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TECAN社製 マルチ検出モードプレートリーダー Spark 10M
® Spark 10M イメージング機能付マルチモードプレートリーダー SPARK 10M BROCHURE I NCU IS B ON AN AL I AT YS TI TE ON P RO CT 02 IO DET N EC . Engineered with cellular assays in mind Spark 10M アプリケーションと機能 細胞カウントおよび生存率測定 細胞イメージング New Tecan はセルバイオロジー研究の現場で日々直面する課題を解決す べく、新しいプラットフォームとして Spark 10M マルチ検出モード プレートリーダーを開発しました。 細胞密度（コンフルエント）測定 New 細胞培養 蒸発防止 Lid LifterTM 蓋の自動取り外し 加温・攪拌機能付試薬分注 Te-CoolTM 冷却モジュール New 吸光測定、吸光スキャニング 核酸定量（吸光、蛍光） 核酸の純度測定 キュベットポート 蛍光強度測定（FI） SparkControl ソフトウェアにより、ワンクリックで細胞 生存率を測定 時間分解蛍光（TRF） 蛍光共鳴エネルギー転移（FRET）測定 時間分解 −蛍光共鳴エネルギー転移 （TR-FRET）測定 蛍光偏光測定 標識不要の細胞カウントと生存率測定 発光測定（フラッシュ & グロー） Spark 10M の内蔵式セル カウンターが細胞のサイズを測定し、30 秒以内でラベルフリー の細胞カウントと生存率測定を行います。 Alpha Technology 発光スキャン • • • • • マルチカラー発光測定 （BRET1, BRET2 ™ , BRET3, Chroma-GloTM ） SparkControlTM ソフトウェア 柔軟な領域選択による正確で再現性のある細胞カウント ワンクリックで細胞の数、サイズや生存率を測定 視覚的確認のためにセルの画像をエクスポート 低濃度であっても高精度な細胞カウントが可能 Cell Chip（ディスポーザブル細胞カウント用チップ）によるレプリケート処理 SparkControl MagellanTM IQ/OQ サービス（QC Tool） ConnectTM マイクロプレートスタッカー R R T RANSCREENER T RANSCREENER Red FI validated Red TR-FRET validated www.bellbrooklabs.com www.bellbrooklabs.com www.bellbrooklabs.com Far Red FP validated T RANSCREENER R Tecan の Cell Chip を最大 4 枚セットできるチッ プアダプター SparkControl ソフトウェアにより、複数のサンプ ルの平均値を自動算出 SPARK 10M BROCHURE Spark 10M マルチ検出モードマイクロプレートリーダーは、最先端の機能に、優れた使いやすさを組み 合わせたプラットフォームです。多彩な機能と高い性能により、様々なアプリケーションに対応します。 自動細胞イメージングと細胞密度測定 90 80 Confluence % セルベースアッセイでは、信頼性を高めるためマイクロプレート上の各ウェルの測定 結果を均一化する必要があります。その際に問題となるのは、細胞がウェル内でどの 程度増殖しているのかを確認できないことです。 Spark 10M にはマイクロプレートのウェル内の細胞密度を自動測定し、画像化する 機能が搭載されました。 これにより、ユーザーが設定した細胞密度に達するとシステムが自動的に特定の化 合物を加えたり、GFP シグナルを測定したりできるため、結果の信頼性が高まります。 R = 0,98957 100 70 60 50 40 10% 30% 70% 90% 30 20 10 0 0 0,1 0,5 0,6 5000 cells / medium with FCS 600 ■ Spark ■ no GCM 500 400 cell growth [%] 経時的な細胞培養環境を保持 結果に悪影響を与えることなく細胞生存率を向上し、長時間のアッセイを実現 CO2/O2 濃度を個々に調整することによりガスレベルと混合を最適化 測定中でもソフトウェアによりリアルタイムのガス濃度調整が可能 0,4 HeLa 細 胞 がさまざまな密 度に 増 殖するとともに BCA アッセイによるタンパク質定量の値もこれに応 じて増加している。 TM • • • • 0,3 BCA OD セルベースアッセイに最適 Gas Control Module（GCM ）はプレートリーダー内の CO2 と O2 濃度の自動制御が 可能な 2 つの独立したガス導入口を備えています。 0,2 300 200 100 0 0 10 20 30 40 50 60 time [h] Spark 10M プレートリーダーに GCM を搭載した 場合としない場合の細胞生存の比較 蒸発防止 Humidity Casette はリザーバー部とリッドで構成されています。 細胞増殖に均一性を持たせ、セルベースアッセイにおける再現性と信頼性の高いデータが 得られます。 蒸発防止用の特殊なプレートを用意する必要はありません。 自動リッドリフター TM 内蔵の Lid Lifter でマイクロプレートのリッドの取り外しを自動で行うことで、吸光や蛍 光・発光アッセイを簡便化します。 実験中も手作業の介入なしで、試薬が分注できます。また CO2/O2 交換と蒸発防止の機能 にも優れ、長時間にわたるカイネティックアッセイも容易に行えます。 加温・攪拌機能搭載 試薬ディスペンサー インジェクター内の沈殿および塩形成を取り除くことによって一貫性のあるデータを生成します。 ※ 加温・攪拌機能 は独立しており、化合物取り扱いの信頼性と再現性を高めると同時に生 細胞の分注を可能にします。 ※加温（20 ∼ 42℃）/ 攪拌（50 ∼ 1000rpm） 03 04 SPARK 10M BROCHURE Spark 10M の機能性と柔軟性 各種フォーマットに対応 Spark 10M は一般的な ANSI/SLAS 規格のマイクロプレートに対応します。 TM TM また、キュベット、微量測定用 NanoQuant Plate 、ディスポーザブル細胞カウント用チップ Cell Chip 、細胞培養用 フラスコ RoboFlask® に対応します。 超高速吸光測定 Spark 10M は、特許出願中 High Speed Monochromators（HSM）を用いてわずか 5 秒で吸光スペクトルスキャンが可能です。ダイオード アレイのスピードとモノクロメーター の精度や柔軟性を、どちらをも損なうことなく提供します。 超高速 DNA 定量 Spark 10M の High Speed Monochromators（HSM）により核酸とタンパク質の定 量において優れた精度を示します。 • • • • UV（紫外）から NIR（近赤外）までの波長における性能とダイナミックレンジの向上 波長領域 200 ∼ 1000nm でのフルスペクトルスキャンが 5 秒 / ウェル 230 と 260nm の波長正確度が向上したことによる高精度な DNA 定量 直線性が高い OD 領域（0 ∼ 4 OD）による希釈、マニュアルピペッティグステップの 削減 蛍光測定 – Fusion Optics ® Spark 10M はフィルター式の感度、さらにモノクロメーター方式の柔軟性の両方を兼ね備 えた初めてのプレートリーダーです。上方 / 下方蛍光測定において励起側または測定側で フィルター、およびモノクロメーターの 4 つの組み合わせが可能です。 標準蛍光フィルター フィルター機能選択時、フィルターリストより励起側 6 枚、測定側 6 枚選択可能 励起 モノクロメーター 測定 フィルター 励起側フィルタースライド 測定側フィルタースライド SPARK 10M BROCHURE 高性能の発光測定 Spark 10M のマルチカラー発光オプションが測定を最適化します。 3 種類の OD 減衰フィルターによる９桁までのダイナミックレンジで、40 種類の選択可能 なフィルターが BRET1、2、3、Chroma-Glo を含むあらゆる発光測定を可能にします。 マルチカラー発光と発光スキャニングによりアッセ イの性能と柔軟性を向上 高性能の Alpha Technology 検出限界 Detection Limit 5.000 4.500 TM 4.000 [ng/ml Omnibeads] Alpha Technology は AlphaScreen®、AphaLISA®、AlphaPlex から成る、生物 学的相互作用を測定するためのビーズベースのアッセイテクノロジーです。 Spark 10M は励起用の高出力レーザー光源とウェル毎の温度補正機能のための IR セン サーが搭載されているので Alpha アッセイにおける高感度、高均一性、直線性を実現しま す。SparkControl は AlphaScreen、AphaLISA AlphaPlex 用に事前設定されたフィ ルターと、ユーザーにより選択可能なフィルター設定を選ぶことができます。 3,62 3.62 3.500 3.000 2.500 2.000 1,58 1.58 1.500 1.000 0.500 0.000 Spark Spark 温度補正機能 temp. corr. Spark Spark Te-Cool により測定データの精度を向上 3 2.5 2 % CV 大半のプレートリーダーは、装置内部の最低温度を室温より数度高めに設定しています。 そのため季節や地域によって温度が大きく異なることがあり、収集データにばらつきが生じ かねません。また、マイクロプレート上で温度勾配が発生することにより、データが変動し たり精度が損なわれる原因にもなります。 室温 1.5 28 °C 1 0.5 0 0 Spark の Te-Cool モジュールの最大の特徴は安定した結果が得られることです。正確な 室温を設定する必要がなく、ソフトウェアがすべてを管理し、測定チャンバーを設定温度に 保ちます。 5 10 min 15 20 平衡化した温度下でのアッセイは、良好な感度をも たらします。5 分毎に 570nm で吸光測定した値で、 Te-Cool で室温を保った場合と 28℃の場合を比較 しました。 Luminescence [RLU] 信頼性の高いデータを収集するには、温度の安定化が不可欠です。ルシフェラーゼアッセ イなどで酵素反応を読み取る場合も、また温度依存性の Alpha アッセイや生体組織を使っ たカイネティックアッセイの場合も、温度を正確に管理することが必要です。 そこで、冷却モジュール Te-Cool により特定の温度で長時間安定的にアッセイを行える環 境を整えました。 1.400 Ambient +8 °C 1.300 Ambient +4 °C 1.200 Ambient CV=14,6 1.100 1.000 CV=7,7 900 800 700 CV=0,4 600 500 400 0 1 2 3 4 Time [min] 5 6 温度変化の影響を受けやすい酵素活性測定のうち、 発光でのカイネティック測定の CV 値を表しました。 Connect マイクロプレートスタッカー Connect は、1 回のランで最高 50 枚までのマイクロプレートのバッチ処理を自動化でき る多用途マイクロプレートスタッカーです。 SparkControl Magellan ソフトウェアに直接接続できるため、操作も簡単。 ゲノミクスやプロテオミクス、創薬などの幅広いアプリケーションでスループットを向上します。 Connect の特長 • 安定した動作と使いやすさ • 感光性サンプルを保護する遮光カバー付 • 特定のプレートのマニュアル操作も可能 • オプションのバーコードスキャナーを搭載すると、プレートの左右短辺を読み取り • スループットに応じて 30 枚または 50 枚用のプレートカセットを選択 05 06 SPARK 10M BROCHURE 標準 ルーチン作業を簡略化するために設計された SparkControl ソフト ウェアは、 迅速でわかりやすい操作が特長です。また、タッチスクリー ン仕様のインターフェースも搭載可能です。 OR 下方蛍光測定 Tecan 独 自 の Optimal Read（OR） 機 能 により各ウェルを多重 測 定することで CV 値を大幅に抑えます。下方蛍光測定で は、ウェル内およびウェル間の再現性が最 大限に高まります。 Substrate FIRST MEASUREMENT Substrate SECOND MEASUREMENT 高解像度ウェルスキャン 環境条件の調整 ワークフロー作成 各ウェルの細 胞 群の完全なデータを収 集 します。細胞の分布を見やすく画像表示し、 選択した領域全体で平均値の算出も可能で す。 SparkControl ソフトウェアは、リーダー 内 部 の 温 度（18 ℃ ∼ 42 ℃） や CO2/O2 の濃度などのパラメーターを測定中でも簡 単に調整できます。 SparkControl ソフトウェアにより、アッ セイプロトコルに従って処 理ステップをド ラッグアンドドロップしてワークフローを容 易に作成できます。また、ワークフローの 保存や編集が可能です。 高さ自動調整機能 細胞密度測定機能 上方蛍光測定と蛍光 偏光測定の感度を高 めデータの信頼性を大幅に向上させます。 この機能は、使用するプレートサイズやサ ンプルの量、ウェルの形状に関わらず、最 適な測定結果を提供します。 セルベースアッセイのワークフローを簡略化 します。たとえばユーザーが細胞密度を設 定すると、設定密度に達した細胞に化合物 を加えるなどの操作が自動で行われ、細胞 の毒性や増殖、 タンパク質の発現などのアッ セイの信頼性が高まります。 App App App Cell Counting Cell Viability Nucleic Acid Quantitation App App Cuvette Labelleling Effi ciency ワンクリックアプリケーション ワークフローを円滑化し、サンプル調製か ら結果の解析までをこれまでになく短縮し ます。 SPARK 10M BROCHURE 07 ダイナミック レンジの向上 Spark 10M のダイナミックレンジの向上に より低信号でさえも検出できます。この機 能は測定の実行時にゲイン設定を自動調整 し、感度について妥協することなく、低信 号を検出することが出来ます。すべての結 果は自動的に相関し、1 つのデータセット 内に表示されます。 カイネティック アッセイの自動 ゲイン調整 SparkControl MagellanTM は様々な検出モードに対応するデー タ整理・解析ソフトです。 SparkControl Magellan は 機 能 性、 簡便性、安全 性を強化した一 連のツー ルを提供します。 • EIA/ELISA 、エンドポイント、カイネ ティックなどのマイクロプレートベース のアッセイに最適です。 • データ解 析、検 量 線からミカエリス・ メンテン式のようなカイネティックパラ メーター計算まで迅速に行います。 • チュートリアルビデオや実例ファイルに よる簡単操作 • プレート定義エディターによりプレート 配列ファイルのカスタマイズが可能 蛍光測定の飽和状態を避けるために、ゲイ ン設定の自動調整により、カイネティック アッセイのデータ損失を防ぎます。 異なるゲイン設定での測定値は、自動的に 相互に関連付けられ、データセット全体の 評価を可能にします。 SparkControl Magellan は、勾配計算、オン セット及び酵素カイネティックを含む完全なカイネ ティックデータ解析を行うことができます。 SparkControl Magellan ソフトウェ アの一連の高機能 • 定性的および定量的 EIA 解析 • 二点間、直線回帰、非直線回帰、多項 式、キュービックスプライン、Akima、 Logitlog、４および５パラメーターな ど主要な検量線近似式に対応 • 希釈系列や ICx 計算 • データのインポート／エクスポート機能 やサンプル ID のインポート機能 • 勾配計算、オンセット（反応時間）、酵 素カイネティックなどのカイネティック データ解析 • スペクトル計算パッケージ：バックグラ ウンド補正、曲線円滑化、波長選択、 ピーク特定および３D スキャニング SparkControl Magellan はすべての希釈系列 と ICx 計算を処理します。 SparkControl Magellan Tracker SparkControl Magellan standard の利点を提供しつつ、電子記録や電子署名の 機能があり、FDA 規制 21 CFR Part11 に準拠しています。 7 Spark 10M 基本仕様 吸光 発光 370 ∼ 700 nm 光源 専用キセノンフラッシュランプ 波長範囲 波長範囲 200 ∼ 1000nm モノクロメーターは 1nm 毎に調整可 検出限界 OD レンジ 0 ∼ 4 OD ダイナミックレンジ ＞9桁 スキャン速度 200 ∼ 1000nm ≦ 5 秒（1nm step） マルチカラー発光 38 スペクトルフィルター 波長正確度 ＜ 0.3nm 減衰フィルター OD1 、OD2、OD3 波長再現性 ≦ 0.3nm 正確度 260/230nm ＜ 0.08 光源 高出力レーザーダイオード 正確度 260/280nm ＜ 0.07 検出限界 ≦ 100 amol/ ウェル bio-LCK-P；20 μＬ 再現性 @260nm ＜ 0.2％ ４） グロー発光 ≦ 9 pM（≦ 225 amol/ ウェル；25 μ L） フラッシュ発光 ≦ 218 fM（≦ 12 amol/ ウェル；55 μ L） 5） AlphaScreen ≦ 2.5 ng/mL Omnibeads；20 μＬ 正確度 @260nm ＜ 0.5％ 均一性 ≦ 3.0% 検出限界（DNA） ＜ 1ng/ μ L Z' 値 ≧ 0.9 F= フィルター、M= モノクロメーター 最短測定時間 蛍光 光源 波長範囲 8） 96 ウェル：≦ 1 分 専用キセノンフラッシュランプ ※ 励起 230 ∼ 900nm 波長正確度 384 ウェル：≦ 2 分 セルカウンティング 測定 280 ∼ 900nm サイズ 4 ∼ 90 μ m モノクロメーター（励起 / 測定）は 1nm 毎に 調整可 正確度 ± 10%（10 ∼ 30 μ m） 再現性 ＜ 10%（10 ∼ 30 μ m） 励起＜ 1nm 、測定＜ 2nm 細胞濃度 1 × 10 4 ∼ 1 × 107 セル /mL 波長再現性 ＜ 1nm イメージング速度（データ換算含む） ＜ 30 秒 / サンプル オプティカルミラー 標準装備 50% ミラー ダイクロイックミラー（510nm） サンプル数 / ラン 8 サンプルまで ウェル スキャニング 最大 100 ｘ 100 ポイント 最短測定時間 96 ウェル（蛍光）：≦ 13 秒 384 ウェル（蛍光）：≦ 30 秒 検出限界 1） 上方 下方 励起 F/ 測定 F ≦ 0.25 pM（≦ 25 amol/ ウェル；100 μ L） 励起 M/ 測定 F または 励起 F/ 測定 M ≦ 0.35 pM（≦ 35 amol/ ウェル；100 μ L） 励起 M/ 測定 M ≦ 0.50 pM（≦ 50 amol/ ウェル；100 μ L） 励起 F/ 測定 F ≦ 2.5 pM（≦ 0.5 fmol/ ウェル；200 μ L) 励起 M/ 測定 F または 励起 F/ 測定 M ≦ 3.5 pM（≦ 0.7 fmol/ ウェル；200 μ L） 励起 M/ 測定 M ≦ 4.0 pM（≦ 0.8 fmol/ ウェル；200 μ L） 蛍光偏光 300 ∼ 850nm 波長範囲 検出限界 2） 励起 F/ 測定 F ≦ 1.5 mP 励起 M/ 測定 F または励起 F/ 測定 M ≦ 2.5 mP 励起 M/ 測定 M ≦ 3.0 mP 高出力 LED イメージングモード 明視野 対物レンズ 4倍 オートフォーカス レーザーベース 分解能 1.3 μ m/ ピクセル ガスコントロールモジュール 調整濃度 濃度正確度 （CO2） 0.04 ∼ 10%（Vol.） （O 2 ） 0.1 ∼ 20.9%（Vol.） （CO2） ＜ 1.0%（Vol.） （O 2 ） ＜ 0.5%（Vol.） インジェクター シリンジサイズ 選択可能 0.5 mL 、1 mL ポンプ速度 100 ∼ 300 μ L/ 秒 分注ボリューム 5 ∼ 1000 μ L 1 μ L ステップ可変 デッドボリューム ≦ 100 μ L 正確度および精度 ≦ 0.5% at 450 μ L 温度コントロール 時間分解蛍光 検出限界 セルイメージング 光源 室温 ＋ 4℃∼ 42 ℃まで 均一性 ＜ 0.5 ℃ Te-Cool 冷却モジュール 3） 励起 F/ 測定 F ≦ 40.0 fM（≦ 4 amol/ ウェル；100 μ L） 励起 M/ 測定 F または励起 F/ 測定 M ≦ 65.0 fM（≦ 6.5 amol/ ウェル；100 μ L） 励起 M/ 測定 M ≦ 100.0 fM（≦ 10 amol/ ウェル；100 μ L） 温度範囲 ＋ 18 ∼ 42 ℃ 冷却 室温より最大 12℃以下 撹拌 直線、回転、8 の字回転（振幅 / スピード調整可） プレートフォーマット 6 ∼ 384 ウェル NanoQuant Plate、Cell Chip、キュベット、RoboFlask 電源・消費電力 100-120/220-240V AC 50/60Hz 170VA 本体寸法 / 本体重量 494（W）× 395（H）× 557（D）mm 40 kg インジェクター搭載時の高さ / 重量 455（H）mm 44kg ∼ 46.7 kg（最大） Te-Cool 搭載時の高さ / 重量 510（H）mm 50kg 仕様は予告なく変更する場合がございます。カタログに記載された性能値は工場試験時の平均実測値です。 1 ）フルオレセイン 2）@1nM フルオレセイン 3）ユーロピウム 4）144-041 ATP 検出キット SL（BioThema） 5）ENLITEN® ATP アッセイ システム（Promega） 6）PE# 6760620；P-Tyr-100 assay kit 7）PE# 6760626D；Omnibeads 8）温度補正含む Tecan Group Ltd. では本文書において正確かつ最新の情報をご提供するよう最善の努力を尽くしておりますが、誤謬や脱漏が生じる可能性があります。したがって、Tecan Group Ltd. では明示的または暗示的にかかわらず、 本文書における情報の正確性または完全性につき、何らの表明または保証を行うものではありません。また、本文書は予告なく変更する場合があります。本文書に記載された仕様書の技術的詳細および詳しい手順については、テカ ンの担当者までご連絡ください。本パンフレットで取り上げたアプリケーションおよび製品は一部の市場で入手困難な場合がありますので、営業担当者にお問い合わせください。すべて記載された商標は法律で保護されています。こ こに参照された商標とデザインはテカングループ株式会社（スイス Mannedorf ）の商標または登録商標です。全てのリストは www.tecan.com/trademark でご確認ください。リストに含まれていませんが、本明細書中に記載 されている製品名および会社名はそれぞれ所有された商標である場合があります。Tecan は主要諸国における Tecan Group Ltd.（スイス、Mannedorf ）の登録商標です。 ©2016 Tecan Trading スイス 著作権所有 398454J v.3.0 April 2016 6） 7）