蛋白質核酸酵素:転写調節因子による転写活性化機構の解析

総説
転写調節 因子による転写活 性化機構の 解析
堀越正美 ・長谷川 聡
数 多 くの転 写 因子 群 が生 化 学 的 ・分 子生 物 学 的 ・遺伝 学 的 ・細胞 生 物 学 的 とい っ た さ
ま ざ ま な アプ ロー チ で 単 離 され ， そ の 構 造 と機 能 の 解 析 が 広 くな さ れ て き た。 そ の よ うな
一 元 的 な 解析 か ら， これ ら の転 写 因 子 群 が ど の時 期 に ， ど の よ うな 経 路 で ， ど の よ うに 転
写 活 性化 を さ ま ざ まな 遺 伝 子 にひ き起 こ して い る か と い った 多元 的な 解 析 ， い わ ゆ る 転 写
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因 子 間 相 互作 用 （コ ミュニ ケ ー シ ョン） の解 析 が 中心 とな っ て き た のは ， 当然 の 流 れ で あ
る。 本 稿 では ， 転 写 調 節 因 子 群 に よ る転 写 活 性化 の分 子機 構 を， そ の標 的 因 子 群 の 側 か ら
論 じる こと に した。
は じめ に 真 核 細胞 に お け る転 写 調 節 研 究 の進 展 は，
転 写 開 始 に は プ ロモ ー タ ー 内 のTATAボ
ックス 領 域 が
以 下 の4つ の段 階 に分 け て考 え る こ とが で き る。 す な わ
必 要 であ る こ と3）
， さ ら には さ ま ざ まな 調 節DNAエ
ち， ① 試 験 管 内 での 無 細胞 転 写 開始 お よび 調 節 系 を確
メ ン トが ， 各々 の遺 伝 子 に あ って 転 写 活 性 量 を規 定 して
立す る 段階
い る こ と4)，な どが 示 さ れ た 。
② 転 写 因 子や プ ロモ ー タ ー領 域 を 同定 ・
単 離 ・機 能 解 析 す る段 階 ，③ 各 転 写 因 子 ，プ ロモ ー タ ー
続 い て，DNA-蛋
レ
白 質 相 互 作 用 を解 析 す る ゲル シフ ト
内 の ど の領 域 （ドメ イ ソあ るい は エ レメ ン ト） が， どの
法 ， フ ッ トプ リン ト法 な どを 用 いて の， 転 写 調 節 因子 の
よ うな 機 能 を有 して い るのか を詳 細 に解 析 す る段 階， ④
同定 ・解 析 ， それ らの 因子 群 を精 製 す るた め のDNAア
転 写 因 子 ど う し， 転 写 因 子一プ ロモ ー タ ー が ど の よ うな
フ ィニテ ィー法 の改 良， また ， そ れ ら 因子 群 を コー ドす
相 互 作 用 を 行 な い ， ど の よ うに 転 写活 性 量 を調 節 す るか
るcDNAを
を 解 析 す る段 階 ， であ る。 そ こで 以上 の 解析 を通 して 得
確 立 な どが 行 な わ れ ，さ ま ざ ま な 転 写 調 節 因子 （
す なわ ち
られ た 今 ま で の 結 果 を， 具 体 的 に簡 潔 に述 べ る。
DNA結
まず， 正確 な 転 写 開 始 反応 を無 細 胞 系 で再 現 す る系 が
確 立 さ れ ，関 与 す る転 写 因 子 お よびDNAプ
ロモ ー タ ー
領 域 の 解析 が な され た1）
。 また 細 胞 を用 い た トラ ンス フ
ェ ク シ ョン法 に よ って も，DNAプ
ロモ ー タ ー領 域 の 解
直 接 単 離 す るた め の， さ ま ざ ま な方 法 論 の
合 因 子 ） の 同 定 ・精 製 ，cDNAク
爆 発 的 な 勢 い で進 行 した5）
。 これ ら転 写 調 節 因 子 の 働 く
転 写 調 節 系 の 確 立 は ，1980年
な わ れ た が6）
， 多 くは1985年
そ の後 ， これ らcDNAが
初 期 に 先 駆 的 な 研 究 も行
以降
は， さ ま ざ まなDNA解
同定 ・解 析 が 広 く行 なわ れ た 。 そ の 結 果 ，mRNA合
の 解析 へ と進 んだ 。 た とえ ばDNA結
を つ か さ どる 転 写 開 始 反 応 に は転 写酵 素RNAポ
相 次 い で な され た 。
単 離 され た 転 写 調 節 因 子 群
析， と くに上 流 エ レメ ン トや エ ンハ ンサ ー エ レメ ソ トの
成
ロー ニ ン グが
析 技 術 を駆 使 し，機 能 ドメ イ ソ
合 因 子 は ，DNA
リメ ラ
結 合 活 性 領 域 や 転 写 活 性 化 領 域 ， 転 写 調 節 領域 な どか ら
ー ゼⅡ 以 外 に， 複 数 の 基 本 因 子群 が必 要 で あ る こ と2）
，
な っ て い る こ とが 示 され ， さ らに は ， これ ら の領 域 は 構
Masami Horikoshi，
University Satoshi New Molecular 東 京 大 学 応 用 微 生 物 研 究 所
（〒113東
of Tokyo，Yayoi，Bunkyo一ku，Tokyo Hasegawa,Laboratory 京 都 文 京 区 弥 生1−1−1）
［Institute of ApPlied M三crobiology，The
113，Japanコ
of Biochemistry and Molecular Biology,The Rockefeller University,1230 York Avenue,
York,NY10021,USA
Mechanism of Transcriptional Activation
【転 写 活 性 化 】 【転写 調 節 因子 】 【TFIID】
【転 写 因子 間 相 互 作 用】
831
22
蛋 白 質 核 酸 酵 素 No.5（1993）
造 上 の特 徴 か ら， 複 数 の タ イ プ に分 け て 考え られ る こ と
どの よ うに な って い るか （
各 機 能 ドメ イ ンが ， どの よ う
も示 され た7）
。具 体 的 には ，DNA結
な 構 造 モ チ ー フ を有 して い るか な ど） の 理 解 ， ② そ れ
合 活 性 領 域 と して，
① ヘ リ ックス ・ター ン ・ヘ リ ッ クス構 造 ，②Znフ
ィソ
ら因 子 間 の 相互 作 用 の理 解
す な わ ち ， 各 因子 が 機 能 を
ガ ー 構 造 ，③ 塩 基 性 領 域 ・ヘ リ ック ス ・ル ー プ ・ヘ リ
発 揮 す る場 合， どの 因 子 に働 きか け る のか ， 相 互 作 用 の
ッ クス 構 造 ，④ 塩 基 性 領 域 ・ロ イ シ ソ ジ ッパ ー な どが
結 果， どの よ うな変 化 が 生 ず るの か な ど の 理 解 ， ③ 上
代 表 的 であ り， 転 写活 性化 領 域 と して は ，① 酸 性 領 域 ，
記 ② で 述 べ た2分 子 間 反 応 の 単 純 な も のだ け で な く，
② グル タ ミンに 富 む 領域 ， ③ プ ロ リソ に 富 む 領 域 な ど
最 終 的 にRNA合
が ， 明 らか に され て き た。
通 して の転 写 開 始 調 節 過 程 の解 析， す な わ ち， 転 写 調 節
しか しな が ら，DNA-蛋
白 質 相 互 作 用 ，蛋 白 質 一蛋 白 質
因 子 が どの転 写 開 始 因子 群 に働 きか け て ， ど の転 写 開 始
相 互 作 用 の解 析 を 通 して の， よ りダ イ ナ ミ ックな 転 写 活
反 応 素 過程 に効 果 を及 ぼ し， 結 果 と して ど の よ うに転 写
性 化機 構 の 解 析 は， 構 成 す る転 写 因子 が きわ め て 多 数 で
活 性化 が行 なわ れ て い るか の理 解
成 が 起 こ るた め の，複 数 の相 互 作 用 を
④ さ ら に これ ら の
あ るた め， ほ と ん ど解 析 が 進 ん で い な い の が現 状 で あ
解 析 を 通 して， 多 様 な 転 写 調 節 因 子 に よ る転 写 活 性 化 機
る。 そ れ で も1988年
構 の， 共通 性 ・多 様 性 を 見 いだ して の 統 一 的 理 解 ， へ と
に 提 出 され た ， 転 写 調 節 因 子 に
よ る 転 写活 性化 機 構 の モ デ ル8 10)（転 写 調 節 因 子 は ，
TATAボ
ックス 結 合 因 子TFⅡDに
RNAポ
進 ん で い くわ け であ る。
働 きか け ，TFⅡD
の 構造 変化 を ひ き起 こ し， そ の 複 合 体 構 造 は転 写 酵 素
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Vol38
リメ ラー ゼⅡ や 基 本 因 子群 に と って 容 易 に 認 識
2．DNA側
の コ ンポ ー ネ ン ト
次に 各々 の項 目 につ い て， 今 ま で の 砥 究 の結 果 を 振 り
さ れ， 転 写 活 性化 を ひ き起 こす ， とい うモ デ ル ） は， そ
返 ってみ る。 関 与 す る コ ン ポ ー ネ ソ トと して は ， 図1に
の後 の こ の方 面 で の研 究 の 方 向 性 を決 定 的 に した。
示 す よ うに，DNA・
転 写 調 節 研 究 の歴 史 の なか で ， 初 期 に 同 定 され た コア
し，RNAが
蛋 白質 が お も に 考え られ る （た だ
関 与す る，RNAポ
リ メラーⅡ
，Ⅲ系 も 存
プ ロモ ー タ ー に関 与 す る基 本 因 子群 は， さ ま ざ まな 理 由
在 す る）。DNAエ
に よ り解 析 が 遅 れ て い た が ， 最 近 にな っ て精 製 ・cDNA
ク ロー ニ ン グへ と著 しい 進 展 が み られ て き て い る11）
。そ
置 か ら，以 下 の3つ に 大 別 で き る4）。① コ ア ・プ ロモ
ー タ ー ：転 写 開 始 反 応 に必 要 な 最 小 領 域 で ，-25付
近
の よ うな転 写 調 節 研 究 の流 れ の な か で， 近 年 は転 写 調 節
に 存在 す るTATAボ
因 子 に よ る転 写 活 性 化 機 構に 関 す る研 究 が 中 心 的 トピ ッ
存在 す るイ ニ シ エ ー タ ー ・エ レ メ ソ トな ど が 働 い て い
クス とな っ てお り， とくに 基 本 因 子TATAボ
レメ ソ トにつ い て は ，機 能， 空 間 的 配
ック ス， 転 写 開 始 位 置 や 下 流 域 に
ッ クス結
る11）
。 ② 上 流 エ レメ ン ト ：比 較 的 コア ・プ ロ モ ー タ ー
重 点 を お く研 究 が きわ め て多 い。 これ
の近 くに存 在 し， さ ま ざ まな 転 写 調 節 因 子 が 作 用 し， 転
らの状 況 を踏 まえ て， 以 下 を 理 解 して いた だ け れ ば幸 い
写 開始 頻 度 を増 減 さ せ る 働 き を も って い る7）
。 ③ エン
合 因子TFⅡDに
で あ る。
ハ ン サ ー 。エ レメ ン ト ：コ ア ・プ ロモ ー ター よ り遠 く離
れ た位 置 に存 在 し， 上 流 エ ソ レメ ソ トと同 様 に 転写 調 節
Ⅰ
． 転 写 活 性 化 機 構 を ど う考 え る か ？
因 子 が作 用 し， 転 写 開 始 頻 度 を 増 減 さ せ る働 きを もつ 。
そ の作 用 は比 較 的 ， 方 向 性 お よ び位 置 に よ らな い。
1． 考 慮 す べ き ステ ップ
転 写 活 性 化 機 構 と一 口に 言 って も，実 際 に は ，① 多 様
な 細 胞 外 情 報 に よ る シ グナ ル 伝 達 経 路 の 活 性 化 ， ② そ
3． 基 本 因 子
以 上 のDNAエ
レメ ソ トに対 応 して ，性 質 の 異 な る蛋
れ らシ グ ナ ル伝 達に よ る 転 写 調 節 因 子 群 の 活 性 化 ， ③
白質 性 因子 が 作 用 す る。 コ ア ・プ ロモ ー タ ー に 対 して
活 性 化 され た 転 写 調 節 因 子群 に よ る転 写 開 始 因 子 群 との
は，TATAボ
相 互作 用 ， そ の結 果 と して の転 写 開 始 反 応 過 程 の 活 性
ー結 合 因子 が， 直 接DNAに
化 ， な ど複 数 の ス テ ップが 考 え られ るが ， こ こ で は と く
のDNA-蛋
に③ に焦 点 を あ て て議 論す る。 本 領 域 は 転 写 調 節 研 究 分
考 え な け れ ば な らな い 要件 は， 以 下 の 如 くで あ る。 ①
す なわ
ち， どの よ うな因 子 が か か わ り， そ れ ら の物 質 的 基 盤 は
832
イ ニ シエ ー タ
結 合 し作 用 す るが ，そ れ ら
白質 複 合 体 を認 識 し， 他 の転 写 開 始 群 （TF
B，ⅡE.，ⅡF，ⅡG／J，ⅡH：
お よびRNAポ
リメ ラ
Ⅱー
ゼⅡ ） が相 互 作 用 し， 転 写 開 始 が ひ き 起 こ され る。 これ
野 にお いて ， 最 も今 日的 な 話 題 とな って い る。
転 写 調 節 機 構 に関 与 す る コ ソポ ー ネ ン トの理 解
ックス結 合 因 子TFⅡDや
らの 因 子群 の解 析 につ い て は ，TFⅡD以
な って 徐々 にcDNAク
外 は ，最 近 に
ロー ン が単 離 され て きて い る状
況 で あ っ て， 機 能 お よび 構 造 ドメ イ ンの 解 析 は これ か ら
転写調節 因子に よる転写活性化機構 の解析
図1.RNAポ
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であ る11）
。TFⅡDに
23
リ メ ラ ーゼⅡ に よ る転 写 調 節 に 関 与 す る コ ン ポ ー ネ ン ト
つ い て は比 較 的 解 析 が 進 み ， 多 く
ク スな ど） に分 類 で き， 標 的 とす る遺 伝 子 を特 定 で き る
の こ とがわ か っ て き て い るが ， こ の点 は 後 述 す る。 これ
働 き を有 す る。 ⑤ 転 写 活 性 化 ドメ イ ンも， さ ま ざ ま な
ら基 本 因 子 の 本 稿 に お け る意 味 合 い と して は ， ど の調 節
化 学的 性 質 を有 す る構 造 モ チ ー フ （酸 性 領 域 ， プ ロ リソ
因 子 に 対 して ど の基 本 因 子 が 直 接 相 互 作 用 し， そ の結
に富 む 領 域 ， グル タ ミンに 富 む 領域 な ど） に分 類 で き，
果 ， 転 写 開 始 因 子 の プ ロモ ー タ ー上 へ の 分 子 集 合 の， ど
標 的 とす る転 写 因 子 を 特 定 で き る の で は な いか と考 え ら
の過 程 が 影 響 を 受 け る のか が 重 要 な 問 題 とな っ て くるわ
れ て い る。 ⑥ 各々 の 転 写 調 節 因 子 に 対 して ， さ ま ざ ま
け で あ る。
な 外 界 の情 報 が伝 達 され ， リン酸 化 ・脱 リン酸 化 な ど に
よ り， そ の活 性 （DNA結
4． 調 節 因 子
合 活 性 ， 転 写 因 子 相互 作 用 の
活 性 ） が 影 響 を 受 け る （た だ し， これ らに つ い て は 詳 し
上 流 エ レメ ン ト， エ ンハ ンサ ー ・エ レ メ ソ トに対 して
は ，双 方 とも に 基 本 的 に は，DNA結
い解 析 は ほ とん どな い）， な ど で あ る。
合 活 性 を 有 す る転
これ ら転 写 調節 因 子 の， 本 稿 にお け る意 味 合 い を 考 え
写 調 節 因 子群 が働 くわ け で あ る の で， 両 エ レメ ン トにか
る と， や は り転 写 活 性 化 ドメ イ ン に 関 して で あ って， ど
か わ る因 子群 を， 機 能的 に 大 き く分 け る必 然 性 は 現 在 の
の よ うな 化 学 構 造 が 転 写 の 活 性 化 ， す な わ ち 他 の転 写 因
と ころ な い。 これ らの因 子群 は，DNAと
子 と の相 互 作 用 に 重 要 で あ るか？
の ア フ ィニテ
ま た ， それ ら転 写 活
ィー の性 質 を 利 用 して， 比 較 的 簡 便 に 単 離 ・精 製 を行 な
性 化 ドメ イ ンは， どの よ うな 因 子 と相 互 作 用 して機 能 を
うこ とが で き る よ うに な った こ と， また 蛋 白質 を精 製 せ
発 揮 す るの で あ ろ うか？
ず に，cDNAク
べ て きた よ うに， 転 写 活 性 化 に は さ ま ざ ま な タ イ プ の コ
ロー ンを 得 るさ まざ ま な 方法 が 開 発 され
た こ と （蛋 白 質 因 子 自身 の もつ さ まざ まな 性 質 に よ り，
とい うこ とに な ろ う。以 上 述
ン ポ ー ネ ン トが 関 与 す るが ， 本 質 的 に はDNA，
蛋 白質
単 離 が 困難 な もの もあ るが）， な どの 理 由 か ら， 著 しい
のた った2種 類 の コ ンポ ー ネ ン トが か か わ る だ け な の
研 究 の進 展 が み られ た5，7)。
そ れ らの知 見 を 概 念 と し て
で，DNA一
と らえ て み る と， ① 転 写 調 節 因 子 は， 通 常 ，DNA結
り説 明 され るはず で あ る （図2） 。
合
蛋 白 質 ， 蛋 白質 一蛋 白質 相 互 作 用 の 集 積 に よ
ドメ イ ン と転 写 活 性化 ドメイ ン， さ らに 転 写 調 節 にか か
わ る ドメ イ ソ （自身 の 活 性 を 調 節 す る ドメ イ ン） に， 機
能 的 に分 割 され る構 造 を 有 して い る。 ②DNA結
イ ンを もた な い 調 節 因 子 は 通 常 ，他 のDNA結
5， 基 本 因子 と転 写 活 性 化
合 ドメ
そ こ で相 互 作 用 につ い て， 関 与 す る基 本 因子 群 ， 調 節
合 ドメ イ
因子 群 にわ け て考 え てみ る。 基 本 因 子 群 につ い ては 現 在
ソを有 す る調 節 因 子 と相 互 作用 し て 機 能 発 揮 す る。 ③
ま で の とこ ろ，2つ
DNA結
結 合 因子TFⅡD，
合 ドメ イ ン と転 写 活 性 化 ドメ イ ンは 通 常 ， 独 立
の 因子 ， す な わ ちTATAボ
お よびTFⅡD−TATAボ
ックス
ックス 複 合
に 機 能 す る。す な わ ち， 両 ドメ イ ンを 他 の因 子 群 の ドメ
体 に分 子 集 合 す るTFⅡBが
イ ン と交 換 して 機 能 変 換 す る こ とが で き る。 ①DNA結
TFⅡDに
合 ドメ イ ンは い くつか の構 造 モ チ ー フ （ヘ リ ックス ・タ
ー ン ・ヘ リ ッ クス， 塩 基 性 領域 ・ロイ シ ンジ ッパ ー ，Zn
が 相互 作用 して，DNAと
フ ィ ンガ ー， 塩 基 性 領域 ・ヘ リ ックス ・ル ー プ ・ヘ リ ッ
化 ドメ イ ン （
酸 性 領域 ） が， そ の変 化 に直 接 寄 与 す る こ
候 補 と し て考 え られ て い る。
つ い て は ，調 節 因 子 で あ るATFやGAL4
とが，1988年
の 相 互 作 用 に影 響 を与 え る こ
に 解 析 され8 10）
， ま たGAL4の
転写活性
883
24
蛋 白 質 核 酸 酵 素Vo138No.5（1993）
VP16と
相互 作 用 す る こ とに よ り， 転 写 の活 性 化 を ひ き
起 こす とい うモ デ ル で あ る。 実 際 ， 単 離 され たTFⅡB
の一 次 構 造 に は，TFⅡDと
同 様 ，basic repeatが 存在
す る20）
。
こ の よ うに調 節 因子 の標 的 と して ， 少 な くと も2つ の
因 子 （TFⅡDとTFⅡB）
が 考え られ て い る が， どち
らが 正 しい の で あ ろ うか？
で あ ろ うか？
そ れ と も どち ら も正 しい の
現 在 の と ころ 明確 な 答 え は な い が， 私 見
と して は， 調 節 因 子 の種 類 の 数 の多 さ， 基 本 因子 の分 子
集合 過 程 が 複数 の ス テ ップか らな る こ とか ら， 標 的 を1
つ と考 え る必 要 は な い と思 わ れ る。 これ ら の展 開 に つ い
て は今 後 の課 題 であ ろ う。
さ らに は標 的 をTFⅡDやTFⅡBに
限 局 す る必 要 は
な く， 他 の基 本 因子 や 広 くRNAポ
リメ ラー ゼ 皿サ ブ ユ
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ニ ッ トを考 え て も よ い。 こ の点 で， 直 接 相互 作 用す る部
位 が 多 様 性 を示 して も， 最 終 的 な 標 的 は 転 写 酵 素RNA
ポ リメ ラー ゼ 皿で あ る こ とは ， きわ め て 興味 深 い。 実 験
的 証 拠 は な い が ，RNAポ
図2． 転写調節因子に よる転 写活性化機構
リメ ラ ー ゼⅡ の最 大 分 子 量 サ
ブユ ニ ッ トのC末 端 側 に 存 在 す るCTD領
域 （SPTSPSY
の7つ の ア ミノ酸 配列 構 造 が ，26∼52回
く り返 す ） が ，
一 時 そ の化 学 構 造 か ら
， 酸 性 活 性 化 因子 の標 的 では な い
とが調 べ られ て8）
，TFⅡDが
一 躍 ，転 写 調 節 機構 にか か
か と考 え られ た21)。CTDの
サ イ ズ が， 複 数 の 調節 因 子
わ る重 要 な コ ンポー ネ ソ トと して 脚 光 を あ び た。 そ の
が働 く とき に考 え られ る大 き さ と よ く 合 う こ と，CTD
後 ，TFⅡDのTATAボ
が 他 のRNAポ
トのcDNAが
ッ クス結 合 因 子 コソ ポ ー ネ ン
，1989∼1990年
にか け 単 離 さ れ12∼16）
，
蛋 白 質 の構造 上 ・機 能上 の モ チ ー フ の ひ と つ と して，
basic repeatの
存 在 が 確 認 され た12）
。 さ らに1990年
酸 性 活 性 化 因 子 の 代表 例 で あ るVP16が
と相 互 作用 す る こ とが示 され17)，TFⅡDが
リメ ラ ー ゼ に は な く，RNAポ
リメ ラ ー
ゼⅡ のみ に 存 在す る こ とか ら， 興 味 深 い 仮 説 で は あ る
が，明確な答えはいまだない。
，
，直 接TFⅡD
転写調 節 の
6． 調 節 因 子 と転 写 活 性 化
一方 ， 調 節 因 子群 につ い て は 転 写 活 性 化 ドメ イ ンの 解
中 心 的 役 割 を演 じて い る こ とが 次 第 に 明 らか に な って き
析 が比 較 的 進 ん で い る とい え るが ， 実 際 に は さ ま ざ まな
た 。 しか しな が ら， これ ら の結 果 は， い くつ か の調 節 因
化 学構 造 を もつ タ イ プ が存 在 す る， とい う点 のみ が 明 ら
子 群 につ いて のみ 解 析 され て い るだ け であ る こ と， 機 能
か に され て い るだ け であ る。 す な わ ち ， こ の ドメイ ンが
的 に重 要 な 相 互 作 用 で あ るか ど うか は不 明 であ る こ とな
実 際 に は どの よ うな 構 造 を有 し， どの 部 位 が 活 性化 に重
どか ら， モ デ ル の 段 階 で は あ る。 しか も ク ロー ン化 した
要 で， ど の よ うな 因 子 を標 的 と し， ど の よ うな 分 子機 構
TFⅡD分
子 のみ で は， 転 写 基 本 活 性 は あ る もの の， 調
で転 写 の活 性 化 に 参 画 して い るのか に つ い て は ほ とん ど
節 因 子 に よ る転 写 活 性化 に は不 充 分 で あ る こ と も 判 明
わ か っ て いな い とい っ て よ い。 最 も解 析 が 進 ん で い る酸
し14,13)，
関 与 す る コ ン ポ ー ネ ン ト と し て ，TFⅡDτ
性 活 性 化 因 子 に して も， ① 酸 性 ア ミノ酸 の 数 が 多 い と
（TATAボ
転 写 活 性 化 能 が 高 い， ② 酸 性 表 面 を もつ よ うに 作 製 し
TFⅡDサ
ックス 結合 因 子 コ ン ポ ー ネ ン ト） 以 外 の他 の
プ ニ ッ トが必 要 で あ る こ とが 予 想 され た 。 詳
細 は後 述す る。
調 節 因子 の 標 的 の1つ
TFⅡBで
た 因子 は， 転 写 活 性 化 能 を有 す る とい う結 果か ら， 酸 性
表 面 が 直 接 の 相互 作 用 ドメ イ ン であ ろ う と考 え られ て い
あ る19）
。TFⅡBは
と して 最 近 発 表 さ れ た の が，
るが22）
， 実 際 にそ の表 面 が 相 互 作 用 に直 接 か か わ って い
転 写 基 本 因 子 の1つ であ っ
るか ど うか わ か っ て い な いだ け でな く， 他 の研 究 結 果 に
て， 転 写 開 始 位 置 の選 定 に深 くか か わ る こ とが示 唆 され
よれ ば， 酸 性 表 面 が重 要 な の で はな く， 疎 水 性 表 面 が 重 」
て い る。 そ のTFⅡBが
要 で あ る との知 見 も あ る23）
。 そ の よ うな わ け で これ ら転
834
あ る条 件 下 で， 酸 性 活 性 化 因 子
転写調節 因子に よる転写活性化機構 の解析
25
写 活 性 化 ドメ イ ンにつ い て は， 化 学 的 ・構 造 的 に は理 解
こ とが で き る ので， 転 写 活 性 化 機 構 の研 究 は， 黄 金 期 を
され て い な い とい うこ とを認 識 してい た だ きた い 。 しか
迎え るで あ ろ う と考え て い る。
しな が らさ ま ざ ま な 実 験 か ら，TFⅡDやTFⅡBと
相
Ⅱ
． 転 写 活 性 化 を 担 う因 子 群
互 作 用 す る結 果 が 示 され た 調 節 因 子 もあ るの で， 今 後 相
互 作 用 に直 接 か か わ る活 性 化 ドメ イ ソの解 析 は進 む と考
え られ る。 また 相 互 作 用 の 化 学 的 基盤 を理 解 して い くた
め に は ， ぜ ひ と もX線
結 晶構 造 解 析 やNMR解
析によ
る三 次 元 構 造 解 析 が な され て ほ しい も の で あ る。
本 節 で は， 調 節 因 子群 の 標 的 と して これ ま で提 出 され
た， い くつ か の 因子 につ い てそ の概 略 を ま とめ ， 今 後 の
展 開 につ い て考 え てみ た い。 標 的 因 子 と して は 今 まで，
調節 因 子 群 の 新 しい タ イ プ の もの と して， コフ ァ クタ
基 本 因子 群 のTFⅡD，TFⅡBが
考 え られ る 一方， 新 し
ー ・コア クチ ベ ー タ ー ・ア ダ プ タ ー な ど とよば れ る 因子
い タ イ プ の因 子 と して ， コ ア ク チ ベ ー タ ー ・ア ダプ タ ー
群 が あ る24)。化 学 的 な 意 味 合 い と して は， 調 節 因子 群 と
な どが 登 場 して きた 。
基 本 因 子群 との相 互 作 用 の橋 渡 しをす る も の， とい う考
え であ る。 す な わ ち， 何 らか の相 互 作 用 を 調 節 因 子 や 基
1．TFⅡD
本 因子 と 行 な うこ とに よ り， 転 写 活 性 化 に か か わ り，
TFⅡDは
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転 写 調 節 に 貢 献 す る も の とみ る こ とが で き る。 な お
cDNAク
ロー ソ化 さ れ たTFⅡD（TATAボ
ックス 結
歴 史 的 に は，RNAポ
リメ ラ ー ゼⅡ に よ る
＋1か らの 正確 な転 写 開 始 反 応 に 関 与 す る因 子 群 の1つ
と して， 発 見 ・命 名 され た 因 子分 画 の 名 称 であ る2）
。そ
合 因 子 コ ン ポー ネ ン ト） で は ，調 節 因子 に よ る転 写 活 性
の後 ， コア ・プ ロモ ー タ ー 内 の ＋1か
化 が 起 こ らな い こ とや ， 他 の さ ま ざ ま な実 験 証拠 な どか
流 に 存在 す るTATAボ
ら，TFⅡD本
れ ， 長 い間 ， そ の性 質 ・特 徴 か ら，TATAボ
体 は 複 数 の コ ンポ ー ネ ソ トか らな る と考え
られ て き た 。 さ らに は， これ らサ ブ ユ ニ ッ ト ・コ ソポ
合 因 子 ＝TFⅡDと
ら約25塩
基対 上
ッ クス に 結 合 す る こ とが 示 さ
ックス 結
して 考え られ ， 知 られ て き た25）
。 し
ー ネ ン ト以外 に も， 遊 離 の コン ポ ー ネ ン トも必 要 であ る
か しなが ら， そ の因 子 の 精 製 は 困 難 を きわ め た ばか りで
こ とが示 され て い る。 した が っ て， ①TFⅡDは
な く， さ ま ざ まな プ ロモ ー タ ー に 対 し て ，TATAボ
複数 の
ッ
サ ブ ユ ニ ッ トを も ち， そ れ らが 調 節 機 能 を 担 って い る，
クス結 合 活 性 を得 る こ と さえ ，筆 者 以 外 ， で き る状 況 に
② そ れ 以 外 に，TFⅡDや
な か った 。
基 本 因 子 群 に 弱 く相 互 作 用 し
て ， 調 節 機 能 を 発 揮 す る， と い う2つ の カテ ゴ リーに ，
コ ア クチ ベ ー ター 様 分 子 を 分 類 で きそ うで あ る。
こ う した なか で1988年
る進 展8∼10）
， ②TFⅡD研
，① 転 写 活 性 化 機 構 論 に関す
究 を 容 易 に さ せ る研 究 の 進
展26,27)が
み られ た 。 前 者 は ，調 節 因子 がDNAに
7． ま
と
め
結合す
る と， なぜ 転 写 開 始 頻 度 が増 加 す るの か ， と い う疑 問 に
いず れ に して も， 転 写調 節 因 子 に よる転 写 活 性化 に必
要 な 因 子群 につ い て は， ま だ 明 確 な結 論 が な い ぼか りで
答 え た もの で あ っ て， 転 写 調 節 系 に お け るTFⅡDの
重
要 性 を認 識 させ た も の で あ る。 そ の モ デ ル とは ，"調 節
な く， 構 造 的 な解 析 もほ とん ど何 もな され て い な い状 態
因 子 はDNAと
に あ る， とい っ て も過 言 で は な い。 す な わ ち， 近 年 さ ま
精 製 標 品） と相 互 作 用 し，TFⅡDの
結 合 す る 際，TFⅡD（
こ の時 点 で は粗
ざ まな 転 写 因子 自身 の研 究 の進 展 がみ られ た に もか か わ
こ し， プ ロモ ー ター へ の結 合 状 態 を 変 換 さ せ （
実際 に
構 造 変 化 をひ き起
らず ， 先 に問 題 提 起 した 点 につ い て は， ほ とん ど 明 らか
は，TATAボ
に な っ て いな い のが 事 実 であ る。1項 で 提 起 した ③ の問
領 域 にTFⅡDが
題 につ い て も， ほ とん ど解 析 が 行 な わ れ て お らず ，1988
複 合 体 構 造 が ，転 写酵 素RNAポ
年 に提 唱 され た ，GAL4，ATFを
始 因 子群 が分 子集 合 す る の に きわ め て 都 合 が よ い状 態 で
用 い た研 究 の み とい
ックス下 流 域 ， す な わ ち ＋1部 位 を 含 む
新 た に結 合 す る）， そ のTFⅡD−DNA
リメ ラ ー ゼ 皿 を含 む 開
って よい8 10)。 く り返 しにな るが ， 現 段 階 に お い ては ，
あ る” とい うも ので あ る。 しか も調 節 因 子 とTFⅡDと
転 写 調 節 因 子 に よる転 写 活 性 化 の 機 構 は 先 駆 的 な 研
の相 互 作 用 には ，調 節 因 子 の 活 性 化 ドメ イ ン （こ の と き
究8∼10）
が あ る に もか か わ らず ， い まだ ど の よ うな 因 子 が
は， 酸 性 活 性 化 因 子 を 使 用 ） が 必 要 で あ る こ と が示 さ
関 与 して い るか 不 明確
れ8）
，TFⅡDが
とい っ た レベ ル であ る こ とを
理 解 して い ただ きた い。 ただ し今 後 は， 今 ま で に単 離 さ
れ た 基 本 因子 群 ・調 節 因 子 群 ， 今 後1年 以 内 にcDNA
ク ロー ン がす べ て得 られ る であ ろ う基 本 因 子 群 を用 い る
転 写 調 節 系 に お い て中 心 的 な 役 割 を 担
って い るこ とが 明 らか にな った 。
② の研 究 は ， そ の後 のTFⅡD遺
結 し，TFⅡD研
伝 子 の 単離 へ と直
究 を 容 易 に さ せ る に 至 った も の で あ
835
26
蛋 白 質 核 酸 酵 素 図3．
る。 つ ま り困 難 を き わ め て い たTFⅡDの
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て ， パ ン酵 母TFⅡDが
ヒ トTFⅡDと
Vol38No.5（1993）
さ ま ざ ま な種 由来 のTFⅡDの
構造比較
精 製 に関 し
酸 性活 性化 領 域 と相 互 作 用 す る可 能 性 が考え られ るが，
基本 転写 系 に
証 明 は な い 。 しか し， 種 々 の タ イ プ の転 写 因 子 と相互 作
お い て機 能 的 に代 替 で き る との結 果 が 変 化 を もた ら した
用 して い る ら しい結 果 が， い くつ か 得 られ て い る，④σ
（こ の結 果 は ， パ ン酵 母GAL4が
ホ モ ロ ジー ；DNA結
ヒ ト細 胞 系 で も 機 能
合 特 異 性 に 関 与 す る可 能 性 が 考 え
す る とい う実 験 事 実 か ら導 き 出 さ れ た， 調 節 因 子 に よる
られ た が，X線 解 析 結 果 は一 部 否 定 す る格 好 に な り， そ
転 写 調 節 機 能 は， パ ン酵 母 か ら ヒ トに至 るま で， 共 通 性
れ とは 別 に他 の転 写 因子 群 との 相 互 作 用 に 関与 す る可 能
を有 す る との 仮 説 に 立 脚 して い る）28）
。 パ ン酵 母 か らの
性 が で て きた ， な ど であ る。
精 製 が 容 易 で あ る こ とは す ぐ に示 され た29）（
材 料 が集 め
や す い とい うよ りは ， パ ン酵 母 のTFⅡDが
サブユニ ッ
TFⅡDの
構 造 解 析 は， 多 くの 変 異 体 を 用 い て 行 なわ
れ ，DNA結
合 ドメ イ ンな ど につ い て， き わめ て有 効 な
ト構 造 を もた ず ， 小 さな 分 子 と して 存 在 す る こ と に よ
結 果 が 得 られ た 。 ①direct repeat構
る）。1989年 に は5つ の グル ー プ に よ りパ ン酵 母TFⅡD
の ドメ イ ンに 分 離 で き る が， 双 方 と もに 必 須 であ る こ
遺 伝 子 の単離 ，1990年
に は 分 裂 酵 母 （2）， 植 物 （1），
シ ョウ ジ ョウバ エ （2）， ヒ ト （3） か らcDNAが
単離
と32｝
， ②DNAに
造 が必 要 で ，2つ
モ ノ マ ー で 結 合 す る こ と30）
， ③DNA
ベ ン デ ィン グ能 を有 す る こ と33)r④DNAの
主溝 （major
され た ［（ ） 内 数字 は 単離 し た グ ル ー プ の 数 ］。1990
groove） で なく ， 副 溝 （minor groove） に 結 合 す るュ
年 に，in vatro系 で の構 造 活 性 相 関30）
，1991年
以降，
ニ ー クな 因 子 であ る34）
。 またX線 結 晶構 造 解析 に よ る三
で の構 造 活 性 相 関 の 解 析 が な され31）
， 本因子
次 元 構 造 も最 近 明 らか に な っ た35）
。
一 方 ， 機 能 的 に は， ク ロー ン化 因 子 を用 い て以 下 の こ
in vivo系
の 性 質 が 幅 広 く解 析 され た。
そ れ らの結 果 を簡 単 に ま とめ る と， 以 下 の よ うで あ る
（図3） 。す なわ ちTFⅡDは
の大 きな
子 に よ る転写 活 性 化 に は 不 充 分 であ る こ と14）
，基本転写
酸 配 列 が種 に よ りま ち ま ち で あ るが ，C末 端 側180個
ア ミノ酸 は種 間 で80％
ック
端 側 は 長 さお よび ア ミノ
構 造 的 に は ，2つ
サ ブ ドメ イ ン に分 け られ ，N末
とが 明 らか とな った 。 ク ロー ン化 さ れ たTATAボ
ス 結 合 因 子 は， 基 本 転 写 活 性 に は充 分 で あ るが ， 調 節 因
の
以 上 の 相 同 性 を 有す るば か りで
活 性 能 は ，C末 端 側180個
の ア ミノ酸 領 域 だ け で 充 分 で
あ る こ と30）
な ど で あ る。 これ らの実 験 結 果 は ，TFⅡD
な く， 一 次 配 列 内 で1個 の ア ミノ酸 の 付 加 や 欠 失 も ま っ
が，TATAボ
た くみ られ な い14)。このC末 端 側 領 域 に は， 以 下 の4つ
ッ クス結 合 因 子 コン ポ ー ネ ン ト以 外 に ，
複 数 の 因 子か ら成 り立 つ こ とを 予 想 させ る。 この 予 想 は
の特 徴的 な配 列 が 存 在 す る。 ①direct repeats； 分 子 内
また ，①native TFⅡDの
2量 体化 に関 与 す る可 能 性 が考 え られ， 最 近 の 筆 者 らに
な分 子 で あ る こ と， ②native TFⅡDは
よ るX線 結 晶構 造 解 析 の結 果 ， 対 称 構 造 を つ く るの に 使
ス主 要 後 期 遺 伝 子 プ ロモ ー タ ー上 で，TATAボ
わ れ て い る。 ②mycホ
領 域 だ け で な く， ＋1部 位 を 含 む 下 流 域 に も結合 す るの
モ ロジ ー／ヘ リ ックス ・ル ー プ ・
ヘ リ ッ クス ；分 子 内あ る い は分 子 間 相 互 作 用 に関 与 す る
に 対 し， ク ロー ン化TATAボ
可 能 性 が考え られ た が， 実 験 事 実 の 蓄積 は な い， た だ し
ネ ン トは ，TATAボ
X線 解析 結 果 は支 持 す る。 ③basic repeat； 調節 因 子 の
か ら も支 持 され る25，36）
。
836
分 子量 は ，100K以
上 の巨大
， アデ ノ ウイ ル
ックス
ッ クス結 合 因 子 コ ンポ ー
ッ クス のみ に結 合 す る， とい う結 果
27
転写調節因子に よる転写活性化機構 の解析
よっ てTFⅡDの
サ ブ ユ ニ ッ構
造 を 明 らか にす る こ
とが ， 調 節 因 子 に よ る転 写 活 性 化 機 構 を 考 え る うえ で，
る方 法 ，TFⅡDτcDNAに
プ ・TFⅡDτ
きわ め て 重要 な こ とに な る。 近 年 そ れ らサ ブ ユ ニ ッ ト ・
コ ンポ ー ネ ン トの解 析 が， い くつ か の グル ー プか ら報 告
され て い る。 ま たTFⅡDに
TFⅡDに
結 合 す る補 助 因子 群 （
弱く
相互 作 用 す る因 子 群 で， 本来 のTFⅡDの
構
細胞
に対 す るTFⅡD再
構 成 を行なって
トー
か ら精 製 を 試 み る ， さ ま ざま な ア フ ィ ニ テ ィ ー法 が導 入
され た 。 ま たTFⅡDτ
に相 互 作 用 す るサ ブ ユ ニ ッ ト因
子 を ， 発 現 ベ ク タ ー ・ラ イ ブ ラ リー を 利 用 し て 発 現 さ
造 ・機 能 を保 持 す る もの に 必 要 な サ ブユ ニ ッ トとは異 な
せ ，in vivo相
る） も， い くつ か 単 離 ・同 定 さ れ て きた。 特 に酵 母 にお
す る方 法 ，in vitroでfar western法
に よ り直 接 検 出
・単 離 す る方 法 な ど， さ ま ざ ま な 試 み が な され て い る。
い て は， 高 等 生 物TFⅡDの
よ うに ， サ ブユ ニ ッ トが 強
く相互 作 用 して い る様 子 は検 出 さ れ な い の で， 補 助 因 子
互 作 用 を マ ー カー 因 子 に よ り検 出 ・単 離
な お 最 近 示 され た 新 しい概 念 と して は ，TFⅡDτ
群 の 存在 が想 定 され て い る 。 こ こ では便 宜 的 に，TF皿D
RNAポ
に強 く相 互 作 用 す る因 子 群 ， お よび 弱 く相互 作 用 す る因
る42）
。 ま たTFⅡDτ
が ，RNAポ
も作 用 し，RNAポ
リメ ラー ゼI転
子 群 とに分 け て ， 話 を進 め る。
SL1の
2。TFⅡDτ
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エ ピ トー プを 導 入後
内 に戻 して トラ ン ス フ ォー マ ン トを得 て， 細 胞 内 で エ ビ
＊1と 強 く相 互 作 用 す る因 子 群
高等 生 物 ではTFⅡDは
在 す るが ， パ ソ酵 母 では ， 精 製 時 に 分 離 し て し ま うの
か ， 非 常 に小 さ な 分 子 （TATAボ
サ ブ ユ ニ ッ トの1つ
ッ クス 結 合 因 子 コ ソ
ポ ー ネ ン ト） と して 単 離 され る。 よ ってTFⅡDτ
と相
互 作 用 す る因 子群 とい っ て も， 高 等生 物 とパ ソ 酵 母 で
ゼ 皿転 写 因子TFⅢBの
リメ ラー ゼI転 写 系 で
写 因 子 の1つ であ る
と して 存在 して い る こ と も
示 され た43）
。 同様 に してTFⅡDτ
， 非 常 に大 きな分 子 と して存
が，
リメ ラー ゼⅢ 転 写 系 で も 作 用 す る こ とであ
が，RNAポ
リメ ラー
サ ブ ユ ニ ッ トの1つ
と して 存在
す る こ とも， 示 され つ つ あ る。 した が っ てTFⅡDτ
は，
真核 細 胞 転 写 系 の 中 心 的 因 子 で あ る との認 識 は， 従 来 以
上 に 高 ま っ て い る。
ま たRNAポ
リメ ラーゼⅡ 転 写 系 に お い て も，通 常 の
は ， 多 少 意 味合 い が 異 な る と考 え られ る の で， 注 意 を 要
TFⅡD（D-TFⅡDと
す る。 こ こで はTFⅡDτ
ル ロー ス カ ラ ム で 異 な る 位 置 に 溶 出 さ れ るB-TFⅡD
と強 く相 互 作 用 す る， シ ョ ウ
ジ ョウバ エ や ヒ トのTFⅡDに
生 化 学 的 にTFⅡDを
つ い て説 明す る。
とい う因 子 も見 い だ され た44）
。 本 因 子 は 最 近 純 化 され ，
単 離 す る 試 み が ， シ ョウ ジ ョ
ウバ エ （Tjian，Nakatani） ， ヒ ト （Tjian，Horikoshi）
の種 か らな され ， 各々 複 数 の コ ソ ポ ー ネ ソ トか らな る こ
とが 示 され た37∼41）
。 方 法 は ，TFⅡDτ
用 い， 抗 体一TFⅡDτ
に 対 す る抗 体 を
に分 子 集 合 す る， 未 知 の サ ブ ユ ニ
ッ トを 検 出す る も の で， 少 な くと も10個
名 づ け られ た）以 外 に， ホス ホ セ
近 くの強 く相
2つ の サ ブ ユ ニ ッ トか らな り，D-TFⅡDの
サ ブユニッ
ト構 成 とは異 な る こ と， 調 節 因 子 に よ る転 写 活 性 化 能 を
有 しな い こ と， な どが示 され て い る。
以 上 の よ うにTFⅡDτ
に 相 互 作 用 す る因 子 群 は ， か
な りの数 存 在 し，しか もそ れ らが 異 な る タ イ プ のTFⅡD
様 複 合 体 を形 成 す る ら し い こ と が ， 明 ら か と な って き
互 作 用す る因子 群 が 同 定 さ れ た 。 さ らに これ らの 因 子群
た。 一 見 単 純 と思 わ れ たTATAボ
ックス結 合 因 子 も，
を 用 い て， 種々 の調 節 因 子群 に よ る転 写 活 性 化 能 を 解析
複 雑 な 様 相 を呈 して き たわ け で， 転 写 調 節 系 に おけ る
した が， 呼応 しな い場 合 もみ られ た 。 した が って， 各 調
TFⅡDの
重 要 性 の認 識 は， ほ と ん ど の 研 究 者 に とっ て
節 因 子 に よ る転 写 活 性 化 に必 要 な 因 子 は 異 な るの で は な
もほ ぼ 確 立 した と い っ て よ い。 今 後 は， これ らTFⅡD
い か と容 易 に想 像 され た。
サ ブ ユ ニ ッ トの単 離 ，cDNAク
現 在 これ らの 因子 の うち ，p250と
ンポ ー ネ ン トが ，TFⅡDτ
い う最 も大 き な コ
と直 接 相 互 作用 し て い る こ
とが判 明 し40）
， さ らに は ， 各 因 子 のcDNAク
ロー ン の
ロー ニ ソ グ，構 造 活性 相
関 の解 析 を 通 して ， さ ま ざ ま な タ イ プの 調節 因 子 が， ど
のTFⅡDサ
ブ ユ ニ ッ トと相互 作 用 して い るの か， そ の
相 互 作 用 が 転 写 酵 素RNAポ
リメ ラ ー ゼⅡ ・転 写 開 始 因
単 離 が さ か ん に行 な わ れ て い る と こ ろ で あ る。cDNA
子 群 お よびDNAプ
単 離 にあ た って ，1つ に は蛋 白 質 を 精製 しア ミノ酸 配 列
うな 変 化 を 与 え て い る のか ， これ らの分 子機 構 を探 る研
を 決定 し， そ して対 応 す る オ リゴ ヌ ク レ オ チ ドを 用 い
究 が 重 要 とな って こ よ う。
て，cDNA単
離 を試 み る 従 来 か ら の 方法 が あ る 。 蛋 白
質 精 製 法 と して は， 抗 体 を 用 い る 方法 ，TFⅡDτ
フ ィニ テ ィーに よ る方 法 ，DNAア
＊1 TATAボ
ロモ ー タ ー と の 複 合 体 に， ど の よ
ア
フ ィニ テ ィー を用 い
ッ ク ス結 合 因子 コ ンポ ー ネ ン ト， ま た はTBPと
書 く方 式 が 一 般 的 とな りつ つ あ る。
837
28
蛋 白 質 核 酸 酵 素 3．TFⅡDに
弱 く相 互 作 用 して ，TFⅡDτ-DNA
と相 互 作 用 す るTFⅡDτ
TFⅡDτ
複 合 体 に 影 響 を与 え る因 子 群
TFⅡDτ
と相 互 作 用 す る因 子 と し て， 強 く結 合す る
の ドメ イ ンにつ いて は ，ElA／
の 場 合 ，basic repeat領
域 が そ の役 割 を 担 っ
て い る こ とが示 され た 。 本 領 域 は先 述 の よ うに ，TFⅡA
サ ブ ユ ニ ッ ト以 外 に も， 複 数 の弱 く結 合す る因子 が見 い
が相 互 作 用 す る 顕 域 で あ り， またNC2がTFⅡA一
だ され， 転 写 調 節 に 重 要 な 役 割 を 演 じて い るであ ろ うこ
TFⅡDτ
の相 互 作 用 を 阻 害 す る際 に作 用 す る 領 域 で も
とが わ か って き た45 47)。基 本 因子 群 の うち，転 写 開 始 に
あ る 。 した が ってbasic repeat領 域 を 介 して， さ ま ざ ま
際 して 働 く と考 え ら れ るTFⅡAは
な 因 子 が 競 合 的 に拮 抗 す る こ とに よ り調 節 が行 なわ れ て
D内
のbasic repeatを
，DNA上
で，TF
介 して 結 合 す る46,49)。
そ
Ⅱれ 以
外 に も， 調 節 因 子 とTFⅡDの
相 互 作 用 を補 助 した り，
阻 害 す る因 子 が ， ゲル シ フ ト法 に よ り検 出 され た。
Reinbergら
は ，TFⅡDτ
す る因 子群Dr1／Dr2を
とDNA上
リン酸 化
とDNA上
い る と想 像 され る。 い ず れ に して も，TFⅡDτ
に結 合
す る 因子 群 に よ り， 転写 開 始 が 調 節 され て い る こ とは確
か な こ とであ ろ う。 また 多 数 の 異 な る因 子 が， た か だ か
で 複合 体 を形 成
見 いだ した 。Dr1は
蛋 白質 で， リン酸 化 状 態 で はTFⅡDτ
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Vol83No.5（1993）
20KのTFⅡDτ
の保 存 領 域 に結 合 す る こ と の 構 造 的
根 拠 は きわ め て興 味深 い35）
。
で複
合 体 を 形 成す るが ， 脱 リン酸 化 状 態 で は複 合 体 を形 成 し
4.TFⅡB
な い。 この こ とは また して も， リン酸 化 ・脱 リン酸 化 に
TFⅡBは
， 転 写 開 始 反 応 に 関与 す る因 子 と して 知 ら
よ り，転 写 調 節 が 担 わ れ て い る こ と を 意 味 す る。Dr1
れ て きた が， 最 近TFⅡBが
が ，TFⅡDτ-DNAと
作 用 し， 調 節 因 子 に よ る転 写 活 性 化 反 応 に 関 与す る可 能
複 合 体 を 形 成す る と， 基本 因 子 で
あ るTFⅡAやTFⅡBの
，TFⅡDτ-DNAへ
合 が 阻 害 され るの で ，Dr1は
に な る。Dr1のcDNAは
の分 子 集
負 の 調 節 能 を有 す る こ と
す で に単 離 され ，興 味深 い こ
とに， 弱 い な が ら も， 調 節 因子 であ るHAP3や
Eve・Enな
，Kr・
ど との 構 造 上 の相 同性 が 見 い だ され て い る。
酸 性活 性 化 因子 と直 接 相 互
性 が提 唱 され た19）
。VP16-TFⅡBの
に意 味 を もつ こ とは ，VP16の
相互 作用 が 機 能 的
変 異 因 子 を 用 い る こ とに
よ り示 さ れ た52）
。 しか もGreenら
glesら の い うTFⅡD−VP16の
VP16に
は ，Greenblatt／In相 互 作 用 は ，TFⅡB一
比 べ る と弱 い と い う結 果 を示 してお り，両 者 の
一 方Roederら
は ，遊 離 の転 写 因子 で，調 節 因 子， 基
主 張 は真 向か ら対 立 し， 混沌 と した 状 況 で あ った53）
。た
本 因 子 ，TFⅡD以
外 の も の を 同 定 ・単 離 す る研 究 を 行
だ どち らの 場 合 に して も， 調 節 因 子 が 効 果 を 与 え る反 応
な って きた が ， そ れ らの ほ と ん ど が ，TFⅡDτ
と弱 く
段 階 は ，TFⅡDがDNAと
結 合 してか ら後 の段 階
す
相 互 作 用す る因 子 群 であ る こ とが示 され た 。 これ らの 因
なわ ちTFⅡBが
子 は，NC1，NC2，USA，DBF4な
ど と称 され ， そ の
ま で の間 で あ る との 結 論 は ， 以 前 筆 者 らが 発 表 した モ デ
性 質 が 若 干 明 らか に され た 。USAは
調 節 因子 に よ る転
ル8 10）と同 様 で あ り， 見 解 の差 異 は， 調 節 因 子 の直 接 の
写 活 性 化 に必 要 な コ ン ポ ー ネ ン トで あ り，NC2は
を阻 害 す る。NC2は
転写
，TFⅡAがTFⅡDz-DNA複
合
体 と相 互 作用 す る のを 阻 害 す る こ とに よ り， 転 写 を 阻 害
す る であ ろ うこ とが 示 され た 。Dr1とNC2は
，そ の性
質 が よ く似 て い る こ とか ら， 同一 の分 子 であ る ら しい 。
調 節 因 子群 とTFⅡDτ
との 相 互 作 用 の 解 析 を 通 し
プ ロモ ー タ ー上 に分 子 集 合 す る段 階
標 的 が ，TFⅡDな
のか ，TFⅡBな
のか ， あ るい は両 者
な のか とい うこ とで あ った 。 興 味深 い点 と してTFⅡB
はTFⅡDと
同様 な ， 蛋 白 質 の 分 子 構 造 を 形成 して い
る こ と （分 子 内 にdirect repeat構
造 ，basic repeat構
造 ， σ ホ モ 官 ジー 領 域 を 含 む20）
） か ら， 両 者 の 間 に は，
機 能 的 に 共 通 な 基 盤 が あ るか も しれ な い こ とを指 摘 して
て， 転 写 活 性 化 の 分 員 機 構 を探 る研 究 もひ き続 き行 な わ
お く20)。な お 新 しい知 見 と して ，TFⅡBがVP16以
れ て い る。代 表 的 な研 究 と して は ，Berk，Weinmannの
の 他 の 調 節 因 子 と も相 互 作 用 す る こ とが判 明 して い る。
ElA-TFⅡDτ
外
相 互 作 用50,51)，BerkのZta−TFⅡDτ
相 互 作 用52)Greenblatt／Inglesら
のVP16-TFⅡDτ
相 互 作 用53)の解 析 な ど が あ る。 いず れ も各々 のcDNA
5． ：
コア クチ ベー タ ー
酵 母 のTFⅡDは
，高 等 動 物 のTFⅡDと
異 な り，
ク ロー ンか ら発 現 させ た転 写 因 子群 を精 製 して， 免 疫 沈
通 常TATAボ
降 法 ， カ ラ ム ク ロ マ ト法 を用 い て 相互 作用 を解 析 した 。
在 して い る ら しい こ とが， 精 製 蛋 白 質 の状 態 か ら考 え ら
相 互 作 用 が 機 能 的 に重 要 で あ る こ とを示 す ため に は， 転
れ た 。 よ っ て調 節 因子 に よ る転 写 活 性化 反 応 には ， 遊 離
写 活 性 化 能 のな い 調 節 因 子 に は ，TFⅡDτ
した 状 態 の 因 子 （高 等 動 物 では ，TFⅡDの
との相 互 作
用 能 が ない とい うこ とで結 論 づ け て い る。 ま た調 節 因子
838
トお よびTFⅡDτ
ッ クス結 合 因 子 コ ンポ ー ネ ン トのみ で存
サブユニ ッ
と弱 く相 互 作 用 す る 因 子 の双 方 にあ
29
転写調節因子に よる転写活性化機構 の解析
た る と考 え られ る） が 必 要 であ る こ とが 明 らか に な っ て
の時 代 か ら， ①TATAボ
き た。 そ の よ うな 因 子 群 と して，WinstonとGuarente
心 と した 転 写 基 本 因 子 の精 製 ，cDNAク
の2つ の グル ー プ が ， 遺 伝 子 単 離 に成 功 を 収 め た54,55)。
れ らの 構 造 ・活 性 相 関 の 解 析 ， ② 遺 伝 子特 異 的 調 節 因
しか しな が ら双 方 と もに ， 遺 伝 学 的 手 法 に よ り単 離 して
子 の標 的 因 子 の解 析 お よび 転 写 活 性化 ・不 活性 化 機 構 の
き て い るた め， 実 際 ， 生 化 学 的 に直 接 働 きか け る因 子 な
解 析 ， ③ 転 写 因 子 の三 次 元 レベ ル で の 構 造 決析 を 用 い
のか ど うか， 検 証 が 必 要 であ る。
Guarenteら
中
ロー ニ ン グ，そ
て の転 写 調 節 機 構 の解 析 ，④ 生 物 学 的 現 象 を転 写 調 節 の
の グ ル ー プ は， 細胞 内 で酸 性活 性 化 因子
観 点 か ら分 子 レベ ル で説 明 して い るよ うな研 究 へ と移 行
を大 量 に 発 現 させ る と， 細 胞 の成 長 が 遅 くな るこ とに注
して い る こ とが ， 明 確 に な って き た 。1990年
目 し， そ の 性質 を 元 の 成 長 速 度 に 戻 す 変 異 因 子 と して単
ス トー ソ ・シ ンポ ジ ア の発 表 で現 わ れ た徴 候 が， 近 年 ま
離 を試 み た 。す なわ ち ， 大 量 発 現 し た 酸 性活 性化 因 子
のキー ・
さ に ピー ク を迎 え よ う とい う雰 囲 気 で あ る 。 しか しな が
は ， 細 胞 内 の コフ ァ クタ ー や 基 本 因 子群 と相 互 作 用 す る
ら遺 伝 子 特 異 的 調 節 因 子 の研 究 も， まだ ま だ さ か ん に
た め， 必要 な遺 伝 子か らの 転 写 を 抑え て しま うと考 え，
（遺 伝 子 数 相 当 分 が ， 行 な わ れ て い くの で あろ うが ） な
そ の 性 質 を元 に戻 す の に コ フ ァ ク ター の変 異 が有 効 な の
され て い る こ とは ， 確 か であ る が。
で は， と考 えた わ け で あ る。 得 られ た い くつ か の遺 伝 子
の うち ，ADA2と
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ック ス結 合 因子TFⅡDを
名 づ け られ た ものは ，in vitro転 写
系 で 興 味深 い性 質 を示 した 。ada2変
異 株 か らの細 胞 抽
お お まか に 研 究 の 枠 を 考 え てみ る と， ① 転 写 基 本 因
子 群 やRNAポ
の 解 析 ，③X線
リメ ラー ゼ の 解 析 ， ② 転 写 調 節 因 子 群
結 晶 構 造 解 析 ，NMR解
析 な ど に よ る三
出 液 に よ る転 写 基 本 活 性 は， 野 生 株 のそ れ と変 わ らな い
次 元 構造 解 析 ，④ 情 報 伝 達 系 と転 写 調 節 系 と の 関 連 の
の に， 酸 性活 性 化 因子 に よ る転 写 活 性化 を ひ き起 こ さな
解 析 ，⑤ 転 写 活 性 化 ・不 活 性 化 機 構 の解 析 ，⑥ ク ロマ チ
い （
野 生 株 は活 性 化 す る） こ とか ら，本 因子 は転 写 基 本
ン構 造 と転 写 調節 との 関 連 解 析 ， ⑦ 発 生 ，分 化 ，癌化 ，
因 子 で は な く， 調 節 因 子 に よ る転 写活 性 化 に必 要 な 因 子
細 胞 周期 ， 細 胞 増 殖 な ど さ ま ざ ま な生 物 学 的 現 象 に対 応
で あ る と考 え られ た 。 また 変 異 因 子 は， 酸 性 活 性 化 因 子
した 転写 因 子群 の機 能 的 役 割 の 解 析 ， な どが 大 きな テ ー
の うち い くつ か の も の に対 して は反 応 す る こ とか ら， あ
マ と して存 在 して い る。
る タ イ プ の酸 性 活 性 化 因 子 のみ に働 くら しい。 酸 性 活 性 ∼
化 因子 に対 して も さ ま ざ まな コア クチペ ー ター が 存在 す
る のか ， 活 性 化 の 経 路 が 異 な る こ とな の か は 不 明 で あ る 。
一 方 ，Winstonの
グル ー プは ，TFⅡDに
変 異 を もつ
した が って， 日本 で の 転 写 調 節 研 究 を 考 え る うえ で も
（本 当 に独 創的 な 研 究 は 別 に して ）， これ ら の状 況 を 見す
て いか なけ れば な らな い こ とは ， 誰 の 目 に も明 らか え
で
あ る。 日本 で こ の状 況 に 対 応 して い く には ， ①RNAポ
温 度 感 受 性 変 異 株 を 多 数 単 離 し， そ の 中 で，TFⅡDの
リメ ラ ー ゼⅠ ・Ⅱ ・Ⅲ転 写 系 を各々 行 な う研 究 室 の育 成
TATAボ
ックス へ の 結 合 活 性 ・転 写 基 本 活 性 は ，野 生
② 転 写 基 本 因 子研 究 の育 成 ，③ 三 次 元 構 造 解 析 の た め
株 と変 わ らな い が， 調 節 因 子に よ る転 写 活 性 化 に は対 応
の総 合 的 設 備 投 資 の充 実 ，④ 高 等 動 物 遺 伝 学 を 駆 使 し
で きな い 株 を 検 出 した 。 変 異 株 で はお そ ら く，TFⅡD
た研 究 の育 成 ， ⑤ 流 行 に と ら わ れ な い ， 日本特 有 の系
と相 互 作 用す る コア クチ ベ ー タ ーが 結 合 で きな い の であ
を用 いた 系 の確 立 お よび 育 成
ろ うと考え ， そ の復 帰株 の 単 離 を 試 み た 。 単離 され た復
い て の情 報 入 手 ， お よび そ の ネ ッ トワー クづ く り， な ど
帰 株 の多 くは ，SPT3遺
異
を 当面 の課 題 と考 え 対 処 して いか な け れ ば な らな い の で
度 感 受 性 株 の 復 帰 は ，allele特 異 的
は な い か と考 え る。 同時 に， 個 人 の サ イ エ ンス に取 り組
に よ るTFⅡD温
伝 子に 変 異 を有 し，spt3変
であ る。 またin vitroの 免 疫 沈 降 実 験 か ら，TFⅡDと
SPT3が
直 接相 互 作 用 す る こ とが 確 か め られ た 。以 上 か
ら，SPT3はTFⅡDと
⑥ さ まざ ま な 方 法 を 用
む 姿 勢 の改 善 ， お よび 今 ま で に多 くの研 究 者 が指 摘 して
きた ハ ー ドの 改 善 の 問 題 な どは， これ か ら取 り上 げ られ
相 互 作 用 す る因子 で， 調 節 因 子
議 論 され な け れ ば な らな い と思 わ れ るが， これ らにつ い
に よ る転 写活 性 化 に関 与 す る， コア クチ ベ ー タ ー であ ろ
て は， 総 説 の性 格 上 ， 割 愛 させ て い た だ く こ とに す る。
う と考 え られ た 。
いず れ に して も転 写 調 節 研 究 は ， さ ま ざ まな 意 味 で，
生 物 学 研 究 分 野 全 体に 大 き くイ ソバ ク トを与 え る分 野 で
あ る と考え て い る こ とを認 め て い ただ け るな らば， 若 い
お わ りに これ ま で 述 べ て き た よ う に， 近 年 の 転
研 究 者 が まだ 見 ぬ 世 界 第 一 線 の研 究者 に 気 お くれ す る こ
写 調 節 研 究 の 中 心 的 課 題 は， 遺 伝 子特 異的 調 節 因子 の
とな く参 加 し， 真 正 面 か ら対 応 して い くの が大 切 であ る
cDNAク
こ とを 伝 え て お きた い。 また ， 医 学的 な局 面 ， 物 質 生 産
ロー ニ ン グ， そ れ ら の 構 造 ・活 性 相 関 の 解 析
839
30
蛋 白 質 核 酸 酵 素 Vo138No.5（1993）
的 な局 面 の み に とらわ れ や す い状 況 下 に お い て も， 基 礎
21)Sigler,P.B.:Nature,333,210-212(1988)
研 究 の重 要 性 を 評 価 で き る よ うな シス テ ムお よび サ ポ ー
22)Ptashne,M.:Nature,335,683-689(1988)
トの充 実 は， 上 述 の 大 望 あ る若 い研 究 者 育 成 に は必 須 の
23)Cress,W.D.,Triezenberg,S.J.:Science,251,
97-90(1991)
こ とで あ る こ とを 切 に願 って い る こ とも あわ せ て述 べ て
24)Lewin,B.:Cell,61,1161-1164(1990)
お きた い。
25)Nakajima,N.,Horikoshi,M.,Roeder,R.G.:
Mol.Cell.Biol.,8,4028-4040(1988)
26)Buratowski,S.,Hahn,S.,Sharp,P.A.,Gua-
文
献
rente,L.:Nature,334,37-42(1988)
27）Cavallini，B．
1)Weil,P.A.,Luse,D.S.,Segall,J.,Roeder,R.
28)Kakidani,H.,Ptashne,M.:Cell,52,161-167
2)Matsui,T.,Segall,J.,Weil,P.A.,Roeder,R.
(i9ss)
G.:J.Biol.Chem.,255,11992-11996(1980)
29)Horikoshi,M.,Wang,C.K.,Fujii,H.,Cromlish,7.A.,Weil,P.A.,Roeder,R.G.:Proc.
3)Breathnach,R.,Chambon,P.:Ann.Rev.Biochem.,50,349-383(1981)
Natl.Acad.Sci.USA,86,4843-4847(1989)
4)Serfling,E.,Jasin,M.,Schaffner,W.:Trends
30)Horikoshi,M.,Yamamoto,T.,Ohkuma,Y.,
Genet.,1,224-230(1985)
Weil,P.A.,Roeder,R.G.:Cell,61,1171-1178
Database Center for Life Science Online Service
5)Johnson,P.F.,McKnight,S.L.:Ann.Rev.
(1990)
Biochem.,58,799-839(1989)
31)Poon,D.,Schroeder,S.,Wang,C,K.,Yamamo-
6)Tsuda,M.,Suzuki,Y.:Cell,27,175-182
to,T.,Horikoshi,M.,Roeder,R.G.,Weil,P.
A.:Mol.Cell.Biol.,11,4809-4821(1991)
(1981)
7)Mitchell,P.J.,Tjian,R.:Science,245,371-
32)Yamamoto,T.,Horikoshi,M.,Wang,J.,Hase-
378(1989)
gawa,S.,Weil,P.A.,Roeder,R.G.:Proc.
8)Horikoshi,M.,Carey,M.F.,Kakidani,H.,
Natl．Acad．Sci．
Roeder,R.G.:Cell,54,665-669(1988)
ひs．A，89，2844−2848（1992）
33)Horikoshi,M.,Bertuccioli,C.,Takada,R.,
9)Horikoshi,M.,Hai,T.,Lin,Y-S.,Green,M.
Wang,7.,Yamamoto,T.,Roeder,R.G.:Proc.
R.,Roeder,R.G.:Cell,54,1033-1042(1988)
Natl.Acad.Sci.USA,89,1060-1064(1992)
10)Hai,T.,Horikoshi,M.,Roeder,R.G.,Green,
34)Lee,D.K.,Horikoshi,M.,Roeder,R.G.:Cell,
M.R.:Cell,54,1043-1051(1988)
67,1241-1250(1991)
11)Roeder,R.G.:TrendsBiochem.Sci.,16,
35)Nikolov,D.B.,Hu,S-H.,Lin,J.P.,Gasch,A.,
402-408(1991)
Hoffmann,A.,Horikoshi,M.,Chua,N-H.,Ro-
12)Horikoshi,M.,Wang,C.K.,Fujii,H.,Crom-
eder,R.G.,Burley,S.K.:Nature,360,40-46
1ish，J．A． ，Wei1，P．A．
，Roeder，R．G．
：Nature，
(1992)
341,299-303(1989)
36)Nakatani,Y.,Horikoshi,M.,Brenner,M.,
13)Hoffmann,A.,Horikoshi,M.,Wang,C.K.,
Yamamoto,T.,Besnard,F.,Roeder,R.G.,Fre-
Schroeder,S.,Weil,P.A.,Roeder,R.G.:
ese,E.:Nature,348,86-88(1990)
GenesDev.,4,1141-1148(1990)
37)Dynlacht,B.D.,Hoey,T.,Tjian,R.:Cell,66,
14)Hoffmann,A.,Sinn,E.,Yamamoto,T.,Wang,
563-576(1991)
38)Pugh,B.F.,Tjian,R.:GenesDev.,5,1935-
J.,Roy,A.,Horikoshi,M.,Roeder,R.G.:Nature,346,387-390(1990)
1945(1991)
15)Gasch,A.,Hoffmann,A.,Horikoshi,M.,Roe-
39)Tanese,N.,Pugh,B.F.,Tjian,R.:GenesDev.,
der,R.G.,Chua,N-H.:Nature,346,390-394
5,2212-2224(1991)
40)Takada,R.,Nakatani,Y.,Hoffmann,A.,Ko-
(1990)
16)Muhich,M.L.,Iida,C.T.,Horikoshi,M.,Roe-
kubo,T.,Hasegawa,S.,Roeder,R.G.,Horiko-
der,R.G.,Parker,C.S.:Proc.Natl.Acad.
shi,M.:Proc.Natl.Acad.Sci.USA,89,
11809-11813(1992)
Sci.USA,87,9148-9152(1990)
，Ingles，C．J．
Nature,345,783-786(1990)
18)Peterson,M.G.,Tanese,N.,Pugh,B.F.,Tjian,R.:Science,248,1625-1630(1990)
19)Lin,Y.-S.,Green,M.R.:Cell,64,971-981
(1991)
20)Malik,S.,Hisatake,K.,Sumimito,H.,Horikoshi,lei.,Roeder,R.G.:Proc.Natl.Acad.
Sci.USA,88,9553-9557(1991)
840
一L．，Sentenac，
77-80(1988)
G.:Cell,18,468-484(1979)
17）Stringer，K．F．
，H：uet，J． ，Plassat，J．
A.,Egly,J.-M.,Chambon,P.:Nature,334,
（数 が 多 す ぎ るた め 同 じ よ うな 論文 は で き るだ け割 愛 した ）
，Greenblatt，J．
：
41)Kokubo,T.,Takada,R.,Yamashita,S.,Gong,
D.-W.,Roeder,R.G.,Horikoshi,M.,Nakatani，Y． ： 投 稿 中
42)Margottin,F.,Dujardin,G.,Gerad,M.,Egly,
J.,Huet,J.,Sentenac,A.:Science,
426(1990)
43)Comai,L.,Tanese,N.,Tjian,R.:Cell,68,
965-976(1992)
44)Timmers,M.,Sharp,P.A.:GenesDev.,5,
.251,424-
転写調節因子に よる転写活性化 機構の解析
1946-1956(1991)
45)Meisterernst,M.,Roy,A.L.,Lieu,H.M.,Roeder,R.G.:Cell,66,981-993(1991)
46)Meisterernst,M.,Roeder,R.G.:Cell,67,
557-567(1991)
47)Inostroza,J.A.,Mermelstein,F.H.,Ha,L,
Lane,W.S.,Reknberg,D.:Cell,70,477-489
(2992)
48)Buratowski,5.,Zhau,H.:Science,255,11301132(1992)
51)Horikoshi,N.,Maguire,K.,Kralli,A.,Maldonado,E.,Reinberg,D.,Weinmann,R.:Proc.
Natl.Acad.Sci.USA,88,5124-5128(1991)
52)Lin,Y.-S.,Ha,I.,Maldonado,E.,Reinberg,
D.,Green,M.R.:Nature,353,569-571(1991)
53)Ingles,C.J.,Shales,M.,Cress,W.D.,Triezenberg,S.J.,Greenblatt,J.:Nature,351,588590(1991)
54)Berger,S.L.,Pina,B.,Silverman,N.,Marcus,
G.A.,Agapite,J.,Regier,J.L.,Triezenberg,
49）Lee,D．K.,DeJong,J．,Hashimoto,S．,Horiko-
A.J.,Guarente,L.:Cell,70,251-265(1992)
shi,M.,Roeder,R.G.:Mol.Cell.Biol.,12,
55)Eisenmann,D.M.,Armdt,K.M.,Ricupero,S.
5189-5196(1992)
L．,Rooney,J．W．,Winston,F．
50)Lee,W.S.,Kao,C.C.,Bryant,G.O.,Liu,X.,
Berk,A.J.:Cell,67,365-376(1991)
Database Center for Life Science Online Service
31
：Genes
Dev． ，
6,1319-1331(1992)
お 知 ら せ
第66回
日
会
時 ：平 成5年10,月1日
場 ：10月1目
Randy
W．Schekman（
Kurt
W?thrich（EHT,ス
（金 ）∼4日
（月 ）
新 高 輪 プ リ ンス ホ テ ル （東 京 都 港 区 高 輪3−13−1）
2∼4日
特別 講 演 （演 題 未 定 ）
Mario R．Capecchi（
日本 生 化 学 会 大 会
東 京 大 学 教 養 学 部 （東 京 都 目黒 区 駒 場3−8−1）
官 を 貫 く実 体
ユ タ大 学 ）
林 利 彦 （東 大 ・教 養 ）・中 村 敏 一 （阪 大 ・医 ）
イ オ ンチ ャ ンネ ル と レセ プ タ ー
カ リフ ォル ニ ア大 学 ）
イス ）
御 子 柴克 彦 （東 大 ・医 科 研 ）・中 西 重 忠 （京 大 ・免 疫 研 ：
シ ン ポ ジ ウム （世 話 人 ）
細 胞 の機 能 とオ ス モ エ ンザ イ ム
前 田正 知 （阪 大 ・産 研 ）・山 口明 人 （千 葉 大 ・薬 ）
画 像 解 析 に み る生 化 学
脊 山 洋 右 （東 大 ・医 ）・中 西 守 （名 古 屋 市 大 ・薬 ）
NMRに
よ る タ ン パ ク質 の構 造 解 析
別 府 輝 彦 （東 大 ・農 ）
医 学 と生 物 学 に お け る一 酸 化 窒 素NOの
稲 垣 冬彦 （都 臨 床 研 ）・横 山茂 之 （東 大 ・理 ）
糖 鎖 発 現 の 制 御 は どの よ うに して 行 わ れ るか 一
細 胞 機 能 を制 御 す る新 し い生 理 活 性 物質
現 状 と将 来
老 化 の生 化 学
谷 口直之 ほ か （阪 大 ・医 ）
ジ ー ソタ ー ゲ ッテ ィ ン グに よ る生 体 機能 の解 析
が ん の パ イオ サ イエ ンス の 進 展
勝 木 元 也 （九 大 ・生 医 研 ）
転 写 調 節機 構
分 子 レベ ル で の 転写 因子 の解 析 か ら 発
病 気 と生 化 学 一
井 原 康 夫 （東 大 ・脳 研 ）
鶴 尾 隆 （東大 ・応 微 研 ）・高 井 義 美 （神 戸 大 ・医 ）
生 ・分 化 ・癌 化 の 仕 組 み 解 明へ 向け て
堀 越 正 美 （東 大 ・応 微 研 ）
ス トレス応 答 と ス トレス タ ン パ ク質
永 田 和 宏 （京 大 ・胸 部 研 ）・矢 原 一郎 （都 臨 床 研 ）
タ ソパ ク質 の 細 胞 内局 在 化 ・ソー テ ィ ソ グの 分 子 機 構
中 野 明 彦 （東 大 ・理 ）・米 田 悦 啓 （阪 大 ・細 工 セ ）
バ イォ モ ジ ュ レー タ ー と し て の プRテ ァ ーゼ
鈴 木 紘 一 （東 大 ・応 微 研 ）・木 南英 紀 （順 天 堂 大 ・医 ）
細 胞 内 情 報 伝 達 と タ ンパ ク質 チロ シ ン残 基 リン酸 化 反 応
中 川八 郎 （阪大 ・蛋 白 研 ）・山 本博 平 （福 井 医 大 ）
役割
前 田 浩 （熊 本 大 ・医 ）・江 角 浩 安 （国 立 が ん セ ）
研究の
病 態 解 析 の 新 し い展 開
鈴 木 義 之 （都 臨 床 研 ）・板 倉 弘 重 （国立 健 康 ・栄 養 研 ）
参 加 申込 み方 法 ：日本生 化 学 会 誌 「生 化学 」3月 号 とじ こみ
の専 用 振 替 用 紙 （参 加 申込 書 を 兼 ね る ） に て7月30日 （金 ）
まで に 申 し込 む こ と。 未 入 会 者 は 入 会 手 続 きが 必 要 。
一 般 講 演 申込 み方 法 ：「生 化 学 」3月 号 とじ こみ の 発 表 申込
書 に て 申 し込む こ と。 なお ， 演 者 は 日本 生 化 学 会 会 員 に限
る。
参 加 登 録 費 ：一般6，000円
学 生4，000円
大 会 連 絡 先 ：〒113東
（当 日8，000円 ）
（当 目6，000円 ）
京 都 文 京 区 弥 生1−1−1
細 胞増 殖 の ス イ ッチ と発 生 分 化 に お け る生 体 高 次機 能 の形
東京大学応用微生物研究所
成制御
第66回
目本 生 化 学 会 大 会 組 織 委 員 会 事 務 局
Tel.03-5684-0086 FAX03-3818-9435
新 井 賢・
一 （東 大 ・医科 研 ）・小 池 克 郎 （癌 研 ）
サ イ トカ イ ン と細 胞 接 着 分 子 に よる 増殖 と死 の シ グナ ル 伝
達 ネ ッ トワ ー クの 制 御
長 田重 一 （阪大 ・パ イ オ研 ）・横 田 崇 （
東 大 ・医科 研 ）
マ トリ ック ス生 物 学 の 夜 明 け 一
分 子 ・細 胞 ・組 織 ・器
入 会 申込 み 先 ：〒113東
京 都 文 京 区 本 郷5-25-16
石 川 ビル 内
日本 生 化 学 会 事 務 局
Tel.03-3815-1913 FAX03-3815-1934
841