コバルトプロトポルフィリンの抗腫瘍作用について

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金沢大学十全医学会雑誌 第67巻 第3号 395−398（1961）
コバルトプロトポルフィリンの抗腫瘍作用について
㌧
皿．コバルトプロトポルフィリンの腫瘍細胞形態に及ぼす影響
金沢大学医学部第二病理学教室（主任 石川大刀雄教授）
佐 古 英 二
（昭和36年10月3日受付）
コバルトプロトポルフィリン（以下COPP）の抗腫
蕩作用，体内分布，腫瘍へのとりこみなどについて前
報1）2）でのべた．ここでは，COPPの腫瘍細胞形態に
図1 腹水腫蕩細胞密度に及ぼすCOPPの影響
×106（個）
300
及ぼす影響を検索した結果を報告する．
、 実験材料と方法
200
実験動物にはdd系ハツカネズミ（体重18∼209
♂）及び雑系ダイコクネズミ（体重80∼1209＄）を
100
●
用い，腹水腫蕩としては，エールリッヒ癌，結節型腫
瘍としては吉田肉腫を用いた．
ハツカネズミ腹腔内の腫瘍細胞数，細胞型並びに細
0 5 10
胞形態をしらべるに際しては，ガラス毛細管で腫瘍細
一。一＝COPP投与
胞を採集した．このとき，出血性の腹水はのぞいた．
一〇一：無処置
縦軸：腫瘍細胞数（1m1当り）
横軸3腫瘍細胞移植後の日数（日）
細胞型等の検索は，腹水塗抹後メタノール固定，メ
15（日）
イ・ギムザ染色を行った．
腫瘍細胞数は，Thoma−Zeiss型の血球計算盤を使
件では，個体差をこえるだけ十分有意な値で示され
用して測定した．
た．
結節型吉田肉腫細胞に及ぼす影響をしらべるに際し
2）エールリッヒ癌細胞型に及ぼすCOPPの影響
ては，移植9日及び14日後の腫瘍を切除し，これを
ついでエールリッヒ癌の細胞型組成に対するCOPP
10％中性ホルマリン固定・パラフィン切片，ヘマトキ
の影響をしらべてみた．まずエールリッヒ癌細胞型を
シリン・エオジン染色として検索した．
沢口3＞にほぼ従って以下の3型に分類した．
工型……直径12・卵以下で，核がほぼ中央に存在
実 験 成 績
し，細胞質が乏しい．
1．腹水腫瘍細胞に及ぼすCOPPの影響
1）腹水腫瘍細胞密度に及ぼすCOPPの影響
皿型……直径12．0∼15．鉢で，核はしばしば偏在
工一ルリッヒ癌細胞106個をハツカネズミ3匹の腹
皿型……直径15．0“以上，細胞質は最も多く，核
腔に接種し，3時間後にCOPP 5mg／kgを後肢心内に
は常に細胞の一方に偏よつている．
投与し，7日間1日1回投与をくりかえした場合，腹
水1m1あたりの癌細胞数の変動は図1のようになる．
実験条件は前述と同様とし，細胞数測定後，塗抹染
数値は3匹平均であり，対照は無処置の腹水癌3例平
均値である，
く1000個の腫瘍細胞を分類した，得た％から復水1m1
中の各型細胞数を計細し，3例平均して図示すると図
即ち，COPP投与は，腹水単位容積あたりの癌細胞
2のようになった．
数の低下を起こさせている．このことは筆者の実験条
これからCOPP投与が腫瘍細胞型に著明な変動を
する．細胞実は1型より多い．
色標本について，細胞境界不明化した変性細胞をのぞ
On the Anti−tumor Effect of Cobaltiprotoporphyrine． II工The Ef〔ect of Cobalitiprotoporphy−
rin on the Morphology of Tumor Cells． Eiji Sako， Department of Pathology（Director 3
Pro￡T． Ishikawa）， School of Medicine， University of Kanazawa．
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佐
古
起こさせることが明らかである．とくに接種後7∼11
COPPの腫瘍細胞形態に対する最も直接的且つ効果
日の腹水における工臨細胞の比率を低下させ，対照13
的な作用を見るために，エルリッヒ癌（腹水型）の腹
日目腹水における皿型細胞の増加を強く低下させてい
腔内にCOPP及び対照物質を大量投与して，細胞形
る．
態の変化を観察した．
3）エールリッヒ癌細胞の形態に及ぼすCOPPの
106個のエールリッヒ癌細胞接種後，3時間目より
それぞれの物質を1日1回7日間連続投与し，8日目
影響
に腹水をとって塗抹，メイ・ギムザ染色標本とした．
図2 COPP投与による腹水腫瘍細胞型の変動
1型の変動
xコ｛P（個）
kgを投与した．
り
＼／
”
1回投与量はCOPP 40mg／kg，対照物質としては，
フ。ロトポルフィリン36mg／kg，硫酸コバルト18mg／
COPP投与では，前記細胞型分類における1型細胞
（直径12μ以下）に相当する大きさの腫瘍細胞は強い
核変化を起こし，多型核化している．（写真3）
より大型の皿型，皿：型細胞の出現は著しく乏しい
5
む
が，それらには，ほとんど著明な変化が認められな
い．また赤血球塩嗜に基性の粗大頼粒乃至糸状構造が
現われ，あたかもJolly小体の如き像を呈するものが
051015（目）
一●一＝COPP投与
一〇一＝無処置
しばしば認められる．
腫瘍細胞胞体内にも嗜塩基性の粗大穎粒がしばしば
認みられるが，それとは別に細胞質がビマン性に黄色
縦軸：腫瘍細胞数（1m1当り）
を呈し，明らかにCOPP摂取を思わせる腫瘍細胞
横軸＝腫瘍細胞移植後の日数（日）
が，かなり認められた．
プロトポルフィリン投与では，工型細胞中直径8∼
皿型の変動
1い程度の小型腫蕩細胞の出現は乏しく，また細胞核
x109（佃）
の多型核化はほとんど認められない．多数存在する
10
皿，皿型細胞にも，ほとんど変化はない．ただしばし
む
／
ば細胞質にポルフィリンに由来すると思われる暗室褐
色の粗大穎粒を含む細胞が出現した．
硫酸コバルト投与では，COPP投与の類似の所見が
5
認められたが，工型細胞中小型（直径8∼10“程度）
細胞の出現は乏しく，多型核化した細胞の数もCOPP
の場合に比して乏しい．多数存在する豆，皿：型細胞に
は，ほとんど認められるほどの変化はない．
o
5
15（日）
ユo
COPPの溶媒である燐酸緩衝液を投与した群または
無投与群では，1型細胞中の小型細胞出現はさらに乏
皿型の変動
しく，また皿型，皿型細胞にも変化は認められなかっ
x109（個）
た．（写真4）
o
20
5
ト●
10
＼＼
15
2．結節型吉田肉腫細胞形態に及ぼすCOPPの影響
吉田肉腫細胞の6×106個をダイコクネズミ背部皮
下に接種し，その後3時間目にCOPPを後肢筋内に
1日1回，1日量50mg／kg 14日間投与した群では，
5例全例が結節中の腫瘍細胞に強い変性を起こしてい
る．即ち，ほとんどすべての細胞に細胞境界不明化，
核消失，核崩壊，核濃縮，あるいは，クロマチン構造
の不明瞭化が起こっている．（写真5）
0
5
10
15（日）
壊死巣の拡がりも，無投与の対照と比較して広いも
COPPの抗腫瘍作用（皿）
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のが多い．1例では，ほとんど結節全体が壊死に陥入
と，COPP投与は腹水腫瘍の細胞型組成に強い変動
り，わずかの崩壊核が散在する像を示していた．
を生ぜしめた．
1日量20mg／kg 14日投与の5例では，上記同様の
エールリッヒ癌ハツカネズミの腹腔内にCOPPを
所見が2例に認められたが，3例では障碍の少ない腫
投与して，COPPの腫瘍細胞に対する直接作用を見る
瘍細胞群が所々に残存していた．
と，腫瘍細胞は小型（直径8∼10ののものが増加し，
対照6例は，いずれも腫瘍結節が大きく，一部に壊
また強く核変性を起した．一方，より大型（皿，皿
死巣は形成しているが，以外の大部分は多少の崩壊核
型）の腫瘍細胞の数は減じたが，それらのものは，変
を含むとしても，ほとんど健全な腫瘍細胞でみたされ
性をうけることが乏しかった．
ている．（写真6）
対照としてのプロトポルフィリン，硫酸コバルト投
これに対してCOPP 1日量100∼20 mg／kgを後
肢筋内に7日間投与した8例では，細胞障碍はより乏
与でも多少類似の変化が起こったが，その程度は微弱
しい．上述同様の効果は多少とも認められるが，毎常
結節型吉田肉腫にCOPP 50∼20mg／kgを14日間投
障碍の少ない腫瘍細胞群が結節中に残存していた．
与したものでは，腫瘍全体の強い壊死が認められた．
結
語
コバルトフ。ロトポルフィリン（COPP）をエールリ
であった。
終りに御指導を戴いた石川教授・倉田助教授に感謝する．
文 献
ッヒ癌ハツカネズミに投与すると，腹水1m1あたり
1）佐古英＝3十全医学会誌，印刷申．
の腹水腫瘍細胞数の低下が起こった．
2）佐古英二：十全医学会誌，印刷中．
腫瘍細胞を，大ききを主として3つの型に分類する
3）沢口正夫：十全医学会誌，62，132（1959）．
Abstract
By intraperitoneal administration of cobaltiprotoporphyrine（COPP）into mice bearing
Ehrlich ascites carcinoma in 40mg／kg／day for 7 days， the number of cell per ml of carcino−
ma ascites decreased and the constitution of cell types changed remarkably．
All Yoshida sarcolna cel】s implanted subcutaneously fell into necrosis by intramusclar ad−
ministration of cOPP in 50mg／kg／day for 14 consecutive days．
佐
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古
難
難灘懇懇
晦
鎌欄顯罵 ‘讐
麟鍵灘
，鍵鍛、蟻戴
図3
工一ルリッヒ癌細胞一COPP投与
図4 エールリッヒ癌細胞一対照
欝
袋灘
一国τ【聯 ’ 胤 図5
吉田肉腫皮下結節一一COPP投与
図6
吉田肉腫皮下結節一対照