eFluxx-ID® Green 多剤耐性アッセイキット

®
Life Sciences
蛍光顕微鏡・フローサイトメトリーによる判定
scientists enabling scientists.
eFluxx-ID® Green 多剤耐性アッセイキット
eFluxx-ID® 多剤耐性アッセイキットは 3 種類の排出型 ABC トランスポータータンパク質：MDR1 (P-glycoprotein)、
MRP1/2、BCRP の機能的検出をするキットです。アッセイでは細胞膜に容易に透過する疎水性の非蛍光化合物を利用
しており、細胞内エステラーゼによって加水分解を受けると親水性の蛍光色素に変化します。その結果、蛍光色素は
ABC トランスポータータンパク質活性によって積極的に排出されない限り細胞内に留まります。本キットに含まれる、
ABC トランスポータータンパク質特異的阻害剤を使用することで、各 MDR トランスポーターの活性を蓄積された色素
の量の違いによって解析することが可能です。
特長
●3 種類の ABC トランスポータータンパク質活動に関連する薬剤耐性を測定
●各種阻害剤：MDR1 (P-glycoprotein)、MRP1/2、BCRP を添付
●簡単で洗浄不要なプロトコールにより 1 時間で測定完了
●3 種類の ABC トランスポーターの為の包括的な拡散検出アッセイ
●Calcein AM では検出できない BCRP 活性を検出
●GFP 発現細胞株や他の CELLestial 色素とのマルチプレックスが可能
構成内容
●eFluxx-ID® Green 検出試薬
●MDR1 阻害剤 (Verapamil)
●MRP 阻害剤 (MK-571)
●BCRP 阻害剤 (Novobiocin)
●Propidium Iodide
多剤耐性：MDR (multidrug resistance) とは
多剤耐性は構造及び細胞内ターゲットが異なる
様々な化学療法薬に対する腫瘍細胞の抵抗です。
多剤耐性の現象は腫瘍学において周知の問題で、
ガン治療にあたって深く考慮する必要があります。
MDR の根本的な分子原理の一つとして、殆どの生
命体に存在している膜貫通 ATP 結合カセット (ABC) トランス
ポータータンパク質ファミリーのアップレギュレーションが挙げ
られます。これらタンパク質は悪性細胞から幅広い治療化合物を
積極的に排出することでガンの化学療法耐性を引き起こします。
一方では細胞や組織、血液組織関門で毒性化合物に対する重要な
防御機能として働いています。
図 1、既知阻害剤による CHO K1 細胞の ABC トランスポーター活動プロファイリング
細胞を一般的な MDR 阻害剤（左のカラム）、もしくはキットに含まれるトランスポーター特
異的阻害剤で 5 分間、37℃でインキュベートした。使用した阻害剤は、以下の通り。
5 µM Cyclosporin A (general MDR inhibitor); 20 µM Verapamil (specific P-gp
inhibitor); 0.05 mM MK-571 (specific MRP inhibitor); 0.05 mM Novobiocin (specific
BCRP inhibitor).
蛍光色素分子
eFluxx-ID 色素
Cy3&Cy5、PI、
7-AAD、APC、
Texas Red、EFP、
YFP、TAMRA、UV、
Violet 色素
eFluxx-ID Green
GFP/eGFP、RFP、PI、
7-AAD、APC、Cy5、
eFluxx-ID Gold
Rhodamine123、
Texas Red、UV、
Violet 色素
図 2、3 種類の ABC トランスポータータンパク質活動の検出
図 3、eFluxx-ID Green 490/514 nm ex/em 及び Gold
CHO K1 細胞の ABC トランスポータータンパク質活動を
530/570 nm ex/em のスペクトル特性は他の一般的な蛍光色
EFluxx-ID®Green ( 上 )、Gold ( 中央 )、カルセイン AM ( 下 ) 色素を使っ 素とのマルチプレックスを可能にします。
たフローサイトメトリーで評価した。ABC トランスポータータンパク
質の特異的阻害剤で処理したもの ( 薄いヒストグラム ) は未処理細胞
( 枠線のあるヒストグラム ) に比べて細胞内に色素が留まっていた。多
剤耐性の定量的測定結果は MAF スコア ( 多剤耐性活性化因子 ) で表さ
れています。より高い MAF スコアは特異的インヒビターによる
eFluxx-ID 色素の優れた特異性によりもたらされた結果です。
CalceinAM（MDR アッセイの一般的なプローブ）では BCRP 活動を検
出することはできません。
表 1、他の蛍光色素と eFluxx-ID MDR 色素と
の適合性
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
品番
包装
希望販売価格
eFluxx-ID® Green multidrug resistance assay kit
ENZ-51029-K100
1kit
\78,000
eFluxx-ID® Gold multidrug resistance assay kit
ENZ-51030-K100
1kit
\78,000
FDA 承認薬剤ライブラリ V2
本ライブラリでは、類似のライブラリに含まれるような不適切な
化合物（除草剤、殺虫剤、日焼け止め、細胞毒薬物）を除いてあ
ります。最も豊富な生理活性ソースで、drug-likeness 率が高い
化合物を多く含んだセットです。このセットから始めることで、
最適化プログラムを有利に進めることが期待できます。含まれる
化合物の多くは、追加試験用に単品で提供することも可能です。
仕様
●容量：100μL/well
●濃度：特に記載がなければ 10mM
●溶媒：DMSO（一部化合物はヌクレアーゼフリー水）
●構成内容：780 以上の化合物のセット
特長
●心臓病学、精神神経学、免疫学、腫瘍学などの分野に
おける各種創薬にご利用いただける化合物
●前バージョンに比べて 新たに加わった化合物は 100 以上！
●100％既知の生理活性をもち、最高の drug-likeness
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
FDA Approved Drug Library V2, Japan version
品番
包装
希望販売価格
BML-2843J-0100
100μℓ/well
ご照会
天然物ライブラリ
天然物は化学的多様性の卓越したソースであり、薬理的活性低分
子のスクリーニングプログラムにおいて理想的なスターティング
ポイントです。歴史的にみて、新薬の成功を納めたほとんどのソー
スが天然物からです。本ライブラリでは民族薬理学由来の多くの
化合物を含んでおり、よく知られた構造の精製天然物 500 以上
からなっています。
仕様
●容量：100μL/well もしくは 500μL/well
●濃度：2mg/ml
●溶媒：DMSO
●構成内容：502 種類の化合物のセット
Enzo Life Sciences, Inc.　メーカー略号：ENZ
品名
Natural Products Compound Library
品番
包装
希望販売価格
BML-2865-0100
100μℓ/well
ご照会
BML-2865-0500
500μℓ/well
ご照会
● 希望販売価格 ･･･「希望販売価格」は参考であり、販売店様からの販売価格ではございません。
記載の希望販売価格は２０１3 年 7月１日現在の希望販売価格です。
予告なしに改定される場合がありますので、ご注文の際にご確認下さい。消費税は含まれておりません。
● 使 用 範 囲 ･･･ 記載の商品は全て、「研究用試薬」です。
人や動物の医療用・臨床診断用等としては使用しないよう、十分ご注意下さい。
(11881)