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膣内細菌の臨床細菌学的研究 第3報 婦人の膣より分離 したB - J
171 昭 和56年3月20日 膣内細菌の臨床細菌学的研究 第3報 婦人の膣 よ り分離 したB群 溶連菌 の薬剤感受性成績 順 天 堂 大 学 医 学 部 臨 床 病 理 学 教 室(指 導:小 酒 井 望 教 授) 大 橋 浩 文* (*現 在,中 央 鉄 道 病 院 産 婦 人科) (昭和55年10月14日 受 付) (昭和55年11日 受 理) Key words: Antibiotic susceptibility, Group B streptococci, Serotype, Minimal inhibitory concentration (MIC) 要 旨 前 報1)に お い て,妊 婦 及 び非 妊 婦 の腔 内 に お け るGBSの 今 回腔 よ り分 離 され たGBSに 対 象 は,中 た1)が,こ 準 じ憾 検 出 率 及 び血 清 型 別 を検 討 した成 績 を報 告 した が, 対 し,各 種 薬 剤 感 受 性 試 験 を 行 い,さ 央 鉄 道 病 院 産 婦 人 科 外 来 患 者301名 で,こ の うち の46株 に つ い て最 小 発 育 阻 止 濃 度(MIC)を 天 平 板 希 釈法 に よ り,接 種 菌 液 は108CFU/mlを らに血 清型 別 に 薬 剤 耐 性 を 検 討 した. の うち51名 か らGBSが 分 離 され そ の血 清 型 を検 査 し 測 定 した.方 法 は,日 本 化 学 療 法学 会標 準法 に 用 い,供 試 薬 剤 はPc-G,CER,TC,CP,EM,LcM の6剤 で あ る. GBS46株 のMICの 成 績 は,PC-G,CERのMICは で は17株(37.0%)に50μg/ml以 μg/ml,LcMで 上,CPで は1株(2.2%)に100μg/mlの す べ て0.05μg/ml以 は4株(8.7%)に25μg/m1以 各種 薬 剤 耐 性 の 組 合せ と血 清 型 との比 較 検 討 で は,CP単 は1株(2.2%)に12.5 独 の耐 性 はIIIR型1株,TC単 の 他1株 に,TC・CPの 三 剤 耐 性 はR型1株 上,EMで 耐 性 菌 が 認 め られ た. 株,IIIR型2株,Ic型1株,R型1株,そ TC.EM.LCMの 下 と感 受 性 が 高 く,TCのMIC に認 め られ た.い 83.3%,R型66.7%,Ia型57.1%,Ib型0%,Ic型11.1%,III型10%と 独 で はIa型8 二 剤 耐 性 はIIIR型2株,III型1株 に, ず れ か の薬 剤 に 耐 性 を 示 す血 清 型 の頻 度 は,IIIR型 血 清 型 に よ る耐 性 化 の差 を認 め た. 新 生 児 重 症 細 菌 感 染 症 と くに 敗 血 症,髄 膜 炎 の 原 因菌 と して,近 年 ま でGram陰 れ て い た が,最 近,B群 性桿菌が重視 さ 溶 連 菌(以 下GBSと 略 血 症 及 び 髄膜 炎 は抗 生 物 質 の進 歩 した 現 在 で もな お か つ 難 治 性 で,新 生 児 死亡 の 重 要 な 原 因 で あ り,ま た 治 癒 して も後 遺症 を残 しやす く,大 き な す)の 重 要 性 が に わ か に注 目さ れ る よ うに な り, 問 題 点 を 有 して い る. 今 日,欧 米 で はE.coliと 前 報 に お いて,妊 婦 及 び 非 妊 婦 の腔 内 に お け る GBSの 検 出 率 及 び 血 清 型 別 を 検 討 した成 績 を報 共 に あ る い は よ り以 上 に 重 要 な もの とな つ て きた.と ころ で,新 生 児敗 別 刷 請 求 先:(〒151)渋 谷 区代 々 木2-1-3 中 央 鉄 道 病 院産 婦 人 科 大橋 告 した が,今 回腔 よ り分 離 され たGBSに 浩文 各種 薬剤 感受 性試 験 を行 い,さ 対 し, らに 血 清 型 別 に 薬 172 感染症学雑誌 剤 耐 性 を 検 討 した.な 報 告 で あ り,治 お,こ 療 法 及 び 予 防 法 に 対 す る2,3の (1) 考 察 を 加 え 報 告 す る. I. 対 象 は,前 分 離 さ れ,そ の うち の46株 C)を 対象及び方法 で あ り,こ の うち51名 か ら, ,こ 小 発 育 阻 止 濃 度(MI たCERに 以 下 で あ り,耐 下 です べ て発 育 が 阻 止 性 菌 は認 め られ なか つた 。 TCのMICは,0・39μg/mlに 50μg/ml以 につ の 分 布 を 検 討 した と こ つ い て もMICは0.025μg/m1 上 の 耐 性 菌 が17株,37 CPのMICは 本 化 学 療 法 学 会 標 準 法 に 準 じた 寒 天 平 板 希 釈 法 に よ りMICの 液 は108CFU/mlを さ れ,ま 績 ピ ー クを 有 し, .0%に 認 め られ た。 測 定 した . 方 法 は,日 測 定 し,そ ろ,PC-Gは0・05μg/m1以 の 血 清 型 を 検 査 し た1)が に つ い て,最 成 第3号 婦 人 の 膣 よ り検 出 さ れ たGBS46株 い てMICを 報 で 述 べ た よ うに 中 央 鉄 道 病 院 産 婦 人 科 外 来 患 者301名 GBSが II. れは本邦で初めての 第55巻 測 定 を 行 つ た.接 用 い,供 試 薬 剤 はPenicillin G(PC-G),Cephaloridine(CER) ,Tetracycline (TC),Chloramphenicol(CM),Erythromycin (EM),Lincomycin(LCM)の6剤 種菌 25μg/m1の ,1.56μg/mlに EMのMICは,0.05μg/mlに 12.5μg/mlの ピ ー ク が あ り, 耐 性 菌 が4株,8.7%に 認 め られ た . ピー クを 有 し, 耐 性 菌 が1株,2 .2%に 認 め られ た. ま た,LCMのMICは,0.10μg/m1に で あ る. が あ り,100μg/mlと ピー ク い う高 いMICを 呈 す る耐 Table 1 Drug Susceptibility of Group B Streptococcus isolated from Vaginal Discharge (N=46) ( Table 2 Drug Resistant Pattern and Serotypes of Group B Streptococci isolated from Vaginal discharge (N=46) )=% 173 昭 和56年3月20日 性 菌 が1株,2.2%に (2) 認 め ら れ た(Table 各 種 薬 剤 の 耐 性 の 組 合 せ と,血 比 較 検 討 した と こ ろ,CP単 1株,TC単 17%と,1型 1). 清 型 とを ら6)は,分 の 他1株 に認 め ら TC・CPの 二 剤 耐 性 は,IIIR型2株,III型1株 に 認 め られ,TC・EM・LCMの の66.7%,つ III型は10%と の57.1%と は0%,Ic型 低 く,血 高 清 型 に よ る薬 剤 耐 性 の 差 が 考 案 幼 若 乳 児 に お け る 敗 血 症 お よび 化 膿 性 髄膜 炎 で あ 症 の 時 期 に よ り2型 に 分 け ら れ る.生 日 以 内 に 発 症 す る"earlyonset"type(以 敗 血 症 を 主 と し,呼 発 作 で 発 症 し,Ia型 離 さ れ るGBSの 後数 下早発 吸 障害 や 無 呼 吸 菌 に よ る こ と が 多 く,患 か ら 分 離 さ れ るGBSの 児 菌 型 と 母 親 の 産 道 か ら分 菌 型 と が 一 致 す る こ と か ら,母 児 間 の 垂 直 感 染 に よ りお こ る と考 え ら れ て い る. ま た,生 後1∼2週 type(以 下 遅 発 型 と 略 す)は 以 後 に 発 症 す る"lateonset" 主 にIII型 菌 が 分 離 さ れ,出 獲 得 した 菌 が,後 が,他 髄 膜 炎 を 主 と し て, 生時に母体の産道か ら に 病 原性 を 示 す 可 能 性 もあ る の新 生 児 や 保 育 に あ た る看 護 婦 や 病 院 勤 務 者 お よび 母 親 か らIII型菌 が 分 離 さ れ る こ と が 多 く,水 非 常 に 高 い の に く ら べ,遅 20∼40%4)と 低 い.し か し,神 亡 率 が50∼90 発型 の死 亡 率 は 経学的な後遺症を 残 す 危 険 は 他 の 細 菌 性 髄 膜 炎 と 同 じで,米 4.4∼33%4)と 報 告 さ れ て お り,本 国では 邦 で も何 らか ら2)は1型 児 よ り分 離 さ れ たGBS 人 の 腔 よ り分 離 さ れ たGBSに 対 す る報 告 は 他 に 見 当 らな い. 舘 石 ら7)は6患 テ ス トを3濃 児 よ り分 離 し たGBSの 感受性 度 デ ィ ス ク 法 に て 行 い,Penicillin, Ampicillin,Cephalosporine系 抗生剤 には 全例 良 好 な 感 受 性 を 示 し た が,Kanamycin,Streptomycin,Tetracyclineに 耐 性 を 示 す ものが 多 か つ た と 報 告 して い る. 著 者 の 検 討 で は,婦 GBSの 人 の 膣 よ り分 離 さ れ た 各 種 薬 剤 に 対 す るMICの 石 ら と 同 様,PC-G,CERに を 示 し,耐 児 に 対 す る 治 療 に は,高 は い感 受 薬 剤 を 第 一 選 択 とす べ き で 来 の 使 用 基 準 は,PC-Gを10万 日,10∼14日 に 至 り,髄 は よ びLCMに 耐 性 を 示 した. した が つ て,患 あ り,従 は全 例 良好 な感 受 性 は8.7%,EMお 各 々2.2%が 分 布 か ら,舘 性 菌 は 認 め ら れ な か つ た が,TCに 37.0%,CPに 間 と さ れ て き た8).し 単 位/kg/ か し,1976年 膜 炎 治 療 中 の 再 燃 ま た は 再 発 例 の報 告 が 相 次 ぎ9)10),従 来 よ りの本 症 抗 生 物 質 基 準 は 修 正 を 迫 ら れ る こ と と な り,Mc PC-Gを15∼20万 の 後 遺 症 を 残 した と い う報 告5)が 多 い. ま た,菌 対 し, 各種 薬剤 感受 性試 験 を行 い さ らに血 清 型 別 に 薬 剤 性 を も つPeniciilin系 平 感 染 も 疑 わ れ て い る2). 早 発 型 が 電 撃 的 な 経 過 を と り,死 %3)と 人 の 膣 よ り分 離 さ れ たGBSに に 対 す る 薬 剤 感 受 性 試 験 は 報 告 が あ る が7)8)9),婦 染 症 の 最 も重 要 な 病型 は 新 生児 お よび 型 と 略 す)は 核 白血 球 の貧 食 能 が 低 い 耐 性 の 検 討 を 行 つ た が,患 III. り,発 染 菌 量 が 多 く,多 場 合 に の み 症 状 が 進 行 す る と 述 べ て い る. 今 回,婦 は11.1%, 認 め ら れ た. GBS感 菌 の感 染 を 受 け る とほ と III型に 対 し て は 母 児 と も に 貧 食 能 を 有 し て い る た め,感 が 最 も 高 く83.3%, い でIa型 れ に 対 し,Ib型 欠 い ん ど 反 応 す る こ と な く急 速 に 症 状 が 進 行 す る が, 度 を 検 討 し た と こ ろ,IIIR型 く,こ 経胎盤性 に対 す る多 核 白血 球 の貧 食 能 が 欠 如 し て お り,Ia型 ず れ か の薬 剤 に 耐 性 を示 す 血清 型 の頻 次 にR型 の90∼95%は 型に に 対 す る液 性 抗 体plasmafactorを て い る た め,Ia型 三 剤 耐 性 は,R に 認 め られ た. ま た,い 娩 時 の 母 体 血 と 膀 帯 血 のGBS各 対 す る 免 疫 能 を 検 討 し,児 でIa型 れ た. 型1株 に よ る 早 発 型 の 予 後 が 悪 く,III型 に よ る 遅 発 型 の 予 後 が 比 較 的 良 い 原 因 に つ い てKlesius 独 の 耐 性 は,IIIR型 独 の 耐 性 は,Ia型8株,IIIR型2 株,Ic型1株,R型1株,そ Ia型 の 病 原 性 が 強 い こ と を 述 べ て い る. Cracken11)は 単 位/kg/日 と従 来 の 使 用 量 よ り 型 と予 後 の 点 か ら み る と,Franciosi 増 量 す べ き と強 調 して い る 。 ま た,Truogら10)は で は 死 亡 率 が100%近 10∼14日 く,II,III型 では 間 で 投 薬 を 中 止 す る こ と は 危 険 で,少 な 174 感 染 症学 雑 誌 く と も3週 間 のPC剤 ,Broughtonら9)は,PC,ABPC,KMの 単 独 使 用 時 とPC+KM併 検 討 し,PC+KM併 各 用 時 のMIC,MBCを 著 し く小 さ くな る と 共 に 両 者 が 相 接 近 す る と し てPC+aminoglycosideの 相 乗 作用 が あ る と報 告 し,Schaufら12)もin に 対 す るPC-G,ABPC,GMの 殺 菌 効 気 を 検 討 し,GM単 vitroでGBS 見 出 し た.し cillin単 の 予 防 に分 け て考 慮 す る必 要 が あ り,抗 生 物 質 の 予 防 的 な投 与 と抗 生 物 質 に よ らな い予 防法 な どに っ い て述 べ る. 早 発型 の場 合,経 過 が早 く,ほ とん ど治 療 に反 用 時 に はABPC 確 な 方 法 は 未 だ な い.そ の た め,Franciosiら2)は 母 親 に 予 防 的 にPC-Gを 独 で の 治 療 効 果 が 思 わ し くな か つ た り, る い は 最 初 か ら両 者 の 併 用 膣 内 か らGBSが 抗 生 剤 に 関 し て は, MICでCephaloridine(CER)はPC系 抗生剤 同 様,高 い 感 受 性 を 有 し,ま fazolinも 比 較 的 感 受 性 を 有 す る.し か し,Fisher く,治 療 後 もGBSが 抗 生 物 質 で 根 絶 され に く 体 内に 潜 在 しつ づ け,再 発 の点で 産1,000人 当 り2∼4人2)16)程 度 で あ り,母 親 の 液 へ の 移 行 が 低 い と い わ れ る が,遊 濃 度 だ け で もCERよ この 予 防的 抗 生 剤 投 与 に 関 して,Predesら15)は ン パ ク結 合 率 が 高 膜 炎 の 治 療 に は 不 適 当 で あ る と い う.こ 比 し,タ 養結 果 の判 定 ま で使 用 す る こ とを す す め て い る. を お こす 可 能 性 が あ る こ とを 報 告 して い る. 一 方 ,欧 米 に お け るGBS感 染症の発生率は生 髄 液 へ の 移 行 と 腎 毒 性 の 面 で,髄 CefazolinはCERに 検 出 さ れ た場 合 に は,そ の新 生 人 体 に定 着 したGBSは たCephalothin,Ce- 母親 の 児 に血 液 培 養 そ の他 の培 養 を行 い直 ち に抗 生 剤 を 投 与,培 つ ぎ に,Cephalosporin系 投 与 して有 効 で あつ た と 報 告 して い る.ま た,McCrackenら14)は た はAmpi- が 勧 め られ る. く,髄 え る.実 際 の対 策 上,垂 直 感 染 の予 防 と水 平 感 染 応 す る 暇 もな く死亡 す る例 が多 く,早 期 発 見 の 明 た が っ て,Penicillinま ら13)はCERは 染 症 の 予 防 とい う面 で考 察 を 加 発 育 抑 制 な らび に しい相 乗 作 用 の あ る こ とを 再 発 が 起 き た 場 合,あ 薬 剤 で の 治療 が必 要 で あ る. 独 で は 全 く効 果 が な い に もか か わ らず,ABPC+GM併 単 独 使 用 時 に 比 し,著 て 薬 剤 耐性 の 関連 か ら興 味 深 く,耐 性 を もた な い 次 に,GBS感 用 時 は 単 独 使 用 時 に 比 し, MIC,MBCが 第3号 %と 薬 剤 耐 性 が少 な か った の は,菌 型 と予 後 そ し の 非 経 口 投 与 と そ の 後2週 間 の 十 分 な 経 過 観 察 が 必 要 で あ る と 述 べ て い る. 一方 第55巻 離血 中 り高 く持 続 も長 く,腎 毒 性 が 少 な い た め 大 量 投 与 が 可 能 で,新 腔 か らの検 出率 と発 病 と の関 係 に つ いて は1%程 度 と低 い ことか ら,妊 婦 に 対 す る予 防 的 投 薬 は 実 生 児化 膿 性 髄 際 的 で な い と反 対 す る意 見 もあ り16),予 防 的投 与 膜 炎 の 治 療 に 今 後 有 望 な 薬 剤 で あ る と考 え ら れ の面 で の抗 生 物 質 使 用 に つ い て は 今後 十 分 な検 討 る. を 要 す る もの と考 え られ る. 著 者 の 検 討 で は,EM,LCMの つ と 少 な か つ た も の の,TC,CPで く,治 ず は耐 性 株 が多 療 の 第 一 選 択 剤 と し て は 不 適 当 と考 え る. い ず れ に せ よ現 在 の と こ ろ,GBS感 系 薬 剤 が 最 も 有 効 と考 え ら れ,そ 膿 性 髄 膜 炎 が 少 な くな い 以 上,PC単 も,複 耐 性 菌 は1株 数 の 抗 生 物 質 の 大 量 使 用,長 染 症 に はPC の病 型 と して化 独投 与 よ り 期 使 用 が,よ り有 効 と 考 え ら れ る. 今 回,GBSの 血 清 型 と薬 剤 耐 性 と の 関 係 を 検 後 の 悪 い 早発 型 の 原 因 とな る こ との が57.1%と の母 児 間 の垂 直 感 染 を 防 ぐこ とを 提 言 し,Wald ら18)は新 生 児 の膀 部 処 置 を厳 重 に して 感染 を 予 防 す べ き と報 告 して い る.Steereら19)は,遅 発型 が 新 生 児 室 に 勤 務 す る医 療 従 事 者 や 母 親 か らの 水 平 感 染 の可 能 性 が 強 い た め,医 療 従 事 者 や 母親 の 十 分 な手 洗 い の励 行 を す す め て い る.以 上,GBS 討 した が,予 多 いIa型 抗 生 物 質 に よ ら な い 予 防 法 と して,Franciosi ら17)は出産 時 の産 道 の 十分 で 適 切 な 消 毒 がGBS 薬 剤 耐 性 が 多 く,比 較的予 後 の 良 い 遅 発 型 の 原 因 と な る こ と の 多 い 皿型 が10 感 染 症 の 予 防 手 段 と して の消 毒 の 有用 性 の報 告 が み られ る. また,Bakerら20)は 前 述 の よ うに母 親 が抗 体 を 欠 くこ とが 本 症 発 症 の 要 因 で あ る6)20)なら,多 糖 175 昭 和56年3月20日 体 ワ ク チ ン に よ る 母 体 の 免 疫 も理 論 的 に は 有 効 で あ ろ う と述 べ て い る.今 後,こ の方 面 か らの検 討 も重 要 な 課 題 で あ ろ う と考 え ら れ る. IV.結 論 婦 人 の 膣 よ りGBSを し,各 分 離 し,血 7) 清型 を 検査 種 薬 剤 感 受 性試 験 を 行 い さ らに血 清 型 別 に 薬 剤 耐 性 に つ い て 検 討 した と こ ろ,GBS(46株) のMICの 成 績 で は,PC-G,CERのMICは 低 く全 例 高 い 感 受 性 を 示 し た が,TCで CPで は8.7%,EMで は37.0%, は2.2%,LCMで は2.2% に 耐 性 株 を 認 め た. 血 清 型 別 に み た各 種 薬 剤 へ の耐 性 を 示 す 頻 度 は,IIIR型83.1%,R型66.7%,Ia型57。1%と 高 く,Ib型0%,Ic型11.1%,III型10%と く,血 低 清 型 に よ る 耐 性 化 の 差 を 認 め た. 稿 を 終 るに あ た り,種 々御 助言,御 た 山 梨 医 大 微 生 物 ・山 田 俊 彦 助教 授,実 援助 をいただい 験材料 の 提供 な ら び に 御 協 力 を い た だ い た 中 央 鉄 道病 院 産 婦 人 科 ・ 長 野 正 男 主 任 医 長,種 々御 助 言 を い た だ き,検 査 に御 協 力 を い た だ い た 順 天 堂 大 中 央 検 査 室 ・小 栗 豊 子 氏, 抗 血 清 の分 与 を い ただ き,型 別法 の 御指導を 賜 った神 奈 川 衛 生 研 究 所 ・宮 本 泰 博 士 に深 く感 謝 い た しま す. な お,本 論 文 の 要 旨 は 第29回 日本 感 染 症 学 会 東 日本 地 方会 総 会 に お い て発 表 し た. 文 献 1) 大 橋 浩 文: 膣 内 細 菌 の 臨 床細 菌 学 的研 究. 第2 報. 妊 婦 及 び 非 妊 婦 の膣 内 に お け るB群 溶 連 菌 検 出率 の 検 討. 感 染 症 誌, 投 稿 中. 2) Franciosi, R. A., Knostman, J. D. & Zimmerman, R. A.: Group B streptococcal neonatal and infant infections. J. Pediatr., 82: 707 718, 1973. 3) Vollman, J. 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Clinical and Bacteriological Study on Microbial Flora in the Vagina (3) Antibiotic Susceptibility of Group B Streptococci Isolated from the Vagina of Women Hirofumi OHASHI Department cf Clinical Pathology,Juntendo University, School of Medicine (Director: Prof. Nozomu KOSAKAI) In my previous paper, the isolation rates of group B streptococci (GBS) in the vagina of pregnant and non-pregnant women and the serotypes of GBS isolated were reported. The present study was per- formed with the antibiotic susceptivility of 46 strains isolated from the vagina of the same women as prepreviously reported. Measurements of antibiotic susceptibility to PC-G,CER,TC,CP,EM,LCM were determined as the minimal inhibitory concentration (MIC) by an agar dilution method and then the relationship of serotype and resistant pattern were studied. The results were as follows. All the strains were found sensitive to both PC-G and CER with the MIC value below 0.05 ml. 17 strains (37.0%) were resistant to TC with the MIC value above 50 tg/ 4 strains (8.7%) were resistant to CP with the MIC value above 25 ti.g/ml. 1 strain (2.2%) was resistant to EM with the MIC value as large as 12.5 tc.g/mland 1 strain (2.2%) was highly resistant to LCM with the MIC value as large as 100 ug/ml. The characteristics of the distribution of resistant pattern in relation to serotypes were as follows. CP-single resistance distributed IIIR,1 strain; TC-single resistance Ia,8 strains; IIIR,2 strains; Ic ,1 strain; R,1 strain; others, 1 strain; TC . CP resistant strains were IIIR,2 strains; III,1 strain; all of the TC. EM . LCM resistant strain was R,1 strain. The distribution frequency of each serotype that was resistant to any antibiotics was as follows. I I IR,83.3 % ; R,66.7%; Ia,57.1 % ; Ib,0% Ic,11.1 % ; 111,10%. Thus the differences of resistant patterns by the serotypes have been found.