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フナコシニュース 2011 年 8 月 1 日号 ● http://www.funakoshi.co.jp/ タンパク質／酵素 エピトープタグ 6 × His タグ融合タンパク質の検出に GFP 融合タンパク質を簡単に単離できるキット 抗 6 × His タグモノクローナル抗体 GFP-Trap-A Kit GFP 結合アガロースビーズを用いたアフィニティ精製によっ て，細胞から GFP 融合タンパク質を単離できるキットです。 特 長 特 長 ◆ 一般的な 6 × His タグ融合タンパク質発現ベクターを用いて産生し た組換え体タンパク質を認識することを確認しています。 ◆ 従来の免疫沈降による分離法で見られるような抗体 H 鎖・L 鎖の混 ◆ ELISA，ウエスタンブロッティング，アフィニティクロマトグラ フィーなどに適用できます。 2 34 56 7 入や非特異的結合などが起こらず，目的のタンパク質を特異的に単 離することができます。 8 ◆ 抗体による免疫沈降法よりも，はるかに高収率です。 6 × His タグ融合タンパク質の検出 市販されている発現ベクターを使用して産生 した 6 × His タグ融合タンパク質を，本抗体 を用いてウエスタンブロッティングにより検 出した。レーン 1，8 は分子量マーカー。レー ン 2 は 6 × His タグを持たないタンパク質を 泳動した。 品 名 ◆ 30 分程度の反応で，GFP 融合タンパク質をビーズに結合させるこ とができます。 NEW ◆ クロマチン免疫沈降法（ChIP：Chromatin Immunoprecipitation） をはじめとした，様々な用途に使用できます。 ◆ 目的の GFP 融合タンパク質と相互作用するタンパク質の探索などに も有用です。 ◆ 粒径：∼ 80 μm メーカー 商品コード 包装 / 価格（￥） Anti-6-His, Mouse-Mono (H21-5)〈Anti-6×Histidine〉 BDL F008 100μg / 25,000 性状：APu，適用：ELISA, West 抗 GFP 抗体 GFP-Trap-A (monoclonal)(polyclonal) I FT B I FT B I FT B 250 150 100 72 タンパク質／酵素 エピトープ 36 28 17 GFP 融合タンパク質を簡単に固定できるプレート 11 GFP-multiTrap SDS-PAGE 36 28 ウエスタンブロッティング GFP を 捕 捉 す る タ ン パ ク 質 （GFP-Trap） が 固 定 さ れ た 96 ウェルフォーマットの黒色プ レートです。DNA，RNA，ペプ チド，タンパク質などが結合し た GFP 融合タンパク質を簡便か つ迅速に固定でき，そのまま各 種アッセイに使用できます。 本製品で精製できる GFP および GFP 改変タンパク質 適 合 wtGFP, eGFP, YFP, eYFP 不 適 CFP, eCFP 使用文献 キット内容 ● Wash-buffer ● Dilution-buffer ● Elution-buffer ● GFP-Trap-A ● RIPA-buffer 品 名 ◆ 非特異的な結合や， 固定した GFP 融合タンパク質の変性はありません。 メーカー 商品コード ◆ 遠心操作は必要ありません。 GFP-Trap-A Kit, for GFP Fusion Protein Immunoprecipitation (20 tests) CHT gtak-20 1 kit / 77,000 B ◆ タンパク質−タンパク質間相互作用，タンパク質− DNA 間相互作用， タンパク質−ヒストン尾部ペプチド間相互作用などの解析に有用です。 110801s_p23_k_n_i.indd 23 ■ GFP 結合ビーズ別売品 GFP-Trap-A CHT gta-20 ◆ ハイスループット解析にも適しています。 1 plate / 36,000 5 plates / 142,000 包装 / 価格（￥） 20 tests / 61,000 250μg / 40,000 ■ GFP 結合タンパク質 GFP-Trap, Free Protein CHT gt-250 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ どのアッセイに使用できます。 ● Lysis-buffer 試薬 ◆ 底面が透明な黒色プレートのため，比色法，化学発光法，蛍光法な お問い合わせ先 Webby, C. J., et al., Science , 325 (5936), 90 ∼ 93 (2009). Rogowski, K., et al., Cell , 137 (6), 1076 ∼ 1087 (2009). 特 長 96 reactions 480 reactions 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です アッセイ GFP 発現細胞から抽出したタンパク質画 分 を，GFP-Trap-A Kit ま た は 従 来 の 抗 GFP 抗体による免疫沈降で精製した後， SDS-PAGE およびウエスタンブロッティ GFP ン グ を 行 っ た。GFP-Trap-A Kit に よ り Ic 単離した画分は，非特異的産物が少なく， GFP を高効率かつ特異的に単離している ことがわかる。 I：精製前のライセート FT：精製時のフロースルー画分 GFP B：精製画分 hc：抗体 H 鎖 lc：抗体 L 鎖 hc hc 56 New GFP-multiTrap CHT gtp-96 CHT gtp-96 タンパク質／酵素 ◆ N 末端側に His タグのついた融合タンパク質を認識します。 1 精製 抗 体 抗体 エピトープタグ 23 2011/07/15 15:18:26