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B-cell ELISpot イムノグロブリン & B細胞応答研究ツール Detail on the Web 溶液サンプル中の抗体反応を測定するために ELISpot のヒントとコツ、 技術情報をコスモ・バイオウェブ上で紹介しています。 デザインされたアッセイはたくさんありますが、 抗体分泌細胞(antibody-secreting cell;ASC) 記事 ID 検索 1004 詳しい情報はコスモ・バイオ Web サイトへ そのものにフォーカスしたアッセイの数はわずか です。その中のひとつが B-cell ELISpot キットです。 図 2. B-cell ELISpot の原理 ELISpot 技術をお使いいただける研究 1 1)キャプチャー抗 Ig 抗体を 96 ウェル ELISpot プレートに固相化 ● 液性免疫研究 ● ワクチンで誘導された抗体応答 2-4)細胞を加えインキュベーションし、分泌抗体をキャ プチャー抗体に結合させる ● B 細胞が分泌する異なるアイソタイプ 抗体の測定 5)細胞を除去後、ウェルにビオチン標識抗原(抗原特異 的細胞の検出)(B)あるいはビオチン標識抗 Ig 抗体 (すべての抗体分泌細胞の検出)(C)を加える ELISpot はサンプル中の抗体分泌細胞と抗 2 6-7)ストレプトアビジン - 酵素、基質を加えてスポッ トを可視化 8) 顕微鏡あるいは ELISpot リーダーでス ポットを評価・数値化 原特異的抗体分泌細胞の高感度な測定と同定 3 の両方が可能です(図 1)。 ヒト、サル、マウスサンプルの異なるアイソタイプの B 細胞分泌抗体の解析用キットと抗原特異的抗体分泌細胞検出 4 システムをご用意しています。 さらに従来法のプロトコールを改良して、抗原をプレートに固定化するので B はなく、抗 Ig 抗体をコートして、抗原はビオチン化して検出に使用すること B B B B B B 5 B が可能です(図 2)。 B B B B B B B B B B B E B ストレプト アビジン- 酵素 B C E E E C ストレプト 酵素 E アビジンE E E E A E E E B E E A E E E E E B B B B ビオチン化 抗Ig抗体 B ビオチン化 抗原 ビオチン化 抗Ig抗体 B B B 抗原 B E E 抗原特異的IgG Ig ELISpot ELISpot Antigen-specific B B B キャプチャー用 抗Ig抗体 B B B 細胞から分泌 されたIg 細胞から分泌 されたIg E E B B B B B E B キャプチャー用 抗Ig抗体 B E E E B 6 E B B E B E E E B B E B B 7 E B E E B B B トータル ELISpot TotalIgIgG ELISpot 8 図 1. 抗原特異的 B-cell ELISpot の 2 つの手法 (A) 抗原を固相化 (B) 抗原をビオチン標識* して検出に使用 (A), (B) 図の例では Ig 産生細胞に限定した解析を示し、Ig 分泌細胞の総数は (C) で示すよう に定量する。 *B-Cell ELISpot キットにビオチン標識キットは含まれません。 Antigen-specific (B) Total Ig (C) B-cell ELISpot イムノグロブリン&B 細胞応答研究ツール 構成内容(キットに PVDF プレート及び基質は含まれません) ●キャプチャー抗体 ●ビオチン標識検出抗体 ●ストレプトアビジン -ALP または -HRP ●リコンビナント IL-2 * *メモリー B 細胞の刺激処理用試薬入り (品番 3810-2A と 3810-2H には CD40 抗体と リコンビナント IL-4 が含まれます) ●R848 * 商品リスト Mabtech AB メーカー略号:MAB 品名 適用種 Human IgA ELISpot BASIC Human Human IgE ELISpot BASIC Human IgG ELISpot BASIC 検出 Human Human, Monkey Human IgM ELISpot BASIC Monkey IgA ELISpot BASIC Mouse IgA ELISpot BASIC Mouse IgG ELISpot BASIC Mouse IgM ELISpot BASIC Human Monkey Mouse Mouse Mouse 包装 品番 希望販売価格 ALP 4 plates 3860-2A ¥66,000 HRP 4 plates 3860-2H ¥66,000 ALP 4 plates 3810-2A ¥66,000 HRP 4 plates 3810-2H ¥66,000 ALP 4 plates 3850-2A ¥66,000 HRP 4 plates 3850-2H ¥66,000 ALP 4 plates 3840-2A ¥102,000 HRP 4 plates 3840-2H ¥102,000 ALP 4 plates 3860M-2A ¥66,000 HRP 4 plates 3860M-2H ¥66,000 ALP 4 plates 3835-2A ¥102,000 HRP 4 plates 3835-2H ¥102,000 ALP 4 plates 3825-2A ¥66,000 HRP 4 plates 3825-2H ¥66,000 ALP 4 plates 3845-2A ¥102,000 HRP 4 plates 3845-2H ¥102,000 アクセサリー ● 基質 品名 Mabtech AB メーカー略号:MAB 検出 包装 品番 希望販売価格 BCIP/NBT-plus substrate for ELISpot ALP 用 120 ml 3650-10 ¥18,000 TMB substrate for ELISpot HRP 用 120 ml 3651-10 ¥18,000 プレートタイプ 包装 品番 白色 10 plates 3654-WP-10 透明 10 plates 3654-TP-10 ¥59,000 白色 , アンダードレインなし 10 plates 3654-EP-10 ¥77,000 ● プレート 品名 ELISpot PVDF plate, white ELISpot PVDF plate, clear ELISpot PVDF plate, w/o underdrain Mabtech AB メーカー略号:MAB ● 希望販売価格 ・・・「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。 記載の希望販売価格は2015 年 7月1日現在の希望販売価格です。 予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。 ● 使 用 範 囲 ・・・ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。 人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意ください。 弊社商品取扱い販売店、 または Web から ご請求ください。 希望販売価格 ¥59,000 (12306)