
希望納入価格（円）
1ℓ用×10
7,100
10ℓ用
5,800
規 格
容量
希望納入価格（円）
細胞培養用
100mℓ
2,100
規 格
容量
希望納入価格（円）
細胞培養用
50mℓ
6,700
1mℓ
026-18711 10mg/mℓ Blasticidin S
Hydrochloride, HEPES Solution 遺伝子研究用
022-18713
1mℓ×10
7,200
293-72601
299-72603
品 名
規 格
D-PBS（-）, Powder
細胞培養用
培地添加溶液
特 長
コード No.
品 名
7.5w/v% Sodium Bicarbonate
195-16411
Solution
●調製が簡単
●保管スペースを縮小できる
●安価
抗生物質溶液
コード No.
品 名
019-23891 Amphotericin B Suspension
15,000
100mℓ
60,000
10mℓ
8,200
細胞培養用
20mℓ
6,000
細胞培養用
1mℓ
10,000
164-25251
Penicillin-Streptomycin Solution
細胞培養用
（×50）
100mℓ
3,000
を添加します。必要に応じて 1N NaOH または HCl
168-23191
100mℓ
3,600
で pH を調整します。
Penicillin-Streptomycin Solution
細胞培養用
（×100）
Penicillin-Streptomycin161-23181 Amphotericin B Suspension
（×100）
細胞培養用
100mℓ
4,800
細胞培養用
100mℓ
4,000
使 用 法
１．培地の最終容積よりも 2-3% 少ない量の精製水を用意
し、本品１袋を溶解します。
２．アルミ袋内をすすぎ、袋中の粉末をすべて溶解しま
す。
３．スターラーでよく撹拌した後、ラベル記載量の NaHCO3
４．精製水を加え最終容積とし、スターラーで泡立てない
ように撹拌して溶解します。
品質試験
外観、浸透圧、pH、エンドトキシン、細胞増殖試験など
コード No.
フェノール
グルタミン
ピルビン酸 備考 規格
レッド
品 名
049-33561
045-33563 D-MEM
（High Glucose）,
297-72501 Powder
293-72503
NEW
NEW
NEW
●
●
容量
希望納入価格（円）
078-06061 Gentamicin Sulfate Solution
細胞培養用
117-00961 Kanamycin Sulfate Solution
133-15931 1mg/mℓ Mitomycin C Solution
危
Penicillin-Streptomycin-LGlutamine Solution（×100）
腹水化誘導試薬
プリスタン，合成品
本品は、プリスタン（2,6,10,14- テトラメチルペンタデ
ー
細胞 1ℓ用×10
培養用 10ℓ用
9,000
7,000
カン）の化学合成品です。腹水化誘導試薬、自己免疫疾患
9,100
7,300
ス腹水化に使用されます。
8,500
6,300
●
ー
●
細胞 1ℓ用×10
培養用 10ℓ用
054-09001 E-MEM, Powder
050-09003
●
●
ー
細胞 1ℓ用×10
培養用 10ℓ用
084-10153 Ham's F-12,
082-10154 Powder
●
●
●
炭酸水素 細胞 1ℓ用×10 11,000
Na不含 培養用 10ℓ用
9,000
043-33743 D-MEM/Ham's
041-33744 F-12, Powder
●
●
●
細胞 1ℓ用×10 11,500
培養用 10ℓ用
9,500
130-18621 MEMα, Powder
136-18623
●
●
●
細胞 1ℓ用×10 12,000
培養用 10ℓ用 10,000
187-03241 RPMI-1640,
183-03243 Powder
●
●
ー
細胞 1ℓ用×10
培養用 10ℓ用
…2 ∼ 10℃保存
遺伝子研究用
161-23201
５．フィルター滅菌を行ってからご使用下さい。
NEW
…− 20℃保存 8,900
7,300
誘発試薬として使用されます。特にハイブリドーマのマウ
●含量（GC）：95.0% 以上
CH3
H3C
コード No.
CH3
CH3
C19H40＝268.52
CAS No. 1921-70-6
品 名
165-27481
163-27482
Pristane, Synthetic
161-27483
167-27485
規 格
危
生化学用
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
22
43,000
20mℓ
071-06431 50mg/mℓ G-418 Sulfate
077-06433 Solution, Animal-derived-free
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
CH3
CH3
容量
希望納入価格（円）
5mℓ
7,000
25mℓ 23,000
100mℓ 70,000
500mℓ 295,000
ew Products
IgG タイプ抗糖鎖抗体ラインアップ
■ 抗シアリルLea抗原，モノクローナル抗体（MSW113）
抗糖鎖モノクローナル抗体シリーズ
し た 抗 体 で す。 シ ア リ ル Lea 抗 原 の 非 還 元 末 端 側 Siaα
本シリーズは、糖鎖に対する IgG タイプの抗体です。糖
2 - 3 Gal β 1 - 3 GlcNAc を認識し、多くの消化器系のがん関
鎖マーカーは細胞の状態や疾患、発生と深く関連するため
連糖鎖抗原として古くから知られる CA 19 - 9 抗原に対する抗
さまざまな分野において注目されています。
体 NS19 - 9 とは還元末端の Fuc 要求性が異なります。
本品は、ヒト結腸がん由来 SW1116 細胞を抗原に樹立
■ 抗ケラタン硫酸，モノクローナル抗体
（R-10G）
本品は、ヒト iPS 細胞を抗原に樹立した抗体です。一般
に広く使用されている多くの未分化マーカー用抗体と異
なり、EC 細胞（胎児性がん細胞）へはほとんど反応せず、
ヒト iPS/ES 細胞を認識します。
●サブクラス：IgG3
●実用濃度：ウエスタンブロット、イムノブロット 0.5μg/mℓ∼
イムノアフィニティクロマトグラフィー
〔参考文献〕
●免疫動物：マウス
●サブクラス：IgG1
●実用濃度：ウエスタンブロット
1 ∼ 5μg/mℓ
ELISA
1 ∼ 5μg/mℓ
免疫細胞染色
5 ∼ 20μg/mℓ
デ ー タ
DAPI
●免疫動物：マウス
固相免疫測定
●クローン No.：R-10G
A
●クローン No.：MSW113
1）Kitagawa, H. et al . : J. Biochem ., 104 , 817（1988）
.
（1993）.
2）Kitagawa, H. et al . : J. Biol. Chem ., 268 , 26541
3）Akita, K. et al . : Int. J. Gynecol. Cancer , 22 , 531（2012）.
■ 抗シアリルTn抗原，モノクローナル抗体（MLS132）
■ 抗Tn抗原，モノクローナル抗体（MLS128）
本品は、ヒト結腸腺がん由来細胞 LS180 細胞を抗原に樹
TRA-1-81
Merge
Phase
立した抗体です。
Tn 抗原及びシアリル Tn 抗原はがん関連糖鎖抗原とし
て知られるムチン型糖鎖であり、本品はそれぞれ、クラス
ター状のシアリル Tn 抗原及び Tn 抗原を認識します。
B
DAPI
R-10G
Merge
Phase
青：DAPI、緑：FITC（抗体）
一次抗体：A）TRA-1-81 抗体（コントロール）
B）抗ケラタン硫酸，モノクローナル抗体（R-10G）
二次抗体：FITC 標識二次抗体
細胞：ヒト iPS 細胞 201B7 株（オンフィーダー培養）
クローンNo.
免疫動物
サブクラス
実用濃度
〔参考文献〕
抗シアリル Tn 抗原，
抗 Tn 抗原，
モノクローナル抗体
モノクローナル抗体
MLS132
MLS128
マウス
IgG3
ELISA
0.5μg/mℓ∼ ウエスタンブロット 0.5μg/mℓ
イムノブロット 0.5μg/mℓ∼ イムノブロット
0.5μg/mℓ
免疫組織染色 1μg/mℓ∼ FACS
1μg/mℓ
免疫組織染色
1μg/mℓ
がん細胞増殖阻害
〔参考文献〕
1）Kawabe, K. et al . : Glycobiology , 23（3）,322（2013）.
■ 抗Siaα2-3，モノクローナル抗体
（HYB4）
本品は、Siaα2 - 3 nLc 4 Cer を抗原に樹立した抗体です。
末端に Siaα2 - 3 Gal 構造を持つ糖鎖を認識します。
●クローン No.：HYB4
●サブクラス：IgG3・κ
●実用濃度：ウエスタンブロット
10 ∼ 50μg/mℓ
ELISA
5 ∼ 25μg/mℓ
フローサイトメトリー
5 ∼ 25μg/mℓ
10 ∼ 100μg/mℓ
〔参考文献〕
1）Hidari, K. I. et al . : Biochem. Biophys. Res. Commun ., 436 , 394（2013）.
2）Yoneyama, T. et al . : Biochem. Biophys. Res. Commun ., 448 , 390（2014）.
…2 ∼ 10℃保存
容量
希望納入価格（円）
011-25811 Anti Keratan Sulfate，
糖鎖研究用
017-25813 Monoclonal Antibody（R-10G）
Anti Siaα2-3，Monoclonal
011-25171
免疫化学用
Antibody（HYB4）
a
010-25901 Anti Sialyl-Le Antigen，
Monoclonal Antibody（MSW113） 糖鎖研究用
016-25903
200μℓ
1mℓ
25,000
98,000
200μℓ
35,000
100μℓ
30,000
500μℓ
120,000
010-25881 Anti Sialyl-Tn Antigen，
Monoclonal Antibody（MLS132） 糖鎖研究用
016-25883
100μℓ
30,000
500μℓ
120,000
017-25891 Anti Tn Antigen，Monoclonal
013-25893 Antibody（MLS128）
100μℓ
500μℓ
30,000
120,000
コード No.
●免疫動物：マウス
免疫細胞染色
1）Fukui, S. et al . : Jpn. J. Cancer Res ., 79 , 1119（1988）.
2）Numata, Y. et al . : Biochem. Biophys. Res. Commun ., 170 , 981（1990）.
3）Nakada, H. et al . : Biochem. Biophys. Res. Commun ., 187 , 217（1992）.
4）Nakada, H. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 90 , 2495（1993）.
.
5）Tanaka, N. et al . : Eur. J. Biochem ., 263 , 27（1999）
6）Akita, K. et al . : Int. J. Gynecol. Cancer , 22 , 531（2012）.
…− 20℃保存 品 名
規 格
糖鎖研究用
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
23
ew Products
■ 抗りん酸化α - シヌクレイン，モノクローナル抗体
（pSyn# 64）
，FITC 結合
レビー小体マーカー
抗りん酸化α - シヌクレイン，モノクローナル抗体（pSyn#64），ビオチン結合
抗りん酸化α - シヌクレイン，モノクローナル抗体（pSyn#64），FITC 結合
抗りん酸化α- シヌクレイン，
モノクローナル抗体（pSyn#64）,
FITC 結合
パーキンソン病、レビー小体型認知症（DLB）などの
抗りん酸化α- シヌクレイン
モノクローナル抗体
［コード No. 015-25191］＋
Alexa Fluor ® 488 標識二次抗体
神経変性疾患において神経細胞に特異的に出現するレビー
小体は、セリン 129 残基が特異的にりん酸化されたα- シ
ヌクレインを含んでいます。抗りん酸化α - シヌクレイン ,
モノクローナル抗体（pSyn#64）（コード No.：015 - 25191）
は、正常なα - シヌクレインとは反応せず、蓄積したりん
酸化α - シヌクレインのみを認識します。本品は、同抗体
サンプル：凝集α- シヌクレイン
（C 末端欠損体 ; 1-122aa）
をLipofection
により添加したα- シヌクレインを恒常発現するヒト神経芽
細胞腫 SH-SY5Y 細胞
青：DAPI（核）、緑：りん酸化α- シヌクレイン
抗体濃度：1/1,000
にビオチンや FITC を標識した抗体です。
特 長
●標識済みで二次抗体不要
二次抗体を用いた場合と同様に凝集α - シヌクレインの明瞭な染
色が見られた。
（データご提供：東京大学大学院医学系研究科神経病理学教室 桑原知樹先生、岩坪威先生）
●免疫染色での実用評価済み
●低バックグラウンド
製品概要
抗りん酸化α - シヌクレイン， 抗りん酸化α - シヌクレイン，
モノクローナル抗体
モノクローナル抗体
（pSyn#64）
, ビオチン結合 （pSyn#64）
, FITC 結合
標識体
サブクラス
種交差性
緩衝液
実用希釈倍率
ビオチン
免疫細胞染色 1：200-5,000
免疫組織染色 1：200-5,000
■ 抗りん酸化α - シヌクレイン，モノクローナル抗体
（pSyn# 64）
，ビオチン結合
抗りん酸化α- シヌクレイン，
モノクローナル抗体（pSyn#64）
［コード No. 015-25191］＋
ビオチン標識二次抗体
サンプル：凝集α-シヌクレインを脳内に注入した 6ヶ月齢野生型マウス線状体
切片：50μm 厚 ビブラトーム切片
染色法：ABC 法 + DAB 染色
抗体濃度：1/200
二次抗体を用いた場合よりもバックグラウンドが抑えられ、明瞭
な染色が見られた。
（データご提供：東京大学大学院医学系研究科神経病理学教室 桑原知樹先生、岩坪威先生）
希望納入価格（円）
100μℓ
45,000
NEW
Anti Phosphorylated α-Synuclein,
017-26491 Monoclonal Antibody（pSyn#64）, 免疫化学用
FITC-conjugated
100μℓ
45,000
規 格
容量
希望納入価格（円）
015-25191 Anti Phosphorylated α-Synuclein,
Monoclonal Antibody（pSyn#64）
品 名
免疫化学用
50μℓ
30,000
190-17941 α-Synuclein, Human, recombinant
細胞生物学用 0.5mg
30,000
197-17951 β-Synuclein, Human, recombinant
細胞生物学用 0.5mg
30,000
194-17961 γ-Synuclein, Human, recombinant
細胞生物学用 0.5mg
30,000
免疫化学用
50μg
30,000
免疫化学用
50μg
30,000
016-26461 Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated 免疫化学用
100μℓ
45,000
Iba1, Rabbit,
013-26471 Anti
Red Flurochrome-conjugated
100μℓ
45,000
Anti Iba1, Rabbit
019-19741 （for Immunocytochemistry）
Anti Iba1, Rabbit
016-20001 （for Western Blotting）
免疫化学用
眼の研究に
視神経研究用ポリクローナル抗体
当社では、視神経の発生、機能に関与する因子に対する
抗体を各種取扱っています。視神経の研究にご活用下さ
い。
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
24
容量
Anti Phosphorylated α-Synuclein,
010-26481 Monoclonal Antibody（pSyn#64）, 免疫化学用
Biotin-conjugated
コード No.
…− 20℃保存 規 格
関連商品
使 用 例 （免疫染色）
…2 ∼ 10℃保存
品 名
NEW
FITC
マウスIgG2b
ヒト、マウス、ラット
PBS, 0.05% アジ化ナトリウム
抗りん酸化α- シヌクレイン，
モノクローナル抗体
（pSyn#64）, ビオチン結合
コード No.
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
［次頁に続く］
ew Products
■ 抗マウス Mak, モルモット
特 長
Mak（ 別 名：DJ417M14.2） は、 約 71kDa の キ ナ ー ゼ で
● KO マウスでの性能チェック済み
RP1 という因子のりん酸化を制御して繊毛の長さを調節する
●文献での使用報告あり
ことで、視細胞の生存に関与する機能が報告されています。
■ 抗マウス 4.1G/EPB41L2, ウサギ
●クラス：モルモット IgG
4.1G（別名：EPB41L2）は、ERM ファミリーに属する
●種交差性：マウス（他の動物種は未検証）
約 113kDa のタンパク質で、細胞膜の形態を保持する機能
が知られています。近年、KO マウスを用いた解析により
桿体視細胞のシナプス位置を決定する機能を果たすと報告
●実用希釈倍率：免疫細胞染色
1：1,000
ウエスタンブロット
1：3,000
使 用 例
されています。本品は、桿体視細胞マーカーとして使用可
■ 免疫染色
能です。
●クラス：ウサギ IgG
サンプル：マウス網膜、凍結切片
●種交差性：マウス（他の動物種は未検証）
●実用希釈倍率：免疫細胞染色
1：5,000 -10,000
ウエスタンブロット
1：10,000 -100,000
使 用 例
赤：Mak
緑：γ-tubulin
■ 免疫染色
サンプル：マウス網膜、凍結切片
（データご提供：大阪大学蛋白質研究所 古川貴久先生）
〔参考文献〕
1）Omori, Y. et al . : Proc. Natl. Acad. Sci ., 107 , 22671（2010）.
■ 抗マウスピカチュリン , ウサギ
ピカチュリンは、視覚の神経伝達に関わる細胞外マト
緑：4.1G/EPB41L2
リックスタンパク質で、リボンシナプス間隙に存在しま
（データご提供：大阪大学蛋白質研究所 古川貴久先生）
す。網膜視細胞と双極細胞の樹状突起との相互作用におい
〔参考文献〕
て不可欠な役割を担っていると考えられています。
1）Sanuki, R. et al . : Cell Rep ., 10 , 796（2015）.
●クラス：ウサギ IgG
■ 抗マウス ICK, モルモット
●種交差性：マウス / ラット（他の動物種は未検証）
繊毛の先端に局在して繊毛内におけるタンパク質輸送の方
ウエスタンブロット
●実用希釈倍率：免疫細胞染色
ICK（別名：MRK, LCK2）は、約 71kDa のキナーゼで、
向転換を制御し、繊毛形成に関与すると報告されています。
1：1,000 - 2,000
1：10,000
使 用 例
●クラス：モルモット IgG
■ 免疫染色
●種交差性：マウス（他の動物種は未検証）
●実用希釈倍率：免疫細胞染色
1：100
ウエスタンブロット
1：250
サンプル：マウス網膜、凍結切片
使 用 例
■ 免疫染色
赤：Pikachurin
青：DAPI
サンプル：マウス胎児線維芽細胞
（データご提供：大阪大学蛋白質研究所 古川貴久先生）
〔参考文献〕
1）Sato, S. et al . : Nat. Neurosci ., 11 , 923（2008）
.
赤：ICK
緑：acetylated α-tublin
紫：pericentrin
青：DAPI
コード No.
NEW
（データご提供：大阪大学蛋白質研究所 古川貴久先生）
〔参考文献〕
NEW
NEW
1）Chaya, T. et al . : EMBO J ., 33 , 1227（2014）.
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 容量
希望納入価格（円）
018-26421 Anti Mouse 4.1G/EPB41L2, Rabbit 免疫化学用
品 名
規 格
50μℓ
40,000
015-26431 Anti Mouse ICK, Guinea Pig
012-26441 Anti Mouse Mak, Guinea Pig
011-22631 Anti Mouse Pikachurin, Rabbit
50μℓ
50μℓ
50μℓ
40,000
40,000
35,000
免疫化学用
免疫化学用
免疫化学用
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
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和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
25
ew Products
製品仕様 既存製品との比較
低コストでのタンパク質精製に
製品名
Ni-NTA アガロース HP Ni-アガロース
［145-07981］
ゲルマトリックス
6%高度架橋アガロース
6%架橋アガロース
リガンド
ニトリロ三酢酸（NTA）
イミノ二酢酸（IDA）
20-40μmol Ni2+/mℓ gel
ニッケル結合容量 ≧15μmol Ni2+/mℓ gel
ビーズサイズ
50-150μm
40-180μm
20%エタノールの50%懸濁液 20%エタノールの50%懸濁液
保存液
最大圧力
0.6MPa
−
最大流速
1,800cm/h
−
Ni-NTA アガロース HP（High Performance）
Ni- アガロースは、6 ×ヒスチジン融合タンパク質をア
フィニティー精製するために使用されます。本品は、リガ
ンドにニトリロ三酢酸（NTA）を用いており、金属イオ
ンの脱落によるタンパク質純度の低下を抑えます。また、
変性剤耐性を有し、中高圧液体クロマトグラフィーにも対
応しています。
特 長
NEW
品 名
●高圧力対応
コード No.
●高い変性剤耐性
デ ー タ
■ 他社製品との比較
溶出画分
Imidazole 濃度
M 1 2
3
4
5
6
7
8 9 10 11 12 13 14 15 16
48,000
本品
35,000
希望納入価格（円）
容 量
145-07981
141-07983
149-07984
031-19781
038-19791
263-01871
品 名
規 格
Ni-Agarose
容 量 希望納入価格（円）
遺伝子研究用
遺伝子研究用
遺伝子研究用
5mℓ
10mℓ
100mℓ
5mℓ
5mℓ
5mℓ
19,000
27,000
120,000
29,500
25,000
26,000
遺伝子研究用
1mℓ×4
15,000
遺伝子研究用
Co-Agarose
Cu-Agarose
Zn-Agarose
Metal Chelate Agarose Set
298-67401
（Ni, Co, Cu, Zn）
新機構による遺伝子発現制御研究用試薬
25,000
20,000
48,000
A社品
35,000
PIPA（ピロール・イミダゾール）からなるポリアミド
PIPA は、抗生物質より見いだされた低分子有機化合物
で、転写因子より強く配列特異的に２本鎖 DNA に結合し、
25,000
20,000
標的遺伝子の転写活性を抑制する新しい阻害機構による新
50,000
B社品
薬候補として研究されています。過去の製造法の欠点を解
決、産業的に展開できるようになりました。 未だ有効な
37,000
治療薬のない難治性疾患などに対し、新規な遺伝子転写制
25,000
20,000
御薬研究のための化合物として期待できます。
: 6×ヒスチジン融合GFP
M : ワイドビューTMプレステインたん白質サイズマーカーⅢ［コードNo. 236-02463］
1 : 精製前サンプル
2 : カラム素通り
3 : 洗浄画分（10mmol/ℓ Imidazole含有）
4-16 : 溶出画分（25-500mmol/ℓ Imidazole含有）
特 長
●分解酵素によって分解されることなく、生体内で安定
●標的遺伝子転写活性を抑制するため、副次的な作用の観
点で有利
●自由に分子設計・化学合成ができる
他社製品と同等の性能です。
PIPA による double strand DNA の認識原理
〈プロトコール〉
① 6 × ヒ ス チ ジ ン 融 合 GFP を 発 現 す る 大 腸 菌 の 溶 解 液（1 ×
PBS）を超音波破砕法に供し、菌体を破砕する。
②前処理を行い精製前サンプルを調製する。
③ PBS で平衡化したレジン 1 mℓを精製前サンプルに添加し、
バッチ法にて反応（4℃、1 時間）させる。
④オープンカラムにレジンを回収し、洗浄バッファー
（20 mmol/ℓ
Sodium Dihydrogenphosphate（pH 7 . 4）, 50 mmol/ℓSodium
Chloride, 10 mmol/ℓ Imidazole）25 mℓでカラムを洗浄する。
⑤溶 出 バ ッ フ ァ ー（20 mmol/ℓ Sodium Dihydrogenphosphate
（pH 7 . 4）, 50 mmol/ℓ Sodium Chloride, 25 - 500 mmol/ℓ
Imidazole）3 mℓで 6 ×ヒスチジン融合 GFP を溶出させる。
⑥各溶出サンプルをスーパーセップ TM エース , 10 - 20 %, 17 well
［コード No. 198 - 15041］にて SDS-PAGE、CBB 染色を行う。
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存 N
H
O
N
HN
HN O
N
N
NH
HN O
N
O
O
N N
NH
O
O
N
HN O
NH
N N
N
HN
O
N
R
DNA 二重らせん構造の表面には深浅 2 種の溝があり、PIPA は Minor Groove :
浅い方の溝に入り込み、DNA の各塩基との間で水素結合を介し可逆的に結合
（ハイペップ研究所提供）
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26
規 格
145-09681 Ni-NTA Agarose HP
10mℓ
（NET 5mℓ） 13,000
遺伝子研究用
141-09683
100mℓ
（NET 50mℓ） 100,000
関連商品
●低コスト
分子量
コード No.
NEW
和光純薬時報 Vol.84, No.2（2016）
［次頁に続く］
ew Products
ラインアップ
品名
構　造
TA- エンハンサークローニングキット
標的遺伝子
出典
γAbu-PyPIPA-01 PIPA-01 Ac-Im-Py-Py-βAla-Im-Py-PyPy-Py-βAla-Py-Py-βAla-Dp
ヒト TGF-β1
1
γAbu-Py-PyPIPA-02 PIPA-02 Ac-Im-Im-βAla-Im-Py-ImPy-βAla-Py-Py-βAla-Dp
ヒトTGF-β1
1
TA クローニング用キットです。ライゲーション用試薬は、
Ac-Im-Py-Im-βAla-Py-Py-Py-γAbu-ImPIPA-03 PIPA-03 Py-Im-βAla-Py-Py-Py-βAla-Dp
ヒトTGF-β1
1
Solution に含まれる「PprA タンパク質」によって、これ
γAbu-Py-PyPIPA-04 PIPA-04 Ac-Py-Py-βAla-Py-Im-PyPy-βAla-Im-Py-βAla-Dp
ラット TGF-β1
2
γAbu-PyPIPA-05 PIPA-05 Ac-Im-Py-Im-βAla-Py-Py-ImPy-Py-βAla-Py-Py-Py-βAla-Dp
ヒト LOX-1
3
Ac-Py-Py-βAla-Py-Py-Im-γAbu-Py-ImPIPA-06 PIPA-06 Im-βAla-Py-Im-βAla-Dp
ラットLOX-1
4
Ac-Im-Py-Py-βAla-Py-Py-Py-γAbu-ImPIPA-07 PIPA-07 Py-Im-βAla-Im-Py-Py-βAla-Dp
ヒトCTGF
5
γAbu-Im-PyPIPA-08 PIPA-08 Ac-Py-Im-βAla-Im-Im-ImPy-βAla-Py-Py-βAla-Dp
TMPRSS2-ERG 6
γAbu-Py-PyPIPA-09 PIPA-09 Ac-Py-Im-βAla-Im-Im-ImPy-βAla-Py-Py-βAla-Dp
TMPRSS2-ERG 6
TGF-β1：進行性腎障害、肝硬変、肺線維症、血管狭窄、皮膚瘢
痕、角膜炎、がん転移などに関与するタンパク質
Lox-1：動脈硬化症に関与するタンパク質
CTGF：血管形成、細胞の遊走や骨形成に関与するタンパク質
TMPRSS2-ERG：前 立腺がんに関与するタンパク質、細胞のが
ん化やがんの悪性度の進行などに影響
Ac：アセチル、Dp：ジメチルアミノプロピル
梱包形態：凍 結 乾 燥 品、 添 加 物 無、100 μg/vial 〜 1 mg/vial
本品は、T ベクターとライゲーション用試薬を組合せた
ニッポンジーン独自のバッファー組成と 10 × Enhancer
まで効率が低いとされてきた TA クローニングを高効率
に行うことができます。
特　長
● PprA タンパク質で高効率なライゲーションが可能
● 30 分間でライゲーション反応が完了
TM
●ECOS
Competent E. coli と組合せることでより迅速に
●ライゲーション反応終了液をそのまま形質転換に使用可能
PprAは直鎖状二本鎖DNAの末端に結合
（資料ご提供：東洋大学 放射線微生物学研究室 鳴海先生）
デ ー タ
■ 各鎖長のライゲーション効率
（別途グラムスケールでの製造も行います）
PIPA は特異的に TGF-β1 発現を抑制し、ラットの腎
障害モデルへの長期投与でも副次的な作用は無く、腎障害
を改善しました。またバルーン傷害血管に一回の投与で血
コロニー数
（個）
応 用 例
A社製品
2,500
100
2,000
80
1,500
60
1,000
40
500
20
0
200bp
500bp
1kbp
3kbp
5kbp
インサートサイズ
管狭窄を有意に抑制します。さらに局所投与でも皮膚肥厚
200bp
500bp
1kbp
3kbp
5kbp
白コロニー率
（％）
メーカーコード
高効率 TA クローニングキット
0
インサートサイズ
性瘢痕、角膜炎などを抑制します。１回の全身投与で１週
間以上、細胞内の核に結合し、ターゲット遺伝子の転写活
A社製品
性を特異的に抑制する極めてユニークな化合物です。マ
ウスでの毒性試験では致死量は 40 mg/kg 以上であり、
20 mg/kg では副次的な作用はありません。
〔参考文献〕
1）Igarashi, J. et al . : PLOS One , 10 , e 0125295（2015）.
2）Matsuda, H. et al . : Kidney Int ., 79 , 46（2011）.
3）Kamei, T. et al . : J. Biomed. Biotechnol ., 2102 , 715928（2012）.
4）Yao, E. H. et al . : Hypertension , 52 , 86（2008）.
5）Wan, J. X. et al . : Biol. Pharm. Bull ., 34 , 1572（2011）.
6）Obinata, D. et al . : Cancer Sci ., 105 , 1272（2014）.
容量・価格はお問合せ下さい。また、標識化・誘導体
化・類縁配列のデザインなども対応可能です。資料のご
要望がございましたらお問合せ下さい。
お問合せ先：[email protected]
…2 〜 10℃保存
…− 20℃保存　インサートサイズ：200 bp, 500 bp, 1 kbp, 3 kbp, 5 kbp
Ligation 反応：本品（16℃, 30 分）、A 社（室温 , 60 分）
TM
TM
Transformation（
6 分間プロトコール）：Ligation 反応液 5 μℓ/
Competent
JM109 100 μℓ → Plating 50 μℓ
各社製品のプロトコールに従ってクローニングを行った。Taq
DNA Polymerase で増幅した各インサートサイズの PCR 産物を
用いて、上記条件でライゲーション反応を行い、本品と A 社製品
のライゲーション効率を比較した。さらに、インサート長 3 kbp
のプラスミドを保有する大腸菌コロニーからランダムに選択し、
コロニー PCR でインサートの確認を行った。
本品は A 社製品と比較して、コロニー数及び白コロニー率におい
て優位性が認められた。また、コロニー PCR による結果から、
本品は選択したすべてのコロニーにおいて増幅が認められた。
コード No.
品　名
316-08271 TA-Enhancer Cloning Kit
メーカー
容量 希望納入価格（円）
ニッポンジーン 25回分
23,000
…− 80℃保存　表示がない場合は室温保存です。その他の略号は、巻末をご参照下さい。
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
和光純薬時報　Vol.84, No.2（2016）
27
未分化維持培養や分化誘導時の品質管理に
ヒトES/iPS 細胞モニタリングキット
本キットは、rBC2LCN を用いて、ヒト ES/iPS 細胞数を推測するキットです。
rBC2LCN は、Burkholderia cenocepacia 由来の BC2L-C レクチンの N 末端ドメインの組換えタンパク質です。
rBC2LCN により認識される糖タンパク質（H-type3 結合ポドカリキシン）はヒト ES/iPS 細胞から培養上清に放出
されます。本キットは、培養上清に放出される糖タンパク質を rBC2LCN- 抗体サンドイッチアッセイで定量的に測定
することで、ヒト ES/iPS 細胞数を推測できます。また、培養上清を測定試料とするため、培養を継続しながらヒト
ES/iPS 細胞の増減を簡便にモニタリングできます。
特 長
参考データ
●ヒト ES/iPS 細胞から分化過程にある細胞の培養上清
■ 分化細胞培養上清へのヒト iPS 細胞培養上清のスパイク実験
を分析することで、ヒト ES/iPS 細胞の増減をモニタ
リング可能
●培養上清（50μℓ）を測定対象とするため、細胞を検
査に消費することなく分析でき、細胞はそのまま培
養を継続可能
● ELISA 法を用いるため、簡便に多検体を処理可能
原 理
ℓ
ヒト ES/iPS 細胞膜上
に存在するポドカリキシ
ンが培養上清中に放出
される。
ポドカリキシン
吸光度
H-type3
ヒト ES/iPS 細胞
rBC2LCN
細胞数
吸光度を測定してヒト
ES/iPS 細胞の増減
を調べる。
プレートに固定化した
rBC2LCNと培養上清中に
含まれるポドカリキシン上の
糖鎖が結合する。
酵素を結合させた分子をポドカリキシンに反応させた後、
酵素反応により発色基質を発色させる。
線維芽細胞の培養上清（血清含有）に添加したヒト iPS 細胞の培養上
清が測定可能か確認した。ヒト iPS 細胞の混合割合を 0 ∼ 20%（0 ∼
2 × 104 cells/mℓ：総細胞数 1 × 105 cells/mℓ）となるように、線
維芽細胞の培養上清へヒト iPS 細胞の培養上清を混合し、本キットに
供した結果、高い相関が得られ、血清及び線維芽細胞存在条件で作製
した培養上清中においてもヒト iPS 細胞の培養上清を測定可能であっ
た。また、線維芽細胞と iPS 細胞の混合試料から得られた近似式より
この条件下でのヒト iPS 細胞の検出下限値※を求めると、170 cells/mℓ
であった。
同様にヒト iPS 細胞の培養上清のみを段階的に希釈し、本キットに供
し、検出下限値を求めると、23 cells/mℓであった。
その他の分化細胞では、ヒト膝軟骨細胞や HeLa 細胞の培養上清を使
用しても同様に測定可能であった。
※検出下限値：バックグラウンドの吸光度平均 + 3.3SD と近似式から
算出した細胞数。
［使用上の注意］
・細胞株、あるいは培地の種類などの培養条件により、シグナル強度と細胞数（cells/mℓ）の関係が異なるため、標準曲線は細胞
株ごと及び未分化維持培養条件ごと、分化誘導培地ごとに作成する必要があります。
・異なる培養条件ではシグナル強度の高低で未分化性を評価することはできません。同じ培養条件で評価して下さい。
・このキットを用いて算出される未分化細胞数と実際の細胞数とは必ずしも一致しません。未分化維持状態及び細胞分化の進行を
モニタリングする一つの指標とお考え下さい。
〔参考文献〕
1）Tateno, H., Onuma, Y., Ito, Y., Hiemori, K., Aiki, Y., Shimizu, M., Higuchi, K., Fukuda, M., Warashina, M., Honda, S., Asashima, M. and Hirabayashi, J. :
Sci. Rep ., 4 , 4069（2014）.
NEW
コード No.
299-78301
品 名
Human ES/iPS Cell Monitoring Kit
規 格
再生医療研究用
容 量
96 回用
…2 ∼ 10℃保存
…− 20℃保存
…− 80℃保存 表示がない場合は室温保存です。
特定
…特定毒物
…毒物
…劇物 …毒薬 …劇薬 危 …危険物 …向精神薬 …特定麻薬向精神薬原料
…化審法 第一種特定化学物質 …化審法 第二種特定化学物質 …化学兵器禁止法 第一種指定物質 …化学兵器禁止法 第二種指定物質 覚 …覚せい剤取締法 毒素等 …国民保護法
掲載内容は、2016 年 4 月時点での情報です。上記以外の法律及び最新情報は、siyaku.com（http://www.siyaku.com/）をご参照下さい。
希望納入価格（円）
96,000
…カルタヘナ法
収載されている試薬は、試験・研究の目的にのみ使用されるものであり、「医薬品」、「食品」、「家庭用品」などとしては使用できません。
記載希望納入価格は本体価格であり消費税などが含まれておりません。
和光純薬時報 Vol. 84 No. 2
2016 年 4 月 15 日 発行
28
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発行責任者 上田 衡
編集責任者 大西礼子
発 行 所 和光純薬工業株式会社
〒 540-8605 大阪市中央区道修町三丁目 1 番 2 号
TEL.06-6203-3741（代表）
URL http://www.wako-chem.co.jp
印 刷 所 共進社印刷株式会社
■和光純薬工業株式会社（Japan） http://www.wako-chem.co.jp
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フリーファックス（日本のみ）0120-052-806/Fax 81-6-6201-5964
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：Tel 49-2131-311-0 / Fax 49-2131-311100
Vol.84 No.2
rBC2LCN はヒト ES/iPS 細胞表面に存在するポドカリキシン上のムチン様 O 型糖鎖である H-type3（Fucα1-2Galβ
1-3GalNAc）に高い親和性を持つため、ヒト ES/iPS 細胞の未分化マーカーとして報告されています。
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