1. 原発性免疫不全症に対する遺伝子細胞治療法の確立 1) X 連鎖慢性

 ᚑ⢒ㆮવ⎇ⓥㇱ㧔∔ᖚㆮવሶ᭴ㅧ⎇ⓥቶ࡮ㆮવሶ⸻ᢿᴦ≮⎇ⓥቶ㧕
1. ේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߦኻߔࠆㆮવሶ࡮⚦⢩ᴦ≮ᴺߩ⏕┙
1) X ㅪ㎮ᘟᕈ⡺⧘⣲∝ߦኻߔࠆㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߩታᣉ
ᘟᕈ⡺⧘⣲㧔chronic granulomatous disease: CGD㧕ߪේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߩߥ߆ߢᦨ߽㗫ᐲߩ㜞޿∔
ᖚߢ‫ ߦ․ޔ‬NADPH ࠝࠠࠪ࠳࡯࠯↥↢㉂⚛ߩ᭴ᚑ࠲ࡦࡄࠢ⾰ߢ޽ࠆ gp91phox ߦ⇣Ᏹ޽ࠆ X ㅪ㎮ᘟᕈ
⡺⧘⣲∝㧔X-linked chronic granulomatous disease: X-CGD㧕ߪߘߩ⚂ 80%ࠍභ߼ࠆ‫ޕ‬ᖚ⠪ߪ NADPH
ࠝࠠࠪ࠳࡯࠯↥↢㉂⚛⇣Ᏹߦࠃࠅᵴᕈ㉄⚛ࠍ↥↢ߢ߈ߕ‫ޔ‬ᐜዋᦼࠃࠅ㊀∝ᗵᨴ∝ߦ⟕ᖚߒ‫ޔߚ߹ޔ‬
ਇቢోߥᲕ⩶ߦࠃࠆ⚦⩶࡮⌀⩶ߩᱷሽߦߡㆊ೾ߥἻ∝ᕈࠨࠗ࠻ࠞࠗࡦߩ᡼಴ߥߤㆊᐲߥἻ∝෻ᔕ߇
ᜬ⛯ߔࠆ‫߼ߚߩߎޕ‬⣺▤߿⢄⤳‫ޔ‬⢖╬ߦ⡺⧘⣲ࠍᒻᚑߒߡ‫ߦེ⤳ࠄࠇߎߦᤨޔ‬ᯏ⢻㓚ኂ߇಴⃻ߔࠆ‫ޕ‬
ᩮᴦ≮ᴺߪ HLA ߇৻⥌ߒߚㅧⴊᐙ⚦⢩⒖ᬀߩߺߢ‫߃ߣߚޔߚ߹ޔ‬ㆡᒰߥ࠼࠽࡯߇ሽ࿷ߒߚߣߒߡ
߽㊀ᐲߥᗵᨴ∝⟕ᖚߦࠃࠅㆡಾߥ೨ಣ⟎߇ⴕ߃ߕ‫ޔ‬
⒖ᬀ⥄૕߇ⴕ޿ߥ޿∝଀߽ᄙ‫ޕࠆ޽ޘ‬
ߎߩߚ߼‫ޔ‬
X-CGD ߦኻߔࠆᣂߚߥᴦ≮ᴺ߇᳞߼ࠄࠇࠆߣߎࠈߢ޽ࠆ߇‫ޔ‬ᒰ⎇ⓥቶߢߪ‫ޔ‬⒖ᬀක≮ࠍⴕ߃ߥ޿㊀
ᐲߩᗵᨴ∝ߦ⟕ᖚߒߡ޿ࠆ HLA ㆡว࠼࠽࡯ߩ޿ߥ޿ X-CGD ᖚ⠪ߦኻߒ‫ޔ‬ᖚ⠪ࠃࠅㅧⴊᐙ⚦⢩
㧔CD34 㓁ᕈ⚦⢩㧕ࠍណขߒ‫⚦ࠄࠇߎޔ‬⢩ߦ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ࠍ↪޿ߡᱜᏱ CYBB ㆮવሶ
㧔gp91phox ࠍࠦ࡯࠼ߔࠆ㧕ࠍዉ౉ߒ‫ޔ‬ౣ߮‫ޔ‬ᖚ⠪ߦᛩਈߔࠆㅧⴊᐙ⚦⢩ㆮવሶᴦ≮ࠍ⸘↹ߒߡ޿ࠆ‫ޕ‬
ߚߛ‫ߚ޿↪ࠍ࡯࠲ࠢࡌࠬ࡞ࠗ࠙ࡠ࠻࡟ߩⴕ⃻ޔ‬ㅧⴊᐙ⚦⢩ㆮવሶᴦ≮ߪ X-CGD ࠍ฽߼ઁߩේ⊒ᕈ
఺∉ਇో∝ߦኻߒߡ߽᦭ലߥᴦ≮ᚑ❣ࠍ਄ߍߡ޿ࠆ߇‫ޔ‬X ㅪ㎮㊀∝ⶄว఺∉ਇో∝㧔SCID-X1㧕ߢ
ߺࠄࠇߚࠃ߁ߥ㊀ᄢߥ᦭ኂ੐⽎ߣߒߡߩ⊕ⴊ∛ߩ⊒∝߽ႎ๔ߐࠇߡ޿ࠆߎߣ߆ࠄ‫ᧄޔ‬ㆮવሶᴦ≮⥃
ᐥ⎇ⓥߩታᣉߦ㑐ߒߡߪ‫ߦߣߏ଀∝ޔ‬ᖚ⠪ߩ risk and benefit balance ࠍචಽߦ⠨ᘦߒ‫ⴊޔ‬ᶧቇ‫∉఺ޔ‬
ቇ‫ޔ‬ㆮવሶᴦ≮ቇࠍኾ㐷ߣߔࠆᄙߊߩකᏧ‫⎇ޔ‬ⓥ⠪߇ෳ↹ߔࠆ nation-wide project ߣߒߡㆮવሶᴦ≮
ࠍⴕ߁߽ߩߣߔࠆ‫ޕ‬
࡮ታᣉᛚ⹺ߦะߌߚㅴ᝞⁁ᴫ
(1) X-CGD ߦኻߔࠆᖚ⠪ㅧⴊᐙ⚦⢩ࠍ↪޿ߚㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߦะߌ‫ޔ‬ᐔᚑ 22 ᐕ 1 ᦬ 22 ᣣ‫ޔ‬ታ
ᣉ⸘↹ᦠࠍ฽߻ᔅⷐᦠ㘃ࠍᒰ࠮ࡦ࠲࡯᡽╷ක≮ડ↹⺖ߦឭ಴ߒߚ‫ࠍࠇߎޕ‬ฃߌ‫ޔ‬หᐕ 5 ᦬ 31 ᣣ
ߦ╙৻࿁ߩㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥክᩏᆔຬળ㧔ᆔຬ㐳 ᄢᯅච਽ᘏᕺળක⑼ᄢᢎ᝼㧕߇㐿௅ߐࠇ‫ޔ‬
ᧄㆮવሶᴦ≮ߩ᭎ⷐ╬߇⺑᣿ߐࠇߚᓟ‫ߦᦠ⺧↳ޔ‬ၮߠߊ⒳‫⑼ߩޘ‬ቇ⊛‫୶ޔ‬ℂ⊛⾰⇼߇ߥߐࠇߚ‫ޕ‬
ߘߩᓟ‫ߦ⇼⾰ࠄࠇߎޔ‬ኻߔࠆ࿁╵㓸߇૞ᚑߐࠇ‫╙ޔ‬ੑ࿁⋡ߩㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥክᩏᆔຬળ߇
หᐕ 12 ᦬ 20 ᣣߦ㐿௅ߐࠇߚ‫ޕ‬ᄢᣇߩ࿁╵ߪੌߣߐࠇ‫ޔ‬ㅊടߩ⾰໧ߦኻߒߡߪᢥᦠߦࠃࠆ࿁╵
ߦߡนߣߐࠇߚߚ߼‫ޔ‬ᐔᚑ 23 ᐕ 2 ᦬ 24 ᣣࠍ߽ߞߡ‫ᧄޔ‬ㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߪᒰᆔຬળߩᛚ⹺
ࠍฃߌߚ‫ޕ‬
(2) ᰴߦ‫ޔ‬ክᩏߩ႐߇ෘ↢ഭ௛⋭ෘ↢⑼ቇክ⼏ળ⑼ቇᛛⴚㇱળߦ⒖ࠅ‫⻁ߩߘޔ‬໧ᯏ㑐ߢ޽ࠆㆮવሶ
ᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥ૞ᬺᆔຬળ߇ᐔᚑ 24 ᐕ 1 ᦬ 13 ᣣߦ㐿௅ߐࠇ‫ߢߎߘޔ‬ᄙߊߩ⾰⇼ᔕ╵߇ߥߐࠇ‫ޔ‬
ߘߩ⚿ᨐ߇ෘ↢⑼ቇክ⼏ળ⑼ቇᛛⴚㇱળߦႎ๔ߐࠇߚ‫ࠍࠇߘޕ‬ฃߌ‫ޔ‬หᐕ 3 ᦬ 28 ᣣߦෘ↢⑼ቇ
ክ⼏ળ⑼ቇᛛⴚㇱળ߇㐿௅ߐࠇ‫ᧄߦ⊛⚳ᦨޔ‬ㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߪੌᛚߐࠇ‫ߩߘޔ‬ႎ๔ࠍฃߌ‫ޔ‬
ᐔᚑ 24 ᐕ 6 ᦬ 14 ᣣઃߌߢෘ↢ഭ௛ᄢ⤿ߩᛚ⹺߇ᓧࠄࠇߚ‫⃻ޕ‬࿷‫ޔ‬ኻ⽎ᖚ⠪ߩㆬቯࠍⴕߞߡ޿
ࠆ‫ޕ‬
(3) ታ㓙ߩㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߦ߅޿ߡ↪޿ࠄࠇࠆ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ࠍ↪޿ߚㅧⴊᐙ⚦⢩߳
ߩㆮવሶዉ౉ᴺࠍ⏕ቯߔࠆߚ߼ߦ‫⎇ޔ‬ⓥᚲ 5 㓏ߦ⚦⢩⺞⵾ቶ㧔Cell Processing Center: CPC㧕ࠍ⸳
⟎ߒ‫⤯ޔ‬Ꮺⴊ↱᧪ CD34 㓁ᕈ⚦⢩ࠍ↪޿ߚㆮવሶዉ౉ታ㛎ࠍⴕߞߡ޿ࠆ‫⚦ߚߒ↪૶ޕ‬⢩ߪ⤯Ꮺ
ⴊ↱᧪ߩනᩭ⃿ߢ‫⚦ߩߘޔ‬⢩ᢙߪ߅ࠃߘ 6x108 ୘ߢ޽ࠅ‫⚦ࠄࠇߎޔ‬⢩߆ࠄ CliniMacs ࠍ↪޿ߡ
CD34 㓁ᕈ⚦⢩ࠍಽ㔌ߒ‫ޔ‬㐽㎮ၭ㙃ࠪࠬ࠹ࡓߦߡᄖ᧪ㆮવሶࠍዉ౉ߒߚ‫⚿ߩߘޕ‬ᨐ‫ޔ‬Cell viability
߇ 90㧑ࠍ⿥߃‫ޔ‬ㆮવሶዉ౉ല₸߽ 70%ࠍ⿥߃ߡ޿ࠆ‫⃻ޕ‬࿷‫ ߥ߁ࠃߩߎޔ‬Dry Run ࠍⶄᢙ࿁ⴕߞ
ߡ߅ࠅ‫৻ࠄࠇߎޔ‬ㅪߩᵹࠇࠍᢥᦠൻߒߚ SOP㧔standard operating procedure㧕ࠍ૞ᚑߒߡ޿ࠆ‫ߥޕ‬
㧙㧙
߅‫⎇ᧄޔߪ࡯࠲ࠢࡌࠬ࡞ࠗ࠙ࠆߔ↪૶ޔ‬ⓥߩ౒ห⎇ⓥ⠪ߢ޽ࠆ☨࿖࿖┙ⴡ↢⎇ⓥᚲ㧔NIH㧕ߩ
Malech ඳ჻߇૞⵾ߒߚ MFGSgp91 ߢ޽ࠅ‫⥃ޔ‬ᐥᔕ↪ߐࠇࠆ㓙ߦᔅⷐߣߥࠆ MFGSgp91 ߩຠ⾰
⹏ଔᦠߪ౉ᚻߒߡ޿ࠆ‫⎇ᧄޔ߅ߥޕ‬ⓥߪ‫ޟ‬ෘ↢ഭ௛⑼ቇ⎇ⓥ⾌⵬ഥ㊄㧔ᚑ⢒∔ᖚస᦯╬ᰴ਎ઍ
⢒ᚑၮ⋚⎇ⓥ੐ᬺ㧕
㧔ᐔᚑ 22ޯ24 ᐕᐲ㧕
‫ߩޠ‬ഥᚑࠍฃߌߡⴕࠊࠇߡ޿ࠆ‫ޕ‬
2) ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ᝌ౉ㇱ૏ߩ✂⟜⊛⸃ᨆᴺߩ⏕┙
⃻࿷‫ߩߤߥ࡯࠲ࠢࡌࠬ࡞ࠗ࠙ࡠ࠻࡟ޔ‬ᨴ⦡૕ᝌ౉ဳࡌࠢ࠲࡯ࠍ↪޿ߡㆮવሶᴦ≮ࠍⴕߞߚ႐ว‫ޔ‬
ᝌ౉ߐࠇߚ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯㧔ࡊࡠ࠙ࠗ࡞ࠬ㧕ߩ⁁ᘒ㧔ࡊࡠ࠙ࠗ࡞ࠬᢙߥߤ㧕ߥࠄ߮ߦᝌ౉
ㇱ૏ㄭறㆮવሶߩᖱႎࠍ⏕⹺ߒߥߌࠇ߫ߥࠄߥ޿‫ߦࠇߎޕ‬ኻߒߡ‫⎇ᧄޔ‬ⓥㇱߢߪ࠲ࠞ࡜ࡃࠗࠝ␠ߣ
౒หߢ‫ޔ‬ታ㓙ߦㅧⴊᐙ⚦⢩ㆮવሶᴦ≮ࠍฃߌߚᖚ⠪ࠨࡦࡊ࡞ࠍ↪޿‫ࠬ࡞ࠗ࠙ࡠࡊޔ‬ᢙߥࠄ߮ߦㄭற
ㆮવሶߩหቯࠍ⹜ߺߡ޿ࠆ‫ޕ‬ᣇᴺߪ‫ ߩ࡯࠲ࠢࡌࠬ࡞ࠗ࠙ޔ‬5’LTR 㗔ၞߦㅒะ߈ߦ primer ࠍ⸳⸘ߒ‫ޔ‬
primer extension ᴺߦߡ 5’LTR ߩ flanking 㗔ၞࠍჇ᏷ߔࠆᣇᴺ㧔LAM-PCR ᴺ㧕ߢ‫ߩߘޔ‬ᓟߘࠇࠄჇ
᏷ߒߚࡃࡦ࠼ࠍ࿁෼ߒߡ sequence ߒߚ‫ᤨ⃻ޕ‬ὐߢᖚ⠪ 1 ߢߪ 6 ࠢࡠ࡯ࡦ‫ޔ‬ᖚ⠪㧞ߢߪ 4 ࠢࡠ࡯ࡦߩ
ࡊࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࠍหቯߒ‫ߩߘޔ‬ㄭறㆮવሶࠍ᣿ࠄ߆ߦߒߡ޿ࠆ‫⸃ߥ⊛⟜✂ࠅࠃޔߚ߹ޕ‬ᨆᴺߣߒߡ
Roche 454 ࠪ࡯ࠢࠛࡦࠨ࡯ࠍ↪޿ߚ pyrosequence ᴺ߽ⴕߞߡ߅ࠅ‫ޔ‬
ᄙߊߩᝌ౉ㇱ૏ㄭறㆮવሶࠍ᣿ࠄ
߆ߦߔࠆ੍ቯߢ޽ࠅ‫ߚࠇߐ┙⏕ߢߎߎޔ‬ᣇᴺߪ‫ޔ‬਄⸥‫ޔ‬X-CGD ߦኻߔࠆㆮવሶᴦ≮⥃ᐥ⎇ⓥߦ߅޿
ߡ೑↪ߐࠇࠆ‫⎇ᧄޔ߅ߥޕ‬ⓥߪ‫ޟ‬ෘ↢ഭ௛⑼ቇ⎇ⓥ⾌⵬ഥ㊄㧔᡽╷ഃ⮎✚ว⎇ⓥ੐ᬺ㧕
㧔ᐔᚑ 22ޯ
24 ᐕᐲ㧕
‫ߩޠ‬ഥᚑࠍฃߌߡⴕࠊࠇߡ޿ࠆ‫ޕ‬
3) ᄖ⢦⪲ᒻᚑਇో఺∉ਇో∝㧔NEMO㧕ߩታᘒ⺞ᩏ
⥄ὼ఺∉ߩ⇣Ᏹߢ޽ࠆ NEMO㧔the nuclear factor kappa B essential modulator㧕⇣Ᏹ∝ߪ‫ޔ‬NF-kB ࠪ
ࠣ࠽࡞ૐਅߦࠃࠅ⊒∝ߔࠆ㔍ᴦᕈ∔ᖚߢ‫ޔ‬ᄖ⢦⪲⇣Ᏹ‫ޔ‬ᤃᗵᨴᕈߥࠄ߮ߦἻ∝ᕈ⣺Ἳࠍਥ∝⁁ߣߒ
ߡ⊒∝ߔࠆ㔍ᴦᕈ∔ᖚߢ޽ࠆ‫ޔߦ․ޕ‬Ἳ∝ᕈ⣺Ἳߪ‫ޔ‬ㄭᐕ‫∝⊒ߩߘޔ‬ᯏᐨ߇⥄ὼ఺∉ߩ⎕✋ߦᷓߊ
㑐ࠊߞߡ޿ࠆߣߐࠇ‫⥄ޔߚ߹ޔ‬ὼ఺∉ߩ⇣Ᏹߦࠃࠅ⊒∝ߔࠆ CGD ⣺Ἳ߽ߘߩ⥃ᐥ∝⁁߇ NEMO ⣺
Ἳߦ㉃ૃߔࠆߎߣ߆ࠄ‫⥄ޔ‬ὼ఺∉ߣ⣺Ἳߣߩ㑐ㅪ߇ᒝߊ␜ໂߐࠇߡ޿ࠆ‫ޔߛߚޕ‬NEMO ⇣Ᏹ∝ߪᭂ
߼ߡ⒘ߥ∔ᖚߢ‫⃻ޔ‬࿷߹ߢ 10 ૛ฬߩᖚ⠪ࠍᢙ߃ࠆߩߺߢ޽ࠅ‫⥃ޔ‬ᐥ∝⁁߽ᄙጘߦࠊߚࠆߎߣ߆ࠄߘ
ߩታᘒߪਇ᣿ߢ޽ࠆ‫ޔ߼ߚߩߎޕ‬ᒰ⎇ⓥቶߢߪో࿖ߩ NEMO ⇣Ᏹ∝ߥࠄ߮ߦ CGD ⣺Ἳߩታᘒࠍ᣿
ࠄ߆ߦߔࠆߚ߼ฦක≮ᯏ㑐ߦታᘒ⺞ᩏ␿ࠍㅍઃߒ‫ᤨ⃻ޔ‬ὐ߹ߢߢ NEMO ⇣Ᏹ∝ߦ㑐ߒߡߪ 12 ฬ‫ޔ‬
CGD ⣺Ἳߦ㑐ߒߡߪ 36 ฬߩᖚ⠪ߩᖱႎ㧔ታᘒ⺞ᩏ␿㧕ࠍ౉ᚻߔࠆߎߣ߇ߢ߈ߚ‫ޕ‬NEMO ⇣Ᏹ∝ߦ
߅ߌࠆἻ∝ᕈ⣺Ἳߣ CGD ⣺ἻߩᲧセߢ޽ࠆ߇‫∝⊒ޔ‬ᐕ㦂ߪߘߩਛᄩ୯ߢ 3 ᱦ 9 ࡩ᦬㧔NEMO ⇣Ᏹ
∝㧕ߣ 4 ᱦ 8 ࡩ᦬㧔CGD ⣺Ἳ㧕ߢ޽ࠅ‫⥃ߩߘޔ‬ᐥ∝⁁߽ห᭽ߥ߽ߩ߇ᄙ߆ߞߚ‫ޔߚ߹ޕ‬CGD ⣺Ἳ
ߢߘߩ․ᓽߣߐࠇࠆ⡺⧘⣲ᒻᚑߦࠃࠆ⁜⓰ߥߤߪ⷗ࠄࠇߚ߽ߩߩౝⷞ㏜࡮∛ℂᚲ⷗⊛ߦߪߎࠇࠄਔ
∔ᖚߦᏅ㆑ࠍ⹺߼ߥ߆ߞߚ‫ޔߦ․ޕ‬CGD ⣺Ἳߦ߅޿ߡᲧセ⊛ᣧ޿Ბ㓏߆ࠄౝⷞ㏜ࠍᣉⴕߒߚ଀ߢߪ‫ޔ‬
シᐲߩᶋ⣲߿ࠕࡈ࠲‫߇ࠎࠄ߮ޔ‬ਥߢ޽ࠆߎߣ߆ࠄ‫ޔ‬CGD ⣺Ἳߦ߅޿ߡ߽∛ೋᦼߦ߅޿ߡߪห᭽ߩ∛
ᘒࠍ␜ߒߡ޿ࠆน⢻ᕈ߇␜ໂߐࠇߚ‫ޕ‬ᴦ≮ߦ㑐ߒߡߪ‫߇ࡦࠫ࡜ࠨࡔ߿࠼ࠗࡠ࠹ࠬޔ‬ਥߢ޽ࠅ‫৻ޔ‬ㇱ‫ޔ‬
఺∉ᛥ೙೷ߩ૶↪ߐࠇߚ଀߽޽ࠆ߇ᄢᣇห᭽ߩ⮎೷ߢᴦ≮ߐࠇߡ޿ߚ‫ޕ‬
ߚߛ‫ޔ‬
NEMO ⣺Ἳߢߪ TNFD
᛫૕㧔࡟ࡒࠤ࡯࠼㧕ࠍ↪޿ߚ଀ߢ⪺ലࠍ⹺߼ߚ߇‫ޔ‬CGD ߦ߅޿ߡߪ NEMO ⇣Ᏹ∝ࠃࠅ఺∉♽ૐਅ
߇ᒝ޿ߚ߼‫ ߦᤨޔ‬TNFD᛫૕ߩ૶↪߇㊀◊ߥᗵᨴ∝ࠍ⺃⊒ߔࠆߎߣ߇޽ࠅ‫ޔ‬ᚒ߇࿖ߦ߅޿ߡߪ૶↪
⚻㛎߇ߥ߆ߞߚ‫ޕ‬ㅒߦ‫ޔ‬CGD ⣺Ἳߢߪㅧⴊᐙ⚦⢩⒖ᬀࠍⴕ߁႐ว߇޽ࠆ߇‫ޔ‬NEMO ⇣Ᏹ∝ߢߪ∝
଀ᢙ߽ዋߥ޿ߎߣ߽޽ࠆ߇‫ߩߘޔ‬ᢙߪ⒘ߢ޽ߞߚ‫ޕ‬
ߥ߅‫⎇ᧄޔ‬ⓥߪ‫ޟ‬ෘ↢ഭ௛⑼ቇ⎇ⓥ⾌⵬ഥ㊄㧔㔍ᴦᕈ∔ᖚస᦯⎇ⓥ੐ᬺ㧕
㧔ᐔᚑ 22ޯ23 ᐕᐲ㧕
‫ߩޠ‬
ഥᚑࠍฃߌߡⴕࠊࠇߚ‫ޕ‬
2. iPS ⥄േၭ㙃ⵝ⟎㐿⊒ߦ㑐ߔࠆ⎇ⓥ
ㄭᐕ‫ޔ‬4 ㆮવሶ㧔Oct4‫ޔ‬Sox2‫ޔ‬Klf4‫ޔ‬c-Myc㧕ࠍᒝ⊒⃻ߐߖࠆߎߣߢ‫⚦⧘⛽✢ޔ‬⢩ߥߤ૕⚦⢩ࠍ⢦
㧙㧙
ᕈᐙ⚦⢩ߩࠃ߁ߥᄙ⢻ᕈࠍ᦭ߔࠆ iPS ⚦⢩ߦ⺃ዉߢ߈ࠆߎߣ߇ࠊ߆ߞߚ‫ ߩߎޕ‬iPS ⚦⢩ߪ⥄Ꮖⶄ⵾
⢻෸߮ᄙಽൻ⢻ߦን߻ߚ߼‫ޔ‬ᰳᄬߒߚ⤳ེᯏ⢻ࠍౣ↢ߔࠆౣ↢කቇߦ߅޿ߡᦨ߽ᵈ⋡ࠍᶎ߮ߡ޿ࠆ
⚦⢩ߢ޽ࠆ‫ޔߛߚޕ‬ၭ㙃߇㔍ߒߊ‫ޔ‬ਇㆡᒰߥၭ㙃ߦࠃߞߡᄙ⢻ᕈࠍᄬ߁ߎߣ߇ᄙߊ‫ޔ‬iPS ⚦⢩ߩၭ
㙃ߦߪ⚦ᔃߩᵈᗧ߇ᔅⷐߣߥࠆ‫ޔߚ߹ޕ‬዁᧪ߩ⥃ᐥᔕ↪ߦะߌߡߪ‫৻ޔ‬ቯߩၮḰߩຠ⾰଻ᜬ߇㊀ⷐ
ߢ޽ࠅ‫⚦ߪߦ߼ߚߩߘޔ‬⢩⺞⵾ቶ㧔CPC㧕ߥߤߩዉ౉߇ᔅ㗇ߣߥࠆ‫ޔߛߚޕ‬CPC ዉ౉ߦߪᄙ㗵ߦ⾌
↪߇ᔅⷐߢ޽ࠅ‫ߥ⊛ੱޔߚ߹ޔ‬ഭജ߽ήⷞߢ߈ߥ޿‫ޔ߼ߚߩߎޕ‬Ყセ⊛቟ଔߢ iPS ⚦⢩ࠍၭ㙃ߢ߈
ࠆᯏེ㧔ⵝ⟎㧕ߩ㐿⊒߇ᦸ߹ࠇࠆ߇‫ޔ‬ᒰ⎇ⓥቶߢߪ‫ޔ‬Ꮉፒ㊀Ꮏߣ౒หߢࡠࡏ࠶࠻ࠍ↪޿ߚ⥄േၭ㙃
ⵝ⟎ߩ㐿⊒ࠍㅴ߼‫ޔ‬ᒰ⎇ⓥቶߩ৻ቶߦ⥄േၭ㙃ⵝ⟎ࠍ⸳⟎ߒ‫ߩߘޔ‬ၭ㙃ᴺࠍᬌ⸛ߒߡ޿ࠆ‫ޔ߅ߥޕ‬
ᧄ⎇ⓥߩ৻ㇱߪ‫ޟ‬NEMO ࡊࡠࠫࠚࠢ࠻ iPS ⚦⢩╬ᐙ⚦⢩↥ᬺᔕ↪ଦㅴၮ⋚ᛛⴚ㐿⊒‫ޠ‬
㧔ᐔᚑ 21ޯ25
ᐕᐲ㧕ߩഥᚑࠍฃߌߡⴕࠊࠇߡ޿ࠆ‫ޕ‬
3. ේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߩේ࿃⸃᣿ߦะߌߚ⎇ⓥ
1) ේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ᖚ⠪ߦ߅ߌࠆㆮવሶ⸻ᢿ
ේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߪ‫ޔ‬ᅢਛ⃿‫ޔ⃿ࡄࡦ࡝ޔ‬න⃿ߥߤ఺∉ᜂᒰ⚦⢩ߩᯏ⢻⇣Ᏹߦࠃࠅ‫ޔ‬ᱜᏱߥ఺∉
෻ᔕ߇⺃ዉߐࠇߥߊߥࠆߎߣߢ‫ޔ‬ᤃᗵᨴᕈ߿⥄Ꮖ఺∉∔ᖚࠍ⺃⊒ߔࠆ㔍ᴦᕈߩ∔ᖚߢ޽ࠆ‫⃻ޕ‬࿷‫ޔ‬
ߎࠇࠄ∔ᖚߩᄙߊߪࡅ࠻ࠥࡁࡓߩ⸃ᨆ߆ࠄߘߩේ࿃ㆮવሶ߇หቯߐࠇ‫ޔ‬ᒰ࠮ࡦ࠲࡯ߦ߅޿ߡ߽ㆮવ
ሶ⸃ᨆߦࠃࠆ⏕ቯ⸻ᢿࠍⴕߞߡ߈ߚ‫⸻ߩߘޔߛ߹޿ޔߒ߆ߒޕ‬ᢿߦ⥋ࠆㆊ⒟ߦߪᄙߊߩ఺∉ቇ⊛⸃
ᨆ߇ᔅⷐߢ޽ࠆߚ߼‫ޔ‬ᒰ⎇ⓥㇱߩㇱ㐳 ዊ㊁ኹ߇∛㒮ౝ⑼♽⸻≮ㇱ఺∉⑼ߩක㐳ࠍ‫ޔ‬ቶ㐳ᴡว߇ห఺
∉⑼ߩකຬࠍ૬છߒ‫ޔ‬Ⓧᭂ⊛ߦᄖ᧪෸߮౉㒮ߦߡߎࠇࠄ఺∉ᖚ⠪ߩ⸻ኤ࡮⸻≮ߦ޽ߚߞߡ޿ࠆ‫⃻ޕ‬
࿷‫୶ޔ‬ℂክᩏᆔຬળߩᛚ⹺ߩਅ‫ⶄޔ‬ᢙߩᖚ⠪ߩㆮવሶ⸻ᢿ‫ޔ‬ᖚ⠪⚦⢩ᩣߩ᮸┙‫⚦ࠄࠇߘޔ‬⢩ࠍ↪޿
ߚࠨࠗ࠻ࠞࠗࡦ࡮ࠤࡕࠞࠗࡦ╬ߩ᷹ቯߥࠄ߮ߦฦ⒳ㆮવሶ⊒⃻⺞▵࿃ሶߩ⸃ᨆࠍⴕߞߡ޿ࠆ‫ޕ‬
2) iPS ⚦⢩ࠍ↪޿ߚේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߩ∛ᘒ⸃᣿
ේ⊒ᕈ఺∉ਇో∝ߪ᦭ലߥᴦ≮ᴺߦਲߒ޿㔍ᴦᕈ∔ᖚߢ޽ࠅ‫∔ޔ‬ᖚߦࠃߞߡߪ⹦⚦ߥ∛ᘒ⸃ᨆ߇
ⴕࠊࠇߡ޿ߥ޿∝଀߽ᄙ޿‫ޕ‬ㄭᐕ‫ޔ‬4 ㆮવሶ㧔Oct4‫ޔ‬Sox2‫ޔ‬Klf4‫ޔ‬c-Myc㧕ࠍᒝ⊒⃻ߐߖࠆߎߣߢ‫ޔ‬
✢⛽⧘⚦⢩ߥߤ૕⚦⢩ࠍ⢦ᕈᐙ⚦⢩ߩࠃ߁ߥᄙ⢻ᕈࠍ᦭ߔࠆ iPS ⚦⢩ߦ⺃ዉߢ߈ࠆߎߣ߇ࠊ߆ߞߚ‫ޕ‬
ᒰ⎇ⓥቶߢ߽ iPS ⚦⢩⎇ⓥࠍⴕߞߡ߅ࠅ‫⃻ޔ‬࿷‫߇ࠄ⥄ޔ‬㐿⊒ߒߚ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ࠍ↪޿ߡ
ㅧⴊᐙ⚦⢩ߥߤㅧⴊ♽⚦⢩߆ࠄ߽ല₸⦟ߊ iPS ⚦⢩ࠍ⺃ዉߢ߈ࠆ♽ࠍ⏕┙ߒߡ޿ࠆ‫ߩߎޕ‬ᣇᴺߪ‫ޔ‬
ห৻ߩᚻᛛߢࡑ࠙ࠬ⚦⢩ߪ߽ߣࠃࠅࡅ࠻⚦⢩߆ࠄ߽ല₸⦟ߊ iPS ⚦⢩ࠍ⺃ዉߢ߈ࠆὐߢఝࠇߡ޿ࠆ‫ޕ‬
․ߦ‫ࠍࡊ࡯ࡠࡌࡦࠛࠬ࡞ࠗ࠙ޔ‬ᡷᄌߒߚߎߣߢ‫ᧃ࠻ࡅޔ‬᪳ⴊ࡝ࡦࡄ⃿ߦല₸⦟ߊߎࠇࠄ 4 ㆮવሶࠍ
ዉ౉ߔࠆߎߣ߇น⢻ߣߥࠅ‫⚦ࠄࠇߎޔ‬⢩߆ࠄ iPS ⚦⢩ࠍ᮸┙ߢ߈ࠆߎߣ߇น⢻ߣߥߞߚ‫⃻ޕ‬࿷‫ࠕޔ‬
࠺ࡁࠪࡦ࡮࠺ࠕࡒ࠽࡯࠯ᰳ៊∝‫ޔ‬ᘟᕈ⡺⧘⣲∝ߥߤߩⶄᢙߩᖚ⠪ᧃ᪳ⴊ߆ࠄ iPS ⚦⢩ࠍ᮸┙ߒߡ߅
ࠅ‫੹ޔ‬ᓟߪߎࠇࠄ iPS ⚦⢩ࠍ↪޿ߡ∛ᘒ⸃᣿ߦᓎ┙ߡߚ޿ߣ⠨߃ߡ޿ࠆ‫ޕ‬
4. ᘟᕈ⡺⧘⣲∝ߦ߅ߌࠆἻ∝ᯏᐨߩ⸃᣿
ᘟᕈ⡺⧘⣲∝㧔CGD㧕ߪ‫ޔ‬NADPH ࠝࠠࠪ࠳࡯࠯ߩ⇣Ᏹߦࠃࠅᵴᕈ㉄⚛↥↢⢻߇㓚ኂߐࠇࠆේ⊒
ᕈ఺∉ਇో∝ߢ޽ࠆ‫∔ᧄޕ‬ᖚߦ߅ߌࠆㆊ೾ߥἻ∝⊒↢ᯏᐨߦߟ޿ߡߪ‫ߛ߹޿ޔ‬᣿ࠄ߆ߣߥߞߡ޿ߥ
޿‫∛ޔߢߎߘޕ‬㒮఺∉⑼⸻≮ਛߩ CGD ᖚ⠪ߦߟ޿ߡ㕖ᗵᨴᕈ∔ᖚࠍว૬ߒߚ∝଀ࠍਛᔃߦㆮવሶ
⸃ᨆࠍ฽߻∛ဳ‫ޔ‬ᵴᕈ㉄⚛↥↢⢻‫ޔ‬㕖ᗵᨴᕈ∔ᖚߩ⥃ᐥᚲ⷗ߦߟ޿ߡᬌ⸛ࠍⴕߞߚ‫ޕ‬CGD ߩ 36 ∝
଀ਛ㧥଀ߦ CGD ⣺Ἳࠍ⹺߼ߚ‫ޕ‬㧝⚵ߩఱᒉ଀߇฽߹ࠇࠆ߽ߩߩ‫ޔ‬CGD ⣺Ἳ∝଀ߦ․ᓽ⊛ߥㆮવሶ
ߩᄌ⇣ߪߥ߆ߞߚ‫ޕ‬CGD ⣺Ἳߩో଀ߦࠬ࠹ࡠࠗ࠼ᴦ≮߇ⴕࠊࠇ‫᦭ޔ‬ലߥᴦ≮ലᨐ߇ߺࠄࠇߚ‫ߩߘޕ‬
ߚ߼‫ߤߥࠫ࡯ࠔࡈࡠࠢࡑ߿⃿ࡄࡦ࡝ޔ‬Ἳ∝⚦⢩ߩ㑐ਈ߇ᒝߊ␜ໂߐࠇߚ‫ޔߢߎߘޕ‬Ἳ∝⚦⢩ߩࠨࠗ
࠻ࠞࠗࡦ↥↢⢻‫⃿ࡄࡦ࡝ޔ‬ಽ↹‫ޔ‬ᵴᕈൻ T ⚦⢩ߩ⺃ዉല₸ߩᄌൻࠍᬌ⸛ߒߡ޿ࠆ‫⚿ߩߢ߹ࠇߎޕ‬ᨐ
߆ࠄ‫∉఺ޔ‬ᜂᒰ⚦⢩ߢ޽ࠆࡑࠢࡠࡈࠔ࡯ࠫ߿᮸⁁⚦⢩ߥߤߩ㘩⚦⢩ߦ߽⊒⃻ NADPH ࠝࠠࠪ࠳࡯࠯
ߩ㓚ኂߪ‫ޔ‬ᘟᕈ⡺⧘⣲∝ߦ߅ߌࠆἻ∝೙ᓮᯏ᭴ߦᷓߊ㑐ਈߔࠆߎߣ߇␜ໂߐࠇߚ‫ޕ‬
㧙㧙
5. ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ߩㆮવሶ⊒⃻ૐਅ㧔gene silencing㧕ᯏ᭴ߩ⸃᣿
৻⥸ߦ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬߩᗵᨴߦኻߒᗵᨴኋਥߪ‫ޔ‬ㆮવሶ㈩೉ᄌൻߩ઻ࠊߥ޿ᓟᄤ⊛ୃ㘼㧔ࠛࡇࠫ
ࠚࡀ࠹ࠖࠢࠬ㧕
ߦࠃࠅ࠙ࠗ࡞ࠬߩォ౮ࠍᛥ೙ߒ‫ޔ‬
ᤨߦ≸ൻߦ❬߇ࠆ࠙ࠗ࡞ࠬߩᵴേࠍ㒖ኂߒߡ޿ࠆ‫ޕ‬
ߎߩ⃻⽎ߪ gene silencing ߣࠃ߫ࠇ‫ߩߘޔ‬ᯏᐨߪ࠙ࠗ࡞ࠬࠥࡁࡓߩࡔ࠴࡞ൻߣ⺞▵ᕈォ౮࿃ሶߩ⚿ว
ߦࠃࠅߥߐࠇߡ޿ࠆ‫ޔࠄ߆ߣߎߩߎޕ‬ᒰ⎇ⓥቶߢߪᗵᨴኋਥߩᛥ೙ᕈᓇ㗀ࠍឃ㒰ߔࠆ⋡⊛ߢ‫ࠗ࠙ޔ‬
࡞ࠬ LTR ࠍࡔ࠴࡞ൻᛶ᛫ᕈߩ PCC-4 cell-passaged myeloproliferative sarcoma virus㧔PCMV㧕↱᧪ LTR
ߦᄌᦝߒ‫ޔ‬ᛥ೙ᕈォ౮࿃ሶ⚿วㇱ૏ߢ޽ࠆ primer binding site ౝߩ negative responsible element㧔NRE㧕
ߦᄌ⇣ࠍ౉ࠇ‫⚿ߩߘޔ‬วࠍ㒖ᱛߒߚ gene silencing ᛶ᛫ᕈ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯GCDNsap ࠍ㐿⊒
ߒߚ‫࡯ࠞ࡯ࡑࠅࠃߦ࡯࠲ࠢࡌߩߎޕ‬ㆮવሶߣߒߡ enhanced green fluorescent protein (EGFP)ࠍዉ౉ߐࠇ
ߚࡑ࠙ࠬ ES ⚦⢩ߪߘߩ⊒⃻ࠍ⛽ᜬߒ‫ ࠄࠇߎߦࠄߐޔ‬ES ⚦⢩ࠃࠅ૞಴ߒߚࠠࡔ࡜ࡑ࠙ࠬ߿ߘߩሶቊ
ߦ߅޿ߡ߽ EGFP ߩ⊒⃻ࠍ⛽ᜬߒߡ޿ࠆ‫ޔߚ߹ޕ‬NRE ߦ⚿วߔࠆᛥ೙ᕈォ౮࿃ሶߩหቯ߽ⴕߞߡ޿
ߚ߇‫ޔ‬ㄭᐕ‫ ߩߎޔ‬NRE ߦ⚿วߔࠆ࠲ࡦࡄࠢߣߒߡ zinc finger motif ࠍ᦭ߔࠆ ZFP809 ߇หቯߐࠇ‫ޔ‬ታ
㓙ߦߎߩ ZFP809 ߇࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ౝߩ NRE ߦ⚿วߒ‫ߩߘޔ‬ォ౮ࠍᛥ೙ߔࠆߎߣ߇␜ߐࠇ
ߚ‫ ߩߎޔߛߚޕ‬ZFP809 ߇ࡑ࠙ࠬ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬߩ MoMLV ↱᧪ߩ NRE ߦߒ߆⚿วߖߕ‫࠻࡟ߩઁޔ‬
ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬߩ NRE ߦߪ⚿วߒߥ޿ߎߣ߆ࠄ‫ޔ‬gene silencing ߦ㑐ਈߔࠆઁߩᛥ೙ォ౮࿃ሶߩሽ࿷߇␜
ໂߐࠇߡ޿ࠆ‫⃻ޕ‬࿷‫ޔ‬ᒰ⎇ⓥቶߢߪ ZFP809 ߦኻߔࠆ᛫૕‫ޔ‬ォ౮ࠍᛥ߃ࠆ shRNA ╬ࠍ૞⵾ߒ‫ޔ‬ZFP809
߇߽ߚࠄߔ࡟࠻ࡠ࠙ࠗ࡞ࠬࡌࠢ࠲࡯ߩ gene silencing ᯏ᭴ࠍ⸃ᨆߒߡ޿ࠆ‫ޕ‬หᤨߦ‫ޔ‬ZFP809 ߦ⋧ᒰ
ߔࠆࡅ࠻ㆮવሶߩหቯ߽⹜ߺߡ޿ࠆ‫ޕ‬
6. ADA ᰳ៊∝ߦኻߔࠆᧂᛚ⹺⮎ࠕ࠳ࠫࠚࡦߩᴦ㛎ߦะߌߚ⎇ⓥ
ࠕ࠺ࡁࠪࡦ࡮࠺ࠕࡒ࠽࡯࠯㧔ADA㧕ߪ‫⚦ޔ‬⢩ಽⵚߩ㓙ߦ↢ߕࠆᩭ㉄ઍ⻢↥‛ߩ࠺ࠝࠠࠪࠕ࠺ࡁࠪ
ࡦࠍ࠺ࠝࠠࠪࠗࡁࠪࡦߦᄌ឵ߔࠆઍ⻢㉂⚛ߢ‫ޔ‬ㆮવ⊛ߦ ADA ߇ᰳ៊ߔࠆߣోりߦ᦭ኂ‛⾰ߩ dATP
߇⫾Ⓧߒ‫ߦ․ޔ‬⢷⣼࡝ࡦࡄ⃿߇்ኂࠍฃߌࠆߚ߼‫ޔ‬ᖚ⠪ߪ↢ਅᤨࠃࠅᒝ޿఺∉ਇో⁁ᘒࠍ๒ߔࠆ‫ޕ‬
ᴦ≮ᴺߪ‫ޔ‬HLA ߇৻⥌ߒߚㅧⴊᐙ⚦⢩⒖ᬀߢ޽ࠆ߇‫ޔ‬ㆡᒰߥ࠼࠽࡯߇⷗ߟ߆ࠆ⏕₸ߪ߅ࠃߘ 30%
ߢ‫߃ߣߚޔߚ߹ޔ‬⒖ᬀ߇ᚑഞߒߚߣߒߡ߽‫ޔ‬⒖ᬀߦࠃࠅ߽ߚࠄߐࠇࠆ ADA ᵴᕈ୯ߢߪోりߩ⸃Ქ
ߪචಽߢߪߥߊ‫ߦᤨޔ‬⒖ᬀ೨ߩ␹⚻㓚ኂ߇ᱷሽߔࠆ‫ޕ‬
৻ᣇ‫ޔ‬ADA ᰳ៊∝ߪ㉂⚛ᰳ៊∝ߢ޽ࠆߎߣ߆ࠄ‫ޔ‬1986 ᐕߦ࠙ࠪ↱᧪ߩ ADA ࠍࡐ࡝ࠛ࠴࡟ࡦ࡮ࠣ
࡝ࠦ࡯࡞ߦߡ൮ၒߒߚ PEG-ADA㧔ADAGEN㧕߇㐿⊒ߐࠇ‫ޔ‬1990 ᐕߦ FDA ߢᛚ⹺ࠍฃߌߚᓟߪ☨
࿖ࠍߪߓ߼ߣߔࠆᶏᄖߢ⃻࿷߹ߢ 150 ฬࠍ⿧߃ࠆᖚ⠪߇ ADAGEN ࠍ㉂⚛⵬ల≮ᴺߣߒߡฃߌߡ߅
ࠅ‫ᤨ⃻ޔ‬ὐߢ߽ 80 ฬࠍ⿧߃ࠆᖚ⠪߇ߎߩ ADAGEN ᴦ≮ࠍ⛯ߌߡ޿ࠆ‫ޔߛߚޕ‬ᚒ߇࿖ߢߪ޿߹ߛ
ADAGEN ߪᧂᛚ⹺⮎ߢ޽ࠅ‫ޔ‬หᤨߦ↢‛⵾೷ߢ޽ࠆߎߣ߆ࠄߘߩଔᩰߪ㜞㗵ߢ‫ޔ‬ᖚ⠪߇ ADAGEN
ࠍ୘ੱ⊛ߦ౉ᚻߒ‫ߪߩࠆߔ↪૶ޔ‬ਇน⢻ߦㄭ޿‫߼ߚߩߎޕ‬ᴦ≮ᴺߣߒߡෂ㒾ᕈ߇㜞޿ HLA ਇቢో
৻⥌ߩㅧⴊᐙ⚦⢩⒖ᬀࠍㆬᛯߖߑࠆࠍᓧߥ޿⁁ᴫߦߥߞߡ޿ࠆ‫ޕ‬
ᒰ⎇ⓥㇱߢߪ‫∛ޔ‬㒮఺∉⑼ߢ⸻≮ߒߡ޿ࠆ ADA ᰳ៊∝ᖚ⠪ߦኻߒ‫ޔ‬ㅳ৻࿁ ADAGEN ߩ╭⡺ౝ
ᛩਈࠍⴕߞߡ߅ࠅ‫੹ޔ‬ᓟ߽ ADAGEN ߦࠃࠆ㉂⚛⵬ల≮ᴺࠍ⛮⛯ߒߡⴕ߆ߥߌࠇ߫ߥࠄߥ޿‫ޔߚ߹ޕ‬
ో࿖ߦߪ ADAGEN ࠍᔅⷐߣߔࠆ߽౉ᚻߦ⥋ࠄߥ޿∝଀߽ሽ࿷ߔࠆߎߣ߆ࠄ‫ޔ‬ADAGEN ߩ቟ోߢㆃ
ṛή߈౉ᚻࠍน⢻ߣߔࠆߚ߼‫ޔ‬කᏧਥዉᴦ㛎ࠍታᣉߒ‫ޔ‬࿖ౝ૶↪ࠍน⢻ߦߔࠆක⮎ຠᛚ⹺↳⺧ࠍ⋡
ᜰߔ‫ޕ‬หᤨߦ‫ޔ‬ෘ↢ഭ௛⋭߇㐿௅ߒߚᧂᛚ⹺⮎૶↪໧㗴ᬌ⸛ળ⼏ߦ ADAGEN ࠍ↳⺧ߒ‫ޔ‬ᐔᚑ 24 ᐕ
3 ᦬ 23 ᣣߦ㐿௅ߐࠇߚળ⼏ߦ߅޿ߡ‫ޟ‬ක≮਄ߩᔅⷐᕈߩ㜞޿ᧂᛚ⹺⮎ὐㆡᔕᄖ⮎‫ߡߒߣޠ‬ᛚ⹺ߐࠇ
ߚ‫⎇ᧄޔ߅ߥޕ‬ⓥߩ৻ㇱߪ‫ޟ‬ᚑ⢒ක≮⎇ⓥ㐿⊒⾌‫ޠ‬
㧔ᐔᚑ 22ޯ24 ᐕᐲ㧕ߩഥᚑࠍฃߌߡⴕࠊࠇߡ޿
ࠆ‫ޕ‬
㧙㧙